Aktiini tsütoskeleti samaaegne stabiliseerimine mitmes nefronispetsiifilises rakus kaitseb neere erinevate vigastuste eest Ⅱ

Kortikaalse aktiini farmakoloogiline stabiliseerimine dünamiini kaudu parandab AKI-d.

Neerutuubulite harja piiride kadumine aktomüosiini ajukoore lahtivõtmise tõttu on AKI domineeriv tunnus2,29. Laialdaselt kasutatav vähivastane ravim, mis sageli põhjustab AKI-d, on tsisplatiin30. Tsisplatiini kahjustuse pöördeline tagajärg neerurakkudes on reaktiivsete hapnikuliikide (ROS) taseme tõus31. Lisaks põhjustab ROS-i suurenenud tase aktiini dünaamika vähenemist32, mis põhjustab mitokondriaalse membraani häireid; seda edasisüvendab ROS-itootmine33,34. Seega uurisime, kas dünamiini farmakoloogiline stimulatsioon's ristsidumise võime on suffitsisplatiinist põhjustatud vigastuste vastu võitlemiseks.

Nagu enne 35. aastat näha, vähendas tsisplatiin MDCK rakkude kõrgust, mikrovillide arvu ja pikkust ning mõjutas rakkude polaarsust endotsütoosi mõjutamata (tabel 1, täiendav joonis 7a–d). TEM-analüüs näitas, et need fenotüübid võivad olla tingitud tsisplatiinist põhjustatud F-aktiini kadumisest (joonis 4a). Bis-T- 23 lisamine enne tsisplatiini tühistas selle mõju, stabiliseerides aktomüosiini ajukoore tsisplatiinist põhjustatud vigastuste vastu (joonis 4a–c). Sarnaseid fenotüüpe täheldati sigadelneeru proksimaalne tuubul(LLC-PK1) rakud (täiendav joonis 8). Need andmed annavad üheskoos tõendeid selle kohta, et Bis-T-23 säilitab aktomüosiini ajukoore tsisplatiinist põhjustatud lahtivõtmise eest.

Täiendavas füsioloogiliselt asjakohases lähenemisviisis36 neutraliseeris Bis T-23 tsisplatiini võimet vähendada transepiteliaalset elektritakistust (TER), mõõdetuna elus epiteeli monokihis, kasutades transwell-kultuurisüsteemi (joonis 4d). Kuna TER mõõdab tihedate ühenduste terviklikkust rakukultuuris, näitavad need andmed veelgi Bis-T-23 kasulikku mõju epiteelirakkude terviklikkusele vigastuse korral.

KLIKI SIIA, ET HANKIDA CISTANCHE CKD EEST

Kuna muutunud aktiini dünaamika võib ROS-i tootmist veelgi suurendada, uurisime järgmisena, kas aktiinivõrgu stabiliseerimine Bis-T -23 abil võib neutraliseerida tsisplatiiniga kahjustatud rakkude oksüdatiivset stressi. Otsustasime hinnata rakulise biomolekuli karbonüülide seisundit, mis on stabiilne oksüdatiivsete kahjustuste biomarker, mida tekitab kõrge ROS-i tase, kasutades meie hiljuti välja töötatud fluorestsentsandurit TFCH37 (joonis 4e). Tõepoolest, Bis-T-23 lisamine enne tsisplatiini vähendas osaliselt tsisplatiinist põhjustatud karbonüülimise suurenemist (joonis 4f). Sarnaseid karbonüülimise suundumusi täheldati pärast töötlemist Bis-T-23 ja aktiini depolümerisaatoriga LatA (täiendav joonis 9a). Need andmed koos annavad tõendeid selle kohta, et aktiinivõrkude stabiliseerumine võib neutraliseerida oksüdatiivse stressi ja vigastatud rakkude aktiini seisundi vahelist tagasisideahelat.

Ex vivo rottneeru mudelJärgmisena kasutati seda BisT{0}}põhise aktomüosiini ajukoore säilimise visualiseerimiseks pintsli piiril. Tsisplatiin kutsus esile olulise F-aktiini värvumise kadumise proksimaalsete tuubulite harja piiril (joonis 4g). Viirusesisese pildistamise abil täheldati hiljuti sarnast F-aktiini kadu pintsli piiril pärast raske isheemia-reperfusioonikahjustuse ilmnemist38. Eeltöötlemine Bis-T-23-ga kaitses osaliselt tsisplatiinist põhjustatud F-aktiini kadu neerutuubulite harja piiril (joonis 4g), mis näitab veelgi Bis-T-23 mõju aktomüosiinile ajukoor neeruepiteelirakkude apikaalses membraanis. Nagu rakukultuuris näha, ei mõjutanud Bis-T-23 endotsütoosi koelõikudes (täiendav joonis 9b), mis näitab veelgi, et Bis-T-23 ei mõjuta dünamiini rolli neerude endotsütoosis. proksimaalsed tuubulid.

Lõpuks uurisime Bis-T-23 reno-kaitsvat toimet tsisplatiinist indutseeritud AKI39 hiiremudelis. BL6 hiirtele süstiti kas Bis-T-23 või DMSO-d üks kord päevas, alustades 24 tundi enne tsisplatiini süstimist. Nagu varem näha40, suurenes seerumi kreatiniini (SCr) ja vere uriini lämmastiku (BUN) tase 3 päeva pärast tsisplatiini süstimist oluliselt (joonis 4h). DMSO-l oli kerge reno-kaitse, nagu varem nähtud41, tänu oma oksüdantide eemaldamisvõimele42. Bis-T-23 igapäevane manustamine ületas reno-kaitse osas DMSO-d (joonis 4h). Kuna kõik loomad surmati 5. päeval tsisplatiini süsteemse toksilisuse tõttu (täiendav joonis 9c), ei saanud me uurida Bis-T-23 pikaajalist kasu.neerufunktsioon. Üheskoos näitavad need uuringud veenvalt, et neerurakkude terviklikkuse säilitamine aktomüosiini ajukoore stabiliseerimise kaudu apikaalses membraanis neutraliseerib tsisplatiini poolt põhjustatud nefrotoksilisust.

Aktiinivõrkude stabiliseerimine neutraliseerib joheksooli poolt indutseeritud AKI.

Kuigi kontrastvärviga indutseeritud AKI täpset mehhanismi ei ole täielikult dešifreeritud, jääb see haiglas omandatud AKI43 peamiseks põhjuseks. Füsioloogiliselt suurendab kontrastaine osmootset koormust, vähendab neerude verevoolu ja kutsub esile neeruarterite ahenemise44. Rakutasandil on ROS kriitilise tähtsusega mängija erinevalt värvainest põhjustatud AKI45-st. Arvestades ROS-i rolli aktiini tsütoskeleti reguleerimisel ja meie hüpoteesi, et aktomüosiini ajukoore stabiliseerumine võib neutraliseerida oksüdatiivseid kahjustusi, uurisime Bis-T -23 mõju kontrastvärviga joheksooliga indutseeritud AKI46-le.

Ioheksooli toimet rakule uuriti inimestelneeru proksimaalne torukujuline(HK-2) lahtrid. Nagu tsisplatiini puhul näha, põhjustas joheksool F-aktiini kadu, millega kaasnes märkimisväärne karbonüülitud molekulide taseme tõus, mis on kõrgenenud ROS taseme pöördumatu tagajärg (joonis 5a, b). Mõlemale fenotüübile anti osaliselt vastu eeltöötlemine Bis-T-23-ga, luues veelgi sünergiat aktiini tsütoskeleti staatuse ja nende rakkude oksüdatiivse stressi taseme vahel. Lisaks rakupõhistele testidele säilitas Bis T-23 igapäevane manustamine Scr ja BUN tasemete põhjal neerufunktsiooni kontrastvärviga nakatatud BL6 hiirtel (joonis 5c). Loomadel, kes said koos kontrastvärviga Bis-T-23 (joonis 5d), täheldati ka ihaldatud paranenud elulemust.

Hiljuti näitasime, et lahustuva urokinaasi tüüpi plasminogeeni aktivaatori retseptori (suPAR) kõrgenenud seerumitasemed sensibiliseerivad neerud joheksooli poolt indutseeritud AKI47 suhtes. Järgmisena uurisime, kas torukujuliste rakkude dünamiini poolt vahendatud kaitse võib samuti anda reno-kaitse BL6 hiirtel, kes ekspresseerivad rasvkoest kõrgel tasemel suPAR-i (suPAR-Tg)48. Nagu oodatud47, vähenes suPAR-Tg hiirtel neerufunktsioon 24–48 tundi pärast joheksooli süstimist (joonis 5e). Seevastu loomadel, kes said päevase annuse Bis-T-23, esines näitusoluliselt parem neerufunktsioonvaatamata kontrastvärvi väljakutsele (joonis 5e). Märkimisväärne on see, et Bis-T-23 saanud hiirte rühmas täheldati olulist suremuse vähenemist (joonis 5f). Nagu oodatud, oli oksüdatiivse kahjustuse (biomolekulide karbonüülimine) ulatus HK-2 rakkudes, mida raviti samaaegselt Bis-T-23-ga, oluliselt madalam kui rakkudes, mis said ainult suPARi ja joheksooli kombinatsiooni (täiendav joonis 1). 9d).

Joonis fig 4 Dynamin agonist kaitseb neerutuubuleid tsisplatiinist põhjustatud vigastuste eest, stabiliseerides aktomüosiini ajukoore apikaalse membraani juures. PR-EM kujutis lamellipoodiumist MDCK rakkudes, mida on töödeldud DMSO (0,1%) või Bis-T-23 (5 µM, 0,1% DMSO) 1 tund enne tsisplatiini (35 uM) lisamisele 23 tundi. Aktomüosiini ajukoore värvus oli kollane. b Suurema suurendusega pildid kastiga piirkondadest (a). Erinevad paksustasemed on värvikoodiga. Ülemine ja alumine paneel näitavad võrke, mis on moodustatud vastavalt lühematest filamentidest ja pikematest filamentidest. c Graafik, mis kujutab aktiini filamentide tihedust esiservas (kollane kast punktis a; loendatakse 18–20 ala). d Tulpdiagramm, mis kujutab suhtelist transepiteliaalset elektritakistust (%) elusates MDCK rakkudes, mida on töödeldud punktis a kirjeldatud viisil, välja arvatud tsisplatiini (50 µM) ja Bis-T-23 (30 µM) kontsentratsioonid (12) näidud proovi kohta). Andmed on kantud keskmisena ± SEM (***P < 0,001, ****P < 0,0001, paaritu kaheosaline t-test). ns, ei ole oluline. e Oksüdatiivse stressi poolt indutseeritud karbonüülimise tuvastamise skemaatiline esitus TFCH testi abil. f Pildid, mis näitavad TFCH-ga määratud biomolekulide karbonüülide taset. Rakke töödeldi punktis (a) kirjeldatud viisil, välja arvatud tsisplatiini kontsentratsioon (5 uM). Skaalariba, 20 µm. Graafik, mis kujutab biomolekuli karbonüülidega seotud TFCH fluorestsentsi suhtelisi tasemeid raku kohta (andmepunktid (n)=83–116; iga punkt tähistab 4–9 raku keskmist intensiivsust). g Rottneeru viiludvärvitud anti-aktiini antikehaga.Neeru viiludinkubeeriti puhvris, DMSO-s (0,1%) või Bis-T-23-s (30 uM) 1 tund enne tsisplatiini (200 uM) või puhvri lisamist 8 tundi. Valge ruuduga piirkondi suurendati. Skaalavardad, 40 µm. Graafik, mis näitab F-aktiini intensiivsust harja piiril tuubuli kohta (100-236). C, f, g jaoks esitatakse andmed keskmisena ± SD (P väärtused on esitatud joonisel, ühesuunaline ANOVA Tukey mitmekordse võrdlustestiga). h Punktdiagrammid, mis näitavad tsisplatiini poolt indutseeritud AKI-d, mis on määratud vere uurea lämmastiku (BUN) või seerumi kreatiniini (SCr) taseme järgi. Loomadele süstiti kas DMSO-d (1%) või Bis-T-23 (20 mg/kg) (n=12, SCr seisundi kohta; n=17, BUN-i tingimuse kohta) üks kord päevas, alustades 24 tundi enne tsisplatiini (15 mg/kg) süstimist. Mõõtmised viidi läbi näidatud aegadel. Andmed on kantud keskmisena ± SEM (P väärtused on esitatud joonisel, paaritu kaheosaline t-test). ns, ei ole oluline.

Erinevalt tsisplatiini ja joheksooli põhjustatud ROS-vahendatud rakukahjustusest soodustab suPAR tubulaarsete rakkude kahjustusi osaliselt hapnikutarbimise määra (OCR) suurendamise kaudu47. Bis-T-23 füsioloogilise toime sidumiseks suPAR-transgeensetel hiirtel selle mõjuga rakkude metabolismile uurisime, kas aktiinivõrgu stabiliseerumine dünamiini kaudu vähendab suPAR-i juhitud OCR-i. OCR-i mõõdeti reaalajas HK-2 rakkudes põhitingimustes ja vastusena mitokondriaalsete inhibiitorite järjestikustele süstidele, kasutades rakuvälise voo analüsaatorit Seahorse XFe24 (joonis 5g). Anti-suPAR-antikeha või Bis-T-23-ga parandatud suPAR-põhine suurendamine suurendab mitokondriaalset basaalhingamist, ATP tootmist, hingamise maksimaalset kiirust ja vaba hingamisvõimet (joonis 5f). Need andmed näitavad Bis-T-23 positiivset mõju rakkude metabolismile vigastuste korral. Need uuringud koos kinnitavad veelgi, et on võimalik kaitsta mitut tüüpi AKI eest ja parandada seeläbi näriliste mudelite ellujäämismäära dünamiini kui puhverserveri kaudu.

Aktiini samaaegne stabiliseerumineerinevad neerurakudnõrgendab nefronivigastusi. Oleme varem näidanud, et dünamiini poolt juhitud aktiini polümerisatsiooni farmakoloogiline aktiveerimine taastas podotsüütide struktuuri ja funktsiooni CKD12 erinevates hiiremudelites. Selles uuringus demonstreerisime aktiini tsütoskeleti ristsidumisega dünamiini võimet säilitada tubulaarsete rakkude terviklikkus ägeda vigastuse korral. Need teadmised ajendasid meid üheskoos ette kujutama võimalust, et dünamiini farmakoloogiliselt suunates saab samaaegselt võidelda nii glomerulaarsete kui ka tubulaarsete vigastustega.

Selle hüpoteesi testimiseks uurisime, kas Bis-T-23 võib kaotust edasi lükataneerufunktsioonAlporti sündroomi (AS) hiiremudelis. AS on pärilik vormprogresseeruv neerupuudulikkusmutatsioonide tõttu geenides COL4A3, COL4A4 või COL4A5, mis koos kodeerivad IV tüüpi kollageeni, mis on glomerulaarse basaalmembraani (GBM) põhikomponent49,50. Kuigi AS-i esmaseks defektiks on jalaprotsesside tuhmumine ja proteinuuria.

Selle hüpoteesi testimiseks uurisime, kas Bis-T-23 võib kaotust edasi lükataneerufunktsioonAlporti sündroomi (AS) hiiremudelis. AS on pärilik vormprogresseeruv neerupuudulikkusmutatsioonide tõttu geenides COL4A3, COL4A4 või COL4A5, mis koos kodeerivad IV tüüpi kollageeni, mis on glomerulaarse basaalmembraani (GBM) põhikomponent49,50. Kuigi AS-i esmaseks defektiks on jalaprotsesside tuhmumine ja proteinuuria.

Arutelu Alates otseste dünamiini ja aktiini interaktsioonide tuvastamisest10 on üha rohkem tõendeid selle kohta, et see GTPaasi on rakus üks peamisi aktiini tsütoskeleti regulaatoreid. Erinevalt kanoonilistest ABP-dest on mehhanismid, mille abil dünamiin mõjutab aktiini, väga mitmekülgsed ja rakutüübispetsiifilised. See on tingitud dünamiini mitmete oligomerisatsiooni olekute kombinatsioonist ja selle võimest siduda F-aktiini kahe erineva sidumissaidiga. F-aktiini interaktsioonid dünamiinrõngaste ja heeliksitega selle C-terminaalse PRD kaudu põhjustavad aktiini kimbud ja hüperkimbud, mis on seotud filopoodiate56 ja membraani väljaulatuvate osade moodustumisega müoblastide sulandumise ajal28. Dünamiini keskmise domeeni ja F-aktiini vahelised koostoimed on seotud aktiinivõrkude reguleerimisega lamellipodia26, postsünaptilise tsütoskeleti organisatsiooni ja neuromuskulaarse ristmiku arenguga27, aktiini kimbu jäikuses endosoomides müoblastide sulandumise ajal25 ja podotsüütide jalaprotsesside moodustumisega12. Kuigi jalaprotsesside moodustumist juhib dünamiini poolt stimuleeritud aktiini polümerisatsioon, viitab see uuring sellele, et molekulaarne mehhanism, mille kaudu dünamiin mõjutab neid teisi aktiinist tingitud protsesse, võib osaliselt olla tingitud selle võimest ristsiduda F-aktiini hargnenud võrkudeks. . Meie praegune uuring laiendab dünamiinist sõltuva võrgu moodustumise rolli, hõlmates aktomüosiini ajukoore moodustumist polariseeritud epiteelirakkude apikaalses membraanis ja raku jäikuse kehtestamist.

Arutelu Alates otseste dünamiini ja aktiini interaktsioonide tuvastamisest10 on üha rohkem tõendeid selle kohta, et see GTPaasi on rakus üks peamisi aktiini tsütoskeleti regulaatoreid. Erinevalt kanoonilistest ABP-dest on mehhanismid, mille abil dünamiin mõjutab aktiini, väga mitmekülgsed ja rakutüübispetsiifilised. See on tingitud dünamiini mitmete oligomerisatsiooni olekute kombinatsioonist ja selle võimest siduda F-aktiini kahe erineva sidumissaidiga. F-aktiini interaktsioonid dünamiinrõngaste ja heeliksitega selle C-terminaalse PRD kaudu põhjustavad aktiini kimbud ja hüperkimbud, mis on seotud filopoodiate56 ja membraani väljaulatuvate osade moodustumisega müoblastide sulandumise ajal28. Dünamiini keskmise domeeni ja F-aktiini vahelised koostoimed on seotud aktiinivõrkude reguleerimisega lamellipodia26, postsünaptilise tsütoskeleti organisatsiooni ja neuromuskulaarse ristmiku arenguga27, aktiini kimbu jäikuses endosoomides müoblastide sulandumise ajal25 ja podotsüütide jalaprotsesside moodustumisega12. Kuigi jalaprotsesside moodustumist juhib dünamiini poolt stimuleeritud aktiini polümerisatsioon, viitab see uuring sellele, et molekulaarne mehhanism, mille kaudu dünamiin mõjutab neid teisi aktiinist tingitud protsesse, võib osaliselt olla tingitud selle võimest ristsiduda F-aktiini hargnenud võrkudeks. . Meie praegune uuring laiendab dünamiinist sõltuva võrgu moodustumise rolli, hõlmates aktomüosiini ajukoore moodustumist polariseeritud epiteelirakkude apikaalses membraanis ja raku jäikuse kehtestamist.

See on hästi kindlaks tehtudCKD ja AKIKuigi mehaaniliselt erinevad, on need omavahel tihedalt seotud, kusjuures AKI-d peetakse kroonilise neeruhaiguse arengu ja progresseerumise riskiteguriks 66. Praeguse seisuga on AKI-d endiselt ravimatu67. See on eriti oluline praeguse 2019. aasta koroonaviiruse haiguse (COVID-19) pandeemia valguses, kus COVID-19-ga hospitaliseeritud patsientidel ja kõrgenenud suPAR-i plasmatasemega patsientidel areneb AKI murettekitava kiirusega. Kõrgenenud suPAR tasemed on seotud nii AKI47 kui ka CKD69-ga, tugevdades veelgi nende kahe vahelist molekulaarset seosterinevad neeruhaigused. Seetõttu on üha olulisemaks muutumas selliste ravimite väljatöötamine, mis kaitsevad mitmesuguste rakutüüpide neerukahjustuste eest70. Siin kirjeldame dünamiini agonisti reno-kaitsvat toimet AS-i geneetilises mudelis, millel on vigastused nii podotsüütidele kui ka torukujulistele rakkudele. Meie uuring loob tervikliku lähenemisviisi uudsete ravimite väljatöötamiseks, mis on seotud aktiinivõrguga nefronis mitmes rakutüübis ja ravivad paljusidneeruhaigusedolenemata vigastuse kohast.

Meetodid Rakukultuur. MDCK (Madin-Darby koera neeru) rakke (ATCC CCL-34) ja hiire sisemise medulla kogumiskanali (mIMCD-3) rakke (ATCC CRL-2123) kasvatati DMEM/F12-s (ThermoFisher). Teaduslik), mis sisaldab 10% veise loote seerumit (FBS) ja 1x Antibiootikumi-antimükootilist ainet (penitsilliin, streptomütsiin ja amfoteritsiin B; Gibco). LLC-PK1 (Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1) rakke (ATCC CL- 101) kasvatati DMEM-is 4,5 g/l glükoosi, L-glutamiini, naatriumpüruvaadi (Corning), 10% FBS ja 1X antibiootikumiga. - Antimükootiline aine. MDCK ja LLC-PK1 rakke kasvatati enne katsete alustamist vastavalt ~ 24 tundi ja ~ 72 tundi. HK-2 (Inimese neer 2) proksimaalseid tubulaarseid rakke (ATCC CRL-2190) kultiveeriti bioenergeetilistes katsetes DMEM/Ham's F12 söötmes (Corning), mis sisaldas 10% FBS-i, 100 U/ml penitsilliini ja 100 ug/ml streptomütsiini. Aktiini tsütoskeleti ja raku karbonüülimise seisundi analüüsimiseks kasvatati HK-2 rakke DMEM F-12-s (ATCC), mis sisaldas 10% FBS-i, 1x Antibiootikumi-antimükootilist ainet ja 1X ITS-i (insuliin, transferriin ja naatriumseleniit) vedela söötme lisand (Sigma-Aldrich). Dünamiin 2 (Dyn2) knock-down rakuliini (mIMCD Dyn2KD) loomiseks nakatati rakud lentiviirustega, mis kandsid shRNA-d, mis kodeerivad DNM2 geeni (5'CGGCCTAGTGGACATGACAATGAACTCGAGTTCATTGTCATGTC CACTAGGTTTTTG3S (polüRNA richened)10 või scraigmambled-Ald. µg/ml). 24 tunni pärast asendati sööde stabiilsete transfektantide valimiseks igal teisel päeval puromütsiini sisaldava söötmega. Dyn2 kukkumise ulatust hinnati Western blot meetodil. Kõiki rakuliine kasvatati kollageeniga kaetud klaasist katteklaasidel.

Joonis fig 6. Dünamiini farmakoloogiline aktiveerimine on samaaegselt suunatud aktiini tsütoskeletile kahes erinevas nefroni rakus. Col4a3-/- hiirtele süstiti DMSO-d (1%) või Bis-T-23 (20 mg/kg) üks kord päevas, kui nad olid 42 päeva vanad (0. päev). Kasutati võrdset arvu DMSO või Bis-T-23-ga töödeldud hiiri (n=10 ACR jaoks; n=8 BUN jaoks). Scatter dot diagramm näitab proteinuuria taset (albumiini ja kreatiniini suhe, ACR) janeerukahjustusmäärab BUN-i tase. Vearibad, keskmine ± SD (P väärtused on esitatud joonisel, paaritu kaheosaline t-test). b Kahe ravirühma ellujäämiskõverate analüüsimiseks viidi läbi Log-Rank (Mantel-cox) test. c Neerude tüüpiline histopatoloogia, mis on määratud perioodilise happe-Schiffi (PAS) ja H&E värvimisega proovidel, mis on saadud punktis a kirjeldatud Col4a3-/- hiirtelt. Loomad olid 62 päeva vanad (Bis-T-23 või DMSO-ga töötlemise 20. päev). Glomerulopaatiat Col4a3-/- DMSO-ga töödeldud loomadel iseloomustas PAS-i värvimisel täheldatud mesangiaalne laienemine (must nool), suurenenud rakulisus ja Bowmani ruumi suurenemine. Degeneratiivsed muutused tuubulites hõlmasid kipside moodustumist (*) ja tubulaarskleroosi esinemist. Bis-T-23-ravi 20 päeva jooksul säilitas osaliselt glomerulite morfoloogia (vähenenud mesangiaalne laienemine) ja tuubulite (kipside puudumine). d Nefroni skeemid (pilt kuulub riiklikule diabeedi- ja seedesüsteemi instituudileNeeruhaigused, National Institutes of Health) ja mehhanism, mis on seotud dünamiiniga reguleeritud reno-kaitsega. Neerutuubulite polariseeritud epiteelirakkudes loob dünamiin raku polaarsuse, sidudes aktiini filamendid võrkudeks (see uuring). Dynamini võime siduda filamente kimpudeks on seotud mikrovilli moodustumisega. Äge vigastus suurendab ROS-i tootmist, muudab rakkude metabolismi ja häirib aktiini dünaamikat, mis suurendab veelgi ROS-i tootmist, põhjustades rohkem väljendunud raku oksüdatiivseid kahjustusi (biomolekulide karbonüülimine). Dünamiini ristsidumise võime suurenemine aktomüosiini ajukoores säilitab tubulaarsete rakkude terviklikkuse, mis kaitseb neid osaliselt oksüdatiivse solvamise eest. Lisaks on dünamiin oluline podotsüütide struktuuri ja funktsiooni jaoks. Dünamiini farmakoloogiline aktiveerimine taastab jala protsessid, indutseerides aktiini polümerisatsiooni. Meie uuring näitab, et dünamiini oligomerisatsiooni farmakoloogiline aktiveerimine avaldab nefronile kahekordset kasulikku mõju, suunates kaks erinevat molekulaarset mehhanismi: podotsüütide terviklikkuse säilitamine (aktiini polümerisatsioon) ja neerutuubulirakkude (aktiini filamentide ristsidumine).

Viited

1. Basile, DP, Anderson, MD ja Sutton, TA Ägeda neerukahjustuse patofüsioloogia.Compr. Physiol. 2, 1303–1353 (2012).

2. Bonventre, JV & Yang, L. Isheemilise ägeda neerukahjustuse rakuline patofüsioloogia.J. Clin. Investeeri. 121, 4210–4221 (2011).

3. Campanale, JP, Sun, TY & Montell, DJ Rakkude polaarsuse areng ja dünaamika lühidalt.J. Cell Sci. 130, 1201–1207 (2017).

4. Salbreux, G., Charras, G. & Paluch, E. Actin cortex mechanics and cellular morphogenesis.Trends Cell Biol. 22, 536–545 (2012). 

5. Vicente-Manzanares, M., Ma, X., Adelstein, RS & Horwitz, AR Mittelihase müosiin II on rakkude adhesioonis ja migratsioonis kesksel kohal.Nat. Rev Mol. Cell Biol. 10, 778–790 (2009). 

6. Chugh, P. et al. Aktiini ajukoore arhitektuur reguleerib raku pindpinevust.Nat. Cell Biol. 19, 689–697 (2017). 7. Nguyen, LT & Hirst, LS Tugevalt ristseotud F-aktiini võrkude polümorfism: mitme pikkusega skaalade sondeerimine.Phys. Rev. E Stat. Nonlin Soft Matter Phys. 83, 031910 (2011).

Wecistanche'i tugiteenus - Hiina suurim tsistanšeksportija:

E-post:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Pood:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop