Humoraalse ja rakulise CMV immuunsuse võrdlus neerusiirdamist ootavatel patsientidel

Abstraktne:Krooniline neeruhaigus võib muuta viirusevastast T-rakulist immuunsust. Käesolevas uuringus hindasime 63 patsiendil enne neerusiirdamist, kuidas korreleerusid humoraalne ja rakuline immuunsus tsütomegaloviiruse (CMV) vastu, kasutades interferooni (IFN)-ELISpot (T-Track® CMV, Mikrogen, Neuried, Saksamaa). Kohordis oli 24 patsienti, kellel oli negatiivne ja 39 positiivset CMV IgG-d. Kui ühelgi negatiivse CMV IgG-ga patsiendil ei ilmnenud tuvastatavat vastust T-Track® CMV-le, siis 26-l 39-st positiivse CMV IgG-ga patsiendist oli positiivne ELISpot-vastus. Keskmine vastus CMV pp65-le CMV seronegatiivses rühmas oli {{10}} spot forming units (SFU) 200,000 PBMC kohta (vahemik 0–1) ja seropositiivses rühmas 43 SFU (vahemikus 0–750). Seega oli 13-l 39-st positiivse CMV serostaatusega patsiendist (33%) tuvastamatu T-rakuline immuunsus ja neil võib olla suurenenud CMV taasaktiveerumise oht. CMV pp65-spetsiifilised ELISpoti vastused olid seropositiivsetel patsientidel 293- korda kõrgemad kui dialüüsi saanud patsientidel ja 56- korda kõrgem immunosupressiivset ravi saanud ja ilma immunosupressiivse ravita patsientidel, kuid patsientidel, kellel oli ravi dialüüs ja immunosupressiivne ravi näitasid ootuspäraselt madalamat reaktsiooni fütohemaglutiniinile, positiivsele kontrollile. See leid võib olla põhjustatud (subkliinilisest) CMV-DNAemiast ja CMV-spetsiifiliste T-rakkude "võimendist".

Märksõnad: inimese tsütomegaloviirus; ELISpot; interferoon-; dialüüs; immunosupressiivne ravi

cistanche tubulosa - parandab immuunsüsteemi

1. Sissejuhatus

Neerutransplantaadi retsipientidel võib herpesviiruste, eriti tsütomegaloviiruse (CMV) nakatumine põhjustada raskeid haigusi, nagu interstitsiaalne pneumoniit, hepatiit, koliit ja entsefaliit [1], ning see võib vallandada allografti äratõukereaktsiooni [2]. Seevastu immuunkompetentsetel inimestel on nakkuse kulg tavaliselt asümptomaatiline või kerge ning sümptomid on sarnased mononukleoosiga [3]. Seega on siirdatud patsientidel või siirdamist ootavatel patsientidel oluline hinnata võimalikult täpselt CMV-nakkuse/reaktivatsiooni riski. Lisaks humoraalse immuunsuse määramisele CMV, st immunoglobuliini (Ig) G või M vastu, hinnatakse rakulist immuunvastust CMV vastu üha enam in vitro meetoditega, nagu voolutsütomeetria või ELISpot [4]. Humoraalne immuunsus on teadaolevalt vähenenud dialüüsi saavatel ja/või immuunsupressiooniga patsientidel. Näiteks näitasid korduvad uuringud 168-st hemodialüüsitud CMV seropositiivsusega patsiendist 18-st (11%) ajutist muutust negatiivseks [5]. Lisaks tuvastati CMV-spetsiifiline T-rakuline immuunsus neerutransplantaadiga patsientidel, kellel polnud CMV IgG antikehi [6]. Sesteri jt ülevaade. [7] rõhutasid CMV-spetsiifilise T-rakulise immuunsuse olulist rolli siirdatud elundi retsipientidel. Siiski on ka hästi tõestatud, et neerufunktsiooni kahjustus muudab T-rakkude funktsiooni, mis põhjustab antimikroobse vastuse vähenemist [8]. Seega, vaatamata varasemale CMV-nakkusele, võivad spetsiifilised antikehad või T-rakud langeda alla teatud piiri ja muutuda (ajutiselt) tuvastamatuks. Väga tundlik ELISpot test suudab tuvastada tsütokiini sekretsiooni ühe raku tasemel [9] ja siirdatud retsipientide viirusevastast immuunsust on võimalik mõõta [10]. CMV rakulise immuunsuse kvantifitseerimine võib aidata stratifitseerida CMV-nakkuse või taasaktiveerumise riski ja suunata seeläbi ennetavat ja profülaktilist viirusevastast ravi pärast siirdamist [11–24]. Spetsiifiline immuunsus CMV vastu ei pruugi olla oluline mitte ainult siirdatud retsipientidel, vaid ka patsientidel, kes ootavad neerusiirdamist. Ootenimekirjas viiakse läbi patsientide riskikihistamine, võttes arvesse ka CMV positiivsust/negatiivsust. Neerufunktsiooni kahjustus võib mõjutada rakulist immuunfunktsiooni ning humoraalse ja rakulise immuunsuse vahelise korrelatsiooni kohta selles kohordis on vähe andmeid [25]. Käesolevas uuringus käsitlesime küsimust, kuidas humoraalne ja rakuline CMV immuunsus korreleerusid 63 patsiendil, kes ootasid neerusiirdamist. Lisaks analüüsisime, kas mis tahes ühismuutuja, nagu CMV IgG, CMV IgM, vanus, sugu, neerupuudulikkuse põhjus, dialüüs, eelnev neerusiirdamine või immunosupressiivne ravi, mõjutasid CMV-spetsiifilisi ELISpot vastuseid.

cistanche tubulosa - parandab immuunsüsteemi

2. Materjalid ja meetodid

2.1. Patsiendid

2021. aasta märtsist juunini hõlmasime järjest 63 neerusiirdamist ootavat patsienti (tabel 1). Välistamiskriteeriume ei olnud. Rühmas oli 38 meest ja 25 naist; keskmine vanus oli 54 aastat (vahemikus 19–78). Üheksateist patsienti said peritoneaaldialüüsi ja 31 hemodialüüsi. 12 patsienti raviti immunosupressiivsete ravimitega. Uuringu kiitis heaks Saksamaa Esseni ülikooli haigla kohalik eetikakomitee (21-9883-BO) ja kõik vabatahtlikud andsid uuringus osalemiseks teadliku nõusoleku. Uuring viidi läbi vastavalt 1964. aasta Helsingi deklaratsioonis ja selle hilisemates muudatustes märgitud eetikastandarditele või võrreldavatele eetikastandarditele.

Tabel 1. 63 neerusiirdamist ootava patsiendi omadused

2.2. ELISpoti test

Perifeerne veri koguti 9 ml hepariini tuubidesse ja PBMC isoleeriti ja reguleeriti 2 miljonile PBMC-le milliliitri kohta. Kokku lisati 8-kaevu ELISpot riba igasse süvendisse 200,000 PBMC-d ja stimuleeriti 19 tundi 37 ◦C juures kahes korduses kahe T-aktiveeritud® CMV valguga, kohese varajase antigeeniga{{ 8}} (IE-1) ja fosfoproteiin 65 (lk 65) vastavalt tootja juhistele (T-Track® CMV, Mikrogen GmbH, Neuried, Saksamaa; endine Lophius Biosciences GmbH, Regensburg, Saksamaa) [10,26 ]. Paralleelselt kultiveeriti negatiivseid kontrolle (ainult söötmega rakud) ja positiivseid kontrolle (stimuleeritud mitogeeni fütohemaglutiniiniga, PHA). Saadud laigud, millest igaüks esindab üht interferooni (IFN) vabastavat rakku, kvantifitseeriti, kasutades ELISpot plaadilugejat (AID Fluorospot, Autoimmun Diagnostika GmbH, Strassberg, Saksamaa). Tulemused genereeriti tootja antud algoritmi järgi. Kasutades pakutud algoritmi, arvutatakse ruutjuure teisendatud 2-korduste punktide arvu aritmeetiline keskmine ja ruudustatakse [26]. Negatiivsed kontrollid lahutati CMV-spetsiifilistest väärtustest, mille tulemuseks oli spot-forming units (SFU). SFU, mis on suurem või võrdne 10, määratleti positiivsena.

2.3. CMV serostatus 

CMV IgG was determined using the Anti-CMV-IgG® (DiaSorin, Saluggia, Italy) assay on the LIASON XL platform, following the manufacturer's instructions. In addition, an Anti-CMV IgM® (DiaSorin) was used to detect CMV primary infection. Using this platform, CMV IgG < 12 IU/mL is considered negative, from 12 to 14 IU/mL borderline, and >14 RÜ/mL positiivne.

cistanche taime suurendav immuunsüsteem

2.4. Statistiline analüüs

Statistiline analüüs viidi läbi tarkvaraga GraphPad Prism 8.{1}}.1 (San Diego, CA, USA) ja IBM SPSS Statistics 23 (New York, NY, USA) tarkvaraga. Numbriliste muutujate analüüsimiseks kasutasime Spearmani korrelatsiooni. Kategooriliste ühismuutujate mõju hindamiseks kasutasime vastavalt vajadusele Fisheri täpset testi, Mann-Whitney või Kruskal-Wallise testi. Lisaks teostasime mitmemõõtmelist analüüsi, kasutades multinominaalset logistilist regressiooni. Siin hõlmasime pideva vanusena ja CMV IgG ning dialüüsi ja immunosupressiivse ravi dihhotoomsete muutujatena, st jah või ei. Kahepoolseid p väärtusi < 0,05 peeti oluliseks.

3. Tulemused

63 kroonilise neeruhaigusega patsiendist koosnev kohort koosnes 24 negatiivse ja 39 positiivse CMV IgG-ga patsiendist. Ühelgi negatiivse CMV IgG-ga patsiendil ei ilmnenud tuvastatavat IFN-vastust CMV IE-1 ELISpotile (joonis 1A) ega CMV pp65 ELISpotile (joonis 1B). Keskmine vastus CMV IE-1 valgule oli 0 SFU 200,000 PBMC kohta (vahemik 0–{{16 }}) ja CMV pp65 valgule {{20}} SFU (vahemik 0–1) (joonis 1A, B, tabel 2). Positiivse CMV IgG-ga patsientidel olid rakulised vastused oluliselt kõrgemad (p < 0,0001). Keskmine vastus CMV IE-1-le oli 2 SFU (vahemik 0–555) ja CMV pp65 korral 43 SFU (vahemik 0–750). Fisheri täpne test näitas, et ELISpot vastused CMV IE-1 ja pp65 suhtes olid märkimisväärselt (p < 0,05) korrelatsioonis CMV IgG vastustega (joonis 1C).

Joonis 1. CMV-spetsiifiliste ELISpoti vastuste jaotus 63 patsiendil, kes ootavad neerusiirdamist. Kohordis oli 24 negatiivset (rohelised ringid) ja 39 positiivset CMV IgG-d (sinised ringid). Paneel (A) näitab ELISpot vastuseid stimuleerimisel CMV vahetu varajase antigeeniga 1 (IE-1) ja paneel (B) pärast stimuleerimist CMV fosfoproteiiniga 65 (lk 65). Horisontaalsed jooned näitavad mediaanväärtusi. Punktiirjoon tähistab positiivsete vastuste piiri (10 punkti moodustavat ühikut, SFU). Rakulisi in vitro vastuseid CMV IgG-ta ja CMV IgG-ga patsientidel võrreldi Mann-Whitney testiga. Paneel (C) võtab kokku humoraalsete (IgG) ja rakuliste (ELISpot) CMV-spetsiifiliste vastuste vahelise korrelatsiooni (Fisheri täpne test). Joonis 1. CMV-spetsiifiliste ELISpoti vastuste jaotus 63 patsiendil, kes ootavad neerusiirdamist. Kohordis oli 24 negatiivset (rohelised ringid) ja 39 positiivset CMV IgG-d (sinised ringid). Paneel (A) näitab ELISpot vastuseid stimuleerimisel CMV vahetu varajase antigeeniga 1 (IE-1) ja paneel (B) pärast stimuleerimist CMV fosfoproteiiniga 65 (lk 65). Horisontaalsed jooned näitavad mediaanväärtusi. Punktiirjoon tähistab positiivsete vastuste piiri (10 punkti moodustavat ühikut, SFU). Rakulisi in vitro vastuseid CMV IgG-ta ja CMV IgG-ga patsientidel võrreldi Mann-Whitney testiga. Paneel (C) võtab kokku humoraalsete (IgG) ja rakuliste (ELISpot) CMV-spetsiifiliste vastuste vahelise korrelatsiooni (Fisheri täpne test).

Tabel 2. CMV-spetsiifiliste ELISpot-vastuste potentsiaalsed kovariaadid kõigil neerusiirdamist ootavatel patsientidel (n=63).

Veelgi enam, Spearmani korrelatsioonianalüüs CMV seropositiivsetel patsientidel kahe CMV valgu IE-1 ja pp65 suhtes näitas ootuspäraselt positiivset korrelatsiooni (r=0.41, p=0.009). ) (Joonis 2). Kolmeteistkümnel 39-st positiivse CMV IgG-ga patsiendist (33%) ilmnes mõlemale CMV antigeenile negatiivne ELISpot-vastus. 18 patsienti reageerisid ainult CMV pp65-le, kuid mitte IE-le{10}} ja kaheksa vastas mõlemale antigeenile.

Joonis 2. Spearmani korrelatsioonianalüüs T-rakkude immuunsuse kohta CMV IE-1 ja pp65 suhtes CMV IgG-positiivsetel patsientidel, kes ootavad neerusiirdamist (n=39). Punktiirjooned tähistavad positiivsete vastuste (10 täppi moodustavat ühikut, SFU) piiri iga CMV antigeeni jaoks. Kvadrandi statistika kuvatakse ülemises vasakpoolses paneelis ja Spearmani korrelatsioonianalüüsi tulemused on alumises vasakpoolses paneelis.

Kokkuvõttes oli ainult 67% positiivse CMV serostaatusega patsientidest tuvastatav T-rakuline immuunsus, st ainult 26-l 39-st positiivse CMV IgG-ga patsiendist oli positiivne vastus ka T-Track® CMV-le. Kõigil neil patsientidel oli positiivne vastus CMV-le pp65 ja kaheksal IE-1 ja pp65-le. Ühemõõtmeline analüüs potentsiaalsete ühismuutujate kohta 63 neerusiirdamist ootaval patsiendil näitas, et ükski neist ei mõjutanud oluliselt CMV-spetsiifilisi ELISpoti vastuseid, välja arvatud CMV IgG. Spearmani korrelatsioonianalüüs ei näidanud korrelatsiooni vanusega (IE-1: r {{10}}.02, p=0.9; lk 65: r {{15 }}.16, lk=0.2). Lisaks jagasime kohordi nooremateks ja vanemateks isikuteks, jagasime keskmise vanusega (54 aastat) ja võrdlesime mõlemat Mann-Whitney testiga (joonis 3A). Kuigi CMV-spetsiifilised T-raku vastused olid vanematel patsientidel suuremad, jäi erinevus statistilisest olulisusest välja (IE-1: p=0.15; lk 65: p=0.30). Noorematel ja vanematel patsientidel täheldasime mediaanvastust 0 vs. 0 SFU IE-1 suhtes ja 1 vs. 3 SFU vastust pp65 suhtes. Vastavad keskmised väärtused olid 1,9 vs 35,9 ja 55,9 vs 105,4 SFU. Mann-Whitney test ei andnud ka olulist mõju CMV IgM-ile, soole ega dialüüsi, eelneva neerusiirdamise või immunosupressiivse ravi olemasolule või puudumisele (tabel 2). Lõpuks näitas Kruskal-Wallise test, et neerupuudulikkuse põhjus või varasemate siirdamiste arv ei avaldanud olulist mõju.

