Cistanche Tubulosa hüperglükeemiline ja hüpolipideemiline toime

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

Cistanche tubulosaiini II tüüpi diabeetiliste db/db hiirte hüperglükeemilised ja hüpolipideemilised toimed

Wen-Ting Xiong jt

Abstraktne

Etnofarmakoloogiline tähtsus:Kuivatatud mahlane varsCistanchetubulosa (Schenk) R. Wight on traditsioonilise hiina meditsiini diabeedi retseptide üks komponent. Seni pole aga olnud ühtegi kaasaegset teaduslikku aruannet, mis kinnitaks seda traditsioonilist väidet Cistanche liikide kohta. Seega uurisime selle mõjuCistanchetubulosaglükoosi homöostaasi ja seerumi lipiidide kohta isastel BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J (db/db) hiirtel, 2. tüüpi diabeedi mudel.

Materjalid ja meetodid:Verbaskosiidi ja ehhinakosiidi sisaldusCistanchetubulosapulbrit hinnati HPLC abil. Üldine fenoolisisaldus, polüsahhariidide sisaldus ja antioksüdantne aktiivsusCistanchetubulosaSamuti hinnati pulbrit. Seejärel erinevad annusedCistanche tubulosa(vastab 120,9, 72,6 või 24,2 mg verbaskosiidi/kg) manustati suukaudselt üks kord päevas 45 päeva jooksul isastele db/db hiirtele. Tavaliste kontrollidena kasutati vanusega sobivaid db / þ hiiri. Katse ajal mõõdeti kehakaalu, tühja kõhu veresuhkru, söögijärgse vere glükoosisisalduse ja insuliini taluvuse teste. Ohverdamise ajal koguti verd insuliinitaseme, insuliiniresistentsuse (HOMA-IR) homöostaatilise mudeli ning üldkolesterooli, triglütseriidide, HDL-c, LDL-c ja VLDL-c taseme mõõtmiseks; glükogeeni taseme mõõtmiseks koguti maksa ja lihaseid.

Tulemused: Cistanchetubulosapärssis märkimisväärselt kõrgenenud tühja kõhu veresuhkru ja söögijärgset vere glükoosisisaldust, parandas insuliiniresistentsust ja düslipideemiat ning pärssis kehakaalu langust indb / db hiirtel. Kuid,Cistanchetubulosaei mõjutanud oluliselt seerumi insuliini taset ega maksa ja lihaste glükogeeni taset.

Järeldus:See uuring annab teaduslikke tõendeid traditsioonilise kasutamise kohtaCistanchetubulosadiabeedi raviks, mis viitab selleleCistanchetubulosasellel on potentsiaal areneda funktsionaalseks toidu koostisosaks või ravimiks hüperglükeemia vältimiseks ja hüperlipideemia raviks.

Märksõnad:Cistanchetubulosa, II tüüpi diabeet,Hüperglükeemiline toime, hüpolipideemiline toime

1. Sissejuhatus

Suhkurtõbi (DM) on progresseeruv ja keeruline metaboolne häire, mida iseloomustab peamiselt ebanormaalselt kõrge veresuhkru tase (hüperglükeemia) (Tiwari ja Rao, 2002; Stumvollet al., 2005; Nathan et al., 2009). Ligikaudu 90 protsendil 347 miljonist diabeediga patsiendist kogu maailmas on II tüüpi (insuliinsõltumatu) DM (Danaei et al., 2011). Kolm peamist metaboolset defekti põhjustavad järjekindlalt hüperglükeemiat II tüüpi DM-ga patsientidel: puudulik insuliini sekretsioon, kõrge maksa glükoosisisaldus ja insuliiniresistentsus (Bavenholm et al., 2001). II tüüpi DM võib lühendada oodatavat eluiga ja kujutab endast märkimisväärset meditsiinilist ja majanduslikku koormust (Gakidou et al., 2011)

2. tüüpi DM patogenees on mitmefaktoriline ja seda on seostatud nii geneetiliste kui ka elustiili teguritega (Stumvoll et al., 2005). Elustiili sekkumised kombineerituna suukaudse manustamisegaanti-hüperglükeemilineravimid on tüüpiline 2. tüüpi DM ravimeetod. Suukaudsed ravimidexert ananti-hüperglükeemilinetoime, parandades kolme peamist hüperglükeemiat põhjustavat metaboolset defekti või vähendades söögijärgset glükeemilise taseme tõusu, takistades süsivesikute seedimist ja imendumist soolestikus.

Kuigi enamiku 2. tüüpi DM-patsientide puhul on meditsiiniliseks raviks tunnustatud mitmeid tõhusate ravimite klasse, on mitmel neist sünteetilistest ravimitest tõsised kõrvaltoimed. Näiteks rosiglitasoon ja pioglitasoon suurendavad müokardiinfarkti, kongestiivse südamepuudulikkuse ja perifeerse turse esinemissagedust ning on seotud suurenenud kantserogeneesi ja isegi surma riskiga pärast pikaajalist kasutamist (Nissen ja Wolski, 2007; Zhang et al., 2007; Home et al., 2009). Seetõttu on kriitiline vajadus alternatiivsete ainete leidmiseks, mis avaldaksid antihüperglükeemilist toimet, kuid avaldaksid vähem kõrvaltoimeid. Võrreldes looduslikult saadud sünteetiliste kemikaalidegaantihüperglükeemilineaineid, nagu ravimtaimed ja traditsioonilised ravimid, on kasutatud pikka aega ja need võivad olla üldiselt ohutud potentsiaalsed uudsete ainete allikad.antihüperglükeemilineravimid (Yeh et al., 2003).

Vastavalt Hiina farmakopöale (Chinese Pharmacopoeia Commission, 2010) kasutatakse orobanchaceae perekonda kuuluvat parasiittaimede perekonda Cistanche'i tavaliselt traditsioonilise ravimina ravihäirete ja viljatuse raviks. Nagu on kirjas Hiina meditsiini raamatutes, nagu BenCao TuJing ja Nature ofDrug, on Cistanche perekonda ka keedetud lambaliha, kartuli või riisiga, et saada toniseerivat toitu, et ravida ülepingest põhjustatud kahjustusi sadade aastate jooksul, mis viitab sellele, et perekond Cistanche on ohtlik võtta suu kaudu.

Traditsioonilises hiina meditsiinis nimetatakse DM-i "Xiao Ke" sümptomiks ja seda on sajandeid ravitud Hiina ravimtaimedega. Cistanche liigi kuivatatud mahlakas vars on traditsiooniliselt kasutatud üheksa diabeedivastase retsepti ("Xiao Ke Fang") komponendina traditsioonilises hiina meditsiini raamatus Sengji Zonglu. Kuid siiani ei ole olnud ühtegi kaasaegset teaduslikku aruannet, mis kinnitaks seda traditsioonilist väidet tsistanchesi liikide kohta.

Cistanchetubulosa(Schenk) R. Wighti, Cistanche'i liiki, mis parasiteerib Tamarixi taime – mida kasvatatakse peamiselt Taklamakani kõrbes – juurtes, on hiljuti kasutatud lahustuva tee tootmiseks, mida kasutatakse funktsionaalse toiduna (DaZhongWeiShengBao, 2010; Baidu Pedia, 2011) .

Cistanchetubulosasisaldab märkimisväärses koguses fenüületanoidglükosiide (PhG), iridoide, lignaane, alditoole, oligosahhariide, polüsahhariide ja lenduvaid ühendeid, nagu palmitiinhape ja linoolhape (Song et al., 2000; Jiang ja Tu, 2009). Arvatakse, et Cistanche liikide peamised aktiivsed komponendid on PhG-d (Xie et al., 2006; Jiang ja Tu, 2009).Cistanchetubulosaja selle komponendid, nagu PhG-d, polüsahhariidid ja polüfenoolid, on avaldanud head antioksüdatiivset toimet (Denget al., 2004; Pellati et al., 2004; Frum et al., 2007; Sui et al., 2011; Wang et al., 2011), antihüpertensiooni (Ahmad et al., 1995) ja hüpokolesterooli (Shimoda jt, 2009) mõju. Paljud aruanded on näidanud, et PhG-d, polüsahhariidid ja polüfenoolid avaldavad oma mõjuantihüperglükeemilineavaldavad või avaldavad soodsat mõju 2. tüüpi DM-le vabade radikaalide eemaldamise ja glükoosist põhjustatud oksüdatiivse stressi moduleerimise kaudu (Pinto et al., 2010; Saltiel, 2001; Gulati jt, 2012). Need komponendid ja bioaktiivsusedCistanchetubulosaviitavad sellele, et seda võib potentsiaalselt kasutada 2. tüüpi DM raviks. Kuna puuduvad aruanded, mis kirjeldaksid selle mõjuCistanchetubulosaDM-i ravis pidasime vajalikuks uurida diabeedivastast toimet.Cistanchetubulosa. Seega uurisime selle mõjuCistanchetubulosahüperglükeemia ja düslipideemia kohta BKSdb/db hiirtel (BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J, Jackson Laboratory stocknumber 00642), 2. tüüpi DM mudel, millel on palju inimese DM-i tunnuseid, sealhulgas progresseeruv hüperglükeemia, insuliiniresistentsus ja rasvumine (Hummel). et al., 1966; Nishina jt, 1994; Uchida jt, 2005; Srinivasan ja Ramarao, 2007).

2. Materjalid ja meetodid

2.1. Kemikaalid

Verbaskosiid (puhtus 493 protsenti) ja ehhinakosiid (puhtus 493 protsenti) osteti riiklikest toidu- ja ravimikontrolliinstituutidest (Peking, Hiina). HPLC puhtusastmega metanool osteti firmalt Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Acarbose osteti firmast Bayer (West Haven, CT, USA). Puhastatud vee tootmiseks kasutati aMillipore Milli-Q Integral 3 System ja Q-POD Milli-Q System (Bedford, MA, USA).

2.2. Cistanche tubulosa pulbri preparaat

Kuivatatud mahlakad varredCistanchetubulosa(Näidiskood 109092, kasvatatud Hetianis, Xinjiangis, Hiinas) osteti ettevõttelt Xinjiang Guru Biology Co. Ltd. (Hetian, Xinjiang, Hiina). Kuivatatud juured purustati pulbriks, sõeluti läbi 200-võrksõela, segati põhjalikult, suletuna väikestesse pakenditesse, et isoleerida pulber valguse ja niiskuse eest, ning hoida temperatuuril 4 1C.

2.3. Cistanche tubulosa tuvastamine

Proovi 109092 kuivatatud mahlaka varre tuvastasid nende morfoloogiliste tunnuste järgi prof DeXiang Gu ja prof. Xin Liu, kes on Cistanche liikide eksperdid. Proovid tuvastati täiendavalt DNA sekveneerimisega. Kogu genoomne DNA eraldati proovist 109 092, kasutades AxyPrep™ MultisourceGenomic DNA komplekti (Axygen, CA, USA). 5.8S rDNA fragmenti sisaldav ITS piirkond amplifitseeriti, kasutades ITS1/ITS2 5′ CGT AAC AAG GTT TCC GTA GAA 3' ja 5' TTA TTG ATA TGCTTA AAC TCA GCG GG 3' praimerjärjestusi (BGI Genomics, Shenzhen, Hiina), kasutades meetodit, mida on kirjeldanud Schneeweiss et al. (Schneeweiss et al., 2004). Amplifitseeritud DNA sekveneeriti BGI abil (BGI Genomics, Shenzhen, Hiina) ja tulemust võrreldiCistanchetubulosa5,8 s rDNA järjestus GenBankis.

2.4. HPLC analüüs

Kvaliteedistandarditena kasutati kahte PhG-d, ehhinakosiidi ja verbaskosiidiCistanchetubulosa, vastavalt Hiina farmakopöale (Chinese Pharmacopoeia Commission, 2010). HPLC on kõige sagedamini kasutatav PhG-de kvalitatiivseks ja kvantifitseerimiseks. Seega verbaskosiidi ja ehhinakosiidi sisuCistanchetubulosamäärati meie varem avaldatud HPLC meetodil (Zhao et al., 2011). Lühidalt 0,1 gCistanchetubulosapulber lisati 1{{10}} ml puhastatud veele ja segati intensiivselt orbitaalloksutil (Vortex-Genie 2, Scientific Industries, Bohemia, New York, USA) 10 min toatemperatuuril. Tahket ainet ekstraheeriti uuesti kaks korda samadel tingimustel. Ekstraktid ühendati, reguleeriti 50 ml-ni ja tsentrifuugiti 12,{8}}g juures 5 minutit. Supernatant filtriti läbi 0, 45 μm pooridega polütetrafluoroetüleenist (PTFE) süstlafiltri (Pall, Ann Arbor, MI, USA). Seejärel süstiti 20 ul supernatanti HPLC süsteemi (binaarne HPLC pump 1525, Refractive Index Detector 2414, Photodiode Array Detector 2996; Waters, Milford, MA, USA), mis sisaldas Symmetry C18 kolonni (4,6 mm, 5 μm, 250 mm). Waters) ja kaitsekolonn (3,9 mm 20 mm, 5 mm; Waters); süsteemi juhiti EmpowerProsi tarkvaraga (Waters, Milford, MA, USA) voolukiirusega 1 ml/min temperatuuril 30 1C. Liikuv faas valmistati lahusti A (0,5-protsendiline (maht/maht) äädikhappe vesilahus) ja lahusti B (metanool) segamisel, et moodustada lineaarne gradient 25–40 protsenti B 0–10 minuti jooksul. Ehhinakosiidi ja verbaskosiidi peetumisajad olid 10,4 minutit ja 13,6 minutit maksimaalse UV-kiirguse neeldumise juures 330 nm.

