Kurkumiini uued paljulubavad terapeutilised võimalused ajuhaiguste korralⅡ

3. Kurkumiini terapeutiline toime PD korral

PD on AD järel teine ​​kõige levinum neurodegeneratiivne haigus. 2020. aastal kannatab maailmas PD hinnanguliselt 10 miljonit inimest (https://www.epda.eu.com/, juurdepääs 27. oktoobril 2021) [72]. PD mõjutab valdavalt dopamiini tootvaid neuroneid keskaju substantia nigras, põhjustades tõsiseid motoorseid ja kognitiivseid häireid. Idiopaatilise PD korral hõlmavad patofüsioloogilised mehhanismid ROS-i põhjustatud sünukleiini ja mitokondriaalset hingamishäireid mõjutavat kompleksi I tootmist [73]. Seda iseloomustab ka peamiselt -sünukleiinist koosnevate valguagregaatide kuhjumine valgu lagunemismehhanismide, nagu lüsosomaalse süsteemi, ebaõnnestumise tõttu [74, 75].

Klõpsake Alzheimeri tõve ja Parkinsoni tõve orgaanilise tsitanche jaoks

Enamik olemasolevaid raviviise on ainult sümptomaatilised. See hõlmab dopamiinilisandit, mis ajutiselt kontrollib dopamiinergilise nigrostriaalse süsteemi degeneratsioonist põhjustatud motoorset düsfunktsiooni. Ravimiresistentse PD korral kasutatakse sügavat aju stimulatsiooni (DBS). Oksüdatiivse stressi ennetamiseks ja haiguse progresseerumise vähendamiseks on looduslike antioksüdantide kasutamine endiselt võimalik alternatiivne ravi. Arvestades kurkumiini neuroprotektiivset, neuropõletikuvastast ja antioksüdantset toimet stressist põhjustatud neurodegeneratsiooni vastu, käsitleme siin hiljutisi leide, mis on seotud kurkumiini kasuliku mõjuga PD progresseerumise ja ennetamise vähendamisel [12].

Kuigi PD patogenees on endiselt laialdaselt ebaselge, on välja pakutud mitmeid mehhanisme ja mitmesugused tõendid toetavad mitokondriaalse düsfunktsiooni olulist rolli PD patogeneesis [76]. Hiljutine uuring teatab kurkumiini kaitsvast mõjust mitokondriaalse düsfunktsiooni ja rakusurma vastu siRNA-vahendatud PINK1 PD-i tõkestusmudelis [77]. Teises uuringus kirjeldatakse kurkumiini mõju mitokondriaalsele düsfunktsioonile PD parakvaadi indutseeritud toksilisuse mudelis fibroblastides, mis on saadud LRRK2-mutatsioonpositiivsest PD-st ja tervisekontrollist.

Selle rakumudeli eeltöötlemine kurkumiiniga enne parakvaadiga töötlemist parandas maksimaalset hingamist ja ATP-ga seotud hingamist, ilma et see mõjutaks hingamisvõimet. Pärast parakvaadiravi ei parandanud fibroblastide järeltöötlus kurkumiiniga mitokondriaalset hingamist kolme parameetri osas (maksimaalne hingamine, ATP-ga seotud hingamine ja vaba hingamisvõime), mis viitab kurkumiini ennetavale toimele enne PD tekkimist. 78]. Motawi jt hiljutine uuring. [79] Kurkumiini ja toidulisandite mõju uurimine rotenoonhiire PD mudelile näitas üldist statistiliselt olulist paranemist.

Tõepoolest, kurkumiini manustamine rotenooniga töödeldud hiirtele parandas sünukleiini taset ja vähendas Lewy kehasid. Samuti paranes loomade käitumine ja põletikuliste vahendajate tase vähenes oluliselt kurkumiiniga ravitud hiirtel võrreldes kontrollrühmaga. Nende hulka kuuluvad IL-6, CRP ja Ang II, millel on varem näidatud põletikku soodustavat ja profibrootilist toimet, mis aitavad kaasa elundite funktsiooni järkjärgulisele halvenemisele PD korral [80]. PD-markerite hindamisel leