Cistanche salsa fenüületanoidglükosiidide ennetav toime kõrgel ajutursega rottidel

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

Abstraktne

Eesmärk Vaadelda Cistamnche Salsa fenüületanoidglükosiidide toimet ja mehhanismi kõrgajutursega rottidel. Meetodid Fenüületanoidglükosiide manustati profülaktiliselt, et luua kõrgmäestiku ajuturse roti mudel, kasutades hüpobaarilist kambrit simuleeritud keskkonnas 5000 m kõrgusel. Mõõdeti patoloogilisi muutusi roti kopsukoes, vee, IL-6, TNF-a, MDA sisaldust ning SOD ja GSH-Px ensümaatilist aktiivsust kopsuhomogenaadis. Tulemused Võrreldes kontrollrühmaga näitasid kõrgmäestiku ajuturse rottidel märkimisväärset ajuturse iseloomu ja suurt veesisaldust kopsudes. IL-6, TNF-a ja MDA sisaldus kopsuhomogenaadis suurenes, samas kui SOD ja GSH-Px ensümaatiline aktiivsus vähenes oluliselt. Fenüületanoidglükosiidid võivad parandada patoloogilisi muutusi kopsukoes, vähendada vee, IL-6, TNF-a ja MDA sisaldust, suurendades samal ajal SOD ja GSH-Px ensümaatilist aktiivsust kopsuhomogenaadis, Concision Fenüületanoidglükosiidid võivad ära hoida kõrgel kõrgusel tekkivat ajuturset. mille mehhanism võib olla seotud põletikuvastase ja oksüdatsioonivastase stressiga kopsukoes.

Märksõnad: Cistanche Salsa; fenüületanoidglükosiid; ajuturse kõrgel kõrgusel

Cistanche fenüületanoidglükosiidid

Kõrge kõrgusega ajuturse (HACE) tekib tavaliselt siis, kui kõrgus on esimest korda suurem kui 3000 m. See on tõsine eluohtlik haigus, mis on põhjustatud keha kohanematusest kõrguse madalrõhu- ja hapnikuvaese keskkonnaga. See on seotud kõrgusehaigusega. Kõrgmäestiku kopsuturse on ägeda kõrgusehaiguse kolm ilmingut. Kuigi HACE kohta on tehtud vähem uuringuid võrreldes kõrgmäestiku kopsutursega, on seotud uuringud näidanud, et oksüdatiivne stress ja põletik mängivad HACE patogeneesis olulist rolli (P-3).

Cistanche fenüületanoidglükosiidid(Cistanche Salsa fenüületanoidglükosiidid, PhGC-d) ekstraheeritakse Xinjiang Cistanche cistanche'ist ja sellega seotud uuringud on edukalt eraldanud mitmesuguseid fenüületanoidglükosiide, sealhulgas peamiselt ehhinakosiidi ja verbaskosiidi 1. PhGC-de farmakoloogilise toime uurimine aastate jooksul on näidanud, et sellel on sarnane farmakoloogilised toimed salidrosiidile, kõrgustõvevastasele toimeainele. Sellel on hüpoksia-, kiirgusevastane, vabade radikaalide eemaldamine jne. P-7]. Selles katses loodi loodepiirkonnas spetsiaalses keskkonnas kunstlikus katsekambris roti HACE mudelivõrk 91 ja PhGC-sid manustati ennetavalt, et jälgida selle ennetavat mõju HACE-le ja selle võimalikku toimemehhanismi.

Tistanche ürt:Cistanche fenüületanoidglükosiidid

1 materjal

1.1 Loomad

Katseloom Wistar rott, SPF klass, pooleldi isane ja pooleldi isane, kaal 180-220g [Xinjiangi meditsiiniülikooli katseloomade keskus, loomakasvatuslitsentsi number SCXK (uus) 2011-0004, loomakasutuslitsentsi number SYXK ( uus) 2011- 0004].

1.2 Seade

Loode erikeskkonna kunstlik katsekabiin (Guizhou Fenglei Aviation Ordnance Co., Ltd., DY{{0}}); optiline mikroskoop (Jaapani firma Nikon, E 200); kudede viilutaja (Saksamaa firma Mecang, HM340E); elektrooniline kaal (Mettler-Toledo Instrument Co., Ltd., AL204, täpsus; 0,1 mg); mikroplaadilugeja (Bio-RAD, XMark 7M, USA): UV-spektrofotomeeter (Shanghai Lens Optical Technology Co., Ltd., SpectrumLab 22); elektriküttega konstantse temperatuuriga kuivatusahi (Huangshi, Hubei) City Medical Equipment Co., Ltd., SKHG-01).

1.3 Testravim

PhGC-d (Pekingi ülikooli professor Tu Pengfei, sisaldus: 90,70 protsenti, valmistatud destilleeritud veega, et saada vastava kontsentratsiooniga lahus); Rhodiola Rosea suukaudne vedelik (Tibet Tibetan Medicine Group Co., Ltd., partii number: 120503, spetsifikatsioon: 10 ml); tuumori nekroosifaktori (kasvaja nekroosifaktori, TNF-) komplekt (partii number: ZJAGBZAB01), interleukiini-6 (interleukiini-6, IL-6) komplekt (partii number: ZIBIBZAB 02) (Shanghai Yikesai Biological Products Co., Ltd. ettevõte); naatriumpentobarbitaal (American Amresco Company, partii number: 20110612); Paraformaldehüüd (Chengdu Keloni keemiliste reaktiivide tehas, partii number: 20110901); Superoksiidi dismutaasi (SOD) komplekt (partii number: 20130812), malondialdehüüdi (MDA) komplekt (partii number: 20130812), glutatioonperoksidaasi (GSH-Px) komplekt (partii number: 20130814) (Nanjing Jianchengi Bioinseneri instituut); PBS-fosfaatpuhvri pulber (Fuzhou Maixin Biotechnology Development Co., Ltd., partii number: 13061716).

cistanche ürt

2 meetod

2.1 Rühmitamine ja ravimid

Wistari rotid jagati juhuslikult 6 rühma: normaalne kontrollrühm, mudelrühm, Rhodiola Rosea suukaudse lahuse rühm (1,78 ml·kg-'), PhGC-de madala annuse rühm (75 mg·kg-), PhGC-de keskmise annuse rühm (15). 0mg ·Kg-'), PhGC-de suure annuse rühm (300mg·kg-), igas rühmas 12 rotti. Iga rühm kasvatati SPF keskkonnas. Normaalsele kontrollrühmale ja mudelrühmale manustati intragastraalselt destilleeritud vett (1,0 ml/100 g). Teistele rühmadele manustati intragastraalselt vastavalt vastavale annusele 10 järjestikuse päeva jooksul. 8. päeval hoiti ülejäänud, välja arvatud tavaline kontrollrühm. Iga rühma hoiti 72 tundi kunstlikus katsekabiinis, mis simuleeris platookeskkonda 5 000 m kõrgusel. Kõrgus salongis tõuseb konstantse kiirusega 10 m·s-' 5000 m kõrgusele (atmosfäärirõhk on 54,1 kPa, hapniku osarõhk 11,52 kPa), mille jooksul loomad sisenevad vabalt vette ja söövad ning salong avatakse 0,5 h iga 24 h järel. Ravim, lisage sööt ja joogivesi.

2.2 Loomade käitlemine

Iga rühma rotid tuimastati naatriumpentobarbitaali (2 protsenti, 0,2 ml/100 g) intraperitoneaalse süstimisega vahetult pärast kabiinist lahkumist, võeti veri kõhuaordist, avati koljuõõs, ajukude võeti ja vasaku aju ülemine pool võeti välja ja kaaluti. Pakendit kasutatakse veesisalduse määramiseks ja vasaku aju alumine pool fikseeritakse HE värvimiseks 4-protsendilise paraformaldehüüdiga. Kaaluge parem ajuosa, lisage 10-protsendilise homogenaadi valmistamiseks PBS-i lahus, tsentrifuugige kiirusel 3 000 r·min-' 10 minutit, jagage supernatant alikvootideks ja hoidke seda TNF-i määramiseks külmikus 80 kraadi juures. a, IIL{11}}, SOD, MDA, GSH-Px.

2.3 Ajukoe patoloogia vaatlus

Pärast seda, kui ajukude on täielikult fikseeritud 4-protsendilises paraformaldehüüdis, dehüdreeritud, sisestatud, viilutatud ja HE-värvitud, vaadeldakse patoloogilisi muutusi optilise mikroskoobi all erinevate suurendustega ja tehakse pilte.

2.4 Aju veesisalduse määramine ja ajukoe sellega seotud indeksite määramine põletiku ja oksüdatiivse stressi homogeniseerimine

Küpsetage tinafooliumisse mähitud ajukude ahjus (80 kraadi, 72 h) konstantse kaaluni, kaaluge kuivmass ja arvutage veesisaldus: veesisaldus=(koe mass-koe kuivkaal) / koe kaal × 100 protsenti . Kasutage TNF-, IL-6 sisalduse mõõtmiseks ensüümiga seotud immuunanalüüsi komplekti, MDA, SOD, GSH-Px mõõtmiseks UV-spektrofotomeetrit, konkreetsed sammud järgige juhiseid.

2.5 Statistiline analüüs

Analüüsiks kasutati SPSS 16.0 tarkvara, kõik mõõtmisandmed olid tähistatud madalamate plussidega, esmalt testiti andmeid normaalsuse suhtes, vastavate rühmade võrdlemiseks kasutati sõltumatu proovi 1 testi ja logaritmiline teisendus viidi läbi mittevastava rühma jaoks. Kontrolli tase on =0.05.

cistanche ekstrakt

3 tulemust

3.1 PhGC-de mõju ajukoe patoloogilistele muutustele HACE rottidel

Iga rühma rottide ajukoe patoloogiliste lõikude jälgimine valgusmikroskoobi all näitas, et ajukoe molekulaarkiht, välimine granuleeritud rakukiht, selgroo kehakihi rakukiht, sisemine granuleeritud rakukiht ja mitmerealine rakukihi struktuur normaalses kontrollrühmas olid selged ja kahjustusi ei leitud. Mudelrühmas oli rottide ajukudedeks hüpereemia ja kapillaaride turse ning molekulaarkihi ja selgroo kehakihi rakkude turse oli ilmne. PhGC-de väikese doosiga rottide rühm ajukoe molekulaarse kihi osa vasodilatatsioonist ja kongestiivne turse, kerge rakuturse, mudelrühmast väiksem turse: PhGC-de keskmise annuse rühm rottide ajukoe osa submeningeaalsest vasodilatatsioonist ja ummistusest, aeg-ajalt rakuturse , turse võrreldes mudelrühmaga Rühm vähenes oluliselt; PhGC-de suurte annuste rühma molekulaarsel kihil ei olnud ilmset turset ja esines kerge perivaskulaarne turse, mis oli mudelrühmaga võrreldes oluliselt vähenenud. Rhodiola Rosea rühma rottide ajukoe molekulaarkihis oli turse hajutatud ja laiali paiknevatel veresoontel oli väga kerge turse. Turse vähenes oluliselt võrreldes mudelrühmaga. On näha, et mudelrühma rottide ajukoes on ilmselgelt tursed ja mudel on loodud. PhGC-d ja Rhodiola Rosea võivad HACE mudelrottidel vähendada ajuturse astet. Tulemused on näidatud joonisel 1.

Joonis 1 Roti aju histopatoloogiline vaatlus erinevates rühmades (HE × 400)

3.2 PhGC-de mõju HACE rottide ajuveesisaldusele

Võrreldes normaalse kontrollrühmaga suurenes mudelrühma ajukoe veesisaldus ja erinevus oli statistiliselt oluline (P<0.01), indicating="" that="" the="" model="" was="" established.="" the="" brain="" tissue="" water="" content="" of="" rats="" in="" the="" low,="" medium,="" and="" high="" doses="" of="" phgcs="" and="" the="" rhodiola="" rosea="" group="" was="" lower="" than="" that="" of="" the="" model="" group,="" and="" the="" difference="" was="" statistically="" significant=""><0.01). there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" in="" tissue="" water="">

3.3 PhGC-de mõju TNF-a ja IL-6-le HACE rottide ajukoes

Võrreldes normaalse kontrollrühmaga suurenes TNF-a ja IIL-6 sisaldus mudelrühma ajukoe homogenaadis oluliselt (P<0.01). the="" contents="" of="" tnf-α="" and="" iil-6="" in="" the="" brain="" tissue="" homogenate="" of="" phgcs="" low,="" medium,="" and="" high="" dose="" groups="" and="" rhodiola="" rosea="" group="" were="" lower="" than="" those="" of="" the="" model="" group=""><0.05), and="" the="" difference="" was="" statistically="" significant.="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" in="" brain="" tissue="" tnf-a="" and="" iil-6="" levels="" between="" the="" phgcs="" dose="" groups="" and="" the="" rhodiola="" rosea="">

3.4 PhGC-de mõju oksüdatiivsele stressile HACE rottide ajukoes

Võrreldes normaalse kontrollrühmaga vähenesid SOD ja GSH-Px ensüümide aktiivsused mudelrühma ajukoes oluliselt ning MDA sisaldus suurenes oluliselt (P<0.01). the="" sod="" and="" gsh-px="" enzyme="" activities="" in="" the="" brain="" tissue="" of="" the="" phgcs="" low,="" medium,="" and="" high="" dose="" groups="" and="" rhodiola="" rosea="" group="" were="" higher="" than="" the="" model="" group,="" and="" the="" mda="" content="" was="" lower="" than="" that="" of="" the="" model="" group.="" the="" difference="" was="" statistically="" significant=""><0.05). there="" was="" no="" significant="" difference="" in="" the="" content="" of="" sod,="" gsh-px,="" and="" mda="" in="" the="" brain="" tissue="" between="" the="" phgcs="" groups="" and="" the="" rhodiola="" rosea="">

Tistanche toidulisand: parandab immuunsust

4 Arutelu

Viimastel aastatel on kodumaised teadusuuringud kõrgusetõve ennetamise ja ravi kohta traditsioonilise hiina meditsiiniga saavutanud suuri uuenduslikke tulemusi ning edukalt on välja töötatud traditsioonilisi Hiina ravimeid, millel on sõltumatud intellektuaalomandi õigused kõrgustõve ennetamiseks ja raviks. Näiteks Tiibeti sõjaväepiirkonna väljatöötatud Rhodiola kapslid on saanud sõjaväe erivajaduste ravimite loanumbri ning neid kasutatakse platoo piirikaitseväes platoohaiguste ennetamiseks ja raviks spetsiaalsete ravimitena. Qinghai ja Tiibeti kohalike farmaatsiaettevõtete poolt turule lastud Rhodiola Rosea suukaudne vedelik on saanud riiklike Hiina meditsiini sortide ametliku loanumbri ning sobib kliiniliselt ägeda ja kroonilise kõrgusehaiguse ennetamiseks ja raviks10. PhGC-de farmakoloogiline toime on sarnane salidrosiidiga, seega valisime positiivseks kontrollravimiks Rhodiola Rosea suukaudse vedeliku, mida müüakse ja kasutatakse turul ning millel on ravimistandard.

Suur hulk uuringuid [1H12 tõestas, et TNF- ja IL-6 tase HACE patsientidel on kõrgenenud, Zhou Qiquan et al. [3 Uuringud on näidanud, et TNF-il on oluline roll hematoentsefaalbarjääri läbilaskvuse muutmisel. Oluline tegur barjääri läbilaskvuse suurendamiseks. TNF-i sekretsioon suureneb hüpokseemia ajal. Kui TNF-i sisaldus veres ebanormaalselt suureneb, võib see kahjustada veresoonte endoteelirakke, põhjustades veresoonte endoteelirakkude morfoloogia muutusi, rakumembraani ja organellide kahjustusi jne, ning TNF-a-d saab kasutada ka apoptoosi rakusisene signaal indutseerib apoptoosi. veresoonte endoteelirakkudest, soodustab endoteliini (ET-1) tootmist ja süvendab veresoonte seina kahjustusi ning soodustab IIL-i sekretsiooni-614.

Hüpoksiat peetakse peamiseks teguriks, mis põhjustab ägeda kõrgusehaiguse esinemist. Hüpoksiast põhjustatud oksüdatiivne stressireaktsioon mängib olulist rolli aju arteriaalse hüpertensiooni ja veresoonte lekke korral. Kohalikud vabad radikaalid on seotud veresoonte kahjustuste tekitamisega. Tserebrovaskulaarne kahjustus ja suurenenud vedeliku leke võivad põhjustada ajuturset 13i4. Zhou Qiquan et al. [7 Uuringud on näidanud, et hapniku vabad radikaalid mängivad olulist rolli HACE moodustumisel ja on oluliseks teguriks hematoentsefaalbarjääri läbilaskvuse suurendamisel kõrgmäestiku keskkondades. Hüpoksilises keskkonnas suureneb vabade radikaalide ja MDA sisaldus märkimisväärselt, samal ajal kui antioksüdantsete ensüümide funktsioon on alla reguleeritud. Seetõttu võib antioksüdantsete ensüümide vähene funktsioon ja lipiidide peroksüdatsioonikahjustuste suurenemine omada olulist tähtsust ägeda kõrgusehaiguse patogeneesis. MDA-d toodetakse rasvhapete peroksiidide lagunemisel ja see on bioloogilistes süsteemides kõige sagedamini mõõdetav lipiidide peroksüdatsiooniprodukt. Organismis leiduvate antioksüdantsete ensüümide hulka kuuluvad SOD, GSH-Px jne, mis kas otse eemaldavad superoksiidi vabu radikaale ja vesinikperoksiidi või muudavad need vähemaktiivseteks aineteks, et täita kaitserolli. Nii tuvastasime ajukoe homogenaadis SOD, MDA, GSH-Px.

Selles katses suurenes võrreldes normaalse kontrollrühmaga oluliselt TNF-a ja IIL-6 kogus HACE mudelrühma ajukoe homogenaadis, SOD, GSH-Px ensüümide aktiivsus vähenes ja MDA sisaldus suurenes märkimisväärselt. See näitab, et hüpoksiast põhjustatud oksüdatiivse stressi düsfunktsioon ja põletik rottidel on seotud HACE moodustumisega. PhGC-de ennetav manustamine võib vähendada ajukoe veesisaldust ajutursega rottidel ja oluliselt parandada ajukoe ödeemi patoloogilisi muutusi, mis näitab, et sellel on HACE-i teket ennetav toime. PhGC-d võivad hüpoksia ajal suurendada SOD ja GSH-Px roti ajukoes. Ensüümi aktiivsus vähendab hüpoksiast põhjustatud MDA sisaldust ajukoes. TNF- ja IL{6}} sisaldus rottide ajukoes PhGC-de ennetava manustamise rühmas on oluliselt madalam kui mudelrühmas, mis viitab sellele, et meie antioksüdatiivne stress ja põletikuvastane toime võib olla ennetus- ja ravimeetod. PhGCs Üks kõrgushaiguse mehhanisme. Selle katse tulemuste põhjal on PhGC-de toime keskmise annuse rühmas veidi parem kui suurel doosil, kuid erinevus ei ole statistiliselt oluline. Seotud kirjanduses ei ole teatatud, et PhGC-d on maksaravimi ensüümide indutseerijad, mis võib välistada võimaluse, et ravimid kutsuvad esile maksaravimi ensüümi aktiivsuse suurenemise ja kiirendavad enesemetabolismi. Spekuleeritakse, et võimalikuks põhjuseks on see, et ravimi kontsentratsiooni tõustes ületab ravimi kontsentratsioon organismis annuse ja toime suhte vahemikku. Keskmise annuse korral on kõik keha retseptorid hõivatud ja retseptorid küllastunud, mistõttu suurte annuste toime ei suurene ja ravim on glükosiid, mis võib maos suhkrut hüdrolüüsida ja viskoossuse suurenemine piirab ravimi efektiivset imendumist, kui kontsentratsioon on liiga kõrge.

Tistanche toidulisand: parandab immuunsust

Viide

[1] John B. West, "Hiina kõrgmäestikuhaiguste nomenklatuur, klassifikatsioon ja diagnostilised kriteeriumid" ingliskeelne tõlge[J]. High Altitude Med Biol, 2010, 11(2): 169-172.

[2] Bailey DM, Evans KA, James PE jt. Vabade radikaalide metabolismi muutus ägeda mägihaiguse korral: mõju dünaamilisele aju autoregulatsioonile ja hematoentsefaalbarjääri funktsioonile [J]. J Physiol, 2009, 587(1): 73-85.

[3] Tang YP, Wu P, Su JJ jt. Akvaporiini-4 mõju ödeemi tekkele pärast intratserebraalset hemorraagiat [J]. Experimental Neurology, 2010, (223): 485-495.

[4] Cai Hong, Bao Zhong, Jiang Yong jne. Erineva päritoluga Cistanche cistanche'i tõhusad koostisosad [J] kvantitatiivne analüüs. Chinese Herbal Medicine, 2007, 38(3): 452-455.

[5] Muhebuli • Abuliz, Mao Xinmin, Rena • Kasmu jt PhGC-d Antioksüdantne aktiivsus HL-60 rakkudes [J]. Chinese Pharmacological Bulletin, 2008, 3 (24): 362-364.

[6] Liu Fengxia, Wang Xiaowen, Luo Lan jt. PhGC-d amüloidpeptiidi vastu Alzheimeri tõve hiiremudeli [J] mõju ja mehhanism õppimisele ja mälule. Chinese Pharmacology Science Bulletin, 2006, 22(5): 595-599.

[7] Liu Zhiqin, Chen Quieting, Li Yan jt. Cistanche mõju hematopoeesile ja keemiaravi hematopoeetilisele toimele kasvajaga hiirtel Immuunfunktsiooni mõju [J]. Journal of Beijing University of Traditional Chinese Medicine, 2010, 33 (11): 758-761.

[8] Xu Yonghua, Zhang Qiong, Cao Jinjun jne. Looge meditsiini laiendamiseks suuremahuline madalrõhukamber. Eksperimentaalsete platvormide tüübid [J]. Chinese Journal of Comparative Medicine, 2012, 22(7): 60-63.

[9] Tao Yicun, Shi Wen Hui, Xu Yonghua jt. Kõrgel kõrgusel esinev kopsuturse simuleeritud platookeskkonnas Hiiremudeli loomine [J]. Chinese Journal of Experimental Animal, 2014, 22 (1): 76-78.

[10] Wang Hai. Farmakoteraapia kutsealase kõrgusehaiguse korral [M]. Peking: sõjameditsiiniteaduse kirjastus, 2010: 131-148.

[11] Chen Yuntian, Hu Ying. Plasma interleukiini-6 muutused ägeda HACE-ga patsientidel [J]. Chinese Journal of Preventive Medicine, 2006, 24 (2): 92-94.

[12] Colleen Glyde JL, Andrew WS, Megan JW jt. Äge mägitõbi, põletik ja läbilaskvus: uued teadmised vere biomarkerite uuringust [J]. J Appl Physiol, 2011, 111: 392-399.

[13] Zhou QQ, Tan XL, Wang J. Põletikuliste vahendajate poolt põhjustatud hematoentsefaalbarjääri suurenenud läbilaskvus on seotud kõrgmäestiku ajuturse [J]. Sci Res and Essays, 2011, 6 (3): 607-615.

[14] Ohga E, Matsuset. Adhesioonimolekulide seos hüpoksiaga [J]. Nippon Rinsho, 2000, 59 (8): 1587-1591.

[15] Bakonyi T, Radak Z. Kõrgkõrgus ja vabad radikaalid [J]. J Sports Sci Med, 2004, 3(2): 64-69.

[16] Bailey DM, Evans KA, James PE jt. Vabade radikaalide metabolismi muutus ägeda mägihaiguse korral: mõju dünaamilisele aju autoregulatsioonile ja hematoentsefaalbarjääri funktsioonile [J]. J Physiol, 2009, 587(1): 73-85.

[17] Zhou Qiquan, Wang Jing, Wang Yunli jt. Vere-aju hapnikuvabade radikaalide kokkupuutel kõrgel kõrgusel Barjääri läbilaskvuse roll muutub ja selle seos HACE-ga [J]. China Micro Circulation, 2007, 11(3): 149-153.