Cistanche glükosiidide mõju mitokondriaalse prekursorvalgu ja keratiini II tüüpi tsütoskeleti 6A ekspressioonile vaskulaarse dementsuse rotimudelis

Lisainfo võtke ühendust:Joanna.jia@wecistanche.com

Abstraktne

Sissejuhatus

Vaskulaarnedementsuson teine ​​kõige levinum dementsuse tüüp (Neltner jt, 2014; Sachdev et al., 2014; Tatlisumak jt, 2014; Sinclair jt, 2015; Thomas jt, 2015; Reijmer jt, 2016 ). Vaskulaarse dementsusega patsientidel tekkiv lakkamatu ja pöördumatu mälukahjustus põhjustab tõsist elukvaliteedi halvenemist ja paneb patsiendi perekonnale suure majandusliku koormuse (Barker et al., 2014; Burke jt, 2014; Chen et al. al., 2014; Brandenburg et al., 2016). Vananeva elanikkonnaga riikides on haiguse ennetamine ja ravi üha olulisem. Seetõttu kasvab teadushuvi vaskulaarse dementsuse raviks tõhusate ravimite otsimise vastu.

Cistancheon taim, mida kasutatakse traditsioonilises hiina meditsiini teoorias nootroopina (Chen et al., 2014; Szalárdy jt, 2015; You et al., 2015). GlükosiididCistanche(GC) on preparaat, mis on ekstraheeritudCistanche. On palju tõendeid, mis toetavad ideed, et GC võib parandada aksonite regeneratsiooni (Procaccio et al., 2014; Love et al., 2015; Brandenburg et al., 2016; Gu jt, 2016). Paljud loomkatsed on näidanud, et GC parandab kognitiivset funktsiooni (Procaccio et al., 2014; Talarowska et al., 2014; Fischer ja Maier, 2015).

Varem kasutasime rottide mudelite loomiseks kahepoolset ühise unearteri oklusiooniveresoontedementsus. Selles mudelis paraneb ruumiline õppimine ja mälu oluliselt pärast GC-ga sekkumist (Chen et al., 2015). GC saab ka reguleerida ja parandadapuutumatuskuid on enim tuntud närvide toniseeriva ja mälu tugevdajana (Chen jt, 2014; Procaccio jt, 2014; Szalárdy jt, 2015; You et al., 2015; Brandenburg et al., 2016).

Kuid vähesed uuringud on uurinud GC mõju aluseks olevaid molekulaarseid mehhanismeveresoontedementsus. Siin kasutame proteoomikat, et uurida valkude ja vaskulaarse dementsuse vahelist seost, et määrata kindlaks GC neuroprotektiivse toime aluseks olev mehhanism.

Cistanchedeserticolal on palju mõjusid, lisateabe saamiseks klõpsake siin

Materjalid ja meetodid

Loomad

Kuue nädala vanused täiskasvanud isased spetsiifilise patogeenivabad Wistari rotid (n=37), kaaluga 230–270 g, saadi Hiinas Hubei provintsis asuvast katseloomade keskusest (litsentsi number: SYXK (E) { {7}}). Katse järgis laboriloomade hooldamise ja kasutamise riiklikke juhiseid ning Rahvusvahelise Veterinaartoimetajate Ühenduse koostatud loomade eetika ja heaolu konsensusjuhiseid. Käsikiri koostati vastavalt Animal Research: Reporting of In Vivo Experiments (ARRIVE) juhistele.

Rotte hoiti kolmeliikmelistes rühmades puuri kohta 25 kraadi juures 12 -tunnise valguse/pimeduse tsükliga ning vaba juurdepääsuga toidule ja veele. Rotid (n=37) määrati juhuslikult kontrollrühma (n=10), vaskulaarse dementsuse rühma (n=12) ja vaskulaarse dementsuse ja GC rühma (GC-ga ravitud, n=15).

Vaskulaarse dementsuse rotimudelite loomine

Sügava anesteesia all 10-protsendilise kloraalhüdraadiga eraldati vaskulaarse dementsuse ja GC-ga ravitud rühmade rottide kahepoolsed ühised unearterid hoolikalt ümbritsevatest kudedest, seejärel ligeeriti tihedalt, kasutades mõlemast otsast 10-0 õmblusniiti ja ühist unearterit. arterid lõigati läbi. Kontrollrühma rottidele tehti sama kirurgiline protseduur, välja arvatud see, et ühised unearterid paljastati, kuid neid ei ligeeritud. Morrise veelabürint viidi läbi vastavalt eelnevalt kirjeldatud meetoditele, et kontrollida, kas loomamudel oli edukalt loodud (Chen et al., 2015).

Farmakoloogiline ravi

Cistanche pulber(Sertifikaat nr Z20050216, Sinphar Tian-Li Pharmaceutical Co., Ltd., Hangzhou, Hiina) segati ülipuhta veega ja ekstraheeriti seadmega TF-2000C Ultrasonicator (Tuofen, Shanghai, Hiina) (võimsus 100 protsenti, 30 kraadi, 40 minutit). GC kontsentratsiooni mõõdeti fenüületanoidglükosiidide analüüsiga. Pärast vigastust said kõik GC-ga ravitud rühma rotid GC-d (10 mg / kg / päevas, 1 ml, intraperitoneaalselt, üks kord päevas) 14 päeva järjest. Kontroll- ja vaskulaarse dementsuse rühma rotid said soolalahust (1 ml intraperitoneaalselt).

