T-rakkudest pärinev interleukiin-22 juhib CD155 ekspressiooni vähirakkude poolt, et pärssida NK-rakkude funktsiooni ja soodustada metastaase
Oct 10, 2023
KOKKUVÕTE
Kuigi T-rakud võivad avaldada tugevat kasvajavastast immuunsust, on rinna- ja kopsukasvajates interleukiini -22 (IL-22) tootvate T-abistajarakkude (Th) alamhulk seotud patsientide kurbade tulemustega. Siin uurisime mehhanisme, mille abil need T-rakud soodustavad haigusi. Kopsu- ja rinnavähi hiiremudelites vähendas Il22 põhiseaduslik ja T-raku-spetsiifiline deletsioon metastaase, mõjutamata primaarse kasvaja kasvu. IL-22 retseptori deletsioon vähirakkudel vähendab metastaase sarnaselt IL-22- puudulikkusega hiirte omaga. IL-22 kutsus esile CD155 kõrge ekspressiooni, mis seondus NK-rakkudel aktiveeriva retseptoriga CD226. Liigne aktiveerimine vähendas CD226 kogust ja funktsionaalselt kahjustatud NK-rakke, mis suurendas metastaatilist koormust. IL-22 signaaliülekannet seostati ka CD155 ekspressiooniga inimese andmekogumites ja patsientide halbade tulemustega. Kokkuvõttes näitavad meie leiud immunosupressiivset ahelat, mille aktiveerib T-rakkudest pärinev IL-22 ja mis soodustab kopsumetastaase.
Cistanche tubulosa-Antitumor eelised
SISSEJUHATUS
Neoplastilise progresseerumise peamine tunnus ja vähiga seotud suremuse peamine põhjus on vähirakkude võime levida sekundaarsetesse kohtadesse ja moodustada metastaase.1,2 Metastaaside teket saab ära hoida immuunseirega, mis hõlmab looduslikku tapjat (NK), tsütotoksilist ainet. , ja T-abistaja (Th) 1 rakud.3,4 Seevastu reguleerivad T-rakud (Treg), ringlevad monotsüüdid ja Th-rakkudest pärinev IL-17A moodustavad immunosupressiivse mikrokeskkonna, mis võimaldab immuunsüsteemi põgeneda ja soodustab metastaase. 4–6 Seetõttu on ülioluline tuvastada signaalikaskaadid, mis määravad kasvajavastaste immuunrakkude funktsiooni.7,8 Interleukiin-22 (IL-22) on Th17 poolt toodetud tsütokiin. ja inimestel ka Th1 alamhulga kaudu, mis teadaolevalt soodustab vähirakkude kasvu, suurendab migratsiooni, kaitseb apoptoosi eest, indutseerib epiteeli-mesenhümaalset üleminekut ja säilitab pahaloomuliste rakkude tüve.9–13 Samuti soodustab see varajast kantserogeneesi, toimides. prekursorkahjustustel või ebaküpsetel vähi tüvirakkudel.14–18 IL-22-tootvad rakud, peamiselt Th-rakud, aga ka gamma-delta (gd) T-rakud, invariantsed looduslikud tapja-T-rakud (iNKT) ja kaasasündinud lümfoidrakud (ILC) ). , on selle ekspressioon seotud halva prognoosi, haiguse kõrgema staadiumi ja kasvaja kiirema progresseerumisega.13,22–24,27–29 IL-22 toimib eranditult IL-22 retseptori (IL{{40) kaudu. }}R), mis koosneb kahest alaühikust IL-22RA1 ja IL-10RB.30,31 Sekreteeritud IL-22 toimet moduleerib inhibiitor IL{{47} } siduv valk (IL-22BP, IL-22RA2), IL-22RA1 homoloog, mida toodavad peamiselt müeloidrakud.32,33 Püsiseisundi tingimustes IL -22 on oluline homöostaatiline tsütokiin epiteeli barjäärides, nagu soolestik, kops ja nahk.34,35 Nendes kohtades soodustab IL-22 kaitset, regenereerimist ja paranemist, et säilitada barjääri terviklikkus36, 37 ja selle puudumine süvendab põletikust põhjustatud kantserogeneesi.13,38 Need andmed toovad üheskoos esile IL-22 laiaulatuslikud kontekstist sõltuvad funktsioonid nii füsioloogilistes kui ka patoloogilistes tingimustes. Retseptoriga seondumisel käivitab IL-22 Januse kinaasid Jak1 ja Tyk2, et fosforüülida STAT3, STAT1 või STAT5, kuid IL-22 võib käivitada teisi allavoolu teid, sealhulgas mitogeen-aktiveeritud proteiinkinaaside (MAPK) kaskaadi. või PI3K-AktmTOR signaalimine, olenevalt raku kontekstist.13, 36, 39–44 Seda signaaliradade mitmekesisust peegeldavad paljud füsioloogilised mõjud, mida on seostatud IL-22 signaaliülekandega, sealhulgas ülalkirjeldatud, samuti kaitse genotoksiliste kahjustuste eest ning antibakteriaalsete peptiidide, lima, pro- ja põletikuvastaste tsütokiinide ning kemokiinide esilekutsumine.36,38,39,45,46 Vähirakud kutsuvad esile IL-i tootmist-22 rinna- ja kopsuvähiga patsientide Th-rakkudest.12,47,48 NLRP3 põletikust tingitud IL-1b vabanemine indutseerib kasvaja T-rakkudest IL-22 tootmist ja nii IL-22+ Th-rakke ja NLRP3-IL-1b signatuuri võib leida rinna- ja kopsuvähi kasvajaproovidest.48,49 Siin on eesmärk kirjeldada mehhanismi, mille abil IL{102}} soodustab rinna- ja kopsuvähi progresseerumine. Leidsime, et IL-22 soodustab metastaaside levikut kopsu, paljastades ahela, kus IL-22 vahendas immunosupressiooni metastaatilises nišis, soodustades CD155 ekspressiooni vähirakkudel, mida seostati CD226 ekspressiooni vähenemisega. NK-rakkudele ja vähenenud interferoon-g (IFNg) tootmine. Kliinilised andmed näitavad, et selliste radade aktiveerimine on seotud patsiendi tulemustega.
TULEMUSED
cistanche toidulisandi eelised - suurendavad immuunsust
IL-22 mõjutab levinud vähirakke kopsu- ja rinnakartsinoomi süngeensetes hiiremudelites
To understand the impact of the IL-22-IL-22R1 signaling axis on cancer progression, we analyzed syngeneic murine models of breast and lung carcinoma. As cancer patients mostly succumb to metastatic disease, we recapitulated this with phenotypically relevant models. We implanted either 4T1 breast cancer or Line-1 lung cancer cells subcutaneously (s.c.) in the right flank of wild-type mice (WT) and mice lacking IL-22 expression (Il22 / ) (Figure 1A). IL-22 did not impact the outgrowth of the primary tumors in either model (Figures 1B and 1C). Upon reaching pre-defined termination criteria (tumor >225 mm2 või haavand), olid kopsud meie mudeli peamine metastaatiline koht, kus aeg-ajalt leidus metastaase mujal (pole näidatud). Il22 / hiirtel ilmnes Line-1 ja 4T1 rakkude metastaaside vähenemine kopsudesse võrreldes metsiktüüpi loomadega, sõltumata primaarse kasvaja suurusest, kasutades erinevaid metastaaside tuvastamise meetodeid (joonised 1B, 1C ja S1A). Oleme täheldanud sarnast metastaatilist fenotüüpi ka rinnavähi ortotoopilises mudelis, kus 4T1 rakud implanteeriti rinnanäärme rasvapadjasse (joonis S2B). Kõik kasutatud makroskoopilise pimeloenduse, klonogeensete analüüside või histoloogia meetodid näitasid suurt järjepidevust madalama metastaatilise koormuse tuvastamisel Il22 / loomade puhul (joonised 1B, 1C ja S1C). See tähendab IL-22 keskset rolli metastaatilises protsessis. Järgmisena sundisime metastaase vähirakkude intravenoosse süstimise teel, mis läheb mööda kudede eraldumise ja invasiooni vajadusest (joonis 1D). Mõlema rakuliini intravenoossed (iv) süstid peegeldasid subkutaanse mudeli fenotüüpi. Võiksime tõepoolest kinnitada madalamat metastaatilist koormust Il22 / hiirtel (joonised 1E ja 1F). Need tulemused näitavad IL-22 spetsiifilist rolli ringluses olevates dissemineerunud rakkudes. Tüvespetsiifiliste mõjude tuvastamiseks kasutasime E0771 rinnavähi mudelit (joonis 1G).50,51 E0771- GFP rakkude intravenoosne süstimine näitas voolutsütomeetriaga valideeritud Il22 / loomade metastaatilise koormuse vähenemist (joonised 1H ja S1D). Samamoodi täheldasime väiksemat metastaatilist koormust hiirte maksas, kui E0771-GFP rakke süstiti intraspleniliselt (joonis S1E). E0771-GFP-ga süstitud hiirte kogu vasak kops puhastati optiliselt iDISCO protokolli järgi metastaaside kvantifitseerimiseks valguslehtmikroskoopiaga in situ (joonis 1I).52 Siin näitas Il22 / hiirtel vähenenud kalduvus metastaaside tekkeks. , samas kui visualiseeritud metastaaside suurus ei erinenud ja neil ei olnud nende lokaliseerimise spetsiifilist mustrit (joonis 1J). Kokkuvõttes toimis IL-22 levinud vähirakkudele, võimaldades rinna- ja kopsuvähi metastaase kopsudesse.
