Mükotoksiinide bioseire Alzheimeri ja Parkinsoni tõvega patsientide plasmasⅢ
Apr 12, 2023
3. Järeldused
Tutvustame tulemusi, mis saadi esimeses HBM-uuringus 19 mükotoksiini ja metaboliidi analüüsi kohta tervete ja patsientide (AD ja PD) vabatahtlike plasmaproovides La Riojas (Hispaania). Uuringu tulemused viitavad mõningatele erinevustele nii kontrollrühma kui ka patsientide vahel OTA ja STER taseme osas. Selle erinevuse põhjus on teadmata. Täheldatud tulemust võivad mõjutada mitmed tegurid, nagu erinevused toitumises, haigusest tingitud ainevahetuse muutused või asjaolu, et sugu ja vanus võivad omada olulist rolli plasmas tuvastatud mükotoksiinide tasemes.
Klõpsake Alzheimeri tõve ja Parkinsoni tõve tsüstanche tinktuuri saamiseks
Kõiki neid segavaid tegureid tuleks hoolikalt hinnata uuringutega, mis hõlmavad suuremat arvu üksikisikuid. Käesolevas uuringus on täheldatud erinevusi OTA-s tervete kaaslaste ja patsientide vahel, kuid erinevused näivad olevat rohkem seotud sooga kui haiguse endaga. Lisaks kippus OTA vanusega vähenema, eriti PD rühmas. Üks peamisi leide on see, et STER ilmnes alles pärast -glükuronidaasi / arüülsulfataasi töötlemist, mis toetab hüpoteesi, et STER-glükuroniidid tekivad inimese metabolismi käigus. Lisaks leiti, et STERi plasmatasemed olid patsientidel kõrgemad, ilma et patoloogiate vahel erinevusi ei esinenud. Lisaks korreleerusid STER-i tasemed naiste vanusega positiivselt.
Andmete tõlgendamisel on oluline märkida, et käesolev uuring ei olnud mõeldud PD või AD patobioloogia selgitamiseks, vaid pigem selleks, et uurida, kas võimaliku keskkonnariski teguri olemasolu võib toimida geeniga seotud häirivate ainetena. keskkonna interaktsioon. Kontrollrühma proovid ühtivad varasemate andmetega, mis on saadud sarnases populatsioonis Hispaania naaberpiirkonnas ja kasutavad sama LC/MS-MS analüüsi [35].
Kui aga võrrelda terveid inimesi mõlema uuringu vahel, tuleb märkida, et: (i) vanusevahemik on erinev, kuna suurem osa käesoleva uuringu proove saadi vanematelt kui 60-aastastelt inimestelt, eriti AD ja PD rühmades. , nagu oodatakse vanusega seotud haiguste puhul; ja (ii) kontrollproovide arv, mis on käesolevas uuringus väike. Lisaks tuleks käesoleva uuringu andmete tõlgendamisel arvesse võtta ka muid piiranguid; paljud andmed olid väga lähedased LOD-le ja proovide arv oli piiratud (eriti AD meestel). Üldiselt näitavad meie tulemused mõningaid statistiliselt olulisi erinevusi kontrollrühma ja neurodegeneratiivsete haigustega patsientide vahel, kuid viitavad ka teatud vanuse ja sooga seotud reaktsioonidele, mis võivad omakorda mõjutada ainevahetust.
4. Materjalid ja meetodid
4.1. Reaktiivid
LC-MS grade methanol (Honeywell Riedel-de-Haën, Seelze, Germany), LC grade acetonitrile (ACN) (Merck, Darmstadt, Germany), MS grade formic acid (purity > 98%), ammonium formate (both from Fluka Sigma-Aldrich, Mannheim, Germany), and deionized water (>Proovi ettevalmistamiseks ja LC-MS/MS analüüsiks kasutati Ultramatic Type I süsteemis (Wasserlab, Navarra, Hispaania) puhastatud eritakistust 18 MΩ cm-1. Captiva EMR-lipiidi (3 ml) padrunid saadi ettevõttest Agilent Technologies (Santa Clara, CA, USA).
Kõik mükotoksiinid (võrdlusmaterjal, puhtus 98 protsenti või suurem) osteti ettevõttelt Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA) ACN lahustena järgmistes kontsentratsioonides AFM1, AFG2 ja AFB2: 0. 5 ug/ml; AFG1 ja AFB1: 2 ug/ml; OTA-d5 ja OTB: 10 ug/ml; STER ja DOM{13}}: 50 µg/ml; NIV, DON, 3-ADON, 15-ADON, NEO, DAS, FUS-X, ZEA ja T-2 ja HT-2 toksiinid: 100 µg/ml. Võrdlusmaterjale hoiti temperatuuril –20 ◦C. Standardsed põhilahused valmistati ACN-is ja neid säilitati temperatuuril –20 ◦C. Töölahus, mis sisaldab kõiki mükotoksiine, valmistati vastavate üksikute põhilahuste lahjendamisel ACN-s. Eelnevalt hinnati standard- ja tööpõhilahuste stabiilsust nendes säilitustingimustes [36].
4.2. Teemaects
Enne uuringusse kaasamist saadi kõigilt osalejatelt teadlik kirjalik nõusolek. La Rioja (Hispaania) San Pedro haigla neuroloogiateenistusest võeti tööle kokku 94 katsealust, sealhulgas 44 kerge PD-ga patsienti, 25 PD-ga mitteseotud dementsusega patsienti ja 25 tervet kontrollirühma ("Uuring"). lipiidide profiilid Parkinsoni tõvega patsientide seerumi/plasma proovides, et saada diagnoosimise eesmärgil erinev kliiniline muster" Viide: CEICLAR PI- 212, heaks kiidetud 4. aprillil 2016) kohalikust inimkatsete eetikakomiteest (CEImLar) , Comité Ética de Investigación con medicamentos de La Rioja). Patsiente diagnoosisid kogenud neuroloogid. PD patsiente hinnati modifitseeritud HY skaala järgi (tabel S3), samas kui PD-ga mitteseotud dementsusega patsiente hindas GDS (tabel S4), et määrata nende haiguse staadium. Tervete kontrollide hulka kuulusid nende patsientide abikaasad või sõltumatud kaaslased, kellel ei olnud nähtavaid või teadaolevaid neuroloogilisi haigusi või kaasuvaid haigusi.
4.3. Plasma
Kogumine Vereproovid võeti arstivisiidil. Veri koguti 4 ml EDTA-ga kaetud tuubidesse (Vacutainer, viitenumber 368171) ja plasma eraldati 2 tunni jooksul tsentrifuugimisega 22{6}}0 × g juures 15 minutit toatemperatuuril. Plasma eemaldati viivitamatult ja viidi kodeeritud viaalidesse 0,2 ml alikvootidena, et vältida korduvaid külmutamise/sulatamise tsükleid, ning seejärel säilitati temperatuuril –80 ◦C. Asjakohast hoolt rakendati, et vältida plasmaproovide saastumist tsentrifuugimisel saadud rakkude või pelleti komponentidega.
4.4. Proovi ettevalmistaminemine
Plasma töötlemine enne ja pärast ensümaatilist hüdrolüüsi oli nii, nagu on kirjeldatud artiklis ArceLópez et al. (2020) [35,36]. Lühidalt, plasmaproovid (400 µL) lisati Captiva EMR-lipiidkassetti, mis sisaldas 1200 µl hapendatud ACN (1% sipelghapet). Rakendati vaakum ja 5 minuti pärast eraldati heitveest kaks 400 µl alikvooti (üks iga uuritava mükotoksiinirühma jaoks) ja aurustati seejärel kuivaks (60 °C).
Seda metoodikat kasutati 19 ühendi (mükotoksiinide ja metaboliitide) tuvastamiseks, mis liigitati kahte rühma (vastavalt kromatograafiliseks eraldamiseks vajalikele erinevatele elueerimisprogrammidele): DOM-1, AFG2, AFM1, AFG1, AFB2, AFB1 , OTB, ZEA, STER, OTA, T-2, HT-2 (I rühm) ja NIV, DON, FUS-X, NEO, 3-ADON, 15-ADON ja DAS (II rühm). Jääk taastati 200 µl liikuva faasiga proportsioonis, mis vastas kavandatud analüüsitavate mükotoksiinide rühmale (40 protsenti B rühma I ja 5 protsenti B rühma II jaoks).
Enne kromatograafilist analüüsi segati lahust vorteksiga (5 minutit) ja filtriti (PVDF, 0,45 µm, Merck Millipore, Iirimaa). Ensümaatilise hüdrolüüsi protseduur oli järgmine: 400 µL plasmat töödeldi 50 µL glükuronidaasi/sulfataasi ensüümide seguga (250 U/mL, 0,2 U/mL PBS-is; firmalt Helix Pomatia (Sigma Aldrich, Mannheim, Saksamaa).Pärast segamist inkubeeriti proove üle öö (37°C) veevannis. Seejärel tehti plasmaproovi puhastamine Captiva-EMR kassette kasutades sarnaselt ülalkirjeldatule.
4.5. LC/MS-MS analüüs
LC-MS/MS analüüs viidi läbi LC-süsteemis 1200, mis oli ühendatud 6410 kolmekordse kvadrupooliga (QqQ) ESI(pluss) režiimis, mõlemad firmalt Agilent Technologies (Mannheim, Saksamaa). Eraldamine viidi läbi temperatuuril 45 °C kolonnis Ascentis Express C18, 2,7 µm osakeste suurus 150 × 2,1 mm (Supelco Analytical, St. Louis, MO, USA), liikuva faasiga, mis koosnes 5 mM ammooniumformiaadist ja 0,1 protsendilisest sipelghappest. vees (A) ja 5 mM ammooniumformiaadis ja 0,1 protsendilises sipelghappes 95:5 metanool/vesi (B) gradiendi tingimustes.
Süstimismaht oli 20 µL ja gradientelueerimine viidi läbi voolukiirusel 0,4 ml/min. Andmete kogumise parameetreid kirjeldavad Arce-López et al. (2020) [36]. Proove analüüsiti ja rühmitati analüütilistesse järjestustesse. Iga jada sisaldas koos proovidega kaheksat maatriksiga sobitatud kalibraatorit.
Neid kalibraatoreid kasutati kalibreerimiskõverate koostamisel, mida kasutati mükotoksiinide kvantifitseerimiseks samas järjestuses analüüsitud proovides. Kalibreerimiskõverate aktsepteerimiskriteeriumid olid järgmised: vähemalt kuus punkti, määramiskoefitsient (R2 ) > 0,99 ja iga kalibraatori järelarvutatud kontsentratsioon, mis ei erine (väljendatuna RE-na) nimiväärtusest rohkem kui 15 protsenti (LOQ taseme puhul 20 protsenti) [32]. Lisaks ei tohiks proovide ja kalibraatorite retentsiooniajad erineda rohkem kui 2,5 protsenti [33]. Sõltuvalt saadaoleva plasma mahust ei saa pärast ensümaatilist töötlemist kõiki proove analüüsida.
4.6. Analüütilise meetodi valideerimine
Mõlema protseduuri valideerimine (enne ja pärast ensümaatilist hüdrolüüsi) järgides FDA ja EL juhiseid, nagu on kirjeldatud artiklis Arce-Lopez et al. (202{{10}}) [35,36]. LOD väärtused olid: 1,35 ng/ml DOM-1 jaoks; 0,35 ng/mL AFG2 puhul, 0,18 ng/mL AFM1 puhul; 0.07 ng/mL AFG1 ja AFB2 jaoks; 0.04 ng/mL AFB1 jaoks; 2,70 ng/mL HT-2 jaoks; 0,40 ng/ml OTA ja OTB puhul; 0,20 ng/mL T-2 ja STER jaoks; 1,80 ng/ml ZEA jaoks; 9,10 ng/ml NIV jaoks; 1,94 ng/ml DON jaoks; 1,95 ng/ml FUS-X jaoks; 0,18 ng/ml NEO jaoks; 0,70 ng/mL 3-ADON; 1,20 ng/mL 15-ADON ja 0,15 ng/ml DAS puhul.
