Laialdaselt sihitud ainevahetuse analüüs, et paljastada Cistanche Deserticola aktiivsete ühendite transformatsioonimehhanism aurutamis- ja kuivatamisprotsesside ajal

Cistanche deserticola on üks hinnalisemaid taimi, traditsiooniliselt Hiina meditsiinina ning seda on hiljuti kasutatud farmaatsia- ja tervisliku toidutööstuses. Aurutamine ja kuivatamine on Cistanche deserticola töötlemise kaks olulist etappi.

Kahjuks on täielik arusaamine Cistanche deserticola keemilise koostise muutustest termilise töötlemise ajal piiratud. Selles uuringus kasutati ülijõudlusega vedelikkromatograafia-tandem-massispektromeetria (UHPLC-MS/MS) põhinevat laialdaselt suunatud metaboolika analüüsi, et uurida Cistanche deserticola toimeainete transformatsioonimehhanismi aurutamis- ja kuivatamisprotsesside ajal. Kokku tuvastati Cistanche deserticola termilise töötlemise käigus 776 metaboliiti, millest 77 metaboliiti olid erinevalt reguleeritud (p < 0,05), millest 39 oli ülesreguleeritud (UR) ja 38 allareguleeritud (DR). Aurutamise ja kuivatamise käigus tuvastati vastavalt 47 (17 UR, 30 DR) ja 30 (22 UR, 8 DR) erinevat metaboliiti.

Aurutamise käigus täheldati kemikaalide kõige enam varieerumist. Metaboolsete radade analüüs näitas, et aurutamise ajal täheldati fenüülpropanoidide, flavonoidide biosünteesi ja alaniini metabolismi, kuivatamise ajal aga glütsiini, seriini ja treoniini metabolismi, tiamiini metabolismi ja küllastumata rasvhapete biosünteesi. Termilise töötlemise ajal tekkivate keemiliste muutuste võimalikud mehhanismid esitati ka Kyoto geenide ja genoomide entsüklopeedia (KEGG) raja analüüsis. Lisaks ilmnes Cistanche deserticola välimuse mustaks muutumine peamiselt aurutamisfaasis, mitte kuivatamisetapis, mis on seotud aminohapete metabolismiga. Kõik tulemused näitasid, et aktiivsete ühendite moodustumine Cistanche deserticola töötlemisel toimus peamiselt aurutamisetapis.

click cistanche tubulosa täiendada mõju tooteid

SISSEJUHATUS

Orobanchaceae sugukonda kuuluv Cistanche deserticola on üks kuulsamaid toniseerivaid ravimeid ning seda levitatakse peamiselt maailma troopilistes ja subtroopilistes piirkondades, nagu Hiina, Iraan, India, Mongoolia jne (1–3). Cistanche deserticola on üks kõige sagedamini kasutatavaid taimseid ravimeid neerupuudulikkuse, impotentsuse, naiste viljatuse, haigusliku leukorröa, rohke metrorraagia ja seniilsuse raviks (4, 5). Kaasaegsed farmakoloogilised uuringud näitasid, et Cistanche deserticola parandab immuunsust, vähendab väsimust, vananemist ning parandab õppimis- ja meeldejätmisvõimet (6). Nende tervisega seotud eeliste tõttu on selle varremugulatest valmistatud Cistanche deserticola tee välja töötatud toitva lisandina ja tarbijad eelistavad seda üha enam. Cistanche deserticola toimeained vastutavad selle meditsiiniliste funktsioonide eest (7). Varasemates uuringutes on teatatud mõnedest Cistanche deserticola toimeainetest, nagu fenüülpropanoidid (näiteks fenüületanoidglükosiidid), flavonoidid, polüsahhariidid, oligosahhariidid, iridoidid ja lignaanid (6, 8).

Kiiresti riknevate ja hooajaliste omaduste tõttu ei ole värske Cistanche deserticola aastaringne varu saadaval, seega muutub töödeldud Cistanche deserticola peamiseks tarbimisvormiks. Cistanche deserticola kvaliteet sõltub paljudest teguritest, nagu kliima, elupaigad, peremehed, saagikoristusaeg, töötlemistehnoloogia ja taime asukoht, mille hulgas on eriti oluline töötlemistehnoloogia (4). Aurutamine ja kuivatamine on Cistanche deserticola töötlemise kaks olulist etappi. Tavaliselt aurutati koristatud Cistanche deserticola risoomi aurutuskatlas temperatuuril 93 °C 30 minutit ja seejärel kuivatati temperatuuril 60 °C, kuni niiskusesisaldus oli 10 protsenti märjal alusel (wb) (9).

Varasemad uuringud on näidanud, et aurutamine võib soodustada Cistanche deserticola aktiivsete koostisosade, nagu fenüületanoidglükosiidide, lahustuvate suhkrute ja polüsahhariidide kogunemist, millega kaasneb välimuse värvuse tumenemine (9–11). Enamik varasemaid uuringuid keskendus siiski teatud kindlatele ühenditele ning väga harvadel juhtudel käsitletakse kõigi keemiliste ühendite ja metaboliitide muundamise mehhanismi muutusi töötlemise ajal. Seetõttu on vaja selgitada Cistanche deserticola metaboliitide muutusi erinevates töötlemisetappides.

Metaboloomikat rakendatakse tavaliselt kõigi proovis tuvastatud väikeste molekulide (nimelt sihitud ja mittesihtühendite) kvalitatiivseks ja kvantitatiivseks analüüsiks (12). Toidu töötlemisel toimuvate erinevate keemiliste komponentide muutuste analüüs aitab süvendada arusaamist keemiliste komponentide muundumise mehhanismist toiduainete töötlemisel (12). Viimastel aastatel on metaboomikat rakendatud ka Cistanche deserticola erinevate osade (11) ja erinevate Cistanche deserticola liikide (13) eristamiseks.

Nendes uuringutes põhinesid metaboliitide tuvastamise meetodid enamasti sihipärasel ja mittesihipärasel metaboloomikal. Nende hulgas põhineb sihipärane metaboloomika standardtoodetel, millel on suur andmete täpsus ja usaldusväärsus, kuid metaboliitide katvus on piiratud. Suunatud metaboolika on metaboolika uuringute oluline osa, see on pigem konkreetsete metaboliidirühmade, mitte kõigi proovi komponentide sihipärane ja spetsiifiline tuvastamine ja analüüs. Mittesihitud metaboolse tehnoloogia abil saab olemasolevate andmebaaside põhjal kvalitatiivselt määrata metaboliite, kusjuures ühendite katvus on suur, kuid täpsus on madal. Peamised metaboliidid peavad olema kinnitatud standardsete toodetega (14). Laialdaselt sihitud metaboloomika on uus tehnoloogia, mis ühendab mittesihtmärgiks olevate ja suunatud metaboliitide tuvastamise tehnoloogiate eelised, et saavutada lai katvus, suur läbilaskevõime ja tundlikkus (15).

