Katepsiini B sihtimine tsükloastragenooliga suurendab CD8 T-rakkude kasvajavastast immuunsust MHC-I lagunemise inhibeerimise kaudu, 2. osa

CAG inhibeerib CTSB-vahendatud MHC-I lüsosomaalset lagunemist

Tistanche glükosiid võib samuti suurendada SOD aktiivsust südame- ja maksakudedes ning oluliselt vähendada lipofustsiini ja MDA sisaldust igas koes, eemaldades tõhusalt erinevaid reaktiivseid hapnikuradikaale (OH-, H2O₂ jne) ja kaitstes tekitatud DNA kahjustuste eest. OH-radikaalide poolt. Tsistanche fenüületanoidglükosiididel on tugev vabade radikaalide eemaldamisvõime, suurem redutseerimisvõime kui C-vitamiinil, nad parandavad SOD aktiivsust sperma suspensioonis, vähendavad MDA sisaldust ja omavad teatud kaitset sperma membraani funktsioonile. Tsistanche polüsahhariidid võivad suurendada SOD ja GSH-Px aktiivsust D-galaktoosi poolt põhjustatud eksperimentaalselt vananevate hiirte erütrotsüütides ja kopsukudedes, samuti vähendada MDA ja kollageeni sisaldust kopsudes ja plasmas ning suurendada elastiini sisaldust. hea puhastav toime DPPH-le, pikendab hüpoksia aega vananevatel hiirtel, parandab SOD aktiivsust seerumis ja aeglustab eksperimentaalselt vananevatel hiirtel kopsude füsioloogilist degeneratsiooni Raku morfoloogilise degeneratsiooniga on katsed näidanud, et Cistanche'il on hea antioksüdantne võime ja sellel on potentsiaal olla ravim naha vananemishaiguste ennetamiseks ja raviks. Samal ajal on Cistanche ehhinakosiidil märkimisväärne võime eemaldada DPPH vabu radikaale ja see suudab eemaldada reaktiivseid hapniku liike ja takistada vabade radikaalide poolt indutseeritud kollageeni lagunemist, samuti on sellel hea parandav toime tümiini vabade radikaalide anioonide kahjustustele.

Klõpsake maca ginseng cistanche merehobust

【Lisateabe saamiseks:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】

Varasemad uuringud on näidanud, et MHC-I laguneb peamiselt lüsosoomides kasvaja progresseerumise ajal, mis viib kasvaja immuunsüsteemi põgenemiseni.12 13 Spekuleerime, kas CAG suudab oma sihtvalgu CTSB kaudu reguleerida ka MHC-I ekspressiooni rakumembraanil. . Esmalt kasutasime RNA interferentsi, et vähendada CTSB ekspressiooni MC38 rakuliinis ja tulemused näitasid, et H2-k1 geeni- ja valguekspressioonitasemed tõusid pärast CTSB vaigistamist (joonis 5A, B). Sarnaselt suurenes pärast CTSB katkestamist ja üleekspressiooni inimese HCT-116 rakuliinis HLA-A mRNA või valgu ekspressioonitase (joonis 5C, D) ja langes (joonis 5E, F). Samal ajal leidsime, et CTSB kõrge ekspressiooniga kasvajarakud ekspresseerisid madalamat HLA-A taset, samas kui rakud pärast CTSB knockdowni suurendasid HLA-A ekspressiooni (joonis 5G). Need tulemused näitavad, et CTSB avaldab negatiivset regulatiivset mõju MHC-I ekspressioonile. Seejärel ravisime MC38 rakuliini CAG-ga ja leidsime, et CAG soodustas MHC-I ekspressiooni ega avaldanud mingit mõju CTSB-le (joonis 5H, I), mis oli kooskõlas kasvaja kudede varasemate uuringute tulemustega. Lisaks avastasime, et pärast CAG-ravi kogunes H2-Kd rakust selle membraanile (joonis 5J), mis kinnitas veelgi meie oletust, et CAG võib pärssida MHC-I molekuli lagunemist ja panna selle kogunema rakumembraan, mida immuunrakkudel on kergem kinni püüda. Oma hüpoteesi täiendavaks kinnitamiseks kasutasime Co-IP katset, et uurida, kas CTSB seondub MHC-I-ga ja viib selle lagunemiseni. Leidsime, et CAG võib inhibeerida CTSB ja MHC seondumist hiire MC38 rakkudes (joonis 5K) ning MHC-I ekspressioon suureneb samuti oluliselt. Sama nähtust täheldasime ka inimese HCT116 rakkudes (joonis 5L). Järgmiseks, et täiendavalt kinnitada, kas CAG soodustab MHC-I ekspressiooni ja rakumembraanide agregatsiooni CTSB kaudu, transfekteerisime CTSB mutantse plasmiidi inimese HCT-116 rakkudesse. Tulemused näitasid, et pärast Y75A, A77V ja G198V mutantsete plasmiidide transfekteerimist hävis CAG funktsioon CD74 ja HLA-A geeniekspressiooni suurendamisel (joonis 5M) ja MHC-I molekulid agregeerusid rakumembraanilt lüsosoomidesse (joonis 5N). See tulemus näitas, et CAG inhibeeris CTSB vahendatud MHC-I lagunemist lüsosoomides ja soodustas MHC-I reagregatsiooni rakumembraanile.

