Ligusticum Wallichii ekstraheerimise terapeutiline toime ja mehhanism ning testosterooni indutseeritud 57 juuksekarva / 6 B Cin C retsept

ABSTRAKTNE:

EESMÄRK Jälgida Ligusticum wallichii ekstrakti ja selle liitekstrakti (sealhulgas Ligusticum wallichii,Cistanche, ingver, Platycladus orientalis, ženšenn, Salvia miltiorrhiza, Polygonum multiflor/6 on C57Llorum) seborroilise alopeetsia mudelid ja seejärel uurida sellega seotud mehhanisme.

MEETODID C57BL/6 hiirte seborroilise alopeetsia mudeli indutseerimiseks kasutatitestosteroonlahus seljale 21 päeva. Pärast erinevuste kontseptsioonide käsitlemist Ligusticum wallichii ekstrakti ja selle kontrakti ekstraktiga hinnati hiirtel uute juuste pikkust ja katvust th. hair gtr Nahk Niiskuse, õli ja temperatuuri muutusi mõõdeti nahatestiga. Iga rühma hiirte histoloogilisi muutusi, nagu naha paksus, juuksefolliikulite kuju ja suurus, mõõdeti mikroskoobiga. -MSN, TGF- 1 ja VEGF tasemed hiirte nahas pärast

Manustamine tuvastati ELISA abil.

TULEMUSED Ligusticum wallichii alkoholiekstrakt soodustas alopeetsia hiirte karvade kasvu ja väikese annuse rühma mõju oli parem kui suure annuse rühmal ja ühendi valemiga rühmal. Niiskuse, õli ja temperatuuri väärtuste tulemused näitasid, et mudelhiirte naha niiskus vähenes, õlisisaldus suurenes, tempel veidi tõusis. Pärast töötlemist taastusid hiirte veesisaldus, õlisisaldus ja temperatuur normaalsetele väärtustele. Histoloogilised tulemused näitasid, et Ligusticum wallichii ja selle liitvorm võivad suurendada naha paksust ja tuimust

karvanääpsud hiirte kasvufaasis. Lisaks võivad Ligusticum wallichii suured ja väikesed annused ja ühendi valem soodustada -MSN, TGF- 1 ja VEGF sisaldust hiirte nahas erineval määral.

KOKKUVÕTE Kohalik kasutaminetraditsiooniline hiina meditsiinLigusticum wallichii võib soodustada androgeense alopeetsiaga hiirte karvakasvu, taastades alopeetsia mudelhiirtel moi ja temperatuuri ning suurendades naha VEGF-i, -MSN-i ja TGF-i- 1.

MÄRKSÕNAD: Ligusticum wallichii; C57BL/6 hiirt; seborroiline alopeetsia;testosteroon

Traditsiooniline hiina meditsiinusub, et juuste väljalangemise teke on seotudmaksa ja neerude puudulikkusjaqi vere nõrkus. Paljudel traditsioonilistel hiina ravimitel on oma funktsioonidmaksa ja neerude toitmine, toitev essents ja veri, jahutab verd ja soodustab vereringetja neid kasutatakse sageli alopeetsia ja leukoplaakia korral. Chuanxiongil on sooja iseloomu, terava maitse ja kergelt mõru maitse omadused. Esmakordselt salvestati see ajakirjas "Shen Nong's Materia Medica" ja seda saab kasutada koos teiste ravimitega, et soodustada vereringet, edendada qi-d, väljutada tuult ja leevendada valu [7]. Teistel traditsioonilistel hiina ravimitel, nagu ingver, on välisilme leevendamise ja külmetuse hajutamise, keskosa soojendamise ja oksendamise leevendamise, kopsude soojendamise ja köha leevendamise funktsioonid [8]; Polygonum multiflorum toidab verd ja täiendab essentsi [9]

Arborvitae jätab jaheda verd ja mustad juuksed [9-10]; Salvia miltiorrhiza soodustab vereringet, hajutab vere staasi ja leevendab valu[11];

. Kaasaegsed uuringud on leidnud, et paljudtraditsiooniline hiina meditsiinühendid või üksikud retseptid võivad soodustada juuksefolliikulite ja juuste kasvu ning avaldada märkimisväärset mõju juuste väljalangemisele. Mõnedtraditsioonilised hiina ravimidvõib pärssida 5 -reduktaasi aktiivsust, omada põletikuvastast, antibakteriaalset, antioksüdantset ja muud füsioloogilist toimet, mis kõik aitavad vältida juuste väljalangemist. Kuna traditsioonilise hiina meditsiini toimeained on leebe toimega ning nii toitva kui ka raviva toimega, on neid viimastel aastatel üha enam kasutatud juuksekasvu toetavas kosmeetikas [13].

Cistanche Vananemisvastane

Selles katses loodi AGA mudel C57BL/6 hiirtel pealekandmise teeltestosteroonseljal ning uuriti Chuanxiongi ekstrakti ja liitvalemi (sh Chuanxiong, ingver, oriental orientalis leaf, ženšenn, Salvia miltiorrhiza, Polygonum multiflorum) mõju sellele ja selle mõjudele. mehhanismi, et pakkuda uusi ideid uute preparaatide ja uute juuste väljalangemise ennetamiseks mõeldud koostiste väljatöötamiseks.

1 Materjalid

1.1 Reaktiivid ja ravimid

Chuanxiong, Ginger, Cistanche, Arborvitae, Panax ginseng, Salvia miltiorrhiza ja Polygonum multiflorum osteti ettevõttelt CHENGDU WECISTANCHE BIOTECH; Testosteroon (partii: 58-22-0) osteti ettevõttelt Ron Reagent Company; Minoksidiili tinktuur (partii: 20210615) osteti ettevõttelt Zhejiang Wansheng Pharmaceutical Co., Ltd.; veevaba etanool (partii number: 2021-12-1) osteti ettevõttest Jindong Tianzheng Fine Chemical Reagent Factory; kloraalhüdraat (partii number: 302-17-0) osteti ettevõttelt McLean Reagent Company; - Melanotsüüte stimuleeriva hormooni (-MSH) komplekt osteti ettevõttelt CUSABIO Reagent Company (partii number: N20016218); Transformeeriva kasvufaktori - 1 (TGF- 1) komplekt osteti firmalt Signalway Antibody Reagent Company (partii number: 211230); Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) komplekt osteti firmalt Signalway Anti-body Reagent Company (partii number: 211230).

Cistanche suupiste

1.2 Instrumendid

Mikroplaadilugeja (Thermo Fisher Scientific), EG1160 manustamismasin (Leica, Saksamaa); Tissue-Tek® GlasTM 6410 automaatne suletud tüüpi tihendusmasin (Sakura, Jaapan); YD-AB laotur (Jinhua Yidi Medical Equipment Co., Ltd.); 1/100,000 analüütiline kaal (sartorius, MSX), ultrahelipuhastusmasin (tüüp KQ-100), nahatester (Fuxi), soojendusmantel (PTHW HEAT-ER) , optiline mikroskoop (BX53) , Olympus), rootoraurusti, kudede homogenisaator (KFBIO), tsentrifuug (Cence, H1650R).

1.3 Loomad

C57BL/6 hiired (SPF klass), isased, 5-6 nädala vanused, füüsilised

Summa 18-22 g andis Lõuna Meditsiiniülikooli katseloomade keskus, litsentsi number: SCXK (Guangdong) 2016-0041.

2 Eksperimentaalne meetod

2.1 Ravimlahuse valmistamine

Chuanxiongi ekstrakti (üksik ravim) jaoks kaaluge Chuanxiongi ravimmaterjalid, lisage 4-kordne kogus 75% etanooli (maht/maht) ja kuumutage ekstraheerimiseks püstjahuti all 4 tundi. Ühendekstrakti jaoks kaaluge Chuanxiong, ingver, arborvitae lehed, ženšenn, Salvia ja Polygonum multiflorum (suhe on 1:1:1:1:1:1) ja lisage 4-kordne kogus 75-protsendilist etanooli (maht/maht). tagasijooksutemperatuuril ekstraheerimiseks 4 tundi. Üksiku ravimi ja ühendi ekstraktid filtriti marli abil, et eemaldada ravimi jäägid ja kontsentreeriti rotaatoraurustis. Chuanxiongi ekstrakt kontsentreeriti 1 g·mL-ni -1 (kaasa arvatud toorravim), kui Chuanxiongi suurte annustega rühm; enne kasutamist lahjendati suure annusega rühma Chuanxiongi väikese annuse rühmana 0,5 mg·mL-1. Chuanxiong, Ginger, Arborvitae, Panax ginseng, Danshen ja Polygonum multiflorum ühendite rühma jaoks, kontsentreeritud kuni 1 g · ml

-1 (sh toorravimite kogukogus). Valmistatud ekstrakti hoida külmkapis 4 kraadi juures.

Tistanche parandab testosterooni

2.2 Modelleerimine

Välja arvatud tühirühm, anesteseeriti teistes rühmades olevad C57BL/6 hiired kloraalhüdraadi intraperitoneaalse süstimisega (4 protsenti, w/v) ja seljakarvad eemaldati depilatsioonikreemiga annuses 10 mg/kg.

-1 annus testosterooni määriti hiirte seljale 21 päevaks. 21 päeva pärast, kui hiire selg oli sile ja roosa ning karvad enam ei kasvanud, loeti modelleerimine õnnestunuks.

2.3 Loomade rühmitamine ja manustamine

C57BL/6 (SPF klass) isased hiired jagati juhuslikult 6 rühma, igas rühmas oli 6 hiirt, keda hoiti eraldi puurides ja nummerdati [tühirühm, mudelrühm, minoksidiili positiivne rühm, madala annusega chuanxiongi rühm ja kõrge rühm. -annus chuanxiong rühma. , Liitrühm (Chuanxiong: Ingver: Arborvitae: Ženšenn: Salvia: Polygonum multiflorum=: 1: 1: 1: 1: 1)].

Pärast edukat modelleerimist ei antud mudelrühma hiirtele manustamist; ülejäänud hiirte rühmad määriti nende seljale vastavalt 0,3 ml minoksidiili lahusega (2 protsenti), Chuanxiongi ekstrakti suurte ja väikeste annuste ja ühendite preparaatidega. 12 päeva jooksul, üks kord päevas. Pärast manustamist kaeti hiirte seljad sobiva suurusega kilega, et vältida ravimilahuse kadumist seljast. Manustamisperioodi jooksul jälgiti ja registreeriti iga päev karvakasvu iga rühma hiirte seljal.

2.4 Uue karva pikkuse ja katvuse määramine

8., 10. ja 12. manustamise päeval võeti igalt hiirelt juhuslikult välja 10 karva ning mõõdeti joonlauaga karva pikkus (mm). Edendamise efekt EE1 (Ehendusefekt) arvutatakse järgmise valemi järgi:

Suurendav efekt (juuste pikkus) =

Juuste pikkus (manustatud rühm)

Juuste pikkus (mudelikomplekt)

Vormel 1)

Valemis (1) on karva pikkus (manustamisrühm) hiirte vastsündinud karva pikkuse keskmine väärtus igas ravimirühmas (n=6); karva pikkus (mudelrühm) on kontrollrühma (mudel) hiirte vastsündinud juuste pikkuse keskmine väärtus (n=6).

Manustamise 4., 8. ja 12. päeval arvutati imageJ tarkvara abil hiirte selja vastsündinud karvadega kaetud ala ning karvade katvus ( protsenti ) ja edendamisefekt EE2 arvutati järgmise valemi järgi. :

Juuste katvus ( protsenti )=Juuksepiirkond Selja depilatsioonipiirkond

Valem (2)

Soodusefekt (juuste katmise määr)=juuste katvuse määr (manustamisrühm) juuste katvuse määr (mudelirühm)

Valemis (3) on karvapiirkond valemis (2) piirkond, mis on kaetud vastsündinud karvadega hiire tagaküljel ja depileeritud ala seljal on kogu raseeritud ala pindala hiire tagaküljel. hiir; valemis (3) on juuste katvus (manustamisrühm) iga piirkond. Uute juuste keskmine protsent manustamisrühmas (n=6) ja juuste katvus (kontrollrühm) oli keskmine väärtus uute juuste protsendist kontrollrühmas (mudel) (n=6).

2.5 Naha niiskuse, rasu ja temperatuuri määramine

Pärast 12-päevast hiirte ravi kasutati nahatestrit (Fuxi), et mõõta ja registreerida hiirte seljanaha niiskuse, õli ja temperatuuri väärtusi, et uurida testosterooni ja ravimite erinevaid mõjusid sellele. nahaindikaatorid ja hinnata ravimite mõju AGA mudelhiirtele. terapeutiline toime.

2.6 Hiire naha histoloogiline vaatlus

Pärast 12-päevast ravi hiired surmati, seljanahk eemaldati kohe, fikseeriti 4% paraformaldehüüdi lahusega, dehüdreeriti, sisestati parafiini, lõigati, värviti hematoksüliin-eosiiniga (HE) ja värvitud viilud asetati täisautomaatne Erinevate rühmade hiirte naha struktuuri, paksuse muutusi ja karvanääpsude kasvu vaadeldi slaidskanneriga (KFBIO) skaneerimisega.

2.7 -MSH, TGF- 1 ja VEGF faktorite määramine hiire nahas

-MSH, TGF- 1 ja VEGF faktoreid kasutati vastavalt Mouse -MSH komplekti, Hiire TGF- 1 komplekti ja Hiire VEGF komplekti asjakohastele juhistele.

2.8 Statistilise töötlemise meetod

Statistiliseks analüüsiks kasutati SPSS 21.{1}} statistilist tarkvara ja katseandmed väljendati keskmisena ± standardhälbe (x ± s).

Toetus:

wallence.suen@wecistanche.com