Ehhinakosiidi ja akteosiidi floridsiinitundlik transport ning muutunud soolestikus imendumise tee pärast Cistanche tubulosa ekstrakti manustamist

Lisateabe saamiseks:ali.ma@wecistanche.com

Tadatoshi Tanino jt

Abstraktsed eesmärgid

Selle uuringu eesmärk oli käsitleda selle kasulikke mõjusidCistanche tubulosa ekstraktehhinakosiidi (ECH) ja akteosiidi (ACT) madala sooleläbilaskvuse parandamise kohta.

meetodid

ECH ja ACT neeldumine sisseCistanche tubulosa ekstraktiseloomustati, kasutades inimese soole Caco{0}} raku monokihte tervete ühenditega. ECH ja ACT glükoositransporterist sõltuvat imendumist kinnitati in-situintestinaalse perfusioonitehnikaga.

Peamised leiud

Näiv läbilaskvus (Papp) ei erinenud oluliselt puutumata ECH ja puutumata ACT vahel. Floridsiini juuresolekul vähenes ECH ja ACT Papp suurtes annustes 20 protsendini vastavast mitteravimisest, kuid floretiin ja verapamiil seda ei muutnud.Cistanche tubulosa ekstraktväikeste ja suurte annuste korral suurendasid ECH ja ACT Papp (mõlemad kolm korda), mille tulemuseks oli nende suur osalus naatriumist sõltuvas glükoosi transporterist sõltumatus imendumises. Madala kontsentratsiooni korral pärssis floridsiin märkimisväärselt samaaegseid ECH ja ACT tasemeid portaalveres.

Järeldus

Dieet ja ravimCistanche tubulosa ekstraktECH ja ACT soolestikus imendumise parandamine võib aidata paremini hallata inimeste tervist, kuigi floridsiinitundliku transpordi osalust tuleks vähendada.

Märksõnadakteosiid; Caco{0}} raku monokihid;Cistanchetubulosa ekstrakt; ehhinakosiid; floridsiinitundlik glükoosi transporter

Cistanche tubulosa ekstrakt

Klõpsake Cistanche tubulosa pulbriks

Sissejuhatus

Cistanche tubulosa juuri on traditsiooniliselt kasutatud meditsiinis ja toidus.Cistanche tubulosa ekstraktOn teada, et sellel on farmakoloogiline toime erinevate ajuhaiguste, vananemisvastaste funktsioonide, rasvade ainevahetuse ja juuste kasvu korral.[1–4]Hiljuti on eraldatud iridoide, monoterpenoide, fenüületanoidglükosiide ja lignaaneCistanche tubulosa[5,6] Fenüületanoidglükosiidid, polüfenoolsete ühendite klass, on Cistanche'i liikide peamised keemilised koostisosad,[7] kuigi nende kogus on erinevate liikide lõikes erinev. Ehhinakosiid (ECH; joonis 1) on HerbaCistanchis üks peamisi fenüületanoidglükosiide. See hüdrolüüsitakse jämesooles bakteriaalse päritoluga ensüümide toimel akteosiidiks (ACT; nimetatakse ka verbaskosiidiks). [8,9] ECH-l ja ACT-l on kasulik maksakaitse[10] ja põletikuvastane[11] toime närilistel. Üllataval kombel parandab vees hästi lahustuv ECH Parkinsoni tõve hiiremudeli käitumist ja neurokeemilisi tulemusi ning inhibeerib kaspaasi{10}} ja kaspaasi-8 aktivatsiooni väikeaju graanulite neuronites.[9] On hästi teada, et hematoentsefaalbarjäär piirab rangelt ksenobiootikumide sisenemist ja jaotumist verest ajju. Wu jt.[12] näitas ka, et vees lahustuv ACT jaotus rottide ajukoes kiiresti. Seetõttu võivad spetsiifilised süsteemid ECH- ja ACT-d transportida ajju, soolestikku ja maksa.