T-rakud on oluline IL{0}} allikas kopsu metastaatilises nišis
Varem tuvastasime CD{0}} T-rakud peamise IL-22 allikana inimese primaarsetes kopsukasvajates ja bronhoalveolaarsetes loputusproovides.12,47,48 IL-22 allika piiritlemiseks Meie mudelite kopsudesse süstisime intravenoosselt E0771 rakke Foxp3mRFP Il17aGFPIl22sgBFP reporterloomadesse ja kvantifitseerisime IL-22+ rakud voolutsütomeetria abil (joonised 2A ja S2A).53 Populatsioonid määratleti kui CD4+, CD{15} , CD }} ja topeltnegatiivsed (DN) (CD4 , CD8 ) ab T-rakud (CD3+ gdTCR NK1.1 ), gd T-rakud (CD3+ gdTCR+ NK1.1 ) ja CD{{ 26}} NK1.{28}} ja CD3 NK1.1+ rakud (joonised 2B ja S2B). Täheldasime CD4+, CD8+ T-rakkude ja NK1.1+ rakkude fraktsiooni suurenemist, mis tootsid IL-22 kasvajaga süstitud loomade kopsudes ( joonised 2C, S2C ja S2D). Siin moodustasid CD4+ ja CD8+ T-rakud kasvajaga hiirtel suurema osa IL-22-tootvatest rakkudest (joonis 2C). Lisaks tuvastasime, et sellised CD4+ T-rakud tootsid IL-22, kuid mitte IL-17A (joonis 2D). Nendel rakkudel oli madal CD44 ekspressioon, mis kinnitas nende mälu fenotüüpi kooskõlas meie varasemate tähelepanekutega (joonis S2E).48 Nende leidude edasiseks uurimiseks mudelite lõikes kasutasime rakusisest värvimist, et hinnata IL-22 tootmist liinis{ {56}} sc mudel, mis andis sarnaseid tulemusi, välja arvatud CD8+ T-rakkude IL-22 tootjate vähenenud osa (joonised S2F–S2I). Samuti võisime tuvastada, et IL-22+ rakud ei koekspresseerinud IFNg-d, mis eristab hiire IL-22 tootjaid Th1 alamhulgast (joonis 2G).49 Lisaks kasutasime täppislõikamisel konfokaalset mikroskoopiat. reporterloomade kopsulõigud, et uurida nende ruumilist jaotust kasvajaga süstitud hiirte kopsudes. Siin võisime tuvastada, et sellised IL-22 ja IL-17A tootjad paiknevad peaaegu eranditult metastaatilistes fookustes (joonis 2E). Nagu näitas voolutsütomeetria, ei leidnud me korrelatsiooni IL-22 ja IL-17A produktsiooni vahel metastaatilistes fookustes reporterrakkudest, mis näitab, et IL-22 ja IL-17 neid toodavad tõepoolest kaks erinevat rakulist alamhulka. Samuti kinnitasime, et suur osa IL-22-tootvatest rakkudest on CD4+ T-rakud (joonis 2E). Kuna need andmed näitasid T-rakkude domineerivat rolli IL-22 tootmises, genereerisime Il22floxCd4cre hiire, millel oli Il22 tingimuslik deletsioon kõigis küpsetes T-rakkudes (joonis 2F). E0771-GFP rakkudega nakatamisel oli Il22floxCd4cre hiirtel vähenenud kalduvus metastaaside tekkeks kopsudes, mis meenutas globaalses Il22 / loomades täheldatud fenotüüpi (joonis 2F). Siiski võime ka kinnitada, et CD4 promootori kontrolli all olev kre-rekombinaas kaotas täielikult IL-22 tootmise mitte ainult CD4+, vaid ka põrnast eraldatud CD8+ T-rakkudes. Il22floxCd4cre hiirtel ja seetõttu ei saanud seda mudelit kasutada konkreetse IL-22 allika kindlaksmääramiseks (joonis S2J). Kinnitamaks Th-rakkude rolli IL-22 olulise allikana meie mudelis, kandsime metsiktüüpi ja Il22 / CD4+ T-rakud Rag1 / II22/ loomadesse, kes said seejärel E{{ 104}} GFP rakud iv (joonis 2G). Siin võime kinnitada, et IL-22 produktsioon adoptiivselt ülekantud CD4+ T-rakkude poolt on meie mudelis piisav kopsumetastaaside soodustamiseks, kuid see tühistatakse, kui kasutatakse II22-st / loomadest eraldatud CD4+ T-rakke. (Joonis 2G). Oluline on see, et T-rakkude siirdamine ülekandel mõjutas metastaaside erinevusi (joonis S2K). Kokkuvõttes tuvastasime Th-rakud piisava IL-22 allikana, mis juhib kasvajaga hiirte kopsudes metastaase, ja järgmiseks püüdsime tuvastada asjakohast sihtrakku.
Joonis 1. IL-22-knockout vähendab kopsumetastaaside arvu, kuid ei mõjuta kasvaja kasvu kopsu- ja rinnakartsinoomi süngeensete hiiremudelite korral
Joonis 2. T-rakud on IL-22 peamine allikas kasvajaga hiirte kopsudes
IL-22RA1 ekspressioon kasvajarakkudel on metastaaside tekkeks hädavajalik
IL-22RA1 ekspressioon on piiratud mittehematopoeetiliste rakkudega ja toimib IL-22 signaaliülekande piirava tegurina. Et uurida selle mõju metastaatilisele fenotüübile, genereerisime stabiilse Il22ra1 deletsiooni 4T1 ja Line -1 rakkudes (joonis 3A). Kooskõlas meie varasemate leidudega ei mõjutanud 4T1 Il22ra1 rakkude kasvaja kasvu võrreldes 4T1 kontrollrakkudega (joonis 3B). Kuid hiirtel, kellele süstiti 4T1 Il22ra1 rakke sc või iv, oli kopsudes vähem makroskoopilisi ja klonogeenseid metastaase võrreldes kontroll-4T1 rakkudega (joonised 3B ja 3C). Kinnitamaks, et see efekt ei ole kloonist sõltuv, genereerisime ja analüüsisime kolm Line-1 Il22ra1 klooni ja testisime neid kolme kontrollklooni vastu, mis andsid sarnased tulemused (joonised 3D ja 3E). See kinnitab, et IL-22RA1-ekspresseerivad vähirakud on IL-22 oluline sihtmärk kopsumetastaaside tekitamisel. Metoodika kõrvalmõjude välistamiseks kasutasime IL-22BP-d IL-22 signaaliülekande pärssimiseks. Lõime 4T1 ja Line-1 rakuliinid, mis eritasid konstitutiivselt IL-22BP-d (Il22ra2+) (joonis S3A). Subkutaanselt süstimisel kasvasid Line{44}} Il22ra2+ rakud implantatsioonikohas võrreldavalt kontrollrakkudega, nagu varem oli näha Il22ra1 mudelite ja Il22 / hiirte puhul, kuigi 4T1 Il22ra2+ rakud kasvasid aeglasem (joonis S3B). Siin oli 4T1 Il22ra2+ rakkudel subkutaanselt süstimisel oluliselt vähenenud metastaaside arv (joonis S3B ja S3C). Vaatamata suuremale varieeruvusele moodustasid Line{61}} Il22ra2+ rakud sc või iv süstimisel vähem metastaase (joonis S3D ja S3E). Seega jäljendas IL-22 neutraliseerimine IL-22BP kaudu suuresti Il22ra1 rakkude ja Il22/hiirte puhul täheldatud fenotüüpi, kinnitades tsütokiini olulisust metastaatilise protsessi jaoks.
cistanche toidulisandi eelised - suurendavad immuunsust
IL-22 kontrollib kasvajarakkude väljakasvu metastaatilise siirdamise varases staadiumis
To determine the role of IL-22 signaling during the dissemination process, we analyzed the kinetics of metastatic seeding in our models. For this, we injected 4T1-GFP cells i.v. and analyzed lungs at 12 and 48 h after injection (Figure S4A). We used confocal microscopy to quantify the numbers of GFP+ colonies (defined as cell clusters of >100 mm) ja üksikud rakud kopsukoe mm2 kohta (joonis S4B). Me ei suutnud tuvastada erinevusi 12 tundi pärast süstimist, mis näitab, et IL-22 ei pruugi külvamist oluliselt mõjutada (joonised S4C ja S4D). Kuid 48-h ajahetkel vähenes GFP+ rakkude ja kolooniate arv Il22 / hiirte kopsudes (joonised S4C ja S4D). See viitas IL{12}} rollile varajase metastaaside tekitamisel kopsudes. Proliferatsiooni kiiruse hindamiseks süstisime hiirtele koos 5-etünüül-20 -desoksüuridiini (EdU) 4 tundi enne uurimist 12, 24, 48 tundi ja 7 päeva pärast kasvaja süstimist (joonis S4E). . Sarnaselt mikroskoopilise loendamisega ei tuvastanud me erinevusi GFP + rakkude arvus varem kui 48 tundi pärast süstimist (joonised S4F – S4G). Seevastu võime tuvastada erinevusi EdU inkorporeerimises, mis näitab jagunevate rakkude suuremat osa alles 7. päeval pärast süstimist (joonis S4G). Seega arvame, et juba 48 tunni pärast täheldatud IL-22 poolt mõjutatud kopsukasvaja koormuse erinevusi vahendab proliferatsioonist sõltumatu mehhanism.
Joonis 3. IL-22RA1 ekspressioon kasvajarakkudel on metastaaside tekkeks hädavajalik
IL-22 reguleerib CD155 ekspressiooni kasvajarakkudel ja soodustab seeläbi metastaase
Tuginedes meie järeldustele, et IL-22 toimib IL-22ra1+ vähirakkudele, soodustades metastaase, teostasime IL-22-ga töödeldud 4T1 rakkude RNA hulgijärjestuse, et täpsemalt piiritleda. aluseks olev mehhanism (GEO: GSE202314) (joonis 4A). Avastasime 147 erinevalt reguleeritud geeni. Neist 133 geeni ekspressioon suurenes ja 14 geeni ekspressioon vähenes pärast IL-22-ravi (joonised 4B ja S5A). Valideerisime Pvr-i (polioviiruse retseptor, Pvr) qPCR-i abil ühe kõige märkimisväärselt suurenenud sihtmärgina (joonis S5B). See on märkimisväärne, kuna Pvr-i produkt CD155 ekspresseerub üle erinevate vähivormide korral ja sellel on kasvajat soodustavad omadused, sealhulgas metastaasid.54–56 Leidude kinnitamiseks hindasime CD155 ekspressiooni IL-22-stimuleeritud 4T1-s, Line-1 ja E0771 rakud voolutsütomeetria abil (joonis 4C). Tuvastasime CD155 ekspressiooni suurenemise kõigis rakuliinides 72 tunni jooksul (joonised 4D ja 4E), kuid see efekt puudus rakkudes, kus puudus IL-22RA1 (joonis S5C). Järgmisena hindasime IL-22 mõju CD155 ekspressioonile kasvajaga hiirte kopsude E0771-GFP rakkudes (joonis 4F). Siin võime kinnitada, et Il22 / hiirtesse siirdatud rakkudel oli madalam CD155 ekspressioon, mis korreleerus voolutsütomeetria abil tuvastatud väiksema osaga E0771-GFP rakkudest (joonised 4G ja 4H). Et kontrollida CD155 rolli metastaasides, lõime Pvr Line-1 ja 4T1 rakuliinid (joonised 4I, S5D ja S5G). Kuigi see ei mõjutanud nende subkutaanset kasvu (joonised S5E ja S5F), kaotas see võime moodustada kopsus metastaase (joonised 4J ja S5H). Võiksime selle protsessi ümber pöörata konstitutiivse CD155 ekspressiooniga Pvr-rakkudes, sõltumata IL-22-indutseeritud regulatsioonist (Pvr+).
Joonis 4. IL-22 signaaliülekanne suurendab CD155 ekspressiooni kasvajarakkude pinnal ja annab resistentsuse metastaaside kontrollile
Selles seades võime indutseerida metastaase Il22 / hiirte kopsudes, tuues esile seose nende kahe molekuli vahel ja nende rolli metastaatilise protsessi vahendajatena (joonised 4K ja S5I).
CD155 kasvajarakkudel on seotud CD226 ekspressiooni vähenemisega NK-rakkudel ja IFNg tootmise vähenemisega
CD155 mängib muu hulgas olulist rolli vähirakkude proliferatsioonis ja adhesioonis54–57. Me ei tuvastanud puudusi Line-1 Pvr-rakkude proliferatsioonis in vitro (andmeid ei ole näidatud). Oluline on see, et CD155-l on rakuväline metastaaside teket soodustav roll, kuna see seondub immunomoduleerivate retseptoritega CD96, CD226 või TIGIT NK- ja T-rakkude pinnal.54–56,58,59 CD155 seondumispartnerite kindlaksmääramiseks analüüsisime. kasvajavastased vastused hiirte kopsudes, mis sisaldavad 4T1-lutsiferaas+ rakke (4T1-Luc) (joonis 5A). Kinnitasime in vivo pildistamissüsteemi (IVIS) abil, et metsiktüüpi ja Il22 / hiirtel oli kasvajarakkude külvamine 5. päeval pärast süstimist sarnane ning kasvaja koormuse erinevused suurenesid kahe nädala jooksul (joonised 5B ja 5C). . Tõepoolest, NK-rakkude, kuid mitte teiste rakutüüpide IFNg tootmise defekt näitas humoraalsete efektormehhanismide kadumist (joonised 5D, 5E ja S6A) ja korreleerus suurema kasvajakoormusega (joonis S6B). Seda efekti leiti pidevalt mudelis Line{30}} sc (joonised S6C–S6E). Kiibi tsütomeetria abil kontrollitud 60 proovi 4T1-kopsu metastaase kandvatest hiirtest näitasid CD155 suurenenud ekspressiooni WT metastaatilistes fookustes, kuid mitte Il22 / loomade puhul (joonised 5F ja S6F). Leidsime NK-rakkude suurema infiltratsiooni Il22 / kuid mitte WT loomade metastaatilistesse fookustesse, mis viitab kõrgemale aktivatsioonile ja kinnitab sõltuvust NK-rakkudest kui kasvajavastastest efektorrakkudest (joonis 5F). CD226, kuid mitte TIGIT või CD96, ekspresseerisid NK-rakud ja vähemal määral CD8+ T-rakud metsiktüüpi ja Il22 / loomade kopsudes (joonised 5G ja S6G-S6H). CD226 on kaasretseptor, mis on oluline NK ja CD8 T-rakkude efektorfunktsioonide aktiveerimiseks. Seetõttu asusime uurima selle patofüsioloogilist tähtsust oma mudelis.61–64
cistanche tubulosa - parandab immuunsüsteemi
CD226 blokaad tühistab IL-22-puudulike loomade antimetastaatilise fenotüübi
Kasvaja mikrokeskkonnas esinev liigne CD155-vahendatud signaalimine võib esile kutsuda CD226 internaliseerumise ja lagunemise efektorrakkudes.61,63 Et piiritleda liigse CD155 ekspressiooni rolli CD226-l ja sellele järgneval kasvajavastasel reaktsioonil, süstisime 4T1 kontroll- ja Pvr+ rakud iv Il22/ hiirtel ja kaks rühma said ka anti-CD226 blokeerivat antikeha (480.1) (joonis 6A). Nii Pvr + rakud kui ka CD226 blokaad võivad sarnaselt soodustada kopsu metastaase Il22 / hiirtel ja need toimed ei sünergiseerunud (joonis 6B). Sarnaselt meie varasematele metsiktüüpi loomadel tehtud tähelepanekutele piisas sellest NK-rakkude IFNg tootmise pärssimiseks (joonis 6C). Lõpuks tuvastasime Pvr+-süstitud hiirtel NK-rakkude CD226 ekspressiooni vähenemise võrreldes kontrollrakkudega. See korreleerus nende NK-rakkude vähenenud võimega toota IFNg (joonis 6D). Lisaks uurisime agonistliku TIGIT-antikeha (IG9) potentsiaali inhibeerida NK-rakkude aktivatsiooni Il22 / loomadel ja CD96 blokaadi (3.3), et vältida NK-rakkude funktsiooni pärssimist (joonis 6E). Ei TIGIT agonist ega CD96 antagonist ei muutnud metastaaside arvu võrreldes Il22 / loomadega, kes said vastavalt kontroll- või Pvr+ 4T1 rakke (joonis 6F). Aktiveerituna võib TIGIT inhibeerida IFNg tootmist CD8+ T-st, kuid mitte NK-rakkudest (joonis 6G). Seega vallandab IL-22- CD155 telg NK-rakkudes CD226 ekspressiooni vähenemise ja muudab need kasvaja mikrokeskkonnas inertseks.
CD155 ekspressioon täiendab rinna- ja kopsuvähiga patsientidel IL-22 geenisignatuuri
Lõpuks hindasime CD155 kliinilist tähtsust IL-22-IL-22RA1 telje kontekstis. Ainuüksi CD155 ekspressioon on seotud ebasoodsa prognoosiga mitmesuguste vähiüksuste puhul.54 Analüüsisime vähi genoomi atlase (TCGA) kopsu adenokartsinoomi (TCGA: LUAD, n=504) ja HER2- RNA järjestuse andmeid. positiivsed patsiendiproovid invasiivse rinnakartsinoomi (TCGA: BRCA, n=110) andmekogumitest. Keskendusime peamistele IL-22-seotud geenidele: IL22RA1, IL22RA2, IL10RB ja PVR. Patsientide rühmade kihistamiseks kasutasime aglomeratiivset klastrite moodustamist, järelevalveta rühmitamise meetodit, mille tulemuseks oli kolm peamist klastrit (joonised 7A ja 7B). See näitas eristavaid geeniekspressiooni mustreid: klaster 0 (IL22RA1hi, IL22RA2lo, IL10RBmed, PVRhi), klaster 1 (IL22RA1lo, IL22RA2hi, IL10RBhi, PVRlo) ja klaster 2 (IL22RA1lo, IL22RA2lo, IL10RBlo, PVRmed) (joonis 7C). Need klastrid olid nendes kahes kohordis ühtlaselt jaotunud (joonis 7D). Klastris 0 ja LUAD-i andmestiku klastri 2 patsientide elulemus oli halvem kui klastri 1 patsientidel (joonis 7E). Klastrite 1 ja 2 ellujäämine ei erinenud kummaski kohordis (joonis 7E). Lisaks arvutasime klastrite 0 ja 1 jaoks piiratud keskmised elulemusajad (RMST), et kvantifitseerida eeldatavas elulemuses kuni viieaastase jälgimisperioodi erinevus, mille tulemuseks oli LUAD puhul 361,18 päeva ja BRCA puhul 93,23 päeva (joonis 7F). Klastrites 0 ja 1 oli patoloogiliste haiguste staadiumide sagedus nende sees LUAD-is, kuid mitte BRCA kohordis (joonis 7G). Oluline on see, et sellised ellujäämise erinevused klastrite (IL22RA1hiPVRhi) ja 1 (IL22RA1loPVRlo) vahel tulenevad peamiselt patsientidest, kellel on diagnoositud haiguse varases (I ja II), kuid mitte kaugelearenenud staadiumis (III ja IV) (joonis S7A). Iga geeni mõju hindamiseks ellujäämisele kasutasime Coxi proportsionaalsete ohtude mudelit. Nii IL22RA1 (riskisuhe [HR]=1.23) kui ka PVR (HR=1.28) mõjutavad ellujäämist, samas kui IL22RA2 ja IL10RB ei muutnud ohtu LUAD-i kohordis (joonis S7B). Veelgi enam, ainult CD226 (p=0.06), kuid mitte TIGIT ega CD96, mõjutas ellujäämist kooskõlas meie tulemustega prekliinilistes mudelites (joonis S7B). Kasutasime LUAD kohordis CIBERSORTx dekonvolutsiooni algoritmi, et hinnata, kas meie klastrite geeniekspressiooni mustrid mõjutavad immuunrakkude infiltratsiooni patsientidel.65 Huvitaval kombel on klastris 1 aktiveeritud NK-rakkude CIBERSORTx ühikute arv klastritega võrreldes suurenenud. 0 ja 2 LUAD-patsientidel, samas kui puhkeolekus NK-rakkudes ega aktiveeritud CD{80}}-mälu T-rakkudes (joonis S7C) ei olnud erinevusi, BRCA kohordis oli sarnane suundumus (joonis S7D). Need kliiniliste kohortide tulemused näitavad koos T-rakkudest pärineva IL-22 ja CD155 vahelise regulatiivse seose olulisust.
Joonis 5. CD226 ekspressioon on kõrgem NK-rakkudel Il22–/– hiirtel
ARUTELU
Selles uuringus avastasime mehhanismi, mille abil T-rakud toodavad IL-i-22, et soodustada kopsumetastaase kopsu- ja rinnavähi hiiremudelites. Mehhaaniliselt toodavad T-rakud kopsu metastaatilistes fookustes, peamiselt CD4+, IL-22, mis annab signaali otse oma vähirakkudes ekspresseeritud retseptori kaudu, soodustades metastaasi soodustava molekuli CD155 ekspressiooni.{{ 5}}, 58, 59 Vaatamata CD155 hästi uuritud vähivastasele ekspressioonile ning selle sisemisele ja välisele rollile vähi progresseerumisel54, on pahaloomulistes rakkudes CD155 regulatsiooni eest vastutav rada raskesti mõistetav.66–68 Näitasime, et IL{{ 15}} suurendas CD155 ekspressiooni kopsu- ja rinnavähi rakuliinides in vitro ja in vivo, samas kui selle konstitutiivne ekspressioon võimaldas metastaase Il22 / hiirtel, võrreldes kontroll- ja puudulike rakkudega. CD155 suurenenud ekspressioon kasvaja kopsu mikrokeskkonnas viis kaasstimuleeriva molekuli CD226 vähenemiseni NK-rakkudel, vähendades nende lokaliseerumist metastaasideni ja IFNg tootmist, mis korreleerus suurema kasvajakoormusega. Varasemates uuringutes tuvastasime IL-22-tootvate T-rakkude kuhjumise mitteväikerakk-kopsukartsinoomi (NSCLC) patsientide kasvajaproovides.12,48 Oleme näidanud, et vähirakud käivitavad NLRP3- sõltuv IL-1b sekretsioon, mis indutseerib sellist IL-22 tootmist peamiselt Th-rakkudest.18 Väärib märkimist, et Th-rakkude tsütokiiniprofiilide erinevuste tõttu inimestel tekib IL{{ 31}} indutseeritakse ka Th1 rakkudes. On mõeldav, et see võib kahjustada kasvajavastast immuunvastust. Oluline on see, et sellised Th1 variandid võivad osaliselt seletada vähi hüperprogressiooni T-rakkude aktiveerimisel pärast kontrollpunkti blokaadi.69 Kooskõlas meie varasemate tähelepanekutega kinnitasime IL-22-tootvate CD4+ ja CD{{38} kogunemist. } T-rakud, aga ka NK1.{40}} rakud kasvajaga süstitud loomade kopsude metastaatilises nišis. Oluline on märkida, et meie mudelites täheldasime selliste IL-22-CD8+ T-rakkude akumuleerumisel tüvespetsiifilisi erinevusi. Siiski piisas IL-22 tootmise kaotamisest küpsetes T-rakkudes kokku, et kokku võtta IL-22-puudulike loomade puhul täheldatud toime.70 Samuti CD4+ T-rakkude adoptiivne ülekandmine rakkudesse. Rag / II22 / hiirtel piisas kopsumetastaaside esilekutsumiseks, näidates täpselt Th-rakkude ülimat rolli IL-i -22 allikana. Vastupidi, meie varasemad leiud viitavad sellele, et hoolimata CD8+ T-rakkude kuhjumisest kasvajaproovides, on nende panus IL-22 kogumisse väike.48 Igal juhul on sellise CD-22 iseloomustus }} IL-22-tootvad T-rakud on hädavajalikud nende kasvajaeelsete või kasvajavastaste omaduste hoolikaks hindamiseks, kuna selle alampopulatsiooni kohta ilmnevad uued andmed.71,72 Samuti kaalub NK- ja NKT-rakkude esmane roll kasvaja kontrollimisel üles nende kasvajavastaste omaduste potentsiaalne panus metastaaside moodustumisse IL-22 kaudu, mida täheldati Rag/II22/adoptiivse ülekande katses, kus kasutati loomi, kellel puuduvad küpsed T-rakud, kuid neil on funktsionaalsed NK-rakud.37 Seda hüpoteesi toetavad ka meie leiud metastaseerunud rakkudes. koldeid, kus NK-rakke leiti rohkem kui tsütotoksilisi T-rakke, tõstes esile NK-rakud kui olulised osalejad kasvaja kontrollis IL-i puudumisel-22. Oluline on märkida, et keskendusime IL-22 tootjatele metastaatilistes koldes kopsudes, kuid ei võtnud arvesse nende päritolu, klonaalsust ega levikut veres või lümfoidorganites. Lisaks soodustavad erinevad IL-22 allikad kasvaja progresseerumist kontekstist sõltuval viisil, mida vahendab selle tsütokiini pleiotroopne toime. Samamoodi võivad sarnased IL{66}}tootvad rakud erinevates sektsioonides (kops vs põrn vs lümfisõlmed) erinevalt mõjutada kasvajaeelseid fenotüüpe või neil ei pruugi olla mingit funktsiooni, olenevalt kontekstist, mida tuleb täiendavalt uurida. Vähiuuringud on korduvalt teatanud, et IL-22 mõjutab primaarsete kasvajate arengut ja kasvu ning lõpuks ka neoplastilist progresseerumist.26,73–76 Seda arusaama põhjendatakse peamiselt võimega soodustada vähirakkude migratsiooni, invasiooni ja tüvirakkude teket. in vitro ja soodustab seega metastaaside teket.76,77 Oluline on see, et IL-22 ablatsioon võib leevendada immunosupressiivset mikrokeskkonda kopsukartsinoomi Kras-mutantse mudeli korral.14 Käesolevas uuringus näitasime, et suurenenud metastaaside koormus oli IL-22 otsene mõju dissemineerunud IL-22RA1+ kasvajarakkudele, mille tulemuseks oli suurenenud kolooniate väljakasv. Oluline on see, et meie andmed ei välista ametlikult mõju mittekasvajarakkudele. Sellisena on Giannou et al.78 laialdaselt rõhutanud IL-22 mõju kasvajarakkude levikule endogeenselt ekspresseeritud IL-22R sisemise toime kaudu.
Joonis 6. CD226 signaalimine on NK-rakkudest IFNg tootmiseks hädavajalik
Näitasime, et Pvr on üks geenidest, mille ekspressioon vähirakkudes on IL-22-ravi korral suurenenud. Selles kontekstis moodustasid CD155-puudulikud rakud vähe metastaase, nii metsiktüüpi kui ka Il22/hiirtel, ja mis kõige tähtsam, CD155 taastoomine võimaldas meil taastada metastaatilise fenotüübi. CD155 olemuslikku rolli vähirakkudes on hästi uuritud ja see mõjutab teadaolevalt külvamist, kasvajarakkude proliferatsiooni ja migratsiooni.56,57 Kuid Pvr-rakkudel ei olnud meie kätes pärsitud proliferatsiooni ega migratsiooni ega kasvajarakkude külvamist. ei mõjutanud Il22/hiirtel. Algselt antigeeni esitlevatel rakkudel tuvastatud CD155 toimib kasvaja progresseerumise välise promootorina, mis pärsib NK- ja T-rakkude funktsiooni, seondudes nende pinnal CD96 ja TIGIT-ga ning indutseerib CD226.56,61–64,79–85Due internaliseerumist ja allareguleerimist. Immunosupressiivse funktsiooni tõttu avaldab CD155 vähi- ja peremeesrakkudes metastaase soodustavaid omadusi ja seda soovitatakse kontrollpunkti inhibeerimise blokaadi sihtmärgiks.61,86 NK-rakud saavad CD226 kaudu antigeeni esitlevatelt rakkudelt kaasstimuleeriva signaali. 87 Kuid CD226 liigne stimuleerimine kasvaja mikrokeskkonnas põhjustab internaliseerumist ja lagunemist.63 Sellele neutraliseerivad tavaliselt CD96 ja TIGIT, mis seovad CD155 suurema afiinsusega.58 Huvitaval kombel indutseerivad 4T1 rakud CD226 allareguleerimist kasvajasse infiltreerudes. lümfotsüüdid ja pärsivad IFNg tootmist.88 Siin näitasime, et IL-22 puudulikkus säilitas CD226 ekspressiooni NK- ja CD8+ T-rakkudel. Kuid ainult NK-rakkudel oli dramaatiliselt suurem IFNg tootmisvõime ja need olid pöördvõrdelises korrelatsioonis metastaatilise koormusega. Huvitav on see, et TIGIT-i signaaliülekande aktiveerimine meie uuringus pärssis IFNg tootmist CD8+ T, kuid mitte NK-rakkudest ega olnud piisav metastaatilise koormuse suurendamiseks. Samamoodi ei olnud teist CD155 retseptorit, CD96, Il22 / hiirtel erinevalt reguleeritud ega selle inhibeerimine takistanud metastaase, mis näitab, et CD155 ei suru meie mudelis alla NK-rakke CD96 kaudu. See tõstab esile kasvajavastaste vastuste rakutüübispetsiifilise reguleerimise CD155 ja selle erinevate sidumispartnerite poolt.
Tistanche toidulisandi eelised - kuidas tugevdada immuunsüsteemi
Cistanche Enhance Immunity toodete vaatamiseks klõpsake siin
【Küsi lisa】 E-post:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
CD155 mõju prognoosile ja selle rollile kopsu-, rinna-, käärsoole- ja muud tüüpi vähi patogeneesis on kindlaks tehtud.79–85 IL-22 ja sellega seotud geenide prognostilise tähtsuse kohta on palju tõendeid. erinevates vähiüksustes.10,21,27,75,89–91 Mõned uuringud ei ole siiski teatanud IL-22 ekspressiooni mõjust ellujäämisele.12 Kuigi need lahknevused võivad olla tingitud heterogeensusest Patsientide populatsioonide, proovide võtmise ja aruandlusprobleemide puhul keskenduvad paljud neist uuringutest ühele IL-22 signaaliülekandega seotud geenile. Siin kasutasime aglomeratiivset klastrit, et tuvastada IL22RA1, IL22RA2, IL10RB ja PVR ekspressioonimustrid LUAD ja BRCA kohortides TCGA-s ning siduda need kliiniliste andmetega. Siin tuvastasime nende geenide kolm ekspressioonimustrit: muster 0 (IL22RA1hi, IL22RA2lo, PVRhi), muster 1 (IL22RA1lo, IL22RA2hi, PVRlo) ja muster 2 (IL22RA1lo, IL22RA2lo, PVRmed). Tuvastasime, et IL22RA1 kõrge ekspressioon langes kokku PVR kõrge ekspressiooniga, mis tõi kaasa ka halva üldise elulemuse, eriti patsientidel, kellel diagnoositi varajased (I ja II), kuid mitte kaugelearenenud (III ja IV) patoloogilised staadiumid. selle mehhanismi etapispetsiifiline roll. Seevastu IL22RA2 (tuntud ka kui IL-22BP) kõrge ekspressioon korreleerus madalama PVR ekspressiooni ja parema elulemusega.18,34 Kolmas muster vastas täiesti madalale ekspressioonile ja esindas immunoloogiliselt külmi kasvajaid.92 Samamoodi. CIBERSORTx dekonvolutsioon näitas, et klastris 1, mida iseloomustab kõrge IL22RA2 ekspressioon, on võrreldes teiste klastritega aktiveeritud, kuid mitte puhkeolekus olevate NK-rakkude geenisignatuur. Mitmetes NSCLC kliinilistes uuringutes on näidatud, et CD226 ekspressioon kihistab patsiente tulemuste järgi.93 Kuid CD226 translatsioonieelse ja -järgse regulatsiooni kahe viisi tõttu ei kajastu ekspressioon alati mRNA sekveneerimisandmetes.94 Seetõttu keskenduvad uuringud, mis keskenduvad CD226 translatsioonijärgse regulatsiooni kohta hinnake selle ekspressiooni kliinilistes proovides, kasutades antikehade värvimist.63 Sellegipoolest, kui küsitleti TCGA andmestikku, mis käsitles CD155 sidumispartnerite seost ellujäämisega, siis ainult CD226 kaldus prognooside paranemisele (log (HR) {{57) }}.24, p=0.06), samas kui TIGIT ja CD96 ei näidanud korrelatsiooni ellujäämisega. Oluline on see, et IL-22BP sekretsiooniks loodud kasvajarakud moodustasid vähem metastaase, mis tõstab esile IL-22 raja potentsiaali sihipäraseks terapeutiliseks sekkumiseks. See võib neutraliseerida kasvaja CD155 üleekspressiooni, kuna selle otsene sihtimine on kaasretseptorite keeruka võrgustiku tõttu endiselt keeruline. Täiendavalt tuleb märkida, et IL-22-i neutraliseerimise pikaajaline toime metastaasidele on teadmata, kuid sellel võib olla otsene mõju T-rakkude terapeutilisele kaalutlusele või IL-22-i neutraliseerimisele antikehi kasutades. kasulik ohutusprofiil, nagu Fezakinumab (katse NCT01941537) või konstrueeritud IL-22 struktuuripõhise disainiga.39,95 Kokkuvõttes tuvastasime IL-22-indutseeritud CD155 üleekspressiooni kasvajarakkudes mehhanismina, mis soodustab metastaatilise väljakasvu. See oluline roll prognoosimisel rõhutas IL-22 potentsiaali vähi ravi sihtmärgina. Siiani on IL-22 neutraliseerimine välja pakutud peamiselt autoimmuunhaiguste ravistrateegiana.31,49 Meie andmed IL-22BP kui IL-22 neutraliseerija kohta, mis fenokopeeris globaalne IL-22 defitsiit, mis toetas terapeutilist potentsiaali IL-22-IL-22R1 telje sihtimisel ning seda tuleks täiendavalt uurida prekliinilistes ja kliinilistes uuringutes.
