Lanostaani triterpenoidid Poria Cocos mängivad kasulikku rolli immunoregulatoorses tegevuses

Palun võtke ühendustoscar.xiao@wecistanche.comrohkem informatsiooni

Abstraktne:Poria cocos (Schwein) FA Wolf (syn. Wolfiporia cocos) kuivatatud sklerootium, mida nimetatakse voltimiseks, on söödav saprofüütne seen, mida tavaliselt kasutatakse tooniku ja vananemisvastase traditsioonilise Hiina meditsiinina. Immuunsuse suurendamiseks kasutatakse seda traditsiooniliselt koos teiste traditsiooniliste Hiina ravimitega. See uuring näitas, et lanostaantriterpenoide sisaldaval P. cocos ekstraktil (Lipucan⑨) puudub immunotoksilisus ja see suurendab mittespetsiifilist (kaasasündinud) immuunsust, aktiveerides looduslikke tapjarakke ja soodustades interferooni (IFN-y) sekretsiooni 1. tüüpi T-abistaja (Th1) rakkude poolt. immuunvastus. Lisaks vähendas P. cocos ekstrakt oluliselt interleukiini (IL-4 ja IL-5) sekretsiooni 2. tüüpi T-abistaja (Th2) rakkude immuunvastuse tõttu, mis on seotud allergiavastusega. Esialgses uuringus tuvastati puhastatud lanostaantriterpenoidid kui tugevdatud mittespetsiifilise immuunsusega P. cocos'i toimeained, soodustades interferooni (IFN-) sekretsiooni. Meie tulemused kinnitavad, et P. cocos ekstrakt mängib kasulikku rolli immunoregulatoorses aktiivsuses.

Märksõnad:Poria kookos; lanostaantriterpenoidid; immunotoksilisus; Th1/Th2: immunoregulatsioon

1. Sissejuhatus

Viirusnakkused, nagu hingamisteede viirused (sealhulgas gripiviirus, rinoviirus, adenoviirus ja koroonaviirus), herpes ja inimese immuunpuudulikkuse viirus (HIV) ohustavad tõsiselt inimeste tervist. Need väga nakkavad hingamisteede viirused nakatavad maailma elanikkonda, muutuvad pandeemiaks ja põhjustavad palju surmajuhtumeid. See oht on muutunud isiklikuks terviseprobleemiks ning ka rahvusvahelisteks majandus-, ohutus- ja sotsiaalseteks probleemideks [1]. Vaktsineerimine on praegu peamine vahend gripiviiruse nakkuste leviku tõkestamiseks. Viiruse kurikuulsa muteerumisvõime tõttu tuleb aga igal aastal välja töötada uued vaktsiinid. Kiiresti on vaja välja töötada tõhusad viirusevastased ravimid või ravimeetodid. Kahjuks on uute ravimite väljatöötamiseks vaja palju aastaid ja sadu miljoneid dollareid, sageli liiga hilja, et ootamatu viiruseepideemiaga võidelda. Hiljutised aruanded näitasid, et üle 50-aastased inimesed on peamiselt nakatunud hingamisteede viirustesse [2,3]. Vananemine on üks põhjus, mis on tihedalt seotud immuunsüsteemi defektidega, sealhulgas rakkude funktsiooni ja arvuga [4-6]. Enesehooldus on oluline lähenemisviis, mida enamikus riikides kasutatakse isiklike ravikulude ja sotsiaaltervishoiu koormuse vähendamiseks |7,8]. Immuunsuse tugevdajate väljatöötamine, et suurendada peremeesorganismi vastupanuvõimet viirusnakkuse suhtes ja parandada peremeesorganismi kohanemisvõimet, on oluline lähenemisviis, millele on viimasel ajal palju tähelepanu pööratud [9, 10].

Inimkeha esimene kaitseliin patogeenide vastu hõlmab füsioloogilisi barjääre, nagu nahk, nahaalune kude ja limaskest. Teine kaitseliin on immuunsüsteem, mis koosneb immuunorganitest, immuunrakkudest ja immuunmolekulidest. Immuunsüsteem jaguneb kaasasündinud immuunsuseks ja adaptiivseks immuunsuseks [11]. Kaasasündinud immuunsüsteem on mittespetsiifiline immuunsüsteem. Ta suudab eristada ennast ja mitte-ise ilma korduva kokkupuuteta patogeenidega, nagu bakterid ja viirused. Oma mittespetsiifiliste omaduste tõttu on sellel laialdane võime võidelda mitmete infektsioonidega [12]. Looduslikud tapjarakud (NK) ja interferoon (IFN) on kaasasündinud immuunsüsteemi peamised viirusevastased komponendid peremeesorganismi kaitseks hingamisteede viirusnakkuste vastu [13]. NK-rakkudel on võime viirustega nakatunud rakke kiiresti tappa. Lisaks käivitavad NK-rakud ka muud immuunrakud, 1. tüüpi T-abistaja (Th1) rakud, vabastades IFN-【14,15】. Interferoonidel on võime häirida viiruse replikatsiooni ja neid saab jagada kolme tüüpi, sealhulgas interferoonid I (IFN-, IFN-). , II （IFN-y） ja ⅢI （IFN-λ）【16,17】. Viiruse replikatsioon on viiruse elu oluline põhietapp. Rakud mängivad olulist rolli viirusinfektsiooni eest kaitsmisel [18]. 2. tüüpi T-abistaja (Th2) rakud sekreteerivad peamiselt interleukiine (IL-e), sealhulgas IL-4 ja IL-5, ning soodustavad B-rakkude sekretsiooni immunoglobuliini E(IgE) antikehi, et edendada humoraalset immuunsust ja tekitada allergilist reaktsiooni [19].

Lisateabe saamiseks klõpsake siin

Viilimist (Poria cocos(Schwein.)FAWolf(syn. Wolfiporia cocos) kuivatatud sklerootium), tuntud toonik ja vananemisvastane traditsiooniline hiina meditsiin, on rahusti ja diureetikumina laialdaselt kasutatud rohkem kui kaks tuhat aastat. 20]. On näidatud, et P. cocosil on põletikuvastane, kasvajavastane, hüperglükeemiline, rahustav ja vananemisvastane toime, mille aktiivseteks komponentideks on lanostaantriterpenoidid [21-30]. Lisaks on näidatud, et P. cocos'e etüülatsetaadi fraktsioon ja toorpolüsahhariidi fraktsioon suurendavad immuunsust loommudelites, mis põhinevad seerumi hemolüüsisisalduse testil, mononukleaarsete makrofaagide fagotsüütilisel toimel ja lümfotsüütide transformatsiooni tasemel. Lanostaani triterpenoide peeti HPLC analüüsi kohaselt etüülatsetaadi fraktsiooni peamisteks komponentideks [31]. Siiski on endiselt ebaselge, kas kaasasündinud ja adaptiivne immuunsus mõjutab NK-rakkude aktiivsust, IFN-i, immuunrakke või P.cocos'e tsütokiine ja aktiivsete ühendite selginemist. Selles uuringus uuriti loommudelite abil patenteeritud lanostaani triterpenoidisisaldusega toote P. cocos ekstraktide immuunsüsteemi toimet. Esmalt tuvastati aktiivsed komponendid.