Sellest tulenevalt on seda tehnoloogiat laialdaselt kasutatud erinevate materjalide koostisainete muutuste uurimisel töötlemisel, näiteks erinevatel töötlemismeetoditel funktsionaalsete toiduainete toimeained (16), flavonoidid ja fenüülpropanoidühendid erinevate meetoditega töödeldud hiina vesikastanis (17). , riisi kollaseks muutumise mehhanism kollasusprotsessi ajal (18) ja iseloomuliku mittelenduva kemikaali moodustumise mehhanism oolongi tee valmistamise protsessis (19). Seetõttu on teoreetiliselt otstarbekas kasutada laialdaselt suunatud metaboliitide tehnoloogiat, et uurida toimeainete muundamise mehhanismi Cistanche deserticola töötlemisel.

Seega olid käesoleva uuringu eesmärgid (1) anda kasulikku teavet Cistanche deserticola keemiliste muutuste kohta aurutamis- ja kuivatamisprotsesside ajal, kasutades üliefektiivset vedelikkromatograafia-tandem-massispektromeetriat (UHPLC-MS/MS) kombineerituna laialdaselt sihitud metaboolse analüüsiga. lähenemine; (2) teha kindlaks erinevad metaboliidid ja nende reguleerimise reeglid ning paljastada Cistanche deserticola võimalikud muundumisteed töötlemise ajal. Seetõttu peaks see uuring andma teoreetilise viite kvaliteetse Cistanche deserticola moodustumise mehhanismile.

MATERJALID JA MEETODID Materjalid ja kemikaalid

Tooraine: Värsked Cistanche deserticola proovid saadi Hiina Xinjiangi provintsi Hetiani piirkonnast. Proovid valiti hoolikalt sama suurusega (keskmine pikkus, läbimõõt ja kaal olid vastavalt 11,7 ± 1,1 cm, 70 ± 1,1 cm ja 360 ± 8,9 g). Proove säilitati toatemperatuuril pimedas keskkonnas esialgse niiskusesisaldusega umbes 78,56% ± 3,47%. Enne katseid pesti Cistanche deserticola proove kraaniveega, et eemaldada pinnalt tolm. Üleliigne vesi selle pinnalt eemaldati blotpaberiga.

Kemikaalid: metanool, atsetonitriil ja sipelghape olid vedelikkromatograafia massispektromeetria puhtusega (LC-MS) ja ostetud Merckist (Sigma Aldrich, MO, USA). Teised analüütilised standardid näitasid puhtust üle 98 protsendi (Sigma Aldrich, MO, USA).

Eksperimentaalne disain

Varasemad uuringud on näidanud, et keemilised ühendid jaotuvad Cistanche deserticola pikisuunas ebaühtlaselt (1). Seetõttu, et saada igas proovis sama keemiliste ühendite algsisaldus, lõigati käesolevas uuringus kõik valitud Cistanche deserticola värske rühma (A) jaoks kolmeks võrdseks osaks, aurutati ilma kuivatamisrühmata (B) ja kuivatati pärast aurutamist. (C) vastavalt pikisuunalise segmenteerimise teel, mille keskpunktiks on pikisuunaline sümmeetriatelg (20).

Rühma B puhul aurutati proove vastavalt eelkatsetele järjestikku 8 minutit. Värskete Cistanche deserticolade aurutamiseks kasutati impulss-vaakumpaurutusseadet (mille on ise välja töötanud Hiina Põllumajandusülikool, Peking, Hiina). Aurutatud proovid kuivatati vaakumkülmkuivatis (LGJ-25C, Si Huan Scientific Instrument Factory Co., Peking, Hiina). Kütteplaadi ja külmalõksu temperatuurid olid vastavalt 30 ja –60 ◦C. Rühma C puhul aurutati proove järjestikku impulss-vaakumseadmega 8 minutit ja kuivatati kuuma õhuga kokkupõrkega kuivatis (mille on ise välja töötanud Hiina Põllumajandusülikool, Peking, Hiina) kuni lõpliku niiskusesisalduseni 10 protsenti (wb). Õhuvoolu kiirus ja temperatuur määrati vastavalt 6 m/s ja 60◦C, viidates Zou jt uurimistulemustele. (11). Kõiki proove hoiti enne edasist analüüsi temperatuuril –20 ◦C mitte rohkem kui 7 päeva.

Cistanche Deserticola välimuse värvi määramine

Cistanche deserticola välimuse värvi enne ja pärast iga termilist töötlemist mõõdeti kolorimeetriga (SMY2000SF, Shengming Yang Co., Peking, Hiina) ja mustust iseloomustati L ∗ väärtusega.

Proovi ettevalmistamine ja ekstraheerimine

Metaboliidi ekstraheerimine viidi läbi vastavalt meetodile, mille on varem kirjeldanud Chen et al. (21) mõningate väiksemate muudatustega. Lühidalt, kuivatatud proovid purustati segistiga (MM 400, Retsch Company, Haan, Saksamaa) tsirkooniumoksiidi helmestega 2 minutit sagedusel 60 Hz. Seejärel kaaluti igast proovist täpselt 50 mg pulbrit (sõeluti läbi 65-meššilise sõela), viidi Eppendorfi katsutisse ja ekstraheeriti 1 ml metanooli/vee seguga (v:v=3:1). Pärast 30-sekundilist keeristamist homogeniseeriti segu kaks korda sagedusel 35 Hz 4 minutit, töödeldi ultraheliga 15 minutit jääveevannis ja seejärel loksutati öö läbi temperatuuril 4 °C. Pärast tsentrifuugimist kiirusel 12, 000 p/min 15 minutit temperatuuril 4 °C, supernatant koguti ja filtriti läbi 022-µm membraani, seejärel kanti saadud ekstrakt 2 ml klaasviaalidesse ja säilitati. temperatuuril –80 °C kuni UHPLC-MS/MS analüüsini.

Metaboliitide analüüs UHPLC-MS UHPLC tingimuste järgi

UHPLC eraldamine viidi läbi, kasutades EXIONLC süsteemi (Sciex Technologies, Framingham, MA, USA). Analüütilised tingimused olid järgmised: kolonn: Waters ACQUITY UHPLC HSS T3 C18 (1,8 µm, 2,1 × 100 mm); lahustisüsteem: liikuv faas A (0,1 protsenti sipelghapet vees) ja liikuv faas B (atsetonitriili sisaldav). Gradiendi programm: 98 protsenti A/2 protsenti B 0 minuti juures, 50 protsenti A/50 protsenti B 10 minuti juures, 5 protsenti A/95 protsenti B 11 minuti juures, 98 protsenti A/2 protsenti B 13,1 minuti juures ja 98 protsenti protsenti A/2 protsenti B 15 minuti juures. Voolukiirus: 0,40 ml/min; kolonni temperatuur: 40◦C; süstimismaht: 2 µl; automaatne sissepritse temperatuur: 4◦C.

