13-nädalane 2-(l-mentoksü)etanooli subkroonilise toksilisuse uuring F344 rottide neerudes
Mar 03, 2022
Rohkem informatsiooni:emily.li@wecistanche.com
Takeshi Toyoda, Kohei Matsushita, Hirotoshi Akane, Tomomi Morikawa ja Kumiko Ogawa
1 Patoloogia osakond, Riiklik Terviseteaduste Instituut, 3-25-26 Tonomachi, Kawasaki-Ku, Kawasaki 210-9501, Jaapan
Abstraktne:
Maitseainena on sageli kasutatud {{0}}(-mentoksü)etanooli; andmed 2-(I-mentoksü)etanooli toksilisuse kohta on siiski piiratud. Tegime 13-nädalase 2-(I-mentoksü)etanooli subkroonilise toksilisuse uuringu isas- ja emasloomadel F344 rottidel annustega 0,15.d. või 250 mg/ke kehamassi kohta (suukaudselt BW-päev). hw keskmine, kasutades vehiikulina maisiõli Ühtegi rühma ei täheldatud olulisi toksikoloogilisi muutusi üldises seisundis, kehakaalus ega toidutarbimises. Hematoloogiline hindamine näitas hemoglobiini, hematokriti, keskmise korpuskulaarse mahu ja keskmise hemoglobiinisisalduse vähenemist ning trombotsüütide arvu suurenemist isastel 250 mg/kg rühmal. Seerumi biokeemia näitas isaste ja emaste rottide rühmas üldkolesterooli tõusu 250 mg/kg, emaste 250 mg/kg rühmas triglütseriidide vähenemist ja 250 mg/kg isaste rottide üldvalgu tõusu. mis näitab mõju lipiidide metabolismile ja valkude sünteesile Elundite masside puhul suurendati maksa ja neerupealiste absoluut- ja suhtelist massi mõlema soo rühmas 250 mg/kg ja meeste rühmas 250 mg/kg Histopatoloogiline analüüs näitas kroonilist nefropaatiat meestel 15 mg/kg või suuremates rühmades koos absoluutse ja suhtelise suurenemiseganeerudkaalud, samuti kõrgenenud seerumi kreatiniinisisaldus meeste rühmas 60 ja 250 mg/kg. Siiski tuvastati proksimaalsetes tuubulites a,-globuliini sisaldavad eosinofiilsed graanulid, mis viitab 2-globuliini nefropaatiale, mis on spetsiifiline isasrottidele ja millel ei olnud toksikoloogilist tähtsust. Need tulemused näitasid, et 2-(-mentoksü)etanooli kõrvaltoimeteta tase oli mõlema soo puhul 60 mg/kg kehamassi kohta päevas (DOI; 10,1293tox2020-0091:J Toxicol Patho 1 2021;34:309-317)
Märksõnad: 2-(-mentoksü)etanool, 2-1-mentoksüetanool,toitlisand, maitseaine, Fischeri rott, menthd
Sissejuhatus
{{0}}(-mentoksü)etanool (CAS nr.{2}}) on selge ja värvitu iseloomuliku lõhnaga vedelik, mida kasutatakse laialdaselt lõhna- ja maitseainena. FAO/WHO ühine toidu lisaainete ekspertkomitee (JECFA) on hinnanud 2-(1-metoksü)etanooli lõhna- ja maitseainena, mis liigitatakse mentooliga struktuuriliselt sarnaseks aineks. Lõhna- ja maitseainete struktuuriklassi alusel määrati 2-(-metoksü)etanool I klassi. Ameerika Ühendriikides ja Euroopas oli 2-(I-metoksü)etanooli tarbimine inimeste poolt hinnanguliselt 12 ug inimese kohta päevas ja 0,01 ug inimese kohta päevas, mis on mõlemad alla I klassi läve 1800 ug inimese kohta päevas. Nende hinnangute põhjal leitakse, et 2-(1-metoksü)etanool ei pruugi lõhna- ja maitseainena tavapärasel kasutamisel ohutusega seotud probleeme tekitada.
