1. OSA Söödava traditsioonilise hiina meditsiini Cistanche Deserticola osteoporoosivastane toime munasarjade eemaldatud rottide luude ainevahetusele RANKL/RANK/TRAF6- vahendatud signaaliradade kaudu

Bo Zhang 1†, Ling-Ling Yang 1†, Shu-Qin Ding 1†, Jing-Jing Liu 1, Yan-Hong Dong 1,

Yan-Ting Li 1, Nan Li 1, Xiao-Jun Zhao 1, Chang-Ling Hu 2, Yiping Jiang 3* ja Xue-Qin Ma 1*

1 Hui etnilise meditsiini moderniseerimise võtmelabor, Haridusministeeriumi farmaatsiaanalüüsi osakond, Ningxia meditsiiniülikooli farmaatsiakool, Yinchuan, Hiina, 2 funktsionaalse toidu ja inimtervise laboratooriumi, koristusjärgsete tehnoloogiate tippkeskus, Põhja-Carolina Teaduslinnak, Põhja-Caroline A&T State University, Greensboro, NC, Ameerika Ühendriigid, 3 farmakognoosia osakond, The Second Military Medical University, Shanghai, Hiina

cistanchesaab ravidaosteoporoos

Arvestades olemasolevate raviainete piiranguid postmenopausaalse osteoporoosi raviks, on endiselt vaja rohkem võimalusi, millel on nii tõhusus kui ka vähem kõrvaltoimeid.Cistanche deserticolaYC Ma on tuntud kui populaarne toniseeriv ravimtaim, mida traditsiooniliselt kasutatakse Aasia maakondade vähemuspiirkondades neerude energiapuuduse, sealhulgas lihasnõrkuse raviks. Tuginedes teooriale, et luus domineerib neerud, kasutati postmenopausaalse osteoporoosi ovariektoomiaga (OVX) roti mudelit, et hinnata ravitoimet.C. deserticolaekstrakti (CDE) luukadu. Nelikümmend kaheksa emast Sprague-Dawley rotti, vanuses umbes 12 nädalat, jaotati juhuslikult kuue rühma, sealhulgas võltsrühm, kellele manustati suukaudselt 0,5 protsenti karboksümetüültselluloosnaatriumi (CMC-Na) (võlts), mis oli positiivne rühm. raviti 1 mg/kg östradioolvaleraadiga (EV), madala, keskmise ja suure annusega rühmad, kellele manustati suukaudselt vastavalt 200, 400 ja 800 mg/kg/päevas CDE-d. Pärast 3 kuud kestnud pidevat sekkumist näitas CDE märkimisväärset osteoporoosivastast toimet, mida tõendab suurenenud luu mineraalne tihedus, paranenud luu mikroarhitektuur; leeliselise fosfataasi aktiivsuse suurenemine; desoksüpüridinoliini, katepsiin K, tartraadiresistentse happefosfataasi ja malondialdehüüdi taseme langus; arvestades, et CDE sekkumine ei mõjutanud OVX rottide keha, emaka ja tupe kaalu. Lisaks täheldati ja selgitati välja näiliselt vastuoluline nähtus kaltsiumi ja fosfori tasemete kohta OVX ja võltsrottide vahel. Mehhaaniliselt alandas CDE oluliselt TRAF6, RANKL, RANK, NF-κB, IKK , NFAT2 taset ning reguleeris üles fosfatidüülinositool3-kinaasi (PI3K), AKT, osteoprotegeriini ja c-Fos ekspressioone. mis tähendas, et CDE võib pärssida RANKL / RANK-indutseeritud allavoolu NF-κB ja PI3K / AKT radade aktivatsiooni ning lõpuks takistada peamiste osteoklastogeensete valkude NFAT2 ja c-Fos aktiivsust. Kõik andmed viitasid sellele, et CDE-l oli potentsiaalne osteoporoosivastane toime ja see mõju oli vähemalt osaliselt seotud RANKL/RANK/TRAF6-vahendatud NF-κB ja PI3K/AKT signaaliülekande ning c- Fos ja NFAT2 tasemed. Seetõttu võib CDE olla kasulik paljutõotav kandidaat menopausijärgse osteoporoosi raviks.

