Uuring Cistanche Deserticola ekstrakti kohta, mis reguleerib M2 sarnaselt makrofaagide polarisatsiooni, et vähendada rakkude migratsiooni ja kolooniate moodustumist rinnavähi korral

Kokkuvõte: Eesmärk Uurida Cistanche deserticola epimedium brevicani etanooliekstrakti regulatiivset mehhanismi makrofaagide polarisatsioonile in vitro ja selle mõju M{{0}}sarnastele makrofaagidele, mis soodustavad 4T1 rakkude migratsiooni ja kolooniate moodustumist. Meetodid CCK-8 meetodit kasutati Cistanche deserticola deserticola etanooliekstrakti erinevate kontsentratsioonide mõju tuvastamiseks luuüdist pärinevate makrofaagide (BMDM) aktiivsusele ja Cistanche deserticola deserticola deserticola etanooliekstrakti ohutu kontsentratsiooni määramiseks; Western blot analüüsi ja qRT PCR-i kasutati Cistanche deserticola deserticola etanooliekstrakti mõju tuvastamiseks arginaasi -1 (Arg-1) ja CD163, M2-sarnaste makrofaagide markerite, ekspressioonile; QRT PCR-i kasutati, et tuvastada Cistanche deserticola deserticola alkoholiekstrakti mõju põletikulisele tsoonile 1 (Fizz1) ja M2 kasvajaga seotud makrofaagide (TAM) seotud geenide peroksisoomi proliferaatoriga aktiveeritud retseptorile (PPAR) (peroksisoomi proliferaatoriga aktiveeritud vastuvõtja, PPAR). ）, Kitinaas 3-nagu 3 (Ym1), kemokiini 24 (CCL24), makrofaagide C-tüüpi galaktoosi lektiini 2 (MGL2) ja interferooni reguleeriva faktori 4 (IRF4) mRNA ekspressiooni mõju; etanooliekstrakti mõju Cistanche deserticola deserticola M2 TAM-idel, mis soodustavad 4T1 rakkude migratsiooni, tuvastati kriimustustestiga; Cistanche deserticola deserticola etanooliekstrakti mõju M2 TAM-ide poolt stimuleeritud 4T1 rakkude kasvule tuvastati kolooniakatsega. Tulemused näitasid, et etanooliekstrakt Epimediumil ei olnud BMDM-rakkudele toksilisi ega kõrvaltoimeid kontsentratsioonil 0.015 625 kuni 2.000 000 mg/mL; Cistanche deserticola etanooliekstrakt inhibeerib oluliselt M2 TAM-idega seotud geene Arg{{ 36}}, CD163, Fizz1, PPAR , CCL24, Ym1, MGL2 ja IRF4 ekspressioon (P<0.05, 0.01, 0.001) inhibited the migration and colony formation ability of M2-TAMs in 4T1 cells (P<0.05, 0.001). Conclusion The ethanol extract of Cistanche deserticola can weaken the promotion of M2-like macrophages on 4T1 Cell migration and colony formation, and its mechanism may be related to the inhibition of M2-type polarization of macrophages.

Võtmesõnad: Cistanche deserticola; Makrofaagid; M2 polarisatsioon; Rinnavähk; Ränne; Kolooniate moodustumine; Bensoehape; koniferüülaldehüüd; emodiin; Vanilliinhape

Cistanche-kasvajavastased toimed

Rinnavähk on peamine pahaloomuline kasvaja, mis ohustab naiste tervist, ja ka teine ​​​​vähktõve surma põhjus maailmas [1-2]. Rinnavähi hilises staadiumis on metastaasid kopsudes ja maksas. Elundite metastaaside ilmnemisel väheneb oluliselt patsientide elulemus ja elukvaliteet [3]. Rinnavähi esmavaliku ravi põhineb peamiselt antratsükliini, paklitakseeli ja teiste tsütotoksiliste ravimite kemoteraapial, kuid ravi käigus tekib sageli ravimiresistentsus. Seetõttu on väga oluline uurida rinnavähi patoloogilist mehhanismi ja leida tõhusad ravimeetodid. Makrofaagid on erinevate kasvajate [4-5] esinemise ja arengu jaoks üliolulised ning makrofaagide biomarkerid võivad olla prognostilised näitajad. Makrofaagide infiltratsiooni kõrge määr on seotud rinnavähi halva prognoosiga. Kasvajaga seotud makrofaagid (TAM) on kõige tüüpilisemad kasvajasse infiltreeruvate immuunrakkude tüübid. Nad mängivad olulist rolli rinnavähi varasest vähist kuni progresseerumiseni, eriti metastaasideni [6]. TAM-id on seotud rinnavähi metastaaside, angiogeneesi, maatriksi ümberkujundamise, invasiooni ja immunosupressiooniga. Traditsiooniline hiina meditsiin mängib olulist rolli kogu rinnavähi ravikuuris. Traditsioonilisel hiina meditsiinil on mitme komponendi, raja ja sihtmärgi omadused, mis võivad vähendada kasvajapatsientide retsidiivide ja metastaaside esinemissagedust, parandada nende elukvaliteeti ja pikendada nende ellujäämisaega. Cistanche deserticola deserticornu Maxim. See on Berberidaceae taim Ranunculales. See on maitselt magus ja magus, olemuselt soe ning järgib kahte maksa ja neeru kanalit. See tugevdab lihaseid ja luid, toniseerib neerude yangi, kaitseb südame-veresoonkonna süsteemi [7], soodustab luude moodustumist [8], reguleerib immuunvõimet [9] ja pärsib vähktõbe [10]. Uuringud näitavad, et Cistanche deserticola alkoholiekstrakt võib pärssida rinnavähirakkude proliferatsiooni [11], kuid uuringuid selle kohta, kuidas Epimedium alkoholiekstrakt mõjutab rinnavähi kasvaja immuunsüsteemi mikrokeskkonda, ei ole teatatud. Seetõttu on selle uuringu eesmärk uurida Cistanche deserticola deserticola alkoholiekstrakti mõju M2-sarnastele makrofaagidele ja selle regulatsiooni 4T1 rinnavähi rakkude migratsioonile ja kolooniate moodustumisele, et pakkuda eksperimentaalset alust ja teoreetilised juhised järeltegevuseks. Epimedium kliiniline kasutamine.

