Desertliving Cistanche vananemisvastane toime: võrdlev uuring

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

XU Hui, WEI Xiao- dong, OU Qin Li Ying Xu Xiao- Xia, WANG Jing- tao₉TIAN Guo- Zhong
(Jiamusi Ülikool» Jiamusi 154007, Hiina)Abstraktne

Eesmärk: uurida vanusega seotud muutusiantioksüdatsioonD-gal indutseeritud roti maksa mitokondritest ja selle vananemisvastasest toimestkõrbes elav cistancheja selle veeekstrakti, etanoolilahuse ja polüsahhariidide komponendid mitokondrite tasemel. Meetodid Uurimisproovina kasutasime D-gal indutseeritud vananevat rotti. Mõõtsime Ca2 pluss -ATPaasi aktiivsust roti maksas ja määrasime MDA sisalduse, membraani voolavuse ja PLA2 aktiivsuse roti maksa mitokondrites, püüdes uurida kõrbes elava tsitanche erinevate komponentide mõju ülalnimetatud indeksitele. Tulemused: MDA sisaldus ja PLA2 aktiivsus vähenesid märkimisväärselt ning Ca2 pluss -ATPaasi aktiivsus ja membraani voolavus suurenesid ilmselt veeekstrakti, etanoolilahuse ja polüsahhariidide komponentide andmisel kõrbes elavate tsitanche rühmadele (P<2 0.="" 05="">Kõrbeline tsistanšerinevad komponendid võivad vananemist edasi lükata, tõstes maksaoksüdatsioonivastane funktsioon, vähendades maksa mitokondrite peroksüdatsioonist põhjustatud kahjustusi, mille mõju on kõrbes elava tsitanši veeekstraktil parem kui teistel komponentidel.

Märksõnad:kõrbes elav cistanche; Vananemisvastane; mitokondrid

Cistanche deserticolal on palju mõjusid, lisateabe saamiseks klõpsake siin

Traditsiooniline hiina meditsiinCistancheon Cistanche kuiv lihakas vars, mis täidab neeru yangi toitmise, essentsi ja vere toitmise ning soolte niisutamise funktsiooni. Sellel on teatud farmakoloogiline toime keha erinevatele süsteemifunktsioonidele. See on traditsiooniline Hiina meditsiin toonikuks. Katsed on kinnitanud, et sellel on vananemisvastane toime, kuid võrdlusvananemisvastane toimeCistanche'i erinevate komponentide kohta ja uuringuid mitokondrite antioksüdatiivse kahjustuse kohta mitokondrite tasemel ning mitokondrite funktsiooni ja mehhanismi parandamise mehhanismi ei ole kodus ega välismaal teatatud. See katse uuribvananemisvastane toimeCistanche'i erinevatest komponentidest ning annab teoreetilise ja eksperimentaalse aluse vananemismehhanismi vananemisvastase mehhanismi ja Hiina taimsete ravimite komponentide uurimiseks.

Tistanche vananemisvastane toime

1 Katsematerjal

1.1 Katseloomad

50 puhast Wistari rotti, kehakaal 180-210 g, 3-4 kuud vanad, pooled isased ja pooled isased, ostetud Jiamusi ülikooli katseloomade keskusest

1.2 Eksperimentaalsed ravimid

Cistancheosteti firmalt Jiamusi Medicinal Material Company. Võtke 400 g toordroogi, leotage seda 30 minutit vees ja ekstraheerige kaks korda ultraheliga. Iga 30 minuti järel pärast vaakumfiltreerimist filtraat kombineeritakse ja kontsentreeritakse 0,5 g toorravimi ekvivalendini milliliitri kohta ning säilitatakse seejärel kasutamiseks; seejärel valmistatakse 400 g toorravimit vastavalt ülaltoodud meetodile, et saada vesiekstrakt. Korduv sadestamine etanooli lisamisega vastavalt kirjanduse meetodile, vaakumfiltreerimine sademe eraldamiseks, sademe pesemine absoluutse etanooli, atsetooni, eetriga, kuivatamine ja konstantse massiga, et saada.Cistanche deserticolapolüsahhariid, säilitamine 4C juures hilisemaks kasutamiseks; etanoolis lahustunud osa kontsentreeriti alandatud rõhul alkoholivabaks Maitseks, säilita 4 kraadi juures, valmista enne kasutamist vajaliku kontsentratsioonini.

1.3 Peamised reaktiivid ja instrumentide reaktiivid:

DPH osteti ettevõttelt Sigma, HEPES osteti Amreseolt ja NADH osteti Amrescolt. MDA testikomplekt ja Ca-ATPaasi testikomplekt osteti Nanjing Jiancheng Bioengineering Research Institute'ist ja D-galaktoos osteti Shanghai teisest reaktiivitehasest. Seadmed: Shimadzu RF-5000 fluorestsentsspektrofotomeeter, Sartorius PP-25 kõrge tundlikkusega PH-meeter, GL-21M kiirkülmutustsentrifuug, RE-52Rootoraurusti, SHB- Ⅲ tsirkuleeriva vee mitmeotstarbeline vaakumpump.

