Thymelaea Hirsuta kasulik mõju pankrease saarekeste degeneratsioonile, neerufibroosile ja maksakahjustustele

Sanae Abid, Hassane Mekhfifi, Abderrahim Ziyyat, Abdekhaleq Legssyer, Mohammed Aziz ja Mohamed Bnouham

Bioressursside, biotehnoloogia, etnofarmakoloogia ja tervise labor, loodusteaduskonna bioloogia osakond,

Ülikool Mohamed Ist, Bd: Mohamed VI, BP: 717, Oujda 60000, Maroko

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Eesmärk. Marokos on lisaks ymelaea hirsute (T. hirsute) (Thymelaeacea) ravimtaim, mida kasutatakse laialdaselt diabeedi raviks ja ennetamiseks. Käesoleva uuringu eesmärk oli hinnata Th vesiekstrakti (AqTh) ja etüülatsetaadi fraktsiooni (EaTh) keskmise tähtajaga diabeedivastast toimet ning uurida nende oletatavat kaitsvat toimet pankrease saarekeste degeneratsioonile, diabeetilisele nefropaatiale ja maksakahjustusele streptozototsiini (STZ) korral. -diabeediga rotid. meetodid. Katseline diabeet rottidel kutsuti esile ühekordse intraperitoneaalse süstiga 50 mg/kg STZ-i. Raviperioodi jooksul (4 nädalat) manustati STZ-diabeediga rottidele suukaudselt iga päev 200 mg/kg AqTh ja 50 mg/kg EaTh. Uuriti parameetrite rühma, sealhulgas tühja kõhu veresuhkru taset, biokeemilisi parameetreid ja soolestiku glükosidaasi inhibeerimist. Lisaks on kõhunäärme histoloogiline uuring,neerudSamuti realiseeriti , maks ja aordi. Tulemused. Ravi lõpus normaliseerisid nii AqTh kui ka EaTh tühja kõhu veresuhkru vastavalt 1,08 ja 1,25 g/l. AqTh on vähendanud ka uriini kreatiniini ja HbAc1 taset. EaTh näitas inhibeerivat toimet soolestiku glükosidaasi suhtes, samas kui AqTh-l seda inhibeerivat toimet ei olnud. Lisaks näitas pankrease hematoksüliini ja eosiini värvimine, et AqTh või EaTh takistab pankrease saarekeste rakkude degeneratsiooni. Nagu samaneerud, Massoni trikroomvärvimine on näidanud olulist ennetamistneeru-fibroos AqTh- või EaTh-ga ravitud diabeetilistel rottidel. Teisest küljest näitas maksa hematoksüliini ja eosiini värvimine, et AqTh ja EaTh hoiavad ära maksakahjustuse. Järeldus. Me järeldame, et AqTh ja EaTh keskmise tähtajaga manustamine avaldab STZ-diabeediga rottidel märkimisväärset antihüperglükeemilist toimet, mis võib olla tingitud soolestiku glükosidaasi inhibeerimisest ja kaitsest pankrease saarekeste rakkude kahjustuste eest. Lisaks takistab AqTh ja EaTh ravi STZ-diabeediga rottidel nefropaatiat ja maksa tüsistusi.

Cistanche herbasaab ravidaneerufibroos

Sissejuhatus

Suhkurtõbi on kõige levinum endokriinne haigus. Selle haiguse esinemissagedus suureneb murettekitava kiirusega (4-5 protsenti) [1]. Ravimata või kontrollimata mitteinsuliinsõltuv 2. tüüpi diabeet (DM2) võib põhjustada mitmeid tüsistusi, nagu südame-veresoonkonna haigused ja diabeetiline nefropaatia, ning see võib viia insuliinsõltuva 1. tüüpi diabeedi (DM1) tekkeni.

Diabeetiline nefropaatia on üks olulisemaid diabeedi tüsistusi ja see on lõppstaadiumiga patsientide arvu suurenemise peamine põhjus.neeru-haigus (ESRD) [2], mis nõuavadneeruddialüüs või aneerudsiirdamine, et patsient elaks.

Seetõttu on diabeedi ravi muutumas väga oluliseks, et vältida selle tõsiseid metaboolseid tagajärgi, nagu nefropaatia.

Tänapäeval hõlmab diabeedi ravi toitumise kontrollimist, liikumist, insuliini ja/või hüpoglükeemiliste ravimite kasutamist ning ka ravimtaimede kasutamist täiendava alternatiivmeditsiinina. Mitmed ravimtaimed on näidanud üliolulist antihüperglükeemilist toimet minimaalsete kõrvalmõjudega [3–5]. Sel põhjusel on Maailma Terviseorganisatsioon (WHO) pööranud suurt tähelepanu traditsiooniliste ja looduslike ravimite ratsionaalsele kasutamisele diabeedi ravis [6].

Marokos kasutatakse diabeedi raviks ja ennetamiseks üle 100 ravimtaime [7–10]. Paljude nende taimede ekstraktide ja toodete (Ammi visnaga Lam., Globularia alum, Nigella sativa ja Olea europaea var.) antihüperglükeemiline ja diabeedivastane toime on kinnitatud[9].