Joonis 3. CMV-spetsiifiliste ELISpot vastuste jaotus 63 patsiendil, kes ootasid neerusiirdamist, jagatud kas vanuse (A), dialüüsi olemasolu või puudumise (B), immunosupressiooni (C) või peritoneaaldialüüsi ja hemodialüüsi (D) järgi. Horisontaalsed jooned näitavad mediaanväärtusi. Punktiirjoon tähistab positiivsete vastuste piiri (10 punkti moodustavat ühikut, SFU). Rakulisi in vitro vastuseid CMV vahetu varajase antigeeni 1 (IE-1), CMV fosfoproteiini 65 (pp65) ja positiivse kontrolli fütohemaglutiniini (PHA) suhtes võrreldi Mann-Whitney testiga. PD, peritoneaaldialüüs; HD, hemodialüüs.

Joonis 3. Jätk.

Dialüüsi ja immunosupressiivse ravi mõju CMV-pp65 spetsiifilistele vastustele ei olnud statistiliselt oluline (vastavalt p=0,1 ja p=0,2) (joonis 3B, C). Kui dialüüsi ja immunosupressiooniga patsientidel olid CMV-pp65 spetsiifilised vastused kõrgemad, siis PHA-ga positiivse kontrolli puhul täheldasime vastupidist. See erinevus PHA-kontrolli puhul oli oluline immunosupressiooniga ja ilma immuunsupressioonita patsientidel (p=0,01). Veelgi enam, keskmine vastus CMV pp65-le oli 19 peritoneaaldialüüsi saanud patsiendil madalam kui 31 hemodialüüsi saavatel patsiendil (3 vs. 17 SFU, joonis 3D). Üksikasjalikud andmed kaheteistkümne patsiendi kohta, kes said immunosupressiivset ravi, on esitatud tabelis 3. Kahel patsiendil, kes said enam kui viis aastat tagasi tümotsüütidevastase globuliiniga T-rakkude vähenemist, ilmnesid mõlemad tuvastatavad T-rakulised vastused CMV pp65-le. Lisaks täheldati CMV pp65-spetsiifilisi vastuseid kõigil patsientidel, kellel oli varem maksa siirdatud (n=2) ja 2–3 eelnevat neerusiirdamist (n=3).

Tabel 3. Kaheteistkümne neerusiirdamist ootava patsiendi omadused, kes said immunosupressiivset ravi

Tegime ka mitme muutujaga analüüsi, mis hõlmas CMV IgG-d, vanust, dialüüsi ja immunosupressiivset ravi. Leidsime olulisi tulemusi järgmiste muutujate jaoks: IE{{0}} ELISpot: CMV IgG (p=0.01); pp65 ELISpot: CMV IgG (p < 0,0001), vanus (p < 0,0001) ja immunosupressiivne ravi (p=0,048). Järgmise sammuna analüüsisime eraldi 39 positiivse CMV IgG-ga patsiendist koosnevat alarühma (tabel 4). Sarnaselt kogu kohortiga olid CMV-spetsiifilised ELISpot vastused dialüüsi ja immunosupressiivset ravi saavatel patsientidel tugevamad (joonis 4). CMV pp65 spetsiifiline SFU oli 29 3- korda kõrgem dialüüsi saavatel ja ilma dialüüsita patsientidel (mediaan 44 vs. 1,5) ja 56- korda kõrgem immunosupressiivset ravi saanud patsientidel (mediaan vastavalt 157 vs 28). See leid oli aga ka ebaoluline. Jällegi näitasid PHA kontrollid vastupidist CMV pp65 stimuleeritud kultuuridele, dialüüsi või immunosupressiooniga patsientidel vähenenud vastust.

Joonis 4. CMV-spetsiifiliste ELISpot vastuste jaotus 39 CMV IgG positiivsel patsiendil, kes ootavad neerusiirdamist, jagatuna dialüüsi (A) või immunosupressiooni (B) olemasolu või puudumise järgi. Horisontaalsed jooned näitavad mediaanväärtusi. Punktiirjoon tähistab positiivsete vastuste piiri (10 punkti moodustavat ühikut, SFU). Rakulisi in vitro vastuseid CMV vahetu varajase antigeeni 1 (IE-1), CMV fosfoproteiini 65 (pp65) ja positiivse kontrolli fütohemaglutiniini (PHA) suhtes võrreldi Mann-Whitney testiga.

Tabel 4. CMV-spetsiifiliste ELISpot-vastuste potentsiaalsed kovariaadid CMV IgG-positiivsetel patsientidel, kes ootavad neerusiirdamist (n=39).

