Okra antioksüdantsed ja väsimusvastased koostisosad

Mar 21, 2022

Fangbo Xia, Yu Zhong, Mengqiu Li, Qi Chang, Yonghong Liao, Xinmin Liu * ja Ruile Pan *


Pekingi Liidu meditsiinikolledž, Hiina meditsiiniakadeemia ravimtaimede arendamise instituutSciences, nr 151, North Road Malianwa, Haidiani piirkond, Peking 100193


Rohkem informatsiooni:ali.ma@wecistanche.com




Abstraktne


Tervislik köögivili Okra (Abelmoschus esculentus (L.) Moench) on laialt levinud troopilistes ja subtroopilistes piirkondades. Varasemad uuringud on tõestanud, et okra kaunad omavadväsimusevastane tegevus,ja selle uurimistöö eesmärk on selgitadaväsimuse vastanekoostisosad. Selle saavutamiseks jagasime okrakaunad (OPD) seemneteks (OSD) ja kestadeks (OSK) ning võrdlesime polüsahhariidide, polüfenoolide, flavonoidide üldsisalduse, isokvertsitriini ja kvertsetiini -3-O-gentiobioosi ning antioksüdanti. aktiivsus in vitro javäsimusevastane tegevusin vivo OSD ja OSK vahel. Polüfenoolide üldsisaldus ja polüsahhariidide üldsisaldus oli OSD-s vastavalt 29,5 protsenti ja 14,8 protsenti ning OSK-s vastavalt 1,25 protsenti ja 43,1 protsenti. Flavonoidide, isokvertsitriini ja kvertsetiin-3-O-gentiobioosi kogusisaldus (vastavalt 5,35 protsenti, 2,067 protsenti ja 2,741 protsenti) tuvastati ainult OSD-s. Antioksüdantide testid, sealhulgas 1-difenüül-2-pikrüülhüdrasüüli (DPPH) eemaldamine, raud(III) redutseeriva antioksüdantse võimsuse (FRAP) ja redutseeriva võimsuse test ning raskusega ujumise test näitasid, et OSD-l on olulisi antioksüdante javäsimusevastane toime. Veelgi enam, biokeemiline määramine näitas, etväsimusevastane tegevusOSD on põhjustatud vere piimhappe (BLA) ja uurea lämmastiku (BUN) taseme vähendamisest, maksa glükogeeni ladestumise suurendamisest ja antioksüdantide võime suurendamisest malondialdehüüdi (MDA) taseme alandamise ning superoksiidi dismutaasi (SOD) ja glutatioonperoksidaasi (GSH-) taseme tõstmise kaudu. Px) tasemed. Need tulemused näitasid, et okra seemned olidväsimuse vastaneosa okra kaunadest ning polüfenoolid ja flavonoidid olid aktiivsed koostisosad.


Märksõnad: okra; väsimusevastane; antioksüdant; polüfenoolid




Cistanche

1. Sissejuhatus


Väsimus on keeruline füsioloogiline nähtus, mida määratletakse kui raskusi vabatahtliku tegevuse alustamisel või jätkamisel [1]. Lisaks vanuse suurenemisele ja vähi, depressiooni, HIV-nakkuse, hulgiskleroosi ja Parkinsoni tõvega patsientide esinemisele on väsimus muutumas tänapäevase elutempo kiirenemisega ka tavalistel inimestel üha tavalisemaks sümptomiks [2–4]. Suured kogukonnauuringud on näidanud, et üle poole täiskasvanud elanikkonnast kaebab väsimuse üle [5,6]. Pikaajaline kuhjunud või krooniline väsimus ei alanda mitte ainult elukvaliteeti, vaid põhjustab ka kroonilise väsimussündroomi ja muid orgaanilisi haigusi ning isegi karoshi (ületöötamisest põhjustatud ebanormaalne surm ägedatesse südame-veresoonkonna haigustesse [7]). Väsimuse põhjuste kohta on mitmeid teooriaid, näiteks kurnatuse teooria, mis väidab, et väsimuse põhjuseks on aktiini-müosiini sidestamiseks, Na`/K` pumpamiseks ja sarkoplasmaatilise retikulumi Ca2 omastamiseks saadaoleva ATP puudumine [8–11. ]; homöostaasi häirete teooria, mis näitab, et väsimus on põhjustatud erinevate metaboolsete kõrvalsaaduste kuhjumisest [10,12]; ja katastroofi teooria, mis näitab, et väsimus võib tekkida tõrke tõttu ühes või mitmes kohas piki jõu tekitamise rada [13]. Nende hulgas arvatakse, et oksüdatiivne stress mängib väsimuse etioloogias olulist rolli [10, 13–16]. Mõnede ürtide antioksüdandid on näidanud, et neil on märkimisväärne väsimusevastane toime, mis näitab, et antioksüdantravi võib olla väärtuslik väsimusevastane ravimeetod [17–20]. Seetõttu otsivad tarbijad oma toidus rohkem looduslikke antioksüdante, et vähendada oksüdatiivseid kahjustusi ja võidelda väsimuse vastu. Okra (Abelmoschus esculentus (L.) Moench, perekond: Malvaceae), tuntud ka kui naissõrm, bhindi ja gumbo, on Aafrikast pärit üheaastane taim, mida on kasvatatud erinevates riikides üle maailma, peamiselt troopilistes, subtroopilistes, ja soojad parasvöötme piirkonnad.


Okra kauna on pikka aega kasutatud köögiviljana ja dieetravimite allikana. Traditsioonilises Aasia ja Aafrika meditsiinis kasutatakse okra kaunasid gastriidi vastu võitlemiseks lima sisaldava toiduna [21]. Farmakoloogilised uuringud on näidanud, et okra omab antioksüdante, neuroprotektiivseid, diabeedivastaseid, hüperlipideemiavastaseid ja väsimusevastaseid toimeid [22–26]. Kuigi okra kaunade väsimusvastane toime on varem tõestatud [26], on selle väsimusevastase toime ja koostisainete kohta vähe teada. Varasemas kirjanduses on teatatud, et okra kaunad sisaldavad suures koguses polüsahhariide, polüfenoole ja flavonoide [27–34]. Samuti on varasemates uuringutes näidatud, et polüfenoolidel ja flavonoididel on tugev antioksüdant ja väsimusevastane toime [15,18,20,35,36]. Veelgi enam, meie esialgne kvalitatiivne katse, milles kasutasime värvi tekitava reagendina raudkloriidi lahust, näitas, et okra seemneekstraktil oli tugev fenoolreaktsioon; selle nahaekstrakt aga ei näidanud peaaegu sellist reaktsiooni (täiendavad materjalid), mis näitas, et okra seemned sisaldasid suuremat polüfenoolide ja flavonoidide sisaldust kui okra nahad. Seetõttu võib oletada, et okra seemned võivad olla okrakaunade väsimusevastane osa ning polüfenoolid ja flavonoidid võivad olla aktiivsed koostisosad. Uuringu eesmärk oli selgitada okra kaunade väsimust vähendavaid koostisosi. Selle saavutamiseks jagasime värsked okrakaunad seemneteks ja kestadeks ning võrdlesime polüsahhariidide, polüfenoolide, flavonoidide, isokvertsitriini ja kvertsetiin{17}}O-gentiobioosi üldsisaldust ning antioksüdantset toimet in vitro ja anti- väsimustegevused in vivo okra seemnete ja kestade vahel. Kõik need tulemused näitasid, et okra seemned olid okrakaunade väsimusevastane osa ning polüfenoolid ja flavonoidid olid aktiivsed koostisosad. Samuti uuriti okra väsimusevastase toime võimalikke mehhanisme.