Kuigi on kindlaid tõendeid selle kohta, et tarbimineCistanche tubulosa ekstrakton inimeste tervisele kasulik, puhta ECH läbilaskvus Caco{{0}} raku monokihtides apikaalsel kontsentratsioonil 8,4 ± 1,6 ug/ml on võrdne paratsellulaarse transpordimarkermannitooli omaga või alla selle.[13] Kui rottidele manustatakse suukaudselt puhast ECH-d (annus, 1{{10}}0 mg/kg), on imendumine ülikiire (Tmax, 15 min) ja maksimaalne kontsentratsioon seerumis on väga madal. (Cmax, 0,61 ± 0,32 ug/ml).[14] ECH absoluutne biosaadavus on ainult 0,83 protsenti. Samamoodi, kui Caco-2 rakke inkubeeritakse fenoolfraktsiooniga, mis on osaliselt puhastatud oliiviveski reoveest, on puhas ACT omastamine kiire, tippakumulatsioon toimub 30 minuti pärast ja kogukuhjumise efektiivsus on 0,1 protsenti, mis tagab rakusisese taseme 130 pmol/mg rakuvalgust.[15] Rottidel saavutati puhta ACT maksimaalne kontsentratsioon (0,13 ± 0,03 ug/ml) 30 minuti jooksul pärast 100 mg/kg suukaudset manustamist,[12] mis viitab kiirele imendumisele soolestikust. ACT, aga ka ECH suukaudne biosaadavus on üsna madal (0,12 ± 0,04 protsenti), mis viitab esmase maksapassaaži võimalikule mõjule sooletraktis ja maksas. Roti sapis on ECH metüülimise ja glükuronidatsiooni konjugaadid peamised metaboliidid[16], kuigi maksas toimuva metabolismi ulatus jääb ebaselgeks. Esialgselt leidsime, et ECH ja ACT olid roti soole limaskesta ja kunstliku maohappe homogenaatides üsna stabiilsed (andmeid pole näidatud). Najar jt.[17] näitas, et ACT inhibeerib P-glükoproteiini (P-gp)-ATPaasi aktiivsust sarnaselt verapamiiliga (esinduslik P-gp inhibiitor), mis viitab P-gp modulaatorile; Siiski pole kindel, kas ACT on saadaval P-gp substraadina. Huvitaval kombel näitasid toidust saadud flavonoid-D-glükosiidide hiljutised leiud, et mitme ravimiresistentsuse valk (MRP2) varjas naatriumist sõltuvat glükoositransporterit (SGLT){45}}vahendatud kvertsetiin-4'-O- -glükoosi omastamist,[18] ,19], mis vastutab väga halva imendumise eest. Siiski on väga vähe teada polüfenoolglükosiidide tundlikkusest absorbeerivate transporterite, sealhulgas glükoosi transporterite suhtes. Teave kvertsetiin-4'-glükosiidi ja kiiresti hematoentsefaalbarjääri läbilaskva ECH absorptsiooniomaduste kohta ajendas meid uurima glükosiidide transporteri suhtes tundlike glükosiidide transporterite toitumist. tubulosa.

Selles uuringus uurisime inimese intestinaalse Caco-2 raku monokihtide abil glükoosi transporteri poolt vahendatud intaktse ECH ja ACT imendumist. Samal ajal toimub ECH ja ACT absorptsioonitransport koos toidugaCistanche tubulosa ekstraktiseloomustas in vitro mudel ja in situ soole perfusioonisüsteem koos portaalvere proovide võtmisega, mis võimaldab hõlpsasti eristada imendumise ulatust ja maksa esmase passiivsuse vältimist.

Materjalid ja meetodid

Materjalid

Terved ECH ja ACT olid EishinTrading Co., Ltd (Osaka, Jaapan) helded kingitused. Floridsiin ja floretiin osteti ettevõttelt Tokyo Kasei Co., Ltd. (Tokyo, Jaapan). Verapamiil ja p-kumaarhape, mida kasutati kõrgsurvevedelikkromatograafia (HPLC) analüüsi sisestandarditena, saadi firmast Sigma-Aldrich (St Louis, MO). ,USA). Kõik muud kasutatud kemikaalid olid analüütilise kvaliteediga ja kaubanduslikult saadaval.

Taimne materjal ja metanooliekstrakti valmistamine

C. tubulosa (SCHRENK) R. WIGHT (Orobanchaceae) on mitmeaastane parasiitaim, mis kasvab Salvadoraor Calotropis liikide juurtel ja on levinud Põhja-Aafrika, Araabia ja Aasia riikides. C. tubulosa kuivatatud varred pulbristati ja ekstraheeriti kolm korda metanooliga püstjahuti all 3 tundi. Lahusti aurustamine alandatud rõhul andis metanooliekstrakti. Metanooliekstrakt (kaubanduslik klass, partii nr 20070130; registreeritud kaubanimi, Sabaku Ninnjinn Kanka) oli Eishin Trading Co., Ltd. helde kingitus Muraoka ja Morikawa (Kinki ülikool, Jaapan) kaudu ning botaanilise identifitseerimise viis läbi aastal professor Jia Xiaoguang. Xinjiangi traditsioonilise hiina ja etnoloogilise meditsiini instituut.

Taimeekstrakti analüüs: kromatograafia

Määrasime ECH- ja ACT-i sisuCistanche tubulosa ekstrakt(partii nr 20070130) HPLC analüüsi abil, mida on kirjeldatud allpool. Saadud andmed on toodud tabelis 1.

Rakukultuur

Caco{{0}} rakke, mis osteti ettevõttest American Type CultureCollection (ATCC, Rockville, MD, USA), kasutati läbipääsudes 38–53. Neid kasvatati kultuurisöötmes, mis koosnes Dulbecco modifitseeritud Eagle'i söötmest (DMEM, Nacalai Tesque Co., Kyoto, Jaapan), millele oli lisatud 0,1 mM mitteasendamatuid aminohappeid, 10% kuumusega inaktiveeritud veise looteseerumit, 100 ui. U/ml penitsilliin G ja 0,1 mg/ml streptomütsiinsulfaati.