4. Arutelu

Selles uuringus testisime 63 kroonilise neeruhaigusega patsienti humoraalse ja rakulise CMV immuunsuse korrelatsiooni osas. Me täheldasime, et CMV IgG seropositiivsusega patsientide rühma saab jagada kolmandikuks ilma tuvastatava rakulise immuunsuseta ja kaheks kolmandikuks rakulise immuunsusega. Rakulised vastused CMV pp65 valkudele olid tunduvalt rikkalikumad kui vastused CMV IE-1-le, mida võis tuvastada vastavalt 26 ja kaheksal 39-st CMV IgG seropositiivsest patsiendist. Patsientidel, kellel on CMV IgG seropositiivsus, kuid T-raku vastused ei ole tuvastatavad, võib neerusiirdamise järgne viirusevastane profülaktika olla sobiv ravivõimalus. ELISpoti vastuste tugevuse paremaks hindamiseks praeguses kohordis võrdlesime seda meie keskuse neeru- ja maksatransplantaadi retsipientide tulemustega, kelle andmed on osaliselt avaldatud [10, 26]. Mõlemad varasemad uuringud hõlmasid keskmise riskiga (doonor (D)−/retsipient (R)+, D+/R+) ja kõrge riskiga (D+/R−) siirdatud retsipiente. ELISpoti vastuse tugevus T-Track® CMV suhtes neerusiirdamise retsipientidel ja maksas oli sarnane praeguste andmetega. Neerutransplantaadi retsipientidel tuvastati keskmine CMV IE-1 spetsiifiline reaktsioon 1,5 SFU 200,000 lümfotsüütide kohta ja CMV pp65 spetsiifiline vastus keskmiselt 40,5 SFU 200,000 lümfotsüüdi kohta (n { {27}}) [10]. Maksatransplantaadi retsipientidel leidsime CMV IE-1-spetsiifilisi vastuseid keskmiselt 4 SFU 200,000 lümfotsüüdi kohta ja CMV pp65 mediaanvastust 41 SFU 200,000 lümfotsüüdi kohta (n { {37}}) [26]. Normaliseerides meie praegused andmed PBMC kohta lümfotsüütide suhtes ja rakendades teisendustegurit 1,29, mis on arvutatud Gliga jt hilisema uuringu toorandmete põhjal. [26], vastused olid endiselt sarnasel tasemel (käesoleva uuringu teisendatud andmed: CMV IE-1 ja pp65: vastavalt 3 ja 55 SFU 200 000 lümfotsüüdi kohta). Võrreldes varasema hemodialüüsipatsientide uuringuga [25], oli positiivsete ELISpot-vastuste määr CMV seropositiivsetel patsientidel käesolevas uuringus madalam. Banase et al. täheldatud positiivseid T-Track® CMV tulemusi 90% (60/67) CMV-seropositiivsete hemodialüüsi patsientidest. Lisaks tuvastasid nad negatiivse CMV seroloogiaga patsientide vereproovides IE{54}}reaktiivseid rakke. Selles eelmises uuringus täheldati CMV IE-1-spetsiifilisi vastuseid keskmiselt 9,7 SFU 200 000 lümfotsüüdi kohta ja CMV pp65 mediaanvastust 165 SFU 200 000 lümfotsüüdi kohta. Võimalik, et erinevate tulemuste põhjuseks võivad olla laboratoorsed erinevused, nt patsientide kategoriseerimiseks kasutatud ELISA-s või täppide määratluses. Eelmises uuringus kasutati teist ELISpoti lugejat kui meie, millel on teadaolevalt suur mõju kohanumbritele.

Tistanche kasulikud omadused meestele - tugevdavad immuunsüsteemi

Cistanche Enhance Immunity toodete vaatamiseks klõpsake siin

【Küsi lisa】 E-post:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Veelgi enam, mitmekeskuselises uuringus 96 keskmise riskiga (D−/R+, D+/R+) neerutransplantaadiga, keda testiti ka T-Track® CMV-ga [11], olid CMV-spetsiifilised ELISpot vastused kõrgemad. Banase jt uuringus oli CMV IE-1 spetsiifiliste reaktsioonide mediaan 9–25 SFU 200,000 lümfotsüütide ja CMV pp65 spetsiifiliste reaktsioonide mediaan 114–206 200 kohta,{{17} Olenevalt ajahetkest tuvastati } lümfotsüüte. Seega on Banase jt rühma mõõdetud punktinumbrid. üldiselt kõrgem, kas hemodialüüsi saavatel patsientidel või neerutransplantaadi retsipientidel. See erinevus teeb selgeks, et piirväärtused peab alati kinnitama vastav labor. Eeldatavasti oleme positiivseteks määratlenud ainult tugeva T-raku vastusega patsiendid, kes on tõenäolisemalt kaitstud CMV taasaktiveerimise eest. Lisaks näitas ühismuutujate analüüs, et CMV IgG oli märkimisväärselt korrelatsioonis CMV-spetsiifiliste ELISpot vastustega. Lisaks võivad nii dialüüs kui ka immunosupressiivne ravi mõjutada rakulist CMV-spetsiifilist immuunsust. CMV seropositiivsetel patsientidel, kes said dialüüsi või immunosupressiivset ravi, oli ravivastus CMV pp65 suhtes 29{21}}korda või 56- korda kõrgem kui neil, kellel ei olnud dialüüsi (st patsiendid, kes olid ootenimekirjas enne elusa neeru siirdamist) või ilma immunosupressiivse ravita. Seevastu dialüüsi või immunosupressiooniga patsientidel vähenesid PHA vastused. See leid CMV immuunsuse kohta on esmapilgul ootamatu, kuna nii dialüüs kui ka immunosupressioon peaksid viima T-rakkude funktsiooni halvenemiseni. Siiski leiti immunosupressioon, nagu oodatud, pärast stimuleerimist mitogeen PHA-ga. Need andmed on kooskõlas meie rühma varasema uuringuga, mis näitas, et hulgimüeloomiga patsientidel oli T-rakuline reaktsioon paljudele mitogeenidele ja meeldetuletusantigeenidele, kuid mitte CMV-le [27]. Üksikasjalikumalt T-rakkude vastused neljale mitogeenile PHA, koncanavaliin A, pokeweed mitogeen ja anti-CD3 ning seitse tagasi kutsuvat antigeeni tuberkuliini, teetanuse toksoidi, Candida albicansi, 1. tüüpi herpes simplex viiruse, tuulerõugete viiruse ning A- ja B-gripi viirust olid hulgimüeloomiga patsientidel (n=169) oluliselt madalamad kui vastavatel tervetel kontrollidel (n=100). Kuid T-rakkude vastused CMV-le ei erinenud oluliselt ja positiivsete CMV-spetsiifiliste vastuste protsent patsientidel oli oluliselt suurem kui kontrollidel.

Tistanche kasulikud omadused meestele - tugevdavad immuunsüsteemi

Kokkuvõttes näitavad praegused andmed, et CMV-spetsiifiline rakuline immuunsus võib säilida või suureneda hoolimata T-rakulise immuunsuse (PHA vastuse) üldisest pärssimisest. Lisaks viitab meie uuring teises immuunpuudulikkusega kohordis (hulgimüeloomiga patsiendid) [27], et immunosupressioon ei mõjuta kõiki antimikroobseid immuunvastuseid võrdselt. Varasemad uuringud näitavad, et vanus mõjutab oluliselt inimese immuunvastust CMV suhtes [26, 28, 29]. Praegune uuring võib neid leide kinnitada mitme muutujaga analüüsi tegemisel. Lisaks vanusele mõjutas dialüüs (eriti hemodialüüs) rakulist CMV immuunsust. Eelnev uuring on näidanud, et hemodialüüs põhjustab peritoneaaldialüüsiga võrreldes tugevamat põletikku, mis võib põhjustada immuunsüsteemi enneaegset vananemist [30]. Veelgi enam, CMV-nakkus mängib olulist rolli lõppstaadiumis neeruhaigusega patsientide immunoloogilises vananemises [31]. Kokkuvõtteks võib öelda, et kroonilise neeruhaigusega CMV-seropositiivsetel patsientidel võib CMV pp65-spetsiifiline ELISpot määrata vastuvõtlikkuse CMV taasaktiveerumisele. Ühel kolmandikul neist patsientidest eeldatakse suurenenud riski spetsiifiliste T-rakuliste reaktsioonide puudumise tõttu. CMV-spetsiifiliste täppide arv suurenes dialüüsi ja immunosupressiivset ravi saavatel patsientidel, mis võib olla korrelatsioonis (subkliinilise) CMV-DNAemia ja CMV-spetsiifiliste T-rakkude "võimendiga". See hüpotees vajab aga kinnitust suuremates sõltumatutes uuringutes.

Viited

1. Azevedo, LS; Pierrotti, LC; Abdala, E.; Costa, SF; Strabelli, TM; Campos, SV; Ramos, JF; Latif, AZ; Litvinov, N.; Maluf, NZ; et al. Tsütomegaloviiruse infektsioon siirdatud retsipientidel. Kliinikud 2015, 70, 515–523. [CrossRef]

2. Martin-Gandul, C.; Mueller, NJ; Pascual, M.; Manuel, O. Infektsiooni mõju kroonilisele allografti düsfunktsioonile ja allografti ellujäämisele pärast tahke elundi siirdamist. Olen. J. Siirdamine. 2015, 15, 3024–3040. [CrossRef]

3. Marcelin, JR; Beam, E.; Raseeritav, RR tsütomegaloviiruse infektsioon maksatransplantaadi retsipientidel: kliinilise juhtimise värskendused. Maailm J. Gastroenterool. 2014, 20, 10658–10667. [CrossRef] [PubMed]

4. Godard, B.; Gazagne, A.; Gey, A.; Baptiste, M.; Vincent, B.; Pegaz-Fiornet, B.; Strompf, L.; Fridman, WH; Glotz, D.; Tartour, E. Elispot-analüüsi optimeerimine tsütomegaloviiruse spetsiifiliste CD8+ T-lümfotsüütide tuvastamiseks. Humm. Immunol. 2004, 65, 1307–1318. [CrossRef] 5. Korcakova, L. Tsütomegaloviiruse antikehad: 208 hemodialüüsitud patsiendi korduvate uuringute tulemuste ülevaade. Edevus. Lek. 1995, 41, 454–457.

6. Litjens, NHR; Huang, L.; Dedeoglu, B.; Meijers, RWJ; Kwekkeboom, J.; Betjes, MGH kaitsev tsütomegaloviirus (CMV) – spetsiifiline T-rakuline immuunsus esineb sageli neerutransplantaadiga patsientidel, kellel ei ole seerumi CMV-vastaseid antikehi. Esiosa. Immunol. 2017, 8, 1137. [CrossRef]

7. Sester, M.; Leboeuf, C.; Schmidt, T.; Hirsch, HH Viirusspetsiifilise T-rakulise immuunsuse "ABC" tahke elundi siirdamisel. Olen. J. Siirdamine. 2016, 16, 1697–1706. [CrossRef]

8. Lindemann, M.; Witzke, O.; Lütkes, P.; Fiedler, M.; Kreuzfelder, E.; Philipp, T.; Roggendorf, M.; Grosse-Wilde, H. ELISpot test kui tundlik vahend rakulise immuunsuse tuvastamiseks pärast gripi vastu vaktsineerimist neerutransplantaadi retsipientidel. Clin. Immunol. 2006, 120, 342–348. [CrossRef]

9. Czerkinsky, C.; Andersson, G.; Ekre, HP; Nilsson, LA; Klareskog, L.; Ouchterlony, O. Reverse ELISPOT test tsütokiinide tootmise kloonanalüüsiks. I. Gamma-interferooni sekreteerivate rakkude loendus. J. Immunol. Methods 1988, 110, 29–36. [CrossRef]

10. Gliga, S.; Korth, J.; Krawczyk, A.; Wilde, B.; Horn, PA; Witzke, O.; Lindemann, M.; Fiedler, M. T-Track-CMV ja QuantiFERON CMV testid, et ennustada kaitset CMV taasaktiveerumise eest neerutransplantaadi retsipientidel. J. Clin. Virol. 2018, 105, 91–96. [CrossRef]

11. Banas, B.; Steubl, D.; Renders, L.; Chittka, D.; Banas, MC; Wekerle, T.; Koch, M.; Witzke, O.; Muhlfeld, A.; Sommerer, C.; et al. Uue ensüümiga seotud immunosorbent-punktanalüüsil põhineva in vitro diagnostilise testi kliiniline valideerimine, et jälgida tsütomegaloviiruse spetsiifilist rakuvahendatud immuunsust neerutransplantaadi retsipientidel: mitmekeskuseline, pikisuunaline, perspektiivne vaatlusuuring. Transpl. Int. 2018, 31, 436–450. [CrossRef]

12. Walker, S.; Fazou, C.; Crough, T.; Holdsworth, R.; Kiely, P.; Veale, M.; Bell, S.; Gailbraith, A.; McNeil, K.; Jones, S.; et al. Inimese tsütomegaloviiruse spetsiifiliste CD8+ T-rakkude vastuste ex vivo jälgimine QuantiFERON-CMV abil. Transpl. Nakata. Dis. 2007, 9, 165–170. [CrossRef]

13. Ruan, Y.; Guo, W.; Liang, S.; Xu, Z.; Niu, T. Tsütomegaloviiruse (CMV) immuunseire diagnostiline jõudlus ELISPOTi ja QuantiFERON-CMV analüüsiga neerusiirdamisel: PRISMA-ühilduv artikkel. Meditsiin 2019, 98, e15228. [CrossRef] [PubMed]

14. Sester, U.; Gartner, BC; Wilkens, H.; Schwaab, B.; Wossner, R.; Kindermann, I.; Girndt, M.; Meyerhans, A.; Mueller-Lantzsch, N.; Schafers, HJ; et al. CMV-spetsiifiliste T-rakkude tasemete erinevused ja pikaajaline vastuvõtlikkus CMV-nakkuse suhtes pärast neeru-, südame- ja kopsusiirdamist. Olen. J. Siirdamine. 2005, 5, 1483–1489. [CrossRef] [PubMed]

15. Chanouzas, D.; Väike, A.; Laenab, R.; Ball, S. T-SPOT.CMV gamma-interferooni vabanemise testi hindamine neerutransplantaadi retsipientidel: ühekeskuseline kohortuuring. PLoS ONE 2018, 13, e0193968. [CrossRef] [PubMed]

16. Barabas, S.; Spindler, T.; Kiener, R.; Tonar, C.; Lugner, T.; Batzilla, J.; Bendfeldt, H.; Rascle, A.; Asbach, B.; Wagner, R.; et al. Optimeeritud IFN-gamma ELISpot test rakuvahendatud immuunsuse CMV valgu-reaktiivsete efektorrakkude tundlikuks ja standardiseeritud jälgimiseks. BMC Immunol. 2017, 18, 14. [CrossRef] [PubMed]

17. Shin, KH; Lee, HJ; Chang, CL; Kim, EJ; Lim, S.; Lee, SJ; Ryu, JH; Yang, K.; Choi, BH; Lee, TB; et al. CMV-spetsiifiline T-rakkude immuunsus ennustab pärast maksa siirdamist varajast vireemiat. Transpl. Immunol. 2018, 51, 62–65. [CrossRef]

18. Rogers, R.; Saharia, K.; Chandorkar, A.; Weiss, ZF; Vieira, K.; Koo, S.; Farmakiotis, D. Kliiniline kogemus uudse testiga, millega mõõdetakse tsütomegaloviiruse (CMV) spetsiifilist CD4+ ja CD8+ T-rakkude immuunsust voolutsütomeetria ja rakusisese tsütokiini värvimise abil, et ennustada kliiniliselt olulisi CMV juhtumeid. BMC nakatada. Dis. 2020, 20, 58.

19. Thompson, G.; Boan, P.; Baumwol, J.; Chakera, A.; MacQuillan, G.; Swaminathan, S.; Lavendel, M.; Flexman, J.; James, I.; John, M. QuantiFERON-CMV testi, CMV vireemia ja viirusevastase ravi analüüs pärast tahke elundi siirdamist Lääne-Austraalias. Patoloogia 2018, 50, 554–561. [CrossRef]

20. Kumar, D.; Mian, M.; laulja, L.; Humar, A. Sekkumisuuring, mis kasutab rakuvahendatud immuunsust tsütomegaloviiruse infektsiooni ravi kohandamiseks pärast siirdamist. Olen. J. Siirdamine. 2017, 17, 2468–2473. [CrossRef]

21. Manuel, O.; Husain, S.; Kumar, D.; Zayas, C.; Mawhorter, S.; Levi, MINA; Kalpoe, J.; Lisboa, L.; Ely, L.; Kaul, DR; et al. Tsütomegaloviiruse spetsiifilise rakuvahendatud immuunsuse hindamine tsütomegaloviiruse haiguse ennustamiseks kõrge riskiga tahke elundi siirdamise retsipientidel: mitmekeskuseline kohordiuuring. Clin. Nakata. Dis. 2013, 56, 817–824. [CrossRef] [PubMed]

22. Kumar, D.; Chin-Hong, P.; Kayler, L.; Wojciechowski, D.; Limaye, AP; Osama Gaber, A.; Ball, S.; Mehta, AK; Cooper, M.; Blanchard, T.; et al. Prospektiivne mitmekeskuseline vaatlusuuring rakuvahendatud immuunsuse kohta tsütomegaloviiruse infektsiooni ennustajana neerutransplantaadi retsipientidel. Olen. J. Siirdamine. 2019, 19, 2505–2516. [CrossRef]

23. Lissaboa, LF; Kumar, D.; Wilson, LE; Humar, A. Tsütomegaloviiruse rakkude poolt vahendatud immuunsuse kliiniline kasulikkus tsütomegaloviiruse vireemiaga siirdatud retsipientidel. Siirdamine 2012, 93, 195–200. [CrossRef]

24. Chiereghin, A.; Potena, L.; Borgese, L.; Gibertoni, D.; Squarzoni, D.; Turello, G.; Petrisli, E.; Piccirilli, G.; Gabrielli, L.; Grigioni, F.; et al. Tsütomegaloviiruse (CMV)-spetsiifilise rakuvahendatud immuunsuse jälgimine südamesiirdamise retsipientidel: QuantiFERON-CMV analüüsi kliiniline kasulikkus siirdamisjärgse CMV-nakkuse raviks. J. Clin. Microbiol. 2018, 56, e01040-17. [CrossRef]

25. Banas, B.; Steubl, D.; Renders, L.; Wekerle, T.; Koch, M.; Witzke, O.; Muhlfeld, A.; Sommerer, C.; Habicht, A.; Hugo, C.; et al. T-Track (R) Cmv kliiniline valideerimine, et hinnata Cmv-spetsiifilise rakuvahendatud immuunsuse funktsionaalsust neerusiirdamise retsipientidel. Siirdamine. Int. 2016, 29, 20.

26. Gliga, S.; Fiedler, M.; Dornieden, T.; Achterfeld, A.; Paul, A.; Horn, PA; Herzer, K.; Lindemann, M. Kolme rakulise analüüsi võrdlus CMV-nakkuse kulgu ennustamiseks maksatransplantaadi retsipientidel. Vaktsiinid 2021, 9, 88. [CrossRef]

27. Lindemann, M.; Schuett, P.; Moritz, T.; Ottinger, HD; Opalka, B.; Seeber, S.; Nowrousian, MR; Grosse-Wilde, H. Rakuline in vitro immuunfunktsioon hulgimüeloomiga patsientidel pärast suurtes annustes keemiaravi ja autoloogsete perifeersete tüvirakkude siirdamist. Leukemia 2005, 19, 490–492. [CrossRef] [PubMed]

28. Yan, Z.; Maecker, HT; Brodin, P.; Nygaard, UC; Lyu, SC; Davis, MM; Nadeau, KC; Andorf, S. Vananemine ja CMV ebakõla on seotud suurenenud immuunsüsteemi mitmekesisusega monosügootsete kaksikute vahel. Immun. Vananemine 2021, 18, 5. [CrossRef]

29. Zielinski, M.; Tarasewicz, A.; Zielinska, H.; Jankowska, M.; Moszkowska, G.; Debska-Slizien, A.; Rutkowski, B.; Trzonkowski, P. CD28-positiivsed, tsütomegaloviiruse spetsiifilised tsütotoksilised T-lümfotsüüdid kui uudne biomarker, mis on seotud tsütomegaloviiruse vireemiaga neeru allorretsipientidel. J. Clin. Virol. 2016, 83, 17–25. [CrossRef]

30. Ducloux, D.; Legendre, M.; Bamoulid, J.; Rebibou, JM; Saas, P.; Courivaud, C.; Crepin, T. ESRD-ga seotud immuunfenotüüp sõltub dialüüsi modaalsusest ja raua staatusest: kliinilised tagajärjed. Immun. Vananemine 2018, 15, 16. [CrossRef] 31. Betjes, MG; Huisman, M.; Weimar, W.; Litjens, NH Tsütolüütiliste CD4+CD28- T-rakkude ekspansioon neeruhaiguse lõppstaadiumis. Kidney Int. 2008,74, 760–767. [CrossRef] [PubMed]