As part of the risk assessment, it has been revealed that 2-(1-menthoxy)ethanol was not mutagenic in the Ames test, and the only in vivo study performed to date was an oral acute toxicity study in male and female rats (LD.:>2,000 mg/kg kehakaalu kohta [BW)1. Vaatamata 2-(1-mentoksü)etanooli kasutamisele maitseainena. Selle ühendi korduva annuse toksilisuse kohta on saadaval piiratud andmed. Meie labor on uurinud näriliste mudelite puhul mitme toidu lisaaine, sealhulgas iga kategooria tüüpiliste lõhna- ja maitseainete toksilisust2-7. Toksikoloogilise profiili selgitamiseks ja jälgitava kahjuliku toime taseme (NOAEL) määramiseks viisime läbi 13-nädalase 2-(1-etoksü)etanooli subkroonilise toksilisuse uuringu, mis oli manustati suukaudselt F344 rottidele sondiga.
Materjalid ja meetodid
Katsekemikaal
2-(I-mentoksü)etanool (partii nr 510002, puhtus 99,9 protsenti ), tootja Takasago Int. Corp. (Tokyo, Jaapan) pakkus Jaapani tervishoiu-, töö- ja heaoluministeeriumi toiduohutuse osakonna standardite ja hindamise osakond Jaapani maitse- ja lõhnamaterjalide assotsiatsiooni (Tokyo, Jaapan) toetusel. Kuigi uuritav aine esitati optiliste isomeeride seguna (CAS nr 38618-23-4), kinnitas tootja selle 1-enantiomeerina (CAS nr 75443-64-0). 2-(1-mentoksü)etanooli vees lahustumatuse ja lenduvuse tõttu valiti manustamisviisiks suukaudne sondiga maisiõli (Wako Pure Chemical Industries, Osaka, Jaapan). 2-(1-mentoksü)etanooli lahused valmistati iga päev vahetult enne manustamist. Pärast 2-tunnist toatemperatuuril hoidmist saadi 2-(-mentoksü)etanooli jääksuhted 4, 40 ja 400 mg/ml lahust kinnitati gaasikromatograafiaga vastavalt 96,8%, 99,8% ja 96,5% (Jaapani Toidu- ja Toiduainetööstuse Keskkonnainspektsiooni Liit, Tokyo, Jaapan).
Katseloomad
Kokku osteti 40 isast ja 40 emast patogeenivaba rotti (F344/DuCrlCrlj, 5-nädalased) ettevõttest Charles River Laboratories Japan (Yokohama, Jaapan) ja neid kasutati pärast ühenädalast aklimatiseerumist. Uuringu ajal peeti loomi polükarbonaadist puurides, millel oli pehme laastud allapanu ja mida hoiti ruumis, kus oli valguse/pimeduse tsükli (12 h), ventilatsiooni (õhuvahetuskiirus 18 korda/h), temperatuuri (24 h) reguleerimiseks tõkkesüsteem. ±1 kraadi) ja suhtelist õhuniiskust (55±5 protsenti). Puure ja laastu allapanu vahetati kaks korda nädalas. Igal loomal oli tasuta juurdepääs kraaniveele ja põhitoidule (CRF-1; Oriental Yeast, Tokyo, Jaapan). Katse alguses jaotati loomad juhuslikult nelja rühma, igaühes 10 isast ja emast rotti, võttes aluseks kehamassi, mis mõõdeti vahetult enne uuritava kemikaaliga ravi alustamist.
Uuringu ülesehitus
Esialgses {{0}}päevases uuringus, milles hinnati2-(1-mentoksü)etanooli, mida manustati annustes 0,200 400 ja 800 mg/kg kehamassi kohta päevas, maksa absoluutne ja suhteline kaal suurenesid märkimisväärselt kõigis mõlema soo ravitud rühmades (andmeid pole näidatud). Nende tulemuste põhjal valisime praeguse 13- isas- ja emasrottidele manustamiseks 2-(-mentoksü)etanooli annused 0,15,60 ja 250 mg/kg kehamassi kohta päevas. nädala toksilisuse uuring.
