2. osa Cistanche Deserticola fenüületanosiidi mõju amüloidvalgu ekspressioonile APP / PS1 transgeensete hiirte hipokampuses

2. osa Cistanche tõhusad koostisosad: kogu terapeutiline toimefenüületanoidglükosiididja Alzheimeri tõve akteosiidid

1. osa vaatamiseks klõpsake siin

Lisateabe saamiseks võtke ühendust ali.ma@wecistanche.com

Klõpsake Cistanche DHT Alzheimeri tõve jaoks

4 . Järeldus

Alzheimeri tõbiesineb peamiselt kesknärvisüsteemis ja seda põhjustavad mitmed tegurid. Seni on selle patogenees veel ebaselge, kuid uurimistöö tuum on endiselt A ümber. Peamiste peptiididena, mida APP eritab ajus, ei saa A 1-42 ja A 1-40 ebanormaalne ladestumine otseselt põhjustada neuronite degeneratsiooni. Etioloogia vaatenurgast on A 1-42 toodetud lahustuvad oligomeerid ADDL-id, mis põhjustavad aju Neuronaalse degeneratsiooni tegelik põhjus. Kuid nende kahe valgu ekspressiooni uurimine võib kajastada ka AD ajukahjustuste ulatust reaalajas, näidata kaudselt lahustuvate oligomeersete ADDL-ide ekspressiooni ja seejärel dünaamiliselt jälgida neuronite kahjustusi ajus allikast, pakkudes viide haiguste ennetamiseks ja raviks. Seda silmas pidades on A 1-42 ja A 1-40 muutunud AD patogeneesi uurimise peamisteks sihtmärkideks. Hipokampus on aju peamine osa, mis hindab õppimis- ja mäluvõimet. Selle neuronite kahjustus on AD kognitiivse düsfunktsiooni peamine põhjus. Hipokampuse CA1 piirkond on AD patoloogilise kahjustuse üks peamisi osi. Katse selles osas kasutatakse HE-d. Värvimismeetod näitas, et normaalse rühma hipokampuse CA1 piirkonna neuronid paiknesid korralikult ja tihedalt, jaotusid ühtlasemalt ja neil olid selged kihid. Mudelrühmas ilmnes hiire hipokampuse CA1 piirkonnas degeneratiivsed muutused, nagu vigastusest tingitud neuronaalsete rakkude apoptoos. Pärast Cistanche fenetüülalkoholi glükosiidirühmade erinevate annuste sekkumist muutus hipokampuse CA1 piirkonna rakumorfoloogia

Kõigil on erinev paranemisaste, mis viitab selleleCistanche fenüületanoidglükosiididvõib omada neuroneid kaitsvat ja nende apoptoosi inhibeerivat toimet, kuid kuna HE värvimine ei ole spetsiifiline raku apoptoosi ja neuronite kadumise suhtes, on siiski vaja hilisemas etapis sihtida apoptoosispetsiifilisi molekule. Markerite asjakohane tuvastamine.

Testitava koe eeltöötlus on otseselt seotud värvimistulemusega. Katses leidis autor, et kuna transgeensete hiirte hipokampus asub telentsefaloni temporaalsagara sügavas sisemises osas, on see väikese suurusega ja raskesti eraldatav kude. Väike hooletus põhjustab sellele mehaanilisi kahjustusi, nii et patoloogilisi muutusi ei saa tõhusalt jälgida. Samal ajal, kuna geneetiliselt muundatud hiired on kallid ja eksperimentaalne doseerimistsükkel pikk, võib proovide kadu mõjutada uuringute üldist edenemist. Seetõttu, kui hiir lõpetab südame perfusiooni, võetakse kogu aju välja ja fikseeritakse paraformaldehüüdiga, skalpelli tera kasutatakse lõhnasibula eemaldamiseks ning ülejäänud ajukude dehüdreeritakse ja sisestatakse. Viilu paksust kontrollitakse 3–5 μm juures, et tagada hipokampuse terviklikkus. Tööprotsessi optimeerimise eeldusel paraneb uurimistöö efektiivsus. Western-blot tuvastamisel leidis autor, et A 1-42 ja A 1-40 valkude väikese molekulmassi tõttu ei ole ekspressiooniribasid lihtne bloteerida, mistõttu on vaja nende SDS-i sõeluda. -PAGE geeli kontsentratsioon, elektroforeesi aeg ja ülekandeaeg. Kui eraldusgeeli kontsentratsioon on liiga väike, siis elektroforeesirajad migreeruvad ja valgu aktiveerimine on puudulik; liiga pikk elektroforeesiaeg põhjustab riba nihkumise geelikihist välja; vastav ülekandeaeg muudab Western bloti häguseks, mõjutades sellega primaarset antikeha inkubatsiooni. Ühendage sekundaarsete antikehadega. Seda silmas pidades tehti selles uuringus esialgsed katsed ja lõpuks valiti 15-protsendiline eraldusgeel, tehti elektroforeesi ja viidi 2 tunniks üle membraan, et teha A 1-42 ja A 1-40 jaoks Western blot, et uurida nende ekspressiooni. .

Praegu valkude reguleerimiseks kasutatavate tehniliste meetodite hulgas kasutatakse Western-blot meetodit peamiselt kvantifitseerimiseks, et uurida seotud valkude spetsiifilist ekspressiooni. Immunohistokeemia meetod algab kvalitatiivsest vaatepunktist. Ühest küljest võib see intuitiivsemalt näidata valgu ja antikeha spetsiifilise seondumise astet ning teisest küljest võib see toetada kvantitatiivseid tulemusi. Kuna immunohistokeemia eesmärk on tuvastada valgu ekspressiooni, sidudes antikehi antigeensete saitidega histopatoloogilistel lõikudel, on histopatoloogiliste viilude ettevalmistamine eriti oluline. Sektsioon ei ole lihtne liiga paks olla. Pärast lõigu valmimist tuleb see hoolikalt salvestada, et vältida koeosa väliseid kahjustusi; enne töötlemist tuleks läbi viia piisav deparafineerimine ja aeg ei tohiks olla lühem kui 2 tundi; Valige sidrunhappepuhver, millel on kerged tingimused ja antigeeni juhuslikud kahjustused. Tehke parandus, eemaldage katalaas, paljastage antigeenne koht täielikult ja kohandage esmane antikeha täielikult selle kohaga. Ülaltoodud kaks meetodit kui molekulaarbioloogias tavaliselt kasutatavad tuvastamismeetodid täiendavad üksteist ja pakuvad tehnilist tuge valkude reguleerimise uurimisel.

Selles uuringus kasutati HE ja muid meetodeid, et uurida hipokampuse kahjustusi ja A-ga seotud valkude ekspressiooni ajus. Tulemused näitasid, et pärast sekkumistCistanchefenüületanoid , paranes AD mudelhiirte aju hipokampuse CA1 piirkonna rakumorfoloogia erineval määral. A 1-42 ja A 1-40 ekspressioonitasemed olid oluliselt alla reguleeritud. Lisaks leiti, et verbaskosiidi sekkumisrühma kaitsev neuroniefekt oli parem kui kogufenüületanoidglükosiididGrupp. Glükosiidide koguarvCistanche fenüületanoidglükosiididneil on suur potentsiaal parandada AD mudelhiirte ajupiirkonna patoloogilisi muutusi ja avaldada seejärel AD-le antagonistlikku mõju. Konkreetset toimemehhanismi tuleb tulevikus veelgi uurida. See uuring täiendab uurimisandmeid selle mehhanismi kohtaCistancheantagoniseerib AD-d A vaatenurgast ja loob samal ajal uurimisaluse aluse efektiivsete komponentide või aktiivsete monomeeride mehhanismi edasiseks selgitamiseks.CistancheAD vastu hilisemal perioodil.