Sobiv harjutustase vähendab soolestiku düsbioosi ja palderjanhappe suurenemist, et parandada neuroplastilisust ja kognitiivset funktsiooni pärast operatsiooni hiirtel 4. osa

Soolestiku mikrobiota profileerimine

Soolestiku mikrobiota profiilide koostamiseks koguti hiirtelt värsked väljaheited. Hiired paigutati eraldi autoklaavitud puuri väljaheidete kogumiseks ja neil lasti vabalt roojata. Väljaheited koguti kohe steriilsesse Eppendorfi katsutitesse kuival jääl ja säilitati seejärel kuni edasise töötlemiseni temperatuuril -80 kraadi. Bakterite DNA ekstraheeriti Power Lyzer Power mulla DNA isolatsioonikomplektiga vastavalt meie varasematele protokollidele [11].

Hiljutised uuringud näitavad, et soolestiku mikrobioomil on meie mälule väga oluline mõju. Täpselt võivad soolestiku mikrobiotas olevad bakterid mõjutada inimese aju närvisüsteemi, muutes seeläbi selle mälufunktsiooni. See on üllatav leid, sest see tähendab, et saame oma mälu parandada, muutes oma soolestiku mikrobioomi.

Mida saate teha inimesena, kes püüab oma mälu parandada, et parandada oma soolestiku mikrobioomi? Vastus on lihtne: keskenduge tasakaalustatud toitumisele. Tasakaalustatud toitumine mitte ainult ei aita reguleerida teie soolestiku mikrobiota tasakaalu, vaid parandab ka kõiki keha funktsioonide aspekte.

Esiteks peame keskenduma mitmekesisele toidule, mis on rikas kiudainete poolest. Kiudainerikas dieet võib aidata säilitada soolestiku mikrobiomi mitmekesisust, mis on hea tervise edendamise võtmetegur. Samas peame ka jälgima, et tarbiksime oma toidukordades piisavalt kvaliteetset valku ja tervislikke rasvu. Need toitained võivad soodustada mälufunktsiooni ja närvijuhtivust.

Lisaks võib regulaarne treening ja stressi vähendamine soodustada ka soolestiku mikrobiomi tasakaalu ja mitmekesisust. Olgu selleks sügav hingamine, meditatsioon või jooga harjutamine – need kõik on tõhusad viisid stressi vähendamiseks. Treening võib parandada soolestiku kontraktiilsust, suurendada soolestiku elujõudu ja soodustada tsüklilist detoksikatsiooni, aidates seeläbi edendada soolestiku mikrobiota tasakaalu ja mitmekesisust.

Kokkuvõttes ei peaks me keskenduma ainult oma toitumisele ja füüsilisele tervisele, vaid ka oma soolestiku mikrobiootale. Söömisharjumuste muutmine ja stressi vähendamine võib soodustada meie soolestiku mikrobiota tasakaalu ja mitmekesisust, mis võib aidata meil parandada mälu ja närvisüsteemi talitlust. Seega, pöörame koos tähelepanu oma soolestiku tervisele ning parandame mälu ja füüsilist vormi!

On näha, et me peame parandama mälu ja Cistanche deserticola võib oluliselt parandada mälu, sest Cistanche deserticola on traditsiooniline Hiina ravimmaterjal, millel on palju ainulaadseid toimeid, millest üks on mälu parandamine. Cistanche deserticola efektiivsus tuleneb paljudest selles sisalduvatest toimeainetest, sealhulgas parkhape, polüsahhariidid, flavonoidglükosiidid jne. Need koostisosad võivad aju tervist mitmel viisil edendada.

