Aptameeril põhinevad strateegiad immunoteraapia tugevdamiseks TNBC 2. osas

Lisaks taluvad aptameerid mitmeid keemilisi modifikatsioone, mis parandavad sihtimise efektiivsust, farmakokineetilist profiili ja stabiilsust bioloogilistes keskkondades, mis on vajalikud nende in vivo kasutamiseks [47]. Nagu mujal laialdaselt läbi vaadatud [27,48], on enim kasutatud modifikatsioonid, mida aptameeridele kas SELEXi ajal või pärast SELEXi rakendati, et suurendada nende resistentsust nukleaaside suhtes (joonis 3): 2 0 -OH rühmade asendamine fluoro-, metoksü-, tiool- või aminorühmadega riboos; oligonukleotiidide otste katmine või tsüklistamine; fosfodiesterkarkassi asendamine fosforotioaatkarkassiga; ja lukustatud nukleiinhapete sisseviimine. Veelgi enam, L-aptameere, mida nimetatakse spiegmeerideks, saab luua, mida nukleaasid ei tunne, kuna need on looduslike nukleiinhapete enantiomeerid. Keemilisi modifikatsioone rakendatakse ka väikese suurusega aptameeride kiire neerufiltratsiooni ületamiseks, konjugeerides need liiga mahukate molekulidega, nagu polüetüleenglükool (PEG) või kolesterool, suurendades seega nende tsirkulatsiooniaega, mõjutamata juurdepääsu sihtmärgile. Samuti on välja töötatud keerukad lähenemisviisid aptameeride keemiliseks konjugeerimiseks sekundaarsete ravimitega kombineeritud ravis ning huvitaval kombel on uuritud uuenduslikke strateegiaid eksootiliste keemiliste rühmade lisamiseks aptameeri molekuli, et laiendada nende funktsionaalsust ja ületada nukleiinhapete keemilise mitmekesisuse puudumine [49]. ].

Nukleaasid viitavad ensüümidele, mis võivad kiirendada RNA või DNA hüdrolüüsireaktsiooni ja millel on lai valik bioloogilisi funktsioone. Immuunsüsteemis on nukleaasid olulised vahendid viirusnakkuste äratundmiseks ja nendest vabanemiseks. Pärast raku nakatamist vabastab viirus rakku RNA või DNA. Nakatunud raku nukleaas tunneb need nukleiinhappemolekulid ära ja hüdrolüüsib, takistades seeläbi viiruse replikatsiooni ja nakkuse levikut.

Lisaks osalevad nukleaasid ka kaasasündinud ja adaptiivsete immuunvastuste reguleerimises. Nukleaasid võivad reguleerida geeniekspressiooni taset, reguleerides RNA või DNA lagunemist ja stabiilsust. Immuunrakkudes reguleerivad nukleaasid immuunvastuseid, nagu apoptoos, antigeeni esitlemine ja T-rakkude diferentseerumine.

Üldiselt mängivad nukleaasid immuunvastuses olulist rolli, tunnevad ära viirusnakkuse, moduleerivad geeniekspressiooni ja moduleerivad immuunvastust. Seega on immuunsuse mõjutamiseks mitu mehhanismi. Sellest vaatenurgast on vaja pöörata tähelepanu immuunsuse paranemisele. Cistanche suurendab immuunsust. Cistanche on rikas mitmesuguste antioksüdantsete ainete poolest, nagu C-vitamiin, C-vitamiin, karotenoidid jne. Need koostisosad võivad eemaldada vabu radikaale, vähendada oksüdatiivset stressi ja parandada immuunsust. immuunsüsteemi resistentsus.

Click cistanche tubulosa eelised

Teine strateegia sidumisafiinsuse, sihtmärgi selektiivsuse ja aptameeride in vivo biosaadavuse parandamiseks on aeglase väljalülituskiirusega modifitseeritud aptameeride (SOMAmeeride) genereerimine. Need on DNA aptameerid, mis kannavad keemiliselt modifitseeritud nukleotiide, mis on funktsionaliseeritud uridiini 5-asendis koos fragmentidega, mis mitte ainult ei saa osaleda interaktsioonides sihtvalguga, vaid moodustavad ka uusi sekundaarseid ja tertsiaarseid struktuurseid motiive, mis suurendavad oluliselt ligipääsetavate sihtmärkide repertuaari. aptameeridele [50].