CAG ja PD{0}} antikeha kombinatsioon suurendab tõhusalt CD8 pluss T-rakkude kasvajat tapavat võimet

Kasvaja immuunsüsteemi põgenemise põhjuseks on peamiselt kasvajaraku antigeeni esitlusfunktsiooni kadumine ja immuunsüsteemi kontrollpunktide pärssimine. Vastavalt meie tulemustele spekuleerisime, kas CAG-i saab kasutada koos PD-1 antikehaga kasvajate hävitamiseks, nii kasvaja antigeeni esitluse puuduste kõrvaldamiseks kui ka PD-st põhjustatud CD8 pluss T-rakkude ammendumise lahendamiseks. {2}}/ PD-L1 rada. Seega siirdasime MC38 vähirakud C57BL/6 hiirtele ja moodustasime PD-1 antikeha ja CAG kombineeritud rühma. Tulemused näitasid, et CAG ja PD-1 antikehade kombineeritud rühmal oli parem kasvajavastane toime kui CAG ja PD-1 rühmadel (joonis 6A–D). Lisaks täheldasime kasvajakudedes infiltreerunud H2-Kd pluss rakkude, CD45 pluss rakkude ja CD8 pluss rakkude arvu olulist suurenemist (joonis 6E–G) ning antigeeni esitlusega seotud geenide ekspressiooni. Samuti täiustati H2-K1, Psmb8 ja B2m (joonis 6H–J). Samal ajal paranes oluliselt ka Ifng ja Tnf geenide ekspressioon (joonis 6K, L) ja immunohistokeemiline värvimine näitas, et H2- Kd ekspressioon suurenes oluliselt (joonis 6M).

Seetõttu selgitas see uuring peamiselt CAG kasvajavastast mehhanismi, peamiselt inhibeerides CTSB poolt vahendatud MHC-I lagunemist, soodustades MHC-I molekulide agregatsiooni rakumembraanile ja suurendades seejärel vähirakkude antigeeni esitlemise võimet. Lisaks võib see koos PD-1 antikehaga väga tõhusalt tappa vähirakke (joonis 6N).

CAG soodustab MHC-I ekspressiooni kolorektaalse vähi organoidides ja suurendab CD8 T-rakkude tapmisvõimet

Et täiendavalt uurida, kas CAG-i farmakoloogilist toimet saab kliiniliselt rakendada, kasutati inimese kolorektaalse vähi organoide. Leidsime, et CAG-ga inkubeeritud organoidid suurendasid MHC-I ekspressiooni (joonis 7A) ja antigeeni esitlevate seotud geenide ANXA1, B2M ja HLA-A ekspressioon samuti suurenes (joonis 7B). Eelmistes katsetes avastasime, et CAG suurendas CD8 T-rakkude tapvat toimet, soodustades kasvajarakkude antigeeni esitlemise ekspressiooni, ja efekt oli parem, kui seda kombineerida PD-1 antikehaga. Nende tulemuste edasiseks kontrollimiseks kogusime tervete inimeste perifeerset verd ja isoleerisime CD8 T-rakud ning seejärel inkubeerisime neid CAG-stimuleeritud organoididega 24 tundi (joonis 7C). Tulemused näitasid, et võrreldes DMSO rühmaga ei triivinud CAG-ga töödeldud kasvaja organoidide CD8 T-rakud enam eemale, vaid olid rohkem kontsentreeritud organoidide pinnale; samal ajal oli CAG ja PD-1 rühmades vähem eemaldunud CD8 T-rakke (joonis 7D). Leidsime, et aktiveeritud CD8 T-rakkude poolt sekreteeritud IFN-G suurenes vastavalt (joonis 7E – H).

