Fukaalide 3. osas leiduvate florotaniinide koostisosade ülevaade

Tistanche glükosiid võib samuti suurendada SOD aktiivsust südame- ja maksakudedes ning oluliselt vähendada lipofustsiini ja MDA sisaldust igas koes, eemaldades tõhusalt erinevaid reaktiivseid hapnikuradikaale (OH-, H2O₂ jne) ja kaitstes tekitatud DNA kahjustuste eest. OH-radikaalide poolt. Tsistanche fenüületanoidglükosiididel on tugev vabade radikaalide eemaldamisvõime, suurem redutseerimisvõime kui C-vitamiinil, nad parandavad SOD aktiivsust sperma suspensioonis, vähendavad MDA sisaldust ja omavad teatud kaitset sperma membraani funktsioonile. Tsistanche polüsahhariidid võivad suurendada SOD ja GSH-Px aktiivsust D-galaktoosi poolt põhjustatud eksperimentaalselt vananevate hiirte erütrotsüütides ja kopsukudedes, samuti vähendada MDA ja kollageeni sisaldust kopsudes ja plasmas ning suurendada elastiini sisaldust. hea puhastav toime DPPH-le, pikendab hüpoksia aega vananevatel hiirtel, parandab SOD aktiivsust seerumis ja aeglustab eksperimentaalselt vananevatel hiirtel kopsude füsioloogilist degeneratsiooni Raku morfoloogilise degeneratsiooniga on katsed näidanud, et Cistanche'il on hea antioksüdantne võime ja sellel on potentsiaal olla ravim naha vananemishaiguste ennetamiseks ja raviks. Samal ajal on Cistanche ehhinakosiidil märkimisväärne võime eemaldada DPPH vabu radikaale ja see võib eemaldada reaktiivseid hapniku liike ja takistada vabade radikaalide põhjustatud kollageeni lagunemist, samuti on sellel hea parandav toime tümiini vabade radikaalide anioonide kahjustustele.

Klõpsake valikul Kust Cistanche'i osta saab

【Lisateabe saamiseks:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Mis puutub Eckolidesse, siis dibensodioksiini struktuuride olemasolu tõttu saab neid teistest rühmadest eristada nende deprotoneeritud molekulaarsete ioonide järgi, mis on tavaliselt 2 Da võrra madalamad kui teised võrdse DP-ga PT-d iga struktuuris esineva dibensodioksiini motiivi kohta (joonis 5D). Näiteks eckol annab [MH]− m/z 371 juures, samas kui trifokaalne, trifluoretool ja fukofloretool on kõik [MH]− m/z 373 juures. Omakorda kutsub esile kaks dibensodioksiini struktuuri, esitavad [MH]− m/z 741 juures, samas kui nende heksameeri ekvivalendid on [MH]− juures m/z 745. Sama kehtib karmaloolide kohta, mis on sisuliselt dibensodioksiini struktuure sisaldavad hallid [120]. Lõpuks iseloomustab mõningaid furaanitsüklit sisaldavaid PT-sid, nagu fukofuroekkool ja fluorofukofuroekkool, dehüdreeritud-deprotoneeritud molekuliioon, st [MH]−, mis on 18 Da võrra madalam, võrreldes nende furaani mittesisaldavate ekvivalentidega, millel on võrdne DP-d. (nt fucofuroeckol vs phloroeckol struktuurid erinevad ainult furaanitsükli olemasolu/puudumise poolest ja näitavad [MH]− vastavalt m/z 496 ja 478 juures) [120]. Tabelis 3 on toodud MS andmed, mis on kogutud erinevatest uuringutest, mis keskendusid PT-de tuvastamisele Fucalesis.