Immunohistokeemia

Pärast 14-päevast GC (või soolalahuse) manustamist eemaldati igast rühmast seitse rotti pea ja ajud ekstraheeriti. Ajukoored eemaldati ja hipokampuse kude lõigati ettevaatlikult välja ja lõigati külmutusmikrotoomi abil 3- μm paksusteks osadeks. Hipokampuse koe lõigud fikseeriti 4% paraformaldehüüdiga 30–60 minutit, pesti PBS-iga ja inkubeeriti 3% H2O2-s 10 minutit, millele järgnes kitse seerum 15 minutit, kõik toatemperatuuril.

Seejärel inkubeeriti sektsioone küüliku rotivastases fosforüülitud p-tau primaarses antikehas

(1:1, 000 PBS-is; Bioworld Technology, Inc., TX, USA) ja küüliku roti amüloid-beeta (A) primaarne antikeha (1:1, 000); Bioworld Technology, Inc.) märjas kastis 37 kraadi juures 2–3 tundi, enne inkubeerimist sekundaarses antikehas (kitse hiirevastane IgG; Bioworld Technology, Inc.) 15 minutit toatemperatuuril. Proovid visualiseeriti 3,3'-diaminobensidiintetrahüdrokloriidiga (Dako, Tokyo, Jaapan). Pildid jäädvustati valgusmikroskoobiga (Olympus, Tokyo, Jaapan) ja töödeldi Photoshopiga (versioon 7.{17}}; Adobe, San Jose, CA, USA).

Immunopositiivsed osakesed olid pruunid, seega valiti positiivseks reaktsiooniks pruun värvumine tsütoplasmas ja poolkvantifitseerimine viidi läbi, kasutades HMIAS-2000 kujutise analüüsisüsteemi (Qianpin Co., Wuhan, Hiina). Igas proovis valiti juhuslikult viis vaatevälja ja igas vaates valiti viis positiivset rakku ning keskmine halli väärtus mõõdeti suhteliste väärtuste kogumina.

Cistanchevõib suurendadapuutumatusja ennetadasüdame-veresoonkonnajatserebrovaskulaarnehaigused

Kahemõõtmeline geelelektroforees (2-DE)

Pärast 14-päevast GC või soolalahuse manustamist anesteseeriti ja dekapiteeriti igast rühmast kaheksa rotti ning hipokampuse kuded koguti kiiresti ja külmutati kohe vedelas lämmastikus. Kõik koed homogeniseeriti vedelas lämmastikus, kasutades uhmrit ja uhmrit, ja koguti lüüsipuhvrisse (7 M uurea, 2 M tiouurea, 2 protsenti CHAPS, 20 mM Tris). Lahustumatud osakesed eemaldati tsentrifuugimisega 13,000 × g juures 20 minutit 4 kraadi juures. Saastunud nukleiinhapet katkestas vahelduv helivõnkumine 5 minuti jooksul. Proove tsentrifuugiti uuesti samades tingimustes ja supernatandid koguti. Valgu kontsentratsiooni mõõdeti Bradfordi testiga (Beyotime Inc., Hiina) ja proove hoiti kuni kasutamiseni temperatuuril -80 kraadi.

Hipokampuses valgu ekspressiooniprofiili uurimiseks viidi läbi 2-DE vastavalt tootja juhistele (GE Healthcare, Pittsburgh, PA, USA). Valgulahus (120 ug proovi kohta) reguleeriti rehüdratsioonipuhvriga lõppmahuks 350 µl. Isoelektriline teravustamine viidi läbi, kasutades IPG ribasid (pH 4–7, suurus 22 cm) Ettan IPG või II süsteemidel (kõik firmalt GE Ettan IPGphor3, GE Healthcare). Seejärel tasakaalustati ribasid 15 minutit.

{{0}}DE viidi läbi 12,5% naatriumdodetsüülsulfaadi (SDS) polüakrüülamiidgeelide (24 cm × 19,5 cm × 1.0 mm) ja 0,5% agaroosi tihendusliimiga Ettan DALTSix elektroforeesis. süsteem (GE, Ettan DALTSix, GE Healthcare).

Elektroforees viidi läbi 2 W juures 45 minutit, millele järgnes eraldamine 17 W juures 4 tundi, kuni bromofenoolsinine oli peaaegu jõudnud 2-DE geeli põhja.

Geelid värviti hõbenitraadiga (Damao Chemical Reagent Factory, Tianjin, Hiina) ja kujutised jäädvustati 2-DE kujutise skaneerimissüsteemiga (VT, USA).

2-DE-kujutise skannimiseks ja analüüsimiseks kasutati tarkvara Image Master 2D Platinum 5.{2}} (GE, Inc., PA, USA).

informatsioon saadi 4700 MALDI TOF/TOF massispektromeetriga (GE, Inc.).