Cistanche deserticolaväljavõte

2 Eksperimentaalne meetod

2.1 Loomaravi ja -ravi

Viiskümmend rotti jagati juhuslikult nooreks kontrollrühmaks ja D-galaktoosi mudelrühmaks. Mudel antiCistancheveeekstrakti rühma, anti mudel Cistanche cistanche alkoholis lahustuvatele rühmadele ja mudel antiCistanche polüsahhariidrühmas oli iga rühm 1oN. Kõiki rotte hoitakse samas ruumis eraldi puurides. Sisetemperatuur on 16-22C ja õhuniiskus 50-65 protsenti. Nad söövad ja joovad normaalselt iga päev. Looduslik valgus. Noorele kontrollrühmale süstiti igal hommikul subkutaanselt soolalahust, annus oli võrdne galani annusega teistes manustamisrühmades ja neile anti samal ajal sooja keedetud vett. Vananemismudeli rühmas süstiti D-gal igal hommikul subkutaanselt annuses 50 mg/kg ja täideti samal ajal sooja keedetud veega. Mudel annab Cistanche'i veeekstrakti rühmale (mida nimetatakse veeekstrakti rühmaks) igal hommikul subkutaanselt süstides D-gal'i annuses 50 mg/kg ja samal ajal manustades tsistanši veeekstrakti toorravimi koguses 2 g/ kg. Mudel andis Cistanche'i alkoholis lahustuvale rühmale (lühendatult alkoholislahustuvaks rühmaks) iga päev hommikul ja pärastlõunal annuses 50 mg/kg subkutaanselt D-gal'i süsti, samal ajal toorravimi koguseks 2g/kg veeekstrakti.cistanche vee ekstraktalkoholis lahustuvad komponendid. Modell andisCistanche polüsahhariidrühmale (mida nimetatakse polüsahhariidi rühmaks) D-gal'i subkutaanne süstimine annuses 50 mg/kg igal hommikul. Samal ajal manustage Cistanche polüsahhariide kiirusega 2 g/kg toorravimi kohta. Pärast 6N pidevat manustamist loomad surmati. Võtke materjali.

2.2 Indeksi mõõtmine

Võtke 1 g maksa. Loputage külma soolase veega, pühkige kuivaks ja kaaluge. Lisage 9-kordne maht eeljahutatud homogeniseerimissöödet (pH 7,4, 0.01mol/L Tris-HC1, 0.0001mol/LEDTA{{11) }}Na, 0,01 mol/L sahharoosi, 0,8 naatriumkloriidi lahus), elektriline Homogenisaator jahvatatakse täielikult, et saada maksakoe homogenaat ja maksakoe homogenaati tsentrifuugitakse 10 minutit kiirusel 3000 p/vihm. Võtke supernatant ja külmutage see testimiseks. Valmistage maksahomogenaat vastavalt ülaltoodud meetodile, võtke 10% maksakoe homogenaati ja tsentrifuugige kiirusel 2000 p/min 10 minutit, visake sade ära, võtke supernatant kiirusega 10000 p/vihm ja tsentrifuugige 15 vihma kiires külmtsentrifuugis, sade on mitokondrid ja mitokondrid on suspendeeritud söötmes. Indeksi määramiseks. Mõõtke maksakoe Ca-ATPaasi aktiivsust ja malondialdehüüdi (MDA) sisaldust maksa mitokondrites vastavalt testikomplekti juhistele. Lipaasi A aktiivsust ja maksa mitokondriaalse membraani voolavust mõõdeti vastavalt kirjandusele.

2.3 Statistiline analüüs

Katseandmed on väljendatud keskmisena ± standardhälbe (± s) ja statistilise analüüsi jaoks kasutatakse SPSS11.5 statistilist tarkvara.

Tistanche toime: vananemisvastane

3. Tulemused

Vananemismudeli rühmas vähenes Ca-ATPaasi aktiivsus maksas ja maksa mitokondriaalse membraani voolavus ning suurenes maksa mitokondrite MDA ja PLA aktiivsuse sisaldus. Erinevad komponendidCistanchevõib märkimisväärselt suurendada maksa Ca-ATPaasi aktiivsust vananevatel mudelrottidel, maksa mitokondriaalse membraani voolavust ja oluliselt vähendada maksa mitokondrite MDA sisaldust ja PLA aktiivsust. Cistanche veeekstrakti mõju on ilmsem. Vaata tabelit 1.

