1. OSA Cistanche Tubulosa (Schenk) Wight ekstrakt suurendab tagajäsemete jõudlust ja nõrgendab müosiini raske ahela IId/IIx ekspressiooni immobiliseeritud hiirtel

Lisateabe saamiseks võtke ühendust:Joanna.jia@wecistanche.com

1Neuromeditsiini teaduse osakond, Loodusmeditsiini Instituut, Toyama Ülikool, 2630 Sugitani, Toyama 930-0194, Jaapan 2Jaapani idamaise meditsiini osakond, meditsiini- ja farmaatsiateaduste kõrgkool, Toyama ülikool, 2630 Sugitani, Toyama {{5 }}, Jaapan

Kirjavahetus tuleks adresseerida Chihiro Tohdale; chihiro@inm.u-toyama.ac.jp

Saabunud 14. juunil 2019; Muudetud 13. septembril 2019; Vastu võetud 17. septembril 2019; Avaldatud 22. oktoobril 2019

Akadeemiline toimetaja: Wen-yi Kang

Autoriõigus © 2019 Yoshiyuki Kimbara et al. See on avatud juurdepääsuga artikkel, mida levitatakse Creative Commonsi omistamislitsentsi alusel, mis lubab piiramatut kasutamist, levitamist ja reprodutseerimist mis tahes kandjatel, eeldusel, et originaalteosele viidatakse õigesti.

Skeletilihaste atroofiat esineb paljude kliiniliste seisundite korral, kuid farmakoloogilist ravi pole veel välja töötatud.Cistanche tubulosa(Schenk) Wight on taimne ravim, mida kasutatakse traditsioonilises Jaapani ja Hiina meditsiinis. Käesolevas uuringus uurisime selle mõjuC. tubulosa ekstrakt(CTE) atroofeerunud lihastel in vivo. Uurisime ka hiirtel tagajäseme kipsi immobiliseerimist ja töötasime välja uudse tüüpi tagajäseme immobiliseeriva kipsi, mis koosnes käsnataolisest teibist ja õhukesest plasttorust. Seda meetodit kasutades immobiliseeriti 3 neljast hiirte rühmast (n 11 igas rühmas) tagajäsemetesse ja neile manustati 13 päeva jooksul CTE-d või kandjat. Neljanda rühma hiirtel, kellele vehiiklit manustati, viidi läbi võltsprotseduur. Järgmisena lõigati välja triitsepsi surae lihased (TS). Et analüüsida uudse valusüsteemi ja CTE manustamise mõju lihaste atroofiale, hindasime TS märgkaalu ja müofibri ristlõikepindala (CSA). Samuti määrasime MyHC IId / IIx ekspressioonitasemed Western blot analüüsiga, kuna nende suurenemine on mittekasutatud lihaste atroofia tunnus, mis viitab aeglasest kiirele müofibri tüübi nihkele. Lisaks viisime läbi kaks tagajäseme jõudluse testi. Uudne valatud immobiliseerimismeetod vähendas märkimisväärselt TS märgkaalu ja müofiberi CSA-d. Sellega kaasnes tagajäsemete funktsiooni halvenemine ja MyHC IId / IIx ekspressiooni suurenemine. CTE manustamine ei muutnud TS märgkaalu ega müofiberi CSA-d; siiski näitas see suundumust tagajäsemete funktsiooni kadumise ja MyHC IId/IIx suurenenud ekspressiooni mahasurumise osas immobiliseeritud hiirtel. Meie uudne tagajäsemete kipsi immobiliseerimismeetod kutsus esile tõhusalt lihaste atroofia. CTE ei mõjutanud lihasmassi, kuid pärssis nihet aeglasest müofibri tüübist kiirele kips-immobiliseeritud hiirtel, leevendades tagajäsemete funktsiooni halvenemist.

Cistanche deserticolal on palju mõjusid, lisateabe saamiseks klõpsake siin

1. Sissejuhatus

Skeletilihaste atroofiaga seotud patofüsioloogiliste seisundite hulka kuuluvad sarkopeenia [1], kahheksia [2] ja glükokortikoididest põhjustatud skeletilihaste atroofia [3]. Skeletilihaste atroofiat põhjustab ka pikaajaline mittekasutamine [4], mille põhjuseks võib olla voodirežiim [5], kipside kasutamine luumurdude või sidemete vigastuste raviks [6] või kosmoselend [7]. Kuna seda seisundit võivad põhjustada mitmesugused haigused, mõjutab see suurt osa elanikkonnast.

Lihaste atroofia raviks on oluline piisav treening ja toitumisteraapia [8]. Lisaks on mõned uuringud teatanud, et farmakoloogilised vastumeetmed, sealhulgas selektiivsed androgeeniretseptori modulaatorid, inimese müostatiini vastased monoklonaalsed antikehad ja selektiivsed greliini retseptori agonistid, on tõhusad [9]; need lähenemisviisid pole aga veel välja kujunenud.

Eespool kirjeldatud lihaste atroofiliste seisunditega kaasneb müofibri tüüpi profiili muutus ja lihasmassi vähenemine. Neuraalse mõju kadumisest ja mehaanilisest tühjenemisest põhjustatud lihaste töövõimetus kutsub esile müofiibri tüüpi aeglasest kiireni muutumise ja müosiini raske ahela (MyHC) isovormi profiili muutuse [10], millest annab märku MyHC IId/IIx ekspressioonitasemete tõus. [11, 12]. Müofiberi tüübi kiirest aeglasesse nihkumise põhjustavad hoopis glükokortikoidide manustamine, kahheksia, sepsis ja muud tegurid [10].

Cistancheon taimne ravim, mis pärinebCistanche deserticolaYC Ma,C. tubulosa(Schenk) Wight või C. salsa (CA Mey) Beck vastavalt Jaapani farmakopöale [13]. Traditsioonilises Jaapani (Kampo) ja Hiina meditsiinis kasutatakse seda "neerupuudulikkuse sündroomi" raviks, mida iseloomustab viljatus, süsteemne lihasnõrkus (eriti selja- ja alajäsemetes) ja luude nõrkus [14, 15]. See sisaldab teadaolevalt erinevaid koostisosi, sealhulgas akteosiidi, ehhinakosiidi ja isoakteosiidi [16]. Selle ürdi ekstrakt või selle keemilised koostisosad on näidanud kardio-, hepato- ja neuroprotektiivset toimet; vananemisvastased, väsimusvastased, vasodilateerivad ja afrodisiaakumid; antioksüdantne ja põletikuvastane toime; ning võime parandada mälu ja õppimist [15, 16]. Sellegipoolest ei ole selle ürdi tõhusust lihaste kurnatuse haiguste ennetamisel või ravimisel kinnitatud. Seetõttu uurisime käesolevas uuringus selle mõjuC. tubulosaekstrakti (CTE) lihaste atroofia raviks.

Sel eesmärgil kasutasime hiirte lihaste atroofia esilekutsumiseks tagajäseme kipsi immobiliseerimist, keskendudes eelkõige kipsis kasutatud materjalidele. Teatatud on mitmesugustest valusüsteemidest, sealhulgas Pariisi valatud kipsist [17], klaaskiust valanditest [18], polüpropüleenist mikrotsentrifuugitorudest [19], puuvillast ja terasvõrgust [20] valmistatud turvaülikonnataolistest seadmetest, proksimaalsest plastpipetist. käsnpolster [21], mitteelastsest sidemelindist ja vinüülkattega terastraadist [22] valmistatud valandid, traadi sisestamine kombineerituna metallplaatidega [23] ja kirurgilise nahaklammerdaja kasutamine [24]. Ideaalne kips peaks olema minimaalselt invasiivne ja mittetraumaatiline, et vältida põletikulisi muutusi, kuna põletik võib esile kutsuda lihaste atroofiat [25]. Lisaks peaks katse viimastes etappides olema võimalik teha kipsiga tagajäsemete jõudluskatseid. Lisaks peaks kipsi olema lihtne käsitseda ilma eriteadmiste või oskusteta; see peaks olema kerge, odav, hõlpsasti ostetav ega vaja pealekandmiseks ja eemaldamiseks spetsiaalseid seadmeid.

Teatatud on erinevatest lihaste kurnatuse loommudelitest. Sageli on kasutatud tagajäsemete mahalaadimist [11, 12], kuid sellel on mitmeid probleeme, sealhulgas saba nekroos, mis võib esile kutsuda süsteemse põletiku [25]; kehavedelike kõrvalekaldumine sabapoolele, mille tagajärjeks on kõrvalekalded tagajäsemete veresoontes [26]; erakordne mikrogravitatsioon tagajäsemele, mis võib tugevalt mõjutada valkude, sealhulgas mitokondriaalsete ensüümide ekspressiooni [27]. Kõik need tegurid võivad mõjutada lihaste kurnatuse kulgu. Erinevad meetodid kutsuvad esile lihaste atroofia, jättes lihased ilma neuronaalsetest sisenditest (näiteks istmikunärvi läbilõike kaudu) [28]; kuna lihased on allutatud terminaalsete neuronite troofilistele teguritele [29], võib see meetod, mis viib ebatavalise peaaegu täieliku denervatsiooni seisundini, muuta lihaste atroofia protsessi. Inimese mudelitena saab kasutada loomi, kes on allutatud lihasatroofiat tekitavatele süsteemsetele häiretele, nagu suhkurtõbi [30], neerupuudulikkus [31], kortikosteroidide manustamine [32] ja vananemine või kiirenenud vananemine [33, 34]. haigused; need süsteemsed seisundid võivad aga häirida ka lihaste atroofia protsessi.

Seega valisime lihaste atroofia esilekutsumiseks tagajäsemete kipsi immobilisatsiooni ja püüdsime luua uudse meetodi selle läbiviimiseks hiirtel, mille abil uurisime CTE mõju lihaste atroofiale.

CistancheToidulisandidNeerHaigusjaTugevdabTugevus

2. Materjalid ja meetodid

2.1. Taimne materjal ja ekstraheerimine.

CTE osteti ettevõttelt Alps Pharmaceutical Industry Co., Ltd. (Hida, Gifu, Jaapan).

C. tubulosa lihavad varred koguti Hiina Rahvavabariigist Shinjang Uyghur Aptonom Rayonist. Kokku 193 kg C. tubulosa segapulbrit kasteti 1883 l 30-protsendilisse etanooli. Segu kuumutati tagasijooksul 2 tundi 55–64 kraadi juures. Ekstrakti saagis oli 7,2 protsenti ja see sisaldas 3,36 protsenti akteosiidi ja 12,72 protsenti ehhinakosiidi.

2.2. Hiired.

Täiskasvanud ddY (12 nädala vanused) isashiiri (Japan SLC, Shizuoka, Jaapan) hoiti eraldi plastpuurides ja neid hoiti 12-h valguse/pimeduse tsüklis reguleeritava temperatuuriga (25 ± 2 kraadi) vivaariumis. Kõikidele loomadele võimaldati ad libitum juurdepääs veele ja toidule (Labo MR stock; Nosan Corporation, Yokohama, Kanagawa, Jaapan).

Kõik loomkatsed ja -protokollid viidi läbi vastavalt Toyama ülikooli Sugitani ülikoolilinnaku laboriloomade hooldamise ja kasutamise juhistele. Loomkatsete heakskiidunumber on A2016INM-3. Tehti kõik jõupingutused kasutatud loomade arvu minimeerimiseks.

2.3. Tagajäseme lihaste atroofia esilekutsumine ja CTE manustamine.

Hiired jagati 4 rühma (n 11 rühma kohta): 2. päeval anesteseeriti kõik hiired ja nende karvad eemaldati depilatsioonikreemiga (Epilat cream; Kracie, Tokyo, Jaapan) reitelt kuni pahkluuni. Järgmisena immobiliseeriti 3 neljast valatud (pluss) rühmast vastavalt järgmisele protseduurile, nagu on näidatud joonistel 1(a)–1(g):

1. samm. Lõika EPDM-i vahtkummist tihenduslint (Cemedine Corporation, Tokyo, Jaapan) 12 8 25 mm ribaks (joonis 1(a)).

2. samm. Hoidke tagajäseme pahkluu jalatalla asendis ja mässige see väga õrnalt pahkluu liigeses tihenduslindiga (joonis 1(b)).

3. samm. Lõigake pehme PVC isolatsioonikate TIC-22 (Nichifu Corporation, Osaka, Jaapan) ja katke tihenduslindi mansett. Kasutage nende nakkumiseks kahepoolset teipi (PRO SELF käepäraselt lõigatud kahepoolne teip J-1300; Nitoms Inc., Tokyo, Jaapan) (joonis 1(c)).

Samm 4. Koguge korgi lõigatud otsad kokku; lõigake veekindel suure jõudlusega kleeplint (power tape; Asahipen Corporation, Osaka, Jaapan) u. 4 48 mm suurus ja fikseerige kokkutõmbunud otsad (joonis 1(d)).

5. samm. Pange väike tükk (umbes 5 30 mm) alumiiniumfooliumteipi (AL-30; Nichiban Corporation, Tokyo, Jaapan) korgi ülemise otsa esiküljele (joonis 1 (e)).

Samm 6. Lõika plastiklint (vinüülist elektriisolatsioonilint nr 21; Nitto Denko Corporation, Osaka, Jaapan) u. 19 × 40 mm ja keerake kork kinni (joonis 1(f)).

Etapp 7. Tehke sama protseduur kontralateraalse tagajäseme puhul (joonis 1(g)).

Käesolevas uuringus kasutatud immobiliseerimisperiood oli 13 päeva ja kips vahetati välja, kui ilmnes üks või mitu järgmistest seisunditest: tugev pedaali turse, tagajäsemete nekroos, rasked nahahaavandid, kipsi lõdvenemine hävimise tõttu või kipsi nihestus kipsist. pahkluu. Ülejäänud rühmas viidi läbi ainult depilatsioon (võltsprotseduur) ja vehiikulit (füsioloogilist soolalahust) manustati 13 päeva jooksul alates depilatsioonile järgnevast päevast (2. päev). Kolmest kipsi (pluss) rühmast manustati 2-le CTE-d (50 ja 100 mg/kg/päevas; kiibi (pluss)/CTE-50 rühm ja kiibi (pluss)/CTE-100 rühm, ja ühele manustati vehiiklit (valatud (pluss)/kandjarühm), samuti alates 2. päevast. CTE lahustati füsioloogilises soolalahuses ja manustati iga päev suukaudse sondiga 13 päeva jooksul.

2.4. Tagajäseme funktsiooni ja tagajäseme lihaste tugevuse hindamine.

14. päeval anesteseeriti kipsi (pluss) rühma hiired pärast CTE manustamist uuesti ja kips eemaldati. Järgmisel päeval (15. päeval) testiti kõiki hiiri tagajäsemete funktsiooni ja lihaste tugevuse suhtes, kasutades kahte järgmist testi:

2.4.1. Kõnnikiiruse mõõtmine.

15 mm laiust ruudukujulist puidust platvormi hoiti horisontaalselt maapinnast umbes 50 cm kaugusel. Seejärel asetati hiir platvormile ja looma platvormi läbimisel hinnati kõnnikiirust, registreerides stopperi abil käsitsi 50 cm läbimise aja. Eelnevalt oli iga hiir platvormiga harjunud, läbides selle kaks korda treeningu käigus.

2.4.2. Jalavea test.

Tagajäseme lihaste tugevuse hindamiseks viisime läbi "jalgade vea testi", mille käigus iga hiir asetati uuesti platvormile ja tabelistati tagajäsemete libisemiste arv platvormilt. See test on staatilise varraste testi modifitseeritud versioon, kus õhuvardad kinnitatakse G-klambri abil ja hiired pannakse neid läbima [35]. Jalavõrke testimine viidi läbi kolm korda ja registreeriti kolme seansi keskmine kõndimiste arv. Seansside vahel oli puhkepaus vähemalt 15 minutit.

2.5. Triceps Surae lihaste histoloogilised ja morfomeetrilised analüüsid.

Pärast tagajäsemete funktsiooni hindamist anesteseeriti hiired sügavalt ja eutanaati füsioloogilise soolalahuse perfusiooniga. Järgmisena lõigati tagajäsemete mõlemalt küljelt välja triitsepsi lihased (TS). vasaku tagajäseme proovid fikseeriti 4-protsendilises paraformaldehüüdis PBS-i lahuses 24 tunniks, seejärel kanti üle 30-protsendilisse sahharoosilahusesse PBS-is ja inkubeeriti külmkaitseks ja krüosekteerimiseks. Pärast seda lõigati krüostaadi (Leica 3050S; Leica Systems, Nußloch, Saksamaa) abil iga lihase kõhu keskosast piki väiketelge 12- μm paksused lõigud. Seitse kuni kümme järjestikust sektsiooni paigaldati triipkattega klaasslaididele (MAS-GP Type A, Matsunami Glass Industry, Osaka, Jaapan), kuivatati kohe fööniga, säilitati 30 kraadi juures ja värviti hematoksüliin-eosiini värvimisega (HE värvimine). , ScyTek Laboratories, Logan, Utah, Ameerika Ühendriigid). Iga looma kohta valiti välja üks esinduslik sektsioon, milles iga müofibri lühiteljeline viil oli selgelt nähtav, ja selle ristlõikepindala (CSA) mõõdeti pildi J abil (National Institutes of Health, Bethesda, Maryland, Ameerika Ühendriigid). .