Maatriksi abil laserdesorptsiooni/ionisatsiooni lennuaja massispektromeetria

Peptiidimassi sõrmejälgede võtmiseks ja järgnevaks analüüsiks lõigati geelid viiludeks ja allutati veidi muudetud geelisisesele protokollile, nagu on kirjeldatud tootja juhistes. Seal oli metanool (Fisher M/4056/17), atsetonitriil (Fisher A/0626/17), trüpsiini (Promega V5280), trüpsiini lahustuv lahus (Promega V530), ammooniumvesinikkarbonaat (Sigma A6141), C-18 ZipTip (Millipore ZTC18M096) ja trifluoroäädikhape (GE HealthCare).

Lühidalt, valgutäpid eemaldati värvieemalduslahusega (30 mM K3Fe(CN)6:100 mM NaS2O3=1:1) ja dehüdreeriti 100 mm ammooniumvesinikkarbonaadi ja atsetonitriiliga, redutseeriti triklorometüülfosfaadiga 20 minutit toatemperatuuril. ja seejärel alküülitakse jodoäädikhappes 30 minutit pimedas. Geeli inkubeeriti 50 µl 12 ng/µl modifitseeritud trüpsiini lahuses 25 mM ammooniumvesinikkarbonaadis, pH 8,6, 37 kraadi juures üleöö. Peptiidid ekstraheeriti geelikorgist 1% sipelghappe / 2% atsetonitriiliga ja kontsentreeriti, kasutades C-18 Zip-Tips. Seejärel valmistati proovid ette Prespotted AnchorChip (PAC96) sihtmärgiga koos alfa-tsüano-4-hüdroksükaneelhappe maatriksiga 96 proovipunkti ja 24 kalibreerimispunkti jaoks. Massispektri peptiidi teave saadi 4700 MALDI TOF/TOF massispektromeetriga. Saadud andmeid analüüsiti, kasutades GPS Explorerit (Applied Biosystems Inc., NY, USA), mis käivitas andmebaasi MASCOT otsingu (Matrix Science, London, UK), kasutades National Center for Biotechnology Information andmebaasi hiire alamhulka.

Cistanchevõib olla antibakteriaalne ja ennetadaveresoontedementsus

Western blot test

Hipokampus valmistati ette ja valgu kontsentratsioon mõõdeti ülalkirjeldatud viisil. Valguproovid kanti SDS polüakrüülamiidgeelile, elektroforeesiti ja kanti üle polüvinülideendifluoriidmembraanile. Membraan pesti Tris-puhverdatud soolalahusega ja Tween 20-ga, blokeeriti 10% rasvavabas piimas ja 0,05% Tweenis fosfaatpuhverdatud soolalahuses. Membraane inkubeeriti üleöö 4 kraadi juures küüliku anti-mitokondriaalse prekursorvalgu polüklonaalse antikehaga (1:2, 000; Proteintech Inc., Chicago, IL, USA) ja küüliku keratiinivastase II tüüpi tsütoskeleti 6A (KRT6A) polüklonaalne antikeha (1:1,000; Proteintech Inc.) 10% rasvavabas piimas. Sekundaarne antikeha, mädarõika peroksidaasiga konjugeeritud kitse küülikuvastane antikeha (Google Biotechnology Inc., Wuhan, Hubei provints, Hiina) lahjendati (1:2, 000) 10% rasvavabas piimas ja inkubeeriti 25 kraadi juures. 1 tunniks. Sisemise võrdlusalusena kasutati hiire anti-roti-aktiini monoklonaalset antikeha (1:2, 000; Google Biotechnology Inc.). Mitokondriaalse prekursorvalgu ja KRT6A ekspressioonitasemete määramiseks kasutati Western blot skaneerimissüsteemi (V300; EPSON, Nagano-ken, Jaapan) ja AlphaEaseFC Adobe PhotoShopi (Alpha Innotech, CA, USA), mida väljendati integreeritud optilise tihedusena, mis on normaliseeritud -aktiiniks.

Statistiline analüüs

Kvantitatiivsed andmed väljendati keskmisena ± SD. 2-DE teabe skannimiseks ja analüüsimiseks kasutati tarkvara ImageMaster 2D Platinum 5.{2}} (GE, Inc.). Kahesuunaline dispersioonanalüüs viidi läbi programmiga GraphPad Prism 6.0 (GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA, USA). P < 0,05="" loeti="" statistiliselt="">

Tulemused

GC mõju p-tau ja A immunoreaktiivsusele vaskulaarse dementsuse rotimudelite hipokampuses

Immunohistokeemia näitas, et p-tau ja A ekspressioon oli pärast 14-päevast GC-ga töötlemist suurem kui kontrollrühmas. Kuid nende valkude ekspressioon GC-ga töödeldud rühmas oli oluliselt madalam kui vaskulaarse dementsuse rühmas (P < 0,05;="" joonis="">

GC reguleeris mitokondriaalse prekursorvalgu ja KRT6A ekspressiooni vaskulaarse dementsuse rotimudelite hipokampuses

Nende kahe valgu ekspressioon oli GC-ga ravitud rühmas oluliselt erinev kui vaskulaarse dementsuse rühmas: mitokondriaalne prekursorvalk (tuntud ka kui kuumašoki valk (HSP) 75 kDa) oli ülesreguleeritud ja KRT6A oli allareguleeritud (joonised joonised 22, 33). ). Teave valgu kohta on loetletud tabelis 1.

Arutelu

Vaskulaarne dementsus on sündroom, mida iseloomustavad mälu-, käitumis- ja tunnetushäired ning mida põhjustavad peamiselt tserebrovaskulaarsed haigused (Barker et al., 2014; Burke jt, 2014; Oliveira jt, 2014; Szalárdy jt, 2014). 2015). Kõigile dementsuse tüüpidele omane ja selle progresseerumise eest vastutav patoloogia on neurodegeneratsioon (Foster et al., 2014; Fischer ja Maier, 2015; Kalaria jt, 2015;

Cistanchevõib tõsta immuunsust jaära hoidaveresoontedementsus

Chen jt, 2016; Pérez -Hernández jt, 2016). Paljudel taimeekstraktidel on raviomadused. Nende ühendite bioaktiivsus neurodegeneratsiooni vastu tuleneb peamiselt nende antioksüdantsest ja anti-amüloidogeensest toimest (Fischer ja Maier, 2015; You et al., 2015; Pérez -Hernández et al., 2016).

Cistancheon Hiina ravimtaim, mida kasutatakse traditsioonilises hiina meditsiinis nootroopina. Uued uuringud näitavad sedaCistancheon kasulik amneesia korral, eriti mälukaotuse progresseerumise pärssimisel (Procaccio et al., 2014; You et al., 2015; Pérez -Hernández jt, 2016). On märkimisväärseid tõendeid selle kohta, et GC võib soodustada aksonite regeneratsiooni ja toimida närvikasvu modulaatorina (Talarowska et al., 2014; Gu et al., 2016; Xu et al., 2016). Meie eelmises Morrise veelabürinti kasutavas töös leidsime, et vaskulaarse dementsuse rotimudelite põgenemislatentsus vähenes pärast GC-ga töötlemist, mis näitab, et GC parandab ruumilist õppimisvõimet. Kuigi GC-d on selle neuroprotektiivse toime tõttu laialdaselt kasutatud (Chen et al., 2015), jääb selle toime aluseks olev mehhanism ebaselgeks.

On hästi teada, et A-peptiidid ja p-tau ekspresseeruvad tugevalt seniilsetes naastudes ja neurofibrillaarsetes puntrates. A- ja tau-valgud mängivad neuronite morfogeneesis võtmerolli, kuid teatud patoloogilistes olukordades tekitavad nad hälbivaid agregaate, mis on neurotoksilised (Love et al., 2015; Sadigh-Eteghad et al., 2015; Sinclair et al., 2015; Thomas jt, 2015; Wang jt, 2015; Reijmer jt, 2016). Käesolevad immunohistokeemia tulemused näitavad, et p-tau ja A valgu ekspressioon GC-ga töödeldud vaskulaarse dementsuse rotimudelites oli oluliselt suurem kui kontrollrottidel, kuid madalam kui ravimata mudelrottidel. Seetõttu võib A ja p-tau toksilisuse vähendamise kaudu ilmneda GC neuroprotektiivne toime.

Meie proteoomiline uuring roti hipokampuses näitas suuri erinevusi mitokondriaalse prekursorvalgu, keratiini ja KRT6A ekspressioonis. Funktsiooni osas spekuleerime, et GC neuroprotektiivne toime võib olla seotud selgroo dendriitstruktuuri ümberkujundamisega.

Mitokondriaalne prekursorvalk kuulub HSP70 perekonda (Rao et al., 2014; Gutiérrez -Aguilar ja Baines, 2015; McGeer ja McGeer, 2015). HSP75 osaleb molekulaarse chaperone aktiveerimises ja küpsemises ning säilitab rakkude stabiilsuse ja normaalse funktsiooni (Booth et al., 2014, 2016; Tavallai et al., 2015).

Arvatakse, et mitokondriaalne prekursorvalk mängib olulist rolli mõnede signaaliradade transduktsioonis (Reid et al., 2014; Booth et al., 2015a, b). Hiljutised uuringud on näidanud, et HSP90 perekond reguleerib mitokondriaalse valkude voltimise töökeskkonda (An et al., 2014; Liu ja Landgraf, 2015; Roberts jt, 2015; Stary ja Giffard, 2015). HSP75 paikneb mitokondrites ja pärsib hapniku vabade radikaalide teket (Radu et al., 2014; Holloway et al., 2016). Meie tulemused näitavad, et GC-ga ravitud rühmas suurenes HSP75 ekspressioon 254- korda, mis viitab sellele, et GC mängib antioksüdantset rolli, parandab rakkude oksüdatiivset tasakaalu ja aeglustab apoptoosi. See leid annab huvitavaid vihjeid mitokondriaalse chaperone valgu interaktsioonide kohta teiste valkudega.