Kuigi need alused võivad olla kasulikud madala molekulmassiga PT-de mõistliku struktuurse identifitseerimise saavutamiseks, tekivad suured raskused kõrge molekulmassiga oligomeeride ja polümeeride puhul, kuna nende isomerisatsioon suureneb eksponentsiaalselt ning floroglütsinooli paigutuste ja kombinatsioonide paljusid võimalusi on vaevalt võimalik kasutada. selgitatud MS või MS/MS abil. Sellegipoolest võib MS sellistel juhtudel siiski anda väärtuslikku teavet florotaniini segus sisalduvate ühendite DP kohta. Sellega seoses on maatriksi abil laserdesorptsioon/ionisatsiooniaeg lennu MS (MALDI-TOF-MS) sobivam lähenemisviis suuremate oligomeeride analüüsimiseks, kuna see suudab tuvastada molekule, mille m/z on üle ESI-ülemise piiri. PRL. Seda meetodit on kasutatud Sargassum wightii florotanniini fraktsiooni uurimiseks, mis võimaldab kinnitada floroglütsinooli dimeeride, trimeeride ja heksameeride olemasolu [125]. Kõrge eraldusvõimega MS (HRMS) on alternatiivne lähenemisviis, mida saab kasutada ka suure molekulmassiga PT-de analüüsimiseks, tuginedes mitmekordse laenguga ioonidele ja muutustele pluss 1 13C isotoopide mustris. Teisisõnu, kui ühend on kahe- või kolmekordselt laetud, näitab see pluss 1 13C isotoobi mustrit m/z erinevustega vastavalt 0,5 ja 0,33 . Sellel põhimõttel Steevensz et al. [78] suutsid profileerida P. canaliculata, F. spiralis, F. vesiculosus ja A. nodosum PT koostist DP järgi, tuvastades ühendeid molekulmassiga kuni 6000 Da, mis muidu ületaksid massivahemiku. ESI-MS.

Üldiselt võib öelda, et kuigi massispektromeetria võib olla PT-de kvalitatiivseks analüüsiks leidlik meetod ja isegi piisavalt võimas madala molekulmassiga ühendite suhteliselt hea iseloomustamise saavutamiseks, ei suuda see leida piisavalt üksikasju ühendite isomeersete vormide tüübi ja sideme asukoha kohta. kõrgema DPS-iga. Seetõttu, kui eesmärgiks on PT-de struktuuriomaduste täielik väljaselgitamine, on NMR ainus tõhus meetod, mis suudab pakkuda sellise põhjaliku analüüsi jaoks piisavat eraldusvõimet.

5.2.3. NMR

NMR-spektroskoopia hõlmab otsest ja mittepurustavat analüüsi, mis võib olla kasulik mitte ainult PT-de sisule juurdepääsuks, vaid ka PT-de struktuuriliste omaduste täielikuks selgitamiseks. Kui on ette nähtud kvantitatiivsed andmed, integreeritakse kõigi vetikaekstraktides sisalduvate fenoolsete ühendite 1H NMR resonantssignaalid ja võrreldakse neid sobiva sisestandardi signaalidega; need ühendid peavad olema stabiilsed, keemiliselt inertsed, saadaval väga puhtal kujul ja täielikult lahustuvad samades deutereeritud lahustites nagu proov. Üldiselt on autorid kasutanud fenoolsete ühendite ja/või PT-de kvantifitseerimiseks selle tehnika abil erinevaid lähenemisviise ja metoodikaid, sealhulgas Fucale-st saadud proovides.

2009, Parys et al. kirjeldas esimest korda kvantitatiivse 1H NMR (NMR) kasutamist A. nodosum'i florotanniini sisalduse varieeruvuse määramiseks aasta jooksul. Nende töös kasutati sisestandardina trimeeshapet (20 mg trimesiinhapet 0,8 ml deutereeritud metanoolis ja 0,2 ml deuteeriumoksiidis) ning floroglütsinooli abil koostati kalibreerimiskõver. Vaatamata sellele, et qHNMR abil tuvastati suurem PT-de sisaldus võrreldes FC kolorimeetrilise meetodi abil saadutega, järgisid mõlemad meetodid sama hooajaliste variatsioonide suundumust [126]. Oluline on märkida, et erinevalt kolorimeetrilisest testist, mis ei ole spetsiifiline PT-de ega isegi fenoolsete ühendite suhtes, võrreldakse 1H NMR spektrite resonantssignaalide integreerimist qHNMR-is sisestandardi omadega. Nende peamiste erinevuste tõttu ei saa mõlema metoodika vahel täpselt võrrelda [127,128].