2.5. Cistanche tubulosa fenooli üldsisalduse, polüsahhariidide sisalduse ja antioksüdantse aktiivsuse analüüs

2.5.1. Proovi ettevalmistamine

Cistanchetubulosaekstrakt valmistati puhastatud veega, kasutades meie varem avaldatud meetodit (Zhao et al., 2011) väikeste muudatustega, et määrata üldfenoolisisaldust, polüsahhariidide sisaldust ja antioksüdantset aktiivsust (joonis 1). Lühidalt, 1 gCistanchetubulosapulber lisati 15 ml puhastatud vette toatemperatuuril, segati intensiivselt vortex-segamisel, kasutades orbitaalset loksutit 5 minutit ja supernatant koguti tsentrifuugimisega 3000 g juures 15 minutit. Sade ekstraheeriti kaks korda samades tingimustes. Kombineeritud supernatant reguleeriti puhastatud veega 50 ml-ni ja juhiti enne analüüsi läbi 0,45 μm pooridega PTFE süstalfiltri (Pall).

2.5.2. Üldfenoolisisalduse analüüs

Fenooli üldsisaldus määrati, kasutades võrdlusühendina Folin-Ciocalteureagenti ja gallushapet, nagu kirjeldasid Singleton ja Rossi (Dubois et al., 1956; Singleton ja Rossi, 1965) väikeste muudatustega. Lühidalt, 0,1 mlCistanchetubulosaekstrakt segati {{0}},9 ml puhastatud vee ja 5 ml Folin-Ciocalteu reagendiga (eelnevalt destilleeritud veega 10-kordselt lahjendatud), lasti seista 25 1C juures 3,5 minutit, seejärel lisati segule 4 ml naatriumvesinikkarbonaadi (7,5 massiprotsenti) lahust ja inkubeeriti temperatuuril {{10}} 60 minutit. Neeldumist mõõdeti 765 nm juures, kasutades spektrofotomeetrit (Perkin Elmer λ 25 UV-visible, Waltham, MA, USA). Fenooli üldsisaldus määrati standardkõvera abil, mis loodi standardina gallushappega (0–0,6 mg/ml). Tulemused arvutati milligrammi gallushappe ekvivalentidena (GAE) 1 g kohtaCistanchetubulosatoorpulber. Kõiki teste korrati neli korda.

2.5.3. Polüsahhariidide sisalduse analüüs

Polüsahhariidide sisaldusCistanchetubulosamõõdeti fenool-väävelhappe meetodil (Dubois et al., 1951; Duboiset al., 1956). Lühidalt, 1 ml sobivalt lahjendatud Cistanchetubulosa ekstrakti ja 0,5 ml fenoolilahust pandi keeratava korgiga katsutitesse, mis suleti ja segati keerisega. Seejärel lisati 5 sekundi jooksul otse vedeliku pinnale 2,5 ml kontsentreeritud väävelhapet. Seejärel suleti torud, segati keerisega 5 sekundit, inkubeeriti 2 minutit temperatuuril 100 1C ja lasti enne analüüsimist toatemperatuurini jahtuda. Neeldumist mõõdeti 490 nm juures, kasutades spektrofotomeetrit (Perkin Elmer λ25 UV-nähtav) 70-protsendilise metanooliga tühikatse suhtes. Polüsahhariidide sisaldus määrati standardkõvera abil, mis loodi standardina glükoosiga (0–100 mg/ml). Tulemused arvutati polüsahhariidi protsentides/Cistanchetubulosatoorpulber. Kõiki teste korrati kolm korda.

2.5.4. Kogu antioksüdantse aktiivsuse analüüs

Antioksüdantne aktiivsusCistanchetubulosaekstrakti, akarboosi ja rosiglitasooni määrati 2,2'-amino-di(2-etüülbensotiasoliinsulfoonhappe-6) ammooniumsoola (ABTS) ja raud-ioonide (Fe3þ) redutseeriva antioksüdantide võimsuse testiga ( FRAP), kasutades kaubanduslikke komplekte (Beyotime, Haimen, Hiina). Sobivate oksüdeerijatega saab ABTS oksüdeerida roheliseks ABTS þ; antioksüdandid võivad seda protsessi pärssida. Antioksüdantide kogu antioksüdantset aktiivsust saab kajastada ABTS þ neeldumises 734 nm juures. Neeldumist mõõdeti lainepikkusel 734 nm (ABTS), kasutades mikroplaadilugejat (Epoch, Bio-Tek, Richmond, VT, USA) koos Troloxiga (ABTS) kui antioksüdantide standard. ABTS-testi tulemused arvutati mM Trolox Equivalent Antioxidant Capacity (TEAC) 1 g pulbri kohta.

Happelistes tingimustes võivad antioksüdandid taastada ferripüridüültriasiini (Fe3þ-TPTZ) siniseks Fe2þ-TPTZ-ks. Antioksüdantide kogu antioksüdantset aktiivsust võib peegeldada Fe2þ-TPTZ neeldumine lainepikkusel 593 nm. Neeldumist mõõdeti lainepikkusel 593 nm (FRAP), kasutades mikroplaadilugejat (Epoch), kasutades antioksüdandi standardiks FeSO4 (FRAP). FRAP-testi tulemused arvutati kui mM FeSO4 ekvivalentne antioksüdantne maht (FEAC) 1 g pulbri kohta. Kõiki teste korrati neli korda.

2.6. Cistanche tubulosa mõju hüperglükeemiale db / db hiirtel

2.6.1. Loomad ja ravirühmad

Mutanthiirte mudeli riiklik ressursikeskus andis isased BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J (db/db) hiired ja nende vanusele vastavad mittediabeetilised heterosügootsed pesakonnakaaslased (db/þ) 5–6 nädala vanuselt Nanjingi ülikooli loomauuringute keskus (Nanjing, Hiina). Loomade hooldamise ja katseprotseduurid kiitis heaks Sun Yat-seni ülikooli maateaduste kooli laboratoorsete loomade eetikakomitee (kinnituskood 0046500) ja need viidi läbi vastavalt Hiina loomkatsete eeskirjadele. Loomi majutati 2272 1C-spetsiifilise patogeenivaba (SPF) klassi ruumis 6075% õhuniiskusega 12-tunnise valguse-pimeduse tsükli ajal ja neile toideti puhastatud AIN-93G-toitu (Trophic Animal Feed High- tech Co., Ltd., Nantong, Hiina) ja tarninud puhastatud vett ad libitum.

Seitse päeva pärast saabumist anti diabeedita db/þ hiirtele normaalseks kontrollrühmaks diabeetikute rühmades (n¼7) puhastatud vett (vehiiklit), samas kui diabeetilised db/db hiired kaaluti ja jagati uurimiseks juhuslikult 6 rühma (n¼8). mõjudCistanchetubulosa2. tüüpi diabeediga db/db hiirtel (tabel 1). Thedb/þ hiirtele manustati suukaudselt vehiiklit ja db/db hiirtele manustati suukaudselt vehiiklit, rosiglitasooni (0,52 mg/kg/päevas), akarboosi (19,5 mg/kg/päevas) või kolme doosiCistanchetubulosa(vastab 120,9, 72,6 või 24,2 mg verbaskosiidi/kg/päevas ja viidatakse vastavalt kui CT120.9, CT72.6 või CT24.2) 45-päevase kestvusajaga. AnnusedCistanchetubulosaolid seatud vastavalt Hiina Rahvavabariigi farmakopöa (PPRC) soovitatud toorpulbri annusele;Cistanchetubulosaannused 120,9, 72,6 ja 24,2 mg verbaskosiidi/kg/päevas, mis vastavad PPRC soovitatud toorpulbri annuse 5--, 3-- ja 1--kordsele lahjendusele. Kõik suukaudseks manustamiseks mõeldud testitavad proovid lahustati puhastatud vees sobivates kontsentratsioonides, et manustada sama kehamassiga hiirtele sarnases koguses testitavaid proove. Manustatud kogumahud olid 01 ml ja testitavaid proove manustati suukaudselt igale hiirte rühmale iga päev ajavahemikus 16.30–17.30 45 päeva jooksul. Kogu katseperioodi jooksul jälgiti kehakaalu ja vere glükoosisisaldust. Katse lõpus (50. päeval) paastusid hiired 14 tundi ja silmaveenist võeti vereproovid, inkubeeriti toatemperatuuril 30 minutit, tsentrifuugiti ja seerumiproove säilitati temperatuuril 70 1C. edasine analüüs. Seejärel hiired surmati. Maks ja skeletilihased koguti, pesti jääkülmas soolalahuses vere eemaldamiseks, külmutati vedelas lämmastikus ja säilitati edasiseks analüüsiks temperatuuril 70 1C.

2.6.2. Tühja kõhu veresuhkru taseme (FBG), kõhukelmesisese insuliini taluvuse testi (ITT) ja tühja kõhu seerumi insuliinitaseme (FINS) analüüs

Tühja kõhu veresuhkru taset mõõdeti pärast 14 tundi tühja kõhuga enne loomkatse algust (0 päeva), päeval 1{{10}} ja iga 5 päeva järel 20.–45. kasutades veresuhkru seiresüsteemi (ACCU-CHEK Active, Roche DiagnosticsGmbH, Mannheim, Saksamaa). FBG väärtuste protsentuaalne suurenemine (FBG protsendi suurenemise väärtused: FBG suurenemise protsent ) päeval x (päev 20–45) arvutati kasutades (BGday x BGday 0) / BG0 päeval 100, et näidata iga FBG väärtuste suurenemist. võrreldes nende esialgsete FBG väärtustega. Söögijärgne veresuhkru tase määrati 120 minutit pärast glükoosi (2 g/kg BW) suukaudset manustamist 40. päeval.

ITT viidi läbi katse 45. päeval pärast üleöö paastu (14 tundi). Sabaveeni veresuhkru taset mõõdeti enne insuliini süstimist (0 min) ja 30 min, 60 minutit pärast kõhukelmevahelist insuliini süstimist (0,1 RÜ/kg kehamassi kohta). Glükoosivastused ITT väljendati insuliini (AUCinsulin) kõverate integreeritud aladena, mis arvutati trapetsi reegli abil (Vishwakarma et al., 2003). Katse lõpus analüüsiti tühja kõhuga seerumi insuliinitasemeid, kasutades roti/hiireinsuliini ELISA komplekti firmast Millipore (Bedford, MA, USA); seerumiproovid valmistati komplekti juhiseid järgides. Insuliiniresistentsuse (HOMA-IR) indeksi homöostaatiline mudel arvutati järgmise valemi abil: HOMA-IR¼ tühja kõhuga insuliin (ng/ml) tühja kõhuga veresuhkur (mmol/L)/22,5 (Matthews et al., 1985).

2.6.3. Seerumi lipiidide taseme analüüs

Seerumi üldkolesterooli (TC), kõrge tihedusega lipoproteiini kolesterooli (HDL-c) ja triglütseriidide (TG) kontsentratsioonid määrati kaubanduslike ensümaatiliste komplektide abil (Biosino Biotechnology & Science Inc., Peking, Hiina). Madala tihedusega lipoproteiini kolesterooli (LDL-c) tase arvutati kui TC-TG/5 – HDL-c, samas kui väga madala tihedusega lipoproteiini kolesterooli (VLDL-c) tase arvutati Friedewaldi võrrandi (Friedewald) järgi TG/5 et al., 1972). Aterogeenne indeks arvutati kui (TC HDL-c)/HDL-c.

2.6.4. Maksa ja skeletilihaste glükogeeni taseme analüüs

Külmutatud maks ja skeletilihased töödeldi glükogenanalüüsiks kohe pärast 70 1C sügavkülmikutest eemaldamist. Maksa ja skeletilihaste glükogeenisisaldust mõõdeti kaubandusliku glükogeenikomplekti (Jiancheng, Nanjing, Hiina) abil, mis põhines Keppleri ja Deckeri meetodil (Keppler ja Decker, 1974). Proovide neeldumine 505 nm juures mõõdeti pärast torude jahutamist toatemperatuurini. Glükogeeni kogus igas koeproovis väljendati milligrammides glükoosi grammi koe kohta.

2.7. Statistiline analüüs

Kõik tulemused on väljendatud keskmisena7SEM ja neid analüüsiti ANOVA-ga statistikapakettidest Social Science Software (SPSS 16.0, Chicago, IL, USA) või GraphPad Prism 5 (La Jolla, CA, USA). HOMA-IR indekseid hinnati ka kahe prooviga sõltumatu t-testi abil pärast logaritmilist teisendust. AUC väärtused arvutati GraphPad Prism 5 abil. P väärtused alla 0,05 viitavad statistiliselt olulistele erinevustele.

3. Tulemused

3.1. Cistanche'i proovi identifitseerimine

Järjestuste joondamise tulemused näitavad, et amplifitseeritud järjestus on samaCistanche tubulosageenid 5.8S rDNA osalise ja täieliku järjestuse jaoks (614 nukleotiidi; Gen-Bank registreerimisnumber AB217871). Selle morfoloogiliste omaduste ja 5.8S rDNA geenijärjestuse põhjal tuvastatakse proov 109 092 kuiCistanchetubulosa.

3.2. Cistanche tubulosa verbaskosiidi ja ehhinakosiidi sisalduse kvantitatiivne määramine

Verbaskosiidi ja ehhinakosiidi sisuCistanchetubulosakvantifitseeriti asjakohaste standardite abil. Verbaskosiidi ja ehhinakosiidi sisaldusCistanchetubulosaolid vastavalt 2,66 protsenti ja 11,59 protsenti. HPLC kromatogrammCistanchetubulosaväljavõte on näidatud joonisel 2.

3.3. Cistanche tubulosa fenooli üldsisaldus, polüsahhariidide sisaldus ja antioksüdantne aktiivsus

Üldine fenoolisisaldusCistanchetubulosaoli 66,2970,44 mg GA/g. Polüsahhariidide sisaldusCistanche torukesed olid10.1570.26 protsenti . ABTS- ja FRAP-testid näitasid, et antioksüdantne aktiivsus oli 1,3970,06 mM TEAC/g ja 1,6170,04 mM FEAC/g.Cistanchetubulosa, {{0}},1570.01 mM TEAC/gand 0,1270,01 mM FEAC/g akarboosi puhul ning 0,1670,01 mMTEAC/g ja 0,1370,01 mM FEAC/g vastavalt rosiglitasoonile.