Teine erinevalt ekspresseeritud valk oli KRT6A. Keratiinid, mida nimetatakse ka tsütokeratiinideks, on vahepealsed filamentvalgud, mis loovad tsütoplasmas läbi lahustumatud tiheda võrgustiku, andes epiteelirakkudele struktuurse toe (Haricharan et al., 2014; Rorke et al., 2015; Szymanski et al., 2015). . Tsütokeratiinidel on aga ka aktiivne roll erinevates rakkude ellujäämisprotsessides (proliferatsioon ja apoptoos) (Zhu et al., 2013; Schwingshackl et al., 2015; Popov ja Komianos, 2016). Need valgud võivad läbida fosforüülimise ja on ka osa sildkontaktist epiteeliraku ja selle mikrokeskkonna vahel (Lessard et al., 2013; Gil Lorenzo jt, 2014; Zhou jt, 2014; Chakrabarti jt, 2015). . CK6a on domineeriv isovorm piimanäärmes (Bramanti et al., 2015a, b, 2016) ja see on ülesreguleeritud naha paranevate haavade servades, mis näitab, et tsütokeratiin osaleb rakkude proliferatsioonis ja migratsioonis. Siiski oleme esimesed, kes näitavad KRT6A allareguleerimist hipokampuses; KRT6A ekspressioon vähenes GC-ga ravitud rühmas 1,{17}} korda võrreldes vaskulaarse dementsuse rühmaga.

Seetõttu võib GC neuroprotektiivne toime olla seotud neurogliia hüperplaasia pärssimisega tserebrovaskulaarse isheemia ajal.

Üheskoos näitavad meie uuringu tulemused, et GC avaldab vaskulaarse dementsuse rotimudelites õppimist ja mälu soodustavat toimet, vähendades A ja p-tau ekspressiooni, nõrgendades seega nende kahe toksilise valgu akumulatsiooni ja omakorda vähendades neuronaalne toksilisus. Lisaks võib GC reguleerida mitokondriaalse prekursorvalgu ja KRT6A ekspressiooni, mis on seotud sünaptilise tsütoskeleti morfogeneesi ja mitokondriaalse energia metabolismiga. Seetõttu annavad meie andmed uue ülevaate GC-de aluseks olevatest mehhanismidest, tuues esile võimaluse, et GC-del on mitu sihtmärki, mis pakub paljulubavat uudset ravivõimalust vaskulaarse dementsuse raviks.

Joonealused märkused

Rahastamine:Seda uuringut toetas Hiina riiklik loodusteaduste fond, nr 30960520; Hiina Sise-Mongoolia autonoomse piirkonna loodusteaduste sihtasutus, nr 2016MS0837.

Huvide konflikt: ei ole deklareeritud.

Uurimiseetika:Uuringuprotokolli kiitis heaks Wuhani esimese haigla loomaeetika komitee. Katseprotseduur järgis riiklike tervishoiuinstituutide laboriloomade hooldamise ja kasutamise juhendit (NIH väljaanded nr 8023, muudetud 1978) ja Rahvusvahelise Veterinaartoimetajate Assotsiatsiooni (IAVE) välja antud "Loomade eetika ja heaolu konsensusjuhiseid". ). Kõik jõupingutused tehti selleks, et minimeerida katsetes kasutatud loomade arvu ja kannatusi. Paber koostati vastavalt juhistele "Loomauuringud: In vivo katsete aruandlus" (ARRIVE Guidelines).

Panustaja leping: "Avaldamislepingu" avaldusele on enne avaldamist kõigi autorite nimel alla kirjutanud volitatud autor.

Plagiaadikontroll: seda paberit on dubleerimise kontrollimise tarkvara iThenticate abil kaks korda kontrollitud.

Eksperthinnang:Selle dokumendi terviklikkuse, kvaliteedi ja olulisuse tagamiseks on läbi viidud topeltpime ja range vastastikuse eksperdihinnangu protsess.

Kopeerinud Slone-Murphy J, prantslane B, Yu J, Li CH, Qiu Y, Song LP, Zhao M

Viited

1. An J, Haile WB, Wu F, Torre E, Yepes M. Tissue-type plasminogen activator mediates neuroglial coupling in the central nervu system. Neuroteadus. 2014;257:41–48.

2. Barker R, Ashby EL, Wellington D, Barrow VM, Palmer JC, Kehoe PG, Esiri MM, Love S. Valgeaine perfusiooni patofüsioloogia Alzheimeri tõve ja vaskulaarse dementsuse korral. Aju. 2014;137:1524–1532.

3. Booth L, Roberts JL, Cruickshanks N, Grant S, Poklepovic A, Dent P. OSU-03012 toksilisuse reguleerimine ER stressivalkude ja ER stressi indutseerivate ravimite poolt. Mol Cancer Ther. 2014;13:2384–2398.

4. Booth L, Roberts JL, Tavallai M, Nourbakhsh A, Chuckalovcak J, Carter J, Poklepovic A, Dent P. OSU-03012 ja Viagra ravi pärsib mitme chaperone valgu aktiivsust ja häirib vere-aju barjääri : mõju vähivastasele ravile. J Cell Physiol. 2015a;230:1982–1998.

5. Booth L, Roberts JL, Cash DR, Tavallai S, Jean S, Fidanza A, Cruz-Luna T, Siembiba P, Cycon KA, Cornelissen CN, Dent P. GRP78/BiP/HSPA5/Dna K on universaalne terapeutiline sihtmärk inimeste haiguste jaoks. J Cell Physiol. 2015b;230:1661–1676.

6. Booth L, Shuch B, Albers T, Roberts JL, Tavallai M, Proniuk S, Zukowski A, Wang D, Chen CS, Bottaro D, Ecroyd H, Lebedyeva IO, Dent P. multikinaasi inhibiitorid võivad seostuda kuumašokiga valke oma NH2-otste kaudu, mille kaudu nad pärsivad chaperone funktsiooni. Oncotarget. 2016;7:12975–12996.