Märksõnad:Cistanche deserticola, antiosteoporootiline, TRAF6, RANKL, RANK

Lisateabe saamiseks võtke ühendust:Joanna.jia@wecistanche.com

Cistanche deserticolal on palju mõjusid, lisateabe saamiseks klõpsake siin

SISSEJUHATUS

Kuna osteoporoosi ei ole peetud normaalse vananemise osaks, on osteoporoosi valdkonnas tehtud suuri edusamme. Tänapäeval on osteoporoos muutunud suureks terviseriskiks, mis puudutab enam kui 200 miljonit elanikkonda üle kogu maailma ning sellega kaasnevad 10 miljardit dollarit kulutatakse igal aastal nende inimeste peale (Ma et al., 2015). Osteoporoosi, sealhulgas menopausijärgset ja seniilset osteoporoosi iseloomustas mikroarhitektuuri halvenemine ja madal luumassi tihedus (BMD), mis oli tingitud tasakaalustamatusest vastavalt osteoblastide vahendatud luu moodustumise ja osteoklastide vahendatud luu resorptsiooni vahel (Kanis et al., 2015). ). Arvestades praeguste ravivõimaluste piiranguid ja sünteetiliste ainete mõningaid soovimatuid kõrvalmõjusid (Ye et al., 2015) osteoporoosi raviks, on vaja alternatiive, millel on nii tõhusus kui ka minimaalsed kõrvalmõjud (Tan et al., 2017). Märkimisväärse täiendava ja alternatiivse raviviisina erinevate vaevuste, sealhulgas menopausijärgse osteoporoosi raviks, hakati järk-järgult tunnustama ja väga õigustatud looduslikke ravimtaimi, eriti traditsioonilisi Hiina ravimeid (Czerwinska ja Melzig, 2018; Ma et al., 2018). Kaks tuhat aastat tagasi,Cistanche deserticolaYC Ma leiti, et see on inimeste tervisele kasulik ja see on registreeritud Hiina klassikalises meditsiiniraamatus Shen Nong Herbal (Anonüümne, 1981). Nüüd on see oluline TCM, mis on ametlikult registreeritud Hiina farmakopöas (Hiina ja farmakopöa, 2015) ja ka kuulsa toonilise ravimtaimena, mida on sajandeid kasutatud Aasia maakondades, sealhulgas Hiinas ja Jaapanis (Wong et al., 2006). .C. deserticolaleiti, et sellel on soodne ohutusprofiil (Liao et al., 2018) ja laialdased meditsiinilised funktsioonid: rahvas kasutati seda laialdaselt erinevate taimsete toitude valmistamisel neerupuudulikkuse, lihasnõrkuse ja nimmepiirkonna nõrkuse raviks. ; tänapäeval on järjest rohkem tähelepanu pööratud selle erinevatele farmakoloogilistele funktsioonidele, sealhulgas põletikuvastasele, väsimusevastasele, kasvajavastasele, antioksüdantsele aktiivsusele, immuunsuse tugevdamisele ja nii edasi (Gu et al., 2016; Fu et al., 2018). See on Hiinas tuntud ka kui "kõrbe ženšenn" selle suurepärase kliinilise meditsiinilise ravitoime tõttu. Nii traditsiooniline kui ka kaasaegne rakendusC. deserticolamuutis selle ürdi populaarseks nii meditsiinis kui ka tervislike toiduainetetööstuses, olles seega välja töötatud riikliku toidu- ja ravimiameti poolt heaks kiidetud meditsiiniliseks ja toitevedelikuks. AntudC. deserticolaSeda kasutati tavaliselt Hiina rahvameditsiinis neerupuudulikkusega tegelemiseks, mis viitas sellele, et seda söödavat ravimtaime võib pidada paljulubavaks alternatiivseks aineks osteoporoosi sekkumiseks, tuginedes teooriale, et luu domineerib neerudes (Wang et al., 2016). Avaldatud andmed on tõestanud C. deserticola ekstraktide osteoporoosivastast toimet nii in vivo kui ka in vitro (Liang et al., 2011; Li jt, 2012; Liang et al., 2013; Xu jt, 2017; Song et al., 2018) ja mitmed isoleeritud ühendid, sealhulgas ehhinakosiid (Li et al., 2013), akteosiid (Lee et al., 2013) ja tsistanosiid A (Xu et al., 2017), mille kohta on samuti teatatud, et see töötleb antioksüdante. -osteoporootilised tegevused; ja teistel ühenditel, nagu 2'-atsetüüllakteosiid, kinnitati, et neil on antioksüdant, põletikuvastane, neuroprotektiivne, hepatoprotektiivne, immuunsüsteemi tugevdav (Li et al., 2016) ja vananemisvastane potentsiaal (Peng et al., 2016). Praeguseks on sellest leitud kümneid bioaktiivseid fenüületanoidglükosiideTistanche ürt(Wang et al., 2012), ehhinakosiid ja akteosiid on peamised ühendid, mis eksisteerivad enamikus Cistanche liikides, mille sisaldus oli 1,83–41,49 ja 0,27–8,28 mg/kg. , vastavalt; samas kui teiste fenüületanoidglükosiidide, sealhulgas 2'-atsetüüllakteosiid, 6'-atsetüüllakteosiid, tsistanosiid A, tsistanosiid C ja isoakteosiid, oli 1,56–3,16 mg/g, 0,49–1,66 mg/kg, 1,41–1{{ 29}},11 mg/kg, 0,33–2,24 mg/kg ja 0,08–5.{32}} mg/kg (Dong et al., 2018). Eespool avaldatud andmete põhjal leidsime, et nende aluseks olevad osteoporoosivastased molekulaarsed mehhanismidC. deserticolaeriti jäi ebaselgeks ülesvoolu signalisatsioon; ja ühend ise ei kujuta endast erinevat tüüpi komponentide sünergiat sisaldava ürdi toimet; lisaks olid signaaliradade konkreetsed eesmärgid erinevate komponentide vahel täiesti erinevad. Praeguse töö eesmärk on uurida võimalikku kaitsvat toimetC. deserticolaovariektoomiaga (OVX) rottide vastu in vivo, rõhuasetusega kasvaja nekroosifaktori retseptoriga seotud faktori 6 (TRAF6), tuumafaktori kappa B ligandi (RANKL) retseptori aktivaatori, RANK ekspressioonide ja RANKL/RANK/TRAF{{3} } indutseeritud tuumafaktori kappa B (NF-κB) ja fosfoinositiidi 3- kinaasi (PI3K) / proteiinkinaasi (AKT) signaalid. Luu remodelleerimine, sealhulgas rekonstrueerimine ja parandamine, on keerukas protsess, mida juhib tasakaal osteoblastilise luu moodustumise ja osteoklastiliste luude resorptsiooni vahel ning suurenenud luu resorptsioon, mis on peamiselt põhjustatud suurenenud osteoklastogeneesist, põhjustas tavaliselt osteoporoosi, isegi luumurde. Enamikku rakusignaale, hormoone ja kasvufaktoreid, mis olid osteoklastide diferentseerumise ja funktsiooni jaoks olulised, kontrollis RANK ja selle kaks ligandit, RANKL ja osteoprotegeriin (OPG) (Lacey et al., 1998). Ja hiljutised leiud avastasid veelgi, et TRAF6 oli RANKL / RANK-i käivitatud signalisatsioonikaskaadide peamine regulatiivne tegur (Tan et al., 2017). TRAF6 värbamisel seostus RANKL oma retseptoriga RANK ja seejärel käivitati allavoolu signaaliülekandekaskaadid, sealhulgas NF-κB ja PI3K/AKT, seejärel c-Fos peamised osteoklastogeensed valgud ja aktiveeritud T-rakkude tuumafaktor c2 (NFAT2) ( Takayanagi, 2007) reguleeriti üles ja lõpuks alustati osteoklastide diferentseerumist. Käesolevas uuringus uuritakse ja arutatakse CDE osteoporoosivastast mehhanismi RANKL/RANK/TRAF{19}vahendatud luu resorptsioonil.

MATERJALID JA MEETODID

Loomad, rakud, antikehad ja reaktiivid

Emased täiskasvanud Sprague-Dawley rotid (Ningxia Medical University, Yinchuan, Hiina); RAW264.7 rakud (Zhong Qiao Xin Zhou Biotechnology Co., Ltd., Shanghai, Hiina); makrofaagide kolooniaid stimuleeriv faktor (M-CSF) ja RANKL (PerroTech, Inc. USA); östradioolvaleraat [östradioolvaleraat (EV), Delpharm Lille SAS, Pariis, Prantsusmaa]; katepsiin K (CK) ELISA komplekt (BioVision, Ameerika); desoksüpüridinoliini (DPD) ja luu gla-valgu (BGP) ristsidemete ELISA komplektid (Xinyu Biological Engineering Co., Ltd, Shanghai, Hiina); malondialdehüüdi (MDA), glutatiooni (GSH) ja superoksiiddismutaasi (SOD) reaktiivide komplektid (Jianchen Biological Engineering, Nanjing, Hiina); penitsilliin ja streptomütsiin (Gibco, USA); polüvinülideenfluoriidi (PVDF) membraan (Millipore Life Sciences, USA); primaarsed antikehad, sealhulgas GAPDH (18AF0401), -aktiin (17AV0411), IκB kinaas (IKK ) (AD01134589), TRAF6 (2), RANKL (GR3193842-5), RANK (AA02113656), NFkBIA (AHK6), 3PI22 (AHK0) AC09021266), OPG (AG06292776), c-Fos (AG12059411), AKT (AF05173234), NFAT2 (AO11015648) ja sekundaarsed antikehad (mädarõika peroksidaasiga konjugeeritud kitse anti-küüliku anti-ZIO-globuliini (G5GB, immunoglobuliini) , Hiina); Dulbecco modifitseeritud kotka sööde (DMEM), bitsinhoniinhappe valgu kvantimise analüüsi komplekt, veise loote seerum (FBS) ja Dulbecco fosfaatpuhverdatud soolalahus (PBS) osteti ettevõttest Hylcone (Logan, UT, USA); ehhinakosiid [kõrgefektiivne vedelikkromatograafia (HPLC) 98 protsenti või rohkem, 11167-200503, riiklikud toidu- ja ravimikontrolli instituutid, Hiina]; akteosiid (HPLC 98 protsenti või suurem, AB0497, ALFA, Hiina); isoakteosiid (HPLC 98 protsenti või suurem, AB17021202, ALFA, Hiina); 2'-atsetüülakteosiid (HPLC 98 protsenti või suurem, PRF7081243, Chengdu Pu Rui Fa Technology, Co., Ltd. Hiina); tsistanosiid A, tsistanosiid C ja 6'-atsetüülakteosiid (HPLC suurem kui 95 protsenti või sellega võrdne, isoleeritud ja puhastatud meie laboris) (Xu et al., 2017).

Taimsed materjalid ja ettevalmistused

Kuivatatud varredC. deserticolaYC Ma osteti 2. 015. septembril Ningxia provintsist Yongningi maakonnast, taimede korjamise konkreetsed koordinaadid olid (106.026597, 38.262816). Rohu tuvastas prof Ling Dong (Ningxia Meditsiiniülikooli farmakognoosia osakond), farmatseutilise analüüsi herbaariumis oli saadaval vautšeri näidis (#20150901). Kokku 10,0 kg kuivatatud ja pulbristatudC. deserticolaekstraheeriti kuuma tagasijooksu meetodil, üksikasjalik protseduur oli järgmine: lahusti oli 75 protsenti etanooli, suheC. deserticolamaterjali ja lahusti vahekord 1:8, tagasijooksuaeg on kestnud 2 tundi ja materjale keedeti püstjahutiga kolm korda; seejärel segati kõik filtraadid kokku ja kontsentreeriti alandatud rõhul, saades 6,5 kgC. deserticolaetanooliekstraktid (CDE). Loomkatses kasutati CDE peatamiseks {{0}},5 protsenti karboksümetüültselluloosnaatriumi (CMC-Na) ning suukaudselt manustatavaks annuseks määrati 200, 400 ja 800 mg/kg/päevas, mahuga 1 ml/100 g kehamassi kohta iga looma kohta; Western blot analüüsi jaoks kasutati CDE lahustamiseks dimetüülsulfoksiidi ja lahjendati seejärel DMEM-ga, et saada lõppkontsentratsiooniks 0,01, 0.{11}} mg/ml; HPLC analüüsi jaoks kasutati CDE lahustamiseks metanooli, seejärel filtreeriti ja lahjendati algse liikuva faasiga, et saada õige kontsentratsioon.

Suure jõudlusega vedelikkromatograafia analüüsCistanche deserticola ekstrakt

CDE peamised keemilised koostisosad tuvastati HPLC abil koos vastavate võrdlusainetega. Kromatograafia tingimused määrati järgmiselt: Agilent 1220 RP-HPLC instrument C18 kolonniga (4,6 id × 250 mm; 5 μm), gradientelueerimise mobiilne faas, mis sisaldas peamiselt vett ja kasutati atsetonitriili. hästi eraldatud piikide saamiseks: lahusti A (0,5 protsenti äädikhapet sisaldav vesi) ja B (atsetonitriil): 0–4 min, 85–83 protsenti A; 4–10 min, 83–80 protsenti A; 10–30 min, 80–75 protsenti A; 30–40 min, 75–70 protsenti A. Proovi süstimismaht oli 5 ul, temperatuuri reguleeriti 30 kraadi juures ja UV-tuvastus viidi läbi 333 nm juures (Dong et al., 2018). Vastava piigi tuvastamiseks kasutati võrdlusaineid, sealhulgas ehhinakosiid, akteosiid, isoakteosiid, tsistanosiid A, tsistanosiid C, 2'-atsetüülakteosiid ja 6'-atsetüülakteosiid.

cistanchesaabapoptoosivastane toime

Loomkatsed

Loomkatsete puhul viidi kõik protseduurid läbi rangelt kooskõlas Ningxia Meditsiiniülikooli (NXMU{0}}) institutsionaalse loomade hooldamise ja kasutamise komitee juhendi poolt heaks kiidetud protokolliga. Saadi nelikümmend kaheksa täiskasvanud emast Sprague-Dawley rotti, kes kaalusid umbes 237 ± 25 g (Ningxia Medical University, Yinchuan, Hiina) ja neid hoiti 1 nädal standardse graanulidieedi ja kraaniveega keskkonnasäästlikult kontrollitud tingimustes. Seejärel tehti igale rotile kas anesteesia (kloraalhüdraat, 100 mg/kg, ip), võltsitud munasarjade eemaldamine (võlts) või kaks munasarja eemaldati ja jagati seejärel juhuslikult viide rühma: mudelrühmale (OVX) manustati suukaudselt 0,5 protsenti CMC-Na; positiivne rühm (EV) 1 mg/kg/päevas östradioolvaleraati; madala (CDEL), mõõduka (CDEM) ja kõrge (CDEH) annustega rühmad, vastavalt 200, 400 ja 800 mg/kg/päevas CDE-d. Katsed on kestnud 12 nädalat; iga roti kehamassi mõõdeti kord kaks korda nädalas ja manustamisannust kohandati vastavalt. Pärast sekkumise viimast päeva koguti 24-tunnine uriin, seerum, reieluu, sääreluu ja emakas ning säilitati -80 kraadi juures edasiseks erinevateks analüüsideks.

