Müalgilise entsefalomüeliidi/kroonilise väsimussündroomiga patsientide metaboolsete fenotüüpide kaart Ⅱ

ME/CFS lipidoomid

Sama uuringurühma seerumis viidi läbi komplekssete lipiidide põhjalik analüüs. Sellehõlmas 892 lipiidiliiki, 153-l esines oluliselt erinev seerumikontsentratsioon ME/CFS-isrühm võrreldes HC rühmaga, millest 34-l oli madalam ja 119-l kõrgem (joonis 6A; täiendavAndmekogum 2, lehed 2 ja 4). Lipiidide klasside summaarsed kontsentratsioonid näitasid diatsüülglütseroolide taseme tõusu(DAG), TAG ja dihüdrotseramiidi (DCER) ning lüsofosfatidüülkoliinide (LPC) redutseerimineME/CFS rühm võrreldes HC rühmaga (täiendav andmekogum 2, leht 3). Siiski selged erinevusedlipiidide profiilis ilmnesid alarühmitamisel vastavalt kavandatud ME / CFS-i metabotüüpidele.Üldiselt oli globaalsele metaboomikale täheldatud lipiididega seotud mõjude vahel ulatuslik sidusus(HD4) ja lipidomics (kompleksne lipidoomika platvorm [CLP]) platvormid. Järgmine on kokkuvõteühetaolised ja metabotüübispetsiifilised muutused seerumi lipiidides ME/CFS-iga patsientidel võrreldes HC isikutega.Ühtsed lipidoomiefektid ME / CFS rühmas.Ainult 16 892 lipiidiliigist avaldasid ühtlast mõjuME-M1 ja ME-M2 alamhulkades HC rühma suhtes (täiendav andmekogum 2, leht 5). Nendest,13 ühendil oli madalam seerumikontsentratsioon ME/CFS patsientidel ja kõik need olid fosfolipiidi derivaadidfosfatidüülkoliini (PC) ja fosfatidüületanoolamiini (PE) ühendid, sealhulgas LPC ja lüsofosfatidüületanoolamiin (LPE). See hõlmas mitmeid PE plasmalogeenühendeid, mis esindavad keemiliseltja bioloogiliselt ainulaadne fosfolipiidide alamklass (49). Kümme 13 ühtlaselt langetatud fosfolipiidiliigistsisaldas vähemalt ühte 18:2 atsüülrühma, mis esindab linoolhapet, asendamatut rasvhapet ja arahhidoonijäähappe (20:4) eelkäija. Üldiselt kippus linoolhappe tase fosfolipiidide alamklassides olema madal(PC, PE, fosfatidüülinositool [PI], LPC ja LPE; joonis 6B). Ainult 3 üksikut lipiidiliiki olid ühtlaseltkõrgenenud – sfingolipiidid, CER(18:1), SM(18:0) ja SM(18:1) –, aga ilmnesid täiendavad sfingolipiididsarnased suundumused. Mis puudutab mõju seerumi rasvhapete üldsisaldusele (st esterdatud ja esterdamata),ainus oluline ühtlane muutus ME-M1 ja ME-M2 alamhulkades oli vähenenud tase 14:0 (joonis 6B).Metabotüüp ME-M1 lipidoom.Sellel alamrühmal oli seerumikontsentratsioon oluliselt kõrgem 23/892ja alandas 227 892 lipiidide metaboliidi taset võrreldes HC rühmaga (joonis 6; täiendavAndmekogum 2, leht 6). Suurem osa kõrgenenud metaboliitidest olid NEFA-d (18 mõõdetud vabast rasvhappest 25-st;Joonis 6A), mis aitab kaasa kõrgemale NEFA kogukontsentratsioonile. Ülejäänud 5 kõrgendatud ühendit sisseME-M1 alamhulk olid kõik sfingolipiidid, mis sisaldasid 18:0 või 18:1 (CER[18:0], CER[18:1], DCER[18:0],SM[18:0], SM[18:1]). 227 alandatud metaboliiti sisaldasid valdavalt glütserolipiidide liike (138TAG, 5 DAG, 2 monoatsüülglütserooli [MAG]) ja fosfolipiidid (79, sealhulgas 16 lüsofosfolipiidi),lisaks SM(14:1), SM(22;1) ja CE(14:1). Kuigi TAG-i summakontsentratsioon ei olnud olulineHC-rühmaga võrreldes on mitme üksiku TAG-i alandatud tasemed kooskõlas

Joonis 6. Ülevaade lipiidide klassidest.Seerumi lipidoomide andmekogumit analüüsiti, et üldiselt võrrelda ME/CFS rühma (ME/All) ja 3 metabotüübi alamhulka(M1–M3) HC rühma suhtes. (A) Vulkaani graafikud annavad üldise ülevaate kõigist antud klassi lipiidimolekulidest koos –logiga10selleP-väärtuspealy telg ja logi2 korda muuta kohtaxtelg. Iga punkt tähistab metaboliiti ja on värvitud vastavalt muutuste suunale ja olulisuse tasemele HC as suhtesmärgitud (P < 0.05,="" 2-tailed="" welch's="" test;="">q < 0.05,="" adjusted="">Pväärtus). Igas kvadrandis olev arv annab vastava arvuq- olulised metaboliidid, ja täiendavadp-olulised metaboliidid on näidatud sulgudes. (B) Spetsiifiliste rasvhapete suhteline kogus (FA, esimene veerg) erinevates lipiididesklassides (veeru pealkiri) ME/CFS kogurühmas (alumine silt, A) ja vastavalt metabotüübi alamhulkadele (M1–M3). Soojuskaardi lahtrite värv kuvablogi2 korda muutus HC suhtes, nagu näidatud. *P< 0.05,="" 2-sabaga="" welchi="" test;="">q< 0.05, korrigeeritudP-väärtus. Kokku, rasvhapete kogusumma kõigi lipiidiklasside lõikes;CE, kolesterooli ester; CER, keramiid; DAG, diatsüülglütserool; DCER, dihüdrokeramiid; FFA, vaba rasvhape (esterdamata rasvhappe sünonüüm, NEFA); HCER,heksosüültseramiid; LCER, laktosüültseramiid; LPC, lüsofosfatidüülkoliin; LPE, lüsofosfatidüületanoolamiin; LPL, lüsofosfolipiid; MAG, monoatsüülglütserool;PC, fosfatidüülkoliin; PE, fosfatidüületanoolamiin; PI, fosfatidüülinositool; PL, fosfolipiidid, SM, sfingomüeliin; SP, sfingolipiidid; TAG, triatsüülglütserool.

laborimõõtmistel täheldati suhteliselt madalat seerumi TAG kogukontsentratsiooni (joonis 3D). Lisaks, oli fosfolipiidide (PC, PI, trend) summaarsete kontsentratsioonide märkimisväärne või trendikas langusPE jaoks) ja lüsofosfolipiidid (LPC, LPE) (täiendav andmekogum 2, leht 3). Märkimisväärset polnudmõju sfingolipiidide alamklasside üldtasemetele, kuid täheldati madalamat DCER-i kogutaset. AastalNEFA fraktsioon, 16:1, 18:1 ja 18:2 rasvhapete suhteline rikastus (mooliprotsent)happed, samas kui TAG-i fraktsioonis oli oluliselt madalam C12- ja C14-rasvhapete sisaldus (täiendavAndmekogum 2, leht 10).

Leiud on kooskõlas rasvade suurenenud mobilisatsiooni ja oksüdatsioonigahapped, nagu viitab vabade rasvhapete, glütserooli ja ketoonkehade suurenenud kontsentratsioon. Täheldatudmuutused ME-M1 alamhulgas võivad jäljendada metaboolseid kohandusi, mis teadaolevalt toimuvad vastusena energialenälgimisest või treeningust põhjustatud pinge (50, 51). Teoreetiliselt võib sellise reaktsiooni põhjustada ebanormaalneglükoosi katabolismi reguleerimine, krooniline kõrge ATP nõudlus või mitokondriaalse hingamise lahtiühendaminemis põhjustab liigset oksüdatiivset voogu ja ebaefektiivset ATP tootmist.Metabotüüp ME-M2 lipidoom.Selles alamrühmas oli kõrgem kontsentratsioon 538 892 lipiidühendist jamadalamad kontsentratsioonid 27/892, võrreldes HC rühmaga (joonis 6; täiendav andmekogum 2, leht7). Valdav enamus kõrgendatud ühendeid olid kas TAG-i (454 liiki) või DAG-i erinevad liigid(43 liiki; joonis 6); vastavalt oli nende kahe lipiidi kogukontsentratsioon seerumis oluliselt kõrgemklassid. Samuti oli mõnede üksikute liikide kolesterooli tase ja kogu klassi kontsentratsioon kõrgemestrid. Mitu üksikut fosfolipiidi (25 liiki PC, PE ja PI) ja sfingolipiidi (8 liiki SM,CER, DCER ja HCER) olid kõrgenenud, kuid nende ühendiklasside üldkontsentratsioonid olid peamiseltei mõjuta, välja arvatud PI-klass, millel on märkimisväärne tõus võrreldes HC rühmaga (täiendavAndmekogum 2, leht 3).

Sarnaselt ME-M1 alamhulgale ei olnud sfini kogutasemele olulist mõjugolipiidide alamklassid. Mitmel üksikul NEFA-l (10 liiki) oli ME-M2 alamhulga seerumikontsentratsioon madalamvõrreldes HC rühmaga, aidates kaasa madalamale NEFA kogutasemele. Seoses fosfolipiidide esinemisegamadalamal tasemel, olid mõjud sisuliselt kooskõlas muutustega, mida on juba kirjeldatud ühtsetena ME/CFS rühm. Kõrgenenud seerumi TAG kontsentratsioon ja vähenenud NEFA kontsentratsioon ME-M2 alamrühmasHC rühmaga võrreldes kinnitati täiendavates laboratoorsetes analüüsides (tabel 2 ja joonis 3D).Kooskõlas kõrgemate TAG-i ja DAG-i tasemetega suurenes üldiselt esterdatud rasvhapete hulk.these glycerolipids, across the fatty acid spectrum (Figure 6B). In summary, the metabolic phenotype of this alamhulka iseloomustas eriti kõrge seerumi TAG-i kontsentratsioon (naised) ja madal NEFA (mõlemadsood). TAG-i ja DAG-i suurenenud kaubitsemine veres on sageli seotud metaboolse tasakaalustamatusega, ülemääraseperifeerse lipiidide akumuleerumine ning rakuliste ja mitokondriaalsete stressireaktsioonide esilekutsumine. Sellised mõjud onkirjeldatud kui erinevate krooniliste haiguste tagajärgi, mis hõlmavad ka põletikku (34).Metabotüüp ME-M3 lipidoom.Sellel väikesel alamhulgal oli kõrgem kontsentratsioon 22 lipiidist 892-st ja madal5 lipiidi kontsentratsioon 892-st, võrreldes HC rühmaga (joonis 6A; täiendav andmekogum2, leht 8). Suurenemist täheldati peamiselt teatud kolesterooli estrite (7 liiki) ja fosfolipiidide (12liigid). Nimelt oli 6 PE plasmalogeeni seerumitase selles alamrühmas kõrgem, mis oli kontrastiksmõju sellele fosfolipiidide alamklassile kahes teises ME/CFS alamrühmas. Vähesed lipiidid, millel on madalam seerumkontsentratsioon ME-M3 alamrühmas võrreldes HC rühmaga hõlmas kahte NEFA liiki (FFA[14:0],FFA[20:4]) ja 3 PC derivaati (LPC[20:2], PC[16:0/22:4], PC[18:1/20:2]). See alamhulk kuvati kõrgemalSM üldtase ning kõrgema üldkolesterooli estri ja PE taseme suundumused võrreldes HC rühmaga.Erinevate lipiidiklasside rasvhapete koostisele leiti suhteliselt vähe mõju (joonis 6B).Selgus, et mitmed mõjutatud üksikud tunnused olid selle alamhulga jaoks ainulaadsed, võrreldes teistega,kuid võimalikke tagajärgi on katsealuste vähese arvu tõttu raske hinnata. Üldise vaataminetendentside tõttu näis alamhulk ME-M3 olevat sarnasem alamhulgaga ME-M2 kui alamhulk ME-M1,nagu näitab TAG-i trendikas tõus.Metaboolse stressi hormoonide tunnusedUurisime energia homöostaasi kontrollivate valitud hormoonide ringlevat taset kontekstisfüsioloogiline tüvi, põletik ja patogenees (joonis 7). Võrreldes HC rühmaga on ME/CFS-rühmal oli insuliini ja leptiini seerumi keskmine tase veidi kõrgem, samuti madalam kõrge molekulmass(HMW) adiponektiin (joonis 7, A–C). Seda ajendas aga peamiselt ME-M2 alamhulk, kuna see ei olnud olulinevõi teiste puhul nähti trendiefekti. Vastavalt suurenenud insuliinile oli ME-M2 alamhulgal kaC-peptiidi kõrgenenud keskmine kontsentratsioon (joonis 7D). Need spetsiifilised mõjud hormoonide tasemele toetavad erinevaidregulatiivsed kontekstid ME-M1 ja ME-M2 alamhulkades ning leiud on kooskõlas vaadeldudmetaboolsed fenotüübid, mis näitavad glükoosi vähenenud kasutamist (ME-M1) ja liigset lipiidide akumulatsiooni (ME)M2). Lisaks suurenes ME / CFS rühmas FABP4 ja FGF21 kontsentratsioon seerumisvõrreldes HC rühmaga (joonis 7, E ja F). Neid tegureid peetakse energiapinge signaalideks jaon seostatud nii ainevahetushaiguste kui ka treeninguga (52, 53). Ainult ME-M2 alamhulk oli märkimisväärneFGF21 tõus. Seal oli väike rühm patsiente, kellel oli eriti kõrge FGF21 taseME-M2 alamhulk ja kahtlustame, et see võib viidata maksa metaboolse stressi liigsele koormusele. Kõrgusseerumi FABP4 kontsentratsioon oli ME-M1 ja ME-M2 alamrühmades sarnane. Täheldatud endokriinsedallkirjad on kooskõlas dereguleeritud ainevahetuse ja kõrgenenud energiakoormusega ME/CFS-iga patsientidel,ja linkidega regulatiivsetele võrkudele, mis võivad selgitada kontekstist sõltuvaid vastuseid.

Joonis 7. Seerumi signaalifaktorite muutused on seotud energia metabolismiga. 

Valitud hormoonid, mis võivad olla seotud energiakoormusega ja dereguleeritudmetabolismi mõõdeti ME / CFS-i ja HC-ga patsientide seerumis, kasutades immuunpõhiseid meetodeid. (A–F) Seerumi kontsentratsioon olimõõdeti 83 ME/CFS-iga patsiendil ja 30 HC-ga patsiendil insuliini suhtes (pg/ml) (A), leptiin (ng/mL) (B), HMW adiponektiin (μg/mL) (C), C-peptiid (pM) (D),  FGF-21 (pg/mL) (E) ja FABP4 (ng/mL) (F). Näidatud on rühma mediaan ± IQR. NäidatudPväärtused (üleval paremal) on 4-rühmade HC, M1,M2 ja M3, kasutades 1-tee Kruskal-Wallis ANOVA. *P <0.05, mann-whitney="">Utest; **q < 0.05,="" adjusted="">P-väärtus

