Cistanche tabletid leevendavad kroonilist prostatiiti STAT3/HIF-1 /glükolüüsi telje kaudu: tõendid in vivo ja ainevahetuse uuringute põhjal

3. Tulemused

3.1 In vivo eksperimentaalne analüüs

3.1.1 Üldised tähelepanekud Cistanche'i tablettidega töödeldud EAP-rottidel

Katse ajal näitasid kontrollrühma rotid läikivat karva, erksat käitumist ning normaalset toitumist ja aktiivsust. Seevastu mudelirühma rottidel ilmnes tuhm karv ja letargia, mis viitab edukale mudeli induktsioonile. Pärast ravi koosCistanche tabletid, täheldati karusnaha seisundi ja üldise elujõu paranemist.

 

Tabel 1. 24-tunnise uriinierituse ja veetarbimise võrdlus rottidel (x̄ ± s, n=7)

Grupp	Annus (mg·kg⁻¹)	Uriini maht (ml)	Vee tarbimine (ml)
Kontrolli	-	19.38 ± 6.57	18.75 ± 11.88
Mudel	-	11.00 ± 5.58¹)	11.50 ± 6.16
Tamsulosiin	34.2	17.88 ± 3.48	14.38 ± 10.84
Cistanche tabletid	197.2	11.00 ± 5.18	10.63 ± 3.20
	591.5	21.50 ± 10.28⁴)	16.25 ± 10.26
	1,774.4	26.00 ± 6.91⁴)	18.13 ± 4.58

3.1.2 Cistanche'i tablettide mõju EAP-rottide veetarbimisele ja uriinieritusele

Vee tarbimine ja uriini kogus on rottide tervise olulised näitajad. Viimasel annustamise päeval paigutati rotid 24-tunniseks mõõtmiseks metaboolsetesse puuridesse. Võrreldes kontrollrühmaga näitas mudelrühmas uriini mahu olulist vähenemist (P<0.05), while water intake was slightly reduced but not statistically significant. In comparison to the model group, the medium- and high-dose Cistanche tabletidrühmades ilmnes uriini mahu oluline suurenemine (P<0.01), with modest but non-significant improvement in water intake (Table 1). These results suggest that Cistanche tabletidleevendab prostatiidist põhjustatud urineerimishäireid.

3.1.3 Mõju elundiindeksile ja eesnäärme morfoloogiale

Eesnäärme indeks on oluline marker põletiku ja näärmestruktuuri hindamisel. Võrreldes kontrollrühmaga näitas mudelrühma eesnäärmeindeksi olulist langust (P<0.05). After treatment, the prostate index improved significantly in all Cistanche tabletidrühmad (P<0.05 or P<0.01), indicating reduced inflammation (Table 2).

Põrna indeks peegeldab süsteemset immuunsüsteemi aktiivsust. See oli mudelrottidel märkimisväärselt kõrgem (P<0.01) but decreased significantly following Cistanche tabletidravi (P<0.01), suggesting immunomodulatory effects. Morphologically, prostates in the model group were smaller, dull-colored, firmer, and showed strong adhesions. In contrast, prostates from the control and treatment groups were larger, brighter, and easier to dissect.

Tabel 2. Eesnäärme indeksi ja põrna indeksi võrdlus rottidel (x̄ ± s, n=7)

Grupp	Annus (mg·kg⁻¹)	Eesnäärme indeks (%)	Põrna indeks (%)
Kontrolli	-	10.57 ± 0.98	18.75 ± 11.88
Mudel	-	7.00 ± 1.15¹)	11.50 ± 6.16²)
Tamsulosiin	34.2	9.00 ± 1.91³)	14.38 ± 10.84
Cistanche tabletid	197.2	10.43 ± 2.23³)	10.63 ± 3.20⁴)
	591.5	11.57 ± 1.99⁴)	16.25 ± 10.26
	1,774.4	12.57 ± 1.51⁴)	18.13 ± 4.58⁴)

Märkus.
¹²) P< 0,05 võiP< 0,01 vs kontroll;
³⁴) P< 0,05 võiP< 0,01 vs. mudel.

3.1.4 Mõju seerumi tsütokiinidele

ELISA tulemused näitasid, et seerumi IL-8 ja IL-1 tase oli mudelrühmas oluliselt kõrgem (P<0.01), indicating heightened inflammation. Treatment with the positive control and medium/high doses of Cistanche tabletidoluliselt vähenenud IL-8 (lk<0.01), while all doses reduced IL-1β (P<0.05 or P<0.01), indicating anti-inflammatory effects (Table 3).

Lisaks suurenes seerumi IgG tase mudelrühmas märkimisväärselt (P<0.05), but significantly decreased in the high-dose group (P<0.01), suggesting that Cistanche tabletidvõib reguleerida immuunvastuseid ja vähendada immuunkompleksi moodustumist.

Tabel 4. HK ja MINPP1 valgu ekspressiooni võrdlus rottide eesnäärmekoes (x̄ ± s, n=3)

Grupp	Annus (mg·kg⁻¹)	HK väljendus	MINPP1 avaldis
Kontrolli	-	0.37 ± 0.10	0.038 ± 0.006
Mudel	-	8.16 ± 0.79²)	0.004 ± 0.001²)
Tamsulosiin	34.2	0.68 ± 0.11⁴)	0.028 ± 0.004⁴)
Cistanche tabletid	197.2	4.35 ± 0.62⁴)	0.014 ± 0.001⁴)
	591.5	2.18 ± 0.31⁴)	0.017 ± 0.001⁴)
	1,774.4	1.27 ± 0.26⁴)	0.028 ± 0.005⁴)

Märkus.
²) P< 0,01 vs kontroll;
⁴) P< 0,01 vs. mudel.

3.1.5 Eesnäärmekoe histopatoloogiline hindamine

HE värvimine näitas mudelrühmas tõsist lümfotsüütilist infiltratsiooni, näärmekahjustust ja atroofiat. Seevastu ravitud rühmadel oli paranenud näärmete struktuur ja vähenenud põletikuliste rakkude infiltratsioon, mis näitab sedaCistanche tabletidleevendas tõhusalt põletikku ja koekahjustusi (joonis 1).

3.1.6 MINPP1 ja HK valkude ekspressioon eesnäärmekoes

Immunohistokeemiline analüüs näitas, et HK valgu ekspressioon oli mudelrühmas oluliselt suurenenud (P<0.01), but significantly reduced after Cistanche tabletidravi (P<0.01). Conversely, MINPP1 expression was significantly decreased in the model group (P<0.01), but significantly increased after treatment (P<0.01) (Figure 2, Table 4). These results suggest that Cistanche tabletidvõib glükolüüsi pärssida, vähendades HK-d ja ülesreguleerides MINPP1.

3.1.7 p-STAT3 ja HIF-1 valkude ekspressioon

Western blot tulemused näitasid mudelirühmas märkimisväärselt kõrgenenud p-STAT3 ja HIF-1 ekspressiooni võrreldes kontrollidega (P<0.01). Treatment with low and high doses of Cistanche tabletidmuutis need muutused oluliselt tagasi (P<0.01) (Figure 3, Table 5).

 

Cistanche kasulikud omadused neerude ja eesnäärme tervisele

 

 

 

3.2 Seerumi ainevahetuse analüüs

3.2.1 Andmekvaliteedi kontroll ja metaboliitide tuvastamine

Kvaliteedikontrolli (QC) proovid näitasid tihedat rühmitust, mis näitab usaldusväärseid andmeid (joonis 4A). Kontroll- ja mudelrühmade selge eraldamine kinnitas mudeli edu. Mudeli ja suure annuse vahel on selge erinevusCistanche tabletidrühm näitas terapeutilist toimet (joonis 4B). Permutatsioonitest andis tulemuseks R²Y=0.94, mis kinnitas, et PLS-DA mudel oli vastupidav ja ei olnud ülekomplekteeritud (joonis 4C).

3.2.2 Diferentsiaalmetaboliidi analüüs

Kasutades künnisväärtustena VIP > 1 ja P < 0,05, tuvastati kontroll- ja mudelrühmade vahel 85 ülesreguleeritud ja 108 allareguleeritud metaboliiti. Mudeli ja suure annuse vahelCistanche tabletidrühmas tuvastati 84 ülesreguleeritud ja 100 allareguleeritud metaboliiti. Kõigis kolmes rühmas muudeti märkimisväärselt 96 erinevat metaboliiti (joonis 5; täieliku loendi leiate lisaandmetest).

 

Ostutellimus oma cistanche pillide jaoks

 

3.2.3 Metaboolsete radade rikastamise analüüs

Rikastusanalüüs näitas, et diferentsiaalsed metaboliidid olid peamiselt seotud:

Terpenoidide ja steroidide biosüntees

Glükolüüs/glükoneogenees

Püruvaadi metabolism

Oksüdatiivne fosforüülimine

Arahhidoonhappe metabolism

(Joonis 6A). Need leiud viitavad selleleCistanche tabletidvõib parandada prostatiidi sümptomeid, moduleerides hormoonide tasakaalu, energia metabolismi ja antioksüdantide võimet.

Peamised glükolüütilises rajas mõjutatud metaboliidid olid -D-glükoos (M179T285_NEG), glütseraat-2,3P2 (M333T352_2_POS), glütseraat-2P (M371T18_NEG) ja püruvaat (M87T113_NEG) (joonis).

 

 

Cistanche ja cistanche ekstrakti munufactorer Hiinas

4. Arutelu

Krooniline prostatiit on mitmefaktorilise etioloogiaga keeruline seisund, mis hõlmab immuun- ja metaboolseid düsfunktsioone. Selles uuringus kasutati efektiivsuse hindamiseks EAP rotimudelitCistanche tabletidja kasutas selle toimemehhanismide uurimiseks metaboloomikat. Tulemused näitavad sedaCistanche tabletidparandada käitumist, taastada uriini ja vee tasakaalu, vähendada põrna immuunkoormust ja alandada immuunkomplekside taset.

Tabel 5. P-STAT3 ja HIF-1 valgu ekspressiooni võrdlus rottide eesnäärmekoes (x̄ ± s, n=3)

Grupp	Annus (mg·kg⁻¹)	p-STAT3	HIF-1
Kontrolli	-	0.51 ± 0.03	0.67 ± 0.06
Mudel	-	1.09 ± 0.09²)	0.88 ± 0.03²)
Cistanche tabletid	197.2	0.65 ± 0.06⁴)	0.69 ± 0.01⁴)
	1,774.4	0.51 ± 0.02⁴)	0.65 ± 0.05⁴)

Märkus.
²) P< 0,01 vs kontroll;
⁴) P< 0,01 vs. mudel.

Histoloogilised ja ELISA andmed kinnitasid põletiku ja tsütokiinide taseme langust. Mehaaniliselt,Cistanche tabletidnäib tegutsevat järgmiselt:

STAT3 fosforüülimise pärssimine → IL-17 sekretsiooni vähendamine

Vähendab HIF-1 → hüpoksiat ja glükolüütilist aktivatsiooni

HK alareguleerimine ja MINPP1 ülesreguleerimine → glükolüütilise metabolismi häirimine

See kolmekordne mehhanism katkestab nõiaringipõletik - hüpoksia - metaboolne düsregulatsioon(Joonis 7).

On teada, et IL-17 aitab kaasa kroonilisele prostatiidile, värbab neutrofiile ja kutsub esile lokaalse põletiku. STAT3 on oluline Th17 diferentseerumise ja IL-17 transkriptsiooni jaoks. Aktiveeritud STAT3 seob IL-17 geeni võimendajaid, soodustades selle ekspressiooni. IL-17 aktiveerib ka PI3K/Akt raja, mis on seotud autoimmuun- ja põletikuliste haigustega. Selles uuringusCistanche tabletidallareguleeritud p-STAT3, mis viitab vähenenud IL-17 tootmisele ja selle allavoolu mõjudele.

Lisaks stabiliseerib aktiveeritud Akt HIF-1, inhibeerides prolüülhüdroksülaase (PHD), suurendades HIF-1 stabiilsust. HIF-1 on glükolüüsi peamine regulaator ja reguleerib üles HK ekspressiooni, et suurendada hüpoksia korral energia tootmist.Cistanche tabletidalareguleeris HIF-1 ja HK, samal ajal reguleerides MINPP1 üles, leevendades seeläbi glükolüütilist üleaktivatsiooni.

Liigne glükolüüs põhjustab laktaadi akumuleerumist, säilitades põletikku ja soodustades Th17 diferentseerumist, säilitades seegapõletik - hüpoksia - glükolüüsi silmus. Cistanche tabletidnäivad selle tsükli katkestavat, käsitledes nii põletikku kui ka metaboolset tasakaalustamatust.

Lisaks võib laktaat suurendada IL-17 sünteesi, soodustades kroonilist põletikku. Erinevalt mittesteroidsetest põletikuvastastest ravimitest, mis on suunatud ainult põletikule,Cistanche tabletidpakkuda kahetoimelist mõlematimmuun- ja metaboolsed teljed, muutes need paljulubavaks mitme eesmärgiga taimse sekkumise vahendiks.

 

Järeldus

See uuring näitab, etCistanche tabletidkroonilise prostatiidi leevendamiseks:

STAT3/IL-17 telje pärssimine immuunpõletiku vähendamiseks

HIF-1 ja glükolüüsi reguleerimine kudede hapnikuga varustamise ja ainevahetuse parandamiseks

HK ja MINPP1 moduleerimine glükolüütilise ülekäigu mahasurumiseks

Need leiud annavad teadusliku aluse arenguksCistanche-põhised taimsed toidulisandidsihtimineimmuun-metaboolne düsfunktsioon kroonilise prostatiidi korral. Tulevased uuringud peaksid täiendavalt uurima Cistanche bioaktiivseid koostisosi ja valideerima neid mehhanisme kliinilistes tingimustes.