Kasutades erinevat lähenemisviisi, kasutasid Stiger-Pouvreau ja kaastöötajad kõrgresolutsiooniga maagilise nurga keerutamist (HR-MAS), et määrata PT-d pruunvetikas Cystoseira tamariscifolia. Selles uuringus kasutati floroglütsinooli (monomeeri) in vivo tuvastamiseks tahkis-TMR-i ja monomeeri kvantifitseerimise hindamiseks kasutati 1H qNMR-i (kasutades sisestandardina trimetüülsilüülpropionaat-d4 (TSP)). Kolmeks prootoniks integreeritud floroglütsinooli singlett δ 6, 02 ppm juures kinnitas selle olemasolu proovis. Selle meetodi täpsust hinnati floroglütsinooli standardlahusega ja tulemused kinnitati võrreldes FC testi tulemustega. Lõppkokkuvõttes väitsid autorid, et esitatud metoodika koosneb uuenduslikust ja kiirest meetodist floroglütsinooli kvantifitseerimiseks, mida saab rakendada kõikide vetikaliikide puhul. qNMR-meetodi ainus piirang seisneb vajaduses omistada vähemalt üks spektrisignaalidest (singlett, dublett jne) ühemõtteliselt ühele ja ainult ühele ühendile [129].

Varem 2010. aastal näitasid samad autorid juba massispektromeetriaga (LC/ESI–MSn) seotud in vivo 1H HR-MAS NMR potentsiaali jälgida viie rannikul esineva perekonna Cystoseira liigi globaalset keemilist profiili. Bretagne'st Prantsusmaal: C. baccata, C. foeniculacea, C. humilis, C. nodi caulis ja C. tamariscifolia [130]. The

nende töö peamine eesmärk oli tuvastada Cystoseira isendeid ja arutada nende taksonoomiat. Tulemused tõestasid esitatud lähenemisviisi tõhusust peamiselt C. nodicaulis'e ja C. tamariscifolia eristamisel, kuna nende spektrid näitasid iseloomulike signaalide olemasolu, võimaldades nende ühemõttelist tuvastamist. Singleti puhul 2,91 ppm esimese ja viimase puhul iseloomustas piik täpselt 6.00 ppm juures liiki ja viitas lihtsa florotanniini võimalikule esinemisele. Foeniculaceat ja C. humilist iseloomustas üldiselt kahe võrdse intensiivsusega dubleti esinemine 7,90 ja 7,36 ppm juures. Kahe signaali absoluutne diskrimineerimine jäi siiski võimatuks. In vivo NMR signaalide sarnasus koos mõlema liigi vähese liigisisese keemilise mitmekesisusega õigustas neid tulemusi. Lõpuks, hoolimata kõige olulisemast keemilisest mitmekesisusest, võimaldasid paljud signaalid C. baccata puhul pidevat eristamist teistest liikidest.

2020. aastal näitasid Walsh ja kaastöötajad [131] kahe puhastatud florotaniini ekstrakti antimikroobset potentsiaali, mis pärinevad kahest pruunvetikatest A. nodosum ja F. serratus. Selles töös võimaldas 1H ja 13C NMR analüüs mitte ainult kogu fenoolsete ühendite kvantitatiivset ja kvalitatiivset hindamist, vaid ka juurdepääsu erinevustele mõlema liigi puhastatud fenoolsete ekstraktide seoste profiilis. FC testi puhul leiti A. nodosum'is oluliselt kõrgem üldfenoolsete ühendite tase kui F. serratus'es ja tulemused kinnitati FC testiga. Lisaks näitasid nii qNMR kui ka FC testiga saavutatud tulemused erinevusi iga kuu kogutud proovide ja mõlema metoodika vahel.

PT-de struktuuri selgitamiseks kasutasid Glombitza ja tema rühm esmakordselt 1H ja 13C NMR analüüsi 70ndatel, kui nad tuvastasid floroglütsinooli erinevates pruunvetikaliikides. Nende derivaatidega seotud spektrite keerukus võimaldas tuvastada ainult väiksemaid polüfenoolstruktuure. Seega oli 1974. aastal esimene kord, kui C. tamariscifolia 80-protsendilise etanooliekstrakti põhjal selgitati bifuhalooli ja difloretooli keemilisi struktuure [132].

Sellest ajast peale on TMR-i abil välja selgitatud enam kui sada PT-struktuuri [133]. Selleks töödeldakse ekstrakte tavaliselt suurte PT-de sadestamiseks heksaani või petrooleetriga eeltöötlemisetapis. Lisaks sellele, et vältida PT-de ebastabiilsust, hõlbustada NMR-analüüsi ja muuta nende ühendite polaarsust, atsetüülitakse need sageli äädikhappe anhüdriidi ja püridiini abil, võimaldades seeläbi nende normaalfaasi ränidioksiidi kromatograafiat [119]. Seda tüüpi ühendite 1H NMR spektrites tuleb märkida kahte aspekti: aromaatsete prootonite resonants on vahemikus δ 6.0 ja 7,5 ppm ning atsetüülrühmad paistavad üksikute piikidena vahemikus 8 2 kuni 3 ppm . See on kasulik tööriist vabade hüdroksürühmade arvu määramiseks algsetes kaitsmata fenoolides. Kahte tüüpi aromaatsete tsüklite süsteeme, mis võivad esineda, on kujutatud joonisel 6. Kahe tüüpi prootonite (Ha ja Hb) iseloomulik keemiline keskkond muudab 1H NMR-is vaadeldud signaalide paljusust ja ka nende integratsiooni.

Koos 1H NMR-spektroskoopiaga on puhastatud PT-de struktuuride selgitamiseks kasutatud 13C ja HSQC ning HMBC NMR spektreid, sealhulgas Fucalesis. Heterotuumakorrelatsioon-NMR-spektroskoopiline lähenemine on kasulik PT-de klassi tuvastamiseks proovimaatriksist (monomeer, kütus, kloroetüül, täis, fukofloroetool jne) [134]. PT-de iseloomulikud 13C-NMR signaalid on kokku võetud tabelis 4. Iseloomulike keemiliste nihete korral võimaldavad teatud tüüpi süsiniku süsiniku resonants koos nende intensiivsusega omistada teatud signaale teatud PT klassidele, eriti fluoretoolidele ja hallidele. .

Aastal 1997 Glombitza et al. [135] kirjeldas 33 PT eraldamist ja iseloomustamist pruunvetikast Cystophora torulosa. Tuvastati erinevad PT klassid, sealhulgas floretoolid ja hallid ning fukofloretoolid ja hüdroksüfukofluoretoolid (näited joonisel 7). Lisaks tuvastati ja iseloomustati viimasega seoses seitse uut hüdroksüfukofluoretooli, mis kandsid täiendavaid hüdroksüülrühmi (NMR ja MS). Nagu eelnevalt mainitud, kirjeldasid autorid eraldatud PT derivaatide oksüdatsiooni vältimiseks ja lipofiilsuse suurendamiseks nende eraldamist atsetaatidena [82].

Koch et al. on näidanud ka 1H ja 13C NMR kasutamist suuremate fuhaloolatsetaatide iseloomustamiseks B. bifurcate'is [136]. HSQC ja HMBC (2D) NMR spektroskoopilisi tehnikaid on kasutanud Cérantola et al. näidata fukooli ja fukofloretooli struktuuride olemasolu Fucus spiralise ekstraktides [137]. Sama lähenemisviisi kasutati Bretagne'is rohkesti levinud Halidrys siliquosa puhul. 1D- ja 2D-TMR-i ning MS-analüüsi kasutamine võimaldas tuvastada nelja fenooli derivaati: trifuhaloole ja tetrafuhaloole ning esmakordselt ka difloretoole ja trifluoretoole [125]. Tabelis 5 on kokku võetud ülalmainitud uuringud, milles 1H ja 13C NMR aitasid kaasa Fucalesesse kuuluvatest vetikatest ekstraheeritud PT-de struktuuri selgitamisele.

【Lisateabe saamiseks:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】