Arutelu

See uurimuslik metaboomika uuring näitas ME / tavaliste ja muutuvate metaboolsete fenotüüpide kaarti.CFS. Vaadeldud metaboolsed muutused sobivad peamiselt energia otsese ja kaudse mõju paradigmassetüvi. Füsioloogilist tähtsust toetasid seosed endokriinsete ja kliiniliste tunnustega.Järgmise arutelu kaudu soovitame, et energiatüve võib tuleneda pingutustundlikust koe hüpoksiastja viib metaboolse kohanemise ja kompenseerimise süsteemsete mustriteni.ME/CFS rühma tavalistes metaboolsetes muutustes domineeris suhteliselt väike arvrajad, millel on usaldusväärne mõju energia homöostaasile. Kõrgenenud ringleva glütserooli tase viitab sellele, et lipolüüs onindutseeritud ja seda täheldatakse tavaliselt paastumise ja treeningu ajal (35, 48). Lisaks mitmed leiudnõustuda aminohapete muutunud kasutamisega ME/CFS-iga patsientidel, sealhulgas BCAA-d, trüptofaan,ja teised. Puriini nukleotiidide, nagu adenosiin ja ksantosiin, lagunemissaaduste suurenemineilmnes ka võimaliku energiatüve allkirjana, mis tavaliselt peegeldab suurenenud ATP-vajadust jamuutunud aminohapete metabolism lihastes (36). Süsteemset metaboolset stressi toetas kõrgenenud FABP4ja FGF21, mis võivad anda märku kompenseerivatest programmidest, aga ka koespetsiifilistest reaktsioonidest (54, 55). Corticosteroidid ei tundunud olevat seotud, kuna need sõltusid füüsilise funktsiooni skooride asemel vanusest ja KMI-st(Täiendavad andmed 3) ja me ei leidnud hommikuse kortisooli ja ACTH muutusi ME / CFS-is võrreldeskoos HC-ga. Eriti vähenesid mõned linoolhapet sisaldavad fosfolipiidid (18:2). See rasvhape onArahhidoonhappe, põletiku ja vaso-ga seotud keskse sõnumimolekuli, oluline eelkäijalaienemine. Arahhidoonhappe derivaatide, nagu 12-HETE ja 12-HHTrE, sisalduse vähenemine näitab veelgiet auto- ja parakriinsed protsessid võivad olla mõjutatud. Nagu allpool täpsemalt käsitletud, võivad mõned neist mõjudest ollaseotud mehhanismidega, mis võivad olla seotud ME/CFS sümptomitega.

