Cistanche valgendava kreemi optimaalne retsepti ja kvaliteedi hindamine

Abstraktne:

Eesmärk: valida parim retseptCistanche valgendav kreemja määrata kindlaks selle kvaliteedistandard.

Meetodid: Orthogonalexi periment loodi parima retsepti väljasõelumiseks; füüsikalised ja keemilised omadusedCistanche valgendav kreemtestiti,tsistanche valgendavas kreemisidentifitseeriti kvalitatiivselt TLC meetodil ja Verbascum glükosiidid valgendavas kreemis määrati HPLC abil.

Tulemused: ortogonaalsete katsetega määrati valgendava kreemi optimaalseks retseptiks {{0}},3 g stearüülalkoholi, 1.0g Tween60, 0,25 gSpan60 ja 0,09 g karbomeeri U30. TLC laigudCistanche valgendav kreemon selged ja konkreetsed. Verbaskosiidi kontsentratsioon vahemikus 6,25–200 ug/ml näitas head lineaarset seost piigi pindalaga.

Verbaskosiidi keskmine sisaldus inCistancheoli vastavalt {{0}}.142mg/g,0.143mg/g,0.146mg/g.

Järeldus: ettevalmistatudCistanche valgendav kreemon hea välimusega ja on aluseks multidele mõistlik; sisu määramise meetod on lihtne ja teostatav, hea reprodutseeritavusega, suure täpsusega ja usaldusväärsete tulemustega. Seda saab kasutada verbaskosiidi sisalduse määramiseksCistanche valgendav kreem.

Märksõnad:Cistanche; valgendav kreem; Retsepti optimeerimine; Valmistamismeetod; Kvaliteedi hindamine

Nahavärv on seotud erinevate bioloogiliste pigmentide olemasoluga, mis aitavad kaitsta päikesekiirguse eest, kuid kõige olulisem pigment nahavärvi määramisel on melaniin [1]. Melaniini toodetakse melanotsüütides, millel on lüsosomaalne organell, mida nimetatakse melanosoomideks, mis sünteesivad ja säilitavad melaniini [2]. Melaniini sünteesi käivitab L-türosiin ja türosinaasi katalüüsil tekib melaniin mitmete keeruliste protsesside nagu dopakroom, dopakinoon ja dopa kaudu. Nende hulgas on 5,6-dihüdroksüindooli (5,6-dihüdroksüindool, DHI) ja 5,6-dihüdroksüindooli-2-karboksüülhappe (5,{{11}) sisalduse suhe. }dihüdroksüindool-2-karboksüülhape, DHICA) määrab nahavärvi muutused mustast pruuniks [3-4].

TASUTA NÄIDISE saamiseks klõpsake siinCistanche valgendav kreem.

Praegu on enamus turul olevatest valgendavatest kosmeetikavahenditest suunatud türosinaasile ja türosinaasi aktiivsust kontrollides saab valgendava efekti saavutamiseks vähendada melaniini tootmist [5]. Tavaliselt kasutatavad nahka valgendavad lisandid hõlmavad kojhapet ja selle derivaate, puuviljahapet, C-vitamiini jne, kuid kõigil neil lisanditel on mõned kõrvaltoimed.

Cistancheon traditsiooniline Hiina meditsiin, mida on iidsetest aegadest kasutatud peamiselt meeste haiguste raviks. Selle peamine toimeaine on fenüületanoid [6]. Kaasaegses uurimistöösCistanche ekstrakthõlmab seksuaalfunktsiooni parandamist, vananemisvastast võitlust, oksüdatsioonivastast toimet [7], õppimis- ja mäluvõime parandamist, neuroprotektsiooni, immuunregulatsiooni, väsimuse ja puudulikkuse vastu võitlemist. Vere ja maksa kaitse ning muud funktsioonid.

Lisaks on traditsiooniliste hiina meditsiini ekstraktide kui tootelisandite eelisteks hea nahaafiinsus, ohutus ja töökindlus võrreldes tänapäevaste valgendustoodete keemiliste lisanditega. Eksperimendid on seda näidanudfenetülosiidvõib türosinaasi aktiivsust oluliselt alandada [8]. Seetõttu kasutati selles uuringus valgendava kreemi valmistamisel peamise koostisosana Cistanche deserticola't ning selle retsepti optimeeriti ja selle kvaliteeti hinnati, et anda võrdlusalus Cistanche deserticola valgendavate koostisosade väljatöötamiseks.

1 materjalCistanche valgendav kreem

1.1 Eksperimentaalsed reaktiivid

stearüülalkohol; glütserüülmonostearaat; PEG100 stearaat; tsetearüülalkohol; Shea või; sünteetiline skvalaan; propüleenglükool; Tween 60; Laius 60; Glütseriin; Carbomer U30 (kõik ostetud ettevõttest Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.); Cistanche deserticola (pärineb Sise-Mongooliast, mille autentseks tunnistas Liaoningi traditsioonilise hiina meditsiini ülikooli professor Xu Liang); Verbasin Standard (partii number: 111530-201007, China Food and Drug Testing Research)

haigla); kloroform, n-butanool, metanool, sipelghape, atsetonitriil, väävelhape, veevaba etanool, fosforhape on kõik analüütilised reaktiivid ja vesi on puhas vesi.

1.2 Katseseadmed

FA1004 elektrooniline tasakaal (Shanghai Yueping Scientific Instrument Co., Ltd.); DZKW-S-4 Elektrikütte konstantse temperatuuriga veevann (Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. Medical Instrument No. 5 Factory); Ultrahelipuhasti SG3300H (Shanghai Guante Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); Silikoonist kokkupandav plaat G (partii number: 20110905, Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.); C18 kromatograafiline kolonn (Yuexu Technology Co., Ltd.).

2 Meetodid ja järeldusedCistanche valgendav kreem

2.1 Valgendava kreemi valmistamine

2.1.1 Valgendava kreemi valem: stearüülalkohol 0,3 g, glütseroolmonostearaat 0,5 g, PEG10{{10}} stearaat 0,25 g, tsetearüülalkohol 0,1 g, sheavõi 0,75g, sünteetiline skvalaan 1,25g, Span 600,25g,

Karbomeer U300.09 g, Cistanche deserticola ekstrakt 0,5 g, glütseriin 2,0 g, propüleenglükool 1,25 g, Tween 601,0 g, trietanoolamiin 0,07 g.

2.1.2 Valgendava kreemi meetod

Stearüülalkohol, glütserüülmonostearaat, PEG100 stearaat, tsetearüülalkohol, sheavõi, sünteetiline skvalaan ja Span 60 kuumutati ja sulatati veevannis 80 kraadi juures ning segati ühtlaselt õlina. Faas, karbomeer U30 lisati veega ja pandi 80-kraadisele veevannile, et kuumutada, et paisuda ja lahustuda, lisada Cistanche deserticola ekstrakt, seejärel lisada glütseriin, propüleenglükool, Tween 60 ja segada hästi vesifaasina, lisada õlifaas. veefaasi, segage pidevalt ja emulgeerige ning lisage trietanoolamiin, segage ühtlaselt ja laske jahtuda, et saada Cistanche valgenduskreem.

2.2 Eelistatud valgendava kreemi retsept

Cistanche deserticola valgenduskreemi optimaalne retsept kontrolliti ortogonaalse testiga. Vastavalt valgendava kreemi peenusele, läikele, viskoossusele, niisutusastmele ja muudele aspektidele viidi läbi põhjalik skoor, võeti keskmine väärtus ja vastavalt tulemustele valiti valgendava kreemi optimaalne retsept.

Valgendava kreemi optimaalne retsept on A2B1C2D3, nimelt stearüülalkohol 0.3g, Tween 601.0g, Span 00.25g,

Karbomeer U300,09g. Tabelist 3 saab kindlaks teha, et valgendavale kreemile kõige enam mõju avaldav tegur on karbomeer U30, millel on oluline erinevus.

2.3 Füüsikaliste ja keemiliste omaduste testimine

Cistanche valgendava kreemi omadusi ja peenust jälgides määrati selle pH ning viidi läbi tsentrifuugimise, madala temperatuuri ja stabiilsuse testid. Asetage ettevalmistatud proov 1 päevaks -20 kraadini ja jälgige, kas seda on

Kihistumise ja osakeste sadenemise nähtus [9]. Seda pandi pidevalt 30 päevaks toatemperatuurile, et jälgida, kas see on stabiilne, kas esineb delaminatsiooni, värvimuutusi ja muid nähtusi. "2.1.2" meetodil valmistatud valgendav kreem Cistanche on pruun

Hea välimusega värvikreem, peen ja sile, nahale kandes ei jää rasvaseks. Mõõdetud pH oli (6,90±0,05), mis vastas Hiina Rahvavabariigi farmakopöa nõuetele ning pärast tsentrifuugimist ei ilmnenud proovides õli-vee kihistumist. Pärast 1 päevaks -20 kraadisesse ja 30 päevaks toatemperatuuri hoidmist ei tekkinud kihistumist ega värvimuutust. Cistanche deserticola valgendav kreem näitas head stabiilsust.

2.4 TLC identifitseerimine

Kaalutakse täpselt 1 g Cistanche deserticola ekstrakti, lisatakse sobiv kogus metanooli, töödeldakse ultrahelipuhastis 15 minutit, filtreeritakse, vesi aurustatakse peaaegu kuivaks ja lahustatakse metanoolis, et saada ravimi võrdluslahus. Võtke 0,5 g tühja maatriksit ja Cistanche valgendavat kreemi, lisage metanool, lahustage ultraheliga, tsentrifuugige ja võtke supernatant vastavalt negatiivse lahusena ja testlahusena.

Pipeteerige 10 μl igat ülaltoodud 3 lahust, suunake need samale õhukesekihilisele plaadile ja rakendage ilmutusainet vahekorras kloroform 6: n-butanool 1: metanool 2: sipelghape 2 [10], võtke see. välja ja kuivatage, piserdage 10% etanoolsulfaadiga, kuumutades 105 kraadi juures, kuni laigud on selged. Jooniselt 1 on näha, et Cistanche valgendava kreemi TLC laigud on selged ja spetsiifilised ning tühja maatriksil pole häireid.

2.5 Verbaskosiidi sisalduse määramine

2.5.1 Kromatograafilised tingimused [11] Kromatograafia kolonn on C18 kolonn (250 mm × 4,6 mm, 5 μm); liikuv faas: atsetonitriil-0,1-protsendiline fosforhappe lahus (20:80); voolukiirus: 1,0 ml/min; tuvastamise lainepikkus: 330nm; kolonni temperatuur:

30 kraadi; süstimismaht: 20 μL.

2.5.2 Lahuse valmistamine

①Katselahuse valmistamine. Kaaluge täpselt 0,5 g Cistanche deserticolast valmistatud valgendavat kreemi, lisage sobiv kogus metanooli, lahustage ultraheliga 15 minutit (40 kHz) ja filtreerige see 10 ml mõõtekolvis konstantse mahuni. saada testlahus. ②Võrdluslahuse valmistamine. 4,13 mg Verbasini võrdlusainet kaalutakse täpselt, pannakse see 100 ml mõõtekolbi, lahjendatakse 50% metanooliga ja loksutatakse korralikult, et saada võrdlusaine lahus.

③Negatiivne märkus: 1. Kontrollravimaterjal; 2. Tühi maatriks; 3, 4, 5 Cistanche valgendav kreem.

Lahuse valmistamine. Kaaluge täpselt {{0}},5 g valmistatud tühja maatriksit, lisage sobiv kogus metanooli, lahustage ultraheliga ja filtreerige negatiivse lahuse saamiseks mõõtekolvis mahuni 10 ml. Ülaltoodud lahused filtriti läbi 0,45 μm mikropoorse membraani.

2.5.3 Süsteemi kohanemisvõime uurimine

Võetakse vastavalt uuritav aine, võrdlusaine ja negatiivne lahus ning tehakse määramine punktis 2.5.1 esitatud kromatograafiliste tingimuste kohaselt.

Verbaskosiidi piigiaeg uuritavas aines ja võrdlusaines oli sarnane ning negatiivses lahuses piiki ei täheldatud, mis näitab, et spetsiifilisus oli hea ja negatiivne lahus seda ei seganud.

2.5.4 Lineaarsete seoste uurimine

Absorbeerige Verbasidiini võrdlusaine lahus, et valmistada standardlahus kontsentratsiooniga 6,25, 12,5, 25, 50, 100, 200 ug/ml, ja mõõta kromatograafilistes tingimustes punktis "2.5.1", võttes kontsentratsiooniks abstsisstelda ja piigi pindala. vertikaalsete koordinaatidena saadi lineaarse regressiooni võrrand y=28483x pluss 54316 (R2=0.9994), mis näitas, et lineaarne seos verbaskosiidi ja piigi pindala vahel oli hea vahemikus 6,25~ 200 ug/ml.

2.5.5 Täpsuskatse

Joonistage võrdluslahus täpselt ja mõõtke seda vastavalt kromatograafilistele tingimustele punktis "2.5.1", verbaskosiidi piigi pindala RSD on 1,58 protsenti (n=6), mis näitab, et instrumendi täpsus on hea. .

2.5.6 Korratavuse test

Joonistage uuritava proovi lahus täpselt ja mõõtke seda vastavalt kromatograafilistele tingimustele punktis "2.5.1", verbaskosiidi piigi pindala RSD on 1,81 protsenti (n=6), mis näitab, et meetodil on hea korratavus. .

2.5.7 Stabiilsuskatse

Joonistage täpselt katselahus, mida hoiti toatemperatuuril 0, 4, 8, 12, 20 ja 24 tundi, ja mõõtke see. Verbaskosiidi piigi pindala RSD on 1,04 protsenti, mis näitab, et testlahusel on 24 tunni jooksul hea stabiilsus.

2.5.8 Proovi lisamise taastumise test

Tõmmake täpselt 9 osa teadaoleva sisaldusega uuritavat lahust, lisage lahustumiseks sama kogus võrdlusainet Verbasin

vedelik ja mõõta vastavalt kromatograafilistele tingimustele punktis "2.5.1". Iga 0,5 g, vastavalt meetodile "2.5.2 ①" katselahuse valmistamiseks vastavalt "2.5.1" kromatograafilistele tingimustele proovi süstimiseks ja määramiseks.

3 AruteluCistanche valgendav kreem

Kuigi melaniini, türosinaasi ja türosinaasiga seotud valgu-1 (TRP-1) ja türosinaasiga seotud valgu-2 (türosinaasiga seotud valgu-2) tootmises osalevad paljud ensüümid ) , TRP-2) mängib melaniini sünteesis olulist rolli. Täpsemalt, türosinaas mängib melaniini sünteesi katalüüsimisel kiirust piiravat rolli ja on kõige olulisem viis melaniini sünteesi inhibiitorite väljatöötamiseks. On teada, et melanoosi reguleerib rohkem kui 125 erinevat geeni [12]. Need geenid reguleerivad mõningaid olulisi melanotsüütide bioloogilisi funktsioone, nagu rakkude diferentseerumist ja pigmentatsiooni või melanogeneesi reguleerimist. Nende hulgas on Microphthamia transkriptsioonifaktor (MITF) teadaolevate melanotsüütide arengu transkriptsioonifaktorite kõige olulisem liige [13]. MITF reguleerib oma transkriptsiooniprotsessi, seondudes TYR, TRP-1 ja TRP-2 geeniekspressiooni promootorpiirkondadega [14]. Cistanche deserticola fenüületanoid võib vähendada melaniini sisaldust, pärssida oluliselt TYR ja TRP-1 geenide transkriptsioonitasemeid ning alareguleerida TYR, TRP-1 ja TRP-2 valgu ekspressiooni. Lisaks võib Cistanche deserticola fenüülglükosiid inhibeerida ka MITF-i mRNA transkriptsioonitaset ja alandada MITF-i valgu ekspressiooni[15].

Nõudlus valgendava kosmeetika järele Hiinas ja Aasias kasvab aasta-aastalt, kuid enamiku kosmeetikatoodete toimeained sisaldavad tavaliselt kahjulikke koostisosi. minu riik on rikas traditsioonilise Hiina meditsiini ressurssidest ja kõrge turvalisusega. Seetõttu kasutati selles uuringusCistanchetoorainena valgendava kreemi valmistamiseks. Valmistatud valgendav kreem on hea välimusega, õrnade ja siledate, stabiilsete omadustega, nahale määrimisel puudub rasvane tunne ja tugev nahaafiinsus; selle füüsikalisi ja keemilisi omadusi testitakse ning katsetulemused näitavad, et sellel on hea stabiilsus. Ortogonaalsel katsekujundusel on teadusliku meetodi, lihtsa toimimise ja märkimisväärse mõju eelised. Seetõttu kasutati optimaalse retsepti skriinimiseks ortogonaalset testiCistanche valgendav kreem. 600,25g, karbomeer U300,09g. ANOVA määras valgendavale kreemile suurimat mõju avaldavaks teguriks karbomeer U30. Verbaskosiidi sisalduse määramine kõrgefektiivse vedelikkromatograafia abil on lihtne ja teostatav, hea reprodutseeritavusega, suure täpsusega ja usaldusväärsete tulemustega.

If you have any questions, please send us Email at: wallencesuen@wecistanche.com