Taastumisväärtused (keskmise täpsusega tingimustes) enne ensümaatilist töötlemist olid 68,8 protsendist STERi puhul 97,6 protsendini DAS-i puhul (RDS vähem kui 15 protsenti kõigi mükotoksiinide puhul) ja pärast ensümaatilist töötlemist erinevusi ei leitud. Maatriksi mõju hinnati ka enne ja pärast ensümaatilist töötlemist ning enamiku mükotoksiinide puhul ei olnud erinevusi, saadi kõigi nende RDS väärtused alla 15 protsendi või sellega võrdsed. Stabiilsust pärast kahte külmutamis-sulatustsüklit hinnati kahel kontsentratsioonitasemel (6 ja 30xLOQ) (kolm kordust taseme kohta). Kõik mükotoksiinid olid stabiilsed (RSD < 15 protsenti) (tabel S7).
4.7. Statistiline analüüs ja andmetöötlus
Analüütiliste andmete käsitlemisel statistikaga on oluline selgitada, missugune jaotus andmestikku iseloomustas. Kasutatavad deskriptorid ja paketitestid on erinevad, kui meil on tavajaotusega või mittetavajaotatud andmed. Shapiro-Wilki testi kasutati uuritud mükotoksiinide kontsentratsioonitasemete normaalse jaotuse kontrollimiseks.
Kuna normaalsuse hüpotees lükati tagasi, kasutati statistiliseks käsitlemiseks mitteparameetrilist (mis ei tähenda jaotuse eeldust) testide komplekti. OTA ja STERi kontsentratsioonitasemete võimalike erinevuste hindamiseks rühmades ja alamrühmades kasutati Wilcoxoni järjestus-summa testi (Mann-Whitney kahe valimi statistika) [49]. Statistikas on Wilcoxoni auaste-summa test mitteparameetriline test, mida kasutatakse selleks, et testida, kas kaks valimit pärinevad tõenäoliselt samast populatsioonist, kontrollides, et kahest populatsioonist juhuslikult valitud väärtuse X ja Y korral on X tõenäosus suurem. kui Y on võrdne tõenäosusega, et Y on suurem kui X.
Samal eesmärgil kasutati Kruskal-Wallise testi, kus muutujate võrdlemine eeldas rohkem kui ühte jaotust [50]. Mükotoksiinide taseme ja vanuse (kvantitatiivne muutuja) vahelise korrelatsiooni hindamiseks kasutati Spearmani astme korrelatsioonikoefitsienti (või Spearmani rho). Kõik testid viidi läbi olulisuse tasemega 5 protsenti. Väljundid esitatakse koos statistilise olulisuse taseme ja p-väärtusega. Kõik analüüsid viidi läbi tarkvara STATA14 abil (Stata/IC 14.0, autoriõigus 1985–2015 StataCorp LP). Andmestiku seadmise andmetöötluse osas käsitleti kvantitatiivseid ja kvalitatiivseid muutujaid järgmiselt: OTA ja STER tase. Kvantitatiivne muutuja, mittenegatiivne muutuja, väljendatuna väärtustena ng/ml.
Väärtused määrati järgmiselt: Väärtus=0 ng/mL; kui leiti analüüsist tuletatud analüütiline tulemus
PD-patsientide diagnoosi skaleerimiseks kasutati kvantitatiivset muutujat (tabel S3). Lisaks määrati PD jaoks binaarne muutuja (HY_d=0 ja HY_d=1): HY_d=0 patsiendid, kelle HY skaalal oli 1–2 (pole kahjustatud asendirefleks); HY_d=1 PD patsientidel, kelle HY skaalal oli vahemikus 2,5–3 (häirunud asendirefleksid). GDS skaala. Kvantitatiivset muutujat kasutati AD-ga patsientide diagnoosi skaleerimiseks (tabel S4).
Cistanche'i tõve mehhanism ravib Alzheimeri tõbe ja Parkinsoni tõbe
Cistanche on traditsiooniline Hiina ravimtaim, mida on selle võimaliku tervisega seotud eeliste tõttu kasutatud juba aastaid. Hiljutistes uuringutes on leitud, et Cistanche'il võib olla neuroprotektiivne toime ja see võib olla tõhus Alzheimeri tõve (AD) ja Parkinsoni tõve (PD) ravis.
Cistanche'i mehhanism AD ja PD tõhusas ravis on tingitud selle aktiivsetest komponentidest, nagu ehhinakosiid, akteosiid ja tsistanosiidid. Arvatakse, et neil ühenditel on antioksüdantsed ja põletikuvastased omadused, mis võivad vähendada oksüdatiivset stressi ja põletikku ajus, mis on seotud neurodegeneratiivsete haiguste arengu ja progresseerumisega.
Cistanche võib samuti soodustada närvirakkude kasvu ja parandada kognitiivset funktsiooni, suurendades ajust pärineva neurotroofse faktori (BDNF) taset – valku, mis mängib neuronite kasvus ja säilimises üliolulist rolli. Lisaks on näidatud, et Cistanche vähendab -amüloidnaastud, mis on Alzheimeri tõve iseloomulikud tunnused, ja vähendab Parkinsoni tõvega seotud sünukleiini akumuleerumist ajus.
Üldiselt on Cistanche potentsiaalsed terapeutilised eelised AD ja PD ravis paljutõotavad, kuid selle täpsete toimemehhanismide selgitamiseks ja selle efektiivsuse ja ohutuse kinnitamiseks kliinilistes tingimustes on vaja täiendavaid uuringuid.
Viited
1Serrano-Pozo, A.; Frosch, MP; Masliah, E.; Hyman, BT Alzheimeri tõve neuropatoloogilised muutused. Cold Spring Harb. Perspektiiv. Med. 2011, 1, a006189. [CrossRef]
2. Fearnley, JM; Lees, AJ Vananemine ja Parkinsoni tõbi: Substantia nigra piirkondlik selektiivsus. Aju 1991, 114, 2283–2301. [CrossRef]
3. Barber, RC Alzheimeri tõve geneetika. Scientifica (Kairo) 2012, 2012, 1–14. [CrossRef]
4. Izco, M.; Carlos, E.; Alvarez-Erviti, L. Parkinsoni tõve eksosoomide kaks palet: patoloogiast teraapiani. Neuroscientist 2021, 107385842199000. [CrossRef] [PubMed]
5. Hou, Y.; Dan, X.; Babbar, M.; Wei, Y.; Hasselbalch, SG; Croteau, DL; Bohr, VA Vananemine kui neurodegeneratiivse haiguse riskitegur. Nat. Rev Neurol. 2019, 15, 565–581. [CrossRef] [PubMed]
6. Johnson, ME; Stecher, B.; Labrie, V.; Brundin, L.; Brundin, P. Käivitajad, soodustajad ja raskendajad: Parkinsoni tõve patogeneesi ümberdefineerimine. Trends Neurosci. 2019, 42, 4–13. [CrossRef]
7. Wainaina, MN; Chen, Z.; Zhong, C. Hilise algusega Alzheimeri tõve arengu ja progresseerumise keskkonnategurid. Neurosci. Bull. 2014, 30, 253–270. [CrossRef]
8. Rahman, MA; Rahman, MS; Uddin, MJ; Mamum-Or-Rashid, ANM; Pang, M.-G.; Rhim, H. Keskkonnategurite esilekerkiv risk: Alzheimeri tõve mehhanismid. Keskkond. Sci. Saasta. Res. 2020, 27, 44659–44672. [CrossRef] [PubMed]
9. Bush, AI Alzheimeri tõve metalliteooria. J. Alzheimeri dis. 2012, 33, S277–S281. [CrossRef] 10. Moulton, PV; Yang, W. Õhusaaste, oksüdatiivne stress ja Alzheimeri tõbi. J. Environ. Rahvatervis 2012, 2012, 472751. [CrossRef]