7. Bramanti V, Grasso S, Tibullo D, Giallongo C, Raciti G, Viola M, Avola R. Ekstratsellulaarse signaaliga seotud kinaasi, tsükliin D1, gliafibrillaarse happevalgu ja vimentiini ekspressiooni moduleerimine östradiooliga eeltöödeldud astrotsüütide kultuurides

pädevuse ja progressi kasvufaktorid. J Neurosci Res. 2015a;93:1378–1387.

8. Bramanti V, Grasso S, Tomassoni D, Traini E, Raciti G, Viola M, Li Volti G, Campisi A, Amenta F, Avola R. Kasvufaktorite ja steroidhormoonide mõju heemi oksügenaasi ja tsükliin D1 ekspressioonile primaarses astrogliaalis rakukultuurid. J Neurosci Res. 2015b;93:521–529.

9. Bramanti V, Grasso S, Tibullo D, Giallongo C, Pappa R, Brundo MV, Tomassoni D, Viola M, Amenta F, Avola R. Neuroaktiivsed molekulid ja kasvufaktorid moduleerivad tsütoskeleti valkude ekspressiooni astrogliiarakkude proliferatsiooni ja diferentseerumise ajal kultuuris. J Neurosci Res. 2016;94:90–98.

10. Brandenburg S, Muller A, Turkowski K, Radev YT, Rot S, Schmidt C, Bungert AD, Acker G, Schorr A, Hippe A, Miller K, Heppner FL, Homey B, Vajkoczy P. Pigem elavad mikrogliia kui perifeersed makrofaagid soodustavad ajukasvajate vaskularisatsiooni ja on alternatiivsete proangiogeensete tegurite allikaks. Acta Neuropathol. 2016;131:365–378.

11. Burke MJ, Nelson L, Slade JY, Oakley AE, Khundakar AA, Kalaria RN. Hipokampuse mikrovaskulatuuri morfomeetria insuldijärgse ja vanusega seotud dementsuse korral. Neuropathol Appl Neurobiol. 2014;40:284–295.

12. Chakrabarti KR, Whipple RA, Boggs AE, Hessler LK, Bhandary L, Vitolo MI, Thompson K, Martin SS. AMPK farmakoloogiline regulatsioon rinnavähi korral mõjutab tsütoskeleti omadusi, mis on seotud mikrokombitsate moodustumise ja taastumisega.

manus. Oncotarget. 2015;6:36292–36307.

13. Chen A, Akinyemi RO, Hase Y, Firbank MJ, Ndung'u MN, Foster V, Craggs LJ, Washida K, Okamoto Y, Thomas AJ, Polvikoski TM, Allan LM, Oakley AE, O'Brien JT, Horsburgh K , Ihara M, Kalaria RN. Frontaalne valgeaine hüperintensiivsus, klasmatodendroos ja neovaskulaarsed kõrvalekalded vananemise ja insuldijärgse dementsuse korral. Aju. 2016;139:242–258.

14. Chen J, Zhou SN, Zhang YM, Feng YL, Wang S. Cistanche glükosiidid parandavad õppimist ja mälu vaskulaarse dementsuse rotimudelis. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2015;19:1234–1240.

15. Chen S, Yin ZJ, Jiang C, Ma ZQ, Fu Q, Qu R, Ma SP. Asiatikosiid nõrgendab põletikuvastase mehhanismi kaudu hiirte mööduvast ajuisheemia-reperfusioonist põhjustatud mäluhäireid. Pharmacol Biochem Behav. 2014; 122:7–

16. Fischer R, Maier O. Oksüdatiivse stressi ja põletiku vastastikune seos neurodegeneratiivses haiguses: TNF-i roll. Oxid Med Cell Longev. 2015;2015:610813.

17. Foster V, Oakley AE, Slade JY, Hall R, Polvikoski TM, Burke M, Thomas AJ, Khundakar A, Allan LM, Kalaria RN. Prefrontaalse ajukoore püramidaalsed neuronid insuldijärgsete, vaskulaarsete ja muude vananemisega seotud dementsuste korral. Aju. 2014; 137:2509–2521.

18. Gil Lorenzo AF, Bocanegra V, Benardon ME, Cacciamani V, Valles PG. Hsp70 regulatsioon Nox4 / p22phoxi ja tsütoskeleti terviklikkuse kohta losartaani mõjuna veresoonte silelihasrakkudes. Rakkude stressi saatjad. 2014;19:115–134.

19. Gu C, Yang X, Huang L. Cistanches herba: neurofarmakoloogia ülevaade. Front Pharmacol. 2016;7:289.

20. Gutiérrez -Aguilar M, Baines CP. Mitokondriaalse läbilaskvuse üleminekupoori tsüklofiliini D-sõltuva kontrolli struktuurimehhanismid. Biochim Biophys Acta. 2015;1850:2041–2047.

21. Haricharan S, Hein SM, Dong J, Toneff MJ, Aina OH, Rao PH, Cardiff RD, Li Y. Alveolaarse päritoluga raku panus rasedusega seotud rinnavähi kõrge astme pahaloomulise fenotüübi tekkesse. Onkogeen. 2014;33:5729–5739. [

22. Holloway KR, Sinha VC, Bu W, Toneff M, Dong J, Peng Y, Li Y. Onkogeenide sihtimine piimanäärmerakkude määratletud alamhulka näitab, et initsieeriv onkogeenne mutatsioon määrab tekkiva kasvaja fenotüübi. Int J Biol

Sci. 2016;12:381–388.

