Nahk on keha kõige ulatuslikum organ ja sellel on palju funktsioone

Palun võtke ühendustoscar.xiao@wecistanche.comrohkem informatsiooni

Abstraktne:Naha fibroblastid on paljude valkude, sealhulgas kollageeni sekretsiooni peamised osalised, säilitades naha funktsiooni. Vabad radikaalid osalevad naha vananemises ja kahjustustes, mis hõlmavad erinevaid rakulisi komponente. Tasakaalustamatus reaktiivsete hapnikuliikide (ROS) koguse ja looduslike antioksüdantsete ensüümide vahel mõjutab negatiivselt naha homöostaasi. Looduslikud ühendid on hiljuti esile kerkinud kui potentsiaalsed vananemisvastased vahendid kudede regenereerimisel. Käesolevas töös hindasime valgete ja punaste veinide antioksüdantset aktiivsust, võttes arvesse nende tõenäolist kasutamist toorainena vananemisvastaste omadustega kosmeetikatoodete valmistamisel. Uurisime meetodit, mis võimaldaks eemaldada veinide alkoholifraktsiooni ja määrasime nende koostise LC-MS analüüsiga. Seejärel testisime 3-(4,5-dimetüültiasool-2-üül)-2,5-difenüültetrasooliumi (MTT) punaste ja valgete veinide võimalikku tsütotoksilist toimet fibroblastidele ) test ja nende antioksüdantne aktiivsus katalaasi aktiivsuse testiga stressitingimustes. Lõpuks hindasime nende vananemisvastast potentsiaali -galaktosidaasi kolorimeetrilise testi abil. Meie tulemused näitasid, et veiniekstraktidel on märkimisväärne antioksüdantne ja vananemisvastane toime, eriti rakkude puhul, mis puutuvad kokku stressirohke sündmusega. Need omadused võivad viidata sellele, et neid saab kasutada kosmeetikatoodetena naha taastamiseks.

Märksõnad:rakkude proliferatsioon; antioksüdandid; rakkude vananemine; bioaktiivsed molekulid; naha vananemine; oksüdatiivne stress

Lisateabe saamiseks klõpsake siin

1. Sissejuhatus

Nahk on keha kõige ulatuslikum organ ja sellel on palju funktsioone, mis kaitsevad selle all olevaid kudesid keemiliste ja mehaaniliste kahjustuste, UV-kiirguse, vabade radikaalide ja infektsioonide eest. See mängib rolli termoregulatsioonis, tal on endokriinsed ja biokeemilised funktsioonid ning see on ksenobiootikumide (ravimid, mürgid, kosmeetika) manustamis- ja/või imendumisorgan[1-3]. Pärisnahas tagavad elastiinikiud ja kollageenkiud õige naha elastsuse. Vanus, hormoonid ja ultraviolettkiirguse kahjulik mõju võivad vähendada pärisnaha paksust ja elastsust, mille tulemuseks on kortsud ja nahatooni kaotus[4,5]. On juba teada, et naha vananemine kahjustab naha barjäärifunktsiooni, mille tulemuseks on kuiv välimus ja vastuvõtlikkus keskkonna agressoritele [6]. Reaktiivsed hapniku liigid (ROS), mis tulenevad elektronide kadumisest aeroobse metabolismi käigus või pärast kokkupuudet keskkonnateguritega, on ebastabiilsed liigid, mis võivad kahjustada erinevaid biomolekule [7, 8]. Nende mõju vastu võitlemiseks suudavad organismi loomulikud antioksüdantsed kaitsemehhanismid hoida ROS-i füsioloogiliselt vastuvõetaval tasemel. Tegelikult näib, et ROS-il, kui seda esineb kontrollitud kogustes, on ka füsioloogiline toime, toimides signaalmolekulidena rakkude vahel [9, 10].cistanche tšingis-khaanSee tasakaalustamatus ROS-i ja antioksüdantsete ensüümide, nagu katalaas, glutatioonreduktaas ja superoksiiddismutaas, vahel põhjustab kahjustusi valkudele, lipiididele ja DNA-le [11], häirides seega negatiivselt keratinotsüütide ja fibroblastide rakusisest signaaliradasid ning muutes MMP ekspressiooni. (maatriksi metalloproteinaasid), prokollageen ja põletikueelsed tsütokiinid [12,13]. Fenoolsed ühendid, nagu resveratrool, hüdroksütürosool ja epigallokatehhiin-3-gallaat, mida leidub köögiviljades, puuviljades ja nende derivaatides, on peamised kaitsemolekulid seente, bakterite ja viiruste vastu [14]. Veinis laialdaselt esinevate polüfenoolide kasulik mõju on viimastel aastatel pälvinud suurt tähelepanu farmaatsia- ja kosmeetikatööstuses[15,16]. Polüfenooli tarbimine võib avaldada kaitsvat toimet ägedate ja krooniliste haiguste korral ning ainevahetuse ja rakkude proliferatsiooni reguleerimisel [17]. Fenoolsete ühendite ekstraheerimiseks ja iseloomustamiseks mõeldud ühtse tõhusa protseduuri väljatöötamisel on palju piiranguid, peamiselt fenoolsete ühendite struktuurse mitmekesisuse ja nende koostoime tõttu teiste rakukomponentidega[18,19]. Kaasaegsed rohelised ekstraheerimistehnikad ja kõrge eraldusvõimega massispektromeetria (LC-ESI-LTQ-Orbitrap-MS) kujutavad endast paljutõotavaid lähenemisviise nende bioaktiivsete molekulide haldamiseks [20]. Seetõttu uurisime odavat, paindlikku, tugevat ja tõhusat meetodit, mis võimaldaks eemaldada veinidest alkoholisisalduse, mida saab kasutada kosmeetikatoodetena. Veini tarbimisega seotud arvukad tervisemõjud on olnud teada juba pikka aega ning eriti kõrge antioksüdantsete polüfenoolsete ühendite sisaldus muudab selle kasulikuks kõrge oksüdatiivse stressiga haiguste ravis[21,22]Antioksüdantide paikne kasutamine võib toetada naha antioksüdantide süsteemi oksüdatiivse stressi vastu ja kaitsta seda pikaajalise fotovananemise eest [23,24]. Selles kontekstis püüdsime käesolevas artiklis hinnata punase ja valge veini ekstraktide antioksüdantset toimet rakkudes, mis on kokku puutunud tugeva stressirohke sündmusega, et võidelda rakkude vananemise vastu, mis viitab nende võimalikule lisamisele erinevatesse paiksetesse vananemisvastastesse preparaatidesse. omadused, küpse ja kahjustatud naha raviks.

Cistanche on vananemisvastane toime

2. Materjalid ja meetodid

Selles uuringus kasutatud punased ja valged veinid olid kontrollitud päritolu nimetusega Buio, mis saadi Carignano del Sulcise viinamarjadest, mida toodab Cantina Mesa, Sardegna ja Giunco, toodab sama Cantina Mesa, mis on saadud Vermentino viinamarjadest.

In vitro katseteks kasutati 5. passaažis in-line inimese naha fibroblaste (HFF1) (ATCC, Manassas, VA, USA). Rakke kasvatati basaalkasvusöötme juuresolekul, mis koosnes Dulbecco modifitseeritud Eagle'i söötmest (DMEM) (Life Technologies Grand Island, NY, USA), millele oli lisatud 10 protsenti veiseloote seerumit (FBS) (Life Technologies). , Grand Island, NY, USA), 200 mM L-glutamiini (Euroclone, Milano, Itaalia) ja 200 U/ml penitsilliini – 0,1 mg/ml streptomütsiini (Euroclone, Milano, Itaalia). Rakke kasvatati termostaatilistes inkubaatorites temperatuuril 37 kraadi ja 5% (maht/maht) CO2. 2.1. Veiniekstraktide valmistamine: pihustuskuivati

Uurimise esimestel etappidel uurisime meetodit veinide rakkudele mürgise alkohoolse fraktsiooni eemaldamiseks. Kuivatusprotseduuriks kasutati minipihustuskuivatit B{{0}} (BUCHIItalia srl, Cornaredo, Itaalia). Algselt kuivatati 100 ml veini alikvooti sisselaske- ja väljalasketemperatuuriga (lämmastik), vastavalt 25 ja 70 kraadi; voolukiiruseks määrati 15 protsenti. Seejärel lisati 100 ml portsjonile veini 0,2 g ksantaankummi ja minimaalses koguses vett, mis on vajalik kummi lahustamiseks. Sisse- ja väljalasketemperatuurid (lämmastik) olid vastavalt 135 ja 70 kraadi; etteande voolukiirus määrati 12 protsendile.

2.2. Veiniekstraktide valmistamine: Rotavapor

Aurutasime täpselt 500 g ja kaalusime Buchi Rotavapor卵R-10 (BUCHI Italia srl, Cornaredo, Itaalia) punased ja valged veinid 500 ml kolbides, temperatuuril 55 kraadi, kolvi pöörlemiskiirusega 5 ja vaakumtingimustes. võrdne 60 mmHg. Esialgu toodi 2 veiniproovi täiesti kuivalt. Seejärel aurutasime need kindlaks määratud ajaga 20 minutit, et eemaldada alkohoolne fraktsioon.

2.3.HPLC analüüs

Vedelikkromatograafia-massispektromeetria (LC-MS) analüüs viidi läbi vastavalt D'Urso et al. （2020） 【25】 väikeste muudatustega. Lühidalt, 5 μL punast ja valget veini enne ja pärast pöördaurustamist lõppkontsentratsiooniga 1 mg/ml (Ho-s) süstiti vedelikkromatograafiasüsteemi, mis koosnes kvaternaarsest Accela 6-st00 pump ja Accela autosampler, mis on ühendatud elektropihustusionisatsiooniga (ESI) lineaarse Trap-Orbitrap hübriidmassispektromeetriga (LTQ-Orbitrap XL, Thermo Fisher Scientific, Bremen, Saksamaa). Kromatograafiline eraldamine viidi läbi C18 Moon kolonnis (100 × 2,0 mm, osakeste suurus 5 um; Phenomenex), kasutades eluentfaasidena 0,1 protsenti sipelghapet (lahusti A) ja 0,1 protsenti sipelghapet (lahusti B) H2O ja CHSCN. Järgmist binaarset gradienti rakendati kiirusel 200 μL/min∶ 0-35 min,5 kuni 95 protsenti （B) ja 35-40 min, isokraatlik 95 protsenti (B ESI allika parameetrid olid järgmised: Kapillaarpinge {{ 25}} V; toruläätse pinge-176,47; kapillaaride temperatuur 280 kraadi ; mantel ja lisagaasi vool (N2),15 ja 5; Pühkimisgaas 0; Pihustuspinge 5. MS spektrid saadi täisulatuse mõõtmise teel, hõlmates m/z180-1400. Fragmentatsiooniuuringute jaoks viidi läbi andmetest sõltuv skaneerimiskatse, valides LC-MS analüüsi kõige intensiivsematele tippudele vastavad prekursorioonid. Instrumentide juhtimiseks, andmete hankimiseks ja andmete analüüsimiseks kasutati Xcaliburi tarkvara versiooni 2.1.