11. Li, Y.; Fang, R.; Liu, Z.; Jiang, L.; Zhang, J.; Li, H.; Liu, C.; Li, F. Seos toksiliste pestitsiididega kokkupuute ja Alzheimeri tõve vahel: saientomeetriline ja visualiseerimisanalüüs. Chemosphere 2021, 263, 128238. [CrossRef]
12. Fulop, T.; Witkowski, JM; Bourgade, K.; Khalil, A.; Zerif, E.; Larbi, A.; Hirokawa, K.; Pawelec, G.; Bocti, C.; Lacombe, G.; et al. Kas infektsiooni hüpotees võib selgitada Alzheimeri tõve beeta-amüloidi hüpoteesi? Ees. Vananevad neuroosid. 2018, 10, 224. [CrossRef]
13. Vasefi, M.; Ghaboolian-Zare, E.; Abedelwahab, H.; Osu, A. Keskkonnatoksiinid ja Alzheimeri tõve progresseerumine. Neurochem. Int. 2020, 141, 104852. [CrossRef]
14. Goldman, SM Keskkonnatoksiinid ja Parkinsoni tõbi. Annu. Rev. Pharmacol. Toksikool. 2014, 54, 141–164. [CrossRef] [PubMed]
15. Marras, C.; Konserveerimine, CG; Goldman, SM Keskkond, elustiil ja Parkinsoni tõbi: mõju ennetamisele järgmisel kümnendil. Mov. Häire. 2019, 34, 801–811. [CrossRef] [PubMed]
16. Van der Mark, M.; Brouwer, M.; Kromhout, H.; Nijssen, P.; Huss, A.; Vermeulen, R. Kas pestitsiidide kasutamine on seotud Parkinsoni tõvega? Mõned vihjed uuringutulemuste heterogeensusele. Keskkond. Tervise perspektiiv. 2012, 120, 340–347. [CrossRef] [PubMed]
17. Gorell, JM; Johnson, CC; Rybicki, BA; Peterson, EL; Richardson, RJ Parkinsoni tõve risk kokkupuutel pestitsiididega, põlluharimise, kaevuvee ja maaeluga. Neurology 1998, 50, 1346–1350. [CrossRef]
18. Priyadarshi, A.; Khuder, SA; Schaub, EA; Priyadarshi, SS Keskkonnariskitegurid ja Parkinsoni tõbi: metaanalüüs. Keskkond. Res. 2001, 86, 122–127. [CrossRef]
19. Mitchell, NJ; Bowers, E.; Hurburgh, C.; Wu, F. Võimalik majanduslik kahju USA maisitööstusele aflatoksiiniga saastumise tõttu. Toidu lisand. Contam. A-osa 2016, 33, 540–550. [CrossRef] [PubMed]
20. Marin, S.; Ramos, AJ; Cano-Sancho, G.; Sanchis, V. Mükotoksiinid: esinemine, toksikoloogia ja kokkupuute hindamine. Food Chem. Toksikool. 2013, 60, 218–237. [CrossRef]
21. Janik, E.; Niemcewicz, M.; Ceremuga, M.; Stela, M.; Saluk-Bijak, J.; Siadkowski, A.; Bijak, M. Mükotoksiinide molekulaarsed aspektid – tõsine probleem inimeste tervisele. Int. J. Mol. Sci. 2020, 21, 8187. [CrossRef]
22. Logrieco, A.; Miller, J.; Eskola, M.; Krska, R.; Ayalew, A.; Bandyopadhyay, R.; Battilani, P.; Bhatnagar, D.; Chulze, S.; De Saeger, S.; et al. Mükotoksiinide harta: teadlikkuse suurendamine ja kooskõlastatud tegevus mükotoksiinidega kokkupuute vähendamiseks kogu maailmas. Toksiinid (Basel) 2018, 10, 149. [CrossRef] 23. Euroopa Komisjon. Komisjoni määrus (EÜ) nr 1881/2006, 19. detsember 2006, millega kehtestatakse teatavate saasteainete piirnormid toiduainetes. Väljas. J. Eur. Liit 2006, 364, 5–24.