Transpordiuuringud

Caco-2 rakud kanti polükarbonaatfiltritele tihedusega 6,4 × 103 rakku/cm2. Transpordikatsetes kasutati monokihte 21–25 päeva pärast külvamist. Terved ECH ja ACT, mis olid samaväärsed nende sisugaCistanche tubulosa ekstrakt (4.5 and 13.5 mg/ml) were mixed with DMEM medium containing 0.5% dimethylsulfoxide to maintain the integrity of the cell monolayer over the periods of the experiments. Intact ACT equivalent to ECH content in the extract was also dosed in the incubation medium. The extract was suspended in a DMEM medium and was centrifuged to remove insoluble components. Supernatants were loaded to the apical side. At the indicated times, an aliquot of the incubation medium was withdrawn from the basolateral side and was mixed with acetonitrile containing an internal standard for the assay. In separate experiments, phloridzin (final concentration, 1 mM) and verapamil (final concentration, 0.2 mM) was added to the apical side of the monolayer; however, phloretin (final concentration, 0.3 mM) was treated on both sides of the monolayer. The integrity of monolayers was monitored by transepithelial electrical resistance (TEER) using Millicell-ERS (Millipore, Bedford, MA, USA) before and after transport experiments. TEER values of monolayers used were >300 Ω·cm2.

Ehhinakosiid sisseCistanche tubulosa ekstrakt

In situ soole perfusioon

Isased Wistari rotid (230–250 g) saadi firmast SLCJapan (Hamamatsu, Jaapan). Loomi hoiti enne kasutamist 1 nädal konditsioneeriga ruumis 12-tunnise valguse/pimeduse tsükli all. Rottidele toideti standardset laboratoorset toitu (Oriental Yeast Co., Ltd., Tokyo, Jaapan) veega ad libitum ja neid paastuti üleöö enne testi. Sisevereringe perfusiooniuuring viidi läbi vastavalt Mihara jt kirjeldatud modifitseeritud protseduurile.[20]Lühidalt, rotid tuimastati 25% uretaanilahusega (1 mg/kg), et vältida vererõhu langust. Tehti kõhu keskjoone sisselõige ja peensool paljastati. Sapijuha ligeeriti, et vältida sapi sekretsiooni perfusaati. Tervet peensoolt ühe segmendina (kaksteistsõrmiksoolest niudesooleni) loputati tavalise soolalahusega 37 kraadi juures 10 minutit, kuni pesu oli selge. Seejärel kanüüliti silikoontoruga ühendatud klaastorud peensoole mõlemasse otsa ja kinnitati õmblusniidiga. Seejärel asendati peensool kõhus ja kanüülid ühendati peristaltilise pumbaga. Portaalveen kanüüliti polüetüleentoruga (PE10).Cistanche tubulosa ekstraktkaubanduslikult saadaval olev suspendeeriti Krebs-Henseleiti vesinikkarbonaatpuhvris (pH 7,4), saades lõppkontsentratsiooniks 4,5 mg/ml, ja tsentrifuugiti 10 min kiirusel 8000 pööret minutis, et eemaldada lahustumatud komponendid. Floridsiini (1 mM) puudumisel või juuresolekul supernatant koguti reservuaari, mida hoiti kogu katse jooksul temperatuuril 37 ± 0,5 kraadi. Näidatud aegadel võeti verd läbi portaalveeni kanüüli. Pärast vereproovide tsentrifuugimist devalkeeriti saadud plasma sisestandardit sisaldava atsetonitriiliga ja tsentrifuugiti kiirusel 3000 p/min. Supernatandid aurustati ja jääk lahustati liikuva faasiga, mis koosnes atsetonitriilist ja 0,5% äädikhappest. Segatud lahus kanti HPLC kolonni. Rotte kasutati eetiliste protseduuride kohaselt, järgides Jaapani valitsuse ja Kinki ülikooli poolt välja antud laboriloomade hooldamise ja kasutamise juhiseid.

HPLC analüüs

HPLC analüüs viidi läbi süsteemiga, mis oli varustatud aShimadzu SPD{{0}}A, UV-detektori, Shimadzu LC-10A pumba ja Shimadzu C-R4A kromatopaki integraatoriga (Kyoto, Jaapan). ECH ja ACT eraldati Inertsil ODScolumni abil (5 μm, 4,6 × 15{13}} mm, GL Sciences Inc., Osaka, Jaapan). Kasutati atsetonitriili ja 0,5% äädikhappe liikuvat faasi vahekorras 15:85 (maht/maht) voolukiirusel 1,0 ml/min. Tuvastamine viidi läbi 334 nm juures

Kineetiline analüüs

Nähtavad läbilaskvuskoefitsiendid (Papp) hinnati Caco-2 raku monokihtide kaudu toimuva ühendi transpordi aja lineaarse osa kalde järgi järgmiselt: P dQ dt AC rakendus=( ) ( )

kus dQ/dt on läbilaskvuse määr, C0 on lahustunud aine algkontsentratsioon doonorikambris ja A on membraani pindala (4,7 cm2).

Roti in situ sooleperfusiooni uuringus arvutati vastavalt lineaarsele trapetsikujulisele reeglile portaalveeni plasmakontsentratsiooni-aja kõvera alune pindala (AUC0–90) nullist kuni viimase mõõtmiseni.