ME / CFS-i rühmas heterogeensed mõjud väljendasid spetsiifilisi dereguleeritud fenotüüpeenergia metabolism patsientide alarühmades. 2 kõige erinevamat ME/CFS metabotüüpi, ME-M1 ja ME-M2,kooskõlla tuntud krooniliste haiguste fenotüüpidega, millel on immuno-metaboolsed prognoosid (34, 37, 38). Seetuleb meeles pidada, et ühelgi meie uuringu patsiendil ei olnud kliinilist prediabeetilist ega diabeetilist diagnoosi. TheME-M1 alamhulk näitas vaatamata normaalsele tasemele kõrgenenud vabade rasvhapete (st NEFA) ja ketoonkehade taset seerumis.glükoos ja insuliin. See võib sarnaneda kontekstiga, kus on füsioloogilised seosed glükoosi nälgimise ja füüsilise koormusegatsise (33, 35). ME-M2 alamrühmas väljendati erinevat metaboolset profiili kõrgenenud seerumi TAG jainsuliini keskmine tase, kuid see ei mõjutanud vere glükoosisisaldust. See võib kajastada lipiidide poolt indutseeritud insu madala kvaliteediga märkelin-resistentsus, mis on seotud ektoopilise perifeerse lipiidide akumulatsiooni ja põletikuliste reaktsioonidega (56). Mõlemadverevoolu autoregulatsiooni on leitud inimestel, kellel on seletamatu pingutustalumatus, võib-ollaEndoteeli ja mikrotsirkulatsiooni düsfunktsiooni mehhanismid veresoonte endoteelile (66, 76, 77, 79,80). Kokkuvõttes leiame, et ME / CFS-iga patsientide metaboolsed muutused ühilduvad häiritud häiretegakoe hüpoksiast tingitud energeetika pingutusel. Selle saavutamiseks tuleks läbi viia täiendavad uuringudteooriat ja tuvastada võimalikud tugistrateegiad kliinilise ravi parandamiseks.Uuringu võimalikud piirangud hõlmasid metaboliitide stabiilsust ja globaalsete sihtmärkide piiratud täpsustmetaboloomika (81). Ühemõõtmeliste tunnuste valiku piirangud rühmitamise ja tuvastamise eesmärgilPatsientide alatüüpide leidmine suuremõõtmelistes andmekogumites on statistikaringkondades hästi teada (82, 83)(Täiendavad andmed 1). Meie põhjalik hinnang võimalikele segadustele, nagu sugu, BMI, vanus, toitumine võiravimid ei näidanud, et need olid ME / CFS-i fenotüüpide peamised tõukejõud, kuid need võivad kaasa aidataindividuaalsele variatsioonile (täiendavad andmed 1). Uuringu tugevuseks oli see, et statistilised analüüsid olid tugevadl ja sõltumatult toetatud mitmekihiliste biokeemiliste leidude ja põhjendustega.Kokkuvõttes annab uuring ME/CFS-iga patsientidel esinevate metaboolsete muutuste kaardi.Leiame, et täheldatud muutused sobivad kokku näiteks kudede põhjustatud suurenenud energiakoormusegahüpoksia pingutusel. Konkreetsete radade võimalikud rollid tuleb kinnitada ja edasi uuridasuunatud uuringud.