3.4. Cistanche tubulosa hüperglükeemiline toime db / db hiirtel

Meie tulemused näitasid sedaCistanche tubulosavõib pärssida kõrgenenud tühja kõhu veresuhkru taset ja kõrgenenud söögijärgset veresuhkru taset, suurendada insuliinitundlikkust ja vähendada diabeetiliste db/db hiirte kehakaalu (BW) vähenemist. ÜldiseltCistanchetubulosaoli katse ajal efektiivsem hüperglükeemia kui akarboosi vähendamisel ja lisaks oli Cistanche tubulosa parem kui akarboos insuliiniresistentsuse parandamisel (p väärtused on näidatud allpool).

3.4.1. Cistanche tubulosa mõju kehale ja maksa kaalule

Diabeedi kontrollrühmas tõusis BW pidevalt esimese 25 päeva jooksul. Diabeedi progresseerumisel vähenes diabeetiliste kontrollhiirte kehamass 30. päevaks veidi (täiendav tabel 1). AastalCistanchetubulosarühmad, kõik kolm annustCistanchetubulosavähendas kaalukaotuse kiirust võrreldes diabeetiliste kontrollhiirtega (ilma tähtsuseta, täiendav tabel 1). Positiivses kontrollrühmas põhjustas rosiglitasoon kehakaalu olulise suurenemise alates 2. päevast 0 võrreldes diabeedi kontrollrühmaga (po0,05). Seevastu akarboos aeglustas kehakaalu langust võrreldes diabeedi kontrollrühmaga. Normaalses kontrollrühmas kasvas kehakaal katse ajal pidevalt ja oli oluliselt madalam kui diabeetikute kontrollrühmas (po0,001).

Katse lõpus suurenesid maksa kaal ja maksa/kehakaalu suhe ainult rosiglitasoonirühmas (po0.001) võrreldes diabeedi kontrollrühmaga.

3.4.2. Cistanche tubulosa mõju vere glükoositasemele

Cistanchetubulosakuvatakseantihüperglükeemilinemõjub indb/db hiirtele pärast 20 päeva suukaudset manustamist ning võib pikka aega kontrollida FBG taset ja FBG suurenemise protsenti väärtust db/db hiirtel annusest sõltuval viisil, mida näitab oluliselt vähenenud tühja kõhuga ja pärast sööki vere glükoosisisaldus (joonis 3, tabel 2). Diabeedi kontrollrühmas tõusis FBG tase katse ajal pidevalt ja oli 45. päeval umbes 6 korda kõrgem kui normaalsel kontrollrühmal (28,3071,027 mmol/L vs. 4,6670,350 mmol/L; po0,001). Kõik kolm annustCistanchetubulosapärssis oluliselt FBG tendentsi suureneda db/db hiirtel kogu katse vältel, kusjuures CT120.9 näitas tugevaimat tüpoglükeemilist toimet (20, 35. ja 45. päev: po{{1{{ 16}}}}.001; 4. päev0: po0.05 vs. diabeedi kontroll). Positiivsetes kontrollrühmades inhibeerisid rosiglitasoon (0.52 mg/kg) ja akarboos (19,5 mg/kg) märkimisväärselt ka FBG suurenemise tendentsi db/db hiirtel kogu katse jooksul (2. päev{41}). } kuni 45: po0.001, 10. päev: po0,05, rosiglitasonevid. diabeedi kontroll; 35. päev: po0,001, 40. päev: po0,01, 20. ja 45. päev: po0. 05, akarboos vs. diabeedi kontroll). Akarboos (19,5 mg/kg) oli aga vähem efektiivne kui rosiglitasoon (20. päev: po0,05; 30. päev: po0,01; päev 35–45: po0,001) ja CT120,9 (päev 45: po0,001) . Normaalses kontrollrühmas püsis FBG tase kogu katse vältel konstantsena ja oli oluliselt madalam kui diabeetikute kontrollrühmal (po0,001).

Pärast 20-päevast manustamistCistanche tubulosainhibeeris oluliselt vere glükoositaseme tõusu db/db hiirtel (joonis 3). Diabeedi kontrollrühma ja akarboosi (19,5 mg/kg kehamassi) rühma FBG suurenemise protsendi väärtused suurenesid katse ajal. Nende kolme FBG suurenemise protsendi väärtusedCistanchetubulosaCT120.9 rühma FBG suurenemise protsendi väärtused jäid 30. päeva ja 45. päeva vahel muutumatuks, samas kui CT72.6 ja CT24.2 suurenesid 45. päevaks ebaoluliselt (p40,05). katse, kolm annustCistanchetubulosa(CT120.9, CT72.6 ja CT24.2) vähendasid oluliselt FBG suurenemise protsendi väärtuste tõusu 181,5%, 151,72% ja 123,58% võrra võrreldes diabeedi kontrollrühmaga (PO{{). 24}}.001). 20. päevast 40. päevani olid kolme Cistanche tubulosa rühma FBG suurenemise protsendi väärtused akarboosirühmaga madalamad või sarnased (p40,05). 45. päeval oli FBG suurenemise protsent CT120.9 rühmas oluliselt madalam kui akarboosi rühmas (po0,01).

Cistanchetubulosailmnesid annusest sõltuvad hüpoglükeemilised toimed (tabel 2). Katse lõpus olid CT120.9 rühma FBG tasemed oluliselt madalamad kui diabeedi kontrollil, akarboosil ja kahel muulCistanchetubulosarühmad (CT120.9 vs. akarboos, CT72.6 ja CT24.2, po0.01; CT120.9 vs. diabeedi kontroll, po0.001; tabel 2). Katse lõpuks on nende kolme FBG tasemedCistanchetubulosarühmades (CT120.9, CT72.6 ja CT24.2) oli FBG tase võrreldes nende algse FBG tasemega tõusnud vastavalt 53,41 protsenti, 83,19 protsenti ja 111,33 protsenti, samal ajal kui diabeedi kontrollrühma ja akarboosirühma FBG tase tõusis 234 protsenti. protsenti ja 150,76 protsenti . Kolmest testitud Cistanche tubulosa annusest viis ainult CT120.9 FBG taseme järjekindlalt madalamale kogu katse vältel. CT72.6 ja CT24.2 olid FBG taseme vähendamisel vähem tõhusad kui CT120.9 (tabel 2, täiendav joonis 1). CT120.9 rühma FBG tase tõusis alles alates 30. päevast, samas kui ülejäänud kahe FBG tasemedCistanchetubulosarühmad ja akarboosirühm suurenesid kiiremini. Päeval 10 kuni 40 on FBG tase kolmCistanchetubulosarühmad olid madalamad või sarnased teakarboosi rühmaga (19,5 mg/kg kehamassi kohta); need erinevused ei olnud statistiliselt olulised (p40,05).

4. päeval 0 pärssis CT120.9 märkimisväärselt söögijärgse vere glükoositaseme tõusu (po0,05, tabel 2) 2 tundi pärast ühekordset suukaudset glükoosiannust (2 g/kg). CT120.9 mõju söögijärgsele veresuhkru tasemele db/db hiirtel oli võrreldav 19,5 mg/kg akarboosiga (p40,05). CT72.9 ja CT24.2 toime oli vähem efektiivne kui rosiglitasoon (po0,001).

3.4.3. Cistanche tubulosa mõju tühja kõhuga seerumi insuliinitasemele ja kõhukelmevahelisele insuliinitaluvusele

FINS-i tulemused näitasid, et pärast 45-päevast suukaudset manustamist tõstis CT120.9 ebaoluliselt seerumi insuliinitaset (p40,05) db/db hiirtel 40,73% võrra, samas kui rosiglitasoon tõstis oluliselt seerumi insuliinitaset 58,90 võrra. protsenti (po0,05 vs. diabeedi kontroll; tabel 3).

HOMA-IR indeks arvutati, et kvantitatiivselt hinnata insuliiniresistentsuse ja rakkude puuduliku funktsiooni panust tühja kõhuga hüperglükeemiasse. Võrreldes diabeedi kontrollrühmaga parandas CT120.9 HOMA-IR süsteemset insuliinitundlikkuse indeksit 15,30% võrra (p40,05), samas kui rosiglitasoon parandas oluliselt HOMA-IR indeksit 35,30% võrra (PO0,001 vs. diabeedi kontroll; tabel 3). Mõju hindamiseks kasutati ITT-dCistanchetubulosainsuliinitundlikkuse kohta pärast eksogeenset insuliini süstimist. Tulemused näitasid, et CT120.9 parandas diabeetiliste db/db hiirte insuliinivastust. CT120.9 toime oli võrreldav rosiglitasooniga ja parem kui akarboos.CT12{{10}.9 ja rosiglitasoon vähendasid oluliselt vere glükoosisisaldust 0 minutil (enne insuliini manustamist). süstimine,po0.001 vs. diabeedikontroll) ja 30 min (po0.01 CT120.9, po0.001 korral rosiglitasoon) pärast insuliini süstimist (joonis 4). CT120.9 ja rosiglitasoon vähendasid AUCinsuliini 27,92 protsenti ja 43,89 protsenti võrreldes diabeedi kontrolliga. ITT ajal ei olnud CT120.9 ja rosiglitasooni rühmade vere glükoositasemete vahel olulist erinevust. CT120.9 rühma veresuhkru tase oli 0 minuti (enne insuliini süstimist, po0.01: CT120.9 vs akarboos), 30. minutil (po0.01:CT120.9 vs akarboos) ja 60. minutil oluliselt madalam kui akarboosil. min (po0,05: CT120,9 vs akarboos) pärast insuliini süstimist (joonis 4). CT120.9 vähendas AUCinsuliini taset akarboosiga võrreldes 28,79 protsenti. Akarboos, CT72.6 ja CT24.2 ei avaldanud ITT ühelgi ajahetkel olulist mõju AUCinsuliini või veresuhkru tasemele. Nii normaalse kontrollrühma FIN kui ka ITT tulemused olid oluliselt madalamad kui diabeetilise kontrollrühma omad (po0, 05: FIN; po0, 001: ITT).

3.4.4. Cistanche tubulosa mõju maksa ja skeletilihaste glükogeeni tasemele

Glükogeeni tase erinevates kudedes peegeldab otseselt insuliinitundlikkust, kuna insuliin soodustab rakusisest glükogeeni ladestumist. Rosiglitasoon alandas oluliselt maksa glükogeeni taset 59,61 protsenti (po0.001) ja suurendas lihaste glükogeenitaset 33,93 protsenti (po0,05 vs. diabeedi kontroll). CT24.2 alandas maksa glükogeeni taset 30,41 protsenti (po0,05 vs. diabeedi kontroll). Cistanche tubulosa väiksemad annused ei mõjutanud oluliselt ei maksa ega skeletilihaste glükogeeni taset.

3.5. Cistanche tubulosa hüpolipideemilised mõjud db / db hiirtel

Et hinnata mõjuCistanchetubulosadüslipideemia kohta määrasime üldkolesterooli, TG, HDL-c, LDL-c ja VLDL-c taseme db/db hiirtel. Meie tulemused näitavad sedaCistanchetubulosavõib parandada düslipideemiat, suurendades HDL-c taset, vähendades TG, LDL-c ja VLDL-c taset lisaks kolesteroolitaseme vähendamisele db/db hiirtel. CT120.9 (po0.05) ja CT24.2 (po0.001) vähendasid oluliselt TC taset diabeetikutel db/db hiirtel (tabel 3 ) võrreldes diabeedi kontrolliga. Kõigist katserühmadest vähendas ainult CT24.2 oluliselt TG (po0,05) ja VLDL-c (po0,05) taset võrreldes diabeedikontrolliga. Kõik kolm annustCistanchetubulosaalandas oluliselt LDL-taset (po0.01 CT120.9, po0.05 CT72.6, po0.001 CT24.2 puhul, vs. diabeedi kontroll) . Kõik kolm annustCistanchetubulosa(CT120.9, CT72.6 ja CT24.2) tõstsid HDL-taset ebaoluliselt 9,78%, 7,32% ja 7,78% võrra (p40,05 vs. diabeedi kontroll).

Nendest lipiidide parameetritest on madal HDL-c/TC tase koronaararterite haiguse kõige olulisem sõltumatu riskitegur. CT120.9 (po0.05) ja CT24.2 (po0.001) vs. diabeedi kontroll) tõstis oluliselt HDL-c/TC taset. Aterogeenne indeks, mis on koronaararterite haiguse riskitegur, vähenes kõigi kolme annusega.Cistanchetubulosa(po{{0}}.001 CT120.9 ja CT24.2 puhul, po0.01 CT72.6 vs. diabeedi kontroll).

Positiivses kontrollrühmas tõstis rosiglitasoon märkimisväärselt TC (po{0}}.001) ja LDL-c (po0,01) taset võrreldes diabeedikontrolliga. Rosiglitasoon tõstis oluliselt ka HDL c taset 57,32 protsenti (po0,001), kuid sellel ei olnud kasulikku mõju HDL-c/TC tasemele ega aterogeensuse indeksile. Akarboosil ei olnud db/db hiirte seerumi lipiidiindeksitele olulist mõju.

4. Arutelu

Käesoleva uuringu eesmärk oli uurida võimalikku antihüperglükeemilist ja hüpolipideemilist toimetCistanchetubulosa.