2.6. Western Blotting.

Kogu valk parempoolsest TS-st ekstraheeriti järgmise meetodiga. Parempoolne TS peenestati kääridega ja külmutati kohe vedelas lämmastikus, säilitati 30 kraadi juures ja hiljem homogeniseeriti koelüsaadi saamiseks. Sulatatud lihaseid inkubeeriti jääkülmas 30 minutit 2 ml M-PER imetajavalgu ekstrakti lahuses (Pierce Biotechnology, Rockford, Illinois, USA) ja seejärel homogeniseeriti. Seejärel tsentrifuugiti homogenaate 4 kraadi ja 4000 g juures 10 minutit ning supernatandid koguti.

10 ug koguvalku igas lihaslüsaadis laaditi ja eraldati naatriumdodetsüülsulfaat-polüakrüülamiidi geelelektroforeesiga (SDS-PAGE), millele järgnes elektroülekanne nitrotselluloosmembraanile (0,2 μm, #). 1620112, Bio-Rad Laboratories, Hercules, California, Ameerika Ühendriigid). Mittespetsiifiline seondumine blokeeriti 5% rasvavaba kuivpiimaga (lõssipulber, 190-12865, FUJIFILM Wako Pure Chemical Industries, Osaka, Jaapan) Tris-puhverdatud soolalahuses, mis sisaldas 0,05% Tween 20 (TBS-T). Seejärel inkubeeriti membraane üleöö 4 kraadi juures primaarse antikehaga, mis oli lahustatud Can Get Signal immuunreaktsiooni tugevdaja lahuses 1 (Toyobo, Osaka, Jaapan). Pärast segamist ja loputamist TBS-T-ga inkubeeriti membraane 1 tund toatemperatuuril mädarõika peroksidaasiga (HRP-) konjugeeritud sekundaarse antikehaga, mis oli lahjendatud Can Get Signal immuunreaktsiooni tugevdaja lahusega 2 (Toyobo, Osaka, Jaapan). Membraanidel olevad signaalid tuvastati elektrokemoluminestsentsi abil, kasutades luminooli. Seejärel viidi läbi densitomeetriline analüüs, kasutades tarkvara CS Analyzer (Atto, Tokyo, Jaapan). Antikehad valiti ja lahjendati järgmiselt: hiire anti-MyHC IId/IIx monoklonaalne antikeha (1:1000, kloon A4.1025, #05-716, Merck Millipore, Burlington, Massachusetts, Ameerika Ühendriigid), hiire anti-GAPDH laadimiskontrolli monoklonaalne antikeha (1: 3500, G041 ABM, Vancouver, Kanada) ja HRP-ga konjugeeritud kitse hiirevastase IgG polüklonaalne sekundaarne antikeha H&L (1: 2000, Abcam, Cambridge, Ühendkuningriik).

2.7. Statistilised analüüsid.

Kõik tulemused on väljendatud keskmisena ± keskmise standardviga (SEM). Rühmadevaheliste võrdluste statistilist olulisust kontrolliti ühesuunalise ANOVA ja post hoc Dunnetti testide või Tukey HSD testiga; Kruskal-Wallise test ja post hoc Dunni testid; või kahesuunaline ANOVA korduvate mõõtmiste ja post hoc Dunnetti testiga. Kõrvalväärtuste välistamiseks kasutati Smirnov-Grubbi testi. Kõigi statistiliste hinnangute puhul peeti statistiliselt oluliseks p väärtusi alla 0,05 ja kõik analüüsid viidi läbi programmiga GraphPad Prism 6 (GraphPad Software, La Jolla, California, Ameerika Ühendriigid).

CistancheToidulisandid vananemisvastased ja tugevdavad jõudu

3. Tulemused

3.1. Loomade tervis ja CTE mõju kehakaalule.

Visuaalselt olid kips-immobiliseeritud hiirte tagajäsemed kõik atroofilised, võrreldes kipsi ( )/kandjarühma hiirte omadega. Kipsi immobiliseerimine tõi uuringufaasi lõpuks kaasa märkimisväärse kehakaalu languse. Seevastu kehamassi muutused ei olnud kipsi ( ) / kandjarühma hiirtel märkimisväärsed. Kahe kipsi (pluss) / CTE rühmas ei ilmnenud olulisi muutusi kehakaalus võrreldes kipsi (pluss) / sõiduki rühmaga (joonis 2).