Cistanche pulbri kasu tervisele - kasvajavastane

Cistanche toodete vaatamiseks klõpsake siin

【Küsi lisa】 E-post:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1. Materjal

1.1 Loom ja rakk

SPF-klassi emane C57BL/6 hiir, 8 nädalat vana, ostetud ettevõttest Sibeifu (Beijing) Biotechnology Co., Ltd., loomasertifikaadi number 110324210105240115. Hiired kasvatati Ameerika Ühendriikide üldhaigla viienda meditsiinikeskuse loomakatsekeskuses. rahvavabastusarmee. Kogu katseperioodi jooksul anti hiirtele tasuta toitu ja vett ning neile anti 12-tunnine valguse/12-tunnine pimedustsükkel. Loomkatsed viidi läbi vastavalt katseloomade hooldamise ja kasutamise juhistele ning need kiitis heaks Rahvavabastusarmee Üldhaigla Viies meditsiinikeskus. Loomkatsete eetiline loanumber on IACUC-2021-0007. 4T1 rakud osteti ettevõttelt Shanghai Fuheng Biotechnology Co., Ltd.

Eksperimentaalne uuring Cistanche deserticola kohta

1.2 Ravim

Teadlane Xiao Xiaohe tuvastas Cistanche deserticola kui Epimedium E., mis on Berberidaceae kuivad lehed Brevicornum Maximist. Võtke Cistanche deserticola deserticola lehed, purustage need ja ajage läbi sõela nr 4, kaaluge täpselt, lisage lahjendatud etanool, tehke ultrahelitöötlus (võimsus 400 W, sagedus 50 kHz) 1 tund, jahutage, kaaluge uuesti. kasutage kaotatud kaalu korvamiseks lahjendatud etanooli, loksutage neid, filtreerige, võtke jätkuv filtraat, külmutage ja kuivatage Cistanche deserticola deserticola ekstrakti saamiseks. 1.3 Ravimid ja reaktiivid arginaas-1 (Arg-1) antikeha (partii number: 93668) osteti Ameerika Ühendriikide ettevõttelt CST Company; - Aktiini antikeha (partii number 20536 1-AP) osteti ettevõttelt Protentech Company; HRP-märgisega kitse küüliku IgG vastane sekundaarne antikeha (partii number J111-035-003) osteti ettevõttest Jackson Immuno Research; Reaktiiv Trizol (partii number BSC51M1) osteti firmalt Biolux; CCK-8 reaktiiv (partii number KTA1020-1000T) osteti ettevõttelt Abbkine Company; Interleukiin 4 (IL-4) faktor (partii number 96-214-14-20) osteti ettevõttelt Peprotech.

1.4 Instrument

QB-9002 seismilise plaadi instrument (Haimen Qilin Bell Company); Epoch ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs ja P100 pluss nukleiinhappe kontsentratsiooni analüsaator (Bio Tek Company, USA); Quantstudio 6 Flex fluorestsentsi kvantitatiivne PCR instrument (Thermo Fisher Scientific, USA); MINI6K palmitsentrifuug (Hangzhou Aosheng Company); Vortex-Genie 2 vibraator (Scientific Industries, USA).