meetodid

Minuga patsiendid/CFSja HC. Kokku 83 ME-ga patsienti/CFSja 35 HC kaasati sellesse uuringusse.Kõik patsiendid vastasid ME/CFS Kanada konsensuskriteeriumidele (1). Vereproovid kogutienne sekkumist (alustase) kahes eraldi kliinilises uuringus, mida juhtis Haukelandi ülikooli haigla, RituxME" uuring (ClinicalTrials.gov NCT02229942, 2014–2017; viide 45) ja "CycloME" uuring (ClinicalTrials.govNCT02444091, 2015–2020; viide 12). HC proovid koguti (aastatel 2015–2017) isikutelt, kellel oliei mingit kroonilist haigust ega kroonilisi ravimeid – peamiselt Haukelandi onkoloogiaosakonna töötajateltÜlikooli haigla ja Bergeni ülikooli biomeditsiini osakond. Valiti HC rühmet see vastaks ligikaudu ME/CFS rühma vanusele ja soole. HC biomeetrilised omadusedME/CFS-iga isikud ja patsiendid on kokku võetud tabelis 1, mis sisaldab ka andmeid alarühmade kohta.ME/CFS-iga patsiendid, kellele on märgitud selles uuringus välja töötatud 3 erinevat metabotüüpi.Vereproovid koguti venoosse punktsiooniga, töödeldi standardiseeritud biopanga protseduuri kohaseltnagu on kirjeldatud katseprotokollides ja säilitatud temperatuuril –80 kraadi (12, 45). Kõik HC-ga isikud ja 71 ME/CFS-iga patsienti,ei paastunud proovide kogumisel. Ülejäänud 12 ME / CFS proovi koguti pärast üleöö paastumistja need lisati, et hõlbustada söögijärgse seisundi võimaliku mõju hindamist. Kliiniline veri ja seerumanalüüsid viidi läbi haigla standardsete laboratoorsete rutiinide kohaselt.Globaalne metaboloomika ja lipidoomika.Metaboliitide analüüside jaoks kaasasime seerumiproovid kõigist 83-stpatsiendid ja 35 HC subjekti. Analüüsid viis läbi Metabolon Inc., kasutades oma standardseid meetodeid. Andmed koguti kahe massispektromeetriapõhise analüütilise platvormi, ühe globaalse metaboliidi abil.platvorm (HD4), mis võimaldab mõõta ja tuvastada 882 ühendit, mis hõlmavad laia molekulide spektritja üks CLP, mis hindas 1005 erinevat molekuliliiki 14 lipiidiklassist. Proovid olidanalüüsitakse igapäevaste plokkidena mitme proovi- ja andmekvaliteedi kontrolli tasemega, näiteks päevadevahelise variatsioonigaparandus enne andmete normaliseerimist.Metaboolsete hormoonide analüüsid.Metaboolsete hormoonide analüüside jaoks kaasasime samad proovid, välja arvatud 5 HC,kus seerumit oli ebapiisav. Seerumiproovid lahjendati ja viidi läbi analüüsidvastavalt tootja juhistele. Komplektid, mis põhinevad Luminexi multiplekshelmeste immuunanalüüsi tehnoloogial(Luminex 100 instrument, Luminex Corp.) kasutati FABP4, insuliini, HMW adiponektiini ja leptiini tuvastamiseks.(kataloog LXSAMH, R&D Süsteemid). FGF21 mõõtmiseks kasutati ELISA-d (kataloog DF2100, R&D Süsteemid) jaC-peptiid (kataloog DICP00, R&D Süsteemid). Mõõtmised viidi läbi mikroplaadilugeja Spark abil(Tecan Trading AG). Andmete analüüs viidi läbi programmides Excel, GraphPad Prism ja R.Statistika.Kõik andmeanalüüsid viidi läbi R-stuudio keskkonnas (84), kasutades R-programmeerimistkeel (85). Esmalt eemaldasime andmetest ksenobiootikumid ja metaboliidid, mille väärtustest puudusid enam kui 25 protsentikomplekti ja puuduvate väärtuste mustrit hinnatiχ2 ja Fisheri täpne test rühma- ja soopõhiseks võrdluseks. Puuduvad väärtused imputeeriti poole miinimumi meetodil (86). Arvestusandmed normaliseeriti kvantiilis, logi2 teisendatud ja automaatselt skaleeritud. Voldi muudatused,Pväärtused (2-tailed Welchi test) ja kohandatudPväärtused(Benjamini-Hochbergi korrigeerimine) arvutati R põhifunktsioonide abil. Automaatselt skaleeritud andmed filtreeritipõhinevad korrigeerimata olulistel metaboliitidel (P< 0.05),="" et="" vähendada="" andmete="" mõõtmelisust.="" rea-="" ja="">Metaboliitide ja proovide rühmitamiseks viidi läbi oluliste funktsioonide k-keskmised ning valisime partitsioonidklastrite kohta, mida juhivad klastrisisese ruudusumma (wss), lünkstatistika ja siluetimeetod. Seda visualiseeritisoojuskaardil, kasutades ComplexHeatmapsi paketti (87) ning saadud klastrid ekstraheeriti jaHC organiseeritud eraldi HC klastriks. Neid klastreid kasutati sõltumatul visualiseerimiskattenaPCA ja laadimisgraafikut kasutati PC1 ja PC2 laadimiste visualiseerimiseks, kasutades ggplot2 (88).