2. Eksperimentaalne osa


2.1. Taimne materjal ja ekstraheerimine


Värsked okrakaunad osteti turult (Sanya, Hainani provints, Hiina) 2013. aasta juulis. Taime autentsuse kinnitasid professor Bengang Zhang, Hiina Meditsiiniteaduste Akadeemia ravimtaimede instituut ja Peking Unioni meditsiinikolledž, Peking, Hiina, kus vautšeri näidised (nr 20130705) on hoiule antud instituudi herbaariumis. Valmistati kaks portsjonit 2,5 kg värskeid okra kaunasid. Üks osa lüofiliseeriti otse, et saada kuivatatud okra kaunad (251,3 g). Teine osa jaotati okraseemneteks ja okrakesteks, lüofiliseeriti, et saada vastavalt kuivatatud okraseemned (50,1 g) ja kuivatatud okrakestad (200,5 g). Okra kaunad, seemned ja kestad jahvatati hästi ja ekstraheeriti eraldi 1500 ml keeva veega 1 tund (3 korda). Iga filtreeritud vedelik kombineeriti ja kontsentreeriti vaakumis, saades vastavalt okrakaunade (OPD, 105,4 g), okraseemnete (OSD, 20,5 g) ja okrakestade (OSK, 84,1 g) jäägid. Seetõttu on OPD:OSK:OSD ekstrakti suhe umbes 5:4:1. Kõiki proove hoiti kuni järgneva keemilise analüüsi ja loomkatseteni temperatuuril 20 ˝C.


Acteoside of Cistanche

2.2. Kemikaalid ja reaktiivid


Isokertsitriini ja kvertsetiin-3-O-gentiobioosi eraldas meie labor okrakaunadest kõrgsurvevedelikkromatograafia (HPLC) analüüsiga, mille puhtusaste on üle 98%. Rutiini, gallushappe ja D-glükoosi standardid osteti riiklikust toidu- ja ravimikontrolli instituudist (Peking, Hiina). Fenoolide määramiseks kasutati Folin-Ciocalteu fenoolreaktiivi (1N, Coolaber Science & Technology, Peking, Hiina). Ferric redutseeriva antioksüdantse jõu (FRAP) komplekt osteti ettevõttelt Beyotime Biotechnology (Peking, Hiina). 1,1-difenüül-2-pikrüülhüdrasüül (DPPH) ja Trolox osteti ettevõttelt Sigma-Aldrich Inc. (St. Louis, MO, USA). Fosfaatpuhver (PBS, Gibco) osteti firmalt Thermo Fisher (Waltham, MA, USA). Lahustid, sealhulgas atsetonitriil (Thermo Fisher, MA, USA) ja sipelghape (CNW, Düsseldorf, Saksamaa), olid HPLC puhtusastmega ja vesi saadi Milli-Q veepuhastussüsteemist (Millipore, MA, USA). Analüüsikomplektid vere laktaadi (BLA), seerumi uurea lämmastiku (BUN), maksa glükogeeni (HG), glutatioonperoksidaasi (GSH-Px), tiobarbituurhappe (TBA) ja superoksiiddismutaasi (SOD) määramiseks osteti ettevõttelt Nanjing Jiancheng Biotechnology. Instituut (Nanjing, Hiina). Kõik muud selles uuringus kasutatud reaktiivid ja kemikaalid olid analüütilise kvaliteediga.


2.3. Loomad


Isased ICR-hiired (20–22 g) osteti ettevõttest Vital River Laboratories (kvalifitseeritud nr: SCXK 2012-0001, Peking, Hiina). Hiiri hoiti rühmades, kus oli 6 looma puuri kohta püsiva temperatuuri (23 ˝C ˘ 2 ˝C) ja niiskuse (50 ˘ 10 %) all 12/12-h valguse/pimeduse tsüklis (tuled põlevad 8:00 hommikul kuni 20:00). Loomadel oli SPF (Specific Patogen Free) loomamajas vaba juurdepääs standardsele toidutoidule ja steriliseeritud joogiveele. Kõik katseprotseduurid viidi läbi ravimtaimede arendamise instituudi katseloomade keskuse akadeemia järelevalve all ja heakskiidul ning rangelt kooskõlas NIH laboriloomade hooldamise ja kasutamise juhendiga (kaheksas väljaanne)[37].



2.4. OSD ja OSK keemiline analüüs


2.4.1. Flavonoidide (TF) üldsisalduse määramine


TF sisaldust mõõdeti NaNO{{0}}Al(NO)3 kolorimeetrilise analüüsiga vastavalt Hiina Rahvavabariigi riikliku tervise- ja pereplaneerimise komisjoni poolt välja antud funktsionaalse toidu testimise ja hindamise tehnilistele standarditele. aastal 2{{20}}03, väikeste muudatustega. Lühidalt, 50 mg proovi lahustati 40 ml destilleeritud vees ja proovilahust ekstraheeriti kolm korda 50 ml kloroformiga. Seejärel lahjendati vesilahus mahuni 50 ml ja 2 ml lahjendatud lahust adsorbeeriti 5 g polüamiidvaiguga ja elueeriti 20 ml 70% etanooliga. Elueerimine 70% etanooliga kontsentreeriti vaakumis mahuni 10 ml. Kolm milliliitrit kontsentreeritud elueerimist pandi 10 ml mõõtekolbi ja seejärel lisati 2 ml 70% etanooli, 0,3 ml NaNO2 (5%) ja 0,3 ml Al(NO)3. 5 minuti pärast lisati segulahusele 2 ml NaOH (1,0 M) lahust ja lasti 6 minutit seista. Lõpuks lisati 2,4 ml 30% etanooli. Neeldumist mõõdeti UNICO-2012 UV-VIS spektrofotomeetriga (Shanghai, Hiina) 510 nm juures tühja katsega. Flavonoidide kogusisaldus arvutati kalibreerimiskõvera põhjal, kasutades standardina rutiini (20–100 mg/l). Tulemused esitati rutiini ekvivalendina mg proovide kohta.


Echinacoside of Cistanche

2.4.2. Polüfenooli (TP) üldsisalduse määramine


TP sisaldus määrati, kasutades Folini – Ciocaiteu meetodit, vähese modifikatsiooniga [38]. Lühidalt, 50 mg proovi segati 25 ml 50 protsendilise metanoolilahusega, seejärel oli piisavalt 0,5 ml proovilahust, 0,3 ml Folin-Ciocaiteu reagenti ja 10 ml naatriumkarbonaati (10 protsenti). segati ja seejärel reguleeriti maht destilleeritud veega 25 ml-ni. Segul lasti seista temperatuuril 50 ˝C pimedas 1 tund. Neeldumist mõõdeti lainepikkusel 765 nm. Valmistati gallushappe kalibreerimiskõver. Tulemused väljendati gallushappe ekvivalentidena mg proovide kohta.


2.4.3. Isokertsitriini ja kvertsetiin-3-O-gentiobioosi määramine


Isokvertsitriini ja kvertsetiini{{0}}O-gentiobioosi kvantifitseerimine viidi läbi HPLC-UV abil, kasutades viiepunktilist kalibreerimiskõverat (r2=0.999) vahemikus 5–5{{23 }}0 µg/mL. Isokertsitriin ja kvertsetiin-3-O-gentiobioos (vastavalt 5 mg) ja proovid (10 mg) lahustati vastavalt 10 ml metanoolis. Kõik lahused filtriti enne HPLC analüüsi läbi 045-µm polütetrafluoroetüleenfiltrite. Ühendite eraldamiseks läbi pöördfaasikolonni (Thermo synchronize aQ, 4,6 mm × 250 mm, 5 µm) kasutati Waters 600 HPLC pumpa koos Waters 2489 UV/nähtava detektoriga, kiirusega 1 ml/min. Liikuv faas koosnes atsetonitriilist (A) ja 0,1 protsendilisest äädikhappest vees (B). Gradiendi elueerimise programm oli järgmine: 10 protsenti A 0 minuti pärast ja lineaarselt kuni 40 protsenti 40 minuti jooksul, 90 protsenti 41 kuni 50 minuti pärast ja 10 protsenti 51–65 minuti pärast. UV-detektori lainepikkus oli 354 nm ja kolonni temperatuur määrati 25 ˝C. Ühendid identifitseeriti, võrreldes standardite retentsiooniajaga ja kvantifitseeriti, arvutades välisstandarditega kõveraaluse pindala.


2.4.4. Polüsahhariidide (TPS) üldsisalduse määramine


TPS-i sisaldus määrati fenool-väävelhappe meetodil [39,40]. Lühidalt, 80 mg proov lahustati 50 ml destilleeritud vees ja seejärel valk eemaldati metsiku meetodiga (proovilahus:kloroform:N-butüülalkohol=20:4:1). Seejärel lisati saadud viskoossele lahusele neljakordne kogus etanooli, et sadestada toorpolüsahhariidi ekstrakt. Etanoolilahust tsentrifuugiti 617,4 ˆ g juures 30 minutit, et saada sade. Sadet pesti järjestikku etanooli, atsetooni ja eetriga ning lahustati 250 ml destilleeritud vees. Seejärel segati katseklaasis 0,1 ml polüsahhariidi lahust 0,9 ml destilleeritud vee, 1 ml 5% fenoolilahuse ja 5 ml väävelhappega ning hoiti toatemperatuuril 30 minutit. Neeldumist mõõdeti 490 nm juures UNICO-2012 UV-VIS spektrofotomeetriga (Shanghai, Hiina). Loodi glükoosi kalibreerimiskõver ja TPS-i sisaldus määrati kalibreerimiskõvera regressioonivõrrandist. Tulemused väljendati milligrammides glükoosi ekvivalente proovide mg kohta.


2.5. In vitro antioksüdantide testid


OPD, OSK ja OSD antioksüdantne võime tuvastati kolme meetodiga, sealhulgas {{0}}difenüül-2-pikrüülhüdrasüüli (DPPH) eemaldamine, raud(III) redutseeriv antioksüdantne võimsus (FRAP) ja redutseerimisvõime. kirjanduse andmetel [19,41] vähese modifikatsiooniga. Troloxi kasutati positiivse kontrollina ja tulemused väljendati Troloxi ekvivalendi antioksüdantse võimena. Kuna OPD koosnes OSK-st ja OSD-st, kasutati okrakaunade aktiivsete koostisosade valgustamiseks OSK ja OSD kontsentratsiooni OPD ekvivalentidena. Esialgsete testide järgi olid OPD, ODS, OSK kontsentratsioonivahemikud 0.0{{10}}4–0,8, {{17 }}.0{{20}}32–0.64 ja 0.0008 –{{40}},16 mg/ml DPPH testi jaoks; 1.0–4.0, 0,8–3,2 ja {{50}},2–0,8 mg/ml FRAP-testi jaoks; ja vastavalt 0,1–4, 0,08–3,2 ja 0,02–0,8 mg/mL võimsuse vähendamiseks. DPPH testi jaoks proovilahus (50 µL) proportsionaalse vahemikuga (0,004–0,8 mg OPD/mL, 0,0032–0,64 mg OSK/ ml ja 0,0008–0,16 mg OSD/mL) segati DPPH lahusega (100 µL, 1,28 ˆ 10,4 mol/L) vabade radikaalide püüdmise aktiivsuse (A1) mõõtmiseks ja 95% etanooliga (100 µL) kontrolliks. (A2). Destilleeritud vesi (50 µL) segati DPPH lahusega (100 µL) pimekatse (A0) jaoks. Pärast lahuste segamist mõõdeti neeldumist lainepikkusel 517 nm ja hoiti toatemperatuuril 30 minutit. DPPH-radikaali eemaldamise võime arvutati järgmise võrrandi abil:


Flavonoids of Cistanche

Puhastustegevus ( protsenti ){{0}}[ 1-(A1-A2/{A0]* 100 protsenti . (1)


Kolme proovilahuse FRAP (1.0–4.0 mg OPD/mL, 0,8–3,2 mg OSK/mL ja 0,2– {{10}},8 mg OSD/mL) tuvastati vastavalt Beyotime'i Biotehnoloogia Instituudi juhistele. Lahjendatud proovilahus (5 µL) segati FRAP töölahusega (180 µL) ja hoiti 5 minutit temperatuuril 37 ˝C. Seejärel registreeriti reaktsioonisegu neeldumine lainepikkusel 593 nm. Standardkõver valmistati FeSO4 abil, vahemikus 0,15 kuni 1,5 mm. Redutseeriva võimsuse määramisel proovilahus (0,5 ml 0,1–4 mg OPD/mL jaoks, 0.08–3,2 mg OSK/mL) ja 0.02–{{50}},8 mg OSD/mL) segati sama koguse PBS-iga (0,2 mol/L). , pH 6,6) ja kaaliumferritsüaniidi lahusega (1 %, w/v) ning inkubeeriti 20 minutit temperatuuril 50 ˝C. Segule lisati trikloroäädikhape (0,5 ml, 10 protsenti, mass/maht), mida tsentrifuugiti 201,6 ˆ g juures 10 minutit. Pärast seda lahjendati lahuse ülemist kihti (0,5 ml) destilleeritud veega (0,5 ml) ja seejärel lisati sellele raudkloriid (0,1 ml, 0,1 protsenti, mass/maht). Neeldumist mõõdeti lainepikkusel 700 nm.