2 meetodid

2.1 Cistanche deserticola alkoholiekstrakti komponentanalüüs

2.1.1 NäidisValmistamine Lisage Cistanche deserticola alkoholiekstraktile metanooli, et valmistada 5 mg/ml suspensiooni, ekstraheerige seda ultraheliga 40 min, võtke 1 ml ja tsentrifuugige seda kiirusel 12 000 p/min 10 minutit. , võtke pärast tsentrifuugimist supernatant, läbige 0,22 μM filtermembraan, proovige UPLC-MS/MS. Cistanche deserticola komponendid koguti traditsioonilise Hiina meditsiini süsteemide farmakoloogia andmebaasi ja analüüsiplatvormi (TCMSP) kaudu. MS tulemusi analüüsiti Progression QI andmeplatvormi abil (põhineb NPATLAS ja GNPS andmebaasidel) ja tulemusi võrreldi Cistanche deserticola komponentide otsimisega mittesihitud komponentide analüüsi jaoks.

2.1.2 Kromatograafilised tingimused:

UPLC BEH C18 kromatograafia kolonn (100 mm × 2,1 mm, 1,7 µm), liikuv faas on topeltdestilleeritud vesi (A) - atsetonitriil (B), gradientelueerimine: 0-3 minutit, 5 protsenti B; 3 kuni 35 minutit, 5 protsenti kuni 95 protsenti B; 35-42 minutit, 95 protsenti -5 protsenti B. Mahuline voolukiirus on 0,3 ml/min; sissepritse maht on 5 μL; Kolonni temperatuurikasti temperatuur on 40 kraadi. 2.1.3 Massispektromeetria tingimused: positiivsete ioonide režiimis tuvastamiseks kasutatakse elektropihustusiooniallikat (ESI) ja kapillaari temperatuur on 275 kraadi; Kattegaasi mahu voolukiirus 20 Arb; Abigaasi mahu voolukiirus 5 Arb; Iooniallika pinge on 5 kV. 2.2 Rakukultuur Luuüdist pärinevad makrofaagid (BMDM) eraldati 8-nädala vanuste emaste C57BL/6 hiirte reieluuüdist. Neid kultiveeriti DMEM söötmes, mis sisaldas 10 protsenti veise loote seerumit, 1 protsenti penitsilliini/streptomütsiini ja hiire makrofaagide kolooniaid stimuleerivat faktorit M-CSF (50 ng/ml), ning pandi inkubaatorisse 37 kraadi ja 5 protsenti CO2 juures 6 tunniks. päevadel.

Seedige rakud 0,25% trüpsiini EDTA-ga (2:1) kiirusega 1,2 × Inokuleerige öö läbi süvendiplaadil tihedusega 106/mL. Teisel päeval, pärast Cistanche deserticola alkoholiekstrakti lisamist 1 tunni jooksul, stimuleeriti rakke IL-4-ga (20 ng/mL) 24 tundi.

2.3 CCK{{0}} meetodit kasutati Cistanche deserticola deserticola alkoholiekstrakti tsütotoksilisuse tuvastamiseks BMDM rakkudele × inokuleerige 96 süvendiga plaatidele tihedusega 106/mL, asetage üleöö inkubaatorisse, ravige erineva massikontsentratsiooniga rakke (0, 0.015 625, {{10}.031 25, 0.{{ 9}}, 0,125, 0,25, 0,5, 1, 2, 4 mg/mL) Cistanche deserticola alkoholiekstrakti 24 tunni jooksul. Visake sööde ära, lisage CCK-8-kultuurisöötme lahus (1:10), inkubeerige inkubaatoris 1 tund, mõõtke neelduvus (A) 450 nm juures mikroplaadilugejaga ja tuvastage alkoholiekstrakti toksilisus. Cistanche deserticola deserticola rakkudesse.

2.4Arg{{0}} valgu ekspressiooni tuvastamiseks BMDM-rakkudes kasutati Western blot analüüsi. Moodustati erineva massikontsentratsiooniga (0.062 5, 0.125, 0,25 mg/ml) Cistanche deserticola kontrollrühm, mudelrühm ja alkoholiekstrakti rühm. Ravimit manustati vastavalt "2.2" all olevale meetodile. Rakud koguti ja valgu ekstraheerimiseks lisati RIPA lüsaat. Valguproovi allutati 10% naatriumdodetsüülsulfaat-polüakrüülamiidi geelelektroforeesile, kanti üle PVDF membraanile, suleti TBST-ga, mis sisaldas 5% lõssi, 1 tund, lisati primaarne antikeha ja inkubeeriti üle öö 4 °C juures; Pärast TBST-ga pesemist inkubeerige sekundaarse antikehaga ja arendage, kasutades täiustatud kemoluminestsentsi tuvastamise reagenti.

2.5 qRT PCR-i kasutati BMDM-rakkude kemotaktilise faktori 24 (CCL24), põletikulise tsooni 1 (Fizz1), kitinaasitaolise 3-3 (Ym1), makrofaagi galaktoosi tüüpi C-tüüpi lektiini 2 (MGL2) ja peroksisoomi proliferaatori tuvastamiseks. aktiveeritud retseptor (peroksisoomi proliferaatoriga aktiveeritud vastuvõtja , PPAR ）, interferooni reguleeriv faktor 4 (IRF4), Arg-1 ja CD163 mRNA ekspressioon määrati kontrollrühmas, mudelrühmas ja erinevates massikontsentratsioonides ({{17} }.062 5, 0.125, 0.25 mg/mL) Cistanche deserticola alkoholiekstrakti vastavalt "2.2"

2.6Konditsioneeritud söötme valmistamine Võrdlusmeetod [12]: BMDM-i kultiveeriti vastavalt punktis 2.2 toodud meetodile. Pärast rakuseemneplaadi kinnitamist lisati seerumivaba sööde, mis sisaldas Cistanche deserticola alkoholiekstrakti (0,25 mg/mL) ja IL-4 (20 ng/mL). ) lisati 1 tund hiljem. 24 tunni pärast koguge supernatant konditsioneeritud söötmeks. Konditsioneeritud söödet tsentrifuugiti kiirusel 2000 p/min, et fragmendid sadestada, aspireeriti ja säilitati rakkude migratsioonikatseteks temperatuuril –80 kraadi. BMDM-i kultiveeriti vastavalt jaotises "2.2 /mL) lisati üks tund hiljem. 24 tunni pärast koguge supernatant konditsioneeritud söötmeks. Fragmentide sadestamiseks tsentrifuugige konditsioneeritud söödet 2000, aspireerige supernatant ja säilitage seda rakukolooniakatsete jaoks -80 kraadi juures.2.7 Rakkude migratsioonikatse Asetage haavade paranemise jaoks mõeldud {{0}}augu pistikprogramm 12-auguplaadile ja 4T1 rakke töödeldakse 3,6 × 105/mL vaktsineerimisega . Kui rakud üleöö seina külge kleepuvad, eemaldage pistikprogramm ja peske ujuvad surnud rakud PBS-iga ära. Lisage seerumivaba sööde, mis sisaldab 50 protsenti konditsioneeritud söödet. Inkubeerige inkubaatoris 24 tundi. Kell 0 ja 24 tundi pildistage pöördmikroskoobiga, analüüsige pilte pildi J abil ja arvutage rakkude migratsioonikiirus. Rakkude migratsioonikiirus=(0 h haava pindala -24 h haava pindala) / 0 h haava pindala

2.8Rakukolooniakatse 1000 4T1 rakud inokuleeriti 6 süvendiga plaadi igasse süvendisse ja inkubeeriti 8 päeva söötmega, mis sisaldas 50 protsenti konditsioneeritud söödet. Kinnitage 2-protsendilise paraformaldehüüdiga, värvige 1-protsendilise kristallvioletiga, pildistage ja analüüsige pilte rakendusega Image J.

2.9Statistiline analüüs viidi läbi GraphPad Prism 8 tarkvara abil, mõõtmisandmed väljendati xs ±, ja rühmadevahelised võrdlused ühesuunalise ANOVA abil.

3 tulemust

3.1 Cistanche deserticola deserticola alkoholiekstrakti koostise analüüs on näidatud joonisel 1 ja tabelis 2. Cistanche deserticola deserticola alkoholiekstrakt sisaldab bensoehapet, koniferüülaldehüüdi, emodiini, vanilliinhapet, hüaliini ja lepirudiin A.

Tabel 1 Praimeri järjestused

Joonis 1 Cistanche deserticola deserticola alkoholiekstraktide analüüs

Tabel 2 Cistanche deserticola deserticola alkoholiekstrakti komponentanalüüs

3.2Cistanche deserticola alkoholiekstrakti tsütotoksilisus BMDM-ile Tulemused näitasid, et 0.015 625 - 2 mg/ml Cistanche deserticola alkoholiekstraktil ei olnud pärast BMDM-rakkude töötlemist erinevate kontsentratsioonide Cistanche deserticola alkoholiekstraktiga BMDM-rakkudele toksilist toimet. 24 tunni jooksul (joonis 2).

Joonis 2 Cistanche deserticola deserticola alkoholiekstrakti tsütotoksilisus BMDM suhtes (xs ±, n=3)

3.3 Cistanche deserticola etanooliekstrakt inhibeerib makrofaagide M2 ​​polarisatsiooni in vitro. BMDM M0 makrofaagides on M2-sarnaste makrofaagide markerid Arg-1 ja CD163 madala ekspressiooniga ning ekspressioon suureneb oluliselt pärast IL-4 indutseerimist, mis näitab, et et BMDM polariseerub edukalt M2-taolisteks makrofaagideks. Western blot analüüsi ja qRT PCR meetodeid kasutati kontrollimaks, et Cistanche deserticola alkoholiekstrakt võib moduleerida IL-4 poolt indutseeritud Arg-1 ja CD163 ekspressiooni annusest sõltuval viisil (joonis 3), mis näitab, et et Cistanche deserticola alkoholiekstrakt võib otseselt pärssida makrofaagide M2-sarnast polarisatsiooni. Cistanche deserticola deserticola alkoholiekstrakti mõju makrofaagide M2 ​​polarisatsioonile edasiseks uurimiseks kasutati M2-sarnaste makrofaagidega seotud geenide Fizz1 ja PPAR uurimiseks qRT PCR-i. Ym1, CCL24, MGL2 ja IRF4 transkriptsioonitasemed on näidatud joonisel. 4. Võrreldes mudelrühmaga on Fizz1, Ym1, CCL24 ja IRF4 mRNA ekspressioonitasemed Cistanche deserticola alkoholiekstraktis (0.062 5, 0.125, { {29}},25 mg/ml) rühmas vähenes oluliselt (P<0.05, 0.01, 0.001), and the PPAR in the alcohol extract of Cistanche deserticola (0.125, 0.25 mg/mL) group γ The mRNA expression level decreased significantly (P<0.01, 0.001), and the MGL2 mRNA expression level in the alcohol extract of Cistanche deserticola deserticola (0.25 mg/mL) group decreased significantly (P<0.001).

3.4 Cistanche deserticola etanooliekstrakt nõrgendab M2-sarnaste makrofaagide soodustamist 4T1 rakkude migratsioonil. Kriimustustesti kasutati, et jälgida Cistanche deserticola etanooliekstrakti supernatandi mõju rinnavähirakkude migratsioonivõimele. BMDM-i inkubeeriti 24 tundi seerumivabas söötmes, mis sisaldas IL-4 ja Cistanche deserticola deserticola alkoholiekstrakti, ning supernatant koguti konditsioneeritud söötmena. 4T1 kultiveeriti seerumivabas söötmes, mis sisaldas 50 protsenti konditsioneeritud söödet, nagu on näidatud joonisel 5. BMDM-ga kogutud konditsioneeritud sööde, mida töödeldi ainult IL-4-ga, soodustas oluliselt 4T1 rakkude migratsiooni (P<0.05), while the conditioned medium of BMDM treated with alcohol extract of Cistanche deserticola significantly inhibited the migration of 4T1 cells (P<0.05). 3.5 Cistanche deserticola alcohol extract weakens the promotion of M2-like macrophages on 4T1 cell colony formation Use colony formation experiment to evaluate the effect of Cistanche deserticola alcohol extract on M2-like macrophages promoting 4T1 cell colony formation. As shown in Figure 6, the conditioned medium treated with IL-4 significantly promoted the colony formation of 4T1 cells (P<0.05), while the conditioned medium treated with alcohol extract of Cistanche deserticola significantly inhibited the colony formation of cells (P<0.001)

4 Arutelu

Cistanche tubulosa-Antitumor eelised

Praegu on rinnavähk endiselt ülemaailmne rahvatervise probleem. Rinnavähki haigestumus suureneb aasta-aastalt ja noortel, mis ohustab tõsiselt naiste tervist [13]. Traditsiooniline hiina meditsiin usub, et kasvajate varases staadiumis, kuna keha ei suuda yangi puudulikkuse tõttu qi-d hajutada, on yin qi ebapiisav ega suuda moodustada normaalset sperma kogunemist. Ebanormaalne kogunemine põhjustab aga patoloogilisi tooteid, nagu röga hägusus ja vere staas, mis viib toksiinide muutumiseni kasvajateks [14]. Cistanche deserticola deserticola kui oluline ravim yangi toniseerimiseks, omab elutähtsat energiat ja neeru yangi toniseerivat toimet ning suudab reguleerida immuunsust. See on kliinilises praktikas sageli kasutatav neere toniseeriv Hiina meditsiin. Nüüd kasutatakse seda sageli rinnavähi raviks ja seda kasutatakse sageli kõrgsagedusliku ühendravimina. Üks vähi tunnuseid on immuunpuudulikkus. Immuunrakud, mis peaksid kasvajate vastu võitlema, on spetsiifiliselt seksuaalne pärssimine ümbritsevate kudede ja kasvaja mikrokeskkonna poolt, mis põhjustab kasvajate kontrollimatut kasvu ja levikut [15]. Üha rohkem tõendeid näitab, et kui see esineb kasvaja mikrokeskkonnas, siis kaasasündinud immuunrakud (makrofaagid, neutrofiilid, dendriitrakud, kaasasündinud lümfoidrakud, luuüdist pärinevad seksuaalset pärssivad rakud ja NK-rakud) ja adaptiivsed immuunrakud (T-rakud ja B-rakud) ) aitavad kaasa kasvaja progresseerumisele [16]. Makrofaagid on kudede homöostaasi asendamatud vahendajad ja nende polariseerumine alternatiivsete aktiveeritud makrofaagide (M2-tüüpi) suunas võib soodustada vähirakkude proliferatsiooni, angiogeneesi ja metastaase. Seetõttu on TAM-ide reguleerimine ja nende homöostaasi säilitamine muutunud kasvajaravi keskmeks [17]. TAM-id on seotud rinnavähi metastaaside, angiogeneesi, maatriksi ümberkujundamise, invasiooni ja immunosupressiooniga. TAM-id jagunevad peamiselt kaheks erinevaks fenotüübiks, nimelt klassikalised aktiveeritud M1--sarnased makrofaagid ja alternatiivsed aktiveeritud M2--sarnased makrofaagid [18]. Healoomuliste või mittefunktsionaalsete kasvajate puhul on enamik TAM-e klassikaliselt aktiveeritud M{11}}sarnased makrofaagid, mis aktiveerivad interferooni, IFN-） või lipopolüsahhariidi (LPS), soodustades seega TAM-ide teket põletikueelsete tegurite ja kasvajarakkude fagotsütoosi tekkeks. M2-sarnaseid makrofaage võivad aktiveerida Th2 tsütokiinid, nagu IL-4, et tekitada palju põletikuvastaseid tegureid, mis soodustavad otseselt rinnavähi teket [19]. Seetõttu on M2-sarnaste makrofaagide polarisatsiooni ümberpööramine või pärssimine rinnavähi immunoteraapia strateegia. Arg-1 on M2-sarnaste makrofaagide marker ja selle üleekspressiooni seostatakse vähihaigete halva prognoosiga [20].

Hiina herb cistanche-Antitumor

CD163 on M2-sarnaste makrofaagide [21] spetsiifiline marker, mida seostatakse kasvaja metastaasidega. CD163 pluss TAM indutseerib epiteeli-mesenhümaalset üleminekut (EMT) ja soodustab vähirakkude migratsiooni [22]. Selle uuringu tulemused näitavad, et Cistanche deserticola deserticola ekstrakt mängib teatud määral immuunsust reguleerivat rolli, inhibeerides M2-sarnaste makrofaagide pinnamarkerite Arg{6}} ja CD163 ekspressiooni. ja makrofaagide M2--tüüpi polarisatsiooni pärssimine. PPAR See on metaboolne andur, mis reguleerib lipiidide homöostaasi erinevate rasvhapete ja rasvhapete derivaatide (nt palmitiinhape) aktiveerimise kaudu [23]. PPAR Seoses makrofaagide M2 ​​polarisatsiooniga, on PPAR-ist saanud makrofaagide M2 ​​polarisatsiooni peamine regulaator [24], on näidatud, et PPAR ligandidel on tugev kasvaja kasvu in vivo inhibeeriv toime [25]. Fizz1 ja Ym1 on mõlemad M{17}}nagu makrofaagide markergeenid ning Fizz1 ja Ym1 osalevad kudede parandamise ajal fibroosis [26]. M2-sarnased makrofaagid toodavad in vitro suures koguses CCL24 [27] ja CCL24 suurenenud ekspressioon võib soodustada kasvaja proliferatsiooni, migratsiooni ja invasiooni [28]. IRF4 on IRF-i perekonna liige. See osaleb makrofaagide M2 ​​polarisatsiooniprotsessis ja toimib MyD88 adaptermolekuliga kombineerides Toll-sarnaste retseptori signaalide negatiivse regulaatorina [29]. MGL2 on makrofaagide C-tüüpi galaktoosi lektiini perekonna liige ja seda ekspresseeritakse ka alternatiivsetes aktiveerimistingimustes stimuleeritud makrofaagides [30]. Selle uuringu tulemused näitavad, et Cistanche deserticola deserticola ekstrakt inhibeerib M2-sarnast makrofaagiga seotud geeni PPAR, Fizz1, Ym1, CCL24, IRF4 ja MGL2 ekspressioon inhibeerib makrofaagide M2-tüüpi polarisatsiooni, mis näitab, et Epimedium võib toimida tõhusa vahendina. M2-sarnaste makrofaagide inhibiitor. Üha rohkem tõendeid viitab sellele, et M{41}sarnased makrofaagid võivad soodustada vähi metastaase ja kasvu [31]. M2-sarnaste makrofaagide konditsioneeritud sööde võib simuleerida kasvaja mikrokeskkonda ning indutseerida kasvaja migratsiooni ja kasvu, mis on sarnane pahaloomulistest kasvajatest eraldatud makrofaagidele [12]. IL-4 võib soodustada makrofaagide polariseerumist M2-tüübi suunas ning soodustada kasvaja proliferatsiooni ja angiogeneesi [18]. See uuring näitas seost makrofaagide polarisatsiooni ja Cistanche deserticola deserticola kasvajavastase toime vahel. IL-4-aktiveeritud makrofaagide konditsioneeritud sööde soodustas 4T1 rakkude migratsiooni ja kasvu ning pärast kaassekkumist Cistanche deserticolaga muutis selle M2-aktiveeritud kasvajat soodustava efekti, mis näitab, et IL{55} }aktiveeritud M2 polarisatsiooni kõrvaldas Cistanche deserticola.