Cistanche on vananemisvastane toime

2. Materjalid ja meetodid

2.1.Taimsed materjalid

P. cocos (Schwein.) FAWolfi kuivatatud selerootium ekstraheeriti 75% etanooliga, et saada P. cocos ekstrakt (Lipucan). Seda ekstrakti toodab Sinphar Tian-Li Pharmaceutical Co., Ltd., Hangzhou Sinphar Group, Hiina ja selle on välja töötanud Taiwani Sinphari uurimis- ja arenduskeskus. Ekstrakt sisaldab nelja peamist lanostaani triterpenoidi (joonis 1, ühendid 1-4), mida analüüsiti üliefektiivse vedelikkromatograafia (UPLC) abil [32]. Nelja peamise lanostaani triterpenoidi sisaldus oli 6,2 protsenti. Immunoregulatoorsele aktiivsusele avalduva mõju uurimiseks kasutati kaubanduslikku kapslit (FL), mis sisaldab 27.0 mg P. cocos ekstrakti.

2.2. Lanostaantriterpenoidide eraldamine ja puhastamine P. cocos'st

Kuivatatud P.cocos (10 kg) ekstraheeriti kolm korda püstjahutiga 75% etanooliga 3 tundi [24]. Kontsentreeritud ekstrakt kromatografeeriti silikageelil (70-230 mesh), kasutades järjest polaarsemaid CH2Cl ja MeOH (CH2Cl:MeOH, 97:3; CH2Cl2:MeOH, 96:4; CH2Cl:MeOH, 90:10) segusid. ja 100 protsenti MeOH). Õhukese kihi kromatograafia (TLC) kohaselt koguti edasiseks eraldamiseks neli fraktsiooni (Fr.{18}}Fr.4). Fr.{20}}Fr.3 allutati preparatiivsele kõrgjõudlusega vedelikkromatograafiale (HPLC) (Waters Prep 150 LCsystem, Milford, MA, USA) Waters XBridge RP-18kolonnis (250 mm×). 19 mm, 5 um, Milford, MA, USA), kasutades liikuva faasi süsteemina 80% metanooli. Voolukiirus oli 18 ml/min. Valikuliselt koguti neli peamist huvipakkuvat tippu. Sihtühendeid sisaldavad fraktsioonid kondenseeriti edasi kuivaks ja saadi tumulooshape (1) (120,1 mg), polüfoonhape C (2) (16,0 mg), 3-epi-dehüdrotumulooshape (3) (12,1 mg). ja dehüdrotumulooshapet (4) (6,8 mg). Nende struktuure selgitati NMR (tuumamagnetresonants) spektroskoopia analüüsi ja elektropihustusionisatsiooni massispektromeetri (ESI-MS) abil ning võrdlemisel kirjanduse andmetega [32].

2.3. Lanostaani triterpenoidsete ühendite (1-3) esialgne loomuuring IFN-r analüüsi uuringu jaoks

Selle uuringu jaoks valmistati puhastatud lanostaani triterpenoidsed ühendid, sealhulgas tumulooshape (1), polüfoonhape C (2) ja 3-epidehüdrotumulooshape (3), kasutades eeluuringut BALB/c (hiire tüvi) albiinohiirtest) isased hiired. Pärast 4-päevast ühendite 1-3 ja steriilse destilleeritud vee (kontrollrühm) (1 ml/hiire) suukaudset manustamist hiired surmati viiendal päeval ja põrnarakud koguti. Värske põrn kanti kultiveerimisplaadile, mis sisaldas 10 ml Roswell Park Memorial Institute (RPMI){8}} söödet. Seejärel jahvatati põrn üle peene võrgu, et vabastada põrnarakud. Söötmes suspendeeritud põrnarakud viidi seejärel 50 ml koonilisse tsentrifuugitorusse ja tsentrifuugiti kiirusel 1300 p/min 10 minutit. Supernatant visati ära ja pellet resuspendeeriti 1 ml külma punaliblede (RBC) lüüsipuhvris, mis sisaldas EDTA-NH4Cl. Rakke inkubeeriti toatemperatuuril 10 minutit ja seejärel pesti kolm korda söötmega tsentrifuugimise teel. Põrnarakkude suspensiooni kultiveeriti seejärel 24-süvendiplaadil tihedusega 1 × 10 kraadi rakke/ml söötmes, mis sisaldas RPMl 1640, millele oli lisatud 10 protsenti veise loote seerumit (FBS), 2 mM L-glutamiini, antibiootikumid ja 1 ug/ml koncanavaliin A (ConA) 37 kraadi juures 3 päeva. Kultuuri põrnarakkude supernatandid koguti. IFN-i kontsentratsioone mõõdeti ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi (ELISA) komplektiga (R&D Systems, Minneapolis, MN, USA).

2.4.Loomamudel ja katseplaan

Emased BALB/c hiired osteti riiklikust Taiwani ülikooli loomakeskusest. Loomi on hoitud individuaalselt ventileeritavates puurides, mille temperatuur on 22 ± 2 kraadi ja mille temperatuur ja niiskus on 40-60 protsenti, valguse/pimeduse tsükliga 12 h/12 ​​h ning vaba juurdepääs toidule ja veele. Pärast ühenädalast aklimatiseerumist rühmitati hiired juhuslikult kehakaalu järgi ja neid kasutati katseteks. Neli erinevat annust, 26 mg/kg (FL200), 52 mg/kg (FL400), 104 mg/kg (FL800), 156 mg/kg (FL1200), lahustati vastavalt steriilses destilleeritud. vett (0,4 ml) ja suukaudselt viiel järjestikusel päeval nädalas 9 nädala jooksul. Kontrollrühma toideti steriilse destilleeritud veega (0,4 ml). Hiirtele süstiti kolmandal, viiendal ja seitsmendal nädalal intraperitoneaalselt ovalbumiini (OVA) spetsiifilist antigeeni. OVA on kanamunavalgeallergeen, mida leidub peamiselt munavalges. Seda kasutatakse tavaliselt allergia esilekutsumiseks katseloomade mudelites. Põrnarakud koguti edasiseks uurimiseks. Hiired surmati pärast 9-nädalast katsetamist süsinikdioksiidi eutanaasia abil. Selle uuringu heakskiidunumber institutsionaalse loomade hooldamise ja kasutamise komitee (IACUC) poolt on A9647.

2.5. Põrnaproovide kogu

Koguti põrn, tumepunane piklik organ hiirte kõhu ülemises vasakus servas. Pärast sidekoe ettevaatlikku eemaldamist väikeste kääride ja tangidega pandi põrnad rakukultuuri söötmesse (RPMI 1640 sööde 10% veise loote seerumiga (HyClone)). Pärast kaalumist jahvatati põrnaproovid puhta ja steriilse 5 ml süstlatõukuriga. Põrnarakkude suspensioon aspireeriti uude 15 ml tsentrifuugi tuubi koos 3 ml steriilse ühepakendilise plasttilgutiga. Suspendeeritud rakud koguti pärast 5-minutilist sadestamist. Suspendeeritud rakke tsentrifuugiti kiirusel 1500 p/min 7 minutit ja supernatant visati ära, et saada rakualused. Seejärel lisati punaste vereliblede eemaldamiseks 1 minutiks 1 ml RBC lüüsipuhvrit. Kultuurisöötmele lisati kiiresti üheksa ml 10% veiseloote seerumit, tsentrifuugimisetappi korrati ja supernatant visati ära. RBClüüsi puhvrist põhjustatud põrnarakkude terviklikkuse kahjustamise vältimiseks pesti proovi kolm korda Hanki tasakaalustatud soolalahuse (HBSS) puhverlahusega. Seejärel suspendeeriti põrnarakud analüüsiks ja katseteks 10-protsendilise veise loote seerumi söötmega.

2.6. Mittespetsiifiline immuunvastus

2.6.1.Põrnarakkude pinnamarkeri analüüs

Immuunrakkude analüüs viidi läbi, kasutades fluorestseeruvaid monoklonaalseid antikehi, mis seonduvad spetsiifiliselt erinevat tüüpi immuunrakkudega, kasutades fluorestseeruvat voolutsütomeetrit. Voolutsütomeetriat (Epics XL-MCL Beckman Coulter, Brea, CA, USA) kasutatakse konkreetse immuunraku osakaalu arvutamiseks, nagu peamised I tüüpi histo-ühilduvuskompleksid (MHC I), CD4 pluss T-rakk, CD8 pluss T-rakk, NK-rakud ja makrofaagid.

2.6.2. Looduslike tapjarakkude aktiivsuse analüüs

Selles katses kasutati NK-rakkude sihtmärgina YAC-1 (NK-rakkude aktiivsuse suhtes tundlik rakuliin) hiire lümfoomi rakuliini (ATCC). Kui BALB/c emaste hiirte põrnarakke kasvatati koos YAC-1 rakkudega samas tassis, tapavad looduslikud tapjarakud YAC-1 rakud. Pärast 3-tunnist tsütotoksilisuse reaktsiooni värviti tapetud YAC{5}} rakud värvainega (LIVE/DEAD Cell-Mediated Cytotoxicity Kit, Molecular Probes, L-7010). Seetõttu kasutati voolutsütomeetriat fluorestsentsi intensiivsuse tuvastamiseks ja analüüsimiseks, kasutades tarkvara WinMDI 2.8 (Purdue University Cytometry Laboratories, West Lafayette, IN, USA). Efektorraku (E) ja sihtraku (T) suhe on 100:1 ja 200:1 (efektorrakk on põrnarakud ja sihtrakk on YAC-1 rakud).

2.6.3. Tsütokiinide sekretsioon põrnarakkude analüüsi abil

Pärast põrnarakkude stimuleerimist ConA-ga (kontsentratsioon 2,5 ug/mL) 48 tundi koguti rakukultuuri supernatant ja säilitati -20 kraadi juures tsütokiinide analüüsiks, kasutades OptEIA hiire IL-5 ELISA komplekti. Pharmigen, 555236, Franklin Lake, NJ, USA) ja DouSeti hiire IFN-ELISA komplekti (R&D Systems, DY485, Minneapolis, MN, USA). Kattepuhver (pH: 9,6) valmistati nii, et see sisaldaks sobivas koguses hiirte tsütokiinivastaseid antikehi (L-5 ja IFN-y) 96-süvendiplaadil (Nunc-Immuno plaat, MaxiSorp, Thermo Teaduslik, Roskilde, Taani). Pärast üleöö 4C juures seismist loputati seondumata antikehad fosfaatpuhverdatud soolalahusega Tween20 (PBST) puhvriga ja seejärel lisati 200 µl/süvend blokeerivat puhvrit (1% BSA PBS-is). Pärast 2 tundi toatemperatuuril loputati proovi PBST puhvriga ja proovile lisati 100 µl/süvend rakukultuuri supernatanti või rekombinantset tsütokiini standardit. Pärast 4-kraadist üleöö hoidmist loputati proovi PBST puhvriga. Seejärel lisati sobivas kontsentratsioonis seotud biotiini (biotiini) tsütokiinivastast sekundaarset antikeha (100 uL süvendi kohta). Pärast 2 tundi toatemperatuuril loputati proovi PBST puhvriga. Seejärel lisati avidiin-peroksidaas (100 µl süvendi kohta) (Sigma, St. Louis, MO, USA). Pärast 1-tunnist seismist toatemperatuuril lisati 5-minutiliseks värvireaktsiooniks tetrametüülbensidiini (TMB) (R&D Systems, Minneapolis, MN, USA) substraati ja seejärel lisati värvusreaktsiooni peatamiseks 50 µl 2,5% H2SO4. Neeldumist mõõdeti 450 nm juures.