23. Kalaria RN, Ferrer I, Love S. Vaskulaarsed haigused, hüpoksia ja sellega seotud seisundid. In: Love S, Perry A, Ironside J, Budka H, ​​toimetajad. Greenfieldi neuropatoloogia. London: CRC; 2015. aasta.

24. Lessard JC, Pina-Paz S, Rotty JD, Hickerson RP, Kaspar RL, Balmain A, Coulombe PA. Keratiin 16 reguleerib kaasasündinud immuunsust vastusena epidermise barjääri purunemisele. Proc Natl Acad Sci US A. 2013;110:19537–19542.

25. Liu W, Landgraf R. CDC37 fosforüülitud ja fosforüülimata seriin 13 stabiliseerivad erinevaid interaktsioone oma kliendi ja HSP90 siduvate domeenide vahel. Biokeemia. 2015;54:1493–1504.

26. Love S, Chalmers K, Ince P, Esiri M, Attems J, Kalaria R, Jellinger K, Yamada M, McCarron M, Minett T, Matthews F, Greenberg S, Mann D, Kehoe PG. Erratum: konsensusprotokolli väljatöötamine, hindamine, valideerimine ja rakendamine tserebraalse amüloidangiopaatia hindamiseks surmajärgses ajukoes. Am J Neurodegener Dis. 2015; 4:49.

27. McGeer PL, McGeer EG. Mikrogliia sihtmärk Alzheimeri tõve raviks. Ekspertide arvamus sihtmärkide kohta. 2015;19:497–506.

28. Neltner JH, Abner EL, Baker S, Schmitt FA, Kryscio RJ, Jicha GA, Smith CD, Hammack E, Kukull WA, Brenowitz WD, Van Eldik LJ, Nelson PT. Mitut ajupiirkonda mõjutav arterioskleroos on seotud vananemisega kaasneva hipokampuse skleroosiga. Aju. 2014;137:255–267.

29. Oliveira NR, Marques SO, Luciano TF, Pauli JR, Moura LP, Caperuto E, Pieri BL, Engelmann J, Scaini G, Streck EL, Lira FS, Pinho RA, Ropelle ER, Silva AS, De Souza CT. Jooksurajatreening suurendab intensiivsusest sõltuval viisil SIRT-1 ja PGC-1 alfa-valgu taset ning AMPK fosforüülimist keskealiste rottide nelipealihases. Vahendajad Põletik. 2014;2014:987017. [PMC tasuta artikkel]

30. Pérez-Hernández J, Zaldívar-Machorro VJ, Villanueva-Porras D, Vega-Ávila E, Chavarría A. Võimalik alternatiiv neurodegeneratiivsete haiguste vastu: fütoravimid. Oxid Med Cell Longev. 2016;2016:8378613. [PMC tasuta

artikkel] [PubMed] [Google Scholar]

31. Popov K, Komianos J. MEDIAN: kontraktsiooni ja polaarsuse joondamise mehaanilised simulatsioonid aktomüosiinivõrkudes. PLoS-arvuti

Biol. 2016;12:e1004877. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Google Scholar]

32. Procaccio V, Bris C, Chao de la Barca JM, Oca F, Chevallier A, Amati-Bonneau P, Bonneau D, Reynier P. Mitokondritele suunatud ravimipõhise neuroprotektsiooni perspektiivid. Rev Neurol (Pariis) 2014;170:390–400. [PubMed] [Google Scholar]

33. Radu M, Semenova G, Kosoff R, Chernoff J. PAK signaalimine vähi arengu ja progresseerumise ajal. Nat Rev Vähk. 2014;14:13–25. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Google Scholar]

34. Rao VK, Carlson EA, Yan SS. Mitokondriaalse läbilaskvuse üleminekupoor on potentsiaalne neurodegeneratsiooni sihtmärk. Biochim Biophys Acta. 2014;1842:1267–1272. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Google Scholar]

35. Reid SP, Shurtleff AC, Costantino JA, Tritsch SR, Retterer C, Spurgers KB, Bavari S. HSPA5 on Ebola viirusnakkuse oluline peremeesfaktor. Viirusevastane Res. 2014;109:171–174. [PubMed] [Google Scholar]

36. Reijmer YD, van Veluw SJ, Greenberg SM. Isheemiline ajukahjustus aju amüloid angiopaatias. J Cereb Blood Flow Metab. 2016;36:40–54. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Google Scholar]

37. Roberts JL, Tavallai M, Nourbakhsh A, Fidanza A, Cruz-Luna T, Smith E, Siembida P, Plamondon P, Cycon KA, Doern CD, Booth L, Dent P. GRP78/Dna K on Nexavari sihtmärk/ stivarga/votrient inimese pahaloomuliste kasvajate, viirusnakkuste ja bakteriaalsete haiguste ravis. J Cell Physiol. 2015;230:2552–2578. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Google Scholar]