2.6. OPD, OSK ja OSD väsimusevastane toime ning biokeemiline analüüs


Tuginedes samale põhjusele kui in vitro antioksüdantide testid, kujundati OPD, OSK ja OSD väsimusevastased annused OPD rühmadena (0.75, 1,50 ja 3.{{ 6}} g/kg kehakaalu kohta), OSK rühmad (0,60, 1,20 ja 2,40 g/kg kehakaalu kohta) ja OSD rühmad (0,15, 0,30 ja 0,60 g/kg kehakaalu kohta). Enne katseid toideti hiiri katsekeskkonnas põhitoiduga. Pärast 3-päevast kohanemist jagati 120 hiirt juhuslikult kümnesse rühma: kontrollrühm (CG), 3 OPD, OSK ja OSD rühma. Igas rühmas oli 12 hiirt. Kontrollrühma (CG) töödeldi steriilse veega, teisi rühmi töödeldi vastava ekstraktiga. Vett/ekstrakte manustati hiirtele suukaudselt (kell 8:{24}} hommikul) üks kord päevas 21 päeva jooksul ning avamaa test ja kaaluga ujumise test (WLST) viidi läbi vastavalt 20. ja 21. päeval. Pärast WLST-d eemaldati hiired basseinist, kuivatati paberrätikutega ja pandi tagasi oma esialgsetesse puuridesse. WLST ja avatud välitesti katsetajad pimestati katsetingimuste suhtes ja loomad randomiseeriti enne katsetes osalemist. OSD väsimusvastase toime selgitamiseks taastumise ajal anesteseeriti hiired eetriga ja igast rühmast koguti vereproovid pärast 24 tundi WLST. Seerumiproovid saadi tsentrifuugimisega (896 ˆ g, 15 min, 4 ˝C). Maksad lõigati kiiresti lahti ja pesti jääkülmas soolalahuses. Kõik proovid külmutati vedelas lämmastikus ja hoiti edasiseks analüüsiks temperatuuril 80 ˝C.


2.6.1. Avatud väli test


Et kontrollida OPD, OSK ja OSD mõju liikumisaktiivsusele, hinnati hiiri automaatselt, kasutades meie poolt välja töötatud avatud väljal arvutipõhist juhtimissüsteemi [42,43]. Seade koosneb neljast metallpaagist (läbimõõt 30 cm, kõrgus 40 cm), mille ülaossa on kinnitatud videokaamera. Katsed viidi läbi vaikses ruumis ja aparaati valgustas laes 120 luksi valgusallikas. Üks tund pärast annustamist asetati iga hiir metallpaagi keskele ja lasti 2 minutit vabalt uurida ning tarkvara abil arvutati 4 minuti jooksul läbitud vahemaa, mis on lokomotoorse aktiivsuse indeks. Samaaegselt testiti nelja hiirt.


Cistanche can relieve chronic fatigue syndrome symptoms

2.6.2. Kaaluga ujumise test (WLST)


WLST viidi läbi väsimuse esilekutsumiseks vastavalt eelnevalt kirjeldatud metoodikale, vähese modifikatsiooniga [19, 44, 45]. Üks tund pärast annustamist laaditi hiired pliilehtedega, mis olid kinnitatud nende sabade samasse kohta ja kaalusid ligikaudu 3 protsenti nende kehakaalust. Seejärel sunniti raskusega hiired individuaalselt ujuma silindrilistes retsipientides (läbimõõt 40 cm), mis täideti veega (25 ˘ 1 ˝C) 30 cm sügavuselt. Kurnatus liigitati koordineeritud liigutuste kaotuseks ja 10 sekundi jooksul pinnale tõusmise ebaõnnestumiseks ning ujumisaeg registreeriti kohe. Basseini vesi vahetati pärast iga seanssi.



2.6.3. Väsimusega seotud biokeemiliste parameetrite analüüs


Seerum valmistati vere uurea lämmastiku (BUN) ja vere piimhappe (BLA) määramiseks. Maksad valmistati ette malondialdehüüdi (MDA) ekvivalentide, üldsuperoksiidi dismutaasi (SOD), glutatioonperoksidaasi (GSH-Px) ja maksa glükogeeni (HG) määramiseks. Kõik biokeemilised parameetrid määrati kaubanduslikult saadavate komplektide abil ja kõik protseduurid vastasid tootja juhistele. Lühidalt, HG sisaldus määrati anthrone reagendi abil lainepikkusel 620 nm, samas kui BLA määrati nitrotetrasooliumsinise kloriidi reagendiga 530 nm juures. BUN-i hinnati ureaasi abil glutamaatdehüdrogenaasiga seotud ensüümi meetodil 640 nm juures. GSH-PX aktiivsust mõõdeti seotud süsteemis, mõõtes trifosfopüridiini nukleotiidi (NADPH) vähenemist 340 nm juures. SOD aktiivsuse analüüs põhines selle võimel inhibeerida ksantiin-ksantiini oksüdaasi süsteemist toodetud O2 oksüdatsiooni. Üks SOD aktiivsuse ühik määratleti kui kogus, mis vähendas neeldumist lainepikkusel 450 nm 50 protsenti. MDA ekvivalentide sisaldus määrati 532 nm juures, reageerides TBA-ga, moodustades stabiilse kromofoorse produkti.


2.7. Statistiline analüüs


Keemilised määramised viidi läbi kolmes korduses ja tulemused väljendati keskmiste väärtustena. Antioksüdantide testid viidi läbi kolmes korduses ja tulemused väljendati keskmiste väärtustena ˘ standardhälvetena. Käitumist ja biokeemilisi andmeid analüüsiti SPSS-i statistikatarkvaraga (SPSS 19.0 Inc., Chicago, IL, USA). Rühmadevaheliseks võrdluseks kasutati ühesuunalist dispersioonanalüüsi (One-way ANOVA) koos vähima olulise erinevuse (LSD) testiga. P väärtusi, mis olid väiksemad kui 0,05, peeti statistiliselt oluliseks. Tulemused väljendati kui keskmine ˘ keskmise standardviga (SEM).