Üldist seisundit ja suremust hinnati iga päev. Katseperioodi jooksul mõõdeti üks kord nädalas kehamassi, samuti tarnitud ja järelejäänud dieedi koguseid. Kõik rotid jäeti ravi lõppedes üleöö tühjaks ning hematoloogia ja seerumi biokeemia jaoks koguti vereproovid kõhuaordist sügava inhalatsioonianesteesia all, kasutades isofluraani. Uuringu ülesehitus oli kooskõlas Jaapani toidu lisaainete määramise ja toidu lisaainete kasutamise standardite läbivaatamise juhendiga (1996) ning heaks kiidetud Jaapani riikliku terviseteaduste instituudi loomade hooldamise ja kasutamise komitee poolt.
Hematoloogia ja seerumi biokeemia
ProCyte Dx automaatsete hematoloogiliste analüsaatorite (IDEXX Laboratories, Westbrook, ME, USA) abil analüüsiti järgmisi hematoloogilisi parameetreid: valgete vereliblede arv (WBC), punaste vereliblede arv (RBC), hemoglobiini kontsentratsioon (HGB), hematokrit (HCT). ), keskmine korpuskulaarne maht (MCV), keskmine korpuskulaarne hemoglobiin (MCH),
keskmine korpuskulaarne hemoglobiini kontsentratsioon (MCHC), trombotsüütide arv (PLT) ja erinevad leukotsüüdid, sealhulgas neutrofiilid (Neut), lümfotsüüdid (lümf), monotsüüdid (monotsüüdid), eosinofiilid (eosino) ja basofiilid (Baso). Seerumi biokeemiline analüüs viidi läbi Oriental Yeast'iga järgmiste parameetrite jaoks: üldvalk (TP), albumiin (Alb), albumiini/globuliini suhe (A/G), üldbilirubiin (Bil). glükoos, üldkolesterool (T-Chol), triglütseriid (TG), uurea lämmastik (BUN), kreatiniin (Cre), kaltsium (Ca), anorgaaniline fosfor-rus (IP), naatrium (Na), kaalium (K), kloor (Cl), as-partaataminotransferaas (AST), alaniinaminotransferaas (ALT), aluseline fosfataas (ALP) ja y-glutamüül-trans-peptidaas (y-GTP).
Elundite kaal ja histopatoloogiline hindamine
Kõigile loomadele viidi läbi täielik lahkamine. ja aju, harknääre, kopsud, süda, põrn,maks, neerupealisednäärmed,neerud, munandid ja munasarjad kaaluti. Need elundid, aga ka seljaaju, kolmiknärvi, hüpofüüsi, ninaõõne, süljenäärmete, keele, söögitoru, hingetoru, aordi, kilpnäärme, kõrvalkilpnäärme, kõhunäärme, mao, peen- ja jämesoole, submandibulaarse ja soolestiku kuded lümfisõlmed, tupp, emakas, kusepõis, eesnääre, seemnepõiekesed, munandimanust, reieluu ja rinnaku koos luuüdiga, selgroolülid, skeletilihased, istmikunärv, nahk ja piimanäärmed fikseeriti 10-protsendilise neutraalse puhverdatud formaliiniga; seejärel valmistati parafiiniga manustatud lõigud ja värviti histopatoloogiliseks uurimiseks hematoksüliini ja eosiiniga. Harderi näärmetega munandid ja silmad fikseeriti vastavalt Bouini fiksaatoris ja Davidsoni lahuses. Luukoed, sealhulgas ninaõõs, selgroolülid, rinnaku ja reieluu, eemaldati katlakivist 10-protsendilise sipelghappe ja 10-protsendilise puhverdatud formaliini seguga kuni 2 nädala jooksul. Histopatoloogiline hindamine viidi läbi kõigi kontrollrühma loomadelt saadud kudede puhul ja rühmale manustati suurim annus, välja arvatud juhul, kui täheldati raviga seotud kahjustusi.
Immunohistokeemia ,-globuliini jaoks
Isastel rottidel uuriti a.globuliini akumuleerumist neerudesse parafiiniga manustatud lõikude immunohistokeemilise analüüsiga. Antigeeni otsimiseks inkubeeriti igas rühmas 5 rotilt saadud sektsioone proteinaas K-ga (DAKO, Glostrup, Taani) 1 minut toatemperatuuril. Endogeense peroksidaasi aktiivsuse inaktiveerimiseks sukeldati kõik sektsioonid 10 minutiks toatemperatuuril 3% H, O./metanooli lahusesse. Pärast mittespetsiifiliste reaktsioonide blokeerimist 10% normaalse küüliku seerumiga inkubeeriti sektsioone globuliini primaarse antikehaga (lahjendatud 1:400; rotivastane globuliini antikeha; R&D Systems, Minneapolis, MN, USA) 4 kraadi s juures üleöö. Antikehade seondumise visualiseerimiseks kasutati Vecta-Stain Elite ABC komplekti (Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) ja 3,3'-diaminobensidiini. Kõik sektsioonid värviti hematoksüliiniga.
Statistiline analüüs
Katseperioodi kehakaalu, samuti hematoloogia, seerumi biokeemia ja elundite massi andmete väärtuste erinevusi hinnati homogeensuse suhtes, kasutades Bartletti testi. Homogeensete ja heterogeensete andmete jaoks kasutati vastavalt ühesuunalist dispersioonanalüüsi ja Kruskal-Wallise testi. Statistiliselt oluliste erinevuste määramisel kasutati kontroll- ja ravirühmade võrdlemiseks Dunnetti mitmekordset võrdlustesti. Histopatoloogiliste esinemissageduste ja astmete võrdlusi analüüsiti, kasutades vastavalt Fisheri täpse tõenäosuse testi ja Mann-W Whitney U/-testi. P väärtused<0.05 were="" considered="" statistically="">
Tulemused
Eluaegsed parameetrid, hematoloogia ja seerumi biokeemia Katseperioodi jooksul ei täheldatud olulisi kliinilisi tunnuseid ja kõik loomad jäid ellu kuni plaanitud lahkamiseni. Peale selle ei täheldatud isas- ja emasrottidel olulisi erinevusi kehakaalus ja päevases toidutarbimises (joonis 1A ja B).
Hematoloogilised ja seerumi biokeemilised andmed on näidatud vastavalt tabelites I ja 2. Hematoloogilised analüüsid näitasid oluliselt vähenenud HGB, HCT, MCV ja MCH ning suurenenud PLT isastel rottidel, kellele manustati 250 mg/kg BW/ay 2-(1-mentoksü)etanooli (tabel 1). Seerumi biokeemias täheldati 250 mg/kg rühma meestel TP, T-Chol ja Ca olulist suurenemist ning Bil ja ALP vähenemist (tabel 2). 60 ja 250 mg/kg rühmade meestel täheldati Cre märkimisväärset suurenemist ja A/G langust. Naistel registreeriti 60 ja 250 mg/kg rühmades Ca sisalduse oluline tõus ja ALP vähenemine, samas kui 250 mg/kg rühmades tuvastati kõrgenenud T-Chol ja vähenenud A/G, Bil, TG.AST ja ALT kg rühma.
Kuigi meestel, kellele manustati 60 mg/kg, täheldati olulist TG tõusu ja Cl vähenemist, viitas dooside seose puudumine sellele, et need erinevused ei olnud seotud uuritava ainega kokkupuutega.
Organite kaalud
Andmed elundite massi kohta on kokku võetud tabelis 3. Maksa absoluutne ja suhteline kaal suurenesid märkimisväärselt mõlemast soost 250 mg/kg rühmas (tabel 3). 60 mg/kg rühma kuuluvatel meestel täheldati maksa suhtelise kaalu märkimisväärset suurenemist, meestel absoluutne ja suhteline.neerudkaal suurenes oluliselt 60 ja 250 mg/kg rühmades. 250 mg/kg meeste rühmas täheldati neerupealiste absoluutse ja suhtelise massi ning põrna ja munandite suhtelise massi märkimisväärset suurenemist.
Histopatoloogia ja immunohistokeemia
Histopatoloogiliste ja immunohistokeemiliste leidude andmed on kokku võetud vastavalt tabelites 4 ja 5. Histopatoloogilised leiud näitasid, et eosinofiilsete graanulite (joonis 2A–D), basofiilsete tuubulite ja hüaliinikipsi kuhjumise sagedus, samuti fokaalne interstitsiaalne põletikneerud, suurenesid märkimisväärselt meestest koosnevates ravirühmades võrreldes kontrollrühmaga (tabel 4). Immunohistokeemiliste analüüside põhjal ilmnes uuritava ainega ravitud isastel rottidel globuliini immunoreaktiivsuse suurenemine proksimaalsete tuubulite epiteelirakkudes, mis näitab selget sõltuvust annusest (joonis 2E-H) (tabel 5).
