Cistanche Tubulosa tüvedest pärit glükosiidide koguhulk leevendab depressioonilaadset käitumist: fütokemikaalide ja soolestiku mikrobiota kahesuunaline koostoime
Mar 16, 2022
lisateabe saamiseks:ali.ma@wecistanche.com
Li Fan jt
ABSTRAKTNE
Taust: Hiina traditsioonilises meditsiinis kõige sagedamini kasutatav neeru-yangi toniseeriv ürt on kuivatatud mahlakad varred.Cistanchetubulosa(Schenk) Wight (CT) on osutunud tõhusaks depressiooni ravis. Antidepressantide komponendid ja nende aluseks olev mehhanism jäävad aga ebaselgeks.
Eesmärk: CT aktiivsete komponentide uurimiseks(Cistanchetubulosa)depressiooni vastu, samuti võimalikke mehhanisme. Uuringu ülesehitus ja meetodid: CT-st eraldatud polüsahhariidide, oligosahhariidide ja erinevate glükosiididega rikastatud fraktsioonide, samuti tüüpiliste soolestiku mikrobiota metaboliitide, sealhulgas 3-hüdroksüfenüülpropioonhappe ({{2) antidepressiivse toime hindamiseks kasutati käitumusliku meeleheite teste. }}HPP) ja hüdroksütürosooli (HT). Lisaks uuriti mitme farmakodünaamika ja biokeemilise analüüsiga bioaktiivsete fraktsioonide ja metaboliitide mõju kroonilise ettearvamatu kerge stressi (CUMS) mudelitele. Värvimise ja immunohistokeemilise analüüsi abil täheldati muutusi käärsoole histoloogias ja soolebarjääris. Soolestiku mikroobide omadusi ja trüptofaani-künureniini metabolismi uuriti, kasutades vastavalt 16S rRNA sekveneerimist ja Western-blot analüüsi.
Tulemused: Kokkuglükosiidid(TG) leevendas dramaatiliselt depressioonitaolist käitumist võrreldes erinevate eraldatud fraktsioonidega, peegeldades fenüületanoid- ja iridoidglükosiidide sünergistlikku mõju hüpotalamuse-hüpofüüsi-neerupealise (HPA) telje hüperaktivatsioonile, raskele neuro- ja perifeersele põletikule ning puudulikkusele. 5-hüdroksütrüptamiinis (5-HT) ja ajust pärinev neurotroofne faktor hipokampuses. Pealegi, TG(glükosiidid kokku)leevendas madala astme põletikku käärsooles ja soolebarjääri häireid ning mitmete bakteriperekondade arvukus korreleerus tugevalt HPA telje ja põletikuga CUMS-rottidel. Järjekindlalt vähenes indoolamiini 2, 3-dioksügenaas 1 (IDO1) ekspressioon käärsooles pärast TG-d oluliselt(glükosiidid kokku)manustamist, millega kaasneb trüptofaani-künureniini metabolismi pärssimine. Teisest küljest avaldas HT ka märkimisväärset antidepressantset toimet, parandades HPA telje funktsiooni, põletikueelset tsütokiini vabanemist ja trüptofaani-künureniini metabolismi, samas kui see ei suutnud suures osas reguleerida häiritud soolestiku mikrobiotat samal viisil nagu TG. Üllataval kombel võivad TG ja HT paremad fluoksetiinist veelgi parandada hüpotalamuse-hüpofüüsi-gonadaalse telje düsfunktsiooni ja ebanormaalset tsüklilist nukleotiidide metabolismi.
Märksõnad: Cistanchetubulosa, kogu glükosiidid, hüdroksütürosool, depressioon, soolestiku mikrobiota
Klõpsake, et näha deserticola ma toodet
Sissejuhatus
Depressioon on krooniline, korduv ja potentsiaalselt eluohtlik vaimne häire, mis mõjutab kuni 20 protsenti kogu maailma elanikkonnast (Nabavi et al., 2017). Kuigi praegu on heaks kiidetud arvukalt antidepressante, on kõrvaltoimed murettekitavad. Eelkõige on pikaajaline ravi selektiivsete serotoniini tagasihaarde inhibiitoritega (SSRI-dega), nagu fluoksetiin, mis on peamine depressiooni farmakoloogiline aine, süvendanud probleeme, nagu krooniline seksuaalne düsfunktsioon (Bijlsma et al., 2014); see on juhtinud üha enam tähelepanu uudsete antidepressantide avastamisele looduslikest ürtidest (Wang et al., 2019). Traditsioonilise hiina meditsiini (TCM) teoorias põhjustab neeru-yangi puudulikkus depressiooni kliiniliste sümptomitega sarnaseid sooritusvõimet, nagu näiteks prügimäed, huvi kadumine ja sentimentaalsus (Yang et al., 2020), mis soodustab mõtteid. depressioonilaadse käitumise leevendamiseks neeru-yangi toniseerimise teel. Juhuslikult on paljude neeru-yangi toniseerivate ürtide eeliseks seksuaalfunktsiooni parandamine (Wu et al., 2015). Sellised uuringud panevad meid pöörama tähelepanu võimalikule rakenduseleCistanchesHerba, mis on TCM-is kõige sagedamini kasutatav neeru-yangi toniseeriv ravimtaim ja mis on antidepressantide arendamise seisukohalt tõhus meeste seksuaalfunktsiooni häirete ravis (Wang et al., 2020).CistanchesHerba, mis on ametlikult registreeritud kui kuivatatud mahlakad varredCistanchetubulosa(Schrenk) Wight (CT) jaCistanchedeserticola(YC Ma) Hiina farmakopöas (Wang et al., 2017) on Hiinas ja teistes Ida-Aasia riikides kasutatud alates 15. sajandist selliste seisundite raviks nagu neeru-yangi puudulikkus, impotentsus ja naiste viljatus. Kaasaegsed farmakoloogilised uuringud näitavad sedaCistanchesHerbal on mitu bioaktiivsust, näiteks immuunsust suurendav, neuroprotektsioon, antioksüdant, vananemisvastane ja väsimusevastane toime (Wang et al., 2017). Neuroprotektiivsed omadusedCistanchesHerba viitab selle terapeutilisele potentsiaalile kognitiivsete haigustega seotud haiguste puhul, nagu insult, depressioon ja Alzheimeri tõbi (Wang et al., 2020). Meie eelmises uuringus leidsime, et CT(Cistanchetubulosa)ekstrakt leevendas kroonilise ettearvamatu kerge stressi (CUMS) rottide depressioonitaolist käitumist (Li et al., 2018). Praeguseks on CT keemiline analüüs(Cistanchetubulosa)näitas, et selle põhikoostisosade hulka kuuluvad fenüületanoidglükosiidid, iridoidglükosiidid, polüsahhariidid ja oligosahhariidid (Jiang ja Tu, 2009), kuid selle antidepressandi toimes domineerivat rolli mängiva ühendi tüüp jääb ebaselgeks.
Paljud uuringud on kinnitanud, et soolestiku füsioloogiline toime (eriti kommensaalne mikrobiota) mängib olulist rolli depressiooni tekkes ning võib reguleerida neuroendokriinset, autonoomset närvisüsteemi ja immuunsüsteemi (Yang et al., 2020). Lisaks on trüptofaani metabolismi, soolestiku mikrobiota ja depressiooni seostav seos järk-järgult palju tähelepanu äratanud. Muutunud soolestiku mikrobiota võib aktiveerida trüptofaani-künureniini raja, vähendades seejärel perifeerse ja aju trüptofaani kättesaadavust, mille tulemuseks on 5-HT puudulikkus (Agus et al., 2018). Meie eelmine uuring näitas, et fenüületanoidglükosiidid CT-s(Cistanchetubulosa)neil on üldiselt madal biosaadavus ja soolestiku mikrobiota võib need kiiresti metaboliseerida 3-hüdroksüfenüülpropioonhappeks (3-HPP) ja hüdroksütürosooliks (HT) (Li et al., 2016). Lisaks CT(Cistanchetubulosa)teatati, et ekstrakt taastab soolestiku mikrobiota homöostaasi CUMS-rottidel (Li et al., 2018). Selliste uuringute põhjal järeldasime, et fütokemikaalide ja soolestiku mikrobiota kahesuunaline koostoime võib reguleerida CT spetsiifiliste bioaktiivsete komponentide antidepressantseid toimeid.(Cistanchetubulosa). Täpsemalt, soolestiku mikrobiota võivad ühendid seedetraktis muutuda imenduvateks metaboliitideks (nagu 3-HPP ja HT) ning seejärel avaldada antidepressantset toimet. Bioaktiivsete komponentide põhjustatud soolestiku mikrobiota struktuurimuutused võivad omakorda mängida antidepressandi aktiivsuses olulist rolli.
Oma uuringus kasutasime käitumusliku meeleheite teste, et hinnata CT-st eraldatud polüsahhariidide, oligosahhariidide ja erinevate glükosiididega rikastatud fraktsioonide antidepressantide toimet.(Cistanchetubulosa)vesiekstrakt (CTE) ja soolestiku mikrobiota tüüpilised metaboliidid (sealhulgas 3-HPP ja HT), mida kinnitasime kroonilise ettearvamatu kerge stressi (CUMS) mudelis mitme farmakodünaamika ja biokeemilise analüüsiga. Seejärel uurisime, kas selle depressioonivastane mehhanism oli oluline fütokemikaalide ja soolestiku mikrobiota kahesuunalise interaktsiooni jaoks.
Materjalid ja meetodid
Materjalid
Kõik keemiliseks analüüsiks kasutatud standardid osteti Durstist (Sichuan, Hiina). 3-HPP, HT, fluoksetiin ja imipramiin osteti ettevõttelt Aladdin (Shanghai, Hiina). BCA valgu kvantitatiivne komplekt osteti firmalt Boster (Wuhan, Hiina). Nanjing Jiancheng (Nanjing, Hiina) andis 5-HT, BDNF, kasvaja nekroosifaktor-alfa (TNF-), interleukiin-1beeta (IL-1) ja interferoon-gamma (IFN-). ) ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi (ELISA) komplektid. Kortikosterooni (CORT), adrenokortikotroopse hormooni (ACTH) ja kortikotropiini vabastava hormooni (CRH) ELISA komplektid osteti ettevõttelt MultiSciences (Hangzhou, Hiina). Tsüklilise adenosiinmonofosfaadi (cAMP), tsüklilise guanosiinmonofosfaadi (cGMP), testosterooni (T) ja gonadotropiini vabastava hormooni (GnRH) ELISA komplektid osteti ettevõttest Enzyme-linked Biotechnology (Shanghai, Hiina). Trüptofaani ja kinureniini ELISA komplektid saadi ettevõttest Small Molecule Antibodies (Bordeaux, Prantsusmaa). Primaarsed/sekundaarsed antikehad, sealhulgas zonula occludens 1 (ZO-1), indoolamiin 2, 3-dioksügenaas 1 (IDO1), -aktiin ja HRP kitse küülikuvastane IgG (H plus L), osteti ettevõttelt Proteintech. (Wuhan, Hiina). Kõik muud analüütilise puhtusega või kõrgema puhtusastmega reaktiivid saadi kaubanduslikelt tarnijatelt.
CTE-st eraldatud erinevate fraktsioonide valmistamine(Cistanchetubulosa ekstrakt)
CT(Cistanchetubulosa)koguti 2015. aasta novembris Hiinas Xinjiangis Hetianis ja selle kinnitas prof Xiaobo Li. Vautšeri näidis (20151108) anti hoiule Shanghai Jiao Tongi ülikooli farmaatsiakooli.
CTE saamiseks ekstraheeriti purustatud proove kolm korda destilleeritud veega (1:10, w/v) 2 tundi temperatuuril 80–90 ◦C.(Cistanchetubulosa ekstrakt)(tootlus oli 57,1 protsenti ). CTE lahustati destilleeritud vees ja segati seejärel aeglaselt etanooliga (1:4, maht/maht) ja pandi 24 tunniks temperatuurile 4 °C. Seejärel koguti sade ja supernatant tsentrifuugimisega kiirusel 4000 p/min 20 minutit. Polüsahhariidid (TP; saagis oli 5,7 protsenti) saadi 80-protsendilise etanooliga pesemisel ja kogutud sademest kolm korda Savage'i reagendiga valgu eemaldamisel. Ülejäänud supernatant kromatografeeriti seejärel mikropoorsel D101 vaigukolonnis ja elueeriti destilleeritud vee ja 40% etanooliga. Elueeritud vee ja 40% etanooli fraktsioonid sisaldasid oligosahhariide (TO; saagis oli 35,1%) jakokkuglükosiidid(TG; saagis oli vastavalt 12,1 protsenti ). TG(glükosiidid kokku)elueeriti veel destilleeritud vee ja 5%, 10% ja 40% etanooliga uuesti läbi mikropoorse D101 vaigu ning elueeritud fraktsioonid 5% ja 40% etanooli olid summaarsed iridoidglükosiidid (TG-IrG; saagis oli 2,7%) ja fenüületanoidglükosiidid (TG-PhG; saagis oli vastavalt 8,7 protsenti).
Keemiline analüüs
Esiteks eraldati CTE-st erinevate fraktsioonide peamised keemilised koostisosad(Cistanchetubulosa ekstrakt)iseloomustati UPLC-QTOF-MS abil. Teiseks määrati UV-Vis meetodil süsivesikute ja glükosiidide üldsisaldus. Kolmandaks kvantifitseeriti peamised komponendid (ehhinakosiid, verbaskosiid, verbaskosiid, 8-epilogaanhape ja teniposiidhape) valideeritud HPLC-meetodiga. Üksikasjalikud parameetrid ja meetodi valideerimine on näidatud lisamaterjalides.
Loomkatsed
Konkreetsed loomkatsete ajakava on näidatud joonisel 1. Kõiki katseloomi hoiti ja aklimatiseeriti 1 nädal enne katseid Shanghai Jiao Tongi ülikooli laboriloomade keskuses (Shanghai, Hiina) kontrollitud toatemperatuuril (25 ± 2 °C). ◦C; suhteline õhuniiskus 55 ± 10 protsenti) valguse-pimeduse tsükliga 12:12 h. See uuring viidi läbi vastavalt SJTU laboriloomade hooldamise ja kasutamise juhendile. Loomade rajatised ja protokollid kiitis heaks SJTU loomaeetikakomitee (nr A2019008).
Sada viiskümmend isast ICR-hiirt (kaaluga 18–20 g, 6 nädala vanused) osteti ettevõttelt Shanghai Slack Biotechnology Company (Shanghai, Hiina) ja jagati juhuslikult 10 rühma (n=15/rühm). Katsealused ja annused käitumusliku meeleheitega hiirte jaoks igas rühmas on näidatud tabelis 1. CTE annused(Cistanchetubulosa ekstrakt) ja selle eraldatud fraktsioonid arvutati järgmise valemiga: annus=4,55 g/kg.d.bw × saagis, mis määrati inimese kehapinnal põhineva kolme ekvivalentdoosi arvutuse alusel. Positiivse ravimi imipramiini ja soolestiku mikrobiota metaboliitide (3-HPP ja HT) annused määrati vastavalt varasematele uuringutele (Gupte et al., 2016; Pablos et al., 2019). Pärast intragastraalset manustamist üks kord päevas 7 päeva jooksul viidi vastavalt 8., 9. ja 10. päeval läbi avatud väli test (OFT), saba riputamise test (TST) ja sunnitud ujumise test (FST). Käitumistestide spetsiifilised meetodid on kirjeldatud lisamaterjalides.
Seitsekümmend kaks isast Sprague-Dawley rotti (kaaluga 160–180 g, 6 nädalat vanad) osteti ettevõttelt Shanghai Slack Laboratory Animal Company (Shanghai, Hiina). Enne ametlikke katseid tehti kõikidele rottidele pärast vastavat koolitust sahharoosi eelistuse test (SPT). Rotid jagati 8 rühma (n=9/rühm) vastavalt nende sahharoosieelisusele (täiendav joonis S1). Iga rühma katsealused ja rottide annused on näidatud tabelis 1. Annused määrati vastavalt hiire ja roti vahelisele konversioonikoefitsiendile, lähtudes nende efektiivsetest doosidest käitumusliku meeleheitega hiirte puhul. Ja positiivse kontrollravimi fluoksetiini annus oli kooskõlas eelmise uuringuga (Hou et al., 2017). Kõik rühmad said rea kroonilist ettearvamatut kerget stressi (CUMS), välja arvatud kontrollrühm. Stressoreid rakendati pidevalt ja juhuslikult 4 nädala jooksul (üksikasju vt täiendavast tabelist S1). Toit ja vesi olid vabalt kättesaadavad kontrollrottidele, kes jäid segamatult teise ruumi, välja arvatud käitumistestid. Katsealustele manustati intragastraalselt 1 tund enne CUMS-i protseduuri 4 nädala jooksul. Pärast 28-päevast pidevat stressorite ja ravimite manustamist viidi OFT, SPT ja FST läbi vastavalt 29., 31. ja 33. päeval. Käitumiskatsete spetsiifilised meetodid on näidatud lisamaterjalides.
Proovide kogumine ja biokeemiline analüüs
Pärast käitumisteste anesteseeriti tühja kõhuga rotid pentobarbitaalnaatriumiga ja seerumiproovide saamiseks koguti täisveri. Pärast südame perfusiooni soolalahusega koguti hipokampuse, käärsoole ja umbsoole sisu ning säilitati temperatuuril -80 ◦C. Käärsoole distaalsed segmendid eemaldati ja fikseeriti 4-protsendilises paraformaldehüüdis. CORT, CRH, ACTH, TNF-, IL-1, IFN-, cAMP, cGMP, T, GnRH, trüptofaani ja kinureniini sisaldus seerumis, 5-HT, BDNF ja TNF- hipokampuses ning TNF- ja IFN- jämesooles mõõdeti vastavalt vastavate ELISA komplektidega kaasasolevatele juhistele.
Histoloogia, immunohistokeemia ja Western-blot test
Käärsoolekoe patoloogiliste muutuste jälgimiseks kasutati hematoksüliini ja eosiini (H&E) ning Alcian sinise perioodilise happe-Schiffi (AB-PAS) värvimist. Lisaks viidi läbi nende sektsioonide immunohistokeemilised hinnangud, et jälgida ZO-1 valgu ekspressiooni käärsoole epiteelirakkudes (Ding et al., 2020). Üksikasju proovi ettevalmistamise ja Western-blot analüüsi kohta IDO1 valgu ekspressiooni määramiseks käärsooles ja hipokampuses on samuti kirjeldatud lisamaterjalides.
Soolestiku mikrobiota koostisprofiili analüüs
16S rRNA suure läbilaskevõimega sekveneerimise viis läbi MajorBio Co., Ltd. (Shanghai, Hiina) ning üksikasjalik meetod ja andmetöötlus on näidatud lisamaterjalides.
Statistiline analüüs
Andmed on väljendatud keskmisena ± keskmise standardviga (SEM). Mitme rühma võrdlemiseks kasutati ühesuunalist dispersioonanalüüsi (ANOVA), kasutades SPSS 20.0 tarkvara. Erinevust peeti oluliseks, kui p < 0,05.="" soolestiku="" mikroobide="" ja="" teatud="" depressiooniga="" seotud="" füsioloogiliste="" tegurite="" vahelisi="" seoseid="" analüüsiti="" spearmani="" korrelatsioonikoefitsiendi="" abil,="" mis="" põhineb="" soojuskaardi="">
Tulemused
CTE-st eraldatud erinevate fraktsioonide keemiline analüüs(Cistanchetubulosa ekstrakt)
Põhikomponente iseloomustati UPLC-QTOF-MS abil (täiendav tabel S2 ja joonis S2) ning kokku tuvastati 21 koostisainet, sealhulgas 16 fenüületanoidglükosiidide komponenti ja 2 fenoolglükosiidide komponenti CTE-s.(Cistanchetubulosa ekstrakt), TG ja TG-PhG; ja 3 iridoidglükosiidide komponenti CTE-s(Cistanchetubulosa ekstrakt), TG ja TG-IrG. Üldiselt oli süsivesikute suhteline sisaldus TP-s ja TO-s vastavalt 60,3 protsenti ja 80,8 protsenti. Suhteline sisukokkuglükosiididaastal TG olid 87,7 protsenti . Fenüületanoid- ja iridoidglükosiidid moodustasid vastavalt 86,7 protsenti ja 53,4 protsenti TG-PhG-st ja TG-IrG-st. Ehhinakosiidi, verbaskosiidi, verbaskosiidi, 8-epilogaanhappe ja teniposiidhappe sisaldus igas fraktsioonis on näidatud tabelis 2 ning HPLC kromatogrammi ja meetodi valideerimise andmed on loetletud lisatabelis S3 ja joonisel S3.
CTE-st eraldatud erinevate fraktsioonide mõju(Cistanchetubulosa ekstrakt)ja tüüpilised metaboliidid soolestiku mikrobiota poolt hiirte käitumise meeleheite testides
Nagu on näidatud joonisel 2, vähenesid hiirtel, kellele manustati 7 päeva imipramiini (positiivne kontroll), võrreldes kontrollrühmaga oluliselt liikumatusaeg nii FST kui ka TST puhul ning neil ei olnud olulist mõju OFT-s läbitud kogukaugusele. . Sarnaseid muutusi täheldati ka CTE-s(Cistanchetubulosa ekstrakt), TG ja HT rühmad, mis näitab, et CTE, TG(glükosiidid kokku)ja HT avaldas antidepressantset toimet ja toimed ei olnud seotud erutuvusega. Seega, TG(glükosiidid kokku)ja HT olid domineeriv bioaktiivne fraktsioon, mis eraldati vastavalt CTE-st ja tüüpilistest metaboliitidest soolestiku mikrobiota poolt. Huvitav on see, et pärast TG-PhG ja TG-IrG manustamist ei ilmnenud olulisi muutusi liikumatusajas FST-s võrreldes kontrollide omadega ega TST-s pärast TG-PhG manustamist, mis näitab, et fenüületanoidi ja iridoidglükosiidide olemasolu võib olla oluline CTE antidepressandi toimes.
Erinevate glükosiididega rikastatud fraktsioonide ja HT farmakodünaamilised toimed ja biokeemilised muutused CUMS-rottidel
Nagu on näidatud tabelis 3, vähenes rottidel, kellele manustati 28 päeva CUMS-i paradigmat, sahharoosi eelistus SPT-s, kogu läbitud vahemaa, märkimisväärselt (p < 0.001)="" ja="" kasvatusarv="" oft-s,="" samuti="" kogu="" liikumatusaja="" märkimisväärne="" suurenemine="" (p="">< 0,01)="" fst-s="" võrreldes="" kontrollidega,="" mis="" viitab="" depressioonitaoliste="" fenotüüpide="" esilekutsumisele="" cums-rottidel.="" depressiooninäitajad="" olid="" flx="" (positiivse="" kontrolli)="" rühmas="" vastupidised.="" samamoodi="" põhjustas="" cte,="" tg,="" tg-phg,="" tg-irg="" ja="" ht-ravi="" sahharoosieelistuse="" taastamise="" normaalsele="" tasemele="" cums-rottidel,="" mis="" olid="" 102,7%,="" 94,1%,="" 89,8%,="" 91,9%="" ja="" 94,3%.="" vastavalt="" juhtnupud.="" järjekindlalt="" ilmnesid="" fst-s="" cte="" ja="" tg="" rühmades="" kõige="" ilmsemad="" mõjud="" ning="" liikumatusajad="" ulatusid="" vastavalt="" 103,3="" protsendini="" ja="" 93,4="" protsendini="" kontrollrühma="" omadest,="" samas="" kui="" tg-phg,="" tg-irg="" ja="" ht="" rühmade="" liikumatusajad.="" jõudis="" just="" 62,1="" protsendini,="" 73,2="" protsendini="" ja="" 69,9="" protsendini="" kontrollrühma="" omadest.="" sarnast="" olulist="" suurenemist="" (p="">< 0,05)="" täheldati="" kogu="" läbitud="" vahemaa="" ja="" kasvatuste="" arvu="" osas="" oft-s="" pärast="">(Cistanchetubulosa ekstrakt), TG ja HT manustamine ning TG-PhG ja TG-IrG ravi kaldusid CUMS-i rottide kasvatusarvu muutmisele. Tulemused näitasid, et TG oli CTE-st eraldatud domineeriv bioaktiivne antidepressantide fraktsioon ning fenüületanoid- ja iridoidglükosiidid olid selle antidepressiivse toime avaldamiseks asendamatud. Lisaks näidati, et HT on üks TG aktiivsetest metaboliitidest in vivo.
Järjekindlalt suurendas CUMS-i põdemine märkimisväärselt rottide CORT, CRF, ACTH, TNF-, IL-1 ja IFN-i ning hipokampuse TNF-i taset võrreldes kontrollrühma omadega (p< 0.05),="" resulting="" in="" significant="" reductions="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" (fig.="" 3).="" except="" for="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" level="" of="" hippocampal="" bdnf="" between="" flx="" and="" cums="" groups,="" the="" above-mentioned="" alterations="" in="" cums="" rats="" could="" be="" significantly="" reversed="" (p="" <="" 0.05)="" after="" administration="" of="" fluoxetine,="" cte="">(Cistanchetubulosa ekstrakt), TG ja HT, mis näitab, et CTE, TG(glükosiidid kokku), ja HT näitasid parandavat toimet HPA telje hüperaktivatsioonile, raskele perifeersele ja närvipõletikule ning {{0}}HT ja BDNF puudujääkidele. Samuti vähendas TG-IrG ja TG PhG ravi oluliselt seerumi CORT, TNF-, IFN- ja hipokampuse TNF- taset ning suurendas hipokampuse 5-HT taset CUMS rottidel (p < {{8}="" }.{14}}5).="" tg-irg="" rühmas="" täheldati="" ka="" seerumi="" crf="" ja="" acth="" taseme="" olulist="" langust="" (p="">< 0,05)="" võrreldes="" cums="" rühmaga.="" huvitaval="" kombel="" olid="" seerumi="" cort,="" tnf-,="" acth="" ja="" crf="" tasemed="" tg-phg="" ja="" tg-irg="" rühmades="" oluliselt="" kõrgemad="" kui="" tg="" rühmas="" (p="">< 0,05)="" ning="" hipokampuse="" 5-ht="" tase="" ja="" bdnf="" näitas="" vastupidist="" ekspressioonimustrit="" (p="">< 0,05).="" need="" tulemused="" näitasid,="" et="" tg-phg="" ja="" tg-irg="" mõju="" hpa="" telje="" hüperaktiivsusele,="" perifeersele="" ja="" neuraalsele="" põletikule="" ning="" 5-ht="" puudusele="" oli="" selgelt="" halvem="" kui="" tg,="" mis="" näitab,="" et="" fenüületanoid-="" ja="" iridoidglükosiidid="" võivad="" avaldada="" mõju.="" sünergistlik="" mõju="" ülalnimetatud="" mitmele="">
TG ja HT reguleerivad HPG telge ja tsüklilist nukleotiidide metabolismi CUMS rottidel
Mõõdeti T, GnRH, cAMP ja cGMP tasemed ning cAMP ja cGMP suhe (cAMP/cGMP) seerumis, millele allutati CUMS, ning tulemused on näidatud tabelis 4. T, GnRH, cAMP kontsentratsioonid ja cAMP/cGMP seerumis vähenesid oluliselt ning cGMP tase tõusis oluliselt (p < 0,05)="" cums-i="" rühmas="" võrreldes="" kontrollidega,="" mis="" näitab,="" et="" cums-i="" manustamine="" põhjustas="" hpg="" telje="" allasurumise.="" ja="" tsüklilise="" nukleotiidide="" metabolismi="" düsfunktsioon.="" võrreldes="" cums-i="" rühmaga,="" ei="" toimunud="" flx-rühmas="" olulisi="" muutusi.="" üllataval="" kombel="" pärast="">(glükosiidid kokku)ja HT-ravi korral suurenesid oluliselt (p < {0}},05)="" seerumi="" t,="" gnrh,="" camp="" ja="" camp/cgmp="" tase,="" samas="" kui="" seerumi="" cgmp="" tase="" vähenes="" oluliselt="" (p="">< 0,05).="" need="" tulemused="" näitasid,="" et="">(glükosiidid kokku)ja HT reguleerisid HPG telge ja tsüklilist nukleotiidide metabolismi, mis oli selgelt parem kui fluoksetiini positiivne kontroll.
TG ja HT leevendavad madala astme põletikku käärsooles ja soolebarjääri häireid CUMS-rottidel
Käärsoole morfoloogiliste kahjustuste hindamiseks kasutati H&E värvimist ja olulisi erinevusi käärsooles katserühmade vahel ei täheldatud (joonis 4a). Lisaks analüüsiti ka TG ja HT mõju käärsoole põletikule ja soolebarjääri katkemist (joonis 4b-d). Võrreldes kontrollrühma omadega vähenes CUMS-rühmas pokaalrakkude arv ja limakihi paksus. Järjekindlalt vähenes ZO-1 valgu ekspressioon ning IFN- ja TNF- tase käärsooles oluliselt (p < 0.05)="" ja="" tõusis="" (p="">< 0,05)="" ),="" mis="" viitab="" sellele,="" et="" kuigi="" ilmset="" histoloogilist="" kahjustust="" ei="" tekitatud,="" põhjustas="" cums-i="" läbiviimine="" käärsoole="" madala="" astme="" põletiku="" ja="" soolebarjääri="" katkemise.="" pärast="" fluoksetiini,="">(glükosiidid kokku), ja HT-ravi korral suurenes pokaalrakkude arv ja limakihi paksus ning jämesoole IFN- ja TNF- tase vähenes oluliselt (p < 0.05).="" lisaks="" suurendasid="" tg="" ja="" ht="" oluliselt="" (p="">< 0,05)="" zo-1="" valgu="" ekspressiooni="" kontrollrühma="" omaga="" sarnasele="" tasemele.="" need="" tulemused="" näitasid,="" et="">(glükosiidid kokku)ja HT võib leevendada madala kvaliteediga põletikku käärsooles ja soolebarjääri häireid CUMS-rottidel.
TG ja HT mõju soolestiku mikrobiota koostisele
Pärast kvalifitseerimata järjestuste eemaldamist saadi kokku 1 874 721 efektiivset lugemist. Alfa mitmekesisuse (joonis 5a) ja beeta mitmekesisuse (joonis 5b) tulemused näitasid, et kuigi soolestiku mikrobiota rikkus (Chao) ja mitmekesisus (Shannon) umbsoole sisus ei erinenud, ei erinenud soolestiku mikrobiota üldine struktuur. põhikoordinaatide analüüsi (PCoA) graafik näitas silmatorkavat erinevust kontroll- ja CUMS-rühmade vahel. Pealegi, TG(glükosiidid kokku)ja HT-ravi suurendas oluliselt CUMS-rottide bakterite rikkust ja kutsus esile märkimisväärsed erinevused PCoA graafikus võrreldes CUMS-rottide omadega, näidates selgeid sarnasusi kontrollidega, eriti kui TG(glükosiidid kokku)analüüsiti.
Taksonoomilised muutused mikrobiotas kinnitasid veelgi, et TG(glükosiidid kokku)avaldas soolestiku mikrobiota koostisele dramaatilist regulatiivset mõju. Pärast TG-d(glükosiidid kokku)manustamisel pöördus enamiku muudetud taksonite arvukus CUMS-rottidel kontrollrühma omaga sarnasele tasemele. Märkimisväärne vähenemine (14,2 protsenti, p < 0,05)="" ja="" rikastamine="" (53,6="" protsenti,="">< 0.05)="" in="" the="" abundances="" of="" the="" phylum="" firmicutes="" and="" bacteroidetes="" were="" observed="" in="" the="" tg="">(glükosiidid kokku)rühm võrreldes CUMS rühmaga (joonis 5c). Perekonna tasandil (täiendav tabel S4) vähendas TG järjekindlalt Ruminococcaceae (perekond Firmicutes) ja Peptococcaceae (perekond Firmicutes) arvukust vastavalt 33,9 protsenti ja 82,9 protsenti võrreldes CUMS-i rühmaga (p < 0).="" {{10}}5).="" vastupidi,="" tg="" rühmas="" esines="" märkimisväärne="" rikastus="" perekonna="" erysipelotrichaceae="" (perekond="" firmicutes,="" 78,4="" protsenti,="" p="">< 0,05)="" ja="" muribaculaceae="" (perekond="" bacteroidetes,="" 77,3="" protsenti,="" p="">< 0,05)="" arvukuses.="" perekonna="" tasandil="" (joonis="" 5d)="" on="" anaerotruncus,="" harryflintia,="" ruminiclostri="" dium_9,="" klassifitseerimata_f_ruminococcaceae="" (sugukonna="" rumino-coccaceae="" liikmed)="" arvukus.="" peptococcus="" (perekonna="" peptococcaceae="" liige)="" vähenes="" oluliselt,="" samas="" kui="" norank_f_erysipelotrichaceae,="" allo="" baculum,="" dubosiella="" (perekonna="" erysipelotrichaceae="" liikmed)="" ja="" norank_f{{24}="" }muribaculaceae="" (sugukonda="" muribaculaceae="" liige)="" esines="" tg="" rühmas="" suurem="" arvukus="" kui="" cums="" rühmas="">< 0.05).="" in="" addition,="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" tyzzerella_3,="" acetatifactor,="" and="" norank_f_lachnospiraceae="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae="" (p="" <="" 0.05),="" although="" the="" abundance="" of="" the="" family="" lachnospiraceae="" was="" similar="" across="" all="" experimental="" groups.="" unlike="" tg,="" ht="" decreased="" the="" abundances="" of="" partially="" altered="" taxa="" induced="" by="" cums,="" including="" the="" family="" ruminococcaceae,="" 3="" genera="" (anaerotruncus,="" harryflintia,="" and="" ruminiclostridium_9)="" assigned="" to="" the="" family="" ruminococcaceae="" and="" 2="" genera="" (tyzzerella_3,="" acetatifactor)="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae.="" additionally,="" converse="" variations="" were="" observed="" in="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae_ucg_013="" and="" streptococcus="" in="" the="" ht="" group.="" these="" results="" indicated="" that="" tg="" and="" ht="" exerted="" clear="" differences="" in="" the="" regulation="" of="" gut="" microbiota="" composition,="" and="" the="" effect="" of="" tg="" was="" superior="" to="" that="" of="" tg="" especially="" in="" altering="" the="" genera="" assigned="" to="" the="" family="" erysipelotrichaceae,="" peptococcaceae,="" and="">
TG poolt mõjutatud muudetud mikroobiperekondade korrelatsioonianalüüs(glükosiidid kokku)ja HT, HPA teljega seotud hormoonid, põletikueelsed tsütokiinid, 5-HT ja BDNF
Selgitada seoseid TG poolt mõjutatud soolestiku mikrobiota koostise muutuste vahel(glükosiidid kokku)ja HT ning vastavad depressiooniga seotud tunnused, viidi läbi Spearmani korrelatsioonianalüüs. Nagu on näidatud joonisel 6, olid 5-HT ja BDNF tasemed hipokampuses ainult märkimisväärselt positiivses korrelatsioonis norank_f_Muribaculaceae'ga. Vastasel juhul võib muutunud mikroobiperekondade ja HPA teljega seotud hormoonide vahel tuvastada selged korrelatsioonid. Eelkõige olid HPA telje funktsiooniga tugevalt seotud Dubosiella, norank{6}}f_Muribaculaceae, norank_f_ Erysipelotrichacea ja Peptococcus. Seerumi CORT-l, CRF-l ja ACTH-l oli negatiivne korrelatsioon Dubosiella, norank{10}}f_Muribaculaceae ja norank_f_Erysipelotrichacea'ga ning positiivsed seosed Peptococcus'ega. Lisaks ilmnesid Dubosiella ja norank_f_ Erysipelotrichacea negatiivsed seosed käärsoole IFN-i ja hipokampuse TNF-ga, samas kui sarnased seosed esinesid Allobaculumi, Harryfinita ning seerumi ja hipokampuse TNF-ga, aga ka norankis _f_Lachnospiracea ja seerumi IFN- ja TNF-. Seevastu Peptococcus oli positiivselt seotud käärsoole TNF- ja seerumi TNF-ga. Samuti oli norank{25}}f_Muribaculaceae positiivselt seotud seerumi IFN- ja TNF-ga. Need tulemused näitasid, et muutunud mikroobide perekonnad, eriti teatud perekondadesse Erysipelotrichaceae, Peptococcaceae ja Muribaculaceae kuuluvad perekonnad, mida spetsiifiliselt mõjutas TG, näitasid tugevat seost HPA teljega seotud hormoonide ja põletikueelsete tsütokiinidega samaaegselt, näidates kriitilist rolli. soolestiku mikrobiota HPA telje funktsiooni ja põletiku reguleerimisel.
TG(glükosiidid kokku)ja HT inhibeerivad CUMS-rottidel trüptofaani-künureniini metabolismi
TG mõju(glükosiidid kokku)ja HT määrati trüptofaani ja kinureniini sisaldus rottide seerumis, samuti IDO1 ekspressioon käärsooles ja hipokampuses. Nagu on näidatud joonistel 7 ja 8, oli trüptofaani tase seerumis võrreldes kontrollrühmaga oluliselt vähenenud CUMS-i rühmas, erinevalt suurenenud kinureniini tasemest ja kinureniini ja trüptofaani suhtest (Kyn). /Trp) ja IDO1 valgu ekspressioon käärsooles ja hipokampuses. Võrreldes CUMS-i rühmaga vähenes seerumi Kyn / Trp FLX rühmas oluliselt (lk< 0.05).="" tg="">(glükosiidid kokku)ja HT-ravi põhjustas seerumi trüptofaani taseme märkimisväärse tõusu CUMS-rottidel (p < {0}}.05)="" ning="" seerumi="" kinureniini="" ja="" kyn/trp="" taseme="" langust.="" (p="">< 0,05).="" lisaks="" pärssis="" tg="" oluliselt="" ido1="" valgu="" ekspressiooni="" cums="" rottide="" käärsooles="" (p="">< 0,05),="" samas="" kui="" ido1="" valgu="" ekspressioonis="" hipokampuses="" täheldati="" cums="" ja="" tg="" rühmade="" vahel="" mitteolulist="" erinevust.="" kuid="" ht="" mõju="" ido1="" valgu="" ekspressioonile="" käärsooles="" ja="" hipokampuses="" oli="" vastupidine="" tg="" omale,="" mis="" näitab,="" et="" tg="" ja="" ht="" inhibeerisid="" trüptofaani-künureniini="" metabolismi,="" vähendades="" ido1="" ekspressiooni="" vastavalt="" cums="" rottide="" käärsooles="" ja="" hipokampuses.="">
Arutelu
Selles uuringus kasutati CT-s bioaktiivsete ühendite skriinimiseks kahte erinevat loommudelit(Cistanchetubulosa)mis leevendavad esimest korda depressioonilaadset käitumist. TP ja TO olid tõenäoliselt CTE-s ebaefektiivsed koostisosad, samas kui TG(glükosiidid kokku)avaldas depressiooni ravis suurimat potentsiaali. Varasemad uuringud CT kohta(Cistanchetubulosa), sama hästi kuiCistanchetaimed, on enamasti keskendunud suurima sisaldusega fenüületanoidglükosiidide bioaktiivsusele ning jätnud tähelepanuta iridoidglükosiidide ja muude vähem levinud koostisainete tähtsuse. Huvitaval kombel näitas meie uuring, et fenüületanoid- ja iridoidglükosiidid avaldasid sünergistlikku mõju HPA telje hüperaktiivsusele, raskele perifeersele ja närvipõletikule ning hipokampuse 5-HT ja BDNF puudulikkusele, mis võib olla soodsa antidepressandi kriitiliseks põhjuseks. TG mõju(glükosiidid kokku). Need tulemused viitavad veelgi taimsete ravimite mitmekomponentsetele ja mitme sihtmärgiga omadustele ning tuletavad meile meelde, et madalama tasemega koostisosad, isegi mikrokoostisosad, võivad samuti mängida olulist rolli farmakoloogilises toimes.
Krooniline stress kutsub esile HPA telje hüperaktiivsuse, mis soodustab depressiooni teket, aga ka HPG telje pärssimist GnRH vähenenud vabanemise ja/või hüpofüüsi tundlikkuse kaudu (Kirby et al., 2009). Samal ajal on cAMP ja cGMP olulised vahepealsed sõlmpunktid, mis tuginesid oma füsioloogilise toime avaldamiseks paljudele neurotransmitteritele ja hormoonidele (Siawrys et al., 2002). Hiljutised uuringud on järjekindlalt näidanud, et neeru-yangi puudulikkuse esinemine on tihedalt seotud hüpotalamuse-hüpofüüsi-sihtnäärme telje düsfunktsiooniga (Zhang et al., 2019). Neeru-yangi puudulikkuse sündroomi korral on täheldatud ka seerumi cAMP ja cAMP/cGMP taseme märkimisväärset langust. Selles uuringus leidsime, et TG(glükosiidid kokku)võib inhibeerida seerumi CORT, CRF ja ACTH taset ning suurendada seerumi T ja GnRH sisaldust CUMS rottidel, mis näitab HPA ja HPG telje düsfunktsiooni taastumist pärast TG manustamist. Lisaks TG(glükosiidid kokku)muutis seerumi cAMP/cGMP taseme olulise languse CUMS-i saanud rottidel. Seega potentsiaalne CT aluseks olev mehhanism(Cistanchetubulosa) depressiooni ja neeru-yangi puudulikkuse ravis võivad olla osaliselt sarnased ja väärivad täiendavat uurimist. Lisaks on seksuaalse iha ja käitumise tekitamine keeruline närvirefleksprotsess. Suguhormoonid on peamised seksuaalse erutuse allikad ja suguhormoonide puudumine võib põhjustada vähem seksuaalset iha või seksuaalset düsfunktsiooni (Holloway ja Wylie, 2015). Eelkõige pärsib liigne 5-HT GnRH vabanemist, mis on pärast pikaajalist SSRI-ravi kroonilise seksuaalse düsfunktsiooni tekke domineeriv põhjus (Prasad et al., 2015). Meie uuringus oli fluoksetiin (SSRI-de esindaja) HPG telje düsfunktsiooni korral ebaefektiivne. Siiski, kuigi TG(glükosiidid kokku)parandas märkimisväärselt 5-HT taset hipokampuses, samuti täheldati sarnaseid muutusi seerumi T ja GnRH tasemetes, mis parandas HPG telje allasurumist. Need tulemused näitavad CT selget eelist(Cistanchetubulosa) depressiooni ravis ja nende mõjude sisemist mehhanismi tuleb täiendavalt uurida.
Üha rohkem tõendeid on näidanud, et soolestik on potentsiaalne sihtmärk krooniliste haiguste raviks, kasutades madala biosaadavusega looduslikke ühendeid (Zhou et al., 2020). Hiljutised uuringud (Wei et al., 2019) on näidanud, et CUMS-ravi kutsub esile fekaalse mikrobioomi muutusi ja soolebarjääri defekte, mis hõlbustavad bakterite tungimist käärsoole limaskestale ja süvendavad käärsoole põletikulisi reaktsioone. Kooskõlas selle aruandega näitasid meie tulemused, et 4-nädalane CUMS-iga kokkupuude põhjustas roti käärsoole karikarakkude arvu ja limakihi paksuse ulatusliku vähenemise, samuti soolebarjääri katkemise, mida kujutas endast soolestiku suurenenud läbilaskvus, mis määrati kindlaks ZO-1 valgu mõõtmine. Lisaks täheldati käärsooles põletikueelsete tegurite (nagu TNF- ja IFN-) suurenenud ekspressiooni. Sellest tulenevalt näitasid need leiud, et kuigi ilmset histoloogilist kahjustust ei tekitatud, algatas CUMS-ravi käärsoole põletiku ja soolebarjääri katkemise. Varasemad uuringud on teatanud, et CT-l oli parem DSS-indutseeritud koliidi ennetamine hiirtel (Jia et al., 2014). Vastuoluline, TG(glükosiidid kokku)Samuti näidati, et see leevendab CUMS-rottide käärsoole madala astme põletikku ja soolebarjääri häireid, mis rõhutab selle potentsiaali käärsoole põletikuga seotud haiguste kliiniliseks raviks.
Ulatuslikud uuringud on samuti näidanud, et kommensaalse soolestiku mikrobiota, HPA telje ja põletiku seos on keeruline ja mängib depressiooni tekkes otsustavat rolli (Misiak et al., 2020). Muutused soolestiku mikrobiota koostises võivad kaasa aidata tsütokiinide suurenenud vabanemisele ja väikeste bioaktiivsete molekulide sünteesile (Du et al., 2020). Teatud tsütokiinid (nt TNF-) võivad läbida hematoentsefaalbarjääri ja on tugevad HPA telje aktivaatorid (Misiak et al., 2020). HPA telje hüperaktiveerumine võib omakorda kaasa aidata soolestiku mikrobiota düsbioosile, käärsoole kroonilisele põletikule ja soolestiku läbilaskvuse muutumisele (Misiak et al., 2020). Kooskõlas varasemate uuringutega on TG-ga ravitud soolestiku mikrobiota modifitseerimine tõenäoliselt vastutav selle depressiooni leevendava mõju eest. Märkasime, et TG(glükosiidid kokku)muutis mikroobide taksonite arvukuse erinevatel tasemetel rottidel, kellele allutati CUMS, tasemele, mis sarnanes kontrollide omaga. Eelkõige leiti, et peamised muudetud perekonnad, mis kuuluvad perekonda Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae ja Muribaculaceae, on tugevas korrelatsioonis HPA telje ja põletikuga. Kooskõlas meie tulemustega on Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae ja Muribaculaceae perekondadel teadaolevalt oluline roll limaskesta barjääri terviklikkuse säilitamisel ja põletiku esinemisel (Kankoush, 2015; Borton et al., 2017; Zhang et al., 2020). Seetõttu oletasime, et TG võib vähendada mõnede perekondadele Erysipelotrichacea, Peptococcaceae ja Muribaculaceae kuuluvate perekondade arvukust, leevendades seejärel käärsoole madala astme põletikku, HPA telje hüperaktiivsust ja limaskesta barjääri terviklikkuse häireid. Huvitaval kombel oli meie uuringus ainult üks perekond nimega nor ank{4}}f_Muribaculaceae korrelatsioonis 5-HT ja BDNF-ga hipokampuses. Suhte konkreetne mehhanism jääb ebaselgeks ja seda tuleb täiendavalt uurida. Vastasel juhul viitavad leiud ka sellele, et enamikul TG poolt põhjustatud muudetud perekondadest on äärmiselt raske otseselt mõjutada 5-HT taset hipokampuses. Selgitamaks, kuidas muutused soolestiku mikrobiota koostises mõjutavad hipokampuse 5-HT taset pärast TG-ravi, köitis meie tähelepanu keeruline seos, mis ühendab trüptofaani metabolismi, HPA telge, põletikulisi tsütokiine ja 5-HT-d. Trüptofaan on inimestele asendamatu aminohape ja vähem kui 1 protsenti kasutatakse valgusünteesis, kusjuures suurem osa (üle 90 protsendi) muudetakse IDO1 ja trüptofaan 2, 3-dioksigenaas 2 (TDO2) toimel kinureniinideks ja ligikaudu 5 protsenti juhib trüptofaani hüdroksülaas mööda serotoniini rada (Duan et al. 2018). 5-HT tase ajus sõltub suuresti perifeerse trüptofaani saadavusest, arvestades, et trüptofaan transporditakse ajju neutraalsete aminohapete transporterite kaudu (Duan et al., 2018). IDO1, kiirust piirav ensüüm kinureniini raja esimeses etapis, indutseeritakse peamiselt IFN- ja teiste põletikueelsete tsütokiinide, nagu IL-1 ja TNF- poolt (Kennedy et al., 2017), mis meie uuringus näidati olevat seotud soolestiku mikrobiotaga. Nagu teatatud, metaboliseeritakse rohkem trüptofaani kinureniini raja kaudu, vähendades seeläbi konkureerivalt trüptofaani konversiooni 5-HT-ks ja seostades vähenenud 5-HT-ga, mida tavaliselt esineb depressiooni korral (O'Mahony et al., 2015). Seega on madalam trüptofaani tase ja kõrgem Kyn/Trp tavaline ning need langevad kokku depressiivse meeleolu suurenenud riskiga. Pärast TG manustamist inhibeeriti IDO1 üleekspressioon käärsooles, mille tulemuseks oli seerumi trüptofaani taseme tõus ja seerumi Kyn/Trp vähenemine, mis näitas potentsiaalset seost soolestiku mikrobiota ja hipokampuse 5-HT taseme vahel, mida TG mõjutab. Samal ajal on neurotrofiinide perekonda kuuluv BDNF oluline rakkude diferentseerumise, neuronite ellujäämise, sünapsi moodustumise ja depressiooni neuroplastilisuse protsesside jaoks (Greenberg et al., 2009). Hiljutised uuringud on näidanud, et BDNF on tihedalt seotud soole limaskesta barjääri funktsiooni ja soolestiku mikrobiotaga (Maqsood ja Stone, 2016). Samuti on teatatud, et soolestiku mikrobiota muutused võivad suurendada BDNF ekspressiooni taset ja seega mõjutada depressiivse käitumise arengut (Du et al., 2020). Sarnaselt 5-HT variatsiooniga oli aga enamikul meie uuringus TG põhjustatud muudetud perekondadel äärmiselt võimatu mõjutada otseselt BDNF-i taset hipokampuses ning sisemine molekulaarne ühendus ja mehhanism vajavad täiendavat uurimist.
Seevastu HT, TG soolestiku mikrobiota metaboliit(glükosiidid kokku), avaldas käesolevas uuringus ka antidepressantne toime, mis on kooskõlas selle soodsa neuroprotektiivse toimega (Hu et al., 2014). Murettekitav on see, et HT võib samuti vähendada põletikueelsete tsütokiinide, HPA ja HPG teljega seotud hormoonide ning hipokampuse 5-HT kontsentratsiooni tasemele, mis on sarnane CUMS-rottide kontrollidega, samas kui enamik muutunud mikroobide perekondi mõjutab. HT poolt oli nõrk korrelatsioon ülaltoodud füsioloogiliste indeksitega, mis viitab sellele, et soolestiku mikrobiota ei pruugi olla HT antidepressandi aktiivsuse sihtmärk. Lisaks pärssis HT IDO1 üleekspressiooni hipokampuses, kuid mitte käärsooles, millega kaasnes seerumi trüptofaani taseme tõus. Ilmsete erinevuste esinemine TG vahel(glükosiidid kokku)ja HT võib olla tingitud HT suurepärasest imendumisest vereringesse ja HT võimest läbida hematoentsefaalbarjääri (Robles-Almazan et al., 2018), mis viitab ka sellele, et soolestiku mikrobiota tugev metaboolne võime on Lisaks füsioloogilistele funktsioonidele on see eriti oluline TG antidepressandi toimes. Seega oleme esialgselt tõestanud, et fütokemikaalide ja soolestiku mikrobiota kahesuunaline interaktsioon mängib TG manustamisega depressiooni ravis kriitilist rolli (nagu on näidatud joonisel 9).
Järeldus
Kokkuvõttes TG(glükosiidid kokku)oli peamiselt vastutav CT antidepressandi toime eest(Cistanchetubulosa), mis peegeldab fenüületanoid- ja iridoidglükosiidide sünergistlikku mõju HPA-telje hüperaktivatsioonile, raskele perifeersele ja närvipõletikule ning 5-HT ja BDNF-i puudulikkusele hipokampuses. Lisaks TG antidepressandi toime potentsiaalne molekulaarne mehhanism(glükosiidid kokku)saavutati fütokemikaalide ja soolestiku mikrobiota kahesuunalise interaktsiooni kaudu. Lisaks allasurutud HPG telje ja tsükliliste nukleotiidide ebanormaalsuse parandamine TG poolt(glükosiidid kokku)ja HT, mida ei reguleerinud ravi SSRI-dega, mida esindab fluoksetiin, näitasid CT selget eelist depressiooni ravis. Sellised modulatsioonid kujutavad endast paljutõotavat strateegiat depressiooni raviks CT abil(Cistanchetubulosa) ja sarnased traditsioonilised taimsed ravimid.
Autorite kaastööd
XL, YP ja LF kavandasid katsed ja analüüsisid andmeid. LF ja JW viisid läbi katse ja analüüsisid andmeid. LF ja XL koostasid käsikirja. PM aitas kaasa loomkatsetele ja proovide testimisele ning LZ aitas kaasa soolestiku mikrobiota koostise analüüsile. Kõik andmed genereeriti ettevõttesiseselt ja paberitehast ei kasutatud. Kõik autorid nõustuvad vastutama kõigi töö aspektide eest, tagades terviklikkuse ja täpsuse.
Konkureerivate huvide deklaratsioon
Autorid kinnitavad, et huvide konflikti ei esine.
Tänuavaldused
Seda tööd toetasid riikliku võtmeuuringute ja arendusprojekti (2017YFC1702400) toetused.
Täiendavad materjalid
Selle artikliga seotud lisamaterjali leiate veebiversioonist aadressil doi:10.1016/j.phymed.2021.153471.
Saatja: 'kogu glükosiidid varredestCistanchetubulosaleevendada depressioonilaadset käitumist: fütokemikaalide ja soolestiku mikrobiota kahesuunaline koostoimeLi Fan jt
---Phytomedicine 83 (2021) 153471/ https://doi.org/10.1016/j.phymed.2021.153471