Praeguseks on vanusega seotud kollatähni degeneratsiooni raviks heaks kiidetud üks ulatuslikult keemiliselt modifitseeritud aptameer (nimega Macugen), mis on suunatud veresoonte endoteeli kasvufaktori isovormile 165, ja 11 aptameeri on kliinilistes uuringutes erinevate inimeste haiguste raviks. [51,52]. Nende hulgas on nukleoliinivastane AS1411 aptameer ja stroomarakkudest pärinev faktori 1 NOX-A12 aptameer juba lõpetanud vähiravi II faasi kliinilised uuringud. Lisaks on anti-valgu türosiinkinaasi -7 Sgc8 DNA aptameer, mis on märgistatud 68 Ga-ga, varases faasis I, et hinnata selle diagnostilist väärtust kolorektaalsetel patsientidel (ClinicalTrials.gov Identifier: NCT03385148).

3. TNBC ravi aptameeripõhised immuunstrateegiad

Vähirakkude geneetilised ja epigeneetilised mutatsioonid viivad paljude kasvajaga seotud antigeenide esinemiseni, mida IS tunneb ära kui mitteiseloomulikke ja seetõttu muteerunud rakke hävitab. Siiski on hästi teada, et vähirakud arendavad välja mitmeid mehhanisme, et pääseda immuunkahjustuse eest ja muuta ümbritsevat mikrokeskkonda enda kasuks, mille tulemuseks on kasvaja kasv, invasioon ja metastaasid (53 55]).

Vähi immunoteraapia eesmärk on tugevdada või taastada IS-i võimet tuvastada ja hävitada vähirakke, ületades mehhanismid, mille abil kasvajad immuunvastust kõrvale hiilivad ja maha suruvad. Viimastel aastatel on välja töötatud silmatorkavad aptameeripõhised strateegiad, et taastada TNBC kasvajavastane seisund. Nagu allpool arutatud, näitavad kasvavad tõendid aptameeri võimet tugevdada immuunrakkude tsütotoksilist aktiivsust, blokeerida immuunsüsteemi kontrollpunkte või värvata immuunrakke vähirakkudesse (joonis 4).

3.1. Kasvajasse infiltreeruvad lümfotsüüdid

Peamised immuunrakkude tüübid TNBC mikrokeskkonnas on TIL-id ja nende olemasolu on märkimisväärselt seotud paremate ellujäämistulemustega patsientidel, kellel on varajases staadiumis ravimata kasvajad [56]. TIL-id hõlmavad kõiki CD3 pluss T-rakke, mis võivad soodustada kasvaja hävitamist (CD8 pluss tsütotoksilised T-rakud) ja kasvajavastast vastust (CD4 pluss T-abistaja 1) või piirata kasvajavastaseid immuunvastuseid (CD4 pluss T-abistaja 2, sealhulgas kahvlipea kast P3 () FOXP3), CD4 pluss regulatoorsed T-rakud).

Hiljuti Zhao et al. pakkus välja originaalse strateegia, mis kasutab ära aptameeride sihtimisvõimet, et konstrueerida "supertsütotoksiline T-lümfotsüüt", et suurendada kasvajavastast vastust vähi immunoteraapias [59]. Nad genereerisid happega lagunevad metalli-orgaanilisel alusel ja lüsosoomile suunatud nanoosakesed, mis olid laetud perforiini ja gransüüm B-ga, kahe CD8 pluss T-rakkude lüsosoomides sisalduva kasvajavastase toksiiniga ning funktsionaliseeriti aptameeriga, mis oli suunatud lüsosoomi CD63 retseptorile. Ca2 pluss kanti nanoplatvormile, et parandada selle biosobivust ja stabiilsust ning tugevdada toksiini aktiivsust. Autoritel õnnestus kasutada sellist aptameeriga juhitavat platvormi (nimega LYS-NP-d) CD8 pluss T-rakkude lüsosoomide tsütotoksilise sisalduse rikastamiseks.

TNBC 4T1 hiiremudelis testimisel aktiveerusid T-rakud töödeldud 4T1--spetsiifiliste antigeenidega ja rekombineerisid LYS-NP-d ning vabastasid lüsosomaalse sisu immunoloogilistesse sünapsidesse, vallandades tugeva kasvajavastase reaktsiooni (joonis 4). Kavandatud aptameeripõhisel immunoteraapial on suur potentsiaal ületada olulisi väljakutseid T-raku immunoteraapias tahkete kasvajate puhul, mida esindavad peamiselt tugevad immunosupressiivsed signaalid, mis kutsuvad esile madala T-rakkude aktivatsiooni ning vähendavad tsütotoksiliste valkude sünteesi ja vabanemist [60].