In vitro analüüsi tulemused näitasid, etCistanchetubulosasisaldab hinnatud koguses fenoole ja polüsahhariide ning sellel on hea antioksüdantne toime. Kogu fenoolisisaldusCistanche tubulosaon madalam kui tee (Ankolekar et al., 2011) ja kohvi (Chu et al., 2011) fenooli kogusisaldus ning kõrgem kui paljudes teisteshüperglükeemilinemaitsetaimed nagu jõhvikas (Pinto et al., 2010), merevetikad (Nwosu jt, 2011), kikerhernes (Sreerama jt, 2012) ja mõned traditsioonilised ravimtaimed, mida kasutatakse 2. tüüpi DM (Gulatiet al., 2012). Cistanche tubulosa polüsahhariidide sisaldus on madalam kui Panaxi ženšenni (Wanget al., 2011) ja tee (Chu et al., 2011) polüsahhariidide sisaldus ning kõrgem kui paljudel teistel.antihüperglükeemilinemaitsetaimed nagu Aloe vera L. (Hu et al., 2003), jujuba (Sun et al., 2011), Polyporus umbellatus (Tian et al., 2007), Rheum palmatum (Ni et al., 2007) ja mõned 2. tüüpi DM-i ravis kasutatavad traditsioonilised ravimtaimed (Gulatiet al., 2012). Sageli tuvastatakse, et kõrge antioksüdantide, nagu polüfenoolide ja fenüületanoidglükosiidide (PhG) sisaldusega taimedel on diabeedivastane toime, mis on vähemalt osaliselt tingitud nende võimest vähendada oksüdatiivset stressi (Pinto et al., 2010; Saltiel, 2001; Gulati jt, 2012). Meie antioksüdatiivse testi tulemus on kooskõlas varasemate aruannetega (Arthur et al., 2011;anti-Baoet al., 2010; Funes et al., 2009), mis viitasid selleleCistanchetubulosaomab olulisi antioksüdantseid omadusi. Cistanche tubulosa TEACväärtus ja FRAP väärtus olid kõrgemad kui rohelisel kapsal, porgandil, kurgil, rohelisel salatil, selleril (Pellegrini et al., 2003) ja mõnel muul hea antioksüdantse toimega taimel, mida kasutati diabeedi ravis (Rahimi et al. , 2005) ja oli palju kõrgem kui akarboos ja rosiglitasoon. Varasemad kliinilised uuringud on näidanud, et lipoehape (Konrad et al., 1999) või teised antioksüdandid (Paolisso et al., 1992) võivad parandada insuliinitundlikkust insuliiniresistentsetel ja/või diabeediga patsientidel. Seega on Cistanchetubulosa antioksüdantide allikas, mis võib avaldada kaitset diabeedi ja pikaajaliste diabeedi tüsistuste vastu.

Cistanche liike on kasutatud toonilise toidu või ravimina sadu aastaid, mis viitab sellele, et neid on suukaudselt võtta ohutu. Eelmine aruanne 14-päevase ägeda mürgisuse testi kohta näitasCistanchetubulosaekstrakt kuulub tegeliku mittetoksilise hulka: selle maksimaalne talutav annus (MTD).Cistanchetubulosahiirtel leiti ekstrakti sisaldus 410 g/kg. 14-päevase jälgimise jooksul ei registreeritud suremust ning iga rühma testitud hiirtel ei ilmnenud 24-tunnise ja 14-päevase vaatluse ajal mingeid ülemääraseid toksilisuse märke (Zhang et al., 2012). Meie katse suurim annus, 5, 084 g CTAE / kg BW / päevas, mis võrdub 9, 10 g toorpulbriga / kg hiirtel, on palju madalam kui MTD. Seega on annus meie katses ohutu.

2. tüüpi DM on üks levinumaid ja tõsisemaid metaboolseid haigusi maailmas ning seda iseloomustab peamiselt hüperglükeemia. Selles uuringus võtsime 2. tüüpi DM mudelina kasutusele BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J(db/db) hiired, et uurida haiguse mõju.Cistanchetubulosaglükoosi ja lipiidide metabolismile in vivo. db/dbhiired on elustiiliga seotud metaboolsete haiguste hästi aktsepteeritud geneetiline näriliste mudel, mis on eriti kasulik diabeedi- ja rasvumisvastaste ainete hindamisel. See hiirte tüvi kannab leptiini retseptori geeni amutatsiooni, 6–7 nädala vanuselt ilmneb hüperglükeemia, hüperlipideemia, insuliiniresistentsus ja rasvumine (Hummel et al., 1966; Nishina jt, 1994; Uchida et al., 2005; Srinivasan ja Ramarao, 2007).

Diabeedi progresseerumisel võib diabeetilise kontrollrühma kehamassi kerge langus (täiendav tabel 1) olla tingitud plasma insuliini taseme langusest, mis esineb diabeetilistel db/db hiirtel vanuses 10–12 nädalat (Hummel et al., 1966) ja suurenenud metaboolne efektiivsus diabeetilistel db/db hiirtel (Trayhurn, 1979). Vähendati kehakaalu langust kõigi kolme annuse puhulCistanche tuubulidvõib olla tingitud sellest, etCistanchetubulosasamuti kõrgenenud insuliini tase (tabel 3), mis on kasulik DM-i korral. Rosiglitasoon tõi kaasa kehakaalu olulise tõusu, mis on rosiglitasooni teadaolev kõrvaltoime. Oluliselt suurenenud maksakaal ja maksa/kehakaalu suhe rosiglitasooni rühmas (po{1}}.001) näitasid, et rosiglitasoon võib esile kutsuda lipiidide akumulatsiooni ja funktsionaalseid muutusi maksas.

In vivo testi tulemused näitasid sedaCistanche tuubulid võiksidpärsivad kõrgenenud tühja kõhu veresuhkru taset ja kõrgenenud söögijärgset veresuhkru taset ning suurendavad db/db hiirte insuliinitundlikkust. ÜldiseltCistanchetubulosaoli katse ajal efektiivsem hüperglükeemia ja düslipideemia vähendamisel ning insuliiniresistentsuse parandamisel kui akarboos.

Pärast 20-päevast suukaudset manustamist,Cistanchetubulosapärssis märkimisväärselt FBG taseme ja FBG suurenemise protsendi väärtuse suurenemist db / db hiirtel pidevalt. Katse lõpusCistanchetubulosanäitas omaantihüperglükeemilinetoime annusest sõltuval viisil. Need tulemused näitavad, etCistanchetubulosavõib sobivas annuses manustatuna toimida potentsiaalse vere glükoosisisaldust alandava ainena. Enamik glükoosi eritub skeletilihastest pärast sööki, samas kui FBG taseme määrab peamiselt maksa glükoositoodang. FBG tulemused näitasid sedaCistanchetubulosaparandas oluliselt db/db hiirte maksa glükoositoodangut; kehv maksa glükoositoodang on üks kolmest peamisest metaboolsest defektist II tüüpi DM-s, mis soodustavad hüperglükeemiat (Bavenholm et al.,2001). 3. päeval 0 olid suhkruhaigete kontrollrühma FBG suurenemise protsendi väärtused oodatust madalamad, mis võib seletada tõsiasja, et ainult CT72,6 (po0,01), akarboos (po0,05) ja androsiglitasoon ( po0,001) vähendas oluliselt FBG suurenemist võrreldes diabeedi kontrollrühmaga.

Kokkuvõttes näitavad tabelis 2 esitatud tulemused sedaCistanchetubulosakontrollis tõhusalt kõrgenenud söögijärgset veresuhkru taset pärast glükoosi laadimist, mis viitab sellele, et Cistanche tubulosa on kandidaataine söögijärgse hüperglükeemia leevendamiseks. Kõrge söögijärgne veresuhkru tase on II tüüpi DM-iga seotud kardiovaskulaarsete tüsistuste sõltumatu riskitegur (Ceriello, 2005; Blaak et al., 2012). CT120.9 pärssis märkimisväärselt söögijärgse veresuhkru taseme tõusu, mis viitab sellele, et CT120.9 parandas diabeetiliste db/db hiirte glükoositaluvuse halvenemist ja toime oli võrreldav 19,5 mg/kg akarboosiga. Siiski oli CT120 hüperglükeemiline toime. 9 oli vähem intensiivne kui rosiglitasoonil.

Puudulik insuliini sekretsioon ja insuliiniresistentsus on kaks kolmest peamisest metaboolsest defektist II tüüpi DM korral, mis soodustavad hüperglükeemiat (Bavenholm et al., 2001). Meie FINS-i analüüsitulemus näitas, et suur annusCistanchetubulosateatud määral taastas defitseeritud insuliini sekretsiooni db/db hiirtel. Seetõttu pärssis Cistanchetubulosa insuliini sekretsiooni stimuleerimise kaudu osaliselt tühja kõhu ja söögijärgse vere glükoositaseme tõusu (tabel 2). Hüperglükeemia ja hüperlipideemia avaldavad lisaks esmasele diabeedipatogeneesile beeta-rakkudele ja mitokondritele täiendavat oksüdatiivset stressi. In vitro ja in vivo on tõendeid selle kohta, et krooniline kokkupuude kõrge veresuhkru ja lipiidide tasemega on kahjulikud tobeta-rakud, põhjustades insuliini puudulikku sekretsiooni, insuliini geeniekspressiooni halvenemist ja rakusurma esilekutsumist apoptoosi kaudu (Pitocco et al., 2010). Kuna antioksüdandid võivad kaitsta beeta-rakuliine ja isoleeritud saari kõrge glükoosikontsentratsiooniga kokkupuute kahjulike mõjude eest (Kaneto et al., 1996, Tajiri et al., 1997), võib Cistanche tubulosa oma antioksüdatiivse toime kaudu parandada insuliini sekretsiooni.

Diabeedi kontrollrühma tugevalt halvenenud insuliinitaluvus kinnitas db/db hiirte insuliiniresistentsust. ITT tulemused näitasid, et suur annusCistanchetubulosadb/db hiirtel paranes insuliiniresistentsus, mis oli võrreldav rosiglitasooniga ja parem akarboosist, mis viitab sellele, etCistanchetubulosaomab tugevaid insuliini sensibiliseerivaid omadusi.

Glükoosi homöostaasi reguleerivad peamiselt maks ja skeletilihased. Suurem osa glükoosi hävitamisest toimub maksas ja skeletilihastes, kusjuures glükogeen on salvestatava glükoosi peamine rakusisene vorm (Saltiel, 2001). Glükogeeni tase erinevates kudedes peegeldab otseselt insuliinitundlikkust, kuna insuliin soodustab rakusisest glükogeeni ladestumist. Insuliiniga stimuleeritud glükogeeni sisaldus on insuliiniresistentsusega loomadel märkimisväärselt vähenenud, võrdeliselt insuliinipuuduse astmega (Chandramohan et al., 2008).Cistanchetubulosaei avaldanud kasulikku mõju glükogeeni ladestumisele maksas ega skeletilihastes.

II tüüpi DM metaboolset profiili iseloomustab glükoosi metabolismi ja insuliiniresistentsuse halvenemine, mis on sageli kombineeritud düslipideemiaga (Cha et al., 2005). Düslipideemia on DM-i üks peamisi südame-veresoonkonna haiguste riskitegureid. Diabeetilise düslipideemia iseloomulikud tunnused on kõrge plasma triglütseriidide (TG) kontsentratsioon, madal kõrge tihedusega lipoproteiini kolesterooli (HDL-c) kontsentratsioon, madala tihedusega lipoproteiini kolesterooli (LDL-c) kontsentratsiooni suurenemine ja väga madala tihedusega lipoproteiinide suurenenud kontsentratsioon. kolesterooli (VLDL-c) kontsentratsioon (Mooradian, 2009). Pärast ravimistCistanchetubulosa45 päeva jooksul vähenes üldkolesterooli, TG, LDL-c ja VLDL-c tase db/db hiirtel, samas kui HDL-c tase tõusis, mis näitab, etCistanchetubulosaavaldas kasulikku mõju düslipideemiale ja võib oluliselt vähendada ateroskleroosi, südame isheemiatõve ja diabeedi tüsistuste riski (tabel 3). Cistanche tubulosa alandas oluliselt TC taset, mis on kooskõlas eelmise aruandega (Shimoda et al., 2009). Mehhanism, mille abil Cistanche tubulosa parandab düslipideemiat, võib olla seotud maksa mRNA ekspressiooni vahendamisega, mis on seotud kolesterooli transpordi ja metabolismiga (Shimoda et al. ., 2009).Kuigi hüperkolesteroleemia levimus DM-i puhul ei suurene, võib kolesteroolitaseme alandamine vähendada suhtelist kardiovaskulaarsete haiguste riski DM-ga patsientidel (Mooradian, 2009). indeks, mis on koronaararterite haiguse riskifaktorid, mis näitab, et Cistanche tubulosa on kasulik nii diabeedi kui ka südame-veresoonkonna haiguste raviks. Positiivne kontrollravim rosiglitasoon tõstis oluliselt TC-taset, mis on oluline diabeedi ja südame-veresoonkonna haiguste progresseerumise suurenenud riski seisukohalt.

5. Järeldus

Kokkuvõtteks pakume esimest demonstratsiooni antihüperglükeemiliste jahüpolipideemilinemõjusidkohtaCistanchetubulosa2. tüüpi diabeediga db/db hiired.Cistanchetubulosanormaliseerunud hüperglükeemia taastas insuliinitundlikkuse ja vähendas düslipideemiat.Cistanchetubulosaparandas kõiki kolme peamist metaboolset defekti, mis soodustavad hüperglükeemiat II tüüpi DM-i korral.Cistanchetubulosademonstreeris suurt potentsiaali 2. tüüpi DM progresseerumise ärahoidmisel ning ateroskleroosi, südame isheemiatõve ja diabeedi tüsistuste riski vähendamisel. Traditsioonilise hiina meditsiini ja toonilise toiduna saaks Cistanchetubulosa't edasi arendada ravimiteks, farmatseutilisteks toiduaineteks või toidulisanditeks. tulevik. Siiski on vaja täiendavaid uuringuid, et tuvastada bioaktiivne komponent ja selgitada välja antihüperglükeemilise toime eest vastutavad mehhanismid.hüpolipideemilinemõjusidkohtaCistanchetubulosa.

Tänuavaldused

Seda tööd toetasid Hiina 11. viie aasta plaani (2007BAI32B06) riikliku võtmetehnoloogia uurimis- ja arendusprogrammi toetused ja riiginõukogu juhtivrühma vaesuse leevendamise ja arendamise büroo (2008-3A).

Lisa A. Täiendav materjal

Selle artikliga seotud täiendavad andmed leiate veebiversioonist aadressil http://dx.doi.org/10.1016/j.jep.2013.09.027.

Alates: "Cistanche tubulosa anti-hüperglükeemiline ja hüpolipideemiline toime", autorWen-Ting Xiong jt

---W.-T. Xiong et al. / Journal of Ethnopharmacology 150 (2013) 935–945