3. Tulemused


3.1. OSK ja OSD keemiline analüüs


Nagu on näidatud tabelis 1, olid TF ja TP sisaldus OSD-s palju suurem kui OSK-s, samal ajal oli TPS-i sisaldus OSD-s palju madalam kui OSK-s. Isokvertsitriini ja kvertsetiin-3-O-gentiobioosi ühendeid tuvastati ainult OSD-s, kasutades HPLC-d (näidatud joonisel 1).


image

image

3.2. OPD, OSK ja OSD in vitro antioksüdantne aktiivsus


Nagu on näidatud tabelis 2, tõestati OPD ja OSD antioksüdantset aktiivsust DPPH, FRAP ja redutseeriva võimsuse analüüsidega ning OSD näitas palju paremat antioksüdantset aktiivsust kui OPD. Siiski näitas OSK nõrka mõju võimsuse vähendamisel ja DPPH- ja FRAP-testides seda ei olnud. Seetõttu oli OSD antioksüdantse aktiivsuse jaoks okra kaunade aktiivne osa



image


3.3. Mõju OPD, OSK ja OSD lokomotoorsele aktiivsusele


Hiirte lokomotoorset aktiivsust testiti 20ndal päeval pärast OSD-ravi. Nagu on näidatud joonisel 2, vähendas OSD-rühmade suur annus (0,6 g/kg) oluliselt hiirte kogukaugust uudses keskkonnas võrreldes kontrollrühmaga (p=0). 04). Siiski ei täheldatud olulist mõju teiste rühmade kogukaugusele. Need tulemused näitasid, et okra kaunadel ja seemnetel ei olnud kesknärvisüsteemile ergastavat toimet. Lisaks võib järeldada, et OSD-l võib olla suurte annuste (0,6 g/kg) korral kerge rahustav toime.



image


3.4. Mõju OPD, OSK ja OSD (WLST) ujumisajale


Nagu on näidatud joonisel 3, võib pärast 21-päevast OPD, OSK ja OSD lisamist OPD (3 g/kg) ja OSD (0,3 ja 0,6 g/kg) ravi. pikendab märgatavalt hiirte ujumisaega, mis ulatus kuni 57,84 ˘ 12,37, 46,51 ˘ 5,82 ja 70.05 ˘ 12.07 min (p < 0="" .05,="" p="">< 0.05="" ja="" p="">< 0.{{70}}1),="" on="" sellest="" palju="" pikem="" kontrollrühmas="" (15,20="" ˘="" 1,49="" min).="" samal="" ajal="" ei="" näidanud="" opd="" (0,75="" ja="" 1,5="" g/kg),="" osd="" (0,15="" g/kg)="" ja="" osk="" (0,6,="" 1,2="" ja="" 2,4="" g/kg)="" ravi="" hiirtel="" ujumisaja="" olulist="" pikenemist="" (="" 14,73="" ˘="" 1,28,="" 23,96="" ˘="" 3,70="" ja="" 27,34="" ˘="" 5,72="" min,="" võrreldes="" kontrollrühmaga="" (vastavalt="" p="0.897," p="0.398" ja="" p="0.268)" ),="" kuid="" osd="" (0,15="" g/kg)="" näitas="" ujumisaja="" pikenemise="" trendi,="" kuid="" ei="" näidanud="" olulist="" erinevust="" (p="0,225)." veelgi="" enam,="" ühesuunalised="" anova-d="" näitasid="" olulisi="" erinevusi="" hiirte="" ujumisaja="" osas="" rühmade="" vahel="" (f="" (3,="" 40)="12,839," p="">< 0,001).="" osd="" suure="" annuse="" rühma="" (0,6="" g/kg)="" ujumisaeg="" erines="" märgatavalt="" keskmise="" annuse="" rühmaga="" (0,3="" g/kg)="" (p="0,019)" ja="" sama="" tulemus.="" vahemikus="" 0.3-g/kg="" kuni="" 0.15-g/kg="" rühmades="" (p="0.034)," võib="" osd="" demonstreerimine="" pikendada="" ammendavat="" ujumisaega="" annusest="" sõltuval="">

image

3.5. OSD mõju biokeemilistele parameetritele hiirtel pärast kaaluga ujumistesti


Kaalukoormatud ujumistesti tulemus näitas, et OSD võib hiirte ujumisaega märkimisväärselt pikendada; aga OSK-ravi ei näidanud hiirtel ujumisaja olulist pikenemist. Seetõttu määrati biokeemilised parameetrid ainult OSD-ga ravitud hiirtel.


3.5.1. OSD mõju BLA-le, BUN-ile ja HG-le


BLA, BUN ja HG sisu erinevus rühmade vahel oli märkimisväärne (BLA: F (3, 40)=8.257, p < {{10}}.{{="" 20}}01;="" bun:="" f="" (3,="" 40)="8.596," p="">< 0.{{3{{32="" }}}}01;="" hg:="" f="" (3,="" 36)="6,960," p="">< 0.{{40}}="" 01).="" nagu="" on="" näidatud="" tabelis="" 3,="" olid="" bla="" ja="" bun="" tasemed="" osd="" rühmades="" 24="" tundi="" pärast="" raskusega="" ujumistesti="" oluliselt="" madalamad="" kui="" kontrollrühmas="" (bla:="" p="">< 0.05,="" p="">< 0,05="" ja="" p="">< 0,01="" vastavalt="" 0,15,="" 0,3="" ja="" 0,6="" g/kg="" puhul;="" bun:="" p="">< 0,01="" 0,15,="" 0,3="" ja="" 0,6="" g/kg="" puhul).="" hg="" tasemed="" osd="" rühmades="" olid="" kontrollrühmaga="" võrreldes="" oluliselt="" kõrgemad="" (p="">< 0,05,="" p="">< 0,01="" ja="" p="">< 0,01="" vastavalt="" 0,15,="" 0,3="" ja="" 0,6="" g/kg="">


image


3.5.2. OSD mõju GSH-PX-ile, MDA-le ja SOD-ile


SOD, GSH-PX tegevuste ja MDA ekvivalendi erinevused rühmade vahel olid märkimisväärsed (MDA: F (3, 40)=8.355, p < 0.{18}="" }01;="" sod:="" f="" (3,="" 42)="9.876," p="">< 0.001;="" gsh-px:="" f="" (="" 3,="" 40)="7.959," p="">< 0.001).="" nagu="" on="" näidatud="" tabelis="" 4,="" oli="" mda="" ekvivalent="" osd="" rühmades="" pärast="" raskusega="" ujumistesti="" oluliselt="" madalam="" kui="" kontrollrühmal="" (p="">< 0.01,="" p="">< 0.{101}="" {45}}1="" ja="" p="">< 0.01="" 0,15,="" 0,3="" ja="" 0,6="" g/kg="" puhul="" vastavalt).="" lisaks="" olid="" sod="" ja="" gsh-px="" tasemed="" osd="" rühmades="" märkimisväärselt="" kõrgemad="" kui="" kontrollrühmas="" (sod:="" p="">< 0,01,="" p="">< 0,01="" ja="" p="">< 0,01;="" gsh-px:="" p="">< 0,05,="" p="">< 0,01="" ja="" p="">< 0,01="" 0,01="" 0,15,="" 0,3="" ja="" 0,6="" g/kg="">


image



4. Arutelu


Ebaküps okrakaun on tervislik köögivili, mida tarbitakse enamikus maailma piirkondades. Varasemad uuringud on teatanud, et ebaküpsetel okra kaunadel oli antioksüdantne ja väsimusvastane toime [25,46], kuid selle aktiivsed koostisosad ja võimalikud mehhanismid ei olnud selged. Okrakaunade antioksüdantse ja väsimusvastase toime uurimiseks jagasime värsked okrakaunad seemneteks ja kestadeks ning ekstraheerimise teel saime OSD, OSK ja OPD, seejärel OSD, OSK ja OSD antioksüdantse aktiivsuse in vitro. OPD tuvastati DPPH, FRAP ja vähendavat jõudu ning OSD, OSK ja OPD väsimusvastast toimet in vivo uuriti raskusega ujumistestiga. Meie tulemused näitasid, et OSD ei omanud mitte ainult head antioksüdantset aktiivsust in vitro, vaid pikendas ka hiirte ujumisaega märkimisväärselt võrreldes kontrollrühmaga, samas kui OSK ei näidanud mõlemas toimet. Ujumise ammendav aeg on otsene mõõt, mis peegeldab objektiivselt keha treeningvastupidavust [47] ja treeningvastupidavuse edendamine on korrelatsioonis pikema ujumisajaga. Seetõttu tuleks OPD antioksüdant ja väsimusevastane osa tuletada selle seemnetena. Veelgi enam, selles uuringus võib OSD (0.3{{10}}, 0,60 g/kg) hiirte ujumisaega märkimisväärselt pikendada ja okra seemnete ekvivalentdoosid inimesele võivad olla 0,9 ~1,8 g/kg (4,5-8,9 g/kg okra kaunade puhul) vastavalt kehapinnale [48]. Need annused on saavutatavad köögivilja portsjoniga. Okra aktiivsed koostisosad on aga endiselt ebaselged. Käesoleva uuringu keemilise analüüsi tulemused näitasid, et polüfenoolide sisaldus OSD-s on umbes 24 korda suurem kui OSK-s, kuid polüsahhariidide sisaldus OSD-s on palju madalam kui OSK-s (tabel 1).


Moreover, total flavonoids content and two compounds of isoquercitrin and quercetin-3-O-gentiobiose were only detected in OSD and were not detected in OSK (Table 1). It has been proven that okra seeds contained epigallocatechin oligomers, catechin, and its oligomers, isoquercitrin, quercetin-3-O-gentiobiose, and other catechin and quercetin derivatives [27–29]. Furthermore, previous studies have reported that polyphenols like catechin and flavonoids like quercetin possess anti-fatigue activity due to their antioxidant activity [35,36,49–51]. Therefore, we deduced that polyphenols and flavonoids of OSD might be the antioxidant and anti-fatigue constituents. As for the reason that the effect of OPD was less than the effect of OSD, it might be that the high content of mucilaginous polysaccharides can affect the assimilation of polyphenols and flavonoids in OPD, which needs to be researched in the future. When it comes to the anti-fatigue mechanism of OSD, an open-field test showed that OSD had no central nerve stimulation in mice, which proved that the anti-fatigue of OSD was not through central excitation. Apart from this, it was likely that OSD possessed a slight sedative effect in high doses (>0,6 g/kg). Selle tõestamiseks on vaja rohkem andmeid, kuna liikumisvõime vähene vähenemine võib olla tingitud ka vähenenud motivatsioonist uurida või võimalikku ärevust tekitavat mõju. Kuid selles uuringus kasutati avatud välja testi, et välistada võimalus, et OSD avaldas väsimusevastast toimet kesknärvisüsteemi ergastava toime kaudu, ja rohkem andmeid OSD rahustava toime näitamiseks ei olnud. Lisaks on tõestatud, et füüsilise väsimuse peamiseks komponendiks on ammendava treeningu ajal tekkivad liigsed reaktiivsed oksiidiliigid (ROS). Liigne ROS võib mõjutada erinevaid metaboolseid ja ensümaatilisi protsesse, rünnates polüküllastumata rasvhappeid, et toota MDA-d ja põhjustada biokilede talitlushäireid [13,52].


Seetõttu ei mõjuta ROS mitte ainult otseselt ensümaatilist aktiivsust energiavarustuse ja ergastus-kontraktsiooni sidumisprotsesside ajal, vaid kiirendab ka jäätmete, sealhulgas BLA ja BUN, kogunemist. Veelgi enam, BLA suurenev tase on oluline väsimuse põhjus, kuna kudede pH langeb, ja suurem BUN-i sisaldus viitab väiksemale treeningvastupidavusele. Seetõttu võib see mitte ainult suurendada treeningvastupidavust, vaid ka leevendada füüsilist väsimust ja soodustada taastumist, soodustades ensümaatiliste antioksüdantsüsteemide, sealhulgas SOD ja GSH-PX, aktiivsust või täiendada antioksüdante. Käesolevas uuringus näitas 24 tundi pärast ujumistesti läbi viidud biokeemiliste parameetrite määramine, et OSD-ravi vähendas oluliselt BLA ja BUN taset veres, MDA taset maksas ning suurendas HG, SOD ja GSH taset veres. maksa väsimuse taastumise ajal, mis tõestas, et OSD võib leevendada füüsilist väsimust ja soodustada taastumist. Arvestades meie uuringutes in vitro antioksüdantide testide tulemusi, võib järeldada, et OSD mängis väsimusevastast toimet mitte ainult vabade radikaalide otsese eemaldamise kaudu, vaid ka antioksüdantsete ensüümide, sealhulgas SOD ja GSH-PX, aktiivsuse soodustamise kaudu.


23

Väsimuse vähendamiseks klõpsake Cistanche Uk pilti

5. Kokkuvõtted


Kokkuvõtteks näitas käesolev uuring, et OSD on okra väsimusevastane osa ning polüfenoolid ja flavonoidid olid tõenäoliselt OSD aktiivsed koostisosad nende antioksüdantse toime tõttu. Väsimus on aga keeruline nähtus ja käesolev uuring okra väsimusevastaste mehhanismide kohta on väga esialgne. Täpsemad üksikasjad vajavad veel valgustamist tulevikus.




Viited


1. Chaudhuri, A.; Behan, PO Väsimus neuroloogiliste häirete korral. Lancet 2004, 363, 978–988. [CrossRef]

2. Belluardo, N.; Westerblad, H.; Mudó, G.; Casabona, A.; Bruton, J.; Caniglia, G.; Pastoris, O.; Grassi, F.; Ibáñez, CF Neuromuskulaarse ristmiku lahtivõtmine ja lihaste väsimus hiirtel, kellel puudub neurotrofiin-4. Mol. Kamber. Neurosci. 2001, 18, 56–67. [CrossRef] [PubMed]

3. Tharakan, B.; Dhanasekaran, M.; Brown-Borg, HM; Manyam, BV Trichopus zeylanicus võitleb väsimusega ilma amfetamiini mimeetilise toimeta. Phytother. Res. PTR 2006, 20, 165–168. [CrossRef] [PubMed]

4. Huang, L.-Z.; Huang, B.-K.; Jah, Q.; Qin, L.-P. Bioaktiivsuse järgi juhitav fraktsioneerimine acanthopanax senticosus'e väsimusvastase toime saavutamiseks. J. Ethnopharmacol. 2011, 133, 213–219. [CrossRef] [PubMed]

5. Pawlikowska, T.; Chalder, T.; Hirsch, SR; Wallace, P.; Wright, DJ; Wessely, SC Rahvastikupõhine väsimuse ja psühholoogilise stressi uuring. BMJ 1994, 308, 763–766. [CrossRef] [PubMed]

6. Li, G. 2823 terve inimese väsimuse olukord, mida tuleb kontrollida, ja selle seos füüsiliste näitajatega; Pekingi Hiina Meditsiini Ülikool: Peking, Hiina, 2013.