Siiani leidsime, et CAG soodustas kasvajate antigeeni esitlevat ekspressiooni, et tugevdada CD8 T-rakkude kasvajavastast toimet, ning CAG ja PD-1 antikeha kombinatsioonil oli parem kasvajavastane toime. Lisaks analüüsisime käärsoolevähi andmeid vähi genoomi atlase (TCGA) andmebaasis ja leidsime, et antigeeni esitlemisega seotud geenid HLA-A, HLA-B, HLA-C, CD74 ja B2M näitasid kasvajates madalat ekspressioonitaset ja nende madala ekspressiooniga geenide ellujäämismäär oli väga halb (joonis 7I, J, joonis 7A–H).

Seetõttu leidsime, et HLA-A, CD74 ja teiste geenide ülesreguleeritud ekspressioon CAG poolt oli kasvajaga patsientidele kasulik. Lisaks leidsime, et kõrge HLA-A ja IFNG ekspressiooniga patsientidel oli kõrgem elulemus (joonis 7K); patsientidel, kellel oli kõrge HLA-A ekspressioon ja madal PDCD1 ekspressioon, oli ka parem elulemus (joonis 7L). Kõik need leiud viitavad sellele, et CAG oleks kolorektaalse vähi raviks mõeldud ravimikandidaat.

ARUTELU

Immuunpõgenemine on kriitiline põhjus, miks immuunsüsteem ei suuda kontrollida kasvaja kasvu, kuid see, kuidas immuunravi ajal põgenemisvariandid ilmnevad, on endiselt halvasti mõistetav.34 Uuringud on näidanud, et kasvaja antigeeni esitleva funktsiooni kadu, epigeneetilised muutused ja antiapoptootilise toime avaldumine. valgud ja immunosupressiivsed retseptorid on tihedalt seotud kasvaja immuunsüsteemi põgenemisega. 6 7 35–37 Kuigi viimastel aastatel on PD-1 antikehaga esindatud immunoteraapia teinud suuri läbimurdeid, on ravimiresistentsuse nähtused ja kolorektaalse vähi ravile reageerimata jätmine põhjustanud suurt rahulolematust.38 39 Seetõttu võib kasvaja antigeeni esitlemist soodustavate ja PD-1 antikehaga sünergistuvate kemikaalide leidmine paremini ära hoida kasvaja immuunsüsteemi põgenemise.

Hiljutised uuringud on leidnud, et traditsioonilisest hiina meditsiinist pärit aktiivsed molekulid mängivad tõhusat rolli haiguste ravis, näiteks tselastrool metaboolse sündroomi ravis, andrografoliid koliidi ja vähi ravis,40 baikaliin lipiidide taset langetavas aines ja trifolirisiin kasvaja kontrollis. 41 42 CAG on A. membranaceus'e aktiivne molekul ja tal on südame-veresoonkonna haiguste, maksakaitse, antibakteriaalse ja kõhuaordi aneurüsmi ravimise funktsioonid.18 43–45 Selle kohta on aga vähe uuritud kolorektaalse vähi valdkond. Seetõttu püüdsime uurida, kas ja kuidas CAG pärsib hiire käärsoolevähi kasvu