VIITED
1. Hanahan, D. ja Weinberg, RA (2011). Vähi tunnused: järgmine põlvkond. Cell 144, 646–674. https://doi.org/10.1016/j.cell.2011. 02.013.
2. Massague, J. ja Obenauf, AC (2016). Metastaatiline kolonisatsioon ringlevate kasvajarakkude poolt. Loodus 529, 298–306. https://doi.org/10.1038/ nature17038.
3. Renner, P., Rovira, J., Klein, C., Schlitt, HJ, Geissler, EK ja Kroemer, A. (2014). KLRG1(+) looduslikud tapjarakud kaitsevad kopsu metastaatilise haiguse eest immunoseire abil. OncoImmunology 3, e28328. https://doi.org/10.4161/onci.28328.
4. Mohme, M., Riethdorf, S. ja Pantel, K. (2017). Ringlevad ja levivad kasvajarakud - immuunseire ja põgenemise mehhanismid. Nat. Rev. Clin. Oncol. 14, 155–167. https://doi.org/10.1038/nrclinonc. 2016.144.
5. Briukhovetska, D., Do¨ rr, J., Endres, S., Libby, P., Dinarello, CA ja Kobold, S. (2021). Interleukiinid vähis: bioloogiast teraapiani. Nat. Rev. Cancer 21, 481–499. https://doi.org/10.1038/s41568-021-00363-z.
6. Kitamura, T., Qian, BZ ja Pollard, JW (2015). Immuunrakkude metastaaside soodustamine. Nat. Rev. Immunol. 15, 73–86. https://doi.org/10.1038/ nri3789.
7. Galon, J. ja Bruni, D. (2020). Kasvaja immunoloogia ja kasvaja areng: põimunud ajalood. Immuunsus 52, 55–81. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.12.018.
8. Page`s, F., Mlecnik, B., Marliot, F., Bindea, G., Ou, FS, Bifulco, C., Lugli, A., Zlobec, I., Rau, TT, Berger, MD jt. (2018). Immunoscore'i konsensuse rahvusvaheline valideerimine käärsoolevähi klassifitseerimiseks: prognostiline ja täpsusuuring. Lancet 391, 2128–2139. https://doi. org/10.1016/S0140-6736(18)30789-X.
9. Rui, J., Chunming, Z., Binbin, G., Na, S., Shengxi, W. ja Wei, S. (2017). IL-22 soodustab rinnavähi progresseerumist, reguleerides HOXB-AS5. Oncotarget 8, 103601–103612. https://doi.org/10.18632/ oncotarget.22063.
10. Kryczek, I., Lin, Y., Nagarsheth, N., Peng, D., Zhao, L., Zhao, E., Vatan, L., Szeliga, W., Dou, Y., Owens, S ., et al. (2014). IL-22(+)CD4(+) T-rakud soodustavad kolorektaalse vähi tüve teket STAT3 transkriptsioonifaktori aktiveerimise ja metüültransferaasi DOT1L indutseerimise kaudu. Immunity 40, 772–784. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2014.03.010.
11. Jiang, R., Tan, Z., Deng, L., Chen, Y., Xia, Y., Gao, Y., Wang, X. ja Sun, B. (2011). Interleukiin -22 soodustab inimese hepatotsellulaarset kartsinoomi, aktiveerides STAT3. Hepatology 54, 900–909. https://doi.org/10.1002/hep.24486.
12. Kobold, S., Vo¨ lk, S., Clauditz, T., K€ augš, NJ, Minner, S., Tufman, A., D€ uwell, P., Lindner, M., Koch, I ., Heidegger, S., et al. (2013). Interleukiini -22 ekspresseeritakse sageli väikese- ja suurrakulise kopsuvähi korral ning see soodustab keemiaravi suhtes resistentsete vähirakkude kasvu. J. Thorac. Oncol. 8, 1032–1042. https://doi.org/10.1097/JTO.0b013e31829923c8.
13. Hernandez, P., Gronke, K. ja Diefenbach, A. (2018). Konks-22: interleukiin-22 ja vähk. Eur. J. Immunol. 48, 15–31. https://doi.org/10. 1002/eji.201747183.
14. Khosravi, N., Caetano, MS, Cumpian, AM, Unver, N., De la Garza Ramos, C., Noble, O., Daliri, S., Hernandez, BJ, Gutierrez, BA, Evans, SE, et al. (2018). IL22 soodustab Kras-mutantset kopsuvähki, kutsudes esile protuumori immuunvastuse ja kaitstes tüve omadusi. Cancer Immunol. Res. 6, 788–797. https://doi.org/10.1158/ 2326-6066.CIR-17-0655. 15. Li, H., Mou, Q., Li, P., Yang, Z., Wang, Z., Niu, J., Liu, Y., Sun, Z., Lv, S., Zhang, B ja Yin, C. (2019). MiR-486-5p pärsib IL-22--indutseeritud rinnavähirakkude epiteeli-mesenhümaalset üleminekut, represseerides Dock1. J. Cancer 10, 4695–4706. https://doi.org/10.7150/jca.30596.
16. Kim, K., Kim, G., Kim, JY, Yun, HJ, Lim, SC ja Choi, HS (2014). Interleukiin-22 soodustab epiteelirakkude transformatsiooni ja rinnakasvaja teket MAP3K8 aktiveerimise kaudu. Kartsinogenees 35, 1352–1361. https:// doi.org/10.1093/carcin/bgu044.
17. Katara, GK, Kulshrestha, A., Schneiderman, S., Riehl, V., Ibrahim, S. ja Beaman, KD (2020). Interleukiin-22 soodustab pahaloomuliste kahjustuste teket spontaanse rinnavähi hiiremudelis. Mol. Oncol. 14, 211–224. https://doi.org/10.1002/1878-0261.12598.
18. Huber, S., Gagliani, N., Zenewicz, LA, Huber, FJ, Bosurgi, L., Hu, B., Hedl, M., Zhang, W., O'Connor, W., Jr., Murphy, AJ jt. (2012). IL-22BP-d reguleerib põletik ja see moduleerib kasvaja teket soolestikus. Loodus 491, 259–263. https://doi.org/10.1038/ nature11535.
19. Perez, LG, Kempski, J., McGee, HM, Pelzcar, P., Agalioti, T., Giannou, A., Konczalla, L., Brockmann, L., Wahib, R., Xu, H., et al. (2020). TGF-beeta signaaliülekanne Th17 rakkudes soodustab IL-22 tootmist ja koliidiga seotud käärsoolevähki. Nat. Commun. 11, 2608. https://doi.org/10.1038/ s41467-020-16363-w.
20. Meyer, A., Stark, M., Karstens, JH, Christiansen, H. ja Bruns, F. (2012). Koljupõhja Langerhansi rakkude histiotsütoos: kas väikese annuse kiiritusravi on efektiivne? Kohtuasi Rep. Oncol. Med. 2012, 789640. https:// doi.org/10.1155/2012/789640.
21. Zhuang, Y., Peng, LS, Zhao, YL, Shi, Y., Mao, XH, Guo, G., Chen, W., Liu, XF, Zhang, JY, Liu, T. jt. (2012). Suurenenud kasvajasisene IL-22-tootvad CD4(+) T-rakud ja Th22-rakud korreleeruvad maovähi progresseerumisega ja ennustavad patsientide kehva ellujäämist. Cancer Immunol. Immuunsus. 61, 1965–1975. https://doi.org/10.1007/s{11}}.
22. Chen, X., Wang, Y., Wang, J., Wen, J., Jia, X., Wang, X. ja Zhang, H. (2018). T-helper 22 rakkude, interleukiini-22 ja müeloidist pärinevate supressorrakkude kuhjumine soodustab eakatel patsientidel maovähi progresseerumist. Oncol. Lett. 16, 253–261. https://doi.org/10.3892/ol.2018.{12}}.
23. Doulabi, H., Rastin, M., Shabahangh, H., Maddah, G., Abdollahi, A., Nosratabadi, R., Esmaeili, SA ja Mahmoudi, M. (2018). Inimese käärsoolevähi erinevates staadiumides IL-17/IL-22 koos tootvate Th22, Th17 ja CD4(+) rakkude analüüs. Biomed. Pharmacother. 103, 1101–1106. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2018.04.147.
24. Zeng, H., Liu, Z., Wang, Z., Zhou, Q., Qi, Y., Chen, Y., Chen, L., Zhang, P., Wang, J., Chang, Y ., et al. (2020). Intratumoraalsed IL22-tootvad rakud määratlevad immunoevasiivse alatüübi lihasinvasiivse põievähi (2017). IL-22BP kaitsefunktsioon isheemia-reperfusiooni ja atsetaminofeenist põhjustatud maksakahjustuse korral. J. Immunol. 199, 4078–4090. https://doi. org/10.4049/jimmunol.1700587.
25. Jiang, R., Wang, H., Deng, L., Hou, J., Shi, R., Yao, M., Gao, Y., Yao, A., Wang, X., Yu, L ja Sun, B. (2013). IL-22 on seotud inimese käärsoolevähi tekkega STAT3 aktiveerimise kaudu. BMC Cancer 13, 59. https://doi.org/10.1186/1471-2407-13-59.
26. Fukui, H., Zhang, X., Sun, C., Hara, K., Kikuchi, S., Yamasaki, T., Kondo, T., Tomita, T., Oshima, T., Watari, J ., et al. (2014). Vähiga seotud fibroblastide toodetud IL-22 soodustab maovähirakkude invasiooni STAT3 ja ERK signaaliülekande kaudu. Br. J. Cancer 111, 763–771. https://doi.org/ 10.1038/bjc.2014.336.
27. Liu, T., Peng, L., Yu, P., Zhao, Y., Shi, Y., Mao, X., Chen, W., Cheng, P., Wang, T., Chen, N ., et al. (2012). Tsirkuleerivate Th22 ja Th17 rakkude arvu suurenemine on seotud kasvaja progresseerumisega ja patsiendi ellujäämisega inimese maovähi korral. J. Clin. Immunol. 32, 1332–1339. https://doi.org/10.1007/ s10875-012-9718-8.
28. Niccolai, E., Taddei, A., Ricci, F., Rolla, S., D'Elios, MM, Benagiano, M., Bechi, P., Bencini, L., Ringgressi, MN, Pini, A. ., et al. (2016). Kasvajasisesed IFN-gamma-d tootvad Th22 rakud korreleeruvad TNM-i staadiumiga ja pankreasevähi halvimate tulemustega. Clin. Sci. 130, 247–258. https:// doi.org/10.1042/CS20150437.
29. Xu, X., Tang, Y., Guo, S., Zhang, Y., Tian, Y., Ni, B. ja Wang, H. (2014). Interleukiini 22-tootvate CD4+ T-rakkude suurenenud intratumoraalne interleukiin 22 tase ja sagedus korreleeruvad pankreasevähi progresseerumisega. Pankreas 43, 470–477. https://doi.org/10.1097/MPA.{10}}.
30. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirotšnitšenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP ja Pestka, S. (2001). Funktsionaalse interleukiini-22 (IL-22) retseptori kompleksi tuvastamine: IL-10R2 ahel (IL-10Rbeta) on mõlema IL{{7 ühine ahel. }} ja IL-22 (IL- 10-seotud T-rakkudest tulenev indutseeritav faktor, IL-TIF) retseptori kompleksid. J. Biol. Chem. 276, 2725–2732. https://doi.org/10.1074/jbc.M0078 37200.
31. Ouyang, W. ja O'Garra, A. (2019). IL-10 perekondlikud tsütokiinid IL-10 ja IL- 22: alusteadusest kliinilise tõlkeni. Immunity 50, 871–891. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.03.020.
32. Kempski, J., Giannou, AD, Riecken, K., Zhao, L., Steglich, B., L€ ucke, J., Garcia-Perez, L., Karstens, KF, Wo¨ stemeier, A. , Nawrocki, M. et al. (2020). IL22BP vahendab lümfotoksiini kasvajavastast toimet kolorektaalsete kasvajate vastu hiirtel ja inimestel. Gastroenteroloogia 159, 1417– 1430.e3. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2020.06.033.
33. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirotšnitšenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP ja Pestka, S. (2001). IL-22-ga seonduva ja selle aktiivsust neutraliseeriva uudse lahustuva retseptori tuvastamine, kloonimine ja iseloomustamine. J. Immunol. 166, 7096–7103. https://doi. org/10.4049/jimmunol.166.12.7096.
34. Dudakov, JA, Hanash, AM ja van den Brink, MRM (2015). Interleukiin-22: immunobioloogia ja patoloogia. Annu. Rev. Immunol. 33, 747–785. https://doi.org/10.1146/annurev-immunol-032414-112123.
35. Wolk, K., Kunz, S., Witte, E., Friedrich, M., Asadullah, K. ja Sabat, R. (2004). IL-22 suurendab kudede kaasasündinud immuunsust. Immunity 21, 241–254. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2004.07.007.
36. Sabat, R., Ouyang, W. ja Wolk, K. (2014). IL-22-IL-22R1 süsteemi ravivõimalused. Nat. Rev. Drug Discov. 13, 21–38. https://doi. org/10.1038/nrd4176.
37. Zenewicz, LA, Yancopoulos, GD, Valenzuela, DM, Murphy, AJ, Stevens, S. ja Flavell, RA (2008). Kaasasündinud ja adaptiivne interleukiin-22 kaitseb hiiri põletikulise soolehaiguse eest. Immunity 29, 947–957. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2008.11.003.
38. Gronke, K., Herna´ndez, PP, Zimmermann, J., Klose, CSN, Kofoed Branzk, M., Guendel, F., Witkowski, M., Tizian, C., Amann, L., Schumacher, F. et al. (2019). Interleukiin-22 kaitseb soolestiku tüvirakke genotoksilise stressi eest. Loodus 566, 249–253. https://doi.org/10.1038/ s41586-019-0899-7.
39. Saxton, RA, Henneberg, LT, Calafiore, M., Su, L., Jude, KM, Hanash, AM ja Garcia, KC (2021). Interleukiini-22 kudesid kaitsvaid funktsioone saab struktuuripõhise disaini abil lahutada põletikuvastastest toimetest. Immuunsus 54, 660–672.e9. https://doi.org/10. 1016/j.immuni.2021.03.008.
40. Dumoutier, L., Louahed, J. ja Renauld, JC (2000). IL-10--seolise T-rakkudest tuletatud indutseeritava faktori (IL-TIF), uudse tsütokiini, mis on struktuurselt sarnane IL-10-ga ja mida indutseerib IL-9, kloonimine ja iseloomustamine. J. Immunol. 164, 1814–1819. https://doi.org/10.4049/jimmunol.164. 4.1814.
41. Lejeune, D., Dumoutier, L., Constantinescu, S., Kruijer, W., Schuringa, JJ ja Renauld, JC (2002). Interleukiin-22 (IL-22) aktiveerib JAK/STAT, ERK, JNK ja p38 MAP kinaasi radasid roti hepatoomi rakuliinis. Teed, mis on jagatud IL-ga ja sellest erinevad -10. J. Biol. Chem. 277, 33676–33682. https://doi.org/10.1074/jbc.M204204200.
42. Nagalakshmi, ML, Rascle, A., Zurawski, S., Menon, S. ja de Waal Malefyt, R. (2004). Interleukiin-22 aktiveerib STAT3 ja indutseerib käärsoole epiteelirakkude poolt IL-10. Int. Immunopharmacol. 4, 679–691. https://doi. org/10.1016/j.intimp.2004.01.008.
43. Mitra, A., Raychaudhuri, SK ja Raychaudhuri, SP (2012). IL-22-indutseeritud rakkude proliferatsiooni reguleerib PI3K/Akt/mTOR signaalikaskaad. Tsütokiin 60, 38-42. https://doi.org/10.1016/j.cyto.2012.06.316.
44. Bachmann, M., Ulziibat, S., H€ ardle, L., Pfeilschifter, J., and M€ uhl, H. (2013). IFNalpha muudab IL-22 tsütokiiniks, mis aktiveerib tõhusalt STAT1 ja selle allavoolu sihtmärgid. Biochem. Pharmacol. 85, 396–403. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2012.11.004.