T. hirsuta on ravimtaim, mida traditsiooniliselt kasutatakse Maroko kirdeosas diabeedi ennetamiseks ja raviks [8]. Varasemad farmakoloogilised uuringud on näidanud AqTh ja EaTh ägedat antihüperglükeemilist toimet [11–13]. Nende kahe T. hirsuta ekstrakti keskmise tähtajaga diabeedivastast toimet pole aga veel kindlaks tehtud. Seetõttu on käesoleva uuringu eesmärk esmakordselt hinnata AqTh ja EaTh keskpika perioodi diabeedivastast toimet ning uurida nende oletatavat kaitsvat toimet pankrease saarekeste degeneratsioonile, diabeetilisele nefropaatiale, maksa steatoosile ja aordi tüsistustele STZ-s. indutseeritud diabeetilised rotid.

2. Materjalid ja meetodid

2.1.Kemikaalid ja reaktiivid.

Glucose Autokit osteti ettevõttest BioSystems (Hispaania). STZ osteti firmalt Sigma Aldrich (Hiina). Akarboos (Glucor 50) saadi firmast Bayer Schering Pharma (Casablanca, Maroko). Sahharoos osteti firmalt Prolabo (rühm Rhone-Poulenc) (EMÜ). Pentobarbitaal saadi firmalt CEVA Sante Animale (LaBallasti`ere). Anthrone (C14H10O) osteti Organicsilt. Parafifiinvaha osteti firmalt FlukaChemika (Šveits). Eosiin (C20H6Br4Na2O5) saadi firmalt Riedel-de Haen (Seelze) ja hematoksüliin firmalt BDH Chemicals Ltd. (Poole England). Fuksiinhape osteti ettevõttelt Acros Organics (NewJersey, USA), fosfomolübdeenhape ettevõttelt Sigma-Aldrich (PF, Steinheim) ja heleroheline osteti ettevõttelt Sigma-Aldrich (MO, USA).

2.2. Loomad.

Mõlemast soost Wistar rotid, kes kaalusid algselt 150–250 g (8-9 nädalat), saadi loodusteaduskonna bioloogiaosakonna loomamajast (Oujda, Maroko). Uuring viidi läbi laboriloomade hooldamise põhimõtete järgi [14]. Neid hoiti standardsetes laboritingimustes (valguse/pimeduse tsükkel 12/12 tundi ja temperatuur 23 pluss 2 kraadi, 3 rotti puuri kohta ning juurdepääs toidule ja veele. Uriini kogumiseks ning vee- ja toidutarbimise määramiseks hoiti rotte metaboolsed puurid.

2.3. Diabeedi esilekutsumine.

Pärast 14-tunnist tühja kõhuga süstimist süstiti rottidele intraperitoneaalselt ühekordne annus STZ-d (50 mg/kg kehamassi kohta), mis oli valmistatud värskes ja külmas naatriumtsitraatpuhvris (0,1 M sidrunhape ja 0,1 M trinaatriumtsitraatdihüdraati) PH 4,5 juures, et esile kutsuda diabeet [15]. 1 nädala pärast loeti rotid, kelle tühja kõhu veresuhkru vahemik oli 1,26–2 g/l, II tüüpi diabeetikuteks ja nad kaasati uuringusse.

2.4. Taimeproovi ettevalmistamine.

T. hirsuta osteti Oujda (Ida-Maroko) traditsiooniliselt turult ja selle autentimist kinnitas bioloogiaosakonna botaanik (Oujda, Maroko teaduskond) ning vautšeri näidis (HUMPOM137) anti hoiule Herbarium University Mohamed Premier of Oujda, Maroko (HUMPO).

T. hirsuta õhust osad puhastati ja pesti esmalt veega ning seejärel kuivatati 40 kraadi juures öö läbi ahjus. AqTh valmistamiseks infundeeriti 140 g T. hirsuta õhust osasid 2 l destilleeritud vees 3 tundi. AqTh saagis oli 4,53 protsenti. EaTh valmistati nii, nagu on kirjeldatud meie eelmises uuringus [13].

2.5. Eksperimentaalne disain.

Rotid jagati juhuslikult viide rühma (5 või 6 rotti rühmas): normaalsed kontrollrotid (manustatud ainult destilleeritud veega), diabeetilised kontrollrotid (manustatud ainult destilleeritud veega), diabeetilised rotid, kellele manustati 10 mg /kg BW akarboosi (standardne hüpoglükeemiline ravim), diabeetilised rotid, keda raviti 50 mg/kg EaTh-ga, ja diabeetilised rotid, keda raviti 200 mg/kg AqTh-ga. Optimaalsed annused määrati meie varasemate uuringute [13] ja esialgsete testide põhjal. Kõiki rotte raviti üks kord päevas 4 nädala jooksul. Kehakaal registreeriti iga päev. Enne ja pärast ravi jälgiti vee ja toidu tarbimist ning uriini kogust ning ravi lõpus on mõõdetud glükosuuriat. Tühja kõhu veresuhkru taset uuriti enne ravi (nädal 0) ja pärast 1, 2, 3 ja 4 nädalat kestnud ravi. -glükosidaasi inhibeerimist in vivo uuriti päev enne rottide surmamist. Pärast 4-nädalast ravi tuimastati kõik loomad 50 mg/kg pentobarbitaaliga pärast 14-tunnist tühja kõhuga. Seejärel koguti veri südame punktsiooniga ja tsentrifuugiti kohe 10 minutit kiirusel 3000 ring/min. *e seerumit hoiti seejärel –20 kraadi juures kuni biokeemilise analüüsini (üldkolesterool ja triglütseriidid). Theneerud, maks, aort, süda ja pankreas eemaldati, kaaluti (neerudmaks ja süda) ning seejärel fikseeritud (neer, maks, aort ja pankreas) 10% formaliinis histoloogilise uuringu jaoks. Maksaproovi säilitati glükogeenisisalduse määramiseks temperatuuril –20 kraadi.

tsistachejaoksneerufunktsioon

2.6. Tühja kõhu veresuhkru hindamine.

Raviperioodi jooksul kvantifitseeriti tühja kõhu glükeemia kord nädalas. Pärast 14-tunnist paastumist eemaldati sabaveenidest veri mikrokapillaare kasutades kerge eetri tuimestuse all. Seejärel tsentrifuugiti seda 5000 × g juures 10 minutit ja seerumis hinnati glükeemiat, kasutades kaubanduslikku glükoosikomplekti (BioSystems, Hispaania), mis põhines glükoosoksüdaasi peroksidaasi meetodil [16].

2.7. - glükosidaasi inhibeerimine, in vivo uuring.

Päev enne ohverdamist kasutati 14 tunni jooksul toiduta jäänud rotte, et jälgida glükosidaasi inhibeerimist in vivo. 30 min enne suukaudset sahharoosikoormust (2 g/kg) manustati igale rühmale ravile vastav annus. Veri koguti saba veenist, kasutades mikrokapillaare, vahetult enne testannuse manustamist (-30 min), vahetult enne sahharoosikoormust (0 min) ja 30, 60 ja 120 minutit pärast sahharoosi lisamist. Pärast tsentrifuugimist kiirusel 5000 × g/10 min määrati plasma glükoosisisaldus glükoosoksüdaasi peroksidaasi meetodil [17].

2.8. Maksa glükogeeni ekstraheerimine ja määramine.

Glükogeeni ekstraheerimiseks kasutati kõigi rühmade kaalutud maksakudede proove ({0}},3–0,5 g) vastavalt Ongile ja Khoole[18]. Maksaproovid purustati esmalt, homogeniseeriti 2 ml 30% kaaliumhüdroksiidiga (KOH) ja keedeti 100 kraadi juures 30 min. Seejärel töödeldi segu glükogeeni sadestamiseks kaks korda 4 ml 95% etanooliga ja iga kord hoiti segu temperatuuril 4 kraadi /30 min. Pärast tsentrifuugimist kiirusega 3000 tiiru/min/15 min, pesti pelletit 8 ml 95% etanooliga ja seejärel tsentrifuugiti kiirusel 3000 ringi/min/15 min. Saadud glükogeen lahustati 1 ml destilleeritud vees. Glükogeeni kontsentratsiooni jälgiti anthrone reagendiga. Optiline tihedus loeti 625 nm juures.

2.9. Biokeemilised analüüsid.

Glükosuuriat mõõdeti kaubandusliku Autokitiga (BioSystems, Hispaania), mis põhines glükoosoksüdaasi peroksidaasi meetodil. Glükosüülitud hemoglobiini (HbA1c) määramiseks kasutati kaubanduslikku komplekti (Cal-tech diagnostika, INC, USA) ja kolesterooli määramiseks kasutati kaubanduslikke analüüsikomplekte (SGM-Italia, Roma, Itaalia). Triglütseriidide ja uriini kreatiniini määramiseks kasutati kaubanduslikke analüüsikomplekte (Bio Sud Diagnostic SRL, Ricerca, Itaalia).

2.10. Histopatoloogia.

Pärast 3 ± 1-päevast fikseerimisperioodi 10-protsendilises formaliinis on kõhunääre,neerud, maksa ja aordi kudesid pesti destilleeritud veega 20 minutit. Seejärel dehüdreeriti neid suureneva etanoolisisaldusega (vastavalt 30 protsenti 30 minutit, 70 protsenti 30 minutit, 95 protsenti 30 minutit ja 2 × 100 protsenti 60 minutit). Pärast valgustusetappi tolueenis (2 × 120 min) lisati elundid 90 minutiks parafintolueeni (1 V / 1 V) seguga, seejärel parafiiniga (2 × 120 min). Lõpuks sisestati elundid enne 7 μm juures lõikamist parafiini (mikrotoom Leitz 1512). Pankrease ja maksa lõigud värviti hematoksüliini ja eosiiniga.Neerja aordi lõigud värviti Massoni trikroomiga, et näidata fifibroosi/kollageeni.

Enne hematoksüliini ja eosiiniga värvimist lõigud deparafineeriti ja inkubeeriti tolueenis (2 × 5 minutit), seejärel hüdreeriti, vähendades etanoolisisaldust (vastavalt 100%, 95% ja 70%) 5 minutit. Seejärel värviti hematoksüliini ja eosiiniga värvimiseks pärast 20-minutilist pesemist raku tuumad hematoksüliiniga sukeldatud 5 minutiks, millele järgnes 15-minutiline pesemine veega. Tsütoplasma värvimiseks kasteti lõigud 5 minutiks 1-protsendilisse eosiini, seejärel pesti 2 minutiks. Pärast värvimist dehüdreeriti lõigud 100% etanooliga (2 × 1/2 min) ja tolueeniga (2 × 2 min). Massoni trikroomvärvimine pärast niisutamist,neerudja aordi lõigud fikseeriti uuesti Bouini lahuses 1 tund/56 kraadi. Seejärel värviti lõigud pärast 10-minutilist pesemist Weigerti raudhematoksüliinis 2 minutit. Pärast 10-minutilist loputamist kasteti lõigud 3 minutiks fukssiinhappesse ja pärast 10-minutilist pesemist diferentseeriti neid 15 minutiks fosfomolübdeenhape. Kollageeni värvimiseks viidi lõigud 15 minutiks otse heleroheliseks. Pärast 2-minutilist diferentseerumist 1-protsendilises äädikhappes dehüdreeriti sektsioone 95-protsendilise ja 100-protsendilise etanooliga 1 minut ja seejärel puhastati tolueenis (2 × 1 min) [19–21].

Lõpuks paigaldati lamellidele värvitud lõigud ülimalt tähtsaks. Pärast kuivatamist tehti mikroskoopiline vaatlus, kasutades OlympusTokyo (Jaapan) valgusmikroskoobi 40x objektiivset silmasüsteemi.

Et määrata ravimi mõju pankrease kudedele, arvutati pankrease saarekeste rakkude arv ja läbimõõt. Kollageeni koguse määramiseksneerudlõikudes hinnati tulemusi nullist kolmeni (0: kollageeni puudumine, 1: nõrk kollageen, 2: mõõdukas kollageen ja 3: tugev kollageen) [22]. Ravi mõju aordile hinnati aordi läbimõõdu mõõtmisega ja maksakahjustusi selgitati lipiidipiiskade tekkega.

2.11. Statistiline analüüs.

Kõik väärtused väljendati kui keskmine ± SEM. Statistiline analüüs ja keskmiste võrdlemine viidi läbi paaristamata Studenti testiga, et võrrelda kahe rühma keskmisi, ja paaris Studenti testiga, et võrrelda kahte sama rühma keskmist. Et määrata ravimi kaitsvat toimetneerudja maksa, kasutati hii-ruut testi. p väärtused<0.05 were="" considered="">

3. Tulemused

3.1. Narkootikumide ravi mõju tühja kõhu veresuhkru tasemele STZ-s

Indutseeritud diabeetilised rotid. Ravimata diabeediga kontrollrottidel täheldati normaalsete kontrollrottidega võrreldes olulist tühja kõhu veresuhkru tõusu. Ravi 200 mg/kg AqTh-ga vähendas vere glükoosisisaldust alates 1. manustamisnädalast ja see mõju oli märkimisväärne 3. (p < 0,001)="" ja="" 4.="" nädalal="" (p="">< 0,05)="" võrreldes="" ravimata="" diabeetikutega="" rottidega.="" ravi="" 50="" mg/kg="" eath-ga="" vähendas="" hüperglükeemiat="" alates="" 2.="" nädalast="" ja="" see="" toime="" oli="" märkimisväärne="" (p="">< 0,05)="" 3.="" ja="" 4.="" nädalal.="" 2.,="" 3.="" ja="" 4.="" nädalal="" oli="" ea*="" toime="" statistiliselt="" sarnane="" 10="" mg/kg="" akarboosi="" toimega="" (joonis="">

3.2. Ravimite mõju glükosidaasi aktiivsusele, in vivo uuring.

Normaalsetel kontrollrottidel tõusis veresuhkru tase pärast sahharoosi lisamist 1,48 g/l,3{11}} minutini ja taastus normaalsele väärtusele 120 minuti pärast, samas kui ravimata diabeetilistel rottidel oli glükeemia. suurendati 2,76 g/l-ni 30-minutise sahharoosi laadimise juures, et saavutada 2,85 g/l 120 minuti pärast. 50 mg/kg EaTh on oluliselt (p < 0,05)="" hoidnud="" ära="" sahharoosi="" laadimisest="" põhjustatud="" hüperglükeemia="" 30.="" ja="" 60.="" minutil="" võrreldes="" ravimata="" diabeetiliste="" rottidega.="" 200="" mg/kg="" aqth="" rühmas="" ilmnes="" antihüperglükeemiline="" toime.="" vere="" glükoosisisaldus="" jõudis="" 30="" ja="" 60="" minutiga="" vastavalt="" 2,63="" g/l="" ja="" 2,70="" g/l="" ning="" 120="" minuti="" pärast="" langes="" see="" 2,21="" g/l-ni.="" 10="" mg/kg="" akarboos="" on="" märkimisväärselt="" (p="">< 0,01)="" hoidnud="" ära="" sahharoosi="" laadimisest="" põhjustatud="" hüperglükeemia="" 30.,="" 60.="" ja="" 120.="" minutil="" võrreldes="" diabeedikontrolliga.="" akarboosi="" toime="" oli="" statistiliselt="" sarnane="" eaththeffffectiga="" (joonis="">

3.3. Ravimi toime

Kehakaalu, toidu ja veetarbimise ravi. Ravimata diabeetikutega rottide kehamassi suurenemine vähenes oluliselt (p < {0}}.05)="" võrreldes="" tavaliste="" rottidega.="" aqth="" on="" märkimisväärselt="" (p="">< 0.05)="" hoidnud="" ära="" kehakaalu="" languse="" võrreldes="" ravimata="" diabeetikutega="" rottidega.="" eath-="" ja="" akarboosiga="" ravitud="" rotid="" ei="" muutnud="" oluliselt="" (p=""> 0.05) kehakaalu tõusu võrreldes ravimata diabeetikutega rottidega. Ravi lõpus ei muutunud vee tarbimine ravimata diabeetilistel rottidel, AqTh, EaTh ja akarboosi rühmas võrreldes andmetega enne ravi, samas kui toidutarbimine suurenes märkimisväärselt diabeetilistel rottidel ning AqTh-, EaTh- ja akarboosiga ravitud rottidel. (vastavalt p < 0,05,="" p="">< 0,05,="" p="">< 0,05,="" a="" dp="">< 0,01)="" võrreldes="" enne="" ravimi="" manustamist="" (tabel="">

3.4. Narkootikumide ravi mõju kuseteede parameetritele.

Pärast {{0}}nädalast raviperioodi suurenesid ravimata diabeediga rottidel uriini kreatiniini ja glükosuuria sisaldus märkimisväärselt (p < 0.05="" ja="" p="">< 0,001)="" võrreldes="" normaalsed="" rotid.="" aqth="" suukaudne="" manustamine="" vähendas="" oluliselt="" (p="">< 0,05)="" uriini="" kreatiniinisisaldust="" võrreldes="" ravimata="" diabeetiliste="" rottidega,="" kuid="" glükosuurias="" ei="" ole="" täheldatud="" olulist="" erinevust="" võrreldes="" ravimata="" diabeetiliste="" rottidega.="" eath-ravi="" on="" tavaliste="" rottidega="" võrreldes="" takistanud="" uriini="" kreatiniinisisalduse="" suurenemist;="" eath="" aga="" glükosuuriat="" oluliselt="" ei="" muutnud.="" teisest="" küljest="" oli="" aqth="" ja="" eath="" mõju="" uriini="" kreatiniinile="" ja="" glükosuuriale="" statistiliselt="" sarnane="" 10="" mg/kg="" akarboosi="" omaga.="" lõpuks="" ei="" olnud="" uriini="" mahus="" olulist="" erinevust,="" kui="" võrrelda="" andmeid="" enne="" ja="" pärast="" ravi="" aqth,="" eath="" või="" akarboosiga="" (tabel="">

3.5. Narkootikumide ravi mõju biokeemilistele parameetritele.

Pärast {{0}}nädalast raviperioodi tõusis HbA1c märkimisväärselt (p < 0,05)="" ravimata="" diabeediga="" rottidel,="" võrreldes="" tavaliste="" rottidega.="" aqth="" suukaudne="" manustamine="" on="" tavaliste="" rottidega="" võrreldes="" hoidnud="" ära="" hba1c="" tõusu.="" raviperioodi="" lõpus="" vähenes="" maksa="" glükogeeni="" kogus="" märkimisväärselt="" (p="">< 0,05)="" ravimata="" diabeetilistel="" rottidel="" võrreldes="" normaalsete="" rottidega.="" ravi="" aq*="" ja="" ea*="" ei="" ole="" näidanud="" olulist="" mõju="" maksa="" glükogeenile="" võrreldes="" ravimata="" diabeetikutega="" rottidega,="" samas="" kui="" akarboosravi="" ei="" muutnud="" maksa="" glükogeeni="" kogust="" võrreldes="" normaalsete="" rottidega.="" lõpuks="" näitavad="" üldkolesterooli="" ja="" triglütseriidide="" tulemused,="" et="" pärast="" aqth-,="" eath-="" või="" akarboosravi="" ei="" toimu="" olulisi="" muutusi="" võrreldes="" normaalsete="" ja="" diabeetiliste="" rottidega="" (tabel="">

3.6. Narkootikumide ravi mõju elundi kaalule.

Tabel 4 näitab maksa,neerudja südame kaal raviperioodi lõpus. Tulemused näitavad sedaneerudravimata diabeetikutel rottidel suurenes kaal märkimisväärselt võrreldes tavaliste rottidega. Ravi 200 mg/kg AqTh või 50 mg/kg EaTh-ga ei muutnud maksa, neerude ja südame massi võrreldes ravimata diabeetikutega rottidega, samas kui akarboosiga ravitud rottidel on maksa ja südame kaal oluliselt tõusnud võrreldes ravimata diabeetiliste rottidega. .