2.4.MTT elujõulisuse test

Nende võimaliku tsütotoksilise toime hindamiseks testiti punase ja valge veini ekstrakte HFFl-ga erinevatel kontsentratsioonidel (100,200,300,400 ja 500 mg/mL) kokku 24 kuni 72 tundi, kasutades kolorimeetrilist testi 3- (4,5-dimetüültiasool-2-üül)-2.5-difenüültetrasoolium (MTT) (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, USA). Elutähtsad rakud suutsid seda ühendit redutseerida, tekitades formazaani, mida saab kvantifitseerida spektrofotomeetriga 570 nm juures. HFF1 külvati kontsentratsiooniga 5000 rakku süvendi kohta 96-süvendiga plaatidele. Töötlemata kontrollina kasutatud rakke kasvatati ainsas põhilises kasvukeskkonnas. Inkubatsiooniperioodi lõpus eemaldati ekstrakte sisaldav sööde ja igasse süvendisse lisati 10 μL MTTT lõppkontsentratsiooniga 0, 65 mg / ml ja inkubeeriti 2 tundi.cistanche eluea pikendaminePärast inkubeerimist lahustati formazaan DMSO-s ja neeldumine tuvastati spektrofotomeetrilise lugemisega 570 nm juures (Akribis Scientific, Common Farm, Frog Ln, Knutsford WA16 OJG, Suurbritannia). Kultiveeritud rakkude elujõulisus erinevate ekstraktide juuresolekul arvutati rakkude elujõulisuse protsendina võrreldes töötlemata kontrolliga: (OD570 töödeldud rakud) × 100/(OD570 kontroll).

(1)

2.5.Antioksüdantne aktiivsus

Veiniekstraktide antioksüdantset aktiivsust hinnati katalaasi aktiivsuse testimisega, mis on ensüüm, mis on võimeline lagundama vesinikperoksiidi vees ja hapnikus. Kasutatav kolorimeetriline test (Catalase Assay Kit) (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, USA) võimaldab hinnata selle ensüümi aktiivsust töödeldud rakkudes spektrofotomeetrilise lugemise abil. Rakud kutsuti esile vananema 1-tunnise töötlemisega 100 μM vesinikperoksiidiga (H2O2) ja seejärel kultiveeriti ekstraktide juuresolekul erinevates kontsentratsioonides (10, 200 300, 400 ja 500 mg/ml) 24,48 ja 72 h. Oksüdatiivse stressi positiivse kontrollina kasutatud rakke kasvatati pärast kokkupuudet H2-ga basaalkasvusöötmes. Kontrollina kasutatud rakke kasvatati ainult basaalkasvusöötmes, ilma eelneva H2O2-ga kokkupuuteta. Inkubatsiooniaja lõpus inkubeeriti proove, nii töödeldud kui ka kontrollproove, komplektis olevate reagentidega toatemperatuuril 15 minutit, et hinnata värvuse kujunemist, ja igaühe neeldumist mõõdeti spektrofotomeetrilise näiduga 520 °C juures. nm (Akribis Scientific, Common Farm, Frog Ln, Knutsford WA16 OJG, Suurbritannia). Katalaasi aktiivsus arvutati igas proovis esinevate mikromoolide arvu põhjal ja võrreldi töötlemata kontrolli aktiivsusega.

2.6. - Galaktosidaasi vananemise test

Kultuuris vananevate rakkude tuvastamiseks kasutati -galaktosidaasi kolorimeetrilist analüüsi (Cell Signaling, MA, USA). HFF1 kasvatati 24-süvendiga plaatidel valge ja punase veini ekstraktide juuresolekul kontsentratsioonis 500 mg/ml kokku 72 tundi. Rakud indutseeriti eelnevalt vananema 1-tunnise töötlemisega 100 uM vesinikperoksiidiga (H-O2). Inkubatsiooniaja lõpus eemaldati peroksiide sisaldav sööde ja rakkudele lisati konditsioneeritud kontsentraate sisaldav värske sööde. Töötlemata kontrollina kasutatud rakke kultiveeriti ainult kasvusöötme juuresolekul, ilma eelneva H2O2-ga kokku puutumata. Selle asemel kasutati vananemise positiivse kontrollina peroksiididega eeltöödeldud rakke, mida kultiveeriti normaalses kasvukeskkonnas. Pärast 72-tunnist töötlemist ekstraktidega fikseeriti kõik rakud ja inkubeeriti värvainega valgusmikroskoobi all jälgimiseks. 2.7.Statistiline analüüs