45. Zheng, Y., Valdez, PA, Danilenko, DM, Hu, Y., Sa, SM, Gong, Q., Abbas, AR, Modrusan, Z., Ghilardi, N., de Sauvage, FJ ja Ouyang , W. (2008). Interleukiin-22 vahendab varajast peremeesorganismi kaitset bakteriaalsete patogeenide kinnitumise ja eemaldamise vastu. Nat. Med. 14, 282–289. https://doi. org/10.1038/nm1720.
46. Andoh, A., Zhang, Z., Inatomi, O., Fujino, S., Deguchi, Y., Araki, Y., Tsujikawa, T., Kitoh, K., Kim-Mitsuyama, S., Takayanagi , A. et al. (2005). Interleukiin-22, mis kuulub IL-10 alamperekonda, kutsub esile põletikulisi reaktsioone käärsoole subepiteliaalsetes müofibroblastides. Gastroenteroloogia 129, 969–984. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2005.06.071.
47. Tufman, A., Huber, RM, Vo¨ lk, S., Aigner, F., Edelmann, M., Gamarra, F., Kiefl, R., Kahnert, K., Tian, F., Boulesteix, AL et al. (2016). Kopsuvähi ja teiste kopsuhaigustega patsientide loputuses on interleukiin-22 kõrgem. BMC Cancer 16, 409. https://doi.org/10.1186/s12885-016- 2471-2.
48. Voigt, C., May, P., Gottschlich, A., Markota, A., Wenk, D., Gerlach, I., Voigt, S., Stathopoulos, GT, Arendt, KAM, Heise, C., et al. (2017). Vähirakud indutseerivad kasvaja kasvu soodustamiseks interleukiini-22 tootmist mälu CD4(+) T-rakkudest interleukiini-1 kaudu. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 114, 12994–12999. https://doi.org/10.1073/pnas.{11}}.
49. Markota, A., Endres, S. ja Kobold, S. (2018). Interleukiini-22 sihtimine vähiravis. Humm. Vaktsiin. Immuunsus. 14, 2012–2015. https:// doi.org/10.1080/21645515.2018.1461300.
50. Ewens, A., Mihich, E. ja Ehrke, MJ (2005). Kauge metastaasid subkutaanselt kasvanud E0771 medullaarsest rinnanäärme adenokartsinoomist. Anticancer Res. 25, 3905–3915.
51. Sugiura, K. ja Stock, CC (1952). Uuringud kasvajate spektris. I. Metüülbis(2-kloroetüül)amiini ja 3-bis(2-kloroetüül)aminometüül-4-metoksümetüül-5-hüdroksü{{7} toime võrdlus }metüülpüridiin erinevate hiire ja roti kasvajate kasvule. Vähk 5, 382–402. https://doi.org/10.1002/1097-0142(195203)5:2<382::aidcncr2820050229>3.0.co;2-3.
52. Renier, N., Wu, Z., Simon, DJ, Yang, J., Ariel, P. ja Tessier-Lavigne, M. (2014). iDISCO: lihtne ja kiire meetod suurte koeproovide immunomärgistamiseks mahu kuvamiseks. Cell 159, 896–910. https://doi.org/10. 1016/j.cell.2014.10.010.
53. Kleinschmidt, D., Giannou, AD, McGee, HM, Kempski, J., Steglich, B., Huber, FJ, Ernst, TM, Shiri, AM, Wegscheid, C., Tasika, E. jt.
54. O'Donnell, JS, Madore, J., Li, XY ja Smyth, MJ (2020). CD1 kasvaja sisemised ja välised immuunfunktsioonid
55. Semin. Cancer Biol. 65, 189–196. https://doi.org/10.1016/j.semcancer.2019.11.013. 55. Molfetta, R., Zitti, B., Lecce, M., Milito, ND, Stabile, H., Fionda, C., Cippitelli, M., Gismondi, A., Santoni, A. ja Paolini, R (2020). CD155: multifunktsionaalne molekul kasvaja progresseerumisel. Int. J. Mol. Sci. 21, 922. https://doi.org/10.3390/ijms21030922.
56. Gao, J., Zheng, Q., Xin, N., Wang, W. ja Zhao, C. (2017). CD155, onkoimmunoloogiline molekul inimese kasvajates. Cancer Sci. 108, 1934–1938. https://doi.org/10.1111/cas.13324.
57. Morimoto, K., Satoh-Yamaguchi, K., Hamaguchi, A., Inoue, Y., Takeuchi, M., Okada, M., Ikeda, W., Takai, Y. ja Imai, T. ( 2008). Vähirakkude interaktsioon trombotsüütidega, mida vahendab Necl-5/polioviiruse retseptor, suurendab vähirakkude metastaase kopsudesse. Oncogene 27, 264–273. https://doi.org/10.1038/sj.onc.1210645.
58. Chan, CJ, Martinet, L., Gilfillan, S., Souza-Fonseca-Guimaraes, F., Chow, MT, Town, L., Ritchie, DS, Colonna, M., Andrews, DM ja Smyth, MJ (2014). Retseptorid CD96 ja CD226 vastanduvad looduslike tapjarakkude funktsioonide reguleerimisel. Nat. Immunol. 15, 431–438. https://doi.org/10.1038/ni.2850.
59. Fuchs, A., Cella, M., Giurisato, E., Shaw, AS ja Colonna, M. (2004). Tipptasemel: CD96 (kombatav) soodustab NK-raku sihtrakkude adhesiooni, toimides polioviiruse retseptoriga (CD155). J. Immunol. 172, 3994–3998. https://doi.org/10.4049/jimmunol.172.7.3994.
60. Jarosch, S., Ko¨hlen, J., Wagner, S., D'Ippolito, E. ja Busch, DH (2022). ChipCytometry valgu ja mRNA markerite multipleksseks tuvastamiseks inimese FFPE koeproovides. STAR protokoll. 3, 101374. https://doi.org/10.1016/j.xpro.2022.101374.
61. Chauvin, JM, Ka, M., Pagliano, O., Menna, C., Ding, Q., DeBlasio, R., Sanders, C., Hou, J., Li, XY, Ferrone, S., et al. (2020). IL15 stimuleerimine TIGIT-i blokaadiga muudab melanoomi CD155-vahendatud NK-rakkude düsfunktsiooni. Clin. Cancer Res. 26, 5520–5533. https://doi.org/10.1158/ 1078-0432.CCR-20-0575.
62. Weulersse, M., Asrir, A., Pichler, AC, Lemaitre, L., Braun, M., Carrie´, N., Joubert, MV, Le Moine, M., Do Souto, L., Gaud, G. et al. (2020). Kaasaktiveeriva retseptori CD226 eomesõltuv kadu piirab CD8(+) T-rakkude kasvajavastaseid funktsioone ja piirab vähi immunoteraapia efektiivsust. Immuunsus 53, 824–839.e10. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 2020.09.006.
63. Braun, M., Aguilera, AR, Sundarrajan, A., Corvino, D., Stannard, K., Krumeich, S., Das, I., Lima, LG, Meza Guzman, LG, Li, K., et al. (2020). Kasvajarakkudel olev CD155 suurendab resistentsust immunoteraapia suhtes, indutseerides CD8(+) T-rakkudes aktiveeriva retseptori CD226 lagunemise. Immuunsus 53, 805–823.e15. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 2020.09.010.
64. Lepletier, A., Madore, J., O'Donnell, JS, Johnston, RL, Li, XY, McDonald, E., Ahern, E., Kuchel, A., Eastgate, M., Pearson, SA, et al. (2020). Kasvaja CD155 ekspressioon on seotud resistentsusega antiPD1 immunoteraapia suhtes metastaatilise melanoomi korral. Clin. Cancer Res. 26, 3671–3681. https://doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-19-3925.
65. Newman, AM, Steen, CB, Liu, CL, Gentles, AJ, Chaudhuri, AA, Scherer, F., Khodadoust, MS, Esfahani, MS, Luca, BA, Steiner, D. jt. (2019). Rakutüübi arvukuse ja ekspressiooni määramine hulgikudedest digitaalse tsütomeetriaga. Nat. Biotehnoloogia. 37, 773–782. https://doi.org/10.1038/s41587-019-0114-2.
66. Soriani, A., Zingoni, A., Cerboni, C., Iannitto, ML, Ricciardi, MR, Di Gialleonardo, V., Cippitelli, M., Fionda, C., Petrucci, MT, Guarini, A., et al. (2009). ATM-ATR-sõltuv DNAM-1 ja NKG2D ligandide ülesreguleerimine hulgimüeloomirakkudel terapeutiliste ainete poolt suurendab NK-rakkude tundlikkust ja on seotud vananeva fenotüübiga. Blood 113, 3503–3511. https://doi.org/10.1182/blood- 2008-08-173914.