ESI-QTRAP-MS/MS tingimused

MS-i jaoks kasutati kolmekordset kvadrupooli (QQQ) lineaarset ioonilõksu massispektromeetrit (QTRAP, API 6500 QTRAP UHPLC-MS/MS) pluss QQQ spektromeetrit, mis oli varustatud ESI turboioonpihustusliidesega (Sciex Technologies, Framingham, MA, USA). analüüs. Analüütilised tingimused olid järgmised: ioonpihustuspinge: pluss 5500 V (positiivse iooni režiim)/−4500 V (negatiivse iooni režiim), kardingaas: 35 psi, lähtetemperatuur: 400 ◦C, iooniallika gaas 1: 60 psi, iooniallika gaas 2: 60 psi, deklastrimise potentsiaal: ±100 V. QQQ skaneeringud saadi mitme reaktsiooni jälgimise (MRM) katsetena kokkupõrkegaasiga (lämmastik), mille rõhk oli 5 psi.

Metaboliitide kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs

Metaboliitide kvalitatiivsed ja kvantitatiivsed analüüsid viidi läbi vastavalt Liu jt meetoditele. (18). Primaarseid ja sekundaarseid massispektromeetria andmeid analüüsiti kvalitatiivselt, tuginedes inimese enda loodud metaboolse andmebaasile (MWDB) (Metware Biotechnology Co., Ltd. Wuhan, Hiina) ja avalikule andmebaasile. Vahepeal eemaldati mõnede ainete kvalitatiivse analüüsi täpsuse tagamiseks Na plus , NH plus 4, K plus ja ioonide korduvatest signaalidest tulenevad häired ning teistest suhteliselt suurtest molekulidest tuletatud fragmentioonide korduvad signaalid ja isotoopsignaalid. tuvastamine. Metaboliitide struktuurianalüüs viidi läbi avalike andmebaaside (Mass Bank, KNApSAcK, HMDB, MoTo DB ja METLIN) osas.

Metaboliitide kvantifitseerimine viidi läbi, kasutades QQQ massispektromeetria MRM-režiimi. MRM-režiimis sõeluti esmalt kvadrupoolvarda abil sihtainete eellasioonid (emaioonid) ja välistatud ioonid, mis vastavad teistele erineva molekulmassiga ainetele, kasutades esmalt häirete kõrvaldamist. Seejärel murravad prekursoriioonid läbi põrkekambri, moodustades pärast ioniseerimist palju fragmendiraudu, mis filtreeriti QQQ-ga, et valida soovitud omadustega üksikud fragmendi ioonid, kõrvaldades samal ajal mittesiht-ioonide häired. Lõpuks integreeriti pärast erinevate proovide metaboliitide massispektromeetria andmete saamist kõigi ainete massispektri piigid ning sama metaboliidi massispektri piigid erinevates proovides integreeriti ja korrigeeriti, kasutades Multi Quant versiooni 3.0 .2 (ABSCIEX, Concord, Ontario, Kanada). Vastav suhteline metaboliitide sisaldus esitati kromatograafiliste piikide pindala integraalidena.

Andmete töötlemine ja analüüs

Metaboolseid andmeid töödeldi ortogonaalse osalise vähimruutude diskrimineerimisanalüüsi (OPLS-DA) ja hierarhilise klasteranalüüsi (HCA) abil. OPLS-DA kasutati iga rühma diskrimineerimiseks; see on madala korrelatsiooniga muutujate suhtes tundlikum kui teised statistilised meetodid (17). OPLS-DA mudelid valideeriti permutatsioonianalüüsi abil (200 korda). Mudelit peeti stabiilseks, kui mudeli parameetrid (R2 ja Q2) olid mõlemad 1 lähedal.

Arvutati metaboliitide muutuva tähtsuse projektsiooni (VIP) väärtused. Kõik metaboliidid, mille VIP väärtused olid suuremad kui 1.0 ja p-väärtused alla 0,05, valiti biomarkeriteks igaks paaris võrdluseks Cistanche deserticola erinevate termilise töötlemise etappide vahel. Erinevate metaboliitide sõelumine visualiseeriti vulkaani graafiku kujul. Metaboliitide akumuleerumist erinevate proovide vahel analüüsiti R-paketi (www.rproject.org/) abil. Venni diagramm on üles ehitatud programmi veebipõhise nutika diagrammi R (https://cloud.smartdraw.com/) järgi. Kommertsandmebaasid, nagu Kyoto geenide ja genoomide entsüklopeedia (KEGG) (https: //www.kegg.jp/kegg/), Pub Chem (https://pubchem.ncbi.nlm. nih.gov/), Diferentsiaalsete metaboliitide rikastamise analüüsiks ja metaboolsete radade leidmiseks kasutati väikese molekuli raja andmebaasi (SMPDB) (//smpdb.ca/) ja HMDB-d (https://hmdb.ca/).

TULEMUSED JA ARUTELU Välimus Cistanche Deserticola värvimuutused termilise töötlemise ajal

Cistanche deserticola välimuse värvuse erinevus värskete, aurutatud ja kuivatatud proovide vahel on kujutatud esinduslikult joonisel 1. Värskest proovidest kuivatatud proovide töötlemisetapi jooksul muutus proovide välimus kollakaspruunist tumemustaks. , ja värvi tumedus muutus üha ilmsemaks (vastav L ∗ väärtus vähenes 50,26-lt 24,90-le). Cistanche deserticola välimuse muutused toimusid peamiselt aurutamisprotsessis. Maillardi reaktsioon, mille käigus suhkrud reageerivad termilistes tingimustes aminohapetega (22), oleks suurel määral vastutav Cistanche deserticola töödeldud risoomide tumedaks muutumise eest. Varasemad uuringud on näidanud, et prekursorid muudeti Maillardi reaktsioonis värvaineteks ja tekitasid tumedat värvi aineid (23). Sarnaseid leide täheldati ka varasemates uuringutes Polygonum multiflorum'i (24) ja Polygonatum cystoma risoomide (25) aurutamise kohta. Aurutatud proovide tumedus süvenes pärast kuivatamist veelgi. Tõenäoliselt oli see nähtus tingitud pigmendi kontsentratsiooni vähenemisest kuivatamise käigus.

Ülevaade metaboliitidest töötlemata ja termiliselt töödeldud Cistanche Deserticola proovides

Kvaliteedikontrolli (QC) proovi (kõigi uuritud proovide segu) koguioonkromatogramm (TIC) ja sama proovi MRM-režiimis kemikaalide mitme piigi tuvastamise graafik on kujutatud lisajoonisel 1. Esitatud on erinevat värvi piigid. erinevad komponendid proovis. Nagu on näidatud joonisel 2, tuvastati praeguses uuringus (täiendav tabel 1) värsketes Cistanche deserticola proovides kokku 776 metaboliiti, mis jaotati 15 klassi, sealhulgas 40 aminohapet ja derivaati, 33 fenüülpropanoidi, 23 flavonoidi, 68 flavooni, 67 terpeeni, 67 fenooli, 87 alkaloidi, 13 süsivesikut, 28 nukleotiidi ja derivaate, 5 alkoholi ja polüooli, 3 puriinnukleosiidi, 15

karboksüülhapped ja derivaadid, 14 orgaanilist hapet ja derivaati, 12 fütohormooni ja 28 muud kemikaali. Nende hulgas moodustasid suurima rühma aminohapped ja derivaadid, mille suhteline sisaldus moodustas 30,26 protsenti kogu metaboliitide koostisest. Lisaks tuvastati ja klassifitseeriti fenüülpropanoidide rühma 10 tüüpi fenüületanoidglükosiide, nagu ehhinakosiid ja verbaskosiid.