4. Arutelu

Viimastel aastatel. Uuringud on leidnud, et mitokondriaalsed oksüdatiivsed kahjustused ja funktsionaalsed muutused mängivad olulist rolli rakkude, kudede ja elundite vananemisprotsessis]. Vananemise vabade radikaalide teooria on alati olnud paljude vananemisteooriate seas oluline teooria ning praegu on üldiselt aktsepteeritud hüpotees "vabade radikaalide-mitokondriaalne kahjustus" vananemise kohta [5]. See rikastab veelgi vabade radikaalide teooriat. See hüpotees usub, et mitokondrid on rakkude peamised hapnikku tarbivad osad ja vabade radikaalide tekitamise peamised kohad. Seetõttu on need ka vabade radikaalide sihtosad. Seetõttu on mitokondrid, organell, oluline toiduotsija ja traditsiooniline hiina meditsiin. Vananemisvastaste mehhanismide uurimine on vananemise olemuse paljastamiseks väga oluline. Cistanche on toonik Hiina meditsiin. Selle vananemisvastane toime on kinnitust leidnud, kuid see on seotud selle vananemisvastase mehhanismi mitokondriaalsel tasemel ja erinevate komponentide toimega.Cistanche vananemisvastase toime kohtamitokondritest. Uuringud, puuduvad aruanded nii kodu- kui välismaal. Selles katses kasutati Cistanche veeekstrakti, alkoholis lahustuvaid komponente ja polüsahhariide rakendusteguritena, et uurida erinevate komponentide vananemisvastast mehhanismi.cistanchemitokondriaalsel tasemel. Paljud eksperimentaalsed tõendid näitavad, et D-galaktoosi vananemise mudelrottidel on mitmeid muutusi, mis on sarnased loomuliku vananemisega L6]. Vananedes väheneb SOD aktiivsus rakus, eriti mitokondrites. MDA sisaldus suurenes.]. Selle katse tulemused näitavad, et malondialdehüüdi (MDA) sisaldus vananevate rottide maksa mitokondrites on oluliselt suurenenud, mis näitab, et antioksüdantide eemaldamise kiiruse vähenemine vananemise ajal vähendab organismi antioksüdantide võimet, mis omakorda põhjustab nende teket ja eliminatsiooni. reaktiivsed hapniku liigid ja muud vabad radikaalid on tasakaalust väljas. Selle tulemusena kogunevad kehasse reaktiivsed hapnikuliigid ja kahjustavad rakke. Lisaks on kaltsiumi ülekoormusest põhjustatud rakkude kahjustusel peamiselt kaks aspekti: ① mitokondriaalse oksüdatiivse fosforüülimise lahtiühendamine ja rakuhingamise pärssimine; ② fosfolipaasi c aktiveerimine ja A. , A. See katse kinnitas, et Ca-ATPaasi aktiivsus vananevate rottide maksakoes vähenes ja maksa mitokondrites ilmnes PLA. Aktiivsuse suurenemine näitab, et Ca-ATPaasi aktiivsuse vähenemine võib suurendada tsütosoolse Ca kontsentratsiooni, mis põhjustab mitokondriaalse PLAz aktiivsuse suurenemist. PLA: see on võtmeensüüm paljudes biokeemilistes protsessides. See võib hüdrolüüsida oma fosfolipiide, et suurendada mitokondriaalse membraani raamistiku haprust, suurendada arahhidoonhappe vabanemist ja tekitada suurel hulgal vabu radikaale, mis suurendab membraani läbilaskvust ja suurendab kaltsiumiioonide sissevoolu. Aktiveerige PLA L8], luues nõiaringi. Lisaks võib PLA aktiivsuse suurenemine muuta membraani fosfolipiidide koostist ja mõjutada membraani voolavust. Membraani õige voolavuse säilitamine on elektronide transpordi, prootoni transpordi ja oksüdatiivse fosforüülimise jaoks hädavajalik. Selles uuringus kasutati fluorestsentspolarisatsiooni meetodit, et tuvastada, et vananevate rottide maksa mitokondriaalse membraani voolavus oli oluliselt madalam kui noortel rottidel, mis kinnitab veelgi, et mitokondri membraani voolavus muutub vananemise käigus.