Klõpsake teada, kuidas ajufunktsiooni parandada

Hüpervarieeruva V3–V4 piirkonna sekveneerimisraamatukogud valmistati vastavalt Illumina MiSeq süsteemi juhistele. Lühidalt öeldes kasutati esimese 16S rRNA PCR DNA matriitsina 12,5 ng DNA-d. Kasutati järgmisi praimereid: F: 5′-TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAGCCTACGGGNGGCWGCAG-3′ja R: 5′-GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAGGACTACHVGGG{GTATCTAAT}′.
Seejärel puhastati amplikonid AMPure XPmagnetic bead'idega ja kasutati seejärel Index PCR jaoks, kasutades Nextera XTIndex Kit. Qubit dsDNA HS testikomplekti ja TapeStationi kõrge tundlikkusega D1000ScreenTape (Agilent, Blacksburg, VA, USA) kasutati PCR-produktide kontsentratsioonide mõõtmiseks ja koguste normaliseerimiseks raamatukogu ettevalmistamiseks.

Sekveneerimine viidi läbi Illumina MiSeq instrumendil MiSeq reagendikomplekti v2 abil (500 tsüklit). Andmeid analüüsiti MiSeqReporter tarkvaraga Metagenomics töövoo v2.5.1.3 (Illumina, San Diego, CA, USA). Topeltterminaalse sekveneerimisega saadud paarilised lugemised ühendati Pandaseqi tarkvara kaudu järjestusteks. Saadi pikad lugemised suure varieeruvusega piirkondadega.

Näidud, mille keskmine phred skoor aknas (suurus 5 bp, sammupikkus 1 bp) oli alla 20, kärbiti. Näidud, mis sisaldavad mitmetähenduslikku "N" või pikkusega < 220 bp, jäeti kõrvale. Pärast algandmete kvaliteedikontrolli määrati kvaliteetsed jadad ilma kimäärideta järjestati arvukuse järgi suurtest kuni väikestest ja rühmitati seejärel 97% sarnasusega operatiivseteks taksonoomilisteks ühikuteks (OTU). Iga OTU loeti esindavaks liigiks. Et vältida analüüsi hälbeid, mis on põhjustatud proovide järjestamise andmete erinevast suurusest, sisestati OTU-le lugemiste arv vastavalt OTU-le sobitatud minimaalsele järjekorranumbrile, kui sekveneerimissügavus oli piisav. Alfa mitmekesisust analüüsiti juhusliku nivelleerimisega.

ARead ekstraheeriti igast OTU-st representatiivse järjestusega. Esinduslikku järjestust võrreldi ribosomaalse andmebaasi projektandmebaasiga. Liigid klassifitseeriti iga OTU jaoks ja järgnevaks analüüsiks saadi liikide arvukuse tabelid. OTU valimine viidi läbi Uclusti abil tarkvaraplatvormil QIIME v1.9.1.

Valimi liigilise mitmekesisuse analüüsimiseks kasutati alfa-mitmekesisust, sh Chao1 indeksit ja kaupade katvuse indeksit. Proovide liikide mitmekesisuse erinevuste võrdlemiseks kasutati beeta-mitmekesisuse analüüsi ja seda iseloomustati Bray-Curtise vahekaugusel põhineva põhikoordinaatide analüüsiga (PCoA). Rühmadevahelisi erinevusi testiti sarnasuse analüüsi (ANOSIM) abil.

Plasma SCFA profileerimine

Plasma SCFA kontsentratsioonid määrati 789{8}}–5977 gaasikromatograafia-massispektromeetria abil (GC-MS, Agilent, Blacksburg, VA, USA). Plasmaproovid koguti hiirtelt ülalkirjeldatud ajahetkedel, säilitati temperatuuril -8{ {20}} kraadi kiiresti ja sulatati seejärel töötlemiseks toatemperatuurini. Lühidalt, 100 ul plasmaproovi segati keerisega 900 ui uletanooliga (sisaldab 0,5% HCl, maht/maht). Ultraheli töödeldi 40 minutit ja seejärel tsentrifuugiti proove kiirusel 14, 000 pööret minutis 10 minutit. Proovide supernatant mõõdeti GC-MS analüüsiga Agilent 7890–5977 GC-MS-ga koos elektronlöökionisatsiooni ja DB-FFAPkapillaarkolonn (30 m × 0,25 mm × 0,25 μm).