Akteosiid sisseCistanche tubulosa ekstrakt

Füüsikalis-keemilised omadused

Ühendite polaarne ja mittepolaarne pind arvutati programmi SAS (versioon 0.8, Olsson, T.; Sherbukhin, V., Synthesis and Structure Administration, 1997–2001, AstraZeneca, Cary) abil. , NC, USA). Eksperimentaalselt määratud log P ja pKa väärtused saadi kirjandusest.

Statistiline analüüs

Andmeid analüüsiti ühesuunalise dispersioonanalüüsiga, millele järgnes Tukey post-hoc test. Tõenäosusväärtusi, mis olid alla 5 protsendi, peeti oluliseks.

Tulemused

Ehhinakosiidi ja akteosiidi neelduv transport läbi Caco{0}} raku monokihtide

Hiirtele ja rottidele manustatakse puutumata ECH[10,14] ja ACT[12,21] suukaudselt annustes 100–1000 mg/kg. TheCistanche tubulosa ekstraktkasutatud sisaldas ligikaudu 30 protsenti ECH-d ja 15 protsenti ACT-d annuse kohta. Kuna ekstrakt muutis inkubatsioonikeskkonnas osmootset rõhku ja pH-d, määrati suukaudse annuse põhjal kontsentratsioonid 4,5 ja 13,5 mg/ml (intaktsed ühendid: 2–20 mg/2{{2{{31} }}} g kehamassi) hiirtel. Väikeste (4,5 mg/ml) ja suurte annuste (13,5 mg/ml) ekstrakt sisaldas 2.0 ja 6,1 mg ECH ja 1.{35}} ja vastavalt 3.{39}} mg ACT jaoks. Kasutasime C. tubulosa ekstrakti koguseid, mis olid palju väiksemad kui inimestel teatatud ECH ja ACT suukaudsed annused (ekstrakti soovitatav toidukogus: 15{41}} mg, mis sisaldab ligikaudu 45 mg forECH-d ja 22,5 mg ACT-d). Intaktsete ühendite väikeste ja suurte annuste korral ei erinenud neeldumisprofiilid (joonis 2) ja Papp oluliselt ECH ja ACT kui ECH ekvivalendi vahel (tabel 2). Kui söötmesse laaditi C. tubulosa ekstrakti suures annuses 13,5 mg/ml, siis Pappvalues ​​(vastavalt 1,27 ± 0,13 ja 0,34 ± 0,03 × 10-6 cm/s) ECH ja ACT samaaegsete patsientide arv oli kolm korda suurem kui puutumata ECH ja ACT (tabel 2). Erinevalt puutumatutest ühenditest suurendas ekstrakt märkimisväärselt ECH ja ACT absorptsioonitransporti.

Floridsiini, floretiini ja verapamiili pärssiv toime

To characterize the intestinal absorption of ECH and ACT, Caco-2 cell monolayers were incubated with representative inhibitors. Apical glucose transporter 1-sensitive phloridzin dramatically reduced the Papp of intact ECH and ACT to 20% of non-treatment at the high dose (Table 2). Basolateral glucose transporter (GLUT) 2-sensitive phloretin did not decrease the transport of intact ECH and ACT (Figure 3). In this study, higher concentrations (>0,3 mM) floretiini ei saanud kasutada märgatava raku toksilisuse tõttu. Lisaks on tuvastatud, et P-gp on oluline tegur, kes vastutab taimsete ravimite ja kliiniliselt oluliste P-gpsubstraatide vahelise koostoime eest. Verapamiil ei suurendanud intaktsete ühendite absorptsioonitransporti (joonis 3).

Floridsiin inhibeeris oluliselt ECH ja ACT neelduvat transporti ekstraktis (väike annus) (tabel 2 ja joonis 4). Suure annusega ekstrakt pärssis floridsiinitundlikku inhibeerimist, kuigi puutumata ECH ja ACT transport oli floridsiini suhtes tundlikum (tabel 2).

In situ soole perfusiooni uuring

In situ uuringus testisime, kas ECH ja ACT on sisse lülitatudCistanche tubulosa ekstrakttransporditi SGLT1-ga, mis asus peensoole apikaalsel küljel. Kui toiduekstrakti väikeses annuses (4, 5 mg / ml) perfuseeriti, ilmusid portaalverre kiiresti ECH ja ACT (joonis 5). AUC määrati ECH jaoks 2702,8 ± 384,1 μm·min ja ACT jaoks 698,3 ± 197,2 μm·min. Pärast seda, kui AUC normaliseeriti sisaldusega alatesCistanche tubulosa ekstrakt, ei erinenud neeldunud kogus ECH ja ACT vahel oluliselt. Erinevalt floretiinist pärssis SGLT1-tundlik floridsiin märkimisväärselt samaaegse ECH (AUC, 649,4 ± 248,2 μm·min) ja ACT (ei tuvastatud) imendumist.

Arutelu

Mõned taimsed koostisosad on P-gp substraadid, mida ekspresseeritakse kõrgelt maksas, soolestikus, ajus ja neerudes. P-gp on määrav tegur taimsete ravimite, sealhulgas naistepuna, kurkumiini, ehhiaatsia, ženšenni, hõlmikpuu ja ingveri in vivo biosaadavuse, jaotumise ja leviku osas.[22,23]Genisteiini biosaadavus{{5} }glükosiidi, flavonoidderivaati, piiras ka soolestiku MRP2 transporter.[24] Seetõttu oli selle uuringu eesmärk uurida ECH ja ACT neeldumisomadusi samaaegselt manustatavate ja ravimitega.Cistanche tubulosa ekstrakt.

Polariseeritud Caco{{0}} rakkude monokihid, aga ka sool,[25] ekspresseerivad peamisi soolestiku ravimite väljavoolu transportereid, nagu P-gp, MRP-d ja rinnavähi resistentsuse valk.[26]Toidu flavonoidid. On näidatud, et kvertsetiini [27] ja müritsetiini [28] kasutamine pärsib P-gp-vahendatud väljavoolu nii rakuliinides kui ka loommudelites. Verapamiil, P-gp inhibiitor, ei muutnud ACT ja ECH läbilaskvust Caco-2 rakkude monokihtides (joonis 3), mis näitab, et P-gp väljavoolupump ei piiranud puutumata ECH-d ja ACT-d. Meie varasemad uuringud näitasid, et MRP2 valke ei ekspresseerunud Caco{13}} rakkude monokihtides.[29] P-gp ja MRP{16}}vahendatud väljavoolu võib ECH ja ACT transpordis välistada. Mõned madala lipofiilsusega kvertsetiini glükosiidid imendusid tõhusamalt kui kvertsetiin ise.[30] Samuti on oluline märkida, et suhkruosaga ACT jaotub ajukoes kiiresti. Meie tähelepanu on keskendunud kahe glükoosi transportija inenterotsüüdi kombineeritud toimele: SGLT pintsli piiri membraanis ja hõlbustatud difusioonglükoosi transport (GLUT) basolateraalses membraanis. Caco-2 rakukultuuri saab kasutada mudelina floretiin-tundlike GLUT2, ja floridsiini suhtes tundlike SGLT1 ja 2 transporterite uurimiseks.[31–34]Glükoosi transporditakse Caco-2 monokihtide tipust basolateraalsele küljele. suure kiirusega Pappofiga 36,8 ± 1,1 × 10−6 cm/s.[35] Sellel on kõrgem pappthan kui transtsellulaarse transpordi marker propranolool (23,4 ± 2,8 × 10−6 cm/s). Nagu on näidatud tabelis 2, oli puutumata ECH ja ACT Papp palju madalam kui glükoosi ja passiivse propranolooli puhul. Arvutasime jaotuskoefitsiendi (oktanool-vesi) logaritmi, log P, oli vastavalt –2,32 ja 0,077 ECH ja ACT jaoks. Arvatakse, et polaarsed hüdrofiilsed ühendid transporditakse paratsellulaarset rada pidi (läbi tihedate ristmike). Kaks fenüületanoidglükosiidi, nagu mannitool, näivad transporditavat paratsellulaarset teed pidi. Kuid floridsiin vähendas dramaatiliselt puutumata ECH ja ACT neeldumisläbilaskvust (tabel 2), mis viitab sellele, et apikaalneSGLT1 mängib olulist rolli puutumata ECH ja ACT imendumisel soolestikust. Samaväärse annuse korral oli suurem hüdrofoobne ACT läbilaskvus lähedane ECH läbilaskvusele (joonis 2 ja tabel 2). Yoshikawa jt.[36] on näidanud, et soodustavad transporterid (GLUT 1 ja 2), aga ka floridsiinitundlik SGLT1 ekspresseeruvad intensiivselt peensooles. Kuna neeldunud ühendite kogused põhinevad omastamise ja eliminatsiooni vahelisel massitasakaal, hindasime GLUT2 osalemist. Glükoos läbib enterotsüütide apikaalseid membraane SGLT1 abil suure afiinsusega ja väikese võimsusega ning väljub basolateraalsest membraanist läbi GLUT2 madala afiinsuse ja suure võimsusega. Floretiin (GLUT2 spetsiifiline inhibiitor) ei kaotanud puutumata ECH ja ACT transporti (joonis 3). Funes jt.[37] näitas, et ACT suhtles tugevalt fosfolipiidmembraanide fosfaatrühmadega. Kuna hüdroksüülrühmi on ACT struktuuris ohtralt, on nende rühmade ja glütserooli polaarpeade või fosfolipiidide fosfaatrühmade vahelised vesiniksidemed kõige tõenäolisemad interaktsioonid. Kui puutumatut ECH-d ja selle ekvivalenti ACT-d inkubeeriti Caco-2 monokihtidega 11 tundi, oli ACT akumulatsioon rakus (0,24 ± 0,04 nmol/cm2) kolm korda suurem kui ECH-l (0,07 ± 0,01 nmol/cm2). Arvasime, et SGLT{74}}tundlik ECH ja ACT viidi aeglaselt enterotsüütidest vereringesse, mis võib viia madala Pappini. Võrreldes väga hüdrofiilse ECH-ga, võib ACT madal läbilaskvus olla tingitud rakumembraanide interkalatsioonist.

Cistanche tubulosa ekstrakt

Polüfenoolühendeid tarbitakse ravimtaimede segudes nende kliinilise kasutamise ajal ja need on kaubanduslikult saadaval toidulisanditena. In vitro uuringus näidati, et fenoolsete epikatehhiinide imendumist ei mõjutanud joogitoidu koostisosade koostis.[38] Seevastu Hypericum perforatumL. tootemaatriksid mõjutavad kvertsetinglükosiidide (rutiin ja isokvertsitriin) ja hüperosiidi transporti läbi Caco-2 rakkude maatriksifütokeemilise koostise ja transpordiomaduste erinevuste tõttu, st paratsellulaarses ülekandes ja kandja vahendatud või aktiivses transpordis.[39] Selles uuringus tagas C. tubulosa kolm korda suurema transepiteliaalse transpordi kui terve ECH ja ACT (joonis 2 ja tabel 2). Me oletame, et komponendidCistanche tubulosa ekstraktaktiveerida floridsiinitundlikku transporterit ja/või kiirendada intratsellulaarse ECH ja ACT eliminatsiooni.Cistanche tubulosa ekstraktsuur annus näis varjavat floridsiinitundliku transpordi tugevust (tabel 2). Toiduga saadavad süsivesikud[40] ja valgud[41] interakteeruvad mõnede polüfenoolidega seedetraktis. Morikawa et al.[10] näitas, et viis iridoidi, kankanosiidi AD ja kankanooli, monoterpeenglükosiidi, kankanosiidi E, kahte fenüületanoidoligoglükosiidi, kankanosiidi F ja G ning atsüülitud oligosuhkrut kankanosiidi, saab eraldadaCistanche tubulosa ekstrakt

praegu kasutusel. Muud koostisosad, sealhulgas valgudCistanche tubulosa ekstrakt, jääb selgusetuks. Koos ülaltoodud spekulatsioonidega oleme kavandatud uurima, kas muud komponendid interakteeruvad SGLT1-ga ja pärsivad ECH ja ACT absorptsiooni.

In vivo katsed ei suuda kergesti eristada imendumise ulatust ja esmase maksa kaudu väljumise vältimist. In-situ sooleperfusioonimudelil on eelis in vivo ja in vitro mudelite ees tänu katseparameetrite hõlpsale kontrollile ja teiste organite mõju välistamisele ning intaktse soole verevarustuse säilitamisele.[22] Floridsiini suhtes tundliku glükoosi transporteri osalust hinnati in situ soole perfusioonisüsteemis. Nagu on näidatud joonisel 5, neeldunud ECH ja ACT kaasainete kogusedCistanche tubulosa ekstrakt (low dose) were greatly abolished by phloridzin, which agrees with our in-vitro data (Figure 4). Using peptides and 20 drugs passively absorbed, a good correlation is obtained between in-vivo drug absorption and the drug permeability of Caco-2 monolayers.[42] Drugs with a Papp of >1 × 10–6 cm/s imenduvad inimestel täielikult, samas kui halvasti imenduvad ravimid ja peptiidid (<1% of="" dose)="" have="" papp="" values="" of=""><1 ×="" 10−7="" cm/s.="" surprisingly,="" the="" papp="" of="" the="" ech="" concomitant="" (high="" dose)="" was="">1 × 10–6 cm/s (tabel 2), mis viitab kõrgele suukaudsele biosaadavusele loomadel ja inimestel. Crespy jt.[43] näitasid, et in situ soole perfusiooni uuringus ei erinenud floridsiini ja floretiini väljavool oluliselt. Nad [44] näitasid ka, et SGLT1 suhtes kõrge tundlikkusega floridsiini suukaudne biosaadavus oli rottidel vaid 10 protsenti. Tulevased uuringud peavad hindama ECH biosaadavust ja maksa esmase maksapassaaži toimet pärast toiduekstrakti suure annuse suukaudset manustamist. In situ tulemused viitavad sellele, et tarbimineCistanche tubulosa ekstraktvõib parandada puutumata ECH ja ACT madalat suukaudset imendumist.

Järeldus

Dieet ja ravimCistanche tubulosa ekstraktECH ja ACT soolestikus imendumise parandamine võib aidata paremini juhtida inimeste tervist, kuigi floridsiinitundliku transpordi osalust tuleks vähendada.

Deklaratsioonid

Huvide konflikt

Autor(id) kinnitab(id), et neil ei ole huvide konflikte, mida avalikustada

Rahastamine

Seda tööd toetas osaliselt Kinki ülikooli kõrgtehnoloogia uurimiskeskus.

Tänuavaldused

Autorid soovivad tänada Osamu Muraokat (Kinki ülikool, Osaka, Jaapan) ja Toshio Morikawat (Kinki ülikool, Osaka, Jaapan) pakkumise eest.Cistanche tubulosa ekstraktja puhtad koostisosad. Oleme Masahiro Iwakile (Kinki Ülikool) õppetoetuse eest väga tänulikud.

Cistanche tubulosa ekstrakttooted

Pärit: ' Phloridzin-tundlik ehhinakosiidi ja akteosiidi transport ning muutunud soolestikus imendumise tee pärast ravimi kasutamistCistanche tubulosa ekstrakt' kõrvalTadatoshi Tanino jt

---© 2015 Royal Pharmaceutical Society, Journal of Pharmacy and Pharmacology, 67, lk 1457–1465,Fenüületanoidglükosiidid, mida transpordib SGLT1

Viited

1. Tanaka J et al. MõjuCistanche tubulosa ekstrakterinevate ajuhaiguste korral. Toidustiil 21 2008; 12: 24–26.

2. Tanaka J et al. Vananemisvastased funktsioonidCistanche tubulosa ekstrakt. Toidustiil 21 2008; 12: 27–29.
3. Tanaka J et al. Ilu ja juuste kasvu funktsioonidCistanche tubulosa ekstrakt. Toidustiil 21 2008; 12: 29–32.
4. Tanaka J et al. Rasva metaboliseeriv toimeCistanche tubulosa ekstrakt. Toidustiil 21 2008; 12:30–33.
5. Yoshizawa F et al. Cistanche tubulosa Schrenk (Hook) f.II koostisosad. uue fenüületanoidglükosiidi ja uue neolignaanglükosiidi eraldamine ja struktuur. Chem Pharm Bull 1990; 38: 1927–1930.
6. Yoshikawa M et al. Cistanche tubulosa vasorelakseeriva toimega fenüületanoidoligoglükosiidid ja atsüülitud oligosuhkrud. Bioorg Med Chem 2006; 14: 7468–7475.
7. Tu PF et al. Herba tsistantside fenüületanoidglükosiidide analüüs RP-HPLC abil. Yao Xue Xue Bao 1997; 32: 294–300.
8. Lei L et al. Herba tsüstanšidest pärit fenüületanoidglükosiidide metaboolne regulatsioon koera seedetraktis. Yao Xue Xue Bao 2001; 36: 432–435.
9. Geng X et al. Ehhinakosiidi neuroprotektiivne toime Parkinsoni tõve hiire MPTP mudelis. Eur J Pharmacol 2007; 564: 66–74.
10. Morikawa T et al. Hepatoprotektiivse toimega atsüülitud fenüületanoidoligoglükosiidid kõrbetaimest Cistanche tubulosa. Bioorg Med Chem 2010; 18: 1882–1890.
11. Paola RD et al. Syringa Vulgarise taimerakukultuuridega biotehnoloogiliselt puhastatud verbaskosiidi mõju periodontiidi näriliste mudelile. J Pharm Pharmacol 2011; 63: 707–717.
12. Wu YT et al. Cistanche deserticola ja Boschniakia rossica akteosiidi määramine ja selle farmakokineetika vabalt liikuvatel rottidel, kasutades LC-MS/MS. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 2006; 844: 89–95.
13. Matthias A et al. Echinacea alküülamiidide ja kohvhappe konjugaatide läbilaskvuse uuringud, kasutades caco-2 raku ühekihilist mudelit. J Clin Pharm Therapeut 2004; 29: 7–13.
14. Jia C et al. Ehhinakosiidi määramine roti seerumis pöördfaasilise kõrgsurvevedelikkromatograafia abil ultravioletttuvastusega ning selle rakendamine farmakokineetika ja biosaadavuse osas. J Chromatogr 2006; 844: 308–313.
15. Cardinali A et al. Verbaskosiidid oliiviveski veest: nende biosaadavuse ja soolestikust omastamise hindamine, kasutades in vitro seedimise/caco{1}} mudelsüsteemi. J Food Sci 2011; 176: H48–H54.
16. Jia C et al. Hea antioksüdandi ehhinakosiidi metabolism rottidel: selle sapiteede metaboliitide eraldamine ja tuvastamine. Drug Metab Dispos 2009; 37: 431–438.
17. Najar IA et al. P-glükoproteiini ATPaasi aktiivsuse moduleerimine mõnede fütokomponentide poolt. Phytother Res 2009; 24: 454–458.
18. Walgren RA et al. Toidu flavonoid-kvertsetiin-4'-beeta-glükosiidi väljavool inimese soole kako-2-rakkude monokihtidest apikaalse mitme ravimiresistentsusega seotud valgu-2 kaudu. J Pharmacol Exp Ther 2000a; 294: 830–836.
19. Walgren RA et al. Toidu flavonoid-kvertsetiin-4'-beeta-glükosidaasi omastamine rakkudes naatriumist sõltuva glükoositransporteri SGLT1 poolt. J Pharmacol Exp Ther 2000b; 294: 837–843.
20. Mihara K jt. Eperisooni esmane metabolism soolestikus rottidel. Pharm Res 2001; 18: 1131–1137.
21. Isacchi B et al. Verbaskosiidi antihüperalgeesiline toime kahes neuropaatilise valu mudelis. J Pharm Pharmacol 2011; 63: 594–601.

22. Cook TJ et al. Kloorpürifossi soole läbilaskvus rottidel ühekordse sooleperfusiooni meetodil. Toksikoloogia 2003; 184: 125–133.

23. Kumar YS et al. P-glükoproteiini ja tsütokroom P-450-vahendatud taimsete ravimite koostoime. Drug Metabol Drug Interact 2010; 25: 3–16.
24. Walle UK et al. Genisteiin-7-glükosiidi transport inimese soolestiku CACO-2 rakkude poolt: MRP2 potentsiaalne roll. Res Commun Mol Pathol Pharmacol 1999; 103: 45–56.
25. Ito K et al. Ravimitransporterite apikaalne / basolateraalne pinnaekspressioon ja selle roll vektoriaalses ravimitranspordis. Pharm Res 2005; 22: 1559–1577.
26. Laitinen L jt. Caco-2 rakukultuurid soolestikus imendumise hindamisel: mõnede samaaegselt manustatud ravimite ja looduslike ühendite mõju bioloogilistes maatriksites. (Helsingi Ülikool, Soome, 2006) Akadeemiline dissertatsioon, lk 1–66.
27. Scambia G et al. Kvertsetiin võimendab adriamütsiini toimet inimese multiresistentses MCF-7 rinnavähi rakuliinis: võimaliku sihtmärgina P-glükoproteiin. Cancer Chemother Pharmacol 1994; 34: 459–464.
28. Choi DH et al. Antioksüdandi müritsetiini mõju losartaani ja selle aktiivse metaboliidi EXP-3174 farmakokineetikale rottidel: tsütokroom P450 3A4, tsütokroom P450 2C9 ja P- glükoproteiini pärssimine müritsetiini poolt. J Pharm Pharmacol 2010; 62: 908–914.
29. Tanino T et al. Paklitakseel-2′-etüülkarbonaadi eelravim võib vältida P-glükoproteiini vahendatud raku väljavoolu, et suurendada ravimi tsütotoksilisust. Pharm Res 2007; 24: 555–565.
30. Hollman PC et al. Toidu kvertsetiinglükosiidide ja kvertsetiini imendumine tervetel ileostoomiga vabatahtlikel. Am J Clin Nutr 1995; 62: 1276–1282.
31. Kellett GL et al. Soole glükoosi imendumise difuusset komponenti vahendab glükoosist põhjustatud GLUT2 värbamine harjaplaadi membraanile. Biochem J 2000; 350: 155–162.
32. Matter K et al. Endogeensete plasmamembraani valkude sorteerimine toimub inimese kultiveeritud sooleepiteelirakkudes (Caco-2) kahest kohast. Cell 1990; 60: 429–437.
33. Mahraoui L et al. SGLT1, GLUT1, GLUT2, GLUT3 ja GLUT5 heksoosi transporteri mRNA-de olemasolu ja erinev ekspressioon Caco-2 rakukloonides seoses rakkude kasvu ja glükoositarbimisega. Biochem, J 1994; 298: 629–633.

34. Mesonero J et al. Fruktoosi transporteri GLUT 5 suhkrust sõltuv ekspressioon Cac-2 rakkudes. Biochem, J 1995; 312: 757–762.

35. Walgren RA et al. Kvertsetiini ja selle glükosiidide transport läbi inimese sooleepiteeli Caco-2 rakkude. Biochem Pharmacol 1998; 55: 1721–1727.
36. Yoshikawa T et al. Heksoosi transporterite (SGLT1, GLUT1, GLUT2 ja GLUT5) võrdlev ekspressioon kogu hiire seedetraktis. Histochem Cell Biol 2011; 135: 183–194.
37. Funes L et al. Sidrunverbena fenüülpropanoidglükosiidi verbaskosiidi mõju fosfolipiidide mudelimembraanidele. Chem Phys Lipids 2010; 163: 190–199.
38. Neilson AP et al. Šokolaadimaatriksi koostise mõju kakao flavan{1}ooli biosaadavusele in vitro ja biosaadavusele inimestel. J Agric Food Chem 2009; 57: 9418–9426.
39. Gao S et al. Väga varieeruv fenoolide sisaldus naistepunatoodetes mõjutab nende transporti inimese soolestiku Caco{1}} rakumudelis: toodete standardimise farmatseutiline ja biofarmatseutiline põhjendus. J Agric Food Chem 2010; 58: 6650–6659.
40. Schramm DD et al. Toidu mõju kakao flavanoolide imendumisele ja farmakokineetikale. Life Sci 2003; 73: 857–869.
41. Laurent C et al. Etanool ja polüfenoolivaba veinimaatriks stimuleerivad inimese soolestiku Caco-2 rakkude diferentseerumist. Nende seos protsüanidiinirikka viinamarjaseemne ekstraktiga. J Agric Food Chem 2005; 53: 5541–5548.
42. Artursson P et al. Korrelatsioon inimestel suukaudse ravimi imendumise ja inimese sisemiste epiteelirakkude (Caco-2) näivate ravimite läbilaskvuskoefitsientide vahel. Biochem Biophys Res Commun 1991; 175: 880–885.
43. Crespy V et al. Kvertsetiini, floretiini ja nende glükosiidide soolestikust imendumise võrdlus rottidel. J Nutr 2001a; 131: 2109–2114.
44. Crespy V et al. Floretiini ja floridsiini biosaadavus rottidel. J Nutr 2001b; 131: 3227–3230.