Immobiliseeritud hiirte tagajäsemete raskeid tüsistusi, nagu nahanekroosi või gangreeni, ei täheldatud ega ebanormaalset käitumist vivaariumis. Kõigil kips-immobiliseeritud hiirtel täheldati siiski kergeid tüsistusi, sealhulgas jala turset, pindmisi nahahaavandeid ja tagajäsemete punetust (joonis 1 (h)). Enamikul juhtudel täheldati ka kipsi lõdvenemist ja nihkumist, mis viis kipsi asendamiseni.

3.2. CTE mõju lihasjõule ja lihaste jõudlusele.

Kipsi (pluss)/sõiduki rühmas esines jalavea testis märkimisväärselt suurenenud tagajäsemete libisemiste arv (joonis 3(a)) ja kõnnikiirus oli oluliselt aeglasem kui kipsi ( )/sõiduki rühmas (joonis 3(b) )).

CTE-ravi põhjustas annusest sõltuva kalduvuse tagajäsemete libisemise vähenemisele. Kipsi (pluss)/CTE-100 rühmas vähendas ravi (p 0.0604) tagajäsemete libisemist võrreldes kipsi (pluss)/sõiduki rühmaga (joonis 3(a)). Mis puudutab kõnnikiirust, siis nii heidete (pluss )/CTE-50 kui ka heidete (pluss )/CTE-100 rühmadel ei esinenud märkimisväärseid erinevusi kõnnikiiruses võrreldes kiibi (pluss)/sõiduki rühmaga. oli kerge, mitteoluline annusest sõltuv suundumus suurema kiiruse poole (joonis 3 (b)).

3.3. TS ja Myofiber CSA märgkaal.

TS-i märgkaal vähenes kipsi immobiliseerimisega märkimisväärselt, võrreldes kipsi ( ) / sõiduki rühmaga (joonis 4 (a)). CTE manustamine ei mõjutanud TS märgkaalu.

Samuti analüüsiti iga rühma keskmist müofiberi CSA-d. Kipsi (pluss) / kandja rühmas leiti müofibri CSA märkimisväärne vähenemine võrreldes kiipide ( ) / kandja rühmaga (joonis 4 (b)). Myofiber CSA klassifitseeriti ja analüüsiti sagedusjaotuse järgi, nagu on näidatud joonisel 4(c). Kõige sagedasem CSA klass näitlejate ( ) / sõidukite rühmas oli suurem kui näitlejate ( pluss ) / sõidukite rühmas; müofibrite protsent 1350- 2250 μm2 CSA klassis oli või kippus olema märkimisväärselt suurem kiibi ( )/sõiduki rühmas kui kiibi ( pluss )/sõiduki rühmas ning vastupidine suundumus ilmnes CSA klassi 0 900 μm2 rühmad (joonis 4(c)). CSA jaotust ei mõjutanud CTE manustamine kahes kiibi (pluss)/CTE rühmas, võrreldes kiipide (pluss)/vehiikuli rühmaga (joonis 4(c)). Tüüpilised müofibri kujutised on näidatud joonisel 4(d).

3.4. CTE mõju MyHC IId/IIx ekspressioonitasemetele TS-is.

Western blotting viidi läbi igast rühmast kuues tüüpilises proovis (joonis 5 (a)). Need proovid valiti selle põhjal, et need saadi loomadelt, kelle jalavea testi tulemuslikkus oli kõige lähedasem nende vastavate rühmade keskmistele väärtustele.

Valatud (pluss)/sõidukirühmas oli MyHC IId/IIx märkimisväärselt suurenenud võrreldes kiipide ( )/sõiduki rühmaga. Seda tõusu pärssis annusest sõltuvalt CTE manustamine. Näitlejate (pluss)/CTE-100 rühmas kaldus MyHC IId/IIx ekspressioon langema, võrreldes näitlejate (pluss)/sõiduki rühmaga (p 0.0810) (joonis 5(b)) . GAPDH ekspressioon, mida kasutati sisekontrollina, ei erinenud rühmade vahel oluliselt (joonis 5 (c)).

Cistanchetubulosal on palju mõjusid