Kortikaalse palderjanhappe kvantifitseerimine

Palderiinhappe kogus ajukoores, mis koguti 24 tundi pärast viimast palderjanhappe intraperitoneaalset süstimist, määrati meetoditega, mis on sarnased varem kirjeldatuga [51, 52]. Lühidalt, 0,1 g ajukooret pesti 500 µl atsetonitriili vesilahuses. Supernatant ekstraheeriti 8 ml ekstraheerimispuhvriga (heksaan:dietüüleeter=1:1) ja tsentrifuugiti 1800 g juures 5 minutit. Koguti 7,5 ml supernatanti, segati 93 ui 20 mMKOH-ga metanoolis ja kuivatati 40 kraadi juures gaasilise lämmastiku all. Kuivatatud jääk lahustati 50 µl 2,5% 18-Crown-6 atsetonitriilis ja derivatiseeriti täiendavalt 9-klorometüülantratseeniga atsetonitriilis, lisades tetrametüülammooniumhüdroksiidi.

Lõpuks laaditi 30 µl derivatiseerimislahust Acclaim C18 kolonni (3 µm, 4,6 × 100 mm, Thermo Scientific) ja eraldati Ultimate 3000 kõrgsurvevedelikkromatograafias (HPLC, Thermo Scientific), mis oli varustatud UV-nähtava detektoriga. Derivatiseeritud palderjanhappe piik tuvastati lainepikkusel 254 nm.{10}}Sisemise võrdluskontrollina lisati etüülvõihape (2-EA). Palderjanhappe piigi pindala mõõdeti kui mAU*min ja selle iga proovi piigi pindala normaliseeriti 2-EA omaga proovis. Lõpptulemused esitati palderjanhappe rühma ja NS rühma suhetena.

Ajukoe kogumine

Hiired kaaluti ja tuimastati isofluraaniga 6 h, 24 h, 48 h, 72 h, 96 h ja 7 päeva pärast operatsiooni ning perfundeeriti ajukoe kogumiseks 4-kraadise NS-ga. Neid hipokampusi kasutati ELISA analüüsiks või RNA testiks. Immunofluorestsentsvärvimiseks kasutati Bregma kogu aju –3 kuni –6 mm. Kõik dissektsiooniprotseduurid viidi läbi jääl.

mRNA raamatukogu ettevalmistamine ja Illumina Hiseqi sekveneerimine

The hippocampi harvested at 24 h after surgery from the control group, surgery group, and Exe+Sur group in the first experiment were placed in liquid nitrogen for 1 h and then stored in a −80 °C freezer quickly for no >1 nädal. RNA puhastamine, pöördtranskriptsioon, raamatukogu ehitamine ja sekveneerimine viidi läbi Shanghais WuXi NextCODE'is vastavalt tootja juhistele (Illumina).

Kogu RNA-st mRNA-le keskendunud sekveneerimisraamatukogud valmistati Illumina TruSeq® RNA proovide ettevalmistamise komplekti kasutades. PolyA mRNA puhastati kogu RNA-st, kasutades oligo-dTattached magnethelmeid ja seejärel fragmenteeriti fragmenteerimispuhvriga. Võttes need lühikesed fragmendid mallidena, sünteesiti esimese ahela cDNA, kasutades pöördtranskriptaasi ja juhuslikke praimereid, millele järgnes teise ahela cDNA süntees. Seejärel viidi sünteesitud cDNA läbi lõppparandus, fosforüülimine ja 'A' aluse lisamine vastavalt Illumina raamatukogu ehitamise protokollile.

cDNA fragmentidele lisati Illumina sekveneerimisadapterid. Pärast PCR amplifikatsiooni DNA rikastamiseks kasutati AMPure XPBeadsi (Beckman) 200–300 bp suuruste sihtfragmentide puhastamiseks. Pärast raamatukogu ehitamist kasutati Qubit 3.0 fluoromeetri dsDNA HS Assay (Thermo Fisher Scientific). kasutati sellest tulenevate sekveneerimisraamatukogude kontsentratsioonide kvantifitseerimiseks, samas kui suurusjaotust analüüsiti Agilent BioAnalyzer 2100 (Agilent) abil. Sekveneerimine viidi läbi Illumina süsteemi abil, järgides Illumina pakutavaid protokolle 2 × 150 paarisotsa sekveneerimiseks Shanghais WuXi NextCODE-s Shanghais.

Hippokampuse mRNA ekspressioon kvantitatiivse polümeraasi ahelreaktsiooni (Q-PCR) abil

Hipokampus koguti 24 tundi pärast operatsiooni kontrollrühmast, treeningrühmast, operatsioonirühmast, Exe+Sur rühmast, Trans-Control+Sur rühmast, Trans-Exe+Sur rühmast, Exe+Sur+NS rühmast ja Exe+Sur+ rühmast. Val rühm pandi 1 tunniks vedelasse lämmastikku ja seejärel hoiti -80 kraadises sügavkülmikus mitte rohkem kui 3 päeva. RNA ekstraheerimine, RNA-cDNA-ks pöördtranskriptsioon ja q-PCR viidi läbi nii, nagu me eelnevalt kirjeldasime [49, 53]. Lühidalt, RNA ekstraheeriti RNeasy Micro komplektiga. Pöördtranskriptsioon viidi lõpule 5X All-in-One MasterMixi abil. Lõpuks kasutati kvantitatiivseks kvantifitseerimiseks CFX-ühenduse reaalajas süsteemi (Bio-Rad). qPCR-i praimerid olid: C3ar1-F:TGGGCTGGTGCTGTGGGTAG ja C3ar1-R: GATGGCGAAGGCGGTTCTCAC. C3ar1 suhteline geeniekspressioon arvutati, kasutades geeniekspressiooni võrdlevat lävitsüklit ΔΔCt ja majapidamisgeenide normaliseerimiseks. Sihtgeenide mRNA tasemeid väljendatakse vastavalt vastava rühma suhtes kordumisena.

Tsütokiinide ja GDNF määramine hipokampuses

IL{{0}}, IL-6, C3 ja GDNF hipokampuses tuvastati ELISAkomplektide abil. IL-1, IL,-6 ja GDNF testimiseks homogeniseeriti ajukoed jääl RIPA puhvris, mis sisaldas 25 mM Tris-HCl, pH 7,6, 150 mMNaCl, 1% naatriumdeoksükolaati, 0,1%. SDS ja proteaasi inhibiitori kokteil, mis sisaldab 10 mg/ml aprotiniini, 5 mg/ml pepstatiini, 5 mg/ml leupeptiini ja 1 mM fenüülmetaansulfonüülfluoriidi.

C3 testimiseks homogeniseeriti ajukoed jääl PTR puhvris (komplektis kaasas). Supernatant koguti ELISA tuvastamiseks pärast seda, kui homogenaati tsentrifuugiti 13, 000 g juures 20 minutit 4 kraadi juures ja valgu kontsentratsioon määrati BCA valgu testiga (Bio-Rad, Hemel Hempstead, Herts, UK). IL-1 , IL6, C3 ja GDNF aju supernatandis tuvastati vastavalt tootja juhistele ELISA jaoks ning nende kogus igas ajuproovis normaliseeriti selle koguvalgusisaldusega ja väljendati kui pg/ mg valku.

Lääne blotting

Western blotting viidi läbi nagu eelnevalt kirjeldatud [49]. Lühidalt öeldes määrati proovide valgukontsentratsioonid BCA valgu testi abil. 20 mikrogrammi igast proovist viidi läbi Westernblot analüüs, kasutades järgmisi primaarseid antikehi: küüliku polüklonaalne-postsünaptiline tihedusvalk 95 (PSD95) lahjenduses 1:1000, küüliku polüklonaalne anti-sünapsiin 1 lahjenduses 1:1000 ja küüliku anti-{{10} tubulinantikeha lahjenduses 1:1000. Pilte skaneeriti Image Master IIscanneriga (GE Healthcare, Milwaukee, WI, USA) ja analüüsiti tarkvara ImmageQuant TL v2003.03 (GE Healthcare) abil. Huvipakkuvate valkude ribasignaalid normaliseeriti vastava tubuliini omadega ja väljendati samade geelide kontrollproovi fraktsioonidena.

Immunofluorestsentsvärvimine

Immunofluorestsentsmärgistamine ja värvimise kvantifitseerimine viidi läbi nii, nagu oleme eelnevalt kirjeldanud [6, 54]. Lühidalt, aju fikseeriti 4% paraformaldehüüdis 4 kraadi juures 24 tundi ja inkubeeriti seejärel 30% sahharoosis üleöö 4 kraadi juures, enne kui see külmutati optimaalse lõiketemperatuuri segus. Koronaalsed 20-µm paksused lõigud lõigati Bregmast järjestikku. -3 kuni -6 mm, kasutades krüostaadi ja paigaldatud mikroskoobi alusklaasidele.

Pärast Tris-puhverdatud soolalahuses (TBS) pesemist blokeeriti lõigud 10% eesli seerumis pluss 1% veise seerumi albumiinis (BSA) TBS-is, mis sisaldas 0,3% triton-X100, 2 tundi toatemperatuuril ja seejärel inkubeeriti temperatuuril 4 kraadi üleöö järgmiste primaarsete antikehadega: küüliku monoklonaalne anti-C3 antikeha (1:50), kitse monoklonaalne anti-GFAP antikeha (1:200), roti monoklonaalne anti-C3ar antikeha (1:50) ja küüliku monoklonaalne anti-Iba{{ 21}} antikeha (1:200).

Sektsioone loputati TBS-is 0,1% Triton-x 100-ga. Küülikuvastane eesli IgG antikeha, mis oli konjugeeritud Alexa Fluor 594-ga (1:200), eesli kitsevastane IgG antikeha, mis oli konjugeeritud Alexa Fluor 488-ga (1:200) , inkubeeriti koos sektsioonidega 1 tund toatemperatuuril pimedas eesli rotivastast IgG antikeha, mis oli konjugeeritud AlexaFluor 594-ga (1:200) või eesli küülikuvastast IgG antikeha, mis oli konjugeeritud AlexaFluor 647-ga (1:200).

Sektsioone pesti TBS-is, inkubeeriti tuumavärvimiseks Hoechst 33342-ga (1:1000), loputati ja paigaldati Vectashieldi kinnitusmeediumiga (H-1000; Vector Labs, Burlingame, CA). Immunovärvimise pildid saadi z-stack abil LSM710 mikroskoopiasüsteemiga (ZEISS) ja kõigisse katsetesse kaasati negatiivne kontroll, mis jättis inkubeerimise primaarse antikehaga.

Kvantifitseerimine viidi läbi nagu eelnevalt kirjeldatud [6, 54]. Lühidalt, kogu dentate gyrus (DG) piirkond, mis oli kaetud 2–3 mittekattuva väljaga ühe hiire igast kuuest järjestikusest hipokampuse sektsioonist. Piirpildi pikslite arvu, mille intensiivsus ületas etteantud lävetaseme, peeti huvitatud markeri jaoks positiivselt määrdunud alaks ja kvantifitseeriti, kasutades rakendust Image-pro plus 6.0 (Media Cybernetics, Inc., Rockville, MD, USA) ja esitatud positiivse pindala protsendina kogupindalast. Seejärel keskmistati kuus mõõtmist hiire kohta, et kajastada positiivse värvumise taset. Kõik kvantitatiivsed analüüsid viidi läbi pimendatud viisil.

BrdU manustamine ja immunofluorestsentsvärvimine

Seitse päeva pärast operatsiooni tehti hiirtele 7 järjestikust intraperitoneaalset süsti 80 mg/kg 5′-bromo-2′-desoksüuridiini (BrdU) üks kord päevas keskpäeval, nagu eelnevalt kirjeldatud [14]. Hiired ohverdati 5 päeva hiljem hipokampuse kogumiseks. Hipokampus fikseeriti 4% paraformaldehüüdi 0,1 M fosfaatpuhverdatud soolalahuses 4 kraadi juures 24 tundi ja sisestati inparafiin. Viie mikroni paksused koronaalsed ajulõigud lõigati järjestikku Bregmast –2 kuni –4 mm. Antigeeni otsimine viidi läbi, inkubeerides sektsioone naatriumtsitraatpuhvriga, mis sisaldas 10 mM naatriumtsitraati, 0,05% Tween 20 (pH 6,0) 95–100 kraadi juures 20 minutit.

DNA denatureerimine viidi läbi, inkubeerides 1 N HCl-ga jääl 3 minutit, 2 N HCl-ga toatemperatuuril 3 minutit ja 37 kraadi juures 6 minutit. Sektsioonid blokeeriti 5% eesli seerumiga fosfaatpuhverdatud soolalahuses (PBS), mis sisaldas 0,5% triton-X 100 2 tundi toatemperatuuril. Seejärel inkubeeriti sektsioone üleöö 4 kraadi juures järgmiste primaarsete antikehadega: rotmonoklonaalne BrdU-vastane antikeha (1:100) ja kitse monoklonaalne anti-GFAP-antikeha (1:200). Sektsioone inkubeeriti 1 tund toatemperatuuril pimedas ruumis eesli rotivastase IgGantikehaga, mis oli konjugeeritud Alexa Fluor 594-ga (1:200) või eesli anti-kitse IgGantikehaga, mis oli konjugeeritud Alexa Fluor 488-ga (1:200). Pärast PBS-s pesemist värviti lõigud vastu Hoechst 33342-ga (1:1000), loputati ja paigaldati Vectashieldi kinnitusmeediumiga (Vector Labs).

Pildid saadi fluorestsentsmikroskoobiga koos laenguga ühendatud seadme kaameraga (High MagOlympus BX51) ja LSM710 konfokaalse mikroskoopia süsteemiga (ZEISS). Kõigisse katsetesse kaasati negatiivne kontroll, mis jättis primaarse antikehaga inkubeerimata. Iga hiire aju jaoks kasutati rakkude loendamiseks kuut järjestikust hipokampuse sektsiooni. Loendati kõigi huvitatud markeri või kahe markeri kombinatsiooni suhtes positiivselt värvitud rakkude arv iga sektsiooni DG subgranulaarses tsoonis. Kvantitatiivsed analüüsid viidi läbi pimendatud viisil.

Golgi plekk

Golgi värvimine viidi läbi, kasutades FD Rapid GolgiStainTM komplekti. Üheksateist päeva pärast operatsiooni sukeldati igas rühmas 6 hiire aju 2 nädalaks immutuslahusesse (lahused A ja B: 1:1) ja viidi seejärel 3 päevaks lahusesse C. Koronaalsed ajulõigud paksusega 100 μm ja umbes –2,7 mm bregmast lõigati vibratoomiga (Microslicer® 10110, Ted Pella, Inc. California, USA).

Nagu eelnevalt kirjeldatud [55, 56], valiti igast hiirest juhuslikult rohkem kui 10 hästi individualiseeritud neuronit hipokampuse DG piirkonnas ja järjestikused optilised mitmekihilised skaneerimispildid tehti intervalliga 2,0 μma piki z-telge. (3DHISTECH, Pannoramic MIDI, Ungari) 20 × eesmärgiga. Mitmekihilised skannimisfailid kanti üle üheks selgeks skannimisfailiks, mida saab arvutis vaadata rakendusega Caseviewer (3DHISTECH, Ungari). Filiaalide koguarvu ja dendriitide pikkust mõõdeti Fidži tarkvaraga (Fiji-win64, NIH, USA). Dendriitpuude (ristmike) keerukust hinnati Sholli analüüsi abil. Selgroo tiheduse mõõtmine, igast loomast valiti 5 neuronit.

Skaneerimisfailidest pildistati viis juhuslikult valitud mikroskoopilist välja apikaalsetes või basaaldendrites. Lülisamba numbrid 40 μmsegmendis loendas vaatleja, kes oli rühma määramise suhtes pime. Tulemused väljendati selgroogude arvuna 10 μmsegmendi kohta. Hiire taseme kajastamiseks keskmistati ühe hiire dendriitide harude arvu, pikkuse ja ristumiskohtade ning selgroo tiheduse andmed.

Statistiline analüüs

Iga katse jaoks valimi suuruse arvutamist ei tehtud. Valimi suuruse määramine põhines enamasti meie kogemustel: õppimist ja mälu testivates katsetes kasutati suuremaid valimi kui biokeemiliste uuringute jaoks. Kõik kogutud andmed kaasati analüüsidesse. Puuduvad andmed hõlmasid loomi, kes vastasid eelnevalt kindlaksmääratud treeningu välistamiskriteeriumidele, ja loomi, kes surid enne kavandatud vaatlusperioodi. Loomade arv, kes andsid analüüsiks andmeid iga katseseisundi kohta, on märgitud legendides.

Tulemused on esitatud keskmisena ± SD (normaaljaotuse andmed) või mediaanina ± interkvartiilne vahemik (mitte normaaljaotuse andmed) koos üksikute loomade andmete esitamisega tulpdiagrammil ja keskmistena ± SD joondiagrammidel. BarnesMaze'i treeningute andmeid analüüsiti kahesuunalise korduva dispersioonanalüüsi (ANOVA) abil, millele järgnes Tukey test.

Soolestiku mikrobiota andmeid analüüsiti, nagu on kirjeldatud jaotises Soolestiku mikrobiota profiilide koostamine. Ülejäänud andmeid analüüsiti ühesuunalise ANOVA abil, millele järgnes Tukey test, kui andmed olid tavapäraselt jaotunud, ühesuunaline ANOVA auastme kohta, millele järgnes Tukey testor Student-Newman-Keulsi meetod, kui andmed ei olnud tavapäraselt jaotunud, kahesuunaline ANOVA. , t-testi või järgu summa testiga. Kahepoolse hüpoteesi testimise põhjal defineeriti oluline erinevus kui P < 0,05.

Korrigeerimist mitme võrdluse jaoks ei tehtud. Kõik statistilised analüüsid viidi läbi rakendusega SigmaStat (Systat Software, Inc., Point Richmond, CA, USA).

VIITED

1. Moller JT, Cluitmans P, Rasmussen LS, Houx P, Rasmussen H, Canet J jt. Pikaajaline operatsioonijärgne kognitiivne düsfunktsioon eakate ISPOCD1 uuringus. ISPOCD-uurijad. Rahvusvaheline postoperatiivse kognitiivse düsfunktsiooni uuring. Lancet.1998;351:857–61.

2. Monk TG, Weldon BC, Garvan CW, Dede DE, van der Aa MT, Heilman KM jt. Kognitiivse düsfunktsiooni ennustajad pärast suurt mittekardiaalset operatsiooni. Anestesioloogia. 2008;108:18–30.

3. Newman MF, Kirchner JL, Phillips-Bute B, Gaver V, Grocott H, Jones RH jt. Neurokognitiivse funktsiooni pikisuunaline hindamine pärast koronaararterite šunteerimisoperatsiooni. N. Engl J Med. 2001;344:395–402.

4. Hall M, Schwartzman A, Zhang J, Liu X. Ambulatoorse kirurgia andmed haiglatest ja ambulatoorsete kirurgiakeskustest: 2010. National Health StatisticsReport 2017.

5. Li Y, Chen D, Wang H, Wang Z, Song F, Li H jt. Intravenoosne versus lenduva anesteetikumi mõju operatsioonijärgsele tunnetusele eakatel patsientidel, kellele tehakse laparoskoopiline kõhuõõneoperatsioon. Anestesioloogia. 2021;134:381–94.

For more information:1950477648nn@gmail.com