Metaboliitide akumulatsiooni mustrit erinevates ravirühmades analüüsiti HCA abil. Nagu on näidatud joonisel 3, koondati 107 Cistanche deserticola tuvastatud metaboliiti soojuskaartidele, mis põhinesid Eukleidilise kauguse aritmeetikal. Erinevates termilise töötlemise etappides tuvastatud metaboliidid koondati dendrogrammi järgi kolme klastrisse. Eredam värv näitab konkreetse metaboliidi suuremat sisaldust vastavas proovis. HCA soojuskaart näitas suuremaid erinevusi värskete ja aurutatud proovide arvukuses kui aurutatud ja kuivatatud proovide vahel, mis näitab, et Cistanche deserticola metaboliidid võivad aurutamise ja kuivatamise etapis muutuda erinevalt ning metaboliitide tüübid ja kogused. aurutamisprotsess on rohkem kui kuivatamise protsess.

Cistanche Deserticola diferentsiaalne metaboliitide analüüs erinevatel termilise töötlemise etappidel

Iga töötlemise mõju Cistanche deserticolas metaboliitidele paremaks mõistmiseks on joonisel 4A näidatud paaride võrdlusrühmade OPLS-DA hajumise skoorid, mis näitavad, et värsked, aurutatud ja kuivatatud Cistanche deserticolasid olid pärast aurutamist oluliselt erinevad. Lisaks näitasid kõrgete testiväärtustega R2Y ja Q2 (nagu on näidatud täiendaval joonisel 2), et see mudel oli ilma ülepaigutamiseta väga usaldusväärne.

Metaboliitide ekspressioonitaseme skriinimiseks värske, aurutatud ja kuivatatud Cistanche deserticola vahel pärast aurutamist rakendati vulkaanigraafiku analüüsi kõigi 776 metaboliidi puhul, mis tuvastati voltide muutuse järgi, kombineerituna VIP väärtustega, et sõeluda erinevalt ekspresseeritud. metaboliidid. Olulised diferentseeritud metaboliidid valiti välja kriteeriumi alusel, mille kohaselt kordamine muudab skoori Suurem või võrdne 2 või väiksem või võrdne 0,5, kui VIP on suurem või võrdne 1. Sõelumistulemused on illustreeritud Joonis 4B. Vulkaanilisel kaardil tähistab iga punkt metaboliiti ja hajutatud punktide värv tähistab sõelumise lõpptulemust. Punane tähistab metaboliite, mis on oluliselt ülesreguleeritud (UR), roheline tähistab oluliselt allareguleeritud (DR) ja hall tähistab neid, mis on ebaoluliselt erinevad. Nagu on näidatud joonisel 4B, 47 metaboliiti värske vs aurutatud rühmas (17 UR ja 30 DR), 30 metaboliiti aurutatud vs kuivatatud rühmas (22 UR ja 8 DR) ja 65 metaboliiti värske vs kuivatatud rühmas (29 UR ja 36 DR) valiti oluliselt erinevaks. Oluliselt erinevate metaboliitide arv värske vs aurutatud rühmas oli suurem kui aurutatud vs kuivatatud rühmas, mis näitab, et mõju metaboliitidele aurutamisprotsessis on suurem kui kuivatamise protsessil.

Cistanche deserticola termilise töötlemise käigus tekkinud diferentseeritud metaboliite klassifitseeriti ja võrreldi. Need erinevalt ekspresseeritud metaboliidid klassifitseeriti 21 klassi, peamiselt aminohapped ja nende derivaadid, flavonoidid ja nende derivaadid, fenüülpropanoidid, alkaloidid, terpeenid, fenoolid ning nukleotiidid ja nende derivaadid (tabel 1). Värske vs aurutatud rühmas võib leida, et flavonoidid (nagu isokvertsitriin, trokserutiin, tsüanidiin ja fisetiin), fenüülpropanoidid (nagu klorogeenhape ja 3-(3,4-dihüdroksü{ {5}}metoksü)-2-propeenhape) ning nukleotiid ja nende derivaadid (uratsiil ja beeta-nikotiinamiidmononukleotiid) olid märkimisväärselt DR-id, samas kui aminohapped ja nende derivaadid (nagu N6-atsetüül-L-lüsiin) , 1- Metüül-L-histidiin ja L-fenüülalaniin) olid märkimisväärselt UR.

Kuid aurutatud ja kuivatatud rühmas olid seda tüüpi diferentseeritud metaboliitide ekspressioonitrendid vastupidised. Mõned aminod ja nende derivaadid (nagu N, N-dimetüülglütsiin), nukleotiidid ja nende derivaadid (nagu 2'-desoksüuridiin; desoksüuridiin) olid oluliselt DR-i, samas kui enamik fenoole (nagu metüülgallaat ja 4'-prenüüloksüresveratrool) flavonoidid (nagu isokvertsitriin ja tsüanidiin), fenüülpropanoidid (verbaskosiid) ja terpeenid (nagu terpinoleen ja furanoon) olid märkimisväärselt UR-i. Need tulemused näitasid, et Cistanche deserticola keemiline koostis on termilise töötlemise käigus läbinud muundumise, mis väljendub peamiselt flavonoidide, fenüülpropanoidide ja aminohapete muundamises ning nende komponentide konversioonimehhanism on erinevates töötlemisetappides erinev.

Varem leiti, et kõrge temperatuuri kasutamine aurutamis- ja kuivatamisprotsesside ajal soodustab metaboliitide hüdrolüüsi, redoks-, isomerisatsiooni, asendamist ja muid termofüüsikalisi ja keemilisi reaktsioone (26). Selles uuringus leiti, et metaboliidid, nagu flavonoidid ja fenüülpropanoidid, kogunesid märkimisväärselt aurutatud Cistanche deserticolasse võrreldes nende vastavate värsketega, mis näitab, et mõned olulised füsioloogilised ja metaboolsed tegevused, mis viivad flavonoidide ja fenüülpropanoidide sünteesini, võivad olla aktiveeritakse kõrgel temperatuuril ja niiskusel. Seda tulemust võib toetada ka Pengi jt aruanne. (10), kes avastasid, et PhG-de (mis kuuluvad fenüülpropanoidide hulka) sisaldus suurenes pärast aurutamist. Kuid nende komponentide kogunemine kuivatatud proovis pärast aurutamist näitas olulist vähenemist, mis võib olla tingitud nende kuumustundlike komponentide termilisest lagunemisest pikaajalise kuivatusprotsessi ajal. Varasemad uuringud on näidanud, et flavonoidglükosiidid võivad termilistes tingimustes laguneda suhkrukehadeks ja flavonoid-aglükoonideks ning flavonoidide kadu kuivatamise ajal mõjutasid sünteetiliselt temperatuur ja kuivamisaeg (26, 27). Aminohapete ja nende derivaatide (N6-atsetüül-L-lüsiin, 1-metüül-L-histidiin ja fenüülalaniin) ülesreguleerimine on tingitud kõrget temperatuuri soodustavast valkude lagunemisest aurutamise ajal. Lisaks täheldati ka seda, et mõned teised aminohapped ja nende N, N-dimetüülglütsiini, L-künureniini, glütsiini, seriini ja treoniini derivaadid olid DR. Nende aminohapete sisalduse vähenemine võib olla seotud termiliselt indutseeritud Maillardi reaktsiooniga, mille käigus redutseerivad suhkrud reageerivad aminohapetega, tekitades 5-HMF-i, mis aitab kaasa Cistanche deserticola musta välimuse tekkele (22) .