ScRNA-seq ja scATAC-seq tehnoloogiate arendamine on oluliselt edendanud haiguste uurimist.46–48 Seetõttu kasutasime CAG spetsiifilise kasvajavastase mehhanismi analüüsimiseks üherakulist multi-omika tehnoloogiat. Leiti, et CAG soodustas vähirakkude antigeeni esitlevat funktsiooni ning CD8 pluss T-rakkude, CD4 pluss T-rakkude ja NK-rakkude funktsioonid lümfotsüütides paranesid erineval määral. Teisest küljest olid müeloidrakkude Spp1 pluss TAM-rakud kalduvamad põletikulise vastuse transformatsioonile ja hüpoksiasignaal inhibeeriti pärast CAG-ravi oluliselt. Need tulemused on kooskõlas varasemate uuringute tulemustega, Spp1 pluss TAM-i hüpoksia signaali pärssimine ja põletikulise vastuse võimendamine võivad pärssida kasvajate kasvu.49 Seetõttu oletasime, et CAG soodustab vähirakkude antigeeni esitlevat funktsiooni, seega vastavad CD8 pluss T-rakud ja makrofaagid suudavad vähirakke tõhusalt ära tunda ja tappa. Lisaks kontrollisime oma oletust in vitro katsetega. Voolutsütomeetria analüüs näitas ka, et CAG suurendab CD45 immuunrakkude, sealhulgas CD8 pluss T-rakkude ja NK-rakkude infiltratsiooni. Lisaks suurendab CAG oluliselt ka CD8 pluss T-rakkude poolt sekreteeritud IFN- ja GZMB võimet. Et teha kindlaks, kas CD8 T-rakud või makrofaagid mängivad CAG kasvajavastases katses suurt rolli, testisime oma oletusi siirdatud kasvajatega karvututel hiirtel. T-rakkude arenguhäire tõttu, mis on põhjustatud karvutute hiirte tüümuse immuniseerimisest, samal ajal kui makrofaagide funktsioon on endiselt olemas. Kuid tulemused näitasid, et CAG ei suutnud karvutute hiirte siirdatud kasvajaid tõhusalt tappa. Need tulemused viitavad sellele, et CAG võib suurendada CD8 pluss T-rakkude surmavat toimet kasvajatele, soodustades vähirakkude antigeeni esitlust.

Järgmisena uurisime, kuidas CAG soodustab vähirakkude antigeeni esitlemist TRAP-tehnoloogia abil, et leida nähtuse selgitamiseks CAG-i sihtvalk. CTSB on tsüsteiini hüdrolaas, mis võib interakteeruda teiste valkudega ja laguneda lüsosoomides.50 Arvasime, et see võib interakteeruda antigeeni esitlemisega seotud valkudega, põhjustades selle lagunemist. Ja on teatatud, et MHC-I molekul laguneb lüsosoomides, mille tulemuseks on kasvajarakkude antigeeni esitleva funktsiooni kadumine.13 Seetõttu kahtlustasime, et CTSB võib seonduda MHC-I molekuliga ja põhjustada selle lagunemist lüsosoomides. Kontrollisime seda hüpoteesi, et CAG võib takistada MHC-I lagunemist, pärssides CTSB ja MHC-I koostoimet. Organoidid on tõhus mudel kasvajahaiguste progresseerumise uurimiseks ja neil on suur tähtsus kliiniliste kasvajapatsientide ravi edendamisel, uurides ravimite mõju kasvaja organoidide kasvule ja spetsiifilist mehhanismi.51 52 Meie katsete kaudu leidsime, et koos CAG ja PD-1 antikehadega on hea võime pärssida kasvaja kasvu nii hiire siirdatud kasvajamudelites kui ka inimese käärsoolevähi organoidides. Selle uuringu puuduseks on ksenotransplantaadi proovide ja patsiendi organoidide piiratud arv. Kuigi hiiremudelite ja inimese organoidide vahel on sarnased järeldused, on vaja täiendavat uurimist.

Siin kirjeldame spetsiifilist mehhanismi, mille abil CAG inhibeerib käärsoolevähi kasvu, inhibeerides peamiselt CTSB poolt vahendatud MHC-I lagunemist, et tugevdada CD8 pluss T-rakkude kasvajavastast immuunsust. Ühelt poolt soodustab see vähirakkude antigeeni esitlemist ja teisest küljest leevendab CD8 pluss T-rakkude ammendumisseisundit. Eksperimentaalsed tulemused kinnitasid ka, et CAG ja PD-1 antikeha kombinatsioonil oli parem kasvajavastane toime.