38. Rorke EA, Adhikary G, Young CA, Rice RH, Elias PM, Crumrine D, Meyer J, Blumenberg M, Eckert RL. Keratoderma-sarnase fenotüübi aluseks olevad struktuuri- ja biokeemilised muutused hiirtel, kellel puudub suprabasaalne AP1 transkriptsioonifaktori funktsioon. Cell Death Dis. 2015;6:e1647. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Google Scholar]

39. Sachdev P, Kalaria R, O'Brien J, Skoog I, Alladi S, Black SE, Blacker D, Blazer DG, Chen C, Chui H, Ganguli M, Jellinger K, Jeste DV, Pasquier F, Paulsen J, Prins N, Rockwood K, Roman G, Scheltens P. International Society for Vascular Behavioral and Cognitive Disorders (2014) Vaskulaarsete kognitiivsete häirete diagnostilised kriteeriumid: VASCOG-i avaldus. Alzheimeri dis assotsiatsiooni häire. 28:206–218.

40. Sadigh-Eteghad S, Sabermarouf B, Majdi A, Talebi M, Farhoudi M, Mahmoudi J. Amüloid-beeta: Alzheimeri tõve oluline tegur. Med Printsi praktika. 2015;24:1–10.

41. Schwingshackl A, Roan E, Teng B, Waters CM. TREK-1 reguleerib tsütokiini sekretsiooni kultiveeritud inimese alveolaarsetest epiteelirakkudest sõltumata tsütoskeleti ümberkorraldustest. PLoS One. 2015;10:e0126781.

42. Sinclair LI, Tayler HM, Love S. Sünaptilise valgu tase muutus vaskulaarse dementsuse korral. Neuropathol Appl Neurobiol. 2015;41:533–543.

43. Stary CM, Giffard RG. Edusammud astrotsüütidele suunatud insuldiravi lähenemisviisides: mitokondrite ja mikroRNA-de esilekerkiv roll. Neurochem Res. 2015;40:301–307.

44. Szalárdy L, Z ádori D, Klivényi P, Toldi J, Vécsei L. Elektronide transpordi häired ja neurodegeneratsioon: Albert Szent-Gyorgyi kontseptsioonist (Szeged) kuni uudsete lähenemisviisideni mitokondriaalse bioenergeetika suurendamiseks. Oxid Med Cell

Longev. 2015;2015:498401.

45. Szymanski WG, Zauber H, Erban A, Gorka M, Wu XN, Schulze WX. Tsütoskeleti komponendid määravad valgu asukoha membraani mikrodomeenides. Moli rakkude proteoomika. 2015;14:2493–2509.

46. ​​Talarowska M, Bobinska K, Zajaczkowska M, Su KP, Maes M, Galecki P. Oksüdatiivse/nitroseeriva stressi ja põletiku mõju kognitiivsetele funktsioonidele korduvate depressiivsete häiretega patsientidel. Med Sci Monit. 2014;20:110–115.

47. Tatlisumak T, Putaala J, Debette S. Insuldi vähem levinud põhjused: diagnoosimine ja juhtimine. In: Norrving B, toimetaja. Oxfordi insuldi ja tserebrovaskulaarsete haiguste õpik. Oxford: Oxford University Press; 2014. lk 153–162. [Google Scholar]

48. Tavallai M, Hamed HA, Roberts JL, Cruickshanks N, Chuckalovcak J, Poklepovic A, Booth L, Dent P. Nexavar/Stivarga ja viagra mõjutavad kasvajarakke. J Cell Physiol. 2015;230:2281–2298. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Google Scholar]

49. Thomas T, Miners S, Love S. Ajukoore hüpoperfusiooni post-mortem hindamine Alzheimeri tõve ja vaskulaarse dementsuse korral. Aju. 2015;138:1059–1069. [PubMed] [Google Scholar]

50. Wang Y, Lin J, Chen QZ, Zhu N, Jiang DQ, Li MX, Wang Y. Mitokondriaalse Hsp75 üleekspressioon kaitseb närvi tüvirakke mikrogliiast pärineva lahustuva faktori poolt põhjustatud neurotoksilisuse eest, reguleerides mitokondriaalse läbilaskvuse ülemineku pooride avanemist in vitro. Int J Mol Med. 2015;36:1487–1496.

51. Xu Q, Fan W, Ye SF, Cong YB, Qin W, Chen SY, Cai J. Cistanche tubulosa Kaitseb dopamiinergilisi neuroneid apoptoosi ja gliiarakkudest pärineva neurotroofse faktori reguleerimise kaudu: in vivo ja in vitro. Esiosa vananemine

Neurosci. 2016;8:295.

52. You SP, Zhao J, Ma L, Tudimat M, Zhang SL, Liu T. Cistanche tubulosa fenüületanoolglükosiidide ennetav toime veise seerumi albumiinist põhjustatud maksafibroosile rottidel. Daru. 2015;23:52.

53. Zhou Q, Anderson C, Zhang H, Li X, Inglis F, Jayagopal A, Wang S. Koroidaalse neovaskularisatsiooni repressioon aktiini tsütoskeleti radade kaudu mikroRNA abil-24. Mol Ther. 2014;22:378–389.

54. Zhu M, Lu C, Li W. Ajutine kokkupuude ehhinakosiidiga on piisav, et aktiveerida Trk signaalimine ja kaitsta neuronaalseid rakke rotenooni eest. J Neurochem. 2013;124:571–580.