See uuring näitas seost makrofaagide polarisatsiooni ja Cistanche deserticola deserticola kasvajavastase toime vahel. IL-4-aktiveeritud makrofaagide konditsioneeritud sööde soodustas 4T1 rakkude migratsiooni ja kasvu ning pärast koossekkumist Cistanche deserticolaga muutis selle M2-aktiveeritud kasvajat soodustava efekti, mis näitab, et IL{{7} }aktiveeritud M2 polarisatsioon elimineeriti Epimediumiga. Selles uuringus leiti, et Cistanche deserticola ekstrakt pärsib rinnavähi rakkude migratsiooni ja kolooniate moodustumist, reguleerides makrofaagide polarisatsiooni in vitro, mis näitab, et Cistanche deserticola rinnavähi ravi võib olla seotud kasvaja mikrokeskkonna reguleerimisega ja Epimedium võib toimida kasvaja mikrokeskkonna regulaator metastaaside asukohas, mõjutades makrofaage, mis annab uue mehhanismi ülevaate Cistanche deserticola kasvajavastasest funktsioonist. See paljastab Cistanche deserticola uue potentsiaalse mehhanismi vähiravis, mis võib aidata vähendada vähi esinemissagedust. vähk ja vähiga seotud suremus. Tulevikus uurib uurimisrühm veelgi Cistanche deserticola mõju rinnavähi kasvule ja metastaasidele pärast makrofaagide M2 ​​polarisatsiooni pärssimist in vivo, et selgitada Cistanche deserticola kasvajavastast mehhanismi ja luua alus kliiniliseks kasutamiseks. Cistanche deserticola kasutamine kasvajahaiguste ravis.

Viited

Viited

[1] GBD 2019. aasta vähiriskitegurite koostööpartnerid. Riskiteguritest tingitud ülemaailmne vähikoormus, 2010-19: 2019. aasta ülemaailmse haiguskoormuse uuringu süstemaatiline analüüs [J]. Lancet, 2022, 400(10352): 563-591.

[2] Yin L, Duan JJ, Bian XW jt. Kolmiknegatiivne rinnavähi molekulaarne alatüüp ja ravi edenemine [J]. Breast Cancer Res, 2020, 22(1): 61.

[3] Medeiros B, Allan A L. Rinnavähi kopsu metastaaside molekulaarsed mehhanismid: kliinilised ja eksperimentaalsed perspektiivid [J]. Int J Mol Sci, 2019, 20 (9): 2272.

[4] Pathria P, Louis TL, Varner J A. Kasvajaga seotud makrofaagide sihtimine vähi korral [J]. Trends Immunol, 2019, 40(4): 310-327.

[5] Shen MJ, Chen YB, Xu LJ jt. Makrofaagide suurenenud infiltratsioon radioresistentsetesse kopsuvähirakkudesse aitab kaasa kasvajarakkude täiendava resistentsuse tekkele NK-rakkude tsütotoksilise toime suhtes [J]. Int J Oncol, 2018, 53(1): 317-328.

[6] Tariq M, Zhang JQ, Liang GK jt. Makrofaagide polarisatsioon: vähivastased strateegiad kasvajaga seotud makrofaagide sihtimiseks rinnavähi korral [J]. J Cell Biochem, 2017, 118(9): 2484-2501.

[7] Ma Li Cistanche deserticola glükosiidi toime stroomarakkudest pärinevale faktorile -1 (SDF-1) ja selle retseptorile CXCR-4 ägeda keskmise ajuarteri infarktiga rottidel [D] Nanjing : Nanjingi Hiina Meditsiini Ülikool, 2014

[8] Hao Fuliang Cistanche deserticola glükosiidi mõju ja mehhanism küüliku kolju defektide parandamisel ja paranemisel [D] Shijiazhuang: Hebei Medical University, 2013

[9] He J, Zang SL, Liu N jt. Epimeediumi polüsahhariidid nõrgendavad hematotoksilisust, vähendades oksüdatiivset stressi ja suurendades immuunfunktsiooni benseenist põhjustatud luuüdi puudulikkuse hiiremudelis [J]. Biomed Pharmacother, 2020, 125: 109908.

[10] Hua Ciyi, Shi Youyang, Xie Ying jt Cistanche deserticola aktiivse koostisaine mehhanismi uurimine rinnavähi ravis [J] Hiina taimne ravim, 2022, 53 (20): 6593-6600

[11]Chen Xiaolei, Tang Lijian, Li Qinglin Uuring rinnavähirakkude proliferatsiooni tõkestamiseks Cistanche deserticola ja fraziili ekstraktidega in vitro [J] China Pharmacy, 2007, 18 (15): 1124-1127

[12] Xu F, Cui WQ, Wei Y jt. Astragalosiid IV inhibeerib kopsuvähi progresseerumist ja metastaase, moduleerides makrofaagide polarisatsiooni AMPK signaaliülekande kaudu [J]. J Exp Clin Cancer Res, 2018, 37(1): 207.

[13] Britt KL, Cuzick J, Phillips K A. Rinnavähi tõhusa ennetamise peamised sammud [J]. Nat Rev Cancer, 2020, 20(8): 417-436.

[14] Hao Feifei, Tian Sisheng Pahaloomulise kasvaja metastaaside "Yangi domineeriva Yin-i järgimise" uurimine gaasistamise teooria põhjal [J] Shi Zhen Guoyi Guoyao, 2021, 32 (1): 164-166

[15] Denk D, Petrocelli V, Conche C jt. T-mälu tüvirakkude laienemine parema kasvajavastase immuunsusega urolitiin A-indutseeritud mitofagiaga [J]. Immunity, 2022, 55(11): 2059-2073.

[16] Hinshaw DC, Shevde LA. Kasvaja mikrokeskkond moduleerib loomupäraselt vähi progresseerumist [J]. Cancer Res, 2019, 79(18): 4557-4566.

[17] DeNardo DG, Ruffell B. Makrofaagid kasvaja immuunsuse ja immunoteraapia regulaatoritena [J]. Nat Rev Immunol, 2019, 19(6): 369-382.

[18] Dong R, Gong YL, Meng W jt. M2 makrofaagide polarisatsiooni inhibeerimise kaasamine fenretiniidi vahendatud kemopreventiivsesse toimesse käärsoolevähile [J]. Cancer Lett, 2017, 388: 43-53. [19] Jiménez-Garcia L, Herránz S, Luque A jt. P38 MAPK kriitiline roll IL-4-indutseeris peritoneaalsete makrofaagide alternatiivse aktiveerimise [J]. Eur J Immunol, 2015, 45(1): 273-286.

[20] Ma ZG, Lian J, Yang M jt. Arginase-1 üleekspressioon näitab kolorektaalse vähiga patsientide halba prognoosi [J]. Pathol Res Pract, 2019, 215(6): 152383.

[21] Tao SF, Chen Q, Lin C jt. Linc00514 soodustab rinnavähi metastaase ja kasvajaga seotud makrofaagide M2 ​​polarisatsiooni Jagged{4}}vahendatud Notchi signaaliraja kaudu [J]. J Exp Clin Cancer Res, 2020, 39(1): 191.

[22] Wei C, Yang CG, Wang SY jt. Vähirakkude ja kasvajaga seotud makrofaagide vaheline ristkõne on vajalik mesenhümaalse ringleva kasvajarakkude poolt vahendatud kolorektaalse vähi metastaaside jaoks [J]. Mol Cancer, 2019, 18(1): 64.

[23] Francque S, Szabo G, Abdelmalek MF jt. Mittealkohoolne steatohepatiit: peroksisoomi proliferaatori poolt aktiveeritud retseptorite roll [J]. Nat Rev Gastroenterol Hepatol, 2021, 18(1): 24-39.

[24] Tian Y, Yang CM, Yao QY jt. Protsüanidiin B2 aktiveerib PPAR-i, et kutsuda esile M2 polarisatsioon hiire makrofaagides [J]. Front Immunol, 2019, 10: 1895.

[25] Takada I, Makishima M. Peroksisoomi proliferaatoriga aktiveeritud retseptori agonistid ja antagonistid: patendiülevaade (olemas 2014-) [J]. Expert Opin Ther Pat, 2020, 30(1): 1-13.

[26] Okuzumi S, Miyata J, Kabata H jt. TLR7 agonist pärsib 2. rühma kaasasündinud lümfoidrakkude poolt vahendatud põletikku IL-27- tootvate interstitsiaalsete makrofaagide kaudu [J]. Am J Respir Cell Mol Biol, 2021, 65(3): 309-318.

[27] Makita N, Hizukuri Y, Yamashiro K jt. IL-10 suurendab IL-4 poolt indutseeritud M2 makrofaagide fenotüüpi ja annab võime suurendada eosinofiilide migratsiooni [J]. Int Immunol, 2015, 27(3): 131-141.

[28] Jin L, Liu WR, Tian MX jt. CCL24 aitab kaasa HCC pahaloomulisusele RhoB-VEGFA-VEGFR2 angiogeneesi raja kaudu ja näitab halba prognoosi [J]. Oncotarget, 2017, 8(3): 5135-5148.

[29] Satoh T, Takeuchi O, Vandenbon A jt. Jmjd3-Irf4 telg reguleerib M2 makrofaagide polarisatsiooni ja peremeesorganismi reaktsioone helmintinfektsiooni vastu [J]. Nat Immunol, 2010, 11(10): 936-944.

[30] Raes G, Brys L, Dahal BK jt. Makrofaagide galaktoosi C-tüüpi lektiinid uudsete markeritena alternatiivselt aktiveeritud makrofaagidele, mida põhjustavad parasiitnakkused ja allergiline hingamisteede põletik [J]. J Leukoc Biol, 2005, 77(3): 321-327.

[31] Mantovani A, Allavena P, Sica A jt. Vähiga seotud põletik [J]. Nature, 2008, 454(7203): 436-444.