24. Euroopa Parlament. Euroopa Parlamendi ja nõukogu Euroopa Parlamendi ja nõukogu 7. mai 2002. aasta direktiiv ebasoovitavate ainete kohta loomasöödas 2002/32. Väljas. J. Eur. Kogukonnad 2002, L140, 10–22.
25. Euroopa Komisjon. Komisjoni 17. augusti 2006. aasta soovitus desoksünivalenooli, zearalenooni, ohratoksiin A, T-2 ja HT-2 ning fumonisiinide sisalduse kohta loomasöödaks ettenähtud toodetes. Väljas. J. Eur. Liit 2006, L299, 7–9.
26. Eskola, M.; Kos, G.; Elliott, CT; Hajšlová, J.; Mayar, S.; Krska, R. Ülemaailmne toidukultuuride saastumine mükotoksiinidega: laialdaselt tsiteeritud FAO hinnangu 25 protsendi kehtivus. Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 2020, 60, 2773–2789. [CrossRef] [PubMed]
27. Escrivá, L.; Font, G.; Manyes, L.; Berrada, H. Uuringud mükotoksiinide esinemise kohta bioloogilistes proovides: ülevaade. Toksiinid (Basel) 2017, 9, 251. [CrossRef]
28. Gurusankar, R.; Yenugadhati, N.; Krishnan, K.; Hays, S.; Haines, D.; Zidek, A.; Kuchta, S.; Kinniburgh, D.; Gabos, S.; Mattison, D.; et al. Inimese bioloogilise monitooringu roll terviseriskide hindamisel. Int. J. Riskianalüüs. Manag. 2017, 20, 136–197. [CrossRef]
29. Bredesen, DE Inhaleeritav Alzheimeri tõbi: tundmatu ja ravitav epideemia. Vananemine (Albany, NY) 2016, 8, 304–313. [CrossRef]
30. Martins, I. Ületoitumine määrab mükotoksiinidest põhjustatud neurotoksilisuse LPS regulatsiooni neurodegeneratiivsete haiguste korral. Int. J. Mol. Sci. 2015, 16, 29554–29573. [CrossRef] [PubMed]
31. Izco, M.; Vettorazzi, A.; Forcen, R.; Blesa, J.; de Toro, M.; Alvarez-Herrera, N.; Cooper, JM; Gonzalez-Peñas, E.; Lopez de Cerain, A.; Alvarez-Erviti, L. Suukaudne subkrooniline kokkupuude mükotoksiini ohratoksiin A-ga kutsub hiirtel esile Parkinsoni tõve peamised patoloogilised tunnused kuus kuud pärast ravi lõppu. Food Chem. Toksikool. 2021, 152, 112164. [CrossRef]
32. Narkootikumide hindamise ja uurimise keskus (FDA). Bioanalüütilise meetodi valideerimise juhend tööstusele. 2018. Veebis saadaval: https://www.fda.gov/files/drugs/published/Bioanalytical-Method-Validation-Guidance-for-Industry.pdf (juurdepääs 20. novembril 2019).
33. Euroopa Komisjon. Komisjoni 12. augusti 2002. aasta otsus, millega rakendatakse nõukogu direktiivi 96/23/EÜ analüüsimeetodite toimimise ja tulemuste tõlgendamise kohta (2002/657/EÜ). Väljas. J. Eur. Kogukonnad 2002, 221, 8–36.
34. EFSA. Vasakpoolse tsenseeritud andmete haldamine keemiliste ainete toiduga kokkupuute hindamisel. EFSA J. 2010, 8, 1–96.