7. Uehata, T. Karoshi, surm ületöötamisest. Nippon Rinsho Jpn. J. Clin. Med. 2005, 63, 1249–1253.

8. Layzer, RB Lihaste ainevahetus väsimuse ja töö ajal. Bailliere'i kliin. Endokrinool. Metab. 1990, 4, 441–459. [CrossRef]

9. Hultman, E.; Bergstrom, M.; Spiet, LL; Söderlund, K. Energia ainevahetus ja väsimus; Inimese kineetika: Champaign, IL, USA, 1990.

10. Glaister, M. Mitmekordne sprinditöö: füsioloogilised reaktsioonid, väsimuse mehhanismid ja aeroobse vormi mõju. Spordimed. 2005, 35, 757–777. [CrossRef] [PubMed]

11. Nozaki, S.; Mizuma, H.; Tanaka, M.; Jin, G.; Tahara, T.; Mizuno, K.; Yamato, M.; Okuyama, K.; Eguchi, A.; Akimoto, K.; et al. Tiamiintetrahüdrofuraandisulfiid parandab rottidel energia metabolismi ja füüsilist jõudlust füüsilise väsimuse koormuse ajal. Nutr. Res. 2009, 29, 867–872. [CrossRef] [PubMed]

12. McCully, KK; Authier, B.; Olive, J.; Clark, BJ, 3. Lihaste väsimus: ainevahetuse roll. Saab. J. Appl. Physiol. 2002, 27, 70–82. [CrossRef] [PubMed]

13. Carter, GT väsimus. In Encyclopedia of the Neurological Sciences, 2. väljaanne; Aminoff, MJ, Daroff, RB, toim.; Academic Press: Oxford, UK, 2014; lk 276–280.

14. Filler, K.; Lyon, D.; Bennett, J.; McCain, N.; Elswick, R.; Lukkahatai, N.; Saligan, LN Mitokondriaalse düsfunktsiooni ja väsimuse ühendus: kirjanduse ülevaade. BBA kliin. 2014, 1, 12–23. [CrossRef] [PubMed]

15. Lin, Y.; Liu, H.-L.; Fang, J.; Yu, C.-H.; Xiong, Y.-K.; Yuan, K. Kvertsetiin-3-O-gentiobioosi väsimusevastane ja vasoprotektiivne toime oksüdatiivsele stressile ja vaskulaarse endoteeli düsfunktsioonile, mis on põhjustatud vastupidavuse ujumisest rottidel. Food Chem. Toksikool. 2014, 68, 290–296. [CrossRef] [PubMed]

16. Edwards, RH Inimese lihaste funktsioon ja väsimus. Ciba leitud. Sümp. 1981, 82, 1–18. [PubMed]

17. Gupta, A.; Vij, G.; Sharma, S.; Tirkey, N.; Rishi, P.; Chopra, K. Kurkumiin, polüfenoolne antioksüdant, nõrgendab kroonilise väsimuse sündroomi hiire veekümblusstressi mudelis. Immunobiology 2009, 214, 33–39. [CrossRef] [PubMed]

18. Wu, CY; Chen, R.; Wang, XS; Shen, B.; Yue, W.; Wu, Q. Euryale Ferox salisb’i seemnekesta fenoolekstrakti antioksüdant ja väsimuse vastane toime. Ja kolme fenoolühendi identifitseerimine lc-esi-ms/ms järgi. Molecules 2013, 18, 11003–11021. [CrossRef] [PubMed]

19. Jiang, D.-Q.; Guo, Y.; Xu, D.-H.; Huang, Y.-S.; Yuan, K.; Lv, Z.-Q. Mooruspuu mahla puhastamise (MJP) ja mooruspuu pressimisjääkide puhastamise (MMP) antotsüaniinide antioksüdant ja väsimusevastane toime erinevatest Hiina mooruspuuviljasortidest. Food Chem. Toksikool. 2013, 59, 1–7. [CrossRef] [PubMed]

20. Swamy, MSL; Naveen, S.; Singsit, D.; Naika, M.; Khanum, F. Granaatõuna koorest ekstraheeritud polüfenoolide väsimusevastane toime. Int. J. Integr. Biol. 2011, 11, 69–72.

21. Messing, J.; Thole, C.; Niehues, M.; Ševtsova, A.; Glocker, E.; Boren, T.; Hensel, A. Abelmoschus esculentus (Okra) ebaküpsete puuviljade ekstrakti kleepumisvastased omadused helicobacter pylori adhesiooni vastu. PLoS ONE 2014, 9, e84836. [CrossRef] [PubMed]

22. Tongjaroenbuangam, W.; Ruksee, N.; Chantiratikul, P.; Pakdeenarong, N.; Kongbuntad, W.; Govitrapong, P. Kvertsetiini, rutiini ja okra (Abelmoschus esculentus Linn.) neuroprotektiivne toime deksametasooniga töödeldud hiirtel. Neurochem. Int. 2011, 59, 677–685. [CrossRef] [PubMed]

23. Fan, S.; Zhang, Y.; Sun, Q.; Yu, L.; Li, M.; Zheng, B.; Wu, X.; Yang, B.; Li, Y.; Huang, C. Okra ekstrakt alandab kõrge rasvasisaldusega dieedist põhjustatud rasvunud C57Bl/6 hiirtel vere glükoosisisaldust ja seerumi lipiide. J. Nutr. Biochem. 2014, 25, 702–709. [CrossRef] [PubMed]

24. Wang, H.; Chen, G.; Ren, D.; Yang, ST Okra hüpopolipideemiline aktiivsus on vahendatud lipogeneesi pärssimise ja kolesterooli lagunemise ülesreguleerimise kaudu. Phytother. Res. PTR 2014, 28, 268–273. [CrossRef] [PubMed]

25. Hu, L.; Yu, W.; Li, Y.; Prasad, N.; Tang, Z. Okra seemne ekstrakti ja selle peamiste koostisosade antioksüdantne toime süsiniktetrakloriidi poolt vigastatud roti hepatotsüütidel. BioMed Res. Int. 2014, 2014, 341291. [CrossRef] [PubMed]

26. Yang, Y.; Jin, Z.; Mao, P.; Jin, J.; Huang, J.; Yang, M. Uuring okraekstraktide väsimusevastase toime kohta. Lõug. J. Mod. Rakendus Pharm. 2012, 29, 4. [CrossRef]

27. Arapitsas, P. Okra seemnetest ja kestadest pärit polüfenoolühendite identifitseerimine ja kvantifitseerimine. Food Chem. 2008, 110, 1041–1045. [CrossRef] [PubMed].