3.2. Immuunsuse kontrollpunkti ekspresseerivad rakud

Alatrashi rühm teatas, et PD-L1 geeni ekspressioon TNBC-ga patsientidel on oluliselt kõrgem kui mitte-TNBC-ga patsientidel (19]. PD-L1, üks peamisi kasvajarakkudega seotud immuunsüsteemi kontrollpunkte, ekspresseerub erinevates immuunrakkudes , nagu makrofaagid, mõned aktiveeritud T-rakud, B-rakud ja paljudes tahkete kasvajarakkudes, sealhulgas BC-rakkudes. Selle retseptor transmembraanne valk PD-1 ekspresseerub TIL-ide, NK-rakkude, makrofaagide, dendriitrakud ja monotsüüdid [61]. Seondumine PD-L1 ja PD-1 vahel põhjustab CD8 pluss TIL-ide inhibeerimist, muutes need anergiliseks vormiks ja seega vähktõve immuunvastuse.

Veelgi enam, PD-1/PD-L1 telg moduleerib kasvajarakkudes erinevaid proliferatiivseid ja ellujäämise signaaliülekandeteid, nagu PI3K/AKT, MAPK ja JAK/STAT [62] ning, mis on väga oluline, TNBC-s aktiveerimist. Selle telje puhul soodustab epiteeli-mesenhümaalset üleminekut (EMT), fenotüüpi, mis on seotud väga agressiivsete ja metastaatiliste kasvajatega [63].

Praegu uuritakse erinevaid aptameeripõhiseid lähenemisviise TNBC-s PD-1/PD-L1 efektide taastamiseks (joonis 5).

Joonis 5. Aptameeripõhiste strateegiate skemaatiline esitus PD-1/PD-L1 telje blokeerimiseks TNBC-s. (a) TNBC aptameeriga kaunistatud nanoosakesed, mis on laetud anti-PD-L1 siRNA-ga; (b) anti-CD44 ja anti-PD-L1 aptameeriga kaunistatud liposoomid, mis on laetud nii doksorubitsiini kui ka anti-IDO1 siRNA-ga; (c) antiPD-L1 aptameer, mis on konjugeeritud paklitakseeliga; (d) EGFR-vastane aptameer, mis on kovalentselt seotud anti-PD-L1 või anti-CTLA{23}} mAb-dega (üksikasju vt tekstist). Loodud saidiga BioRender.com (kasutatud 2. märtsil 2023).

Selles kontekstis uuris meie rühm esimest korda TNBC-s PD-L1-vastase mAb ja trombotsüütidest pärinev kasvufaktori retseptori (PDGFR) aptameeri, nimega Gint4.T, kombinatsiooni [64]. Gint4.T on nukleaasiresistentne 20 -fluoropürimidiinide (20F-Py) RNA aptameer, mis seondub erinevate inimese vähirakkude, sealhulgas TNBC rakkude [65] ja TNBC TME komponentidega, sh. mesenhümaalsed tüvirakud [66] ja T-rakud [64]. Huvitav on see, et TNBC 4T1 süngeensetele hiirtele intravenoosselt süstides võimendab aptameer tugevalt antiPD-L1 mAb-de toimet kasvaja kasvu ja kopsumetastaaside moodustumise pärssimisel, toimides nii kasvajarakkudele kui ka TME komponentidele [64].

Lisaks põhjustab PDGFR ja PD-L1 kombineeritud blokaad FOXP3 pluss Treg rakkude ammendumist ning CD8 pluss T-rakkude ja gransüüm B suurenemist järjekindlamalt kui üksikud monoteraapiad. Need tulemused panevad aluse bispetsiifilise immunokonjugaadi konstrueerimisele, mis koosneb PD-L1-vastasest antikehast, mis on kovalentselt seotud Gint4.T aptameeriga, optimeerides seega kombineeritud ravi efektiivsust. Bispetsiifilised konstruktsioonid, mis on saadud epidermaalse kasvufaktori retseptori (EGFR) 20F-Py RNA aptameeri kovalentsel sidumisel anti-PD-L1 (10_12) [67] või anti-CTLA-4 (ipilimumab) immunomodulaatoritega [68] mAb-d genereerisid Passariello et al. ja tõestas, et säilitab mõlema vanemosa bioloogilised funktsioonid, avaldades seega tugevat tsütotoksilist toimet BC-rakkude vastu.

Alternatiivne strateegia anti-PD-L1 mAb-dele PD-L1 sihtimiseks on PD-L1 mahasurumine geenide vaigistamise kaudu, mis võib ületada mõningaid korduvaid takistusi mAb-del põhineva ravi korral, nagu nende aeg ja hind. - tarbiv tootmine, immunogeensuse potentsiaal ja madal stabiilsus. Lisaks võimaldab see strateegia blokeerida tsütoplasmaatilise PD-L1 sisemist kasvajaeelset rolli [69], mis selle asemel ei ole antikehadele kättesaadav. Võimalus sünteesida vähirakke sihtivaid aptameere, mille otstes on funktsionaalsed rühmad, võimaldades konjugeerimist nanovektoritega, on silmatorkav lähenemisviis nanovektorisse laaditud väikeste segavate RNA (siRNA) veoste toimetamiseks, eriti kasvajasse. , ületades seega siRNA-de haavatavuse nukleaaside suhtes ja nende võimetuse sihtrakkudesse siseneda. Hiljuti on polü(piim-ko-glükool-)-plokk-PEG (PLGAb-PEG)-põhised nanoosakesed laetud anti-PD-L1 siRNA-ga ja kaunistatud 20F-Py RNA aptameeriga, mis on võimeline seonduma ja sisestama spetsiifiliselt TNBC rakkudesse. [70,71].

Saadud aptameeriga konjugeeritud nanovektorid toimetasid pärast 90-minutilist inkubeerimist TNBC rakkudel tõhusalt sihtrakkudesse siRNA, mis oli pädev põhjustama PD-L1 ekspressiooni peaaegu täielikku mahasurumist [72]. Eelkõige pakuvad aptameeriga kaunistatud nanokandjad võimalust siduda NP-de pinnaga erinevaid ligande, suurendades seega sihtimise spetsiifilisust ja kapseldada NP-desse mitut ravimit, võimaldades seega tõhusaid kombineeritud ravimeetodeid. Näiteks võib tsisplatiini [40] ja siPD-L1 [72] samaaegne manustamine PLGA polümeersete nanoosakeste poolt, mille me varustasime TNBC aptameeridega, mitte ainult soodustada toksiliste kõrvaltoimete vähenemist, vaid ka neutraliseerida tsisplatiini teatatud negatiivset mõju. manustamine PD-L1 pluss immuunsüsteemi vältivate TNBC rakkude rikastamiseks [73].

Sellega seoses on Kim et al. valmistas multifunktsionaalse nanosüsteemi, millel oli kaks DNA aptameeri konjugeeritud liposoomide välispinnale ja kaks erinevat terapeutilist ainet nanovektorites TNBC sünergiliseks kemoimmunoteraapiaks [74]. Täpsemalt kasutasid nad TNBC rakkude sihtimiseks eelnevalt valitud anti-CD44 [75] ja anti-PD-L1 [76] DNA aptameere, millest igaüks oli tiooliga modifitseeritud ja kovalentselt konjugeeritud PEGüülitud-DSPE mitsellide maleimiidrühmadega tiool-maleimiidiga. keemia. Nanosiseeritud liposoomid laaditi nii doksorubitsiini kui ka siRNA-ga, mis häirivad IDO1 ekspressiooni, valgu, mis soodustab immunosupressiivset TME-d ja mida doksorubitsiinravi reguleerib üles. Intravenoosselt TNBC 4T1 kasvaja-ksenotransplantaadi hiirtele süstides vähendasid nanovektorid tugevalt kasvaja kasvu ja pärssisid metastaaside moodustumist, kombineerides sünergistlikult vähirakkudele suunatud immunogeense rakusurma esilekutsumist ja immunosupressiooni tagasipööramist [74].

Hiljuti on loodud ja testitud erinevaid PD-L1 aptameere kui iseseisvaid antagoniste, bispetsiifilisi konjugaate ja terapeutiliste ainete kohaletoimetamise aineid kopsu-, maksa- ja käärsoole kasvaja hiiremudelites, mis sarnaselt PD-L1-vastaste antikehadega häirivad PD-1/PD-L1 telg, blokeerides PD-L1 (tabel 2). Üks aptameer, nimega XQ-P3, on genereeritud positiivse selektsiooni teel PD-L1 üleekspresseerivates MDA-MB-231 rakkudes, kasutades vastuvalikuks PD-L1 knockout rakke [77]. Isegi kui seda ei ole veel in vivo testitud, näib see väga tõhus TNBC MDA-MB-231 rakkude ja immuunsete Jurkat rakkude kaaskultuurides, blokeerides interaktsiooni PD-1-ga ja taastades T-rakkude funktsiooni. Lisaks näitas XP-Q3 aptameeri ja paklitakseeli konjugaat proliferatsioonivastast toimet PD-L1 üleekspresseeritud TNBC rakkudes [77].

3.3. Makrofaagid

Kasvajaga seotud makrofaagid (TAM-id) on paljude vähivormide TME-s kõige levinumad immuunrakud ja võivad soodustada või pärssida kasvajavastaseid immuunvastuseid [86,87]. Tõepoolest, tänu oma suurele plastilisusele nihkuvad nad vastuseks erinevatele mikrokeskkonna stiimulitele kahele erinevale fenotüübile: klassikaliselt aktiveeritud põletikuvastane M1 ja alternatiivselt aktiveeritud põletikuvastane M2, millel on erinev ekspressiooniprofiil rakupinna markeritega ja erinev tsütokiinide ja kemokiinide tootmine. M1 makrofaagid avaldavad tavaliselt kasvajavastaseid funktsioone, samas kui M2 makrofaagid soodustavad kasvaja progresseerumist. Enamiku agressiivsete kasvajate, sealhulgas TNBC puhul, kipuvad TAM-id sarnanema M2-sarnase fenotüübiga, mis on suures osas tingitud tavapäraste ravimeetodite ja immuunkontrollpunkti inhibeerivate ravimeetodite ebaõnnestumisest. Sel põhjusel on mitmete uuenduslike immunoterapeutiliste lähenemisviiside eesmärk M2 makrofaagide sihtimine ja ammendumine või nende ümberprogrammeerimine soovitud fenotüübile [88, 89].

Inimese M2-sarnaste makrofaagide sihtmärgiks olevate aptameeride valimiseks rakendati esimest raku-SELEX-lähenemist inimese makrofaagide suhtes, mis pärinevad mitme doonori monotsüütidest ja olid polariseeritud M2-sarnase fenotüübiga [90]. Kuigi valikust pärit parim M2-sihtiv DNA aptameer ei suutnud sihtrakke eristada diferentseerumata M0-sarnastest ja monotsüütidest ning seondus ka vähemal määral M1-sarnastega. makrofaagides, see sisenes kiiresti CD14-sse pluss monotsüütidesse, säilitades seega potentsiaali monotsüütidele suunatud ravimite kohaletoimetamiseks.

Veel üks silmatorkav aptameeride rakendus tahke kasvaja immunoteraapias seisneb M1 makrofaagide spetsiifilisuse tugevdamises kasvajarakkude suhtes, konstrueerides need vähirakkudele suunatud aptameeridega. Kimäärse antigeeni retseptori T (CAR-T) rakkude immunoteraapia, mis infundeerib patsientidele CAR-T rakke, on näidanud suurt efektiivsust mõnede leukeemiate ja lümfoomide ravis, kuid ainult tagasihoidlikud tulemused on soliidtuumorite tekkeks, kuna kasvajatesse on raske tungida [91] . Makrofaagide sisemise võime tõttu kasvajakudedesse tungida on hiljuti välja pakutud mitmeid lähenemisviise, mis muudavad need geneetiliselt selliseks, et ekspresseerida kasvajarakkude sihtimiseks kimäärseid CAR-e (CAR-M) ja algatada sihitud kasvajavastane reaktsioon [92]. Traditsiooniliste CAR-M-teraapiatega seotud peamiste puuduste, nagu konstrueeritud valkude madal reprodutseeritavus ja ohutusprobleemid, ületamiseks on Qian et al. pakkus välja uue CAR-M lähenemisviisi, mis põhineb aptameeride kasutamisel [93].

Hiire stabiilset makrofaagi rakuliini RAW 264.7 inkubeeriti esmalt asiidi sisaldava metaboolse glükoproteiini märgistusreagendi ja lipopolüsahhariidiga, et tekitada M1 raku pinnal asidosuhkrud. Seejärel konjugeeriti M1 rakud klikikeemilise reaktsiooniga nii AS1411 aptameeriga, mis seondub mitmel vähirakkudel ekspresseeritud nukleoliiniga, kui ka PD-L1 aptameeriga, et samaaegselt sihtida kasvajat ja immuunsüsteemi kontrollpunkti blokeerida. Oluline on see, et fluorestseeruvate aptameeridega funktsionaliseeritud 4T1 TNBC-d kandvate ja M1-rakkudega intravenoosselt süstitud hiirte in vivo pildistamine näitas kasvajates suuremat kuhjumist võrreldes modifitseerimata M1-rakkudega. Lisaks põhjustas kahe aptameeriga konstrueeritud M1 kasvajavastase aktiivsuse testimisel tuumori kasvu ja metastaaside moodustumise tugevat vähenemist, millega kaasnes immuunsüsteemi TME ümberprogrammeerimine koos suurenenud T-rakkude infiltratsiooniga kasvajas ja suurenenud T-rakkude tsütotoksilisusega.

Alternatiivina on Chen et al. pakkus makrofaagide inseneristrateegiana välja polüvalentsed sfäärilised aptameerid (PSA-d) [94]. PSA-d genereeriti kulla nanoosakeste funktsionaliseerimisel nii tiooliga modifitseeritud AS1411 aptameeriga kui ka DNA linkeriga, mis kannab vabas otsas funktsionaalrühma, mis reageerib M0 makrofaagidel ülalmainitud metaboolsete protsesside kaudu loodud asiidmärgistega. märgistamine ja biortogonaalsed klikireaktsioonid (joonis 6). Tehtud polariseerimata makrofaagide fenotüübiline transformatsioon M1 alatüübiks aktiveeriti röntgenikiirgusega in vitro ja kinnitati 4T1 kasvaja ksenotransplantaadiga hiirtel, põhjustades tugevat kasvajaspetsiifilist tapmist ilma süsteemse toksilisuse tunnusteta.

3.4. Looduslikud tapjarakud

NK-rakud on kaasasündinud IS-i kuuluvad tsütotoksilised lümfotsüüdid, mis on võimelised tootma põletikulisi tsütokiine ja kemokiine. Neid nimetatakse "esimeseks kaitseliiniks", kuna erinevalt T-lümfotsüütidest ei ekspresseeri nad antigeenispetsiifilisi T-raku retseptoreid, vaid toimivad muteerunud rakkude vastu ilma eelneva sensibiliseerimise või kloonide laienemiseta [95]. NK-rakkude adoptiivne immunoteraapia ei näidanud tõhusust tahkete kasvajate ravis, osaliselt immunosupressiivse TME ja NK-rakkude spetsiifilisuse puudumise tõttu kasvaja suhtes [96].

Seetõttu on NK-rakkude vähivastase terapeutilise efektiivsuse parandamise lähenemisviiside hulgas keskendutud suuri jõupingutusi vähi spetsiifilisuse andmisele CAR-de ekspressiooni või kasvajale suunatud ligandide konjugeerimise kaudu [97]. Zu ja tema kolleegid uurisid aptameere kui aktiivseid vähivastaseid aineid, ühendades lümfoomirakkudel aptameeri, mis on võimeline spetsiifiliselt ära tundma CD30 retseptori, kas kaubandusliku NK rakuliini või kolmelt tervelt doonorilt saadud NK-rakkude pinnaga [98]. Selle DNA-tüüpi aptameeri valis sama rühm varem hübriidse SELEX-meetodi abil, kus CD30 pluss lümfoomirakkude selektsiooni etappidele järgnesid CD30 rekombinantse valgu selektsioonietapid [99]. Aptameeri modifitseeriti 30 otsas lipofiilsete topelt-C18 süsivesinike ahelatega, et kinnitada NK-rakkude membraani, mis on suunatud spetsiifiliselt lümfoomirakkudele, et neid tappa [98]. Hiljuti rakendasid samad autorid sama lähenemisviisi TNBC-s, kinnitades NK-rakkude pinnale DNA aptameeri, mis on võimeline siduma TNBC-rakkudel ekspresseeritud senitundmatut valku. Aptameeriga konstrueeritud NK-rakud inhibeerisid hiirtele intravenoosselt süstitud MDA-MB-231 rakkude kopsumetastaase ilma kõrvaltoksilisuseta normaalsetele kudedele [100].

Tahkete kasvajate NK-rakkude kasvajaspetsiifilisuse edasiseks suurendamiseks genereeriti kahe aptameeriga varustatud NK-rakud, kasutades nii hepatotsellulaarsetele kartsinoomirakkudele suunatud aptameeri kui ka AptPD-L1 aptameeri [81]. Saadud konstrueeritud NK-rakud olid hepatotsellulaarse kartsinoomi kasvu pärssimisel adoptiivselt ülekantud hiirtel efektiivsemad kui konjugeerimata või ainult ühega kahest aptameerist konjugeeritud rakud. NK-rakkudega immunoteraapia efektiivsuse teine ​​piir on nende ebapiisav infiltratsioon tahketesse kasvajatesse. Taaskord on aptameerid osutunud suurepärasteks vahenditeks selle probleemi lahendamiseks. Hocki rühm genereeris bispetsiifilise aptameeripõhise konjugaadi, mis on võimeline samaaegselt seonduma c-Met-ga, retseptoriga, mida ekspresseeritakse tugevalt mitmel kasvajarakkudel, ja Fcg-retseptori III-ga (CD16a), valguga, mida ekspresseeritakse NK-rakkudel [101]. Konjugaat koosneb kahest väga spetsiifilisest c-Met ja CD16a DNA aptameerist, mis liideti erinevate linkeritega, säilitades ~65 Å-ideaalse kauguse samaaegseks seondumiseks kahe retseptoriga. Konjugaat suutis tõhusalt jäljendada antikehast sõltuvat rakulist tsütotoksilisust, värbades NK-rakke vähirakkudesse. Hiljem liideti sama CD16 aptameer PD-L1 DNA aptameeriga, et luua konstruktsioon, mis on võimeline värbama NK-rakke PD-L1-le ja kasvajarakkudele ning kahjustama PD-1/PD-L1 immunosupressiivset telge TIL-ide taasaktiveerimise kaudu. kasvajarakkude vastu kasvajat kandvatel hiirtel [82]. See lähenemisviis on eriti näidustatud kõrge PD-L1 tasemega soliidkasvajate jaoks, nagu TNBC.

4. Järeldused

Siin käsitletud hiljutised uuringud näitavad selgelt oligonukleotiidaptameeride suurt potentsiaali võimendada meie IS-i vähi vastu võitlemisel. Aptameere saab kasutada vähivastaste ainetena samal viisil kui mAb-sid, kuid need on odavamad, toodetud kiiremini ja suurema reprodutseeritavusega ning vähem immunogeensed kui antikehad. Siiski tuleb tunnistada, et aptameeride saabumine kliinikusse osutub oodatust aeglasemaks; Tegelikult, kuigi esimesest SELEXist on möödunud rohkem kui 30 aastat [25, 26], on praegu ainult kolm aptameeri vähiravi kliinilistes uuringutes [51].

See aeglustumine on peamiselt tingitud mõningatest väljakutsetest, mis piiravad aptameeride efektiivsust patsientidel, näiteks nende ebakindel stabiilsus ja poolestusaeg, eriti kasvajat ümbritsevas keerulises ja pidevalt arenevas mikrokeskkonnas. Sellegipoolest muudavad hämmastavad strateegiad, mis on viimastel aastatel välja töötatud ülalmainitud piiravate probleemide ületamiseks ning hiljutised edusammud aptameeride avastamisel ja nende kohandamisel soovitud rakendustega, põhjendatult väita, et aptameeride praktika hakkab peagi kasutama. teostada selliste vähkkasvajate jaoks nagu TNBC, mis vajavad kiiresti uusi ravivõimalusi.

Autori kaastööd:

Kontseptualiseerimine, LC; kirjutamine – algse eelnõu ettevalmistamine, LC; kirjutamine – läbivaatamine ja toimetamine LA, Ad, RN, MF, SC ja LC Kõik autorid on käsikirja avaldatud versiooni läbi lugenud ja sellega nõustunud.

Rahastamine:

Seda uuringut rahastas Fondazione AIRC per la Ricerca sul Cancro, IG 23052, LCLA-le toetas Itaalia AIRCi stipendium.

Institutsioonilise ülevaatenõukogu avaldus:

Ei kohaldata.

Andmete kättesaadavuse avaldus:

Ei kohaldata.

Tänuavaldused:

Oleme A. Caliendole tänulikud sisukate arutelude eest.

Huvide konfliktid:

Autorid ei kinnita huvide konflikti.

Viited

1. Dent, R.; Trudeau, M.; Pritchard, KI; Hanna, WM; Kahn, HK; Sawka, CA; Lickley, LA; Rawlinson, E.; Sun, P.; Narod, SA Kolmiknegatiivne rinnavähk: kliinilised tunnused ja kordumise mustrid. Clin. Cancer Res. 2007, 13, 4429–4434. [CrossRef]

2. Derakhshan, F.; Reis-Filho, JS Kolmiknegatiivse rinnavähi patogenees. Annu. Rev Pathol. 2022, 17, 181–204. [CrossRef]

3. Lu, JY; Alvarez Soto, A.; Anampa, JD Varajases staadiumis kolmiknegatiivse rinnavähi süsteemse ravi maastik. Eksperdi arvamus. Pharmacother. 2022, 23, 1291–1303. [CrossRef]

4. Lehmann, BD; Bauer, JA; Chen, X.; Sanders, MINA; Chakravarthy, AB; Shyr, Y.; Pietenpol, JA Inimese kolmiknegatiivsete rinnavähi alatüüpide tuvastamine ja prekliinilised mudelid sihipäraste ravimeetodite valimiseks. J. Clin. Uurige. 2011, 121, 2750–2767. [CrossRef]

5. Lehmann, BD; Jovanovic, B.; Chen, X.; Estrada, MV; Johnson, KN; Shyr, Y.; Mooses, HL; Sanders, MINA; Pietenpol, JA Kolmiknegatiivse rinnavähi molekulaarsete alatüüpide täpsustamine: mõju neoadjuvandi keemiaravi valikule. PLoS ONE 2016, 11, e0157368. [CrossRef]

6. Burstein, MD; Tsimelzon, A.; Poage, GM; Covington, KR; Contreras, A.; Fuqua, SA; Savage, MI; Osborne, CK; Hilsenbeck, SG; Chang, JC; et al. Põhjalik genoomianalüüs tuvastab kolmiknegatiivse rinnavähi uued alatüübid ja sihtmärgid. Clin. Cancer Res. 2015, 21, 1688–1698. [CrossRef]

7. Park, JH; Ahn, JH; Kim, SB Kuidas ravime varajast kolmiknegatiivset rinnavähki (TNBC): praegusest standardist eelseisvate immuunmolekulaarsete strateegiateni. ESMO Open 2018, 3, e000357. [CrossRef]

8. Li, S.; Bao, C.; Huang, L.; Wei, JF Metastaatilise kolmiknegatiivse rinnavähi praegused terapeutilised strateegiad: apteekrite vaatenurgast. J. Clin. Med. 2022, 11, 6021. [CrossRef]

9. MROSS, K.; Kratz, F. Tavapärase vähi keemiaravi piirid. Onkoloogia ravimite tarnimises: alusuuringutest vähiravini; Kratz, F., Senter, P., Steinhagen, H., toim.; John Wiley & Sons, Ltd.: Hoboken, NJ, USA, 2011; 1. köide, lk 1–31.

10. Ferrari, P.; Scatena, C.; Ghilli, M.; Bargagna, I.; Lorenzini, G.; Nicolini, A. Kemoteraapiaresistentse TNBC molekulaarsed mehhanismid, biomarkerid ja uued ravimeetodid. Int. J. Mol. Sci. 2022, 23, 1665. [CrossRef]

11. Gonzalez-Angulo, AM; Timms, KM; Liu, S.; Chen, H.; Litton, JK; Potter, J.; Lanchbury, JS; Stemke-Hale, K.; Hennessy, BT; Arun, BK; et al. BRCA mutatsioonide esinemissagedus ja tulemus kolmekordse retseptor-negatiivse rinnavähiga patsientidel. Clin. Cancer Res. 2011, 17, 1082–1089. [CrossRef]

12. Robson, M.; Im, SA; Senkus, E.; Xu, B.; Domchek, SM; Masuda, N.; Delaloge, S.; Li, W.; Tung, N.; Armstrong, A.; et al. Olaparib metastaatilise rinnavähi raviks idutee BRCA mutatsiooniga patsientidel. N. Ingl. J. Med. 2017, 377, 523–533. [CrossRef] [PubMed]

13. Eikesdal, HP; Yndestad, S.; Elzawahry, A.; Llop-Guevara, A.; Gilje, B.; Blix, ES; Espelid, H.; Lundgren, S.; Geisler, J.; Vagstad, G.; et al. Olapariibi monoteraapia kui esmane ravi valimata kolmiknegatiivse rinnavähi korral. Ann. Oncol. 2021, 32, 240–249. [CrossRef] [PubMed]

14. Litton, JK; Rugo, HS; Ettl, J.; Hurvitz, SA; Gonçalves, A.; Lee, KH; Fehrenbacher, L.; Yerushalmi, R.; Mina, LA; Martin, M.; et al. Talasopariib kaugelearenenud rinnavähi ja idutee BRCA mutatsiooniga patsientidel. N. Ingl. J. Med. 2018, 379, 753–763. [CrossRef]

15. Keung, MY; Wu, Y.; Badar, F.; Vadgama, JV Rinnavähirakkude reaktsioon PARP-i inhibiitoritele ei sõltu BRCA staatusest. J. Clin. Med. 2020, 9, 940. [CrossRef] [PubMed]

For more information:1950477648nn@gmail.com