Lahkamisel ilmnes ühel isasel rotil 250 mg/kg rühmas parempoolne tugev laienemine.neerudhistoloogiliselt iseloomuliku nefroblastoomi tõttu. Kuigi nefroblastoom on enamiku rotitüvede9 puhul haruldane, peeti seda juhtumit juhuslikuks, kuna ühelgi teisel loomal ei esinenud sarnaseid kahjustusi. Lisaks jäi suukaudse manustamise kantserogeensuse uuringutes spontaansete nefroblastoomide esinemissagedus isastel F344/DuCrlCrlj rottidel väidetavalt vahemikku 0-2.0 protsenti 10. Kuigi teistes elundites avastati juhuslikult mitmeid kahjustusi, ei toimunud olulist ravi. sõltuvad muutused nende kahjustuste esinemissageduses olid ilmsed.
Arutelu
Praeguseks on JECFA hinnanud 24 soodustavat ainet, sealhulgas 2-(-mentoksü)etanooli, kui aineid, mis on struktuurselt sarnased mentooliga ja praeguse hinnangulise tarbimise taseme juures on kõik loetletud kui "ohutusprobleemid". 2-(1-Mentoksü)etanool on klassifitseeritud alitsükliliste alkoholide või eetrite alarühma ja seda peetakse peamiselt konjugeerituks glükuroonhappega, millele järgneb eritumine uriiniga!. Kuigi nende ainete suukaudsed LD väärtused närilistel on suhteliselt kõrged, on korduvannuse toksilisuse uuringute andmed piiratud. 13-nädalane korduvannuse toksilisuse uuring näitas, et mentüülpürrolidoonkarboksülaati (CAS nr 68127-22-0), mis on struktuurilt mentooliga sarnane ühend, võib seostada suhtelise maksa ja maksa suurenemisega.neerudisaste ja emaste Wistari rottide kaal. .-globuliini akumuleerumist isaste rottide proksimaalsetesse tuubulitesse täheldati ka annuse 1,1 ui mg/kg kehamassi kohta päevas ja NOAEL määrati 109 mg/kg kehamassi kohta päevas.
Käesolevas 13-nädalases 2-(1-mentoksü)etanooli subkroonilise toksilisuse uuringus ei täheldatud toksikoloogilisi muutusi üldises seisundis, kehakaalus ja toidutarbimises. Pärast hematoloogilist hindamist täheldasime meestel HGB (96,6 protsenti kontrollväärtuste suhtes), HCT (96,3 protsenti), MCV (98,4 protsenti) ja MCH (98,2 protsenti) vähenemist ning PLT suurenemist (111 protsenti). 250 mg/kg rühmas, mida peeti 2-(1-mentoksü)etanooliga töötlemise toksikoloogilisteks mõjudeks nii absoluutselt (115 protsenti mõlemast soost) kui ka suhteliseks (meestel 119 protsenti ja naistel 111 protsenti). )maksa kaal tõusis 250 mg/kg rühmas märkimisväärselt mõlemal sugupoolel. Kuigi maksas histopatoloogilisi muutusi ei esinenud, suurenes seerumi T-Chol (meestel 10 protsenti ja naistel 121 protsenti) ja TP (meestel 105 protsenti) ning TG vähenemine (naistel 60,1 protsenti) 250. eluaastal. mg/kg rühmad näitavad toksilisi muutusi, mis on seotud lipiidide metabolismi ja valkude sünteesiga maksas. Samuti tuvastati HGB ja MCH vähenemine ning kõrgenenud PLT, T-Chol ja TP meestel ning vähenenud TG ja suurenenud maksa absoluutne ja suhteline kaal mõlemal sugupoolel, millel on statistiline olulisus 28-päevases eeluuringus (andmeid ei ole näidatud). ), mis kinnitab, et need muutunud hematoloogilised ja seerumi biokeemilised parameetrid, samuti maksa kaal, ei olnud juhuslikud, vaid katseainega seotud mõjud. Seevastu käesolevas uuringus 60 mg/kg meeste rühmas tuvastatud maksa suhtelise kaalu olulise suurenemisega ei kaasnenud absoluutmassi suurenemist ega muutusi seotud biokeemilistes parameetrites, mis viitab sellele, et see tõus oli adaptiivne muutus.
250 mg/kg meeste rühmas peeti uuritava kemikaaliga seotuks neerupealiste märkimisväärselt suurenenud absoluutne (120 protsenti) ja suhteline (118 protsenti) kaal. Lisaks näitasid mõlema soo neerupealiste suurenenud absoluutne ja suhteline kaal päevases eeluuringus (andmeid ei ole näidatud) selget annusest sõltuvust, mis näitab seost uuritava kemikaaliga töötlemisega. Kuigi neerupealiste hüpertroofia võib tuleneda stressist, ei leitud nii käesolevates kui ka esialgsetes uuringutes stressile viitavaid leide, nagu vähenenud kehakaalu tõus või harknääre ja teiste lümfoidorganite atroofia. Kuna steroidogeneesiga seotud ensüümide12 inhibeerimise korral ei pruugi neerupealistes histopatoloogilisi muutusi esineda isegi glükokortikoidide tootmise häire korral, ei saa välistada võimalust, et neerupealiste suurenenud kaal on toksiline leid. Seevastu põrna ja munandite suhtelise massi suurenemist meessoost 250 mg/kg rühmas, mida eeluuringus ei täheldatud, peeti toksikoloogiliselt ebaoluliseks histopatoloogiliste kahjustuste puudumise või oluliselt suurenenud absoluutkaalu tõttu. Sarnaselt näitas seerumi biokeemia A / G vähenemist ja Ca suurenemist mõlemal sugupoolel, millel ei peetud toksikoloogilist tähtsust, arvestades, et seotud parameetrites ei tuvastatud kõrvalekaldeid. Lisaks olid Bil ja ALP taseme langus mõlemast soost ning ASAT ja ALAT vähenemine naistel vastupidine eeldatavatele toksilistele mõjudele ja neid ei peetud oluliseks.
Kõigi ravitud rühmade meestel täheldati kroonilist nefropaatiat, mida iseloomustasid basofiilsed tuubulid, hüaliinikips ja fokaalne interstitsiaalne põletik. Lisaks suurenenud seerumi Cre ja absoluutne ja suhtelineneerudkaal tuvastati meessoost 60 ja 250 mg/kg rühmas; neid muutusi ei täheldatud naiste ravirühmades. Nendel juhtudel suurenes eosinofiilsete graanulite kogunemine proksimaalsetesse tubulaarsetesse epiteelirakkudesse näiliselt annusest sõltuval viisil. Need graanulid kinnitati immunohistokeemiaga 2uglobuliinina, mis näitab x-globuliini nefropaatia esinemist. -Teatud kemikaalidega, nagu d-limoneen, seotud globuliinid akumuleeruvad lüsosoomidesse ja neid täheldatakse proksimaalsetes tuubulites eosinofiilsete või hüaliinsete graanulitena9. See kogunemine võib kahjustada epiteelirakke, põhjustades kroonilist progresseeruvat nefropaatiat ja sellest tulenevat kasvaja moodustumist. Seega, kuigi 2-(1-meeste-toksü)etanooli NOAEL on seotud ., globuliini nefropaatiaga isastel rottidelneerudei tuvastatud, on seda tüüpi nefropaatia väidetavalt spetsiifiline isastel rottidel ja seega ei ole see inimeste riskide hindamisel asjakohane. ,-globuliini akumulatsiooniga seotud mehhanismide kaudu vahendatud neerupuudulikkuse suurenenud risk on väga ebatõenäoline, kuna see valk puudub hu-mansl4-s. Seetõttu peeti mõistlikuks jätta NOAEL määramisel välja meestel täheldatud kroonilise nefropaatiaga seotud muutused.
Kokkuvõtteks näitas käesolev 13-nädalane subkroonilise toksilisuse uuring, et ravi 250 mg/kg kehamassi kohta päevas 2-(/-mentoksü)etanooliga põhjustas toksilisi muutusi hematoloogias, seerumi biokeemias ning meeste ja elundite kaalus. emased F344 rotid. Täheldatud tulemuste põhjal hinnati 2-(1-mentoksüetanooli) NOAEL-iks mõlema soo puhul 60 mg/kg kehamassi kohta päevas.
Viited
1 JEFF. WHO toidulisandite sari: 60. Teatavate toidulisandite ohutuse hindamine. 579–593. 2009.
2. Akagi J, Cho YM, Mizuta Y, Toyoda T ja Ogawa K. 5-heksenüülisotiotsüanaadi (Wasabia japonicast pärit loodusidentse maitseaine) subkroonilise toksilisuse hindamine F344/DuCrj rottidel. Food Chem Toxicol. 122: 80–86. 2018. [Medline] [CrossRef]
3. Matsushita K, Toyoda T, Morikawa T ja Ogawa K. Vanilliini propüleenglükoolatsetaali 13- nädalane subkroonilise toksilisuse uuring F344 rottidel. Food Chem Toxicol. 132: 110643. 2019. [Medline] [CrossRef]
4. Matsushita K, Toyoda T, Morikawa T, Takahashi M, Inoue K ja Ogawa K. 13-nädalane 2-etüülbutanaali subkroonilise toksilisuse uuring F344 rottidel. Regul Toxicol Pharmacol. 100: 118–126. 2018. [Medline] [CrossRef]
5. Toyoda T, Cho YM, Matsushita K, Tachibana S, Senuma M, Akagi J ja Ogawa K. Heksüülatsetaadi 13-nädalane subkroonilise toksilisuse uuring SD-rottidel. J Toxicol Pathol. 32: 205–212. 2019. [Medline] [CrossRef]
6. Akagi J, Cho YM, Mizuta Y, Tatebe C, Sato K ja Ogawa K. Isoeugenoolmetüüleetri subkroonilise toksilisuse hindamine F344/DuCrj rottidel 13-nädalase suukaudse manustamise teel. Regul Toxicol Pharmacol. 102: 34–39. 2019. [Medline] [CrossRef]
7. Ide T, Mizuta Y, Akagi J, Masumoto N, Sugimoto N, Sato K, Ogawa K ja Cho YM. Sünteetilise lõhna- ja maitseaine 2,4-dimetüül- 4-fenüültetrahüdrofuraani nelja stereoisomeeri 90-päevane korduva suukaudse annuse toksilisuse uuring F344 rottidel. Regul Toxicol Pharmacol. 114: 104664. 2020. [Medline] [CrossRef]
8. Furukawa S, Nagaike M ja Ozaki K. Immunohistokeemia tehniliste aspektide andmebaasid. J Toxicol Pathol. 30: 79–107. 2017. [Medline] [CrossRef]
9. Seely JC, Hard GC ja Blankenship B. Kidney. In: Boor man's Pathology of the Rat, 2nd ed. AW Suttie (toim). Aca demic Press, London. 125–166. 2018.
10. Takanobu K, Aiso S, Umeda Y, Senoh H, Saito M, Katagiri T, Ikawa N, Ishikawa H, Mine T, Take M, Haresaku M, Matsumoto M ja Fukushima S. [F344 spontaansete kasvajate taustandmed /DuCrlCrlj rotid]. Sangyo Eiseigaku Zasshi. 57: 85–96. 2015 (jaapani keeles). [Medline] [CrossRef]
11. JEFF. WHO tehniliste aruannete seeria: 891. Teatavate toidu lisaainete hindamine (FAO/WHO ühise toidu lisaainete ekspertkomitee viiekümne esimene aruanne). 111–118. 2000.
12. Wallig MA. Endokriinsüsteem. In: Toxicologic Pathology alused, 3. väljaanne. MA Wallig, WM Haschek, CG Rousseaux, B Bolon ja BW Mahler (toim.). Academic Press, London. 565–624. 2018.
13. Swenberg JA. 2u-globuliini nefropaatia: ülevaade kaasatud rakulistest ja molekulaarsetest mehhanismidest ning nende mõjust inimeste riskide hindamisele. Keskkonna tervise vaade. 101 (lisa 6): 39–44. 1993. [Medline] [CrossRef]
14. Kõrned P. Kuseteede. In: Histopatology of Preclinical Toxicity Studies, 4. väljaanne. Academic Press, London. 537–614. 2012. aasta.