Biokeemilised parameetrid

Seerumi SOD, GSH, MDA, katepsiin K, BGP ja uriini DPD tasemed määrati vastavate reaktiivide komplektidega, samal ajal kui tartraadiresistentse happelise fosfataasi (TRAP) aktiivsust hinnati vastavalt viitele (Jiao et al., 2009). Aluselise fosfataasi (ALP) aktiivsust ning Ca ja P taset hinnati automaatse analüsaatoriga (Ciba-Corning 550, USA).

Luu mineraaltiheduse ja mikrokompuutertomograafia analüüs

Iga roti parema reieluu luu mineraalse tiheduse (BMD, g/cm2) hindamiseks kasutati kahe energiaga röntgenikiirguse absorptiomeetria aparaati (Lunar, USA), kusjuures skaneerimisrežiim määrati väikeseks loomaks. Seejärel kasutati sama reieluu trabekulaarse luu mikroarhitektuuri 3D-kujutise hindamiseks mikro-CT skanneri aparatuuri (GE, Ameerika) abil, huvipakkuv piirkond (ROI) valiti, määrates samad koordinaadid luu kasvuplaadile. iga proovi reieluu, mikroarhitektuuri parameetrid, sealhulgas luu mineraalide sisaldus (BMC), koe mineraalide sisaldus (TMC), koe mineraaltihedus (TMD), trabekulaarne eraldumine (Tb. Sp), trabekulaarne arv (Tb. N) ja trabekulaarne paksus ( Tb. Th) saadi ROI-d analüüsides.

Western blot määramine

Osteoklaste indutseerimiseks kasutati RAW 264.7 rakke, millele oli lisatud MCSF (25 ng/ml) ja RANKL (20 ng/ml) (Yang et al., 2019). Pärast 6-päevast kestnud stimuleerimist töödeldi küpsenud osteoklastide rakke, mis tuvastati TRAP aktiivsuse suhtes, 48 ​​tundi CDE-ga või ilma (vastavalt 0,01, 0,1 ja 1 mg/ml), seejärel rakud lüüsiti lüüsipuhvriga ja supernatandid tsentrifuugiti ja eraldati 10% naatriumdodetsüülsulfaat-polüakrüülamiidi geelelektroforeesiga ja kanti üle PVDF membraanidele. Membraan blokeeriti 5-protsendilise rasvavaba piimaga ümbritseval temperatuuril 1 tund ja inkubeeriti seejärel TRAF6 (1:400), RANKL-i (1:400), RANK-i (1:400), IKK-i (1:400) vastaste primaarsete antikehadega. ), NFkBIA (1:400), OPG (1:400), PI3K (1:400), AKT (1:400), c-Fos (1:400), NFAT2 (1:400), -aktiin ja GAPDH (1:1,000). Samad membraanid eemaldati ja sondeeriti uuesti vastavate antikehadega, mille lõpuks tuvastas Image Lab tarkvara. Kõiki katseid korrati kolm korda, sisekontrollina kasutati aktiini või GAPDH-d.

Statistiline analüüs

Meie katsete andmeid, mida kirjeldati kui keskmine ± SD, analüüsiti ühesuunalise dispersioonanalüüsi abil, millele järgnes Dennetti test (SPSS 22.0 tarkvara, SPSS, USA), p < {{3} },05 loeti statistiliselt oluliseks.

cistanchetuntud ka kuikõrbŽenšenn

TULEMUSED Peamised keemilised koostisosadCistanches deserticola

Ekstrakt Kasutades vastavaid võrdlusaineid, seitset peamiselt fenüületanoidglükosiidide ühendit, sealhulgas ehhinakosiidi,tsistanosiidA, akteosiid, isoakteosiid,tsistanosiidC,2'-atsetüülakteosiid,ja 6'-atsetüülakteosiididentifitseeriti selles ekstraktis, nende vastavad kromatograafia piigid ja struktuurid on näidatud joonisel 1.

MõjudCistanches deserticolaEkstrakt keha, emaka ja tupe kaaludele

Algses keskmises kehakaalus enne operatsiooni olulist erinevust ei olnud. Kuid 3 kuud pärast munasarjade eemaldamise operatsiooni suurenes OVX-i mudelirühma rottide kehamass märkimisväärselt, 35,7 protsenti, samas kui emaka ja tupe märgkaal vähenes järsult, vastavalt 91,2 ja 61,8 protsenti, võrreldes võltsitud loomadega. rotid (p < 0,001).="" cde="" annusega="" 200–800="" mg/kg/päevas="" ei="" näidanud="" mingit="" mõju="" nendele="" märgatavalt="" suurenenud="" kehakaalule="" ega="" emaka="" ja="" tupe="" märgatava="" massi="" vähenemisele,="" nagu="" on="" näidatud="" joonisel="" 2.="" täiesti="" erinevalt="" cde-st="" avaldas="" ev="" 1="" mg="" kg="" päevas="" märkimisväärset="" östrogeenset="" toimet,="" millest="" ovx-rottide="" suurenenud="" kehakaalu="" ning="" emaka="" ja="" tupe="" massi="" vähenemist="" vähendas="" ev-lisandiga="">

MõjudCistanches deserticolaEkstrakt luu mineraalse tiheduse ja luu mikroarhitektuuri kohta

Intuitiivselt vähenevat tendentsi täheldati OVX-rühmas, kelle LMT oli {{0}},158 ± 0.016 g/cm2 võrreldes võltsitud rottidega, kelle BMD oli {{10}},180 ± 0,010 g/cm2 (p < 0,001),="" mis="" viitas="" sellele,="" et="" ovx="" mudelirühma="" rottide="" bmd="" vähenes="" pärast="" seda="" umbes="" 12,2="" protsenti.="" 12="" nädalat="" munasarjade="" eemaldamise="" operatsiooni="" võrreldes="" võltsitud="" rottidega.="" nagu="" joonisel="" 3="" on="" näidatud,="" suurenes="" kõigil="" cde-ga="" ravitud="" rottidel="" bmd="" vastavalt="" 15,1="" protsenti="" (p="">< 0,001),="" 8,1="" protsenti="" (p="">< 0,05)="" ja="" 9,2="" protsenti="" (p="">< 0,05),="" võrreldes="" ovx="" mudelirühmaga.="" rottide="" trabekulaarse="" luu="" mikroarhitektuuri="" 3d-kujutis="" ja="" vastavad="" kvantitatiivsed="" tulemused="" on="" näidatud="" joonisel="" 4.="" kooskõlas="" bmd="" tulemustega="" saavutati="" ovx="" mudelrühmas="" trabekulaarse="" pindala="" ilmne="" vähenemine="" võrreldes="" võltsitud="" rottidega.="" kuid="" trabekulaarse="" luu="" halvenemist="" parandas="" osaliselt="" cde="" sekkumine,="" välja="" arvatud="" tmd="" ja="" tb.="" th,="" teised="" trabekulaarse="" luu="" parameetrid="" hõlmavad="" bmc,="" tmc="" ja="" tb.="" n="" suurenes="" oluliselt="" ja="" tb.="" sp="" vähenes="" pärast="" cde-ravi="">

MõjudCistanches deserticolaEkstrakt uriini ja seerumi biokeemiliste parameetrite kohta

Kaksteist nädalat pärast munasarjade eemaldamist täheldati OVX mudelirühmas Ca uriiniga eritumise taseme langust, kuid mittestatistilist suundumust, nagu näitas joonis 5, samas kui uriini P tase OVX mudelirühma rottidel langes umbes kolm korda. korda vähem kui võltsrottidel (p < 0.001).="" pärast="" 12-nädalast="" ravi="" cde-ga="" (200–400="" mg/kg/päevas)="" hoiti="" oluliselt="" ära="" seerumi="" ca="" ja="" p="" vähenemine="" (p="">< 0,05)="" ning="" p="" vähenenud="" uriiniga="" eritumise="" tase="" oli="" samuti="" pärsitud="" kõigis="" ravitud="" cde-des.="" rühmad="" (p=""><>

MõjudCistanches deserticolaLuu moodustumise ja resorptsiooni markerite ekstrakt

Mis puutub ALP ja BGP luu moodustumise markeritesse (joonis 6), siis ALP, mitte BGP aktiivsus paranes võltsitud rottidega võrreldes märkimisväärselt kõigis kolmes CDE annuses (200–800 mg/kg/päevas) ravitud rühmas. Mis puudutab TRAP, DPD ja katepsiin K luu resorptsiooni markereid (joonis 7), siis kõigi kolme luu resorptsiooni aktiivsus

markerid suurenesid OVX-mudeli rühma rottidel märkimisväärselt, ligikaudu 20,9–74,8 protsenti, võrreldes võltsitud rottidega; ja eeldatavasti oli CDE-l suur potentsiaal kõigi nende indeksite allasurumisel, millest katepsiin K aktiivsus vähenes 49,9–66,7 protsenti (p < 0.001),="" dpd="" tase="" oli="" vähenes="" 22,9–39,3="" protsenti="" (p="">< 0,01)="" ja="" trap-i="" omadusi="" hoiti="" ära="" vastavalt="" 20,1–27,6="" protsenti="" (p="">< 0,01),="" võrreldes="" ovx="" mudelirühma="">

Cistanches deserticola ekstrakti mõju glutatiooni ja superoksiidi dismutaasi aktiivsusele ning malondialdehüüdi sisaldusele

SOD ja GSH aktiivsuses ei ilmnenud olulisi erinevusi OVX-i ja võltsrühmade vahel pärast 3-kuulist munasarjade eemaldamist, nagu näitas joonis 8, samas kui MDA sisaldus oli OVX-i rottidel ilmselgelt suurenenud.

mudelrühmas 68,2 protsenti võrreldes võltsitud rottidega ning seda suurenenud MDA taset pärsisid märkimisväärselt madalad, mõõdukad ja suured CDE-ga ravitud rühmade annused, kusjuures inhibeerimise protsendid olid 66,1, 44.0 ja 62,8 protsenti. , võrreldes OVX mudelirühma rottidega.

MõjudCistanches deserticolaEkstrakt TRAF6, RANKL, RANK, NFkBIA, IKK, PI3K, AKT, OPG, c-Fos ja NFAT2 valgu ekspressioonitasemete kohta

Nagu jooniselt 9 on näidatud, olid TRAF6, RANKL, RANK, IKK, NFkBIA ja NFAT2 ekspressioonid oluliselt alla reguleeritud, samas kui PI3K, AKT, OPG ja c-Fos tasemed olid pärast CDE-ga töötlemist ilmselgelt ülesreguleeritud, võrreldes võrreldes nendega. kontrollile. Hüpoteesitud mehhanism (joonis 10), mille abil CDE suutis RANKL-i, RANK-i ja TRAF6 tasemeid alla reguleerida ja OPG ekspressiooni üles reguleerida, seega vähenesid RANKL-i seondumiskogused RANK-iga; järelikult pärssiti allavoolu teid, sealhulgas NF-κB signaali, ja stimuleeriti PI3K / AKT-d ning need signaaliülekandekaskaad soodustasid c-Fos-i aktiveerimist ja NFAT2 inhibeerimist ning lõpuks takistati osteoklastilise luu resorptsioon. ARUTELU