Kokkuvõtteks, meie teadmiste kohaselt rõhutavad need leiud, et CTSB alareguleerimine annab kasvajavastase immuunsuse. Meie uuringud selgitasid ka CAG-i spetsiifilist mehhanismi kolorektaalse vähi kasvu pärssimisel. Tasub mainida, et CAG-l on tervisetootena suur potentsiaal Euroopa ja Ameerika turgudel. Meie uurimistulemused pakuvad potentsiaalset vähivastase ravimi kandidaadi.

Autorite seosed

1 Riiklik Farmaatsia biotehnoloogia, keemia ja biomeditsiini innovatsioonikeskuse (ChemBIC) laboratoorium, biotehnoloogia ja farmaatsiateaduste osakond, Nanjingi ülikooli bioteaduste kool, Nanjing, Jiangsu, Hiina

2 Bioinformaatika ennustava meditsiini osakond, Biomeditsiinilise informaatika instituut, rakusignaali ülekande labor, meditsiini põhiteaduste kool, Henani ülikool, Kaifeng, Henan, Hiina Rahvavabariik

3 Jiangsu traditsioonilise hiina meditsiini koostööinnovatsioonikeskus kasvajate ennetamise ja ravi valdkonnas, esimene kliiniline kolledž, Nanjingi hiina meditsiini ülikool, Nanjing, Jiangsu, Hiina

4 Shanghai Jiao Tongi ülikooli kuuenda rahvahaigla üldkirurgia osakond, Shanghai, Hiina Rahvavabariik

5 Jiangsu provintsi ravimite metabolismi ja farmakokineetika võtmelabor, riiklik loodusravimite laboratoorium, Hiina farmaatsiaülikool, Nanjing, Jiangsu, Hiina

6 Genergy Bio-technology (Shanghai) Co. Ltd, Shanghai, Hiina

7 Jiangsu uute ravimite uurimise ja kliinilise farmaatsia võtmelabor, Xuzhou meditsiiniülikool, Xuzhou, Jiangsu, Hiina

KaastöölisedYS, HC ja DS töötasid selle projekti välja ja koostasid uuringu. GD, BW ja XS viisid läbi katsed ja analüüsisid andmeid. LZ ja HC analüüsisid scRNA-seq ja scATAC-seq andmeid. DS ja HC andsid metoodilist tuge ja kontseptuaalseid nõuandeid. YS ja GD kirjutasid käsikirja. YS kui käendaja kannab täielikku vastutust uuringu töö ja/või läbiviimise eest ning tal on õigus pääseda juurde andmetele ja kontrollida väljastamisotsust.

RahastamineSeda tööd toetasid riiklik võtmetähtsusega uurimis- ja arendusprojekt (2017YFC1700602), Hiina riiklik loodusteaduste sihtasutus (nr 81930117, 81872877, 82074318), Jiangsu kõrgkoolide prioriteetse akadeemilise programmi arendamine ja mägironimistalentide projekt. (N/A), Shanghai loodusteaduste fondi projekt, teadusliku ja tehnoloogilise innovatsiooni tegevuskava (nr 22ZR1447400).

Konkureerivad huvidÜkski pole deklareeritud.

Patsiendi nõusolek avaldamiseksEi kohaldata.

Eetika heakskiitInimese käärsoolevähi organoidide uuringu kiitis heaks Nanjingi Hiina Meditsiiniülikooli sidushaigla uurimis- ja eetikakomitee ning see järgis kõiki asjakohaseid eetikaeeskirju (2020-NL-094- 02). Osalejad andsid enne osalemist teadliku nõusoleku uuringus osalemiseks

Päritolu ja eksperdihinnangEi ole kasutusele võetud; väliselt eelretsenseeritud.

Andmete kättesaadavuse avaldusKõik uuringuga seotud andmed sisalduvad artiklis või laaditakse üles veebipõhise lisateabena.

Täiendav materjalSelle sisu on esitanud autor(id). BMJ Publishing Group Limited (BMJ) ei ole seda kontrollinud ja see ei pruugi olla eelretsenseeritud. Kõik arutatud arvamused või soovitused on ainult autori(te) omad ja BMJ neid ei toeta. BMJ loobub igasugusest vastutusest ja vastutusest, mis tuleneb mis tahes sisule tuginemisest. Kui sisu sisaldab tõlgitud materjali, ei garanteeri BMJ tõlgete täpsust ja usaldusväärsust (sealhulgas, kuid mitte ainult, kohalikud eeskirjad, kliinilised juhised, terminoloogia, ravimite nimetused ja ravimiannused) ega vastuta mistahes vigade ja/ või tõlkimisest ja kohandamisest või muust tulenevatest väljajätmistest.

Avatud juurdepääsSee on avatud juurdepääsuga artikkel, mida levitab Creative Commons Attribution Non-Commercial (CC BY-NC 4.0) litsents, mis lubab teistel seda teost mitteäriliselt levitada, remiksida, kohandada, selle põhjal edasi arendada ja litsentsivad oma tuletatud teoseid erinevatel tingimustel, eeldusel, et originaalteosele on õigesti tsiteeritud, antakse asjakohane krediit, märgitakse kõik tehtud muudatused ja kasutamine on mitteäriline.

VIITED

1 Siegel RL, Miller KD, Fuchs HE jt. Vähistatistika, 2022. CA A Cancer J Clinicians 2022;72:7–33.

2 Kuipers EJ, Grady WM, Lieberman D jt. Pärasoolevähk. Nat Rev Dis Primers 2015;1:15065.

3 Biller LH, Schrag D. Metastaatilise kolorektaalse vähi diagnoosimine ja ravi. JAMA 2021;325:669–85.

4 Oliveira AF, Bretes L, Furtado I. PD-1/PD-L1 inhibiitorite ülevaade metastaatilise dMMR/MSI-H kolorektaalse vähi korral. Front Oncol 2019;9:396.

5 Das M, Zhu C, Kuchroo VK. Tim-3 ja selle roll kasvajavastase immuunsuse reguleerimisel. Immunol Rev 2017;276:97–111.

6 Jiang X, Wang J, Deng X jt. Kasvaja mikrokeskkonna roll PD-L1/PD-1-vahendatud kasvaja immuunsüsteemi põgenemisel. Mol Cancer 2019;18:10.

7 Dhatchinamoorthy K, Colbert JD, Rock KL. Vähi immuunsüsteemi vältimine MHC I klassi antigeeni esitluse kaotamise kaudu. Front Immunol 2021;12:636568.

8 Zhu Y, Qian Y, Li Z jt. Neoantigeeniga reaktiivne T-rakk: esilekerkiv roll adoptiivses rakulises immunoteraapias. MedComm 2021; 2:207–20.

9 Vries JE, Yssel H, Spits H. TCR/CD3 kompleksi ja CD4 või CD8 koosmõju tsütotoksiliste T-lümfotsüütide aktiveerimisel. Immunol Rev 1989;109:119–42.

10 Huang J, Meyer C, Zhu C. T-raku antigeeni äratundmine rakumembraanil. Mol Immunol 2012;52:155–64.

11 Allison JP. CD28-B7 interaktsioonid T-rakkude aktiveerimisel. Curr Opin Immunol 1994;6:414–9.

12 Liu X, Bao X, Hu M jt. PCSK9 inhibeerimine võimendab vähi immuunkontrollpunkti ravi. Loodus 2020;588:693–8.

13 Yamamoto K, Venida A, Yano J jt. Autofagia soodustab kõhunäärmevähi immuunsüsteemi vältimist MHC-I lagundamise kaudu. Loodus 2020;581:100–5.

14 Chen X, Zhao Y, Luo W jt. Celastrol kutsub esile ROS-vahendatud apoptoosi, suunates otseselt peroksiredoksiini-2 maovähirakkudesse. Theranostics 2020;10:10290–308.

15 Kong N, Chen X, Feng J jt. Baikaliin indutseerib põie vähirakkudes ferroptoosi, vähendades FTH1. Acta Pharm Sin B 2021;11:4045–54.

16 Deng G, Chen W, Wang P jt. NLRP3 põletiku poolt vahendatud püroptoosi inhibeerimine makrofaagides tsükloastragenooli poolt aitab kaasa imikvimoodist põhjustatud psoriaasilaadse nahapõletiku leevendamisele hiirtel. Int Immunopharmacol 2019;74:105682.

17 Li M, Li S-chun, Dou B-kai jt. Tsükloastragenool reguleerib üles SIRT1 ekspressiooni, nõrgendab apoptoosi ja pärsib neuroinflammatsiooni pärast ajuisheemiat. Acta Pharmacol Sin 2020;41:1025–32.

18 Chen C, Ni Y, Jiang B jt. Biotransformatsiooni teel toodetud tsükloastragenooli vananemisvastased derivaadid. Nat Prod Res 2021;35:2685–90.

19 Fauce SR, Jamieson BD, Chin AC jt. Inimese CD8 ja T-lümfotsüütide viirusevastase funktsiooni telomeraasipõhine farmakoloogiline võimendamine. J Immunol 2008;181:7400–6.

20 Wang B, Wang Y, Sun X jt. CXCR6 on vajalik intratumoraalsete CD8 pluss T-rakkude kasvajavastaseks efektiivsuseks. J Immunother Cancer 2021;9:e003100.

21 Butler A, Hoffman P, Smibert P jt. Üherakuliste transkriptoomiliste andmete integreerimine erinevate tingimuste, tehnoloogiate ja liikide lõikes. Nat Biotechnol 2018;36:411–20.

22 Yu G, Wang LG, Han Y jt. clusterProfiler: R-pakett geeniklastrite bioloogiliste teemade võrdlemiseks. OMICS: A Journal of Integrative Biology 2012; 16:284–7.

23 Stuart T, Butler A, Hoffman P jt. Ühelahtri andmete põhjalik integreerimine. Cell 2019;177:1888–902.

24 Granja JM, Corces MR, Pierce SE jt. ArchR on skaleeritav tarkvarapakett integreerivaks üherakulise kromatiini juurdepääsetavuse analüüsiks. Nat Genet 2021;53:403–11.

25 Korsunsky I, Millard N, Fan J jt. Ühelahtri andmete kiire, tundlik ja täpne integreerimine harmooniaga. Nat Methods 2019;16:1289–96.

26 Trapnell C, Cacchiarelli D, Grimsby J et al. Rakkude saatuseotsuste dünaamika ja regulaatorid ilmnevad üksikute rakkude pseudoajalise järjestamise kaudu. Nat Biotechnol 2014;32:381–6.

27 Qiu X, Hill A, Packer J et al. Üherakuline mRNA kvantifitseerimine ja diferentsiaalanalüüs koos loendusega. Nat Methods 2017;14:309–15.

28 Qiu X, Mao Q, Tang Y jt. Pööratud graafiku manustamine lahendab keerulised üherakulised trajektoorid. Nat Methods 2017;14:979–82.

29 Patel AP, Tirosh I, Trombetta JJ jt. Üherakuline RNA-seq tõstab esile primaarse glioblastoomi intratumoraalse heterogeensuse. Teadus 2014;344:1396–401.

30 Subramanian A, Tamayo P, Mootha VK jt. Geenikomplekti rikastamise analüüs: teadmistepõhine lähenemisviis genoomi hõlmavate ekspressiooniprofiilide tõlgendamiseks. Proc Natl Acad Sci USA 2005;102:15545–50.

31 Tian Y, Wan N, Ding M. Chemoproteomics kaardistab glükolüütilisi sihtmärke vähirakkudes. bioRxiv 2020.

32 Zhu Y, Wan N, Shan X jt. Celastrol on suunatud adenülüültsüklaasiga seotud valgule 1, et vähendada makrofaagide poolt vahendatud põletikku ja leevendada kõrge rasvasisaldusega dieedist põhjustatud metaboolset sündroomi hiirtel. Acta Pharm Sin B 2021;11:1200–12.

33 Driehuis E, Kretzschmar K, Clevers H. Patsientidelt saadud vähi organoidide loomine ravimite sõeluuringute jaoks. Nat Protoc 2020;15:3380–409.

34 Lin KY, Lu D, Hung CF jt. Vaskulaarsete rakkude adhesioonimolekuli ektoopiline ekspressioon-1 kui uus mehhanism kasvaja immuunvastuse vältimiseks. Cancer Res 2007;67:1832–41.

35 Kriegsman BA, Vangala P, Chen BJ jt. IRF2 sagedane kadu vähkkasvajate korral põhjustab immuunsüsteemi kõrvalehoidmist MHC I klassi antigeeni esitluse vähenemise ja PD-L1 ekspressiooni suurenemise kaudu. Ji 2019;203:1999–2010.