35. Arce-López, B.; Lizarraga, E.; Irigoyen, Á.; González-Peñas, E. 19 mükotoksiini esinemine inimese plasmas ühes Põhja-Hispaania piirkonnas. Toksiinid (Basel) 2020, 12, 750. [CrossRef]
36. Arce-López, B.; Lizarraga, E.; Flores-Flores, M.; Irigoyen, Á.; González-Peñas, E. Captiva EMR-lipiidide puhastamisel ja LC-MS/MS analüüsil põhineva metoodika väljatöötamine ja valideerimine inimese plasma mükotoksiinide samaaegseks määramiseks. Talanta 2020, 206, 120193. [CrossRef]
37. Remiro, R.; González-Peñas, E.; Lizarraga, E.; López de Cerain, A. Ohratoksiin A ja viie analoogi kvantifitseerimine Navarra punastes veinides. Toidukontroll 2012, 27, 139–145. [CrossRef]
38. Yang, S.; Zhang, H.; De Saeger, S.; De Boevre, M.; Sun, F.; Zhang, S.; Cao, X.; Wang, Z. Ohratoksiin A in vitro ja in vivo metabolism: võrdlev uuring, milles kasutati ülijõudlusega vedelikkromatograafia-kvadrupooli/lennuaja hübriidmassispektromeetriat. Anal. Bioanal. Chem. 2015, 407, 3579–3589. [CrossRef] [PubMed]
39. Muñoz, K.; Cramer, B.; Dopstadt, J.; Humpf, HU; Degen, GH Tõendid ohratoksiin A konjugaatide olemasolust imikute ja täiskasvanute uriiniproovides. Mycotoxin Res. 2017, 33, 39–47. [CrossRef] [PubMed]
40. Vidal, A.; Mengelers, M.; Yang, S.; De Saeger, S.; De Boevre, M. Mükotoksiinidega kokkupuute biomarkerid: põhjalik ülevaade. Compr. Rev. Food Sci. Toit Saf. 2018, 17, 1127–1155. [CrossRef]
41. EFSA CONTAM Panel (EFSA Panel on Contaminants in the Food Chain); Schrenk, D.; Bodin, L.; Chipman, JK; del Mazo, J.; Grasl-Kraupp, B.; Hogstrand, C.; Hoogenboom, L.; Leblanc, J.; Nebbia, CS; et al. Ohratoksiin A riski hindamine toidus. EFSA J. 2020, 18, 06113.
42. Arce-López, B.; Lizarraga, E.; Vettorazzi, A.; González-Peñas, E. Mükotoksiinide biomonitooring veres, plasmas ja seerumis viimastel aastatel: ülevaade. Toksiinid (Basel) 2020, 12, 147. [CrossRef]
Beatriz Arce-López 1 , Lydia Alvarez-Erviti 2 , Barbara De Santis 3 , María Izco 2 , Silvia López-Calvo 4 , Maria Eugenia Marzo-Sola 4 , Francesca Debegnach 3 , Elena Lizarraga 1 , Adelain López de6a Elena González-Peñas 1,† ja Ariane Vettorazzi 5,6,* ,†
1 Farmaatsiatehnoloogia ja keemia osakond, uurimisrühm MITOX, Farmaatsia ja toitumise kool, Universidad de Navarra, 31008 Pamplona, Hispaania; barce@alumni.unav.es (BA-L.); elizarraga@unav.es (EL); mgpenas@unav.es (EG-P.)
2 Molekulaarse neurobioloogia labor, La Rioja biomeditsiiniliste uuringute keskus (CIBIR), Piqueras 98, 3rd Floor, 26006 Logroño, Hispaania; laerviti@riojasalud.es (LA-E.); mizco@riojasalud.es (MI)
3 Riiklik mükotoksiinide ja taimetoksiinide referentlabor, Istituto Superiore di Sanità, 00161 Roma, Itaalia; barbara.desantis@iss.it (BDS); francesca.debegnach@iss.it (FD)
4 Servicio de Neurología, Hospital San Pedro, Piqueras 98, 26006 Logroño, Hispaania; slcalvo@riojasalud.es (SL-C.); memarzo@riojasalud.es (MEM-S.)
5 Department of Pharmacology and Toxicology, Research Group MITOX, School of Pharmacy and Nutrition, Universidad de Navarra, 31008 Pamplona, Spain; acerain@unav.es 6 IdiSNA, Navarra Institute for Health Research, 31008 Pamplona, Spain