3.7. Histopatoloogiline vaatlus

3.7.1. Pankrease muutused.

Normaalsete rottide pankrease saarekeste rakkude valgusmikroskoopiline vaatlus näitab normaalset histoloogilist välimust suure läbimõõdu ja suure granulatsioonitihedusega (joonis 3). Ravimata diabeediga rottidel vähenes oluliselt läbimõõt ja saarekeste rakkude arv (p < 0.001="" ja="" p="">< 0.01,="" vastavalt="" )="" täheldati.="" ravi="" 200="" mg/kg="" aqth-ga="" on="" märkimisväärselt="" takistanud="" langerhansi="" saarekeste="" läbimõõdu="" ja="" rakkude="" arvu="" vähenemist="" (vastavalt="" p="">< 0,01="" ja="" p="">< 0,05).="" samal="" ajal="" on="" 50="" mg/kg="" eath-l="" märkimisväärselt="" (p="">< 0,05)="" kaitstud="" läbimõõt="" ja="" rakkude="" arv="" vähenemise="" eest.="" ravi="" 10="" mg/kg="" akarboosiga="" on="" märkimisväärselt="" (p="">< 0,05)="" takistanud="" saarekeste="" rakkude="" arvu="">

3.7.2. Neerude muutused.

Massoni värvimisjäljed sinistes/rohelistes kollageenkiududes, pruunides tuumades, punaste lihaskiudude tsütoplasmas ja oranžides vererakkudes. Normaalses rühmas täheldati minimaalset tubulointerstitsiaalset kollageeni (joonis 4). Ravimata diabeediga rottidel tuvastati tubulointerstitsiaalse kollageeni oluline suurenemine (p < 0.01).="" ravi="" annusega="" 20{{10}}="" mg/kg="" aqth="" ja="" 50="" mg/kg="" eath="" on="" oluliselt="" (vastavalt="" p="">< 0,001="" ja="" p="">< 0,05)="" takistanud="" tubulointerstitsiaalset="" kollageeni="" tootmist="" võrreldes="" ravimata="" diabeetikutega="" rottidega,="" kuid="" 10="" mg/kg="" akarboosiravi="" ei="" muutnud="" oluliselt="" (p=""> 0,05) tubulointerstitsiaalset kollageeni. Teisest küljest täheldati glomerulite kollageeni 33,3 protsendil normaalsetest rottidest. Diabeediga rottidel tuvastati glomerulite kollageen kõigil rottidel (100 protsenti). Ravi 200 mg/kg AqTh-ga on vähendanud oluliselt (p < 0,05)="" glomerulite="" kollageeni="" 40="" protsendini,="" kuid="" ea*="" ja="" akarboos="" mitte="" (joonis="">

3.7.3. Maksa muutused.

Hematoksüliini ja eosiiniga värvitud lõikude uurimine näitas, et normaalsetel rottidel oli normaalne histoloogiline välimus. Ravimata diabeediga rottidel täheldati maksakoes olulist degeneratiivset muutust. Lipiidipiisad ilmnesid kõigil rottidel (100 protsenti). Ravi 200 mg/kg AqTh ja 50 mg/kg EaTh-ga on seda toimet märgatavalt (p < 0,05)="" nõrgendanud.="" kaitseprotsent="" oli="" vastavalt="" 60="" ja="" 50="" protsenti.="" 10="" mg/kg="" akarboosravi="" aga="" seda="" maksakahjustust="" ei="" nõrgendanud="" (joonis="">

3.7.4. Aordi muutused.

Valgusmikroskoopiline vaatlus näitab, et ravimata diabeetilistel rottidel oli normaalsete rottidega võrreldes normaalne aordi läbimõõt. Ravi 200 mg/kg AqTh, 50 mg/kg EaTh või 10 mg/kg akarboosiga ei muutnud oluliselt aordi läbimõõtu võrreldes normaalsete ja diabeetiliste rottidega (joonis 6).

4. Arutelu

Selles uuringus demonstreerisime esimest korda T. hirsuta keskmise tähtajaga (4 nädalat) manustamise diabeedivastast toimet ja selle ennetamist.neeru-ja maksa tüsistused STZ-indutseeritud diabeetilistel rottidel.

Meie tulemused näitasid, et keskmise tähtajaga ravi 200 mg/kg AqTh või 50 mg/kg EaTh-ga vähendab STZ-ga ravitud diabeetiliste rottide veresuhkru taset märkimisväärselt tühja kõhuga võrreldes STZ-ga ravimata diabeetiliste rottidega. EaTh on näidanud sarnast glükosidaasi inhibeerivat aktiivsust võrreldes 10 mg/kg akarboosiga, kuid AqTh ei ole pärast sahharoosi laadimist inhibeerinud glükosidaasi aktiivsust. Need tulemused näitavad, et Ea* keskmise tähtajaga antihüperglükeemiline toime on seotud soolestiku glükosidaasi inhibeerimisega. Seega kinnitab see leid meie varasemaid tulemusi [13], samas kui Aq* diabeedivastane toime näib olevat seotud muu mehhanismiga kui -glükosidaasi rada. Lisaks oleme täheldanud HbAc1 taseme langust Aq*-ga ravitud diabeetilistel rottidel, samas kui Ea*-ravi ei muutnud HbAc1 taset võrreldes ravimata diabeetiliste rottidega. See selgitab, miks -glükosidaasi inhibiitoreid määratakse diabeedi ravis sageli koos teiste diabeedivastaste ravimitega.

Kõhunäärme sektsioonide histopatoloogiline uuring näitas, et AqTh ja EaTh manustamine 4 nädala jooksul suurendab märkimisväärselt Langerhansi saarekeste läbimõõtu ja rakkude arvu. Sarnased uuringud on tõestanud, et paljud taimeekstraktid taastasid märkimisväärselt saarekeste läbimõõdu ja rakkude arvu diabeetilistel rottidel [23–25].

Järelikult võib AqTh usutav toimemehhanism vere glükoositaseme kontrollimisel olla insuliini sekretsiooni suurendamine pankrease rakkudest. Nagu ka teiste võimalike mehhanismide puhul, võib AqTh sensibiliseerida insuliiniretseptorit insuliini suhtes või stimuleerida STZ-indutseeritud diabeetiliste rottide kõhunäärme Langerhansi saarekeste tüvirakke [25].

Seetõttu järeldame, et AqTh-s esinevad antihüperglükeemilised fütokeemilised ühendid erinevad EaTh-i omadest.

Paljud uuringud on tõestanud, et sekundaarsetel metaboliitidel, nagu flavonoidid, tanniinid ja terpenoidid, on potentsiaalne inhibeeriv toime alfa-glükosidaasile [26–28]. Meie töörühma eelmises uuringus näitas T. hirsutahase polüfenoolirikas fraktsioon tugevat diabeedivastast toimet diabeetilistel rottidel[29]. Seega on EaTh glükosidaasi inhibeeriv toime tõenäoliselt tingitud flavonoidide olemasolust.

On hästi teada, et diabeet on seotud makro- ja mikrovaskulaarsete tüsistustega, nagu nefropaatia. Statistika näitas, et 2001. aastal moodustas kõigist dialüüsipatsientidest diabeetikuid 20,6 protsenti, 1995. aastal 13,1 protsenti ja 1989. aastal 6,9 protsenti. Dialüüsi saavate patsientide suremus on diabeetikutel märkimisväärselt kõrgem kui mittediabeetikutel (241,4/1000 vs. 91030/91000). inimaastates) [30]. Dialüüsi alustava II tüüpi diabeedi keskmine elulemus on ligikaudu 3 aastat [31, 32]. Diabeetilisele nefropaatiale on iseloomulik teatud valkude, näiteks kollageeni akumuleerumine glomerulaarmesangiumis ja tubulointerstitsiaalses ruumis, mis põhjustabneeru-fibroos ja nii edasineeru-ebaõnnestumine [33–35]. Selles uuringus näitasime, et 200 mg/kg AqTh või 50 mg/kg EaTh keskmise aja jooksul suukaudne manustamine hoiab ära uriini kreatiniini ja tubulointerstitsiaalse neerukollageeni suurenemise, võrreldes ravimata diabeetikutega rottidega, nagu on näidatudneerudhistopatoloogilised tulemused. Need leiud näitavad, et AqTh ja EaTh võivad rakuvälise maatriksi (ECM) valgu akumulatsiooni pärssimise kaudu kaitsta neerufibroosi eest. Need tulemused on sarnased teiste etnofarmakoloogiliste uuringutega, mis näitasid, et küüslauk ja sklerocaryabirrea leevendavad diabeetilise nefropaatia neerufibroosi protsessi [36, 37]. Kaitsev toime neerude ECM-i valkude akumuleerumise vastu tuleneb rapamütsiini (PKB/mTOR) signaaliraja proteiinkinaasi B/imetaja sihtmärgi pärssimisest [38]. Hiljutised uuringud on näidanud, et PKB aktiveerimine põhjustab mTORC1 ja selle allavoolu valgu p70S6K aktivatsiooni, mis on rakkude kasvu, rakkude proliferatsiooni ja valgusünteesi kriitilised regulaatorid [39, 40].

Mõjucistancheparandadaneerufunktsioon

Järelikult võib suhkurtõve ravil AqTh ja EaTh ühenditega olla kasulik mõjuneeru-funktsioon diabeediga patsientidel

Tõendid näitavad, et diabeetilistel rottidel täheldati antioksüdantsete ensüümide aktiivsuse keerulisi muutusi [41]. See muutus põhjustab koekahjustusi ja mängib olulist rolli diabeedi tüsistuste patogeneesis. Käesolevas uuringus näitavad maksa histopatoloogilised tulemused, et ravimata diabeetilistel rottidel areneb maksa steatoos, mida iseloomustavad lipiiditilgad. Teised uuringud näitasid, et STZ-indutseeritud diabeetiliste rottide maks oli nekrotiseerunud [42]. STZ-d peetakse diabeedi esilekutsumise klassikaliseks mudeliks, kuna see kutsub esile toksilisuse pankrease rakkudele ja rakusurma [43], mille tulemuseks on hüpoinsulineemia ja hüperglükeemia. Insuliin mängib olulist metaboolset rolli rasvkoe lipolüüsi supressorina [44]. Seega põhjustab diabeedi hüpoinsulinemia vabade rasvhapete (FFA) suurenenud vabanemise vereringes [45] ja hapete sissevoolu maksa. Intrahepaatiline triglütseriidide akumuleerumine toimub siis, kui lipiidide sissevool maksa ületab maksa võime triglütseriide vereringesse eksportida [45], mis põhjustab maksa steatoosi kui diabeedi tüsistuste tekkimise [46].

Käesolevas uuringus näitavad histopatoloogilised andmed, et 200 mg/kg AqTh või 50 mg/kg EaTh keskmise tähtajaga suukaudne manustamine kaitseb märkimisväärselt maksa steatoosi all, vähendades lipiidide tilkade kogunemist. Sarnastest leidudest teatasid Eliza jt. [47]kus Costus speciosus vähendas maksahäireid. Lisaks näitasid teised uuringud, et Camellia oleifera seeda leevendab maksa steatoosi FFA reguleerimise kaudu [48] ja kurkumiin vähendab steatohepatiiti ja lipiidide ladestumist, olles antioksüdant ning avaldades põletikuvastast ja vabade radikaalide püüdjat [49]. Siiski ei olnud akarboosravil seda maksa kaitsvat omadust. See kinnitab selle ravimi kõrvalmõju maksale [50].

Lisaks sisaldab T. hirsuta steroole, kumariine, terpeene, tanniine, alifaatset alkoholi, laktooni, alkaane ja alkanoole [51]. Huvitaval kombel võivad AqTh ja EaTh hüperglükeemilised ja diabeedivastased toimed olla tingitud nende fütokemikaalide või muude tundmatute ühendite olemasolust.

5. Kokkuvõtted

Kokkuvõtteks võib öelda, et meie uuring näitas, et T. hirsuta AqTh ja EaTh keskmise tähtajaga manustamine võib STZ-indutseeritud diabeetilistel rottidel vähendada vere glükoosisisaldust. EaTh antihüperglükeemilist toimet võib osaliselt seletada soolestiku glükosidaasi aktiivsuse pärssimisega. Ja AqTh antihüperglükeemilist toimet võib seostada insuliini sekretsiooni stimuleerimisega pankrease saarekeste rakkudest. Lisaks on AqTh ja EaTh näidanud olulist ennetavat toimetneeru-fibroosi ja maksa steatoosi tüsistused. Seega näitavad need leiud, et AqTh ja EaTh võib pidada tõhusaks suukaudseks diabeedivastaseks raviks. Praegu on meie uuringud keskendunud EaTh ja AqTh aktiivsete ühendite eraldamisele ja tuvastamisele, mis vastutavad T diabeedivastase toime eest. hirsuta.

Lühendid

AqTh: pluss ymelaea hirsuta vesiekstrakt

DM1: I tüüpi diabeet

DM2: II tüüpi diabeet

EaTh: etüülatsetaadi fraktsioon pluss ymelaea hirsuta

ECM: Ekstratsellulaarne maatriks

ESRD: lõppstaadiumneeru-haigus

FFA: vabad rasvhapped

mTOR: imetajate rapamütsiini sihtmärk

PKB: Proteiini kinaas B

STZ: streptosototsiin

T. hirsuta: pluss ymelaea hirsuta

UMPO: Herbarium University Mohamed Premier of

Oujda, Maroko

WHO: Maailma Terviseorganisatsioon.

Andmete kättesaadavus

Selle uuringu tulemuste toetuseks kasutatud andmed on autorite nõudmisel kättesaadavad.

Huvide konfliktid

Autorid kinnitavad, et huvide konflikti ei esine.

Tänuavaldused

Autorid soovivad avaldada tänu Ramdaoui Karimile ja Badraoui Mustaphale tehnilise abi eest.

cistanche bienfaitsjaoksneerud

Alates: "Thymelaea hirsuta kasulik mõju pankrease saarekeste degeneratsioonile, neerufibroosile ja maksakahjustustele" Sanae Abid

---The Scientific World Journal