28. Sengkhamparn, N.; Sagis, LMC; de Vries, R.; Schols, HA; Sajjaanantakul, T.; Voragen, AGJ Okra (Abelmoschus esculentus (L.) Moench) pektiinide füüsikalis-keemilised omadused. Food Hydrocoll. 2010, 24, 35–41. [CrossRef]

29. Karakoltsidis, PA; Constantinides, SM Okra seemned: uus valguallikas. J. Agric. Food Chem. 1975, 23, 1204–1207. [CrossRef] [PubMed]

30. Zhou, Y.; Jia, X.; Shi, J.; Xu, Y.; Jing, L.; Jia, L. Abelmoschus esculentuse kaks uut pentatsüklilist triterpeeni. Helv. Chim. Acta 2013, 96, 533–537. [CrossRef]

31. Jia, L.; Zhong, LJ; Li, HF; Jing, LL Keemilised koostisosad Abelmoschus esculentuse veefraktsioonis. Lõug. Tradit. Ürt. Narkootikumid 2011, 42, 2186–2188.

32. Jia, L.; Guo, M.; Li, D.; Jing, L. Abelmoschus esculentus II petrooleetri osa keemilised koostisosad. Zhongguo Zhong Yao Zazhi 2011, 36, 891–895. [CrossRef] [PubMed]

33. Jia, L.; Li, HF; Jing, LL Abelmoschus esculentus L. Chin N-butanooli ekstrakti keemilised koostisosad. Tradit. Ürt. Narkootikumid 2010, 41, 1771–1773.

34. Jia, L.; Li, D.; Jing, LL; Guo, MM Abelmoschus esculentuse petrooleetri osa keemiliste koostisosade uuringud. J. Chin. Med. Mater. 2010, 33, 1262–1265.

35. Kobori, M.; Takahashi, Y.; Akimoto, Y.; Sakurai, M.; Matsunaga, I.; Nishimura, H.; Ippoushi, K.; Oike, H.; Ohnishi-Kameyama, M. Krooniline kõrge kvertsetiini tarbimine vähendab oksüdatiivset stressi ja kutsub esile antioksüdantsete ensüümide ekspressiooni hiirtel maksas ja vistseraalsetes rasvkudedes. J. Funktsioon. Toidud 2015, 15, 551–560. [CrossRef]

36. Nogueira, L.; Ramirez-Sanchez, I.; Perkins, GA; Murphy, A.; Taub, PR; Ceballos, G.; Villarreal, FJ; Hogan, MC; Malek, MH (-)-epikatehiin suurendab hiire lihaste väsimuskindlust ja oksüdatsioonivõimet. J. Physiol. 2011, 589, 4615–4631. [CrossRef] [PubMed] .

37. Laboriloomade hooldamise ja kasutamise juhendi uuendamise komisjon. Laboratoorsete loomade hooldamise ja kasutamise juhend, 8. trükk; National Academies Press: Washington, DC, USA, 2011.

38. Liao, H.; Dong, W.; Shi, X.; Liu, H.; Yuan, K. Abelmoschus esculentus L. Pharmacogn. ekstraktide aktiivsete komponentide ja antioksüdantse toime analüüs ja võrdlus. Mag. 2012, 8, 156–161. [PubMed]

39. Zhu, Z.; Li, N. Uuring okra polüsahhariidi sisalduse määramise meetodi kohta. Jiangsu põllumajandus. Sci. 2012, 40, 2. [CrossRef]

40. DuBois, M.; Gilles, KA; Hamilton, JK; Rebers, PA; Smith, F. Kolorimeetriline meetod suhkrute ja nendega seotud ainete määramiseks. Anal. Chem. 1956, 28, 350–356. [CrossRef]

41. Luo, J.; Li, L.; Kong, L. Fenüülpropanoidglütseriidide ettevalmistav eraldamine Lilium lancifoliumi sibulatest kiire vastuvoolukromatograafia abil ja nende antioksüdantse toime hindamine. Food Chem. 2012, 131, 1056–1062. [CrossRef]

42. Dang, H.; Chen, Y.; Liu, X.; Wang, Q.; Wang, L.; Jia, W.; Wang, Y. Stria terminalis voodituum: anatoomia, füsioloogia, voodi tuuma funktsioonid. Prog. Neuro-Psychopharmacol. Biol. Psühhiaatria 2009, 33, 1417–1424. [CrossRef] [PubMed]

43. Wang, Q.; Mai, WL; Li, YH; Chen, SG; Wang, LW; Feng, ZQ; Zhu, YF; Liu, XM Arvutipõhise pilditöötlussüsteemi loomine loomade liikumisaktiivsuse ja rahustava toime kontrollimiseks kaixini pulbri abil. Lõug. Tradit. Ürt. Narkootikumid 2009, 40, 1773–1779.

44. Qi, B.; Liu, L.; Zhang, H.; Zhou, G.-X.; Wang, S.; Duan, X.-Z.; Bai, X.-Y.; Wang, S.-M.; Zhao, D.-Q. Panax quinquefolium'ist eraldatud valkude väsimusvastane toime. J. Ethnopharmacol. 2014, 153, 430–434. [CrossRef] [PubMed]

45. Tan, W.; Yu, KQ; Liu, YY; Ouyang, MZ; Yan, MH; Luo, R.; Zhao, XS Rehmannia preparata radixist ekstraheeritud polüsahhariidide väsimusvastane toime. Int. J. Biol. Macromol. 2012, 50, 59–62. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​Wang, J.; Zhou, J.; Tang, G. Uuring Okra väsimusvastase toime kohta. Lõug. J. Mod. Rakendus Pharm. 2003, 20, 2. [CrossRef]

47. Contarteze, RV; Manchado Fde, B.; Gobatto, CA; de Mello, MA Stress biomarkerid rottidel, kes allusid ujumis- ja jooksulindil jooksuharjutustele. Comp. Biochem. Physiol. A Mol. Integr. Physiol. 2008, 151, 415–422. [CrossRef] [PubMed]

48. Xu, SY Farmakoloogia eksperimentaalne metoodika; Rahvameditsiini kirjastus: Peking, Hiina, 2002.

49. Zanwar, AA; Badole, SL; Shende, PS; Hegde, MV; Bodhankar, SL Katehhiini antioksüdantne roll tervises ja haigustes. In Polüfenoolid inimeste tervises ja haigustes; Watson, RR, Preedy, VR, toim.; Academic Press: San Diego, CA, USA, 2014; lk 267–271.

50. Jadhav, SB; Singhal, RS Laccase – kummiaraabia konjugaat katehhiini vees lahustuva oligomeeri valmistamiseks, millel on tõhustatud antioksüdantne toime. Food Chem. 2014, 150, 9–16. [CrossRef] [PubMed]

51. Liudong, F.; Feng, Z.; Daoxing, S.; Xiufang, Q.; Xiaolong, F.; Haipeng, L. Rohelise tee polüfenoolide antioksüdantsete omaduste ja väsimusevastase toime hindamine. Sci. Res. Esseed 2011, 6, 2624–2629.

52. Sina, L.; Zhao, M.; Regenstein, JM; Ren, J. Papaiini seedimisega valmistatud peptiidide (misgurnus anguillicaudatus) in vitro antioksüdantne aktiivsus ja in vivo väsimusvastane toime. Food Chem. 2011, 124, 188–194. [CrossRef]


Ju gjithashtu mund të pëlqeni