2.7. Ovalbumiini (OVA) indutseeritud hiirte spetsiifiline immuunvastus

Emastele BALB/c hiirtele süstiti intraperitoneaalselt antigeenina OVA-d ja adjuvandina CFA-d (Freundi täielik adjuvant). Põrnarakkude kultiveerimistingimused olid samad, mis eespool. Tsütokiine (L-4) analüüsiti ELISA abil.

2.8.Statistilised analüüsid

Andmed esitati keskmisena (SD) ja analüüsiti ühesuunalise ANOVA abil. Väärtused loeti statistiliselt olulisteks p<0.05. dunnett's="" test="" was="" used="" to="" identify="" the="" differences="" between="">

3. Tulemused

3.1. P.cocos'e nelja lanostaani triterpenoidi ühendi 1-4 isoleerimine ja identifitseerimine

Kuivatatud P.Vananemisvastane cistanchecocos (10 kg) ekstraheeriti kolm korda püstjahutiga 75% etanooliga 3 tundi. Kontsentreeritud ekstrakt kromatografeeriti silikageelil ja C18 kolonnis, et saada neli peamist lanostaani triterpenoidühendit: tumulooshape (1), polüfoonhape C (2), 3-epi-dehüdrotumulooshape (3) ja dehüdrotumulooshape (4). ), vastavalt (joonis 1). Nende struktuure selgitati NMR-spektroskoopia (tabel S1) ja ESI-MS analüüsiga (joonised S2, S4, S6 ja S8) ning võrdlusi kirjanduse andmetega [32,33]. 1-4 UPLC kromatogrammid on näidatud joonistel S1, S3, S5 ja S7.

3.2. Lanostane triterpenoidsete ühendite esialgne uuring BALB/c isastel hiirtel 1-3

Lanostaani triterpenoidühenditega (1-3) töödeldud hiirtelt eraldatud põrnarakke kultiveeriti viis päeva ühe raku juuresolekul. Mõõdeti põrna T-lümfotsüütide poolt sekreteeritud IFN-y kogus. Pärast seda, kui hiirtele toideti 2,5 mg/kg/päevas või suuremas annuses ühendit 1,5 ja 10 mg/kg/päevas vastavalt 2-st ja 20 mg/kg/päevas 3-st, eritati ConA poolt sekreteeritud IFN-y. -stimuleeritud põrna T-rakud suurenesid oluliselt (tabelid 1 ja 2). Esialgne uuring näitab, et lanostaan ​​1-3 suurendas IFN-y sekretsiooni ConA poolt stimuleeritud põrnarakkude poolt.

3.3. Ohutuse hinnang P. cocos ekstrakti loomkatsetest

Tabelid 3 ja 4 näitavad, et P. cocos ekstrakt ei mõjutanud kehakaalu ega põrna kaalu.cistanche benefíciosTabelis 5 on samuti näidatud, et immuunrakkudel, nagu kogu T-rakud, kogu B-rakud, MHC II (II tüüpi peamine histo-ühilduvuskompleks, CD4 pluss T-rakud, CD8 pluss T-rakud, NK-rakud ja makrofaagid P. cocos ekstrakti rühmas olulist erinevust kontrollrühmaga võrreldes ei ole Ülaltoodud tulemuste põhjal tuleks hinnata, et P. cocos ekstraktiga söötmise katse ajal ei tohiks tekkida immunotoksilisuse ohtu.

3.4. Mittespetsiifilise immuunvastuse hindamine

Loodustapjarakud (NK-rakud) mängivad mittespetsiifilises immuunsuses keskset rolli. Tabel 6 näitab, et FL400 rühm kutsus oluliselt esile NK-rakkude aktiivsuse suurenemise võrreldes FL200 rühmaga. See on tendents P.cocos ekstrakti NK-rakkude aktiivsuse suurenemisele. Tsütokiinid on kemikaalid, sealhulgas interleukiinid (IL) ja interferoon (IFN), mis reguleerivad immuunvastust või rakkude kasvu 【34】. Analüüsisime IFN- (Th1 immuunvastuse) ConA ja LPS-indutseeritud põrnarakkude kontsentratsiooni ning FL200, FL400, FL800-ga töödeldud hiirtelt eraldatud ConA-indutseeritud põrnarakkude IL-5 (Th2 immuunvastus) kontsentratsiooni, ja FL1200 (tabelid 7 ja 8). FL800 ja FL1200 rühmad stimuleerisid märkimisväärselt IFN-y tootmist hiirte põrnarakkudes ConA juuresolekul (tabel 7). Tabel 7 näitab ka, et FL200, FL400, FL800 ja FL1200-ga ravitud hiirtelt eraldatud IL-5 hiirte põrnarakkude kontsentratsioonil oli annusest sõltuval viisil oluliselt vähenenud toime. Lisaks stimuleerisid rühmad FL400, FL800 ja FL1200 oluliselt ka IFN-i tootmist hiirte põrnarakkudes LPS-i juuresolekul (tabel 8).

4. Arutelu

Inimese immuunsüsteem vastutab välismaiste patogeenide vastu võitlemise eest, et kaitsta tervist.puritaanid c-vitamiinEbapiisav immuunsus muudab organismi tavaliselt vastuvõtlikuks infektsioonidele ja nõuab seetõttu piisavat immuunsust, kuid see nõuab ka rangeid regulatsioonimehhanisme, et vältida liigseid kaaskahjustusi. Immuunsüsteemi tasakaalu säilitamine on immuunsüsteemi kõige olulisem ülesanne[35]. Paljud tõendid näitavad, et immuuntasakaal on tugevas korrelatsioonis Th1/Th2 raku vastusega36,37]. Stress ja vananemine võivad põhjustada Th1/Th2 tasakaalu kaotamise ja Th2 poole kaldumise, mis võib põhjustada infektsioone ja allergilisi haigusi [38-40]. Seda tõhusa tasakaalu immuunsuse otsimist on hädasti vaja. Lisaks on rõõmustav, et aastakümnete jooksul kogutud teadusuuringutest inimese immuunsüsteemi ja selle nakkushaigustele reageerimise kohta kogutud teadmised aitavad anda teavet terapeutiliste uuringute ja arendustegevuse kohta ning omavad ka viiruspuhangute leviku ennetusstrateegiaid [41] , A42]. Paljud varasemad P. cocos'e farmakoloogilise uuringu uuringud on kallutatud P. cocos'e valgu [43,44] või polüsahhariidide [45,46] poole. P. cocos'e lanostaantriterpenoidide tõhususe kohta on tehtud mitmeid uuringuid, näiteks hüpoglükeemia [25], vähivastane [24] ja rahustav funktsioon [28].mis on cistancheVarasemad uuringud on näidanud, et P. cocos'e etüülatsetaadi fraktsioon sisaldab põhikomponenti triterpenoide ja sellel on immuunsust tugevdav toime 31 Siiski ei ole avaldatud täiendavaid põhjalikke järeluuringuid. Meie uuringus hinnati P. cocos'e immuunsuse funktsiooni hästi väljakujunenud hiirte mudelis, mis hõlmas puhastatud lanostaani triterpenoidühendi eeluuringut. Selles uuringus näitasime, et P.cocos ekstraktil (Lipucan), mis sisaldab 6,2 protsenti neljast lanostaani triterpenoidist, on immunoregulatoorses aktiivsuses palju kasulikke rolle.

Eelnev uurimine teatas, et inimese CD4 pluss T-abistaja (Th) rakud, sealhulgas Th1 ja Th2 alamhulgad, on määratletud nende sekreteeritavate tsütokiinide järgi [36]. Th1 rakud sekreteerivad peamiselt IFN-; Th2 rakud toodavad IL-4, IL-5, indutseerivad antikehade tootmist ja põhjustavad allergilisi reaktsioone, suurendades B-rakkude IgE tootmist ning soodustades nuumrakkude kasvu ja eosinofiilide diferentseerumist. On hästi teada, et NK-rakud ja IFN mängivad olulist rolli immuunkaitses viirusnakkuste vastu. Kaasasündinud immuunsüsteem on väga oluline, et kaitsta viiruste eest, mis algselt kehasse tungisid, ja aktiveerida järgneva adaptiivse immuunsuse. NK-rakud klassifitseeritakse mittespetsiifiliseks (kaasasündinud) immuunsuseks, mis vastutab viirusega nakatunud rakkude tapmise eest【14】. IFN - pärsib viiruse elutsüklit ja takistab viiruse replikatsiooni. IFN reguleerib ka immuunvastust, aktiveerides mittespetsiifilist rakuvahendatud immuunsust ja stimuleerides spetsiifilist immuunsust [17]. Esialgse loomkatse põhjal stimuleerivad P. cocose ekstrakti peamised lanostaani triterpenoidsed ühendid, tumulooshape (1), polüfoonhape C (2) ja 3-epi-dehüdrotumulooshape (3) märkimisväärselt IFN-i sekretsiooni põrnarakkude poolt. Aktiivse Poria kookose ekstrakti komponendi kinnitus selles eeluuringus on toote kvaliteedikontrolli ning edasiste biosaadavuse ja mehhanismide uuringute jaoks väga oluline. Lisaks näitasime selles uuringus, et P. cocos ekstrakt stimuleerib oluliselt NK-rakkude aktiivsust ja IFN-sekretsiooni, millel puuduvad immunotoksilised omadused. Need tulemused näitasid P. cocos'e ekstrakti ja peamiste lanostaani triterpenoidide 1-3 olulist stimuleerivat toimet immuunvastusele.

Lisaks näitasid meie leiud, et P. cocos'e ekstrakt pärssis Th2 immuunvastust olulise IL-5 inhibeerimisega (tabel 7) mittespetsiifilises immuunvastuse mudelis ja olulise IL-4 (tabel 9) inhibeerimisega. OVA-indutseeritud spetsiifilise immuunvastuse mudelis. IL-4 ja IL-5 põhjustavad allergilise reaktsiooni.sistancheAllergia, mida nimetatakse ka allergilisteks haigusteks, on põhjustatud immuunsüsteemi ülitundlikkusest keskkonnas leiduvate ainete suhtes, näiteks allergiline astma. Patsiendi immuunvastus kaldub Th2-le. Kui Th1/Th2 organismis on tasakaalus, peaks see allergia sümptomeid parandama. See uuring tõestas, et P. cocos ekstrakt suudab reguleerida Th1/Th2 immuunvastust, võib vähendada allergiliste haiguste esinemist ja sellest võib kujuneda allergiavastase haiguse potentsiaalne kandidaat.

5. Kokkuvõtted

See uuring on esimene, mis demonstreerib lanostaani triterpenoide sisaldava P. cocos ekstrakti toime mittespetsiifilist ja spetsiifilist immuunsuse reguleerimist hiirtel. Need immuunvastused hõlmavad NK-rakkude aktiveerimist, IFN-i sekretsiooni suurenemist ning IL-4 ja IL-5 vähenemist. Meie tulemused kinnitavad, et P. cocos'e ekstrakt, mis ei ole toidule lisatud või mida kasutatakse eraldi, mängib kasulikku immunoregulatoorset rolli immuunpuudulikkuse parandamisel ning infektsiooni- ja allergiavastuste ennetamise võime parandamisel. See on esimene kinnitus, et lanostaantriterpenoidid on tõhusad koostisosad ja neid saab kasutada kvaliteedikontrolli koostisosadena, et säilitada P. cocos ekstrakti efektiivsuse konsistents.

See artikkel on välja võetud ajakirjast Life 2021, 11, 111. https://doi.org/10.3390/life11020111 https://www.mdpi.com/journal/life