Ühemõõtmelineanalüüs viidi läbi mitme muutujaga analüüsist eraldatud klastrite kohta. Organiseeriti metaboliididradadeks vastavalt ettevõtte Metabolon Inc. esitatud märkustele. Volt muutub,Pväärtused ja kohandatudP metaboliitide väärtused igas vastavas rajas visualiseeriti ggplot2 abil. Valitud biomeetrilised andmed olidkorreleerusid metaboliitidega, mis näitasid Spearmani meetodit kasutades ühtseid muutusi klastrite vahel jaP<0.05 määrati piiriks. See visualiseeriti paketi ggplot abil.CLP-platvormi andmeid eeltöödeldi, eemaldades muutujad, millest enam kui 10 protsenti puudusidväärtused andmekogus ja imputeeriti, kasutades iga metaboliidi minimaalset täheldatud väärtust. Proovidjagati HD4 varasemast analüüsist saadud vastavatesse klastritesse ja voltimismuudatusi,P väärtused (Welchi test) ja kohandatudPväärtused (FDR) arvutati R. Associated põhifunktsioonide abillipiidiklasside metaandmed saadi firmalt Metabolon Inc. ja R-paketist Lipidr (89).

Thesaadud andmed visualiseeriti ggplot2 abil. Kirjeldav statistika tehti 2-tailed Welchi abiltest normaalselt jaotatud andmete jaoks, Mann-WhitneyUkallutatud jaotusega muutujate testid jaχ2 jaFisheri täpsed testid kategooriliste muutujate jaoks (GraphPad Prism). Viidi läbi 3 või enama rühma võrdluskasutades 1-viisi ANOVA testi.Uuringu heakskiit.Kliinilised uuringud, millest saadi biopanga proovid, sealhulgas proovidterved kontrollid, kiitis heaks piirkondlik eetikakomitee (Tromsø, Norra; nr 2010/1318-4, nr.2014/365 ja nr. 2014/1672). Kõik patsiendid andsid kirjaliku teadliku nõusoleku.

LEIA PARIM BOTAANILINE HOLISTILINE HOOLDUS HAIGUSTEGA SEOTUD VÄSIMUSE TAASTAMISEKS

Meie hoolikalt käsitsi valmistatud Neuro Regeni valem sisaldab kõige paremini uuritud ürte. Igaüks neist näitab hämmastavat potentsiaali närvivalu juhtimiseks ning üldist närvi- ja neuronitoetust.

Sisaldab:

Cistanche- 

Cistanche on traditsioonilise hiina meditsiini retseptides kõige sagedamini kasutatav ravimtaimfüüsilise väsimuse leevendamine. Tegelikult on Cistanche omamoodi toidumaterjal. Traditsioonilise meditsiini teoreetilisel alusel on kaasaegne meditsiin läbi viinud palju uuringuidväsimusevastane toimekohtaCistanche. Katsed on tõestanud, etväsimusevastane toimeCistanche on tingitud kehaorganite paranemisestCistanche. Cistanchevõib parandada neerude ja maksa funktsioone, saavutades seeläbiväsimusevastane toime. Järgmine on ülevaade sellest, kuidas Cistanche suudableevendada väsimust.

4 Cistanche glükosiidide omadused

Ühiskonna arenguga läheb inimeste elu järjest kiiremaks. Päikese tõusust alates peavad kõik "elava masina" osana oma postidele tormama. Olenemata sellest, kas olete töökojas seisev tehnik, arvuti ees istuv börsikaupleja või isegi mänguväljakul mängiv üliõpilane, peate silmitsi seisma lugematute pingetega. Inimeste töökohad on erinevad, kuid neil kõigil on üks ühine probleem – väsimus. Väsimus on nagu prussakas, kes peidab end kööginurgas. Sellel pole olulist kahju, kuid see on alati inimesi vaevanud.

Kui teil jääb millestki arusaamatuks, ärge kartke mulle öelda:wallence.suen@wecistanche.com