36 Gomez S, Tabernacki T, Kobyra J et al. Epigeneetilise ja immuunteraapia kombineerimine vähiresistentsuse ületamiseks. Semin Cancer Biol 2020;65:99–113.

37 Mandal R, Barrón JC, Kostova I. Kaspaas-8: kahe teraga mõõk. Biochim Biophys Acta Rev Cancer 1873;2020:188357.

38 Qin S, Xu L, Yi M jt. Immuunsuse kontrollpunktide uudsed sihtmärgid: PD-1 ja CTLA-4 kaugemale jõudmine. Mol Cancer 2019;18:155.

39 Lizardo DY, Kuang C, Hao S jt. Immunoteraapia efektiivsus ebakõla parandamise puudulikkusega kolorektaalse vähi korral: pingilt voodi kõrvale. Biochim Biophys Acta Rev Cancer 2020;1874:188447.

40 Guo W, Sun Y, Liu W jt. Väikeste molekulide poolt juhitud mitofagia poolt vahendatud NLRP3 põletiku inhibeerimine vastutab koliidiga seotud vähi ennetamise eest. Autofagia 2014;10:972–85.

41 Dai J, Liang K, Zhao S jt. Kemoproteoomika näitab, et baikaliin aktiveerib maksa CPT1, et leevendada dieedist põhjustatud rasvumist ja maksa steatoosi. Proc Natl Acad Sci USA 2018;115:E5896–905.

42 Sun D, ​​Tao W, Zhang F jt. Trifolirisiin kutsub AMPK / mTOR signaalimise kaudu esile käärsoolevähi autofagiast sõltuva apoptoosi. Sig Transduct Target Ther 2020; 5:174.

43 Gu M, Zhang S, Zhao Y et al. Tsükloastragenool parandab maksa steatoosi, aktiveerides farnesoidi X retseptori signaaliülekannet. Farmakoloogilised uuringud 2017;121:22–32.

44 Wang J, Wu ML, Cao SP jt. Tsükloastragenool leevendab eksperimentaalset südamekahjustust rottidel, soodustades müokardi autofagiat AKT1-RPS6KB1 signaaliülekande pärssimise kaudu. Biomed Pharmacother 2018;107:1074–81.

45 Wang Y, Chen C, Wang Q jt. Tsükloastragenooli pärssiv toime kõhu aordi aneurüsmile ja sellega seotud mehhanismidele. Br J Pharmacol 2019;176:282–96.

46 Lee JJ, Bernard V, Semaan A jt. Kasvaja-stromaalse heterogeensuse ja ligandi-retseptori interaktoomi selgitamine üherakulise transkriptoomika abil reaalses kõhunäärmevähi biopsiates. Clin Cancer Res 2021;27:5912–21.

47 Zhang L, Li Z, Skrzypczynska KM jt. Üherakulised analüüsid annavad teavet käärsoolevähi müeloid-sihitud ravi mehhanismide kohta. Cell 2020;181:442–59.

48 Gao J, Wu Z, Zhao M et al. Allosteeriline inhibeerimine näitab SHP2-vahendatud kasvaja immunosupressiooni käärsoolevähi korral üherakulise transkriptoomika abil. Acta Pharm Sin B 2022;12:149–66.

49 Wei J, Chen Z, Hu M jt. Pan-vähi rakkudevahelise suhtluse iseloomustamine näitab, et SPP1 pluss kasvajaga seotud makrofaagid laienesid hüpoksia korral ja soodustavad vähi pahaloomulisust üherakuliste RNA-Seq andmete kaudu. Front Cell Dev Biol 2021; 9:749210.

50 Chen X, Yu C, Kang R jt. Rakkude lagunemissüsteemid ferroptoosi korral. Rakkude surma erinevus 2021; 28:1135–48.

51 Puschhof J, Pleguezuelos-Manzano C, Martinez-Silgado A jt. Soole organoidsed kokultuurid mikroobidega. Nat Protoc 2021;16:4633–49.

52 Lee SH, Hu W, Matulay JT jt. Kasvaja areng ja ravivastus patsiendilt saadud põievähi organoidmudelites. Cell 2018;173:515–28.

【Lisateabe saamiseks:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】