See katse näitas, et vesiCistanche deserticola ekstrakt, Cistanche deserticola veeekstrakti alkoholis lahustuvad komponendid ja Cistanche deserticola polüsahhariidid parandasid erineval määral maksa Ca-ATPaasi aktiivsust ja mitokondriaalse membraani voolavust ning vähendasid MDA ja PLA sisaldust. maksa mitokondrid. See tõestab, et Cistanche erinevatel komponentidel on vananemisvastane toime. Mehhanismi põhjuseks võib olla iga manustamisgrupi antioksüdantse võimekuse paranemine, mis tagab Ca ja isegi ATPaasi aktiivsuse, nii et kaltsiumioonide kontsentratsioon maksarakkudes ja väljaspool seda püsib normaalsel tasemel, vältides mitokondriaalse PLA suurenemist. rakusisese kaltsiumi ülekoormuse tõttu. Kõrge vähendab seeläbi erinevate tegurite mõju, mis vähendavad mitokondriaalse membraani voolavust, hoiab mitokondriaalse membraani voolavuse normaalsena ja tagab mitokondrite funktsiooni. Tulemused näitasid ka, et Cistanche vesiekstrakt suudab taastada ravimirühma näitajad noore rühma tasemele ning selle mõju vananemismudeli rühmale on teistest komponentidest parem. Kirjanduses on teatatud, et Cistanche deserticola polüsahhariid võib suurendada kopsukoe SOD aktiivsust ja vähendada MDA sisaldust [9]. Xue Dejun tõestas ka, et Cistanche deserticola polüsahhariid võib aktiveerida seerumi SoD aktiivsust ja vähendada südamelihase lipofustsiini_]. See eksperiment näitab sedaCistanche deserticolapolüsahhariidil on vananemisvastane toime. See võib olla tingitud sellest,cistanche deserticolapolüsahhariid võib parandada immuunfunktsiooni, aktiveerida SOD-d, et otseselt või kaudselt vabu radikaale eemaldada, vähendada vabade radikaalide kahjustusi mitokondritele ja kogu rakule ning seega mängida vananemisvastast toimet. Cistanche veeekstrakti alkoholis lahustuvad komponendid võivad parandada immuunsust ja androgeense hormooni sarnaseid toimeid [1, selles katses leiti, et sellel on ka vananemisvastane toime, mis võib olla tingitud koostises sisalduvate flavonoidide ja glükosiidide vananemisvastasest toimest. seda. Vananemisvastane toimeCistanche vee ekstrakton parem kui teised koostisosad, mis näitab, et Cistanche veeekstrakti vananemisvastane toime tuleneb selle kahe komponendi sünergilisest toimest. Samal ajal sisaldab Cistanche anorgaanilisi elemente nagu Fe, Zn, Cu, mis on kõik organismile vajalikud Mikroelemendid, Fe on ensüümide, valkude, hormoonide ja vitamiinide aktiivne keskus või aktivaator; Zn suudab säilitada mitmesuguseid ensüümide aktiivsusi; Cu on erinevate metallide ensüümide põhikomponent ja on tõhus organismi redokssüsteemi katalüsaator. On näha, et Cistanche vananemisvastane toime sõltub selle orgaaniliste aktiivsete komponentide (polüsahhariidid jne) ja anorgaaniliste elementide koostoimimisest.

Tistanche ekstrakti eelised: vananemisvastane

Viited:

[1] Sheng Wei, Gao Leining. Cistanche polüsahhariidide ekstraheerimine, eraldamine ning füüsikaline ja keemiline analüüs[J]. Hiina rahvas Civil Medicine Journal, 2001, 50: 166

[2] Chen Sifeng, Wu Zhongli. Lihtne ja kiire meetod fosfolipaasi A2 määramiseks kehavedelikes ja kudedes [J]. teine ​​ajakiri Military Medical University, 1989, l0(3): 254-256

[3] Nie Songqing, Bo Huiqing, Lin Kechun. Kuningliku essentsi mõju erütrotsüütide membraani voolavusele rottidel [J]. Journal of Beijing Medical College, 1983, 15(4): 249-252

[4] AmesBN, ShigenagaMK, HagenTM. Mitokondriaalne lagunemine vananemisel [-J]. Biochim Biophys Acta, 1995, 1271(i): 165-170

[5] ZorovDB. Mitokondriaalsed kahjustused on haiguste ja vananemise allikas: nende vastu võitlemise strateegia [J]. Biochim Biophys Acta, 1996, 1275 (1–2): lO-15

[6]Zhang Xi, Li Wenbin, Zhang Binglie. D-galaktoosi alaäge mürgistus rotid vananevad biokeemilised muutused Muutus [J]. Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology, 1990, 4(4): 309-310

[7] Sun Yun. Wang Dejun, Zhu Jin jne. Cistanche cistanche kopsuvalgusisalduse ja vananevate hiirte antioksüdatsiooni kohta Funktsionaalsete suhete mõju [J]. Hiina farmakoloogia bülletään. 2001, 17(I): 101-103

[8] Xue Dejun, Zhang Ming, Wu Xiaohong. Oota. Cistanche vananemisvastaste aktiivsete komponentide uurimine [J]. keskmine National Journal of Traditional Chinese Medicine, 1995, 2O(11): 687

[9] Ta Wei, Shu Xiaofen, Zong Guizhen jne. Uuringcistanche mõjuneerude toitmisel ja yangi tugevdamisel enne ja pärast töötlemist [J]. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, i996, 21(9): 534-537