Cistanche Tubulosa (Schenk) Wighti fenüületanoidglükosiidid: põhjalik ülevaade farmakoloogiast, mehhanismidest, farmakokineetikast ja ohutusest

Abstraktne:Cistanche tubulosa (Schenk) Wight, Orobanchaceae sugukonda kuuluv parasiitaim, levib peamiselt Hiinas Xinjiangi lõunaosas ja on üks kahest Hiina farmakopöas ametlikult loetletud Cistanches Herba botaanilisest allikast. Seda on pikka aega peetud kõrbe ženšenniks. Fenüületanoidglükosiidid (PhG-d), mida esindavad ehhinakosiid (ECH), verbaskosiid/akteosiid (ACT), isoakteosiid (IAT) ja tubulosiid A (TA), on selle peamised bioaktiivsed komponendid. Selles ülevaates võetakse süstemaatiliselt kokku PhG-de keemiline koostis ja sisalduse varieeruvus C. tubulosa's, ekstraheerimise, eraldamise ja kvaliteedikontrolli strateegiad, farmakokineetiline käitumine ning seni teatatud farmakoloogiline toime ja molekulaarsed mehhanismid, sealhulgas neuroprotektsioon ja kognitiivsete funktsioonide paranemine, vananemisvastane ja antioksüdantne toime, osteoporoosivastane aktiivsus ja taasproduktiivne aktiivsus, endokripiidne aktiivsus ja glükooliinne regulatsioon, hepatoprotektsioon, nefroprotektsioon, põletikuvastane ja immunomoduleeriv toime, lahtistav toime ja soolestiku mikrobiota reguleerimine ning väsimusevastane toime. Arutatakse ka toksikoloogilisi leide, kliinilisi tõendeid ja translatsiooni arengut. Praegused tõendid näitavad, et C. tubulosa PhG-d toimivad mitmele sihtmärgile ja rajale, mille hulgas on Nrf2/HO-1 antioksüdantide telg, TGF-beeta1/Smad anti-fibrootiline signaaliülekanne, CYP450-3beta-HSD steroidogeenne regulatsioon, NLRP3 põletikuliste protsesside inhibeerimine, CK2-meedia fusioon, mitokondrite alfa-pritsi. Lühiahelalisi rasvhappeid hõlmavat telge on kõige intensiivsemalt uuritud. Kehv suukaudne biosaadavus (ehhinakosiidi absoluutne biosaadavus rottidel on ligikaudu 0,83%) on endiselt peamine barjäär ravimite väljatöötamisel ja kvaliteetsed tõendid inimestelt on endiselt piiratud. Tulevases töös tuleks eelistada ühtlustatud võrdlusstandardeid ja annuste aruandlust, soolestiku mikroobide metabolismi ja kokkupuute-vastuse suhete selgitamist, süsteemset kokkupuudet suurendavaid manustamissüsteeme ja rangelt kavandatud randomiseeritud kontrollitud uuringuid.

Kõrbe ženšenn

Märksõnad: Cistanche tubulosa; fenüületanoidglükosiidid; ehhinakosiid; verbaskosiid; farmakoloogia; molekulaarne mehhanism; farmakokineetika; ohutus

1. Sissejuhatus

Cistanche (Cistanches Herba) koosneb perekonna Cistanche (Orobanchaceae) mitmeaastastest parasiittaimedest, mis kasvavad kõrbetaimede, nagu Tamarix ja Haloxylon liikide juurtel. Seda on Hiinas meditsiiniliselt kasutatud enam kui kaks tuhat aastat, traditsioonilistes retseptides on see üks kõige sagedamini välja kirjutatud toniseerivaid ürte ning vananemisvastastes koostistes on see ženšenni järel teisel kohal, mis seletab selle mainet kõrbe ženšenna. Hiina farmakopöa on alates 2005. aasta väljaandest aktsepteerinud nii Cistanche deserticola YC Ma kui ka Cistanche tubulosa (Schenk) Wighti kuivatatud mahlaseid varsi koos ketendavate lehtedega Cistanches Herba ametlike botaaniliste allikatena ning seda korraldust säilitatakse ka 2020. ja 2025. aasta väljaannetes.

C. tubulosa on levinud peamiselt Tarimi jõgikonnas Lõuna-Xinjiangis, suurimad kasvualad on Hotanis ja Bayingolinis, kus ta parasiteerib Tamarixi liikidel. Võrreldes C. deserticolaga sisaldab C. tubulosa märkimisväärselt rohkem fenüületanoidglükosiide, mistõttu on farmakopöas seatud kahe allika jaoks erinevad piirmäärad: kuivatatud ainete põhjal arvutatuna peab ehhinakosiidi ja verbaskosiidi kombineeritud sisaldus olema C. deserticola puhul vähemalt 0,30 protsenti, kuid C. deserticola puhul mitte vähem kui 5 protsenti. See erinevus on muutnud C. tubulosa peamiseks tooraineks PhG-de kaevandamiseks ja tööstuslikuks arendamiseks.

Fenüületanoolglükosiid on Cistanche tubulosa peamine aktiivne komponent

Traditsioonilises Hiina meditsiinis on Cistanches Herba maitselt magus ja soolane ning olemuselt soe, toimides neerude ja jämesoole meridiaanidele. See toniseerib neeru yangi, toidab essentsi ja verd ning niisutab soolestikku kõhukinnisuse leevendamiseks ning on näidustatud neeru yangi vaeguse, essentsi ja vere ammendumise, alaselja ja põlvede nõrkuse ning kuiva soolestiku kõhukinnisuse korral. Kaasaegsed farmakoloogilised uuringud on näidanud, et Cistanche sisaldab fenüületanoidglükosiide, iridoide, lignaane ja polüsahhariide, mille hulgas on PhG-d kõige levinumad ja kõige põhjalikumalt uuritud koostisosad ning need on farmakopöa identifitseerimise ja analüüsi markerühendid.

Kuna see perekond on altid botaaniliseks segaduseks ja kuna erinevad liigid erinevad oluliselt keemilise koostise poolest, kohaldatakse käesolevas ülevaates järgmisi tõendusreegleid. Cistanche tubulosa (Schenk) Wightiga otseselt läbiviidud uuringuid käsitletakse esmaste tõenditena. Toetavate tõenditena kasutatakse isoleeritud PhG-sid kasutavaid mehaanilisi uuringuid, kusjuures taimeallikas ja tõendite tase on selgelt märgitud. Teisi Cistanche liike, nagu C. deserticola või C. salsa, kasutanud uuringud on toodud ainult võrdluseks ja neid ei kasutata C. tubulosa tõhususe väidete toetamiseks.

2. Keemiline alus

2.1 Struktuurilised omadused ja peamised komponendid

Fenüületanoidglükosiidid koosnevad kolmest elemendist: hüdroksüfenüületanooli aglükoonist, tsentraalsest glükoosist koos täiendavate suhkrutega, nagu ramnoos, ja kofeoüül- või kumaroüülrühmadest, mis on suhkruosa külge kinnitatud estersidemete kaudu. Struktuurne mitmekesisus tuleneb suhkruühikute arvust ja aheldusasendist, atsüülrühmade tüübist ja asendusasendist ning atsetüülimisest. Fenoolsed hüdroksüül- ja kofeoüülrühmad tagavad tugeva vesiniku annetamise ja ühe elektroni ülekandevõime, mis on selle klassi antioksüdantse aktiivsuse aluseks, samas kui mitmed suhkrujäägid annavad kõrge polaarsuse ja molekulmassi, mis omakorda määravad kehva suukaudse imendumise ja madala biosaadavuse, mida täheldatakse in vivo.

Cistanche tubulosa peamised keemilised koostisosad

Ehhinakosiid on C. tubulosa kõige levinum PhG ja moodustab tavaliselt suurema osa kõigist PhG-dest, millele järgnevad isoakteosiid, verbaskosiid, tubulosiid A ja 2-prime-atsetüüllakteosiid. Varajased fütokeemilised tööd eraldasid tervetest C. tubulosa taimedest tubulosiidid A kuni D, ehhinakosiidi, akteosiidi, akteosiidi isomeeri ja 2-prime-atsetüüllakteosiidi, luues selle klassi struktuurilise aluse. Vedelikkromatograafia-massispektromeetria põhinev profiilide koostamine on PhG spektrit veelgi laiendanud ja hiljutises ülevaates teatati, et Cistanche liikidest on eraldatud ja identifitseeritud ligi sada fenüületanoidglükosiidi.

Tabel 1. Peamised fenüületanoidglükosiidid, millest on teatatud Cistanche tubulosa puhul

Üldnimetus	Ingliskeelne nimi	Valem	Märkmed
ehhinakosiid	ehhinakosiid (ECH)	C35H46O20	Trisahhariid kahe kofeoüülrühmaga; domineeriv koostisosa ja esmane marker ning enamiku mehaaniliste tööde teema
Verbascoside	verbaskosiid / akteosiid (ACT)	C29H36O15	glükoosi-ramnoosdisahhariid ühe kofeoüülrühmaga; teine ​​farmakopöa marker ja tugev antioksüdant
Isoakteosiid	isoakteosiid (IAT)	Pole määratud	Akteosiidi positsiooniline isomeer; sisaldub märgataval tasemel standardiseeritud glükosiidide üldekstraktides
Tubulosiid A	tubulosiid A (TA)	Pole määratud	C. tubulosa iseloomulik koostisosa; aktiivne kasvuhormooni sekretsiooni analüüsides
2-prime-atsetüüllakteosiid	2-prime-atsetüüllakteosiid	Pole määratud	Atsetüülitud derivaat; atsetüülimine võib muuta lipofiilsust ja metaboolset stabiilsust
Tubulosiidid B, C, D	tubulosiid B/C/D	Pole määratud	Varajases fütokeemilises töös isoleeritud; kvantitatiivseid andmeid on vähe
Tsistanosiidid	cistanoside AF ja teised	Pole määratud	Perekonnas laialt levinud ja ka C. tubulosa puhul

Märkus. Valemid esitatakse ainult ametlikult määratud; kirjed, mis on märgitud määramata, näitavad, et kontrollitavates allikates ei olnud usaldusväärset valemit saadaval ja siin pole ühtegi järeldatud.

2.2 Sisutasemed ja mõjutegurid

C. tubulosa PhG sisaldus on väga tundlik iduplasma, geograafilise päritolu, peremeestaime, koristusaja, ravimosa ja töötlemise suhtes ning varieeruvus on palju suurem kui enamikul ravimtaimedel. Seitsme C. tubulosa iduplasma lisamise analüüs näitas ehhinakosiidide sisaldust vahemikus 21,09–50,86 protsenti ja verbaskosiidi sisaldust 2,08–3,28 protsenti, kusjuures olulisi erinevusi on ka ühe taime kuivmassis ja seemnete idanemiskiiruses. Need leiud viitavad sellele, et aretus ja tooraine liigitamine võivad PhG tarnimisel olla määravamad kui lihtsalt tootmispiirkonna muutmine.

Töötlemine muudab oluliselt ka näivat koostist. Ühes võrdlevas uuringus sisaldas pulbristatud C. tubulosa 19,81 pluss-miinus 0,66 protsenti ehhinakosiidi ja 2,45 pluss-miinus 0,12 protsenti verbaskosiidi, samas kui vastav keetmine sisaldas ainult 5,90 pluss-miinus 0,12 protsenti ja 0,54 pluss või miinus 0,12 protsenti ja 0,54 pluss või miinus 0,5 protsenti traditsioonilisest taastumisest. Keetmine sõltub suuresti ekstraheerimis- ja kontsentreerimistingimustest. Standardsete ekstraktide tasemel kvantifitseeriti diabeediuuringus kasutatud glükosiidipreparaadi TGCT koguhulk HPLC-DAD abil, kuna see sisaldas 500,19 pluss või miinus 11,52 mg/g ehhinakosiidi, 19,13 pluss või miinus 1,44 mg/g verbaskosiidi ja 141,85 illustreerivat või 8 minusosiidi ekstraktide ja toordroogi suurusjärgu erinevus.

Tabel 2. Tüüpilised andmed Cistanche tubulosa PhG sisalduse ja koostise kohta

Koostisosa	Sisu	Materjal ja töötlemine	Meetod ja märkmed
ehhinakosiid	21,09-50,86 protsenti	Seitse iduplasma lisamist, kuivatatud	HPLC; iduplasma sõeluuring, mis peegeldab liitumisevahelisi variatsioone
Verbascoside	2,08-3,28 protsenti	Seitse iduplasma lisamist, kuivatatud	HPLC; puuduvad samaaegsed andmed taimeosa või saagikuu kohta
ehhinakosiid	19,81 pluss-miinus 0,66 protsenti	C. tubulosa pulber	HPLC; botaaniline allikas, peremeesorganism ja saagikoristuse aeg on puudulikult teatatud
Verbascoside	2,45 pluss-miinus 0,12 protsenti	C. tubulosa pulber	HPLC
ehhinakosiid	5,90 pluss-miinus 0,12 protsenti	C. tubulosa pulbri keetmine	HPLC; ekstraheerimistingimustest tugevasti mõjutatud taastumine
Verbascoside	0,54 pluss-miinus 0,05 protsenti	C. tubulosa pulbri keetmine	HPLC
ECH/ACT/IAT TGCT-s	500,19 / 19,13 / 141,82 mg/g	Glükosiidi koguekstrakt TGCT	HPLC-DAD kvantifitseerimine HPLC-Q-TOF-MS iseloomustusega
Farmakopöa piirang	ECH pluss ACT mitte vähem kui 1,5 protsenti	Kuivatatud C. tubulosa	HPLC 330 nm juures; teoreetilised plaadid vähemalt 3000 ehhinakosiidi piigi jaoks

Neil andmetel on kolm otsest mõju. Esiteks, üldised väited, nagu C. tubulosa, sisaldavad loomulikult umbes üks kuni kolm protsenti PhG-sid, ei esinda kõrge saagikusega iduplasma ega saa olla toote disaini sihtmärgiks. Teiseks, farmakopöa miinimum on kvaliteetne alus, mis on ette nähtud halvema või võltsitud materjali välistamiseks, mitte optimaalse annuse juhend. Kolmandaks, toorravimi, ekstrakti ja üksikühendi vahel ei ole fikseeritud ümberarvestustegurit, seega peab iga doosi arvutamine põhinema tegeliku partii mõõdetud sisul ning esitama ekstrakti massi, markeri sisalduse ja partiidevahelise lubatud hälbe.

2.3 Ekstraheerimine, eraldamine ja rikastamine

PhG-de ekstraheerimistehnoloogia nihkub saagikuse maksimeerimiselt sihtkompositsiooni kontrollimise suunas. Tavaline kuuma tagasivooluga ekstraheerimine on lihtne ja skaleeritav, C. tubulosa PhG-de jaoks optimeeritud tingimusega kakskümmend mahtu nelikümmend protsenti etanoolist, üks ekstraheerimine kestab kaks tundi. Ultraheli abil ekstraheerimine kasutab kavitatsiooni, et saavutada kõrge efektiivsus madalamatel temperatuuridel: värskelt lõigatud materjali puhul annab kuuskümmend protsenti metanooli 40 kraadi juures 30 minuti jooksul rahuldava taastumise ning lühike aurutamine viis kuni seitse minutit enne ultrahelitöötlust suurendab veelgi nii sisu kui ka antioksüdantide aktiivsust. Kõrge hüdrostaatilise rõhu ekstraheerimine häirib raku struktuuri ümbritseval või isegi madalal temperatuuril ja aitab seetõttu säilitada termolabiilseid koostisosi.

Rohelised lahustid esindavad hiljutist olulist suunda. Looduslikud süvaeutektilised lahustid (NADES), mis koosnevad koliinisooladest, polüoolidest ja looduslikku päritolu orgaanilistest hapetest, on madala toksilisusega ja biolagunevad. Kasutades koliinkloriid-propüleenglükooli süsteemi (molaarsuhe 1:3, kolmkümmend protsenti vett) tahke ja vedeliku suhte 1:24 tingimustes, 20 minutit ultraheliga töötlemist ja 48 kraadi Celsiuse järgi, oli ehhinakosiidi ja verbaskosiidi ekstraheerimissaagis 1,98 korda suurem kui 98 korda suurem kui 98 korda suurem kui 3.

Makropoorne adsorptsioonivaik on peamine rikastamistehnika, mis kontsentreerib sihtkomponente selektiivselt adsorptsiooni-desorptsiooni teel, jäädes samal ajal hõlpsasti suurendatavaks. Verbaskosiidil on HPD300 vaigu suhtes suurem afiinsus kui ehhinakosiidil; elueerimine viiekümneprotsendilise etanooliga suurendas ehhinakosiidi ja verbaskosiidi sisaldust vastavalt 9,31 ja 10,61 korda, andes PhG kogumassiosaks 76,58 protsenti. Vaike AB-8 ja D101 kasutatakse tavaliselt ka glükosiidide kogufraktsioonide valmistamiseks C. tubulosast. Üksikute ühendite peeneraldamine põhineb preparatiivsel vedelikkromatograafial ja tuleb märkida, et PhG-de rohked fenoolsed hüdroksüülrühmad muudavad need tavalistel silikageeli- või Sephadexi kolonnidel pöördumatuks adsorptsiooniks, vähendades seeläbi saagist.

Oluline on see, et protsessi hindamine peaks liikuma ühelt saagiseindikaatorilt sihtkoostise, saagise ja partiidevahelise stabiilsuse kombineeritud raamistikule, kusjuures samaaegne massibilanss arvestaks ehhinakosiidi, verbaskosiidi, isoakteosiidi ja tubulosiidi A. Lisaks säilitavad jäägid pärast vesiekstrakteerimist teatud koguse PhG-sid ja antioksüdantset aktiivsust, kuid see ei tohiks olla enam kasulik. aktiivne: toorravimi, vesiekstrakti ja jäägi üheteistkümne partii võrdluses näitasid toorravim ja ekstrakt võrreldavat antioksüdantset aktiivsust, samas kui jääk oli kõige nõrgem.

Cistanche tubulosa eksperiment

3. Farmakokineetika ja in vivo saatus

3.1 Imendumine ja biosaadavus

Kehv suukaudne imendumine on PhG-de kõige olulisem farmakokineetiline piirang. Pärast ehhinakosiidi suukaudset manustamist annuses 100 mg/kg rottidele oli maksimaalse kontsentratsiooni saavutamise aeg umbes viisteist minutit; maksimaalne kontsentratsioon oli 612,2 pluss-miinus 320,4 ng/ml, poolväärtusaeg oli ligikaudu 74,4 minutit; andmed sobitasid ühekambrilise mudeliga; ja absoluutne biosaadavus oli vaid umbes 0,83 protsenti. Keskmise ajuarteri oklusiooni rottidel, kellele manustati suukaudselt 50 mg/kg, jäid plasmakontsentratsioonid viie kuni saja kahekümne minuti vahel vahemikku 29,83 ng/ml kuni allapoole tuvastamispiiri, mis viitab madalale üldisele ekspositsioonile ja kiirele eliminatsioonile. Parkinsoni mudelis andis 20 mg/kg suukaudne manustamine poolväärtusajaks 73,9 minutit ja maksimaalseks kontsentratsiooniks 403,6 pluss-miinus 52,3 ng/ml, võrreldes 121,6 minutiga ja 365,2 pluss-miinus 46,4 ng/mL normaalsetel rottidel, mis näitab, et patoloogiline farmakokineetiline seisund võib olla ebasoodne. Rakutasandil näitasid Caco-2 monokihi näivad läbilaskvuskoefitsiendid nullilähedasi või suurusjärgus kümmet kuni miinus seitse cm/s, omastamisega nullilähedane üheksakümne minuti pärast, mis viitab väga piiratud passiivsele transtsellulaarsele difusioonile. Ühes uuringus teatati, et pärast seda, kui terved vabatahtlikud võtsid ehhinakosiidi tablette, mis on valmistatud ehhiaatsia ekstraktidest, ei leitud muutumatut ehhinakosiidi ühelgi ajahetkel plasmaproovis.

3.2 Ainevahetus soolestiku mikrobiota poolt

Soolestiku mikrobiota on suukaudselt manustatud PhG-de in vivo saatuse võtmetegur. Pärast kogu PhG-de maosisest manustamist 3 g/kg rottidele langes ehhinakosiidi suhteline sisaldus soolesisus 48 protsendilt 16 protsendile, kusjuures osa sellest muudeti akteosiidiks. Väljaheites tuvastati akteosiidi, dekofeoüüllakteosiid, lugrandosiid ja 3,4-dihüdroksüfenüületanool, mis näitab deglükosüülimist ja kofeoüülimist kui peamisi metaboolseid teid. Kuna need metaboliidid on väiksemad ja vähem polaarsed, imenduvad nad teoreetiliselt paremini, nii et lähteühend ja metaboliidid koos moodustavad tegeliku süsteemse kokkupuute.

3.3 Kudede jaotumine ja eelravimi hüpotees

Läbivaadatud tõendid viitavad PhG-de suhteliselt suurele jaotumisele maksa ja neerudesse, mis on kooskõlas nende rolliga metabolismis ja eritumisel. Vaieldavam on kokkupuude ajuga: mitmed uuringud näitasid selget tsentraalset kaitsvat toimet hoolimata vähesest kokkupuutest lähteühendiga, mis tekitas ilmse paradoksi madala biosaadavuse ja kõrge efektiivsusega. Kolm seletust on usutavad: ajju jõudvast väikesest lähteühendi kogusest võib piisata, et mõjuda kõrge afiinsusega sihtmärkidele; metaboliidid võivad anda osa süsteemsest kokkupuutest ja läbida hematoentsefaalbarjääri; või kaudsed distaalsed mõjud võivad tekkida soolestiku mikrobiota-metaboliit-immuun- või närvitelje kaudu. Üheski uuringus ei ole veel üheaegselt mõõdetud vanemate ja peamiste metaboliitide kokkupuudet, sidumata aju kontsentratsiooni ja sihtmärgi hõivatust, seega jäävad need selgitused hüpoteetiliseks ja nõuavad isotoopide jälgimist ja kokkupuute-vastuse modelleerimist.

Cistanche tubulosa ekstrakt

Cistanche Tubulosa ekstrakti loodusliku toidulisandi pulbri vaatamiseks klõpsake siin

【Küsi lisa】 E-post:cindy.xue@wecistanche.com / WhatsApp: 0086 18599088692 / WeChat: 18599088692

3.4 Biosaadavuse parandamise strateegiad

Ratsionaalne lähenemine on pigem stabiilsuse ja membraani transpordi parandamine, mitte lihtsalt manustatava annuse suurendamine. Kandidaatstrateegiad hõlmavad nanoemulsioone, tahkeid lipiidide nanoosakesi, liposoome, fosfolipiidide komplekse, tsüklodekstriini inklusiooni, aglükooni või eelravimi disaini ja enteraalset või käärsoole suunatud kohaletoimetamist. Tuleb rõhutada, et uuring, mis suurendab ainult sihtühendi piigi pindala kromatograafilises sõrmejäljes, ilma in vivo kokkupuudet mõõtmata, ei saa väita, et biosaadavus paraneb; samuti ei tõesta, et metaboliidil on antioksüdantne toime ilma soolestiku mikrobiota in situ kontrollimiseta, see, et metaboliit on üldmõju peamine tõukejõud.

Tabel 3. Tarnestrateegiate hindamiseks soovitatavad minimaalsed lõpp-punktid

Hindamistase	Soovitatavad minimaalsed lõpp-punktid
In vitro vabanemine ja läbitungimine	Näiv läbilaskvus Caco-2 monokihtides, transepiteliaalne elektritakistus, kahesuunaline transpordisuhe
In vivo farmakokineetika	AUC0-t, Cmax, poolväärtusaeg, absoluutne biosaadavus, aju ja plasma kontsentratsiooni suhe
Kokkupuude-vastus	Ajaline seos farmakodünaamiliste markerite ning lähteühendi ja peamiste metaboliitide AUC vahel
Ohutus	Maksimaalne talutav annus, organitoksilisus, hemolüüs, immuun- ja endokriinsed kõrvaltoimed

4. Farmakoloogiline toime ja mehhanismid

4.1 Neuroprotektsioon ja kognitiivne parandamine

4.1.1 Alzheimeri tõve mudelid ja soolestiku-aju telg

2025. aastal avaldatud uuringus said kuuekuused APP/PS1 topelttransgeensed hiired kuuekümne päeva jooksul suukaudselt kolmes annuses C. tubulosa (GCT) glükosiide (GCT) või positiivse kontrollina donepesiili. Kognitiivset funktsiooni hinnati Morrise veelabürindi abil, soolestiku mikrobiota profileeriti 16S rRNA sekveneerimisega ning seerumi ja aju metaboloome analüüsiti sihipärase metaboloomika abil, võimaldades samaaegselt kvantifitseerida 306 metaboliiti. Suure annusega rühm (400 mg/kg päevas) lühendas viiendal päeval märkimisväärselt põgenemise latentsust ja parandas sihtkvadrandi ja platvormi ristumisaega, vähendades samal ajal lahustuvat ja lahustumatut amüloid-beeta 1-40 ja 1-42 ning põletikueelseid tegureid hipokampuses. Multi-omika analüüs näitas, et alates seitsmendast sekkumispäevast rikastas GCT kiiresti kasulikke taksoneid, nagu Akkermansia, ja pärssis Firmicutes'i ebanormaalset laienemist, mille tulemuseks oli neuroprotektiivsete lühikese ahelaga rasvhapete, nagu beeta-hüdroksübutüraat, suurenemine ja põletikuvastaste pikaahelaliste rasvhapete vähenemine nii seerumis kui ka ajus. In vitro katsed näitasid lisaks, et GCT soodustas otseselt Akkermansia muciniphila proliferatsiooni.

Selle töö tähtsus seisneb testitava tee, soolestiku mikrobiota-rasvhapete metabolismi-neuropõletiku telje pakkumises, mille kaudu võivad toimida halvasti biosaadavad fütokemikaalid. Selle piirangud on sama selged: kasutati pigem glükosiidide kogufraktsiooni kui üksikuid ühendeid, nii et mõju ei saa omistada ühelegi komponendile; mikrobiota ja metaboolsed ühendused ei määra põhjuslikku suunda; kuuenädalane sekkumine ei võimalda pikaajalist haiguse muutust; Puuduvad farmakokineetilised andmed loomade ja inimeste vahel. Sellest tulenevalt peaksid translatsioonilised jõupingutused keskenduma põhjuslikkuse testimisele mikroobivabade hiirte, antibiootikumide ammendumise, monokolonisatsiooni ja metaboliitide sekkumise abil, selle asemel, et väita, et C. tubulosa võib ravida Alzheimeri tõbe.

4.1.2 Parkinsoni tõve mudelid ja neurotroofsed tegurid

Subakuutses MPTP hiiremudelis alustati suukaudset ehhinakosiidi annuses 30 mg/kg päevas neljateistkümne päeva jooksul pärast seda, kui nigrostriataalne süsteem oli juba kahjustatud, taastas nigraalsed dopamiinergilised neuronid, striataalsed kiud, dopamiinisisaldus ja dopamiini transporter 134,24, 2013,17 ja 7,5, 2014,17. väärtused vastavalt MPTP-kahjustusega loomadel. Gliarakuliinist pärineva neurotroofse faktori (GDNF) ja ajust pärineva neurotroofse faktori (BDNF) Messenger RNA ekspressioon suurenes 2,94 ja 3,75 korda ning valgu tase tõusis 184,34 ja 185,93 protsendini. Apoptoos ja suurenenud Bax/Bcl-2 suhe hoiti märkimisväärselt ära ning kõnnihäired paranesid märkimisväärselt seitsmendal ja neljateistkümnendal päeval. See töö asetas ehhinakosiidi suukaudselt aktiivse, neurotroofsete tegurite mittepeptiidse indutseerijana ja apoptoosi inhibiitorina.

Järgnevad uuringud lisasid põletikuvastaseid ja püroptootilisi mehhanisme. MPTP mudelites inhibeeris ehhinakosiid mikrogliia ja astrotsüütide aktivatsiooni, reguleeris alla IBA-1, lõhustas kaspaas-3 ja TNF-alfa, reguleeris üles GDNF-i ning alandas seerumi TNF-alfa ja gamma-interferooni taset. Teises uuringus kirjeldati dopamiinergiliste neuronite kaitset NLRP3 / kaspaas-1 / IL-1 beeta signaaliraja pärssimise kaudu. Tuleb märkida, et mõnes varasemas uuringus saadi kasutatud ehhinakosiid teistelt Cistanche'i liikidelt või botaanilist allikat ei märgitud, seega tuleb nende järelduste ülekandmisel C. tubulosale olla ettevaatlik.

Hiina ravimtaim - Parkinsoni tõbi

4.1.3 Tserebraalisheemia, vaskulaarne dementsus ja sihtmärgi otsene tuvastamine

Sihttasemel kasutas Pekingi ülikooli uurimisrühm ehhinakosiidi sihipüügi molekulaarse sondina ja tuvastas kaseiini kinaasi 2 katalüütilise alfa-põhisubühiku (CK2 alfa-prime) otsese sihtvalguna, mis on selle kaitse aluseks isheemilise neuronikahjustuse eest. Mehhaaniliselt modifitseerib ehhinakosiid spetsiifiliselt CK2 alfa-prime lüsiini 171, kutsub esile konformatsioonilise muutuse, aktiveerib Wnt signaaliülekande ja soodustab mitokondriaalset sulandumist viisil, mis ei sõltu CK2 tavapärasest kinaasi aktiivsusest, nõrgendades seeläbi ajuisheemia-reperfusioonikahjustust. See töö pakub ka uue sihtmärgi ravimite avastamiseks isheemilise insuldi ja vaskulaarse dementsuse korral.

Tõlkimise osas kiideti 2005. aastal heaks Congrong Zonggani kapslid, mille peamine aktiivne fraktsioon on Cistanche PhG-d, kerge kuni mõõduka vaskulaarse dementsuse raviks ning ehhinakosiid kui uus klass 1 ravim sai 2017. aastal kliinilise uuringu heakskiidu ja on avalike aruannete kohaselt lõpetanud I faasi uuringu. Need arengud näitavad, et C. tubulosa PhG-d on liikunud traditsiooniliselt toorravimilt tänapäevase ravimiarenduse poole, kuigi nende terapeutilise asukoha määratlemiseks on endiselt vaja II ja III faasi tõendeid.

4.1.4 Antidepressantide sarnane tegevus, õppimine ja mälu

Cistanche keetmise igapäevane intragastriline manustamine 21 päeva jooksul vähendas märkimisväärselt liikumatusaega saba riputamise testis ning parandas ruumilist õppimist ja mälu Morrise veelabürindis vaoshoitud hiirtel, millega kaasnes aju monoamiini oksüdaasi aktiivsuse vähenemine, aju dopamiini kontsentratsiooni suurenemine ja seerumi kortikosterooni taseme langus. Sama uuring kvantifitseeris ehhinakosiidi ja verbaskosiidi nii C. tubulosa pulbrites kui ka keedustes, andes põhiandmed annuse ja koostise vastavuse kohta.

4.2 Vananemisvastane, antioksüdantne ja mitokondriaalne kaitse

Caenorhabditis elegans'is pikendas ehhinakosiid metsiktüüpi usside eluiga ning suurendas tolerantsust kuumašoki ja oksüdatiivse stressi suhtes, mõjutamata neelu pumpamise kiirust või järglaste tootmist, mis näitab, et pikaealisuse efekt ei ole toitumispiirangute või reproduktiivsuse pärssimise tagajärg. Mehhaaniliselt suurendas ehhinakosiid daf-16 transkripti taset ja moduleeris daf-16 tuuma lokaliseerimist ja transkriptsioonilist aktiivsust, täpsustades seeläbi selle sihtgeenide ekspressiooni. daf-16 on kahvlipea transkriptsioonifaktori FOXO nematoodi ortoloog, insuliini/IGF-1 signaaliraja allavoolu efektor, mis on eluea ja stressireaktsioonide reguleerimisel väga konserveerunud ussidest imetajateni.

Imetajate mudelites avalduvad PhG-de antioksüdantsed toimed peamiselt suurenenud superoksiidi dismutaasi ja glutatioonperoksidaasi aktiivsusena koos vähenenud malondialdehüüdi ja reaktiivsete hapnikuliikidega, kusjuures ülesvoolu reguleerimine hõlmab Nrf2/HO-1 rada. Etanoolist põhjustatud maksakahjustuse korral nõrgendas ehhinakosiid oksüdatiivset stressi ja hepatotsüütide apoptoosi, suurendades Nrf2 aktiivsust. Mitokondriaalsel tasemel, lisaks ülalkirjeldatud CK2 alfa-prime / Wnt-vahendatud mitokondriaalse sulandumise edendamisele, näitavad hiljutised tööd, et ehhinakosiid parandab mitokondriaalset funktsiooni ja raku homöostaasi vananenud munarakkudes GJA1 / SIRT1 raja kaudu. Üldiselt on vananemisvastased tõendid mudelorganismide puhul suhteliselt täielikud, kuid põhinevad endiselt imetajate surrogaat-näitajatel.

Cistanche tubulosa eelised: inhibeerib türosinaasi ekspressiooni

4.3 Osteoporoosivastane toime ja luude moodustumine

In vitro suurendas C. tubulosa tüvedest eraldatud ehhinakosiid luu regeneratsiooni MC3T3-E1 osteoblastilistes rakkudes. In vivo said munasarjade eemaldatud rotid kaheteistkümne nädala jooksul suukaudset ehhinakosiidi annuses 30, 90 või 270 mg/kg päevas. Kõik annustamisrühmad muutsid märkimisväärselt munasarjade eemaldamisest põhjustatud kehakaalu ja seerumi hüdroksüproliini suurenemise ning emaka märgkaalu ja luude mineraaltiheduse vähenemise ning korrigeerisid täielikult kaltsiumi, anorgaanilise fosfori ja hüdroksüproliini suurenenud eritumist uriiniga. Distaalse reieluu mikrokompuutertomograafia näitas märkimisväärselt paranenud luu kvaliteeti ning kaheteistkümne nädala pärast suurenes märkimisväärselt reieluu mineraalne tihedus ja sääreluu biomehaaniline tugevus. Histoloogilised leiud näitasid nii luu moodustumise soodustamist kui ka luu resorptsiooni pärssimist ning immunohistokeemia näitas suurenenud emaka östrogeeniretseptori ekspressiooni. Selle põhjal pakuti ehhinakosiid välja uue fütoöstrogeenide klassina, millel on potentsiaal hallata östrogeenipuudusest põhjustatud menopausijärgset osteoporoosi. Tuleb märkida, et emaka östrogeeni retseptori ülesreguleeritud ekspressioon nõuab tähelepanu ka võimalikele pikaajalistele endomeetriumi mõjudele.

4.4 Glükoosi ja lipiidide metabolismi reguleerimine

2. tüüpi diabeedi mudelis, mille põhjustas kõrge rasvasisaldusega ja sahharoosirikas dieet koos streptozototsiiniga annuses 30 mg/kg, manustati kuue nädala jooksul suukaudselt C. tubulosa (TGCT) glükosiide 50, 100 või 200 mg/kg päevas või metformiini 200 mg/kg. 200 mg/kg päevas vähendas TGCT kehakaalu langust 11,1 protsenti ja plasma tühja kõhu glükoosisisaldust 56,4 protsenti ja glükeeritud hemoglobiini 37,4 protsenti. Glükogeeni sisaldus suurenes maksas 40,8 protsenti ja lihastes 52,6 protsenti ning paranes suukaudne glükoositaluvus, glükoosikõvera alune pindala ja insuliinitundlikkus. Paralleelselt paranesid seerumi lipiidide profiilid, antioksüdantsete ensüümide aktiivsus ja põletikumarkerid ning pankrease histoloogia säilis paremini. Mehaaniliselt tuvastati muutused proteiinkinaasi B ja glükogeeni süntaasi kinaasi 3 beeta fosforüülimises ning heksokinaasi ja püruvaatkinaasi aktiivsuses, mis viitab PI3K/Akt ja GSK3 beeta-ga seotud glükogeeni metabolismi osalemisele, mille ühiseks aluseks on antioksüdantsed ja põletikuvastased toimed.

Kuna TGCT sisaldas 500,19 mg/g ehhinakosiidi, 141,82 mg/g isoakteosiidi ja 19,13 mg/g verbaskosiidi, on mõistlik pidada glükosiide üldkoguseid peamiseks keemilise kokkupuute allikaks, kuid kogu toimet ei saa seostada ehhinakosiidiga ja selle panust ei tohiks tähelepanuta jätta. Veelgi enam, metaboolne paranemine diabeedi mudelis esindab pigem metaboolset regulatsiooni kui kliinilist glükoosisisaldust langetavat efektiivsust.

4.5 Reproduktiiv- ja endokriinne modulatsioon

Tsistanche toime - parandab neerufunktsiooni

Hüdrokortisooni poolt indutseeritud reproduktiivkahjustuse hiiremudelis manustati C. tubulosa fenüületanoolglükosiide (CPhG) neljateistkümne päeva jooksul intragastraalselt annuses 72, 145 või 289 mg/kg, kusjuures positiivseks kontrolliks oli testosteroonpropionaat. Väike annus 72 mg/kg ei andnud olulist kaitset, samas kui 145 mg/kg parandas reproduktiivsusvõime halvenemist ning luteiniseeriva hormooni ja testosterooni taseme langust. Suur annus 289 mg/kg oli kõige tõhusam: see parandas kehakaalu, lühendas erektsiooni, kinnipüüdmise ja ejakulatsiooni inkubatsiooniperioodi, suurendas löökide ja ejakulatsioonide arvu, suurendas munandite, munandimanuse, seemnepõiekeste ja peenise kaalu ning suurendas seerumi akuutset luteiniseerivat hormooni ja testosterogeenset proteiini taset koos munandite steroididega. külgahela lõhustamise ensüüm (CYP11A1) ja 3-beeta-hüdroksüsteroiddehüdrogenaas (3-beeta-HSD). Need leiud toetavad järeldust, et CPhG-d soodustavad munandite steroidogeneesi CYP450-3 beeta-HSD raja kaudu ja parandavad seeläbi meeste reproduktiivfunktsiooni.

Kasvuhormooni telje suhtes tuvastati ehhinakosiid, tubulosiid A ja akteosiid C. tubulosa vesiekstraktis ning neid testiti roti hüpofüüsi rakkudes. Ehhinakosiid kontsentratsioonides üle kümne kuni miinus kuue molaarse stimuleeris märkimisväärselt kasvuhormooni sekretsiooni, kusjuures sõltuvust annusest täheldati vahemikus kümme kuni miinus kaheksa kuni kümme kuni miinus viis molaarset nii viieteistkümne kui ka kolmekümne minuti jooksul. Toime pärssis [D-Arg1, D-Phe5, D-Trp7,9, Leu11]-aine P, kasvuhormooni sekretsiooni indutseeriva retseptori GHS-R1a pöördagonist ja molekulaarne dokkimine näitas, et kõik kolm PhG-d võivad siseneda GHS-R-i sidumistaskusse, ehhinakosiidi seondumine aga veidi soodsamalt. See on testitav mehhaaniline lähtepunkt traditsioonilistele vananemisvastase ja füüsilise tugevdamise väidetele, kuid tõendid jäävad rakutasandile: andmeid GH või IGF-1 muutuste kohta tervetel loomadel või inimestel ei esitatud ning tulemusi ei saa ekstrapoleerida väsimusevastastele mõjudele või treeningute paranemisele.

4.6 Maksakaitse

Ehhinakosiid on näidanud kaitsvat toimet mitmetes keemiliste ja ravimitest põhjustatud maksakahjustuse mudelites. Etanoolist põhjustatud vigastuse korral leevendasid suukaudsed annused 10, 30 või 60 mg/kg päevas kümne päeva jooksul oksüdatiivset stressi ja hepatotsüütide apoptoosi, suurendades Nrf2 aktiivsust, ning teine aruanne näitas, et 50 või 100 mikromolaarse in vitro ja 100 mg/kg päevas moduleerides hepatoosset ja oksüdeerivat stressi in vivo. SREBP-1c/FASN rada PPAR-alfa kaudu. Atsetaminofeeni hepatotoksilisuse korral vähendasid suukaudsed annused 25, 50 või 100 mg/kg päevas seitsme päeva jooksul oksüdatiivset stressi, pärssisid põletikueelset tsütokiini ekspressiooni ja vähendasid tsütokroom P450 2E1 valgu ekspressiooni. D-galaktoosamiini/lipopolüsahhariidi mudelis alandasid annused 25 ja 100 mg/kg seerumi AST ja ALAT ning hepatotsüütide tundlikkust TNF-alfa suhtes. Lisaks näidati, et kaitse annuses 20 mg/kg päevas seitsme päeva jooksul sõltus TLR4/NF-kappaB raja inhibeerimisest.

Kroonilise maksahaiguse korral blokeeris ehhinakosiid TGF-beeta1/Smad signaaliülekannet ja inhibeeris maksa tähtrakkude aktivatsiooni, mis näitab antifibrootilist potentsiaali, ja B-hepatiidi transgeensete hiirte puhul inhibeeris annus 50 mg/kg HBsAg ja HBeAg ekspressiooni ning vähendas seerumi HBV DNA taset maksa HBV DNA-d oluliselt mõjutamata. Tuleb märkida, et enamikus hepatokaitse uuringutes kasutati isoleeritud ehhinakosiidi ja mõnedes ei täpsustatud taimset allikat, seega on neid kõige parem pidada C. tubulosa PhG-de mehaaniliseks tõendiks.

4.7 Nefroprotektsioon

db/db diabeetilise nefropaatiaga hiirtel parandas ehhinakosiid hüperglükeemiat ja 24-tunnist uriinivalku ning nõrgendas kollageeni ladestumist, mesangiaalsete rakkude ja maatriksi proliferatsiooni, basaalmembraani paksenemist ja podotsüütide kadu. Molekulaarsel tasemel reguleeris see alla TGF-beeta1 / Smad, fibronektiini, kollageeni IV ja alfa-silelihase aktiini, samal ajal reguleerides üles E-kadheriini, mis näitab epiteeli-mesenhümaalse ülemineku pärssimist. Need leiud toetavad ehhinakosiidi kandidaatmehhanismi, mis toimib TGF-beeta1/Smadi kaudu, et piirata EMT-d ja fibroosi diabeetilise nefropaatia korral, kuid olemasolevad kokkuvõtted ei andnud annust, ravi kestust ega valgumarkerite muutuse täpset ulatust, mistõttu tulemusi ei saa asetada samale annustamisalusele kui ülalkirjeldatud glükosiiddiabeedi uuringus. Edaspidine töö peaks mõõtma neerude kokkupuudet lähteühendi ja selle metaboliitidega nii ühekordse kui ka korduva manustamise korral, et teha kindlaks, kas nefroprotektsiooni vahendavad lähteühend, metaboliidid või mõlemad.

4.8 Põletikuvastane ja immunomoduleeriv toime

Kõrbe ženšenn - parandab immuunsust

Immunomodulatsiooni testides suurendasid RAW264.7 makrofaagidele 75, 100 või 125 g/l peale kantud C. tubulosa glükosiidid rakkude elujõulisust ning lämmastikoksiidi, iNOS, TNF-alfa ja IL-6 taset, optimaalne on 100 g/l. Loomkatses, milles kasutati ka Angelica sinensist ja Astragalust sisaldavaid tablette, soodustasid annused 0,4 ja 1,2 g/kg päevas lümfotsüütide proliferatsiooni, hilinenud tüüpi ülitundlikkust, antikehade tootmist ja süsinikuosakeste kliirensit. Tuleb tunnistada mitmeid piiranguid: g/l-des väljendatud in vitro kontsentratsioone ei saa loomadel otse mg/kg annusteks teisendada; tabletid olid liitkoostised, seega ei saa toimeid omistada ainult C. tubulosa üldglükosiididele; ja loomad olid normaalsed hiired, seega ei saa tulemusi ekstrapoleerida immuunpuudulikkusega patsientide kliinilisele immuunsüsteemi taastumisele.

Põletiku osas inhibeerisid PhG-d NF-kappaB ja aktivaatorvalgu-1 aktivatsiooni ning vähendasid indutseeritavat lämmastikoksiidi süntaasi ekspressiooni. Seljaaju vigastuse mudelis parandas ehhinakosiid Basso-Beattie-Bresnahani lokomotoorseid skoori, vähendas neuronite kadu ja parandas kudede arhitektuuri, pärssides samal ajal märkimisväärselt NLRP3 põletikulist aktivatsiooni. Lipopolüsahhariidi ja ATP-ga stimuleeritud BV-2 mikroglia puhul vähendas see reaktiivseid hapniku liike, parandas mitokondriaalset membraanipotentsiaali, blokeeris NF-kappaB aktivatsiooni ja pärssis NLRP3 põletikusignaali edastamist – mõjusid, mida osaliselt reguleeris reaktiivsete hapnikuliikide tekke ja NF-kappaB aktivatsiooni pärssimine.

4.9 Lahtistav toime ja soolestiku mikrobiota reguleerimine

Soole niisutamine kõhukinnisuse leevendamiseks on Cistanche'i traditsiooniline näidustus ja tänapäevased uuringud on hakanud pakkuma mehhaanilist tuge. Aeglase transiidi kõhukinnisuse rotimudelis suurendas Cistanche ürdi vesiekstrakt c-komplekti valgu ja mRNA ekspressiooni käärsooles, Cajali (ICC) interstitsiaalsete rakkude märgistamist ja reguleeris tüvirakufaktori, c-kiti ligandi taset, mis viitab paranenud ICC funktsioonile ja suurenenud käärsoole motoorikale S3K signaalimise ja cPI-komplekti kaudu. Mikrobioota osas suurendas C. tubulosa ekstrakt Weissella ja Bacteroides, vähendas Ruminococcus ja Deinococcus ning muutis äädik- ja kaproonhappe kontsentratsiooni normaalse tasemeni. Lühikese ahelaga rasvhapped, mis on käärsoole motoorika ja limaskesta tervise olulised vahendajad, kinnitavad ülalkirjeldatud Alzheimeri mudeli metaboolseid leide.

Tuleb tunnistada, et üheski inimuuringus ei ole veel kasutatud C. tubulosa PhG-sid üksi, mõõtes samal ajal soolestiku läbimise aega, väljaheite omadusi, soolestiku mikrobiootat ja lühikese ahelaga rasvhappeid. Seetõttu jääb lahtistav näidustus traditsiooniliseks kasutuseks ja ravimvormi väljatöötamise suunaks ning seda ei saa loetleda väljakujunenud inimestele mõeldud näidustustena.

4.10 Väsimusevastane aktiivsus ja treeningvastupidavus

Koormatud ujumistestis pikendas C. tubulosa valemiga tee, mida manustati 4,50 g/kg, oluliselt hiirte ujumisaega, suurendas maksa glükogeenivarusid ja vähendas treeningujärgset vere uurea taset. Eeldatakse, et mehhanism hõlmab suurenenud glükogeenivarusid, metaboolsete saaduste kiirenenud kliirensit ja vähenenud oksüdatiivset stressi koos võimaliku kasvuhormooni telje osalemisega. Olemasolevad hiinakeelsed uuringud selles valdkonnas on enamasti kasutanud ühend- või formuleeritud tooteid ning üksikühendite ja standardiseeritud glükosiidide koguarvu annuse-vastuse andmed on endiselt ebapiisavad. Otsingukuupäeva seisuga ei ole tuvastatud ühtegi kinnitatavat randomiseeritud topeltpimedat inimuuringut, milles kasutati ainult C. tubulosa ekstrakti väsimuse vähendamiseks.

Tistanche-vastane väsimus

4.11 Südame-veresoonkonna kaitse, kasvajavastane toime ja muud juhised

Roti müokardiinfarkti mudelis, mis oli indutseeritud vasaku eesmise laskuva koronaararteri ligeerimisega, vähendas suukaudne ehhinakosiid annuses 50 või 100 mg/kg päevas 28 päeva jooksul annusest sõltuval viisil (suure annusega rühmas 15 protsenti võrreldes 38 protsendiga vasakpoolse kontrolliga 01-s). vatsakeste väljutusfraktsioon (64,7 protsenti versus 40,3 protsenti, p alla 0,05). Proteoomiline profileerimine tuvastas 1105 erinevalt ekspresseeritud valku; ehhinakosiid muutis infarkti indutseeritud I tüüpi kollageeni alfa 1 ja alfa silelihaste aktiini ülesreguleerimise, normaliseeris makrofaagide polarisatsioonimarkereid ning vähendas TNF-alfat, IL-6 ja muid põletikulisi tegureid, kusjuures toimed korreleerusid PI3K/AKT pärssimisega, mida põhjustas agonistlik PI370 tagasiminek40. YP. Molekulaarne dokkimine, molekulaarse dünaamika simulatsioon, allatõmmetestid ja pinnaplasmonresonants kinnitasid ehhinakosiidi otsest seondumist Mrc1-ga.

Onkoloogias on ülevaated koondanud tõendeid selle kohta, et ehhinakosiid inhibeerib kasvajarakkude proliferatsiooni, invasiooni ja metastaase PI3K/AKT ja TGF-beeta1/Smad signaaliülekande kaudu, kuid aluseks olevad uuringud on peamiselt raku- ja loomkatsed, mille tõendite tase on piiratud. Naha fotovananemise eest kaitsmiseks on olemas hajutatud vihjavaid aruandeid, kuid need ei ole kvantitatiivsete järelduste tegemiseks piisavad.

Tabel 4. Cistanche tubulosa PhG-de peamiste farmakoloogiliste toimete ja mehhanismide kokkuvõte

Tegevus	Mudel	Annus ja kestus	Peamised leiud	Mehhanism või võtmepunkt
Kognitiivne paranemine	APP/PS1 hiirt	GCT suu kaudu 60 päeva; suur annus 400 mg/kg päevas	Parem veelabürindi jõudlus; vähenenud hipokampuse amüloid beeta 1-40 ja 1-42	Soolestiku mikrobiota-rasvhapete metabolismi-neuropõletiku telg
Parkinsoni tõvevastane toime	Subakuutsed MPTP hiired	Ehhinakosiid 30 mg/kg päevas 14 päeva jooksul	Dopamiinergiliste neuronite, dopamiini ja dopamiini transporteri taastumine; paranenud kõnnak	GDNF ja BDNF ülesreguleerimine; apoptoosi ja neuroinflammatsiooni pärssimine
Anti-tserebraalne isheemia	MCAO reperfusioonimudel	Sihtmärgi ja mehhanismi uuring	Paremad neuroloogilised skoorid	CK2 alfa-prime Lys171 modifikatsioon; Wnt aktiveerimine; mitokondriaalne fusioon
Vananemisvastane	Metsikut tüüpi C. elegans	Täiendus söötmes	Pikendatud eluiga; suurenenud kuumuse ja oksüdatiivse stressi taluvus	Daf-16 / FOXO transkriptsiooni ja tuuma lokaliseerimise reguleerimine
Osteoporoosivastane	Munasarjade eemaldatud rotid	30, 90, 270 mg/kg päevas 12 nädala jooksul	Parem luu mineraalne tihedus, mikroarhitektuur ja biomehaaniline tugevus	Fütoöstrogeenilaadne toime; suurenenud moodustumine ja vähenenud resorptsioon
Glükoosi ja lipiidide reguleerimine	Dieet pluss streptozototsiin diabeediga rotid	TGCT 50, 100, 200 mg/kg päevas 6 nädala jooksul	Tühja kõhu glükoosisisaldus vähenes 56,4 protsenti; HbA1c 37,4 protsenti; glükogeen suurenenud	Antioksüdant ja põletikuvastane; PI3K/Akt ja GSK3 beeta-seotud glükogeeni metabolism
Reproduktiivsuse paranemine	Hüdrokortisooniga töödeldud hiired	CPhGs 72, 145, 289 mg/kg 14 päeva jooksul	Parem seksuaalkäitumine ja lisaorganite kaal; suurenenud testosteroon	StAR, CYP11A1 ja 3 beeta-HSD ülesreguleerimine
Kasvuhormooni sekretsioon	Roti hüpofüüsi rakud	Ehhinakosiid 10-8 kuni 10-5 molaarne	Annusest sõltuv kasvuhormooni sekretsiooni suurenemine; efektiivne umbes 10-6 molaarselt	GHS-R1a retseptor; blokeeritud pöördagonisti poolt
Hepatoprotektsioon	Etanool, atsetaminofeen ja muud mudelid	10-100 mg/kg päevas 7-10 päeva jooksul	Vähendatud ALT, AST ja malondialdehüüd; taastatud SOD ja glutatioon	Nrf2/HO-1; TLR4/NF-kappaB; CYP2E1 supressioon
Nefroprotektsioon	db/db diabeetilise nefropaatia hiired	Annust ei ole selgelt näidatud	Vähenenud proteinuuria ja kollageeni ladestumine; podotsüütide kaitse	TGF-beeta1 / Smad ja epiteeli-mesenhümaalse ülemineku pärssimine
Põletikuvastane ja immuunne	RAW264.7, BV-2, tavalised hiired	In vitro 75-125 g/l; in vivo 0,4 ja 1,2 g/kg	Makrofaagide aktiveerimine; paranenud immuunindeksid	NLRP3 põletiku ja NF-kappaB inhibeerimine
Lahtistav toime	Aeglase transiidiga kõhukinnisusrotid	Vesiekstrakt intragastraalselt	Täiustatud c-kit ja ICC funktsioon; suurenenud käärsoole motoorika	SCF/c-kit/PI3K rada
Väsimusevastane	Hiire laaditud ujumise test	Segu tee 4,50 g/kg	Pikenenud ujumisaeg; maksa glükogeeni suurenemine; vere uurea vähenemine	Glükogeeni varud ja metaboliitide kliirens
Südame-veresoonkonna kaitse	Roti müokardiinfarkti mudel	50, 100 mg/kg päevas 28 päeva jooksul	Infarkti suurus 15 versus 38 protsenti; väljutusfraktsioon 64,7 versus 40,3 protsenti	Makrofaagide polarisatsiooni ja kollageeni ladestumise moduleerimine; PI3K/Akt kaasamine

5. Toksikoloogia ja ohutus

Kõige süstemaatilisemad praegu saadaolevad ohutusandmed pärinevad C. tubulosa ekstrakti tootest Memoregain. Genotoksilisuse osas ei näidanud Amesi test revertantsete kolooniate arvu suurenemist kuni 5 mg plaadi kohta, kasutades viit Salmonella typhimurium'i tüve; Hiina hamstri munasarja (CHO-K1) rakkudes ei täheldatud kromosoomaberratsioonide suurenemist kuni 2,5 mg/ml; ja kuni 500 mg/kg ICR-hiirte luuüdis ei täheldatud mikrotuumade suurenemist. Korduva doosiga toksilisuse korral said rotid suukaudseid annuseid 0, 0,15, 0,3 ja 0,5 g/kg päevas 28 päeva jooksul ning jälgitavaid kõrvaltoimeid ei leitud, mistõttu täheldati kõrvaltoimete puudumisel üle 500 mg/kg päevas. Kodused uuringud on samuti teatanud, et C. tubulosa PhG ekstraktid kontsentratsioonis 0,5–2,0 g/kg ei näidanud mutageensust ega genotoksilisust.

Tabel 5. Cistanche tubulosa ekstraktide toksikoloogiline hinnang

Test	Tingimused ja tulemused
Amesi test	viis Salmonella typhimurium tüve; mutageensus ei suurene kuni 5 mg plaadi kohta
CHO-K1 kromosoomiaberratsioon	Kromosoomide aberratsioonid ei suurene kuni 2,5 mg/ml
Hiire luuüdi mikrotuum	Mikrotuumade arv ei suurene kuni 500 mg/kg
28-päevane korduvannuse toksilisus	0, 0,15, 0,3 ja 0,5 g/kg päevas rottidel; ei ole märgatavaid kõrvalmõjusid
Järeldus	NOAEL suurem kui 500 mg/kg päevas
Täiendavad kodumaised andmed	PhG ekstraktid 0,5–2,0 g/kg ei näidanud mutageensust ega genotoksilisust

Need tulemused annavad kasutatava lähtepunkti konkreetse ekstrakti ohutusele lühiajalise korduva annustamise korral, kuid neid ei saa ekstrapoleerida kõikidele C. tubulosa ekstraktidele. Erinevad ekstraheerimisprotsessid ja koostisosade vahekorrad, erinevad peremeestaimed ning raskmetallide, pestitsiidide jääkide, mükotoksiinide või lahustite jääkide esinemine võivad muuta toksikoloogilist profiili. Rasedate naiste, laste, autoimmuunhaigusega patsientide, hormonaalset või antikoagulantravi saavate isikute ning maksa- või neerukahjustusega inimeste puhul ei saa ülaltoodud loomade andmeid kasutada riskist loobumiseks. Andmed pikaajalise (üheksakümmend päeva või enam) korduvate annuste toksilisuse, reproduktiiv- ja arengutoksilisuse, endokriinsete ja immuunsüsteemi kõrvalnähtude, soolestiku mikrobiota pikaajaliste häirete ning ravimite ja ravimite koostoimete kohta puuduvad.

6. Kvaliteedikontroll ja analüütilised standardid

Ametlike standardite kohaselt kasutab Hiina farmakopöa ehhinakosiidi ja verbaskosiidi Cistanches Herba markerühenditena, mis on määratud kõrgsurvevedelikkromatograafiaga tuvastusega lainepikkusel 330 nm, kusjuures kuivatatud ehhinakosiidi piigi põhjal arvutatakse teoreetiliste plaatide arv, mis peab olema vähemalt 30 kahe virde kombineeritud sisaldusega. olema C. deserticola puhul vähemalt 0,30 protsenti ja C. tubulosa puhul mitte vähem kui 1,5 protsenti. See piirang on kvaliteedipõrand halvema või võltsitud materjali välistamiseks, mitte optimaalse terapeutilise annuse juhend.

Metoodilisel tasandil on HPLC-DAD tavapärane tööriist peamiste koostisosade kvantifitseerimiseks, samas kui UPLC-Q-TOF-MS ja teisi suure eraldusvõimega massispektromeetrilisi meetodeid kasutatakse mitmekomponendilise iseloomustamiseks ja tundmatute piikide tuvastamiseks. Näiteks spektri-efekti seose uuringus kasutati võrdlemiseks Vanquish Horizon ülikõrge jõudlusega vedelikkromatograafia süsteemi ACQUITY UPLC BEH C18 kolonniga, gradientelueerimist 0,1% fosforhappe ja atsetonitriiliga kiirusel 0,3 ml/min ning tuvastamist lainepikkusel 238 nm genebashinakosiidhappega. tubulosiid A ja isoakteosiid toorravimite, vesiekstrakti ja C. tubulosa jääkide hulgas. Spektri-efekti seoste kindlakstegemiseks kasutati osalist vähimruutude regressiooni, kahemõõtmelist korrelatsioonianalüüsi ja redundantsusanalüüsi ning võrgufarmakoloogia ennustas 159 sihtgeeni, mida jagavad aktiivsed koostisosad ja antioksüdantidega seotud haigused.

Tabel 6. Kvaliteedikontrolli soovitatavad tasemed ja meetodid

Eesmärk	Soovitatav meetod
Peamine koostisosade sisu	HPLC-DAD ehhinakosiidi ja verbaskosiidi jaoks; Vajadusel UPLC-MS/MS
Mitmekomponendilised ja tundmatud tipud	LC-MS/MS ja kõrglahutusega massispektromeetria
Botaaniline identifitseerimine ja võltsimine	DNA vöötkodeerimine koos morfoloogilise ja keemilise sõrmejälgede võtmisega
Partii-partii sõrmejälgede järjepidevus	Põhikomponentide analüüs, OPLS-DA ja peamiste tipptasemete suhtarvude juhtimine
Ohutusega seotud lisandid	Raskmetallid, pestitsiidide jäägid, mükotoksiinid, lahustite jäägid ja oksüdatsiooniproduktid

Ainult ehhinakosiidil ja verbaskosiidil põhinev kvaliteedikontroll võib puududa tubulosiidi A, isoakteosiidi, 2-peamise atsetüüllakteosiidi ja töötlemisega seotud lagunemissaadused ega tuvastada erinevast iduplasmast või jääkide rikastamisest põhjustatud koostise nihkeid. Annuse teisendamiseks, võttes näiteks ekstrakti, mis sisaldab 500 mg/g ehhinakosiidi, vastab 200 mg ekstrakti päevane tarbimine ligikaudu 100 mg ehhinakosiidile; kui toode sisaldab ka teisi PhG-sid, ei saa 100 mg ehhinakosiidi samastada 200 mg glükosiidide üldsisaldusega.

7. Kliinilised uuringud ja tõlkearendus

Praegu saadaolev kõrgeima kvaliteediga inimeste tõendusmaterjal on randomiseeritud, topeltpime platseebokontrollitud uuring kombineeritud Cistanche tubulosa ja Ginkgo biloba ekstrakti (CG) kohta. Uuringus osales üheksakümneks päevaks 100 Hiina keskealist ja eakat osalejat, kes said kaks tabletti päevas, iga paar sisaldas 72 mg ehhinakosiidi ja 27 mg flavonoolglükosiide. CG rühmas tõusid vaimse seisundi minieksami skoorid 26,5-lt algtasemel 27,1-le üheksakümnendaks päevaks, Montreali kognitiivse hindamise skoorid 23,4-lt 25,3-le ja Maailma Terviseorganisatsiooni elukvaliteedi skoorid 81,6-lt 84,2-le, kusjuures kõik tulemused olid paremad kui 00bo-1 ja kõik 0. Cognitraxi maatrikstest ja Wechsleri mäluskaala parandasid mälufunktsioone, sealhulgas pikaajalist ja viivitatud mälu. Vere biomarkeritest vähenesid märkimisväärselt tau, pT181, pS199, pT231, pS396 ja kilpnääret stimuleeriv hormoon, samas kui trijodotüroniini ja vaba trijodotüroniini sisaldus suurenesid oluliselt. Raviga seotud kõrvaltoimetest ei teatatud ning rutiinsed vere- ja uriinianalüüsid jäid stabiilseks.

Selle uuringu tähtsus seisneb selles, et see on esimene randomiseeritud topeltpime uuring, mis viitab C. tubulosa ekstrakti kognitiivsele kasulikkusele inimestel. Selle piirangud on sama selged: sekkumine oli kombinatsioon, mis sisaldas Ginkgo bilobat, nii et mõju ei saa omistada ainult C. tubulosa PhG-dele; valimi suurus ja üheksakümnepäevane kestus ei ole piisavad, et hinnata haiguse pikaajalist muutust; ja kognitiivsete skaalade paranemine on endiselt kaugel kliinilistest tulemusnäitajatest, nagu Alzheimeri tõbi. Lisaks ei ole otsingu kuupäeva seisuga tuvastatud ühtegi kinnitatavat topeltpimedat randomiseeritud uuringut C. tubulosa ekstraktiga ainult mälu või väsimuse tuvastamiseks.

Cistanche tubulosa ekstrakt

Tabel 7. Inimeste kohta käivate tõendite ja andmete praegune seis, mida on endiselt vaja

Tõendusmaterjal	Praegune järeldus	Andmed on endiselt vajalikud
Ainult C. tubulosa RCT mälu jaoks	Kinnitatavat topeltpimedat randomiseeritud uuringut ei tuvastatud	Katse registreerimine, valimi suuruse arvutamine, statistilise analüüsi plaan
Ainult C. tubulosa RCT väsimuse tuvastamiseks	Kinnitatavat topeltpimedat randomiseeritud uuringut ei tuvastatud	Harjutuse protokoll; objektiivsed lõpp-punktid, nagu laktaat ja glükogeen
CG kombineeritud tunnetuse uuring	100 osalejat, 90 päeva; märkimisväärne MoCA ja MMSE paranemine	Pikem kestus, sõltumatu replikatsioon, ühe agendi võrdlus
Jäta meelde inimkatsed	Täielikku kliinilist aruannet ei saadud	Protokoll, CONSORTi vooskeem, andmed kõrvaltoimete kohta
Uute ravimite väljatöötamine	Turustatud Congrong Zonggan kapslid; ehhinakosiid lõpetas I faasi	II ja III faasi efektiivsuse ja ohutuse andmed

Toodete ja uute ravimite väljatöötamise osas kiideti 2005. aastal heaks kerge kuni mõõduka vaskulaarse dementsuse raviks Congrong Zonggani kapslid, mille peamine aktiivne fraktsioon on Cistanche PhG-d; ehhinakosiid kui 1. klassi uus ravim sai 2017. aastal kliinilise uuringu heakskiidu ja on lõpetanud I faasi uuringud; ja toidulisanditooteid, nagu Memoregain, turustatakse väljaspool Mandri-Hiinat. Tuleb rõhutada, et tervislikud toidud, ravimid ja toidulisandid kuuluvad erinevate regulatiivsete raamistike alla ning funktsiooniväiteid, millel puuduvad riiklike ravimi- või tervishoiuasutuste või kliiniliste uuringute registrite kontrollitavad andmed, ei tohiks käsitleda heakskiidetud näidustustena.

8. Järeldused ja perspektiivid

Kokkuvõttes on C. tubulosa PhG-de farmakoloogilised uuringud moodustanud üsna selge pildi. Keemiliselt on ehhinakosiidi domineerimine ja sisalduse varieeruvuse ulatus nüüd hästi välja kujunenud, kuid konversiooniahel toorravimist ekstraktist doosist kokkupuuteni ei ole veel standarditud. Farmakodünaamiliselt on tõendid suhteliselt olulised kognitiivsete funktsioonide paranemise, Parkinsoni-sarnaste vigastuste eest kaitsmise, ajuisheemiavastase, vananemisvastase, osteoporoosivastase, glükolipiidide ainevahetuse regulatsiooni, paljunemisvõime paranemise, hepatokaitse ja põletikuvastase toime kohta, samas kui kasvajavastane toime ja kaitse naha fotovananemise eest jäävad vihjavasse staadiumisse. Mehhaaniliselt on Nrf2/HO-1, TGF-beta1/Smad, NLRP3 põletikuline, CK2 alfa-prime/Wnt mitokondriaalne fusioon, daf-16/FOXO, GHS-R1a, StAR/CYP11A1/3 beeta-HSD ja soolestiku mikrobiootsas enim investeeritud. põhjalikult.

Samal ajal piiravad kolm kitsaskohta jätkuvalt nende leidude ülekandmist tõendatavalt tegevuselt heakskiidetavateks ravimiteks ja kaitstavateks väideteks. Esimene on ebaselge biosaadavus ja metaboolne omistamine: kokkupuude lähteühendiga on äärmiselt madal ja soolestiku mikroobide transformatsioon on keeruline, seega puuduvad otsesed kokkupuute-vastuse tõendid selle kohta, kas efektiivsust vahendavad lähteühend, metaboliidid või peremeesorganismi metabolismi ümberkujundamine. Teine on katkendlik keemilise kokkupuute ja mõju ahel: koostisosade kvantifitseerimine, farmakokineetilised proovid, kudede jaotus ja efektiivsuse lõpp-punktid on sageli hajutatud erinevate uuringute vahel ning ebajärjekindel annuste aruandlus muudab võrdlemise ja ühendamise keeruliseks. Kolmas on ebapiisav inimeste tõendusmaterjal: kombineeritud toote kohta on olemas ainult üks randomiseeritud kontrollitud uuring ning pikaajaline ohutus ja riskid teatud populatsioonides on määratlemata.

Selle põhjal soovitatakse järgmiseks uurimisetapiks viis prioriteeti.

Looge laboritevaheline võrreldav kemikaalide ja kokkupuute andmebaas: hõlmake erinevatest peremeesorganismidest, tootmispiirkondadest, saagikoristusaegadest, töötlemismeetoditest ja partiidest pärit proove, määrake ehhinakosiidi, verbaskosiidi, isoakteosiidi ja tubulosiidi A kvantifitseerimine ühtlustatud HPLC-DAD/LC-MS/MS meetoditega ning teatage avastamispiirid, suhtelise saagise kvantifitseerimise ja kuivkaalu standardne määramine, devi-analüüs.

Dooside aruandluse ühtlustamine: esitage doosid samaaegselt ühikutes mg glükosiidide kogusisaldus kilogrammi kohta ja milligrammi ehhinakosiidi kilogrammi kohta koos partii keemilise sõrmejäljega, nii et ekstrakti spetsifikatsioonid ei asenda kunagi kokkupuudet.

Testige soolestiku mikrobiota-metaboliidi-aju hüpoteesi põhjuslike in vivo katsetega: konstruktsiooniuuringud, milles kasutatakse antibiootikumide ammendumist, monokoloniseerimist või määratletud mikroobikooslusi, lähteühendi ja peamiste metaboliitide paarisannustamist ning isotoopide jälgimist, kombineerituna hematoentsefaalbarjääri läbilaskvuse ja sidumata ajukontsentratsiooniga, et luua kokkupuute taastamise mudelid.

Seostage koostise uuringud kliiniliselt mõõdetavate tulemusnäitajatega: võrrelge süstemaatiliselt nanoemulsioone, tahkeid lipiidide nanoosakesi, fosfolipiidide komplekse ja muid strateegiaid füüsikalis-keemilise stabiilsuse, Caco-2 läbitungimise, soolestiku mikroobide transformatsiooni, roti farmakokineetika, ajuga kokkupuute, immunotoksilisuse ja pikaajalise korduva toksilisuse osas.

Edendage rangeid kliinilisi uuringuid ja pikaajalist ohutuse hindamist: seadke prioriteediks uurimuslikud uuringud glükoositaluvuse ja kerge kognitiivse häirega inimestel, mille esmased tulemusnäitajad põhinevad regulatiivsetel või kliinilistel tulemustel, ning lisage paralleelselt üheksakümnepäevased või pikemad korduvate annuste toksilisuse, reproduktiiv- ja arengutoksilisuse ning ravimite koostoime, endokriinse ja immuuntoksilisuse uuringud.

Kokkuvõttes keskenduvad C. tubulosa PhG-de kõige tõlgitavamad tõendid standardiseeritud glükosiidide üldsisaldusele, soolestiku-aju teljele Alzheimeriga seotud patoloogias, glükolipiidide metaboolsele regulatsioonile, reproduktiivsele steroidogeneesile ja hepatokaitsele ning farmakoloogiline narratiiv on selgelt inimeste tõenditest ees jooksnud. Asjakohane eesmärk selles etapis ei ole väita, et need koostisosad suudavad ravida Alzheimeri tõbe, diabeeti, neeruhaigust, osteoporoosi või seksuaalfunktsiooni häireid, vaid pigem muuta traditsiooniline ravimtaim reprodutseeritavaks, annusega määratletavaks tootekandidaadiks, millel on hinnatav kasu-riski profiil range botaanilise kontrolli, kvantitatiivsete keemiliste sõrmejälgede, suletud farmakokineetilise kontrolli, juhusliku kontrollitud ja juhusliku metaboolse mehhanismi kaudu. katsumused.

Viited

[1] Hou R, Song W, Nan Y, Gong Y, Liu J, Liu J. Cistanche tubulosa glükosiidid leevendavad APP/PS1 hiirte kognitiivset langust soolestiku mikrobiota ja rasvhapete metabolismi moduleerimise kaudu: arusaamad multi-oomikast ja eksperimentaalsest valideerimisest. Frontiers in Pharmacology, 2025, 16: 1662336. DOI: 10.3389/fphar.2025.1662336.

[2] Zhao Q, Gao J, Li W, Cai D. Ehhinakosiidi neurotroofsed ja neurorescue-efektid Parkinsoni tõve subakuutses MPTP hiiremudelis. Brain Research, 2010. PMID: 20478277.

[3] Zeng K, Wang J, Wang L jt. Väike molekul indutseerib mitokondriaalset sulandumist neuroprotektsiooniks, suunates CK2, mõjutamata selle tavapärast kinaasi aktiivsust. Signaali ülekanne ja sihtteraapia, 2021. DOI: 10.1038/s41392-020-00447-6.

[4] Zhu K, Meng Z, Tian Y jt. Cistanche tubulosa koguglükosiidide hüpoglükeemiline ja hüpolipideemiline toime dieedi / streptosototsiini poolt indutseeritud diabeetilistel rottidel. Ajakiri Etnofarmakoloogia, 2021.

[5] Wang Q, Dong J, Lu W jt. Cistanche tubulosa fenüületanoolglükosiidid parandasid reproduktiivset düsfunktsiooni, reguleerides munandite steroide CYP450-3beta-HSD raja kaudu. Ajakiri Etnofarmakoloogia, 2020.

[6] Li F, et al. Ehhinakosiidi antiosteoporootiline toime munasarjade eemaldatud rottidel. Fütomeditsiin, 2013. PMID: 23428402.

[7] Wu CJ, Chien MY, Lin NH jt. Cistanche tubulosast eraldatud ehhinakosiid stimuleerib oletatavasti kasvuhormooni sekretsiooni greliini retseptori aktiveerimise kaudu. Molecules, 2019, 24(4): 720. DOI: 10,3390/molekulid24040720.

[8] Wang X, Zhang J, Lu L, Zhou L. Ehhinakosiidi pikaealisuse mõju Caenorhabditis elegansis vahendatud daf-16 kaudu. Bioscience, Biotechnology and Biochemistry, 2015. DOI: 10.1080/09168451.2015.1046364.

[9] Liao PL, Li CH, Tse LS, Kang JJ, Cheng Y W. Tervisliku toidutoote Cistanche tubulosa Memoregain ohutuse hindamine: genotoksilisuse ja 28-päevase korduvdoosi toksilisuse test. Toidu- ja keemiline toksikoloogia, 2019.

[10] Liu J, Yang L, Dong Y, Zhang B, Ma X. Ehhinakosiid, hindamatu loodustoode neuroloogiliste ja muude häirete ravis. Molecules, 2018, 23(5): 1213. DOI: 10,3390/molekulid23051213.

[11] Wang W, Jiang S, Zhao Y, Zhu G. Ehhinakosiid: paljulubav aktiivne looduslik toode ja farmakoloogiline aine. Pharmacological Research, 2023, 197: 106951. DOI: 10.1016/j.phrs.2023.106951.

[12] Liu X T. Uudne strateegia Cistanche tubulosa aktiivsete komponentide skriinimiseks, mis põhineb spektri-efekti seoste analüüsil ja võrgufarmakoloogial. 2023. DOI: 10.1155/2023/9030015.

[13] Wang D, Wang H, Gu L. Traditsioonilise hiina ürdi Cistanche antidepressandid ja kognitiivseid parendustegevusi. Tõenduspõhine täiendav ja alternatiivne meditsiin, 2017, 2017: 3925903. DOI: 10.1155/2017/3925903.

[14] Chen et al. Randomiseeritud topeltpime platseebokontrollitud uuring Cistanche tubulosa ja Ginkgo biloba ekstraktide kohta keskealiste ja eakate inimeste kognitiivse funktsiooni parandamiseks. Phytotherapy Research, 2024. DOI: 10.1002/ptr.8275. PMID: 38972848.

[15] Ehhinakosiidi parandav toime seljaajukahjustuse vastu NLRP3 põletikulise signaaliraja pärssimise kaudu. Bioteadused, 2019, 116978. DOI: 10.1016/j.lfs.2019.116978.

[16] Ehhinakosiid kaitseb dopamiinergilisi neuroneid, inhibeerides MPTP-indutseeritud Parkinsoni tõve mudelis NLRP3/kaspaas-1/IL-1beeta signaaliülekande rada. Brain Research Bulletin, 2020, 164: 55–64. DOI: 10.1016/j.brainresbull.2020.08.015.

[17] Ehhinakosiid nõrgendab infarktijärgset südame remodelleerumist, reguleerides makrofaagide polarisatsiooni ja kollageeni ladestumist. Fütomeditsiin, 2025.

[18] Hiina farmakopöa komisjon. Hiina Rahvavabariigi farmakopöa, 1. köide, 2020. aasta väljaanne. Peking: China Medical Science Press, 2020.

[19] Jiang X, Feng C, Wang L jt. Fenüületanoidglükosiidide ekstraheerimise, eraldamise, keemiliste struktuuride ja farmakoloogilise tegevuse edusammud Cistanche'is. Kaasaegne Hiina meditsiin, 2026. DOI: 10.13313/j.issn.1673-4890.20260107001.

[20] Uuring Cistanche tubulosa iduplasma ravimkomponentide sisalduse ja ühe taime kuivmassi kohta. Journal of China Agricultural University, 2017. (hiina keeles)

[21] Luo Z et al. Cistanche tubulosa koguglükosiidide immunomoduleeriv toime RAW264.7 rakkudele ja normaalsetele hiirtele. Toiduainetööstuse teadus ja tehnoloogia. DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019110203. (hiina keeles)

[22] Cistanche tubulosa valemitee ekstraheerimistehnoloogia ja väsimusvastane toime. (hiina keeles)

[23] Hiina meditsiini ja soolestiku mikrobiota roll kroonilise kõhukinnisuse korral. Tõenduspõhine täiendav ja alternatiivne meditsiin, 2019. PMCID: PMC6556327.