Cistanche deserticola sektsiooni välimuse värvimuutuste tulemused termilise töötlemise ajal kinnitasid seda hüpoteesi veelgi. Seetõttu oli Cistanche deserticola mustaks muutumine aurutamise ajal tõenäoliselt seotud aminohapete ainevahetusega. Venni diagrammi kasutati Cistanche deserticola tavaliste ja eksklusiivsete metaboliitide eristamiseks erinevatel termilise töötlemise etappidel. Nagu on näidatud joonisel 4C, eksisteerivad erinevate võrdlusrühmade vahel nii ühised kui ka ainulaadsed metaboliidid. Värske ja aurutatud rühma vahel täheldati 21 tavalist metaboliiti, samas kui värske ja kuivatatud rühmas ning aurutatud ja kuivatatud rühmas leiti ainult 5 ja 1 0 metaboliiti. Seega täheldati Cistanche deserticolas aurutamise ja kuivatamise termilise töötlemise etapis kokku 23 ja 17 eksklusiivset metaboliiti (p < 0,05). See tulemus kinnitas veelgi, et aurutamine oli eriti kriitiline metaboliitide muundamiseks Cistanche deserticola töötlemise ajal.

Diferentsiaalsete metaboliitide rikastamise analüüs ja KEGG raja mõjude analüüs

Värskete ja töödeldud proovide diferentsiaalsed metaboliidid (p < 0.05) kaardistati veebipõhistesse andmebaasidesse KEGG, HMDB ja PubChem, mis sisaldavad teadmisi molekulaarsete interaktsioonide, reaktsioonide ja seoste võrgustike ning rikastamise tulemuste kohta. ja üksikasjalikud metaboolsed rajad on näidatud lisatabelis 2 ja joonisel 5. Nagu on näidatud joonistel 5a1 ja a2, näitas raja mõju fenüülpropanoidi biosünteesi, flavonoidide biosünteesi, alaniini metabolismi, riboflaviini metabolismi, tauriini ja hüpotauriini metabolismi ning nikotiinamiidi metabolismi rikastumist. ainevahetus Cistanche deserticola aurutamise ajal. Kuivatamise ajal pärast aurutamist sisaldasid diferentsiaalsete metaboliitide metaboolsed rajad peamiselt glütsiini, seriini ja treoniini metabolismi, tiamiini metabolismi, pürimidiini metabolismi ja küllastumata rasvhapete biosünteesi.

Lisaks kattusid mõned metaboolsed rajad nende kahe paaripõhise võrdluse vahel, näiteks nikotinaadi ja nikotiinamiidi metabolism, fenüülpropanoidi biosüntees ja flavonoidide biosüntees, kuid nende rikastamise tasemed olid kahes paaripõhises võrdluses väga erinevad. Need tulemused näitasid, et Cistanche deserticola aurutamis- ja kuivatamisprotsesside vahelised metaboliitide konversiooniteed olid erinevad ning metaboolsete radade erinevused võivad seletada erinevusi erinevalt välistavate metaboliitide olemasolus termilise töötlemise ajal. Neid biokeemilisi muutusi võib kasutada termilise töötlemise etappide mõju mõistmiseks Cistanche deserticola koostisele.

Neli metaboolset rada (fenüülpropanoidi biosüntees, flavonoidide biosüntees, alaniini metabolism ning glütsiini, seriini ja treoniini metabolism) valiti peamiste metaboliitidena, et iseloomustada Cistanche deserticola peamiste aktiivsete komponentide muundumist termilise töötlemise ajal (joonised 5b1, b2). Praegune uuring näitas, et fenüülpropanoide ja flavonoide kogunesid, kuid aminohapped lagunesid aurutatud Cistanche deserticolas võrreldes värskete ja kuivatatud proovidega. Fenüülpropanoidi biosünteesirada on flavonoidide biosünteesi rajast ülesvoolu. Sarnased järeldused avaldasid Liu jt. (18), kes teatasid, et fenüülpropanoidide kogunemine riisi kollaseks muutumise protsessis on tavalise riisiga võrreldes oluliselt suurenenud. Fenüülpropanoidid saadakse kaneelhappest ja nende eelkäija on fenüülalaniin, mida saab sünteesida kuumutamisel fenüülalaniini ammoniaaklüaasi (PAL) aktiivsuse aktiveerimisega (28).

Varasemad uuringud teatasid, et fenüülpropanoidi rada viib kumariinide, flavoonide, isoflavoonide ja flavonoolide biosünteesini, mis on taimekaitse olulised relvad (29) ja väldivad aurutamisprotsessis tugevast kuumastressist põhjustatud rakusurma, fenüülpropanoid. rada võib suureneda kõrge temperatuuri põhjustatud bioloogilise stressi tõttu (30, 31). Flavonoidid on peamised sekundaarsed metaboliidid, mis on saadud fenüülpropanoididest (32) ja nende akumuleerumine võib kaitsta taimi oksüdatiivsete kahjustuste eest vabade radikaalide eemaldamise eest (33). Võrreldes värske ja kuivatatud Cistanche deserticolaga, võib aurutatud Cistanche deserticola flavonoidide kõrgem biosüntees olla seotud aurutamisprotsessi ajal suurenenud kuumastressiga, kaitstes reaktiivseid hapniku liike (ROS) (34, 35). Nagu on näidatud joonistel 5b3 ja b4, mängis aminohapete metabolism Cistanche deserticola termilisel töötlemisel olulist rolli. Maillardi reaktsiooni esinemise näitamiseks on kasutatud ravimtaimedes leitud alaniini, glütsiini, seriini ja treoniini sisalduse muutusi pärast aurutamist (36).

Sellegipoolest tuleks Cistanche deserticola aurutamise keerulise protsessi tõttu täiendavalt uurida Cistanche deserticola aurutamise igakülgset hindamist, nagu välimus, aktiivsed ühendid ja metaboolsed biomarkerid.

JÄRELDUSED

Käesolevas uuringus kasutati UHPLC-MS / MS-põhist laialdaselt suunatud metaboolika lähenemisviisi, et uurida aktiivsete ühendite moodustumise mehhanismi Cistanche deserticola erinevatel termilise töötlemise etappidel. Praegused tulemused näitasid, et mõnede peamiste metaboliitide, nagu fenüülpropanoidid ja flavonoidid, biosüntees paranes aurutamisprotsessi ajal märkimisväärselt. Aminohapete ekspressioonitase aurutatud Cistanche deserticolas suurenes, mis näitab transformatsiooni primaarsete ja sekundaarsete metaboliitide vahel. Lisaks ilmnes Cistanche deserticola välimuse mustaks muutumine peamiselt aurutamise, mitte kuivatamisetapis, see omadus on seotud aminohapete metabolismi rajaga. Ülaltoodud metaboliitide tase langes aga kuivatamise käigus märkimisväärselt, mis viitab sellele, et aktiivsed ühendid tekkisid peamiselt Cistanche deserticola termilise töötlemise käigus aurutamisetapis. Meie teadmiste kohaselt on see esimene kord, kui laialdaselt sihitud metaboolset meetodit kasutati aktiivsete ühendite muutuste mehhanismi paljastamiseks termilise töötlemise ajal ja nende olulist panust Cistanche deserticola mustaks muutumisse. Siiski on vaja täiendavaid uuringuid, et paremini mõista aktiivsete ühendite biosünteesi ja välimuse mustaks muutumise vahelist seost termilise töötlemise ajal.

Diferentsiaalsete metaboliitide rikastamise analüüs ja KEGG raja mõjude analüüs

Värskete ja töödeldud proovide diferentsiaalsed metaboliidid (p < 0.05) kaardistati veebipõhistesse andmebaasidesse KEGG, HMDB ja PubChem, mis sisaldavad teadmisi molekulaarsete interaktsioonide, reaktsioonide ja seoste võrgustike ning rikastamise tulemuste kohta. ja üksikasjalikud metaboolsed rajad on näidatud lisatabelis 2 ja joonisel 5. Nagu on näidatud joonistel 5a1 ja a2, näitas raja mõju fenüülpropanoidi biosünteesi, flavonoidide biosünteesi, alaniini metabolismi, riboflaviini metabolismi, tauriini ja hüpotauriini metabolismi ning nikotiinamiidi metabolismi rikastumist. ainevahetus Cistanche deserticola aurutamise ajal. Kuivatamise ajal pärast aurutamist sisaldasid diferentsiaalsete metaboliitide metaboolsed rajad peamiselt glütsiini, seriini ja treoniini metabolismi, tiamiini metabolismi, pürimidiini metabolismi ja küllastumata rasvhapete biosünteesi. Lisaks kattusid mõned metaboolsed rajad nende kahe paaripõhise võrdluse vahel, näiteks nikotinaadi ja nikotiinamiidi metabolism, fenüülpropanoidi biosüntees ja flavonoidide biosüntees, kuid nende rikastamise tasemed olid kahes paaripõhises võrdluses väga erinevad. Need tulemused näitasid, et Cistanche deserticola aurutamis- ja kuivatamisprotsesside vahelised metaboliitide konversiooniteed olid erinevad ning metaboolsete radade erinevused võivad seletada erinevusi erinevalt välistavate metaboliitide olemasolus termilise töötlemise ajal. Neid biokeemilisi muutusi võib kasutada termilise töötlemise etappide mõju mõistmiseks Cistanche deserticola koostisele.

KEGG annotatsiooni ja rikastamise analüüsi põhjal valiti peamiste metaboliitidena neli metaboolset rada (fenüülpropanoidi biosüntees, flavonoidide biosüntees, alaniini metabolism ning glütsiini, seriini ja treoniini metabolism), et iseloomustada Cistanche deserticola peamiste aktiivsete komponentide muundumist termilise toime ajal. töötlemine (joonised 5b1, b2). Praegune uuring näitas, et fenüülpropanoide ja flavonoide kogunesid, kuid aminohapped lagunesid aurutatud Cistanche deserticolas võrreldes värskete ja kuivatatud proovidega. Fenüülpropanoidi biosünteesirada on flavonoidide biosünteesi rajast ülesvoolu. Sarnased järeldused avaldasid Liu jt. (18), kes teatasid, et fenüülpropanoidide kogunemine riisi kollaseks muutumise protsessis on tavalise riisiga võrreldes oluliselt suurenenud. Fenüülpropanoidid saadakse kaneelhappest ja nende eelkäija on fenüülalaniin, mida saab sünteesida kuumutamisel fenüülalaniini ammoniaaklüaasi (PAL) aktiivsuse aktiveerimisega (28).

Varasemad uuringud teatasid, et fenüülpropanoidi rada viib kumariinide, flavoonide, isoflavoonide ja flavonoolide biosünteesini, mis on taimekaitse olulised relvad (29) ja väldivad aurutamisprotsessis tugevast kuumastressist põhjustatud rakusurma, fenüülpropanoid. rada võib suureneda kõrge temperatuuri põhjustatud bioloogilise stressi tõttu (30, 31). Flavonoidid on peamised sekundaarsed metaboliidid, mis on saadud fenüülpropanoididest (32) ja nende akumuleerumine võib kaitsta taimi oksüdatiivsete kahjustuste eest vabade radikaalide eemaldamise eest (33).

Võrreldes värske ja kuivatatud Cistanche deserticolaga, võib aurutatud Cistanche deserticola flavonoidide kõrgem biosüntees olla seotud aurutamisprotsessi ajal suurenenud kuumastressiga, kaitstes reaktiivseid hapniku liike (ROS) (34, 35). Nagu on näidatud joonistel 5b3 ja b4, mängis aminohapete metabolism Cistanche deserticola termilisel töötlemisel olulist rolli. Maillardi reaktsiooni esinemise näitamiseks on kasutatud ravimtaimedes leitud alaniini, glütsiini, seriini ja treoniini sisalduse muutusi pärast aurutamist (36). Sellegipoolest tuleks Cistanche deserticola aurutamise keerulise protsessi tõttu täiendavalt uurida Cistanche deserticola aurutamise igakülgset hindamist, nagu välimus, aktiivsed ühendid ja metaboolsed biomarkerid.

JÄRELDUSED

Käesolevas uuringus kasutati UHPLC-MS / MS-põhist laialdaselt suunatud metaboolika lähenemisviisi, et uurida aktiivsete ühendite moodustumise mehhanismi Cistanche deserticola erinevatel termilise töötlemise etappidel. Praegused tulemused näitasid, et mõnede peamiste metaboliitide, nagu fenüülpropanoidid ja flavonoidid, biosüntees paranes aurutamisprotsessi ajal märkimisväärselt. Aminohapete ekspressioonitase aurutatud Cistanche deserticolas suurenes, mis näitab transformatsiooni primaarsete ja sekundaarsete metaboliitide vahel. Lisaks ilmnes Cistanche deserticola välimuse mustaks muutumine peamiselt aurutamise, mitte kuivatamisetapis, see omadus on seotud aminohapete metabolismi rajaga. Ülaltoodud metaboliitide tase langes aga kuivatamise käigus märkimisväärselt, mis viitab sellele, et aktiivsed ühendid tekkisid peamiselt Cistanche deserticola termilise töötlemise käigus aurutamisetapis. Meie teadmiste kohaselt on see esimene kord, kui laialdaselt sihitud metaboolset meetodit kasutati aktiivsete ühendite muutuste mehhanismi paljastamiseks termilise töötlemise ajal ja nende olulist panust Cistanche deserticola mustaks muutumisse. Siiski on vaja täiendavaid uuringuid, et paremini mõista aktiivsete ühendite biosünteesi ja välimuse mustaks muutumise vahelist seost termilise töötlemise ajal.

ANDMETE KÄTTESAADAVUSE AVALDUS

Uuringus esitatud algsed kaastööd on lisatud artiklisse / lisamaterjali, edasised päringud võib suunata vastavatele autoritele.

AUTORI KAASALAD

ZA viis läbi eksperimentaalse disaini, viis läbi katsed, genereeris andmed ja kirjutas selle käsikirja. YZ viis läbi metaboolse analüüsi. XL esitas statistilise analüüsi. WS viis läbi andmetöötluse ja uurimise. YL lõpetas rahastamise hankimise, üldise raamistiku ja kirjutamise-ülevaatamise. Kõik autorid panustasid artiklisse ja kiitsid esitatud versiooni heaks.

RAHASTAMINE

Seda tööd toetas rahaliselt Guangdongi provintsi teaduse ja tehnoloogia osakond (nr 2018B020241003).

LISAMATERJAL

Selle artikli lisamaterjali leiate veebist: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fnut.2021. 742511/täis#lisamaterjal

VIITED

1. Wang X, Wang J, Guan H, Xu R, Luo X, Su M jt. Kultiveeritud Cistanche deserticola erinevate osade keemiliste profiilide ja antioksüdantide aktiivsuse võrdlus, kasutades üliefektiivset vedelikkromatograafiat-kvadrupooli lennuaja massispektromeetriat ja 1,1-difenüül-2-pikrüülhüdrasüülil põhinevat testi. Molekulid. (2017) 22:2011. doi: 10,3390/molekulid22112011

2. Fu Z, Fan X, Wang X, Gao X. Cistanches Herba: ülevaade selle keemiast, farmakoloogiast ja farmakokineetikast. J Etnopharmacol. (2018) 219:233–47. doi: 10.1016/j.jep.2017.10.015

3. Piwowarczyk R, Carlón L, Kasinska J, Tofil S, Furma ´ nczyk P. ´ Mikromorfoloogiline liigisisene diferentseerimine nektarijuhiste ja tolmeldajate maandumisplatvormi jaoks Pürenee parasiitaimes Cistanche phelypæa (Orobanchaceae). Bot Lett. (2016) 163:47–55. doi: 10.1080/12538078.2015.1124287

4. Jiang Y, Tu P. Cistanche liikide keemiliste koostisosade analüüs. J Kromatograaf a. (2009) 1216:1970–9. doi: 10.1016/j.chroma.2008. 07.031

5. Li Z, Lin H, Gu L, Gao J, Tzeng C. Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): traditsioonilise hiina meditsiini üks parimaid farmaatsia kingitusi. Front Pharmacol. (2016) 7:41. doi: 10.3389/fphar.2016.00041

6. Song Y, Zeng K, Jiang Y, Tu P. Cistanches Herba, alates ohustatud liigist kuni Hiina meditsiini suure kaubamärgini. Med Res Rev. (2021) 5:1–39. doi: 10.1002/med.21768

7. Xiong Q, Kadota S, Tani T, Namba T. Cistanche deserticola fenüületanoidide antioksüdatiivne toime. Biol Pharmac Bull. (1996) 19:1580–5. doi: 10.1248/bob.19.1580

8. Wang L, Ding H, Yu H, Han L, Lai Q, Zhang L jt. Cistanches herba: keemilised koostisosad ja farmakoloogilised toimed. Chin Herbal Med. (2015) 7:135–42. doi: 10.1016/S1674-6384(15)60017-X

9. Peng F, Xu R, Wang X, Xu C, Liu T, Chen J. Aurutamisprotsessi mõju koristusjärgse Cistanche deserticola kvaliteedile meditsiiniliseks kasutamiseks päikesekuivatamise ajal. Biol Pharm Bull. (2016) 39:2066–70. doi: 10.1248/bob.b16- 00250

10. Peng F, Chen J, Wang X, Xu C, Liu T, Xu R. Muutused fenüületanoidglükosiidide tasemes, antioksüdantide aktiivsuses ja muudes kvaliteediomadustes Cistanche deserticola viiludes auruga töötlemisel. Chem Pharm Bull. (2016) 64:1024–30. doi: 10.1248/CPB.c16-00033

11. Zou P, Song Y, Lei W, Li J, Tu P, Jiang Y. 1H NMR-põhise metaboloomika rakendamine erinevate osade diskrimineerimiseks ja Cistanche deserticola uue töötlemise töövoo väljatöötamine. Acta Pharm Sin B. (2017) 7:647–56. doi: 10.1016/j.apsb.2017.07.003

12. Zheng J, Wu Z, Yang N, Zhou K, Hu W, Ou S jt. Laialdaselt suunatud UHPLC-MS/MS metaboolne analüüs mustikatäidisega küpsetiste keemilise varieerumise kohta töötlemise ajal. Piirid toitumises. (2020) 7:569172. doi: 10.3389/fnut.2020.569172

13. Liu W, Song Q, Cao Y, Xie N, Li Z, Jiang Y jt. Alates 1H NMR-põhisest mittesihipärasest kuni LC-MS-põhise sihipärase metaboolse strateegiani kummeli põhjalikuks võrdluseks nelja Cistanche liigi vahel. J Pharmaceut Biomed. (2019) 162:16–27. doi: 10.1016/j.jpba.2018.09.013

14. Wang H, Hua J, Yu Q, Li J, Wang J, Deng Y jt. Laialdaselt suunatud metaboolne analüüs näitab mittelenduvate ja lenduvate metaboliitide dünaamilisi muutusi rohelise tee töötlemise ajal. Food Chem. (2021) 363:130131. doi: 10.1016/j.foodchem.2021.130131

15. Koistinen VM, Da Silva AB, Abrankó L, Low D, Villalba RG, Barberán FT jt. Taimtoidu bioaktiivsete ühendite ja nende metaboliitide laboritevaheline katvuse test massispektromeetriapõhise sihtmärgita metaboomika abil. Metaboliidid. (2018) 8:46. doi: 10.3390/metabo8030046

16. Santin M, Lucini L, Castagna A, Chiodelli G, Hauser M, Ranieri A. Saagikoristusjärgne UV-B kiirgus moduleerib metaboliitide profiili virsiku puuviljades. Postharvest Biol Tec. (2018) 139:127–34. doi: 10.1016/j.postharvbio.2018.02.001

17. Nie H, Chen H, Li G, Su K, Song M, Duan Z jt. Flavonoidide ja fenüülpropanoidühendite võrdlus erinevatel meetoditel töödeldud hiina vesikastanis. Food Chem. (2021) 335:127662. doi: 10.1016/j.foodchem.2020.127662

18. Liu Y, Liu J, Wang R, Sun H, Li M, Strappe P jt. Kollastumisprotsessist põhjustatud sekundaarsete metaboliitide analüüs riisi kollasuse mehhanismi mõistmiseks. Food Chem. (2021) 342:128204. doi: 10.1016/j.foodchem.2020.128204

19. Wu L, Huang X, Liu S, Liu J, Guo Y, Sun Y jt. Oolongi tee iseloomuliku mittelenduva kemikaali moodustumise mehhanismi mõistmine tootmisprotsesside käigus, kasutades integreeritud laialdaselt sihitud metaboolse ja DIA proteoomi analüüsi. Food Chem. (2020) 310:125941. doi: 10.1016/j.foodchem.2019.125941

20. Xie Y, Li X, Zhang Y, Zheng Z, Huang L, Liu D jt. Kõrge niiskusega kuuma õhuga aurutamise mõju Gastrodia elatale: aurutamisaste, kaalulangus, tekstuur, kuivamiskineetika, mikrostruktuur ja aktiivsed komponendid. Toidu biotooteprotsess. (2021) 127:255–65. doi: 10.1016/j.fbp.2021.03.005

21. Chen W, Gong L, Guo Z, Wang W, Zhang H, Liu X jt. Uudne integreeritud meetod laialdaselt suunatud metaboliitide laiaulatuslikuks tuvastamiseks, identifitseerimiseks ja kvantifitseerimiseks: rakendamine riisi metaboloomika uurimisel. Moli tehas. (2013) 6:1769–80. doi: 10.1093/mp/sst080

22. Arena S, Renzone GD, Ambrosio C, Salzano AM, Scaloni A. Piimatooted ja Maillardi reaktsioon: paljutõotav tulevik ulatuslikuks toiduainete iseloomustamiseks integreeritud proteoomikauuringute abil. Food Chem. (2017) 219:477–89. doi: 10.1016/j.foodchem.2016.09.165

23. Rizzi G P. Värviliste Maillardi reaktsiooniproduktide keemiline struktuur. Food Rev Int. (1997) 13:1–28. doi: 10.1080/87559129709541096

24. Liu Z, Chao Z, Liu Y, Song Z, Lu A. Maillardi reaktsioon, mis osaleb Polygonum multiflorum juure aurutamisprotsessis. Planta Med. (2009) 75:84–8. doi: 10,1055/s-0028-1088349

25. Jin J, Lao J, Zhou R, He W, Qin Y, Zhong C jt. Sahhariidide samaaegne tuvastamine ja dünaamiline analüüs Polygonatum cystoma risoomide auruga töötlemisel HPLC-QTOF-MS / MS abil. Molekulid. (2018) 23:2855. doi: 10,3390/molekulid 23112855

26. Wan XC. Tee biokeemia (kolmas väljaanne). Peking: Hiina põllumajanduskirjastus (2003). lk. 41–5.

27. Xu Y, Xiao Y, Lagnika C, Li D, Liu C, Jiang N jt. Erinevate kuivatamismeetoditega kapsa (Brassica oleracea var. Capitate var L) toiteomaduste, antioksüdantse võime ja füüsikaliste omaduste võrdlev hindamine. Food Chem. (2020) 309:124935. doi: 10.1016/j.foodchem.2019.06.002

28. Dixon RA, Paiva N L. Stressist põhjustatud fenüülpropanoidide metabolism. Taimerakk. (1995) 7:1085–97. doi: 10.1105/tpc.7.7.1085

29. Gupta R, Min CW, Kim SW, Wang Y, Agrawal GK, Rakwal R jt. Pruuni ja kollase värvusega sojaoa seemnete seemnekatete võrdlev uurimine, kasutades integreeritud proteoomika ja metaboloomika lähenemisviisi. Proteoomika. (2015) 15:1706–16. doi: 10.1002/pmic.201400453

30. Commisso M, Toffali K, Strasser P, Stocchero M, Ceoldo S, Baldan B jt. Fenüülpropanoidühendite mõju kuumastressitaluvusele porgandi rakukultuurides. Front Plant Sci. (2016) 7:1439. doi: 10.3389/fpls.2016.01439

31. Wahid A, Gelani S, Ashraf M, Foolad M. Heat tolerance in taimed: an overview. Environ Exp Bot. (2007) 61:199–223. doi: 10.1016/j.envexpbot.2007.05.011

32. Wu X, Yuan J, Luo A, Chen Y, Fan Y. Põuastress ja uuesti kastmine suurendavad dendrobium moniliformi sekundaarseid metaboliite ja ensüümide aktiivsust. Ind Crop Prod. (2016) 94:385–93. doi: 10.1016/j.indcrop.2016.08.041

33. Wang Y, Ren W, Li Y, Xu Y, Teng Y, Christie P jt. Mittesihipärane metaboolne analüüs, et selgitada välja di(2-etüülheksüül)ftalaadi stressi mõju lutserni (Medicago sativa) juureeksudaatidele. Sci Total Environ. (2019) 646:212–9. doi: 10.1016/j.scitotenv.2018.07.247

34. Jia X, Sun C, Li G, Li G, Chen G. Progresseeruva põuastressi mõjud Radix Astragali füsioloogiale, antioksüdatiivsetele ensüümidele ja sekundaarsetele metaboliitidele. Acta Physiol taim. (2015), 37:262. doi: 10,1007/s11738-015- 2015-4

35. Paupière MJ, Müller F, Li H, Rieu I, Tikunov YM, Visser R GF jt. Tomati õietolmu arengu ja kuumastressi reageerimise sihtotstarbeline metaboolne analüüs. Taim reprod. (2017) 30:81–94. doi: 10,1007/s00497-017-0301-6

36. Chen J, Ho C. Lenduvate ainete genereerimise võrdlus seriini/treoniini/glutamiini-riboosi/glükoosi/fruktoosi mudelisüsteemides. J Agr Food Chem. (1999) 47:643–7. doi: 10.1021/jf980771a

Huvide konflikt:

Autorid kinnitavad, et uuring viidi läbi ilma igasuguste äriliste või finantssuhete puudumisel, mida võiks tõlgendada potentsiaalse huvide konfliktina.

Väljaandja märkus:

Kõik selles artiklis väljendatud väited on ainult autorite väited ja ei pruugi esindada nende sidusorganisatsioonide või väljaandja, toimetajate ja arvustajate väiteid. Väljaandja ei garanteeri ega kinnita ühtegi toodet, mida selles artiklis hinnatakse, või väiteid, mille võib esitada selle tootja.

Autoriõigus © 2021 Ai, Zhang, Li, Sun ja Liu. See on avatud juurdepääsuga artikkel, mida levitatakse Creative Commonsi omistamislitsentsi (CC BY) tingimuste alusel. Kasutamine, levitamine või reprodutseerimine muudes foorumites on lubatud eeldusel, et tunnustatud akadeemilise praktika kohaselt on ära märgitud originaalautor(id) ja autoriõiguste omanik(id) ning tsiteeritakse selles ajakirjas avaldatud originaali. Nendele tingimustele mittevastav kasutamine, levitamine ega reprodutseerimine ei ole lubatud.

For more information:1950477648nn@gamil.com