Ⅱ osa Kultiveeritud Cistanche Deserticola erinevate osade keemiliste profiilide ja antioksüdantse toime võrdlus, kasutades ultrajõudlusega vedelikkromatograafiat-kvadrupoolne lennuaja massispektromeetria ja A 1,1-difenüül-2-pikriid

Rohkem informatsiooni:emily.li@wecistanche.com

Cistanche kohta lisateabe saamiseks klõpsake siin

Üksikasjalikud massispektri andmed ja kavandatud fragmentatsioonimustrid on toodud joonisel 7. Kuue ülaltoodud PhG struktuurid on jagatud kolmeks osaks: I-kofeiinhape (CA), II-aglükoon ja III-suhkur (Glc ja Rha). . MS/MS spektrites domineerivad kofeoüülrühma ning Glc- ja Rha-jääkide neutraalsetele lõhustumistele vastavad massidefektid PhG-de fragmentatsiooniradadel ja genereerivad diagnostilisi fragmendiioone (joonis 8). Täiendavad MS/MS iseloomulikud fragmendi ioonid m/z 179, 161 ja 135 juures viitasid lisaks sellele, et nende struktuurides on kofeoüülasendus. Neid killustamisfunktsioone kasutades võiksime julgelt välja pakkuda killustamisviisid järgmiselt.Akteosiid(joonis 7c) tekitas CA-osa kadumise kaudu fragmendi m/z 461 juures ja seejärel Rha edasise kadumise kaudu iooni m/z 315 juures. CA-osa leiti m/z 179 juures ja selle fragmendi ioonid, mis leiti m/z 161 ja m/z 135, tekkisid vastavalt H2O ja CO2 kao tõttu. Isoakteosiid (joonis 7d) tootis samu ioone kui akteosiid m/z 461, 315, 179, 161 ja 135 juures. 20 -Atsetüüllakteosiid (joonis 7e) tekitas fragmendi m/z juures 623 atsetüül- ja seejärel genereeriti ioone m/z 461, 315, 179, 161 ja 135 juures, mis oli identne akteosiidi killustumise mustriga. Samal ajal tekitas 20 -atsetüüllakteosiid fragmendi m/z 503 juures, kaotades oma CA fragmendi ja seejärel Ac rühma, et toota iooni m/z 461 juures. Tubulosiid B (joonis 6f) näitas sarnast fragmentatsioonimustrit. 20 -atsetüüllakteosiid. Ehhinakosiid (joonis 7a) tekitas fragmendi iooni m/z 623 juures CA-osa kaotamise kaudu ning seejärel Rha ja Glc fragmentide järjestikune kadu andis fragmendi ioonid m/z 477 ja 315 juures. Fragmendi ioon m/z juures 461 genereeriti CA ja Glc osade kaotamisega prekursorioonist. Leiti ka iseloomulikud CA ioonid m/z 179, 161 ja 135 juures. Tsistanosiid A (joonis 7b) tekitas fragmendi iooni m/z 637 juures, kaotades oma CA-osa, ja seejärel genereeris ioone m/z 491 ja 475 juures vastavalt Rha ja Glc fragmentide edasise kadumise tõttu. Seetõttu võib UPLC-PDA-QTOF/MS kombinatsiooni kasutamine anda suure panuse ühendite keemiliste struktuuride täpsesse selgitamisse.

2.7. Antioksüdantide ja A8 antioksüdantide omaduste korrelatsioon.

Korrelatsioonianalüüsi antioksüdantide üldsisalduse ja antioksüdantide koguaktiivsuse vahel on kirjeldatud paljudes uuringutes [33–38]. Meie teadmiste kohaselt puuduvad uurimused kultiveeritud toodete antioksüdantsete omaduste ja PhG sisalduse võrdlemiseks.C. deserticolaosad, kasutades sellist kokkuvõtlikku iseloomustusmeetodit. Jaotises "Kvantitatiivne analüüs" kirjeldatud kuue PhG sisalduse esialgsed tulemused on kokku võetud tabelis 4 ja antioksüdantne aktiivsus (IC50), mis on määratud DPPH testiga, nagu on kirjeldatud jaotises "Antioksüdantide võime", on loetletud tabelis 5. Esiteks, iga osa antioksüdantide kogusisaldus ja aktiivsus on toodud joonisel 9. On selge, et erinevate osade vahel on silmatorkavad erinevused. Tegelikult näitasid saadud tulemused, et kultiveeritud antioksüdantne aktiivsusC. deserticolavarred olid võrreldavad turul saadaolevate vartega. Need tulemused näitasid, et varreekstrakti antioksüdantne aktiivsus võib olla korrelatsioonis selle PhG sisaldusega. Seetõttu fütokemikaalide varre ekstrakti kultiveeritudC. deserticolaArvatakse, et neil on oluline roll selle DPPH radikaalide eemaldamise aktiivsuses. Üldiselt näitasid meie tulemused tugevat korrelatsiooni PhG üldsisalduse ja antioksüdantse aktiivsuse vahel: r {{0}},92, ** p <>

Lisaks ei näidanud teatud suurema antioksüdantide sisaldusega proovid kõrget antioksüdantset aktiivsust, näiteks telg ja õisik. Samal ajal oli võra, millel oli kuuest osast kõrgeim aktiivsus, madalam antioksüdantide kogusisaldus kui teljel ja õisikul. Joonisel 4, nagu on kirjeldatud jaotises "Kvantitatiivne analüüs", on näidatud PhG-ühendite suhtelised kogused, et anda esialgne arusaam nende individuaalsest panusest. Selles uuringus viidi läbi ka osaliste vähimate ruutude (PLS) regressioonianalüüs [39–41], et võrrelda korrelatsiooni iga antioksüdandi rohkuse ja antioksüdandi aktiivsuse vahel in vitro. PLS-mudel konstrueeriti, kasutades iga antioksüdandi sisu (deskriptormaatriksina X) sõrmejälgede kromatogrammides lainepikkusel 33{6}} nm ja kõigi osade antioksüdantide aktiivsust (vastusmaatriksina Y). SIMCA-P pluss tarkvara (versioon 13.0, Umetrics, Umea, Rootsi) abil saadud koefitsientide graafikud ja muutuva tähtsuse väärtused projektsioonis (VIP) on näidatud joonisel 10. Nimelt valiti mudelite koostamiseks Y-muutujaks IC50 väärtuste pöördväärtus (1/IC50), kuna madalamad IC50 väärtused näitavad tugevamat antioksüdantset aktiivsust. Vastavalt saadud regressioonikoefitsiendi graafikule joonisel 10A näitavad lineaarse regressiooni mudelid, et kõik antioksüdandid peale akteosiid olid positiivses korrelatsioonis 1/IC50-ga. Saadud PLS-i kalibreerimismudelit väljendatakse regressioonivõrrandiga: Y=0,50X1 pluss 0,57X2 − 0,11X3 pluss 0,32X4 pluss 0,58X5 pluss 0,24X6. VIP väärtused peegeldavad muutujate tähtsust mudelis. mida suurem on VIP, seda asjakohasem on valimi klassifitseerimine. Nagu meie tulemused näitasid, oli 20 -atsetüüllakteosiid antioksüdantse aktiivsuse oluline osa (joonis 10B). See leid oli kooskõlas Yangi jt uuringuga [20].

3 Materjalid ja meetodid

3.1 Taim Materjalid.KasvatatudC. deserticolapakkus heldelt Ningxia provintsis Yongningi maakonnas asuv Bencao Congrong istutusbaas ja selle kinnitas prof Jun Chen Hiina meditsiiniteaduste akadeemia ravimtaimede arendamise instituudist Pekingis, Hiinas. Kultiveeritud kuus erinevat osaC. deserticola Nende hulka kuuluvad mahlakas vars (R1), õisikutelg (R2), õisik (R3), õis (ilma seemneta) (R4), õisikuvars (R5) ja õisik (R6). Üksikasjalik prooviteave on näidatud joonisel 11. Iga osa kuivatati eraldi kuivatis, purustati pulbriks, lasti läbi 40-sõela, seejärel laaditi õhukindlatesse anumatesse ja säilitati eksikaatoris. Nende proovide vautšeriproovid deponeeriti Hiinas Pekingis asuvas Hiina meditsiiniteaduste akadeemia ravimtaimede arendamise instituuti.

3.2. Kemikaalid ja reaktiivid. Isoakteosiid (partii 130809), akteosiid (partii 130421) ja ehhinakosiid (partii 121027) osteti ettevõttelt Chengdu Pure-Chem Standard Co. Ltd. (Peking, Hiina), tsistanosiid A, 20 -atsetüüllakteosiid ja tubulosiid B eraldati ja puhastatud kultiveeritudC. deserticolameie laboris üle 98-protsendilise puhtusega (HPLC) ja nende struktuur kinnitati ka HR-MS, 1H-NMR ja 13C-NMR põhjal ning võrreldi varasema kirjandusega. Nende struktuurid on näidatud tabelis 7. DPPH, L-askorbiinhape ja Trolox osteti firmalt Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Lahustid, atsetonitriil ja metanool olid HPLC puhtusega firmalt Merck (Darmstadt, Saksamaa) ja sipelghape puhtusega 96 protsenti oli HPLC puhtus (Tedia, Fairfield, OH, USA). Deioniseeritud vesi (18 MΩ) valmistati destilleeritud veega läbi Milli-Q süsteemi (Millipore, Milford, MA, USA). Teised reaktiivid ja kemikaalid olid analüütiliselt puhtad.

3.3. Lahuste ettevalmistamine

3.3.1. Standard Solutions.Segatud standardpõhilahus, mis sisaldabehhinakosiid(501 µg/mL), tsistanosiid A (64 µg/mL), akteosiid (239 µg/mL), isoakteosiid (22,6 µg/mL), 20 -atsetüüllakteosiid (278 µg/mL) ja tubulosiid B (46,2 µg) /mL) valmistati metanoolis. Põhilahused lahjendati metanooliga, et saada rida sobivaid kontsentratsioone, mida kasutati töölahustena kalibreerimiskõvera koostamiseks ja mida säilitati enne kasutamist temperatuuril 4 ◦C.

3.3.2. Näidislahendused. Täpselt kaalutud pulber (40 silma, 1 g) kuuest erinevast kultiveeritud osastC. deserticolalisati vastavalt 50 ml metanooli. Pärast 30-minutist toatemperatuuril sukeldamist segud kaaluti ja ekstraheeriti seejärel ultraheliveevannis (40 kHz, 250 W, Kunshan, Hiina) toatemperatuuril 40 minutit. Pärast jahutamist lisati kaotatud kaalu kompenseerimiseks metanooli. Kõik lahused filtriti enne süstimist läbi 0,22 µm membraanfiltrite. Supernatandi lahuse alikvoot (3 µL) süstiti analüüsimiseks UPLC-sse. Iga ekstrakti süstiti kolmes eksemplaris.

3.3.3. DPPH lahendused. DPPH radikaali põhilahus (5 × 10–3 mol/L) valmistati täpselt kaalutud DPPH proovi lahustamisega metanoolis vahetult enne katseid ja seda kaitsti valguse eest. Seejärel lahjendati põhilahust värskelt metanooliga, et saada standardlahus (1 × 10–4 mol/L).

3.4. UPLC-PDA analüüsi seisund. UPLC analüüs viidi läbi Waters Acquity UPLC süsteemiga (Waters, Milford, MA, USA), mis sisaldas kolonnsoojendit, proovihaldurit, binaarset lahustihaldurit ja fotodioodide massiivi detektorit. Kromatograafiline eraldamine viidi läbi Acquity UPLC BEH C18 kolonniga (1,7 µm, 2,1 mm × 1{{10}}0 mm; Waters), fikseerides kolonni soojendaja 30 ◦C juures. Liikuv faas koosnes atsetonitriilist (A) ja veest, mis sisaldas 0,2 protsenti sipelghapet (B) voolukiirusel 0,4 ml/min. Gradient-elueerimisprogrammi kasutati järgmiselt: 5 protsenti A 0–2 minuti pärast, 5–15 protsenti A 2–4 minuti pärast, 15 protsenti A 4–6 minuti pärast, 15–20 protsenti A 6–10 minuti pärast, 20 –35 protsenti A 10–15 minuti juures, 35 protsenti A 15–18 minuti juures ja 35–5 protsenti A 18–18,1 minuti juures. Seejärel hoiti kompositsiooni uuesti tasakaalustamiseks 5% A juures veel 10 minutit. Detekteerimise lainepikkuseks määrati 330 nm.

3.5. UPLC-ESI-Q/TOF-MS analüüs. Tingimused UPLC tingimused olid samad, mis on kirjeldatud jaotises 3.4. MS analüüs viidi läbi Waters Xevo G2-XS QTOF massispektromeetriga (Waters MS Technologies, Manchester, UK), mis oli varustatud elektropihustusliidesega (ESI) negatiivsete ioonide režiimis koos täieliku skaneerimisega MS-spektriga üle m/ z vahemikus 50–1200. Allikas oli kapillaarpinge 2000 V, allika temperatuur 120 ◦C, desolvatseerimistemperatuur 450 ◦C, koonuse pinge 40 V, koonuse gaas 30 L/h ja desolvatatsioonigaasi voolukiirus 600 L/h. MS/MS katsed viidi läbi kasutades MSE-d ja kokkupõrkeenergia oli 20–40 V. Kõik MS andmed koguti Lock Spray süsteemi abil, et tagada massi täpsus ja reprodutseeritavus. Leutsiin-enkefaliini [M - H] - iooni m/z 554,2615 juures kasutati lukumassina negatiivses ESI režiimis. Andmed koguti, analüüsiti ja töödeldi Waters Mass Lynx 4.1 tarkvara (Waters MS Technologies, Manchester, UK) abil.

3.6. Võrguühenduseta DPPH radikaali eemaldamise test. Taimeekstraktide kogu antioksüdantset aktiivsust hinnati võrguühenduseta DPPH radikaalide püüdmise testi abil. Erinevate kontsentratsioonidega proovilahused (2 ml) segati 2 ml 1 × 10–4 mol/L DPPH lahusega (metanoolis). Kõiki proove loksutati ja lasti 60 minutit pimedas toatemperatuuril seista. DPPH vabade radikaalide vähenemist mõõdeti neeldumise lugemisel lainepikkusel 517 nm ELISA lugeja (TECAN, Growing, Austria) pimekatse suhtes (metanool ilma proovita). Selle katse kontrollina kasutati ainult metanooli (2 ml). Positiivsete kontrollidena kasutati troloxi ja L-askorbiinhapet. Testitud proovide radikaali eemaldamise aktiivsus (inhibeerimise protsent), mida väljendati DPPH eemaldamise protsendina, arvutati järgmise valemi abil: inhibeerimise protsent=[(A kontroll – A proov)/Akontroll] × 100. Kogu antioksüdantne aktiivsus arvutati graafikule inhibeerimise protsendi ja proovi kontsentratsiooni suhtes ja seda esitati proovikontsentratsioonina, mis on vajalik 50 protsendi DPPH radikaalide (IC50) eemaldamiseks. Kõik testid viidi läbi kolmes korduses ja IC50 väärtused esitati kui keskmine ± SD.

3.7. UPLC-PDA ühendatud kolonnieelse DPPH analüüsiga. Selles uuringus kasutati kultiveeritud C. deserticola erinevate osade 2 ml DPPH lahuse (3 × 10–3 mol/L) ja 1 ml proovilahuste (12 mg/mL) segamist, et edasi anda UPLC-PDA. sõeluda antioksüdantide profiile ja tuvastada antioksüdantide komponendid, tuvastades muutused proovilahuste iseloomulikes piikides enne ja pärast DPPH vabade radikaalide eemaldamise reaktsiooni. Iga erineva taimeosa jaoks süstiti 10 µL proovilahuse alikvoodid enne ja pärast DPPH testi eraldi UPLC süsteemi samadel tingimustel, mida on kirjeldatud jaotises 3.4. Pärast proovilahuste segamist DPPH lahusega tuvastati 330 nm juures muutused proovilahuste iseloomulikes piikides.

3.8. Andmete analüüs. Analüütilised andmed on väljendatud kolmekordsete sõltumatute mõõtmiste keskmisena ± standardhälbe (SD). Kahe muutujaga korrelatsioonianalüüs viidi läbi, et uurida seost PhG kogusisalduse ja antioksüdandi aktiivsuse vahel, määrates Pearsoni korrelatsioonikoefitsiendi (r), kasutades IBM SPPS Statistics (versioon 19; International Business Machines Corp., New York, NY, USA). IC50 väärtused arvutati ka probitanalüüsidega, kasutades SPPS Statistics 19. DPPH vabade radikaalide eemaldamise määr ja PhG kogusisaldus joonistati, kasutades programmi OriginPro 8.5.1 (Origin Lab Corp., Northampton, MA, USA). Osalise vähimruutude (PLS) regressioonide määramiseks kasutati tarkvara SIMCA-P plus (versioon 13.0, Umetrics, Umea, Rootsi).

4. Järeldused

Kultiveeritud C. deserticola, laialdaselt kasutatava taimse ravimi eri osade omadusi uuriti. Esiteks iseloomulikud sõrmejäljed kuuest erinevast kultiveeritud osastCistanchedeserticolaproovid genereeriti ja hinnati SES-i ja kuue markerühendi sisalduse samaaegse analüüsi abil. Teiseks näitas kuue peamise ühendi kvantifitseerimine UPLC abil nende ühendite jaotusomadusi erinevates osades. Tulemusi ei saanud aga otseselt seostada taimravi tegevusega. Seetõttu oli vaja paremat meetodit kultiveeritud C. deserticola proovide kvaliteedi ja aktiivsuse samaaegseks määramiseks. Esiteks kasutasime kultiveeritud taimede antioksüdantse toime hindamiseks võrguühenduseta DPPH radikaali püüdmise testi.Cistanchedeserticolaekstraktid ja leidis kõrgeima aktiivsuse varreekstraktis. Lisaks kasutati kultiveeritud antioksüdantide skriinimiseks ja hindamiseks UPLC-PDA-d, mis olid ühendatud kolonnieelse DPPH testiga.Cistanchedeserticolavarre ekstraktid. See meetod ei andnud mitte ainult rohkem keemilist teavet, vaid andis ka teavet antioksüdantide kohta, mida saaks kasutada taimsete ravimite tuvastamiseks ja hindamiseks. Teiseks eraldati ja identifitseeriti tüveekstraktide aktiivsed komponendid UPLC-PAD-QTOF/MS abil, et kinnitada asendusrühmade arvu ja positsiooni ning parandada struktuurianalüüsi täpsust. Lõpuks määrati kindlaks seos keemiliste komponentide ja in vitro antioksüdantse aktiivsuse vahel, mis kinnitati PLS-mudeli abil.

Kokkuvõtteks oleme esimest korda võrrelnud kultiveeritud C. deserticola proovide erinevate osade keemilise koostise profiile ja antioksüdantset aktiivsust. Need leiud pakkusid erilist huvi, kuna kuni käesoleva uuringuni ei ole teatatud PhG-ühendite jaotumisest, PhG-sisaldusest ja nende panusest kultiveeritud C. deserticola proovide erinevate osade antioksüdantide toimimisse. Lisaks loodi esmakordselt PLS-analüüs, et anda esialgne arusaam kuue PhG individuaalsest panusest antioksüdantsesse aktiivsusse. Selline lähenemine võib anda meile uusi teadmisi kultiveeritud C. deserticola igakülgse kvaliteedi hindamise kohta. Lõpuks on käesolev töö esimene aruanne tugevast korrelatsioonist DPPH radikaalide eemaldamise aktiivsuse ja kultiveeritud C. deserticola (r=0.92) erinevate osade PhG kogusisalduse vahel. Nende erinevate osade hulgas leiti, et varred on rikkad PhG-de poolest ja neil on tugev antioksüdantne toime. Eelkõige sisaldasid kultiveeritud C. deserticola äravisatud osad bioaktiivseid ühendeid ja neid võib kasutada alternatiivse toidulisandina. Loodame, et tulemused annavad kasulikku teavet kultiveeritud C. deserticola edaspidiseks kasutamiseks. Meie teadmiste kohaselt on see esimene aruanne looduslike antioksüdantide kiire tuvastamise ja kvantifitseerimise kohta kultiveeritud taime erinevates osades.Cistanchedeserticolakasutades UPLC-PAD-QTOF/MS, võrguühenduseta DPPH meetodit ja UPLC-PAD-pre-columnDPPH meetodit. Meie tulemuste kohaselt võib siin välja töötatud meetod pakkuda võimsa ja sisuka vahendi komplekssete taimsete ravimite igakülgseks kvaliteedikontrolliks. Meie riigis saaks algatuse "Üks vöö, üks tee" juhtimisel seda traditsioonilist tervisele kasulikku põllukultuuri kasutada uute ülemaailmsete rakendustega toodete kujundamiseks.

Tänuavaldused

Autorid tunnustavad tänulikult Hiina Meditsiiniteaduste Akadeemia (CAMS) Meditsiiniteaduste Innovatsioonifondi (CIFMS) (nr 2016-I2M-1-012) ja Hiina riikliku loodusteaduste fondi (nr. 31570344).

Autori kaastööd

Yue Shi ja Xiaoming Wang osalesid uurimistöö kavandamisel. Katsete läbiviimise eest vastutasid Xiaoming Wang, Jinfang Wang, Huanyu Guan, Rong Xu, Xiaomei Luo, Meifeng Su, Xiaoyan Chang, Wenting Tan ja Jun Chen. Yue Shi, Xiaoming Wang ja Jinfang Wang viisid läbi andmete analüüsi. Yue Shi ja Xiaoming Wang aitasid kaasa käsikirja kirjutamisele ja toimetamisele. Huvide konflikt: autorid ei deklareeri huvide konflikti.

Viited

Wang, T.; Zhang, X.; Xie, W. Cistanche deserticola YC Ma, "Desert Ginseng": ülevaade. Olen. J. Chin. Med. 2012, 40, 1123–1141. [CrossRef] [PubMed]

2. Li, Z.; Lin, H.; Gu, L.; Gao, J.; Tzeng, C. Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): Traditsioonilise Hiina meditsiini üks parimaid farmatseutilisi kingitusi. Esiosa. Pharmacol. 2016, 7, 41. [CrossRef] [PubMed]

3. Gu, C.; Yang, X.; Huang, L. Cistanches Herba: neurofarmakoloogia ülevaade. Esiosa. Pharmacol. 2016, 7, 289. [CrossRef] [PubMed]

4. Xu, X.; Zhang, Z.; Wang, W.; Yao, H.; Ma, X. Tsistanosiidi A terapeutiline toime munasarjade eemaldamisega hiirte luude ainevahetusele. Molecules 2017, 22, 197. [CrossRef] [PubMed]

5. Wang, D.; Wang, H.; Gu, L. Traditsioonilise hiina ürdi Cistanche antidepressandid ja kognitiivset arengut parandavad tegevused. Tõenditepõhine täiendus. Altern. Med. 2017, 2017, 1.–9. [CrossRef] [PubMed]

6. Xue, Z.; Yang, B. Fenüületanoidglükosiidid: nende fütokeemia, farmakoloogilise aktiivsuse ja farmakokineetika uurimise edusammud. Molecules 2016, 21, 991. [CrossRef] [PubMed]

7. Jiang, Y.; Tu, P. Cistanche liikide keemiliste koostisosade analüüs. J. Chromatogr. A 2009, 1216, 1970–1979. [CrossRef] [PubMed]

8. Xiong, Q.; Kadota, S.; Tani, T. Cistanche deserticola fenüületanoidide antioksüdatiivne toime. Biol. Pharm. Bull. 1996, 19, 1580–1585. [CrossRef] [PubMed]

9. Ma, Z.; Yang, Z.; Li, P.; Li, C. Kaheksa fenüületanoidglükosiidi samaaegne määramine perekonna Cistanche erinevates liikides kõrgsurvevedelikkromatograafia abil. J. Liq. Chromatogr. Relat. Technol. 2008, 31, 2838–2850. [CrossRef]

10. Jiang, Y.; Li, SP; Wang, YT; Chen, XJ; Tu, PF Herba Cistanchesi diferentseerimine sõrmejälje järgi kõrgjõudlusega vedelikkromatograafia-dioodide massiivituvastus-massispektromeetriaga. J. Chromatogr. 2009, 1216, 2156–2162. [CrossRef] [PubMed]

11. Lu, D.; Zhang, J.; Yang, Z.; Liu, H.; Li, S.; Wu, B.; Ma, Z. Cistanches Herba kvantitatiivne analüüs, kasutades kõrgjõudlusega vedelikkromatograafiat koos dioodide massiivi tuvastamise ja kõrglahutusega massispektromeetria kombineerituna kemomeetriliste meetoditega. J. Sep. Sci. 2013, 36, 1945–1952. [CrossRef] [PubMed]

12. Laul, Q.; Li, J.; Liu, X.; Zhang, Y.; Guo, L.; Jiang, Y.; Song, Y.; Tu, P. Survevedeliku ekstraheerimise, turbulentse voolu kromatograafia ja kõrgjõudlusega vedelikkromatograafia kodune sidekriips, Cistanche deserticola juhtumiuuringuna. J. Chromatogr. 2016, 1438, 189–197. [CrossRef] [PubMed]

13. Han, L.; Boakye-yiadom, M.; Liu, E.; Zhang, Y.; Li, W. Struktuurne iseloomustus ja identifitseerimine fenüületanoidglükosiidid alates Cistanches deserticola YC Ma poolt UHPLC/ESI-QTOF-MS/MS. Phytochem. Anal. 2012, 23, 668–676. [CrossRef] [PubMed]

14. Zheng, S.; Jiang, X.; Wu, L.; Wang, Z.; Huang, L. Cistanches Herba keemiline ja geneetiline diskrimineerimine UPLC-QTOF/MS ja DNA vöötkoodi alusel. PLoS ONE 2014, 9, 1–11. [CrossRef] [PubMed]

15. Song, Y.; Song, Q.; Li, J.; Zhang, N.; Zhao, Y.; Liu, X.; Jiang, Y.; Tu, P. Integreeritud strateegia kummeli kvantitatiivseks eristamiseks Cistanche deserticola ja C. tubulosa vahel, kasutades kõrgjõudlusega vedelikkromatograafia-hübriid kolmekordse kvadrupool-lineaarse ioonlõksu massispektromeetriat. J. Chromatogr. 2016, 1429, 238–247. [CrossRef] [PubMed]

16. Niu, Y.; Yin, L.; Luo, S.; Dong, J.; Wang, H.; Hashi, Y.; Chen, S. Flos Chrysanthemi antioksüdantide identifitseerimine HPLC-DAD-ESI/MSN ja HPLC abil, ühendatud kolonnijärgse derivatiseerimissüsteemiga. Phytochem. Anal. 2013, 24, 59–68. [CrossRef] [PubMed]

17. Chen, LX; Hu, DJ; Lam, SC; Ge, L.; Wu, D.; Zhao, J.; pikk, ZR; Yang, WJ; fänn, B.; Li, SP Lumikrüsanteemi (Coreopsis tinctoria Nutt.) erinevate osade antioksüdantide aktiivsuse võrdlus ja nende looduslike antioksüdantide tuvastamine, kasutades kõrgjõudlusega vedelikkromatograafiat koos dioodirea tuvastamise ja massispektromeetriaga ning 2,20 -asinobis({) {4}}etüülbenstiasoliinsulfoonhappe) diammooniumsoolapõhine analüüs. J. Chromatogr. 2016, 1428, 134–142. [PubMed]

18. Fu, M.; Xu, Y.; Chen, Y.; Wu, J.; Yu, Y.; Zou, B.; An, K.; Xiao, G. Bioaktiivsete flavonoidide ja antioksüdantse aktiivsuse hindamine Pericarpium Citri Reticulate'is (Citrus reticulata "Chachi") säilitamise ajal. Food Chem. 2017, 230, 649–656. [CrossRef] [PubMed]

19. Zhang, X.; Xu, M.; Zhang, J.; Wu, L.; Liu, J.; Si, J. Antioksüdantsete komponentide tuvastamine ja hindamine viie Chimonanthusi liigi lilledes. Ind. Crop. Prod. 2017, 102, 164–172. [CrossRef]

20. Yang, J.; Hu, J.; Rena, K.; Ka, S.; Du, N. Fenüületanoidglükosiidide struktuuri-aktiivsuse suhted Cistanche salsa taimedes antioksüdatiivse toime kohta. J. Chin. Med. Mater. 2009, 32, 1067–1069.

21. Tema, W.; Fang, T.; Tu, P. Ehhinakosiidi farmakoloogilise toime uurimise edusammud. Hiina J. Chin. Mater. Med. 2009, 34, 476–479.

22. Li, Y.; Chen, J.; Li, Y.; Li, P. Lonicera liikide õienuppudes esinevate vabade radikaalide püüdjate identifitseerimine ja kvantifitseerimine veebipõhise HPLC-DPPH testiga koos elektropihustusionisatsiooni kvadrupooliga lennuaja tandem-massispektromeetriaga. Biomed. Chromatogr. 2012, 26, 449–457. [CrossRef] [PubMed]

23. Yao, H.; Chen, Y.; Shi, P.; Hu, J.; Li, S.; Huang, L.; Lin, J.; Lin, X. Livistona Chinensis R. Br viljades leiduvate antioksüdantide sõelumine ja kvantitatiivne analüüs, kasutades HPLC-DAD-ESI MS koos kolonnieelse DPPH analüüsiga. Food Chem. 2012, 135, 2802–2807. [CrossRef] [PubMed]

24. Wang, Y.; Hao, H.; Wang, G.; Tu, P.; Jiang, Y.; Liang, Y.; Dai, L.; Yang, H.; Lai, L.; Zheng, C.; et al. Tüüpilise fenüületanoidglükosiidi ehhinakosiidi järjestikuste metaboliitide tuvastamise meetod, mis põhineb vedelikkromatograafia-ioonilõksu-aja lennu massispektromeetria analüüsil. Talanta 2009, 80, 572–580. [CrossRef] [PubMed]

25. Qi, M.; Xiong, A.; Li, P.; Yang, Q.; Yang, L.; Wang, Z. Akteosiidi ja selle peamiste metaboliitide identifitseerimine roti uriinis ülijõudlusega vedelikkromatograafiaga kombineerituna elektropihustusionisatsiooni kvadrupooliga lennuaja tandem-massispektromeetriaga. J. Chromatogr. B 2013, 940, 77–85. [CrossRef] [PubMed]

26. Li, W.; Päike, X.; Song, H.; Ding, J.; Bai, J.; Chen, Q. HPLC/Q-TOF-MS-põhine imendunud koostisosade ja nende metaboliitide tuvastamine roti seerumis ja uriinis pärast Cistanche deserticola ekstrakti suukaudset manustamist. J. Food Sci. 2015, 80, H2079–H2087. [CrossRef] [PubMed]

27. Li, Y.; Zhou, G.; Xing, S.; Xing, S.; Tu, P.; Li, X. Inimese soolebakterite poolt toodetud ehhinakosiidide metaboliitide tuvastamine Ultraperformance Liquid Chromatography-Quadrupole Time-of-Flight Mass Spectrometery abil. J. Agric. Toit. Chem. 2015, 63, 6764–6771. [CrossRef] [PubMed]