Statistiline analüüs viidi läbi, kasutades tarkvara Statistical Package for the Social Sciences versiooni 13 (SPSSInc, Chicago, IL, USA).cistanche nzKatsed viidi läbi 2 korda 3 tehnilise kordusega iga ravi jaoks. Iga rühma dispersiooni jaotusi hinnati Kruskal-Wallise auaste summa ja Wilcoxoni märgistatud auaste testiga, eeldades p-väärtust<0.05 as="" statistically="">

3. Tulemused

3.1. Veini ekstraheerimine Rotavaporiga parandab ekstraheerimise kvaliteeti, säilitades veinide fenoolprofiilid

Esimene katse veiniekstrakti saamiseks tehti pihustuskuivatiga, mis oli kiire ja lihtne tehnika, mis sobis veinidest alkoholifraktsiooni eemaldamiseks. Igatahes ei sobinud saadud ekstrakt meie kasutusalasse, seetõttu kaaluti bioloogilise ja keemilise analüüsi proovi saamiseks lihtsat ja odavamat vaakumis aurustamist. Alustades 500 g veinist ja töötades 55 kraadi juures, saadi 20 minuti pärast 262 g ekstrakti.

Veinis sisalduvate polüfenoolide mis tahes riknemise tuvastamiseks aurustamisetapi ajal viidi proovid enne ja pärast töötlemist läbi vedelikkromatograafiliselt. Joonistel 1 ja 2 on kujutatud punaste ja valgete veinide LC-ESI-LTQ-Orbitrap MS profiilid enne ja pärast aurustamist. Andmete kogumine viidi läbi negatiivse ionisatsiooni režiimis; oli teada, et negatiivne ionisatsioonirežiim oli selektiivsem ja võimaldab saada suuremat tundlikkust fenoolsete ühendite suhtes. Punase veini proovides on tuvastatud 33 fenoolühendit ja valge veini proovides 26 ühendit (tabelid 1 ja 2). Sõrmejälg näitas fenoolhapete, katehhiinide ja nendega seotud proantotsüaniidide, stilbeenide ja flavonoidglükosiidide esinemist proovides. Punase veini profiilid enne ja pärast aurustamist näitasid väikseid kvantitatiivseid erinevusi (joonis 1). Ootuspäraselt olid punase veini kromatogrammid valge veiniga võrreldes rahvarohkemad, mis tähendab, et punane vein sisaldas rohkem polüfenoolühendeid kui valge. (Joonis 2). Kvalitatiivsest vaatenurgast olid toorproovid ja vastav veiniekstrakt võrdväärsed.

3.2. Veiniekstraktid parandavad rakkude elujõulisust ja antioksüdantide reaktsiooni

MIT-analüüs näitas veiniekstraktide mittetoksilisust kõigi testitud kontsentratsioonide (joonis 3) ja kokkupuuteaja puhul, säilitades rakkude elujõulisuse võrreldes töötlemata kontrollrakkudega. Ainult suuremate kontsentratsioonide korral (400 ja 500 mg/ml valge ja 500 mg/ml punase veini ekstraktid) vähenes rakkude elujõulisus 24 tunni pärast (paneel A) ja 48 h (paneel B) võrreldes kontrollida töötlemata rakke. Erinevate ekstraktidega töödeldud rakkudel oli ka parem antioksüdantne aktiivsus, stimuleerides katalaasi aktiivsust H-O2 lagunemisel hapnikus ja vees, kaitstes rakke oksüdatiivse stressi põhjustatud kahjustuste eest (joonis 4). Antioksüdandi aktiivsuse paranemine töödeldud rakkudes võrreldes kontrollidega oli nähtav juba pärast 24-tunnist töötlemist, eriti kõrgemate kontsentratsioonide (500 mg/ml) korral (joonis 4A), saavutades maksimumi 48 tunni pärast, mis on statistiliselt oluline kõrgemate kontsentratsioonide puhul ( Joonis 4B) ja seejärel stabiliseeriti 72 tunni pärast (joonis 4C).

3.3. Veiniekstraktid võitlevad rakkude vananemise vastu, vaatamata tugevale stressirohkele sündmusele

Joonisel 5 on näidatud -galaktosidaasi aktiivsus erinevates kasvutingimustes. Rakud, mida kultiveeriti kahe ekstrakti (valge ja punane kontsentratsioonis 500 mg/ml) juuresolekul, näitasid selget siniste positiivsete rakkude arvu vähenemist ja seega ka vananemist, võrreldes töötlemata kontrollrakkudega, mida kasvatati ainsa kasvusubstraadile (Ctrl) ja rakkudele, mis on eksponeeritud H2O2-ga ilma ekstraktideta (Ctrl H2O2).

4. Arutelu

Polüfenoolid on veinis kõige levinumad bioaktiivsed molekulid, mis on viimasel ajal keskendunud ka kosmeetiliste rakenduste valdkonnale [26]. Polüfenoolid on rühm taimedes laialdaselt leiduvaid ühendeid, mis on struktuurilt väga erinevad, kuid vastutavad toiduainete ja taimede organoleptiliste ja toiteväärtuste eest [14]. Neil on ka positiivne mõju, kaitstes vähi, südame-veresoonkonna haiguste, diabeedi, osteoporoosi ja neurodegeneratiivsete haiguste eest [27-29]. Teised autorid kirjeldasid varem nende omadusi oksüdatiivse stressi ja põletiku vastu võitlemiseks [30]. Eelkõige sõltub ateroskleroosi hästituntud ennetav toime LDL-kolesterooli antioksüdantsest aktiivsusest, mille oksüdatsioon viib valgete vereliblede hõivamiseni, millele järgneb ateroomsete naastude moodustumine [31,32]. Selles kontekstis tõusis vein hiljuti esile kui üks parimaid viise sooleinfektsioonide ennetamiseks, millel on viiruse- ja antibakteriaalne toime grampositiivsete ja gramnegatiivsete mikroorganismide, nagu salmonelloos, šigelloos, kolibatsilloos, stafülokokid ja streptokokid, vastu [334]. .

Resveratrooli peetakse üheks kõige tõhusamaks veinis leiduvaks antioksüdandiks, mis kaitseb nahka vabade radikaalide eest ja aeglustab vananemisprotsessi, pärssides türosinaasi aktivatsiooni [35]. Lisaks mõjutab see glükoosaminoglükaanide tootmist, mis hõlbustavad ja reguleerivad vee ümberjaotumist pärisnahas, taastades selle tasakaalu ja tuues kaasa püsiva hüdratatsiooni [36]. Lisaks moduleerib resveratrool rakutsükleid, apoptoosi ja vananemist, näidates kaitsvat toimet DNA oksüdatiivse kahjustuse vastu[37]. Gallushapet ja kõiki selle derivaate peetakse kõige olulisemateks fenoolhapeteks, millel on kõrge vabade radikaalide eemaldamise aktiivsus, mis on võimeline häirima raku signaaliülekande radu ja vähirakkude apoptoosi [38]. Flavonoididel ja antotsüaniinidel on märkimisväärne antioksüdantne toime.cistanche peenise suurusSee on hästi tuntud oma märkimisväärse võime tõttu vähendada vähirakkude proliferatsiooni ja kaitsta südame-veresoonkonna haiguste, rasvumise ja diabeedi eest [39, 40]. Lisaks osalevad nad ka neuronite funktsioonide moduleerimises ja vanusega seotud haiguste ennetamises [41]. Tõhus ekstraheerimisprotseduur on fenoolsete ühendite stabiilsuse säilitamiseks ülioluline[42]. Selles kontekstis hindasime käesolevas artiklis kahte tüüpi veiniekstraktide komponente, mis saadi vaakumaurustamisega, et saada alkoholivaba kontsentraadi. Veendumaks, et aurutamisprotsess ei mõjutanud veini kvaliteeti ja kogust, analüüsiti punase ja valge veini proovide keemilisi profiile ning võrreldi neid aurutamisjärgsete näitajatega. Proovide sõrmejälgede analüüs näitas suures koguses fenoolhapete, katehhiinide ja nendega seotud proantotsüaniidide, stilbeenide ja flavonoidglükosiide (joonised 1 ja 2), mis on kasulikud paikse kosmeetilise ettevalmistuse toorainena [43]. Nende potentsiaalne ravitoime paljude nahahaiguste, sealhulgas nakatunud haavade ja UV-kiirguse korral, on tõenäoliselt seotud nende bioaktiivsete molekulide sünergilise toimega [4]. Need ühendid võivad inhibeerida ROS-i genereerivaid ensüüme, nagu ksantiinoksüdaas ja nikotiinamiid-adeniindinukleotiidfosfaat (NADPH) oksüdaas [45,46].

Oksüdatiivset stressi põhjustab reaktiivsete hapnikuliikide liig. ROS, mis tuleneb elektronide kadumisest aeroobse metabolismi käigus või pärast kokkupuudet keskkonnateguritega, on ebastabiilsed liigid, mis on võimelised esile kutsuma muutusi biomolekulide struktuuris ja funktsioonis [47,48]Looduslikud antioksüdandid on seotud ROS-i hoidmisega füsioloogiliselt sobival tasemel[49,50]. Kõik muutused selles protsessis võivad naha vananemist negatiivselt mõjutada[51,52]. Selles kontekstis on paljud looduslikud ekstraktid hästi tuntud oma kasuliku mõju poolest haavade paranemise ja antioksüdantsete reaktsioonide stimuleerimisel kahjustatud nahal pärast kokkupuudet keskkonnastressiga [53-56]. Nüüd on teada, et naha vananemine põhjustab barjäärifunktsiooni halvenemist, mille tulemuseks on kuiv välimus ja vastuvõtlikkus keskkonna agressoritele, mis kujutab endast seetõttu suuremat nahahaiguste riski [57, 58]. Lisaks on haavade paranemine keeruline ja dünaamiline paranemisprotsess, naha terviklikkuse taastamine ja kudede homöostaas [59]. Aktiivsete antioksüdantide molekulide paikne kasutamine võib toetada naha antioksüdantide süsteemi oksüdatiivse stressi vastu, kaitstes seda seega pikaajalise fotovananemise eest [24,60]. On hästi teada, et bioaktiivsed molekulid, mis toimivad antioksüdantidena, on võimelised tõrjuma rakkude vananemis- ja vananemisprotsesse. Rakkude vananemine on rakkude kasvu peatamise stabiilne faas, mida iseloomustab vananemisfenotüüpidega (SASP) seotud sekretoorsete tegurite sekretsioon [61]. SASP võib moduleerida naaberrakke, mis viib erinevates patoloogilistes protsessides osalevate signaalikaskaadide aktiveerimiseni [62]. Vananevaid rakke seostatakse telomeeride lühenemise ja püsiva põletikueelse miljööga, soodustades rakkude transdiferentseerumist [63]. Sellega seoses oleme hiljuti näidanud, et Myrtus Communis L. omab olulisi antioksüdantseid ja regenereerivaid omadusi, moduleerides tüvirakkude pluripotentsust ja põletikulist vastust[64]. Selle taime ekstraktid, mis on rikkad polüfenoolide poolest, on võimelised kaitsma rakke oksüdatiivse stressi eest, kutsudes esile telomeraasi pöördtranskriptaasi (TERT) ekspressiooni ja takistades enneaegset vananemist [65].

Teised autorid on varem näidanud, et terapeutilised sekkumised vananevate rakkude vastu võivad taastada tervise, tõrjudes kroonilist põletikku ja kutsudes esile haava paranemise [66]. Sellegipoolest näitasid teised autorid, et kvertsetiin, flavonoidid ja gallushape võivad ära hoida vigastusi, mis on põhjustatud otsesest vabade radikaalide püüdmisest, toetades rakkude detoksifitseerimissüsteeme, nagu superoksiidi dismutaas, katalaas ja glutatioonperoksüdaas [67]. Katalaas on üks olulisemaid ensüüme, mis on seotud ROS-i detoksikatsiooniga, mille düsregulatsioon põhjustab paljusid vanusega seotud degeneratiivseid haigusi [68, 69].cistanche pulberOn hästi teada, et katalaasi puudulikkus on seotud peroksisomaalse düsfunktsiooni tõttu kiirenenud diabeetilise neerukahjustusega [70], mõjutades seega bioloogilisi protsesse, sealhulgas rakkude proliferatsiooni, diferentseerumist, migratsiooni ja apoptoosi [71]. Käesolevas artiklis näitame, et punase ja valge veini ekstraktid on erinevates kontsentratsioonides võimelised neutraliseerima oksüdatiivse stressi põhjustatud rakkude vananemist, moduleerides katalaasi, peamise oksüdatiivse stressi reguleerimises osaleva ensüümi aktiivsust (joonis 4) ja -galaktosidaas (joonis 5). Meie tulemused näitavad, et veiniekstraktid on võimelised neutraliseerima ROS-i akumulatsiooni, suurendades katalaasi aktiivsust pärast H-O2-töötlust, hoides seega ära kroonilisi nahahaigusi ja vähendades vananevate rakkude arvu. Kokkuvõttes näitavad meie tulemused, et need vaakumaurustamisega saadud veiniekstraktid võivad seega olla huvitav tooraine uute kosmeetikatoodete valmistamiseks, et võidelda naha vananemise vastu. Täiendavad in vitro ja in vivo uuringud ka üksikute ühendite kohta võivad olla abiks nende tulemuste ülekandmisel tulevastes kudede regenereerimise rakendustes.

5. Kokkuvõtted

Naha vananemine on dünaamiline ja multifaktoriaalne protsess, mille indutseerib UV-kiirgus ja sellega seotud reaktiivsete hapnikuühendite moodustumine. Ainsad teadaolevad kaitsevahendid fotovananemise vastu on päikesefiltrid ja antioksüdandid, eriti kombineerituna, et vähendada ja neutraliseerida vabade radikaalide tootmist. Käesolevas artiklis keskendusime veiniekstraktide antioksüdantsele potentsiaalile, mille flavonoidid on võimelised takistama vananemist, eriti kui neid kasutatakse rakkudele, mis puutuvad kokku märkimisväärse stressirohke sündmusega. Tänu uudsele ekstraheerimisprotseduurile eemaldasime alkoholifraktsiooni, muutmata kvalitatiivselt flavonoidide antioksüdante. Majanduslikust aspektist on selge, et vein on kallim kui mitu kõrvalsaadust. Teatavasti kasutab kosmeetikatööstus ka mitut veinist kallimat toorainet. Punase ja valge veini ekstraktid võivad seega olla huvitav tooraine uute kosmeetikatoodete valmistamiseks, et võidelda naha vananemise vastu, parandades kudede taastumist.

See artikkel on välja võetud ajakirjast Antioxidants 2021, 10, 227. https://doi.org/10.3390/antiox10020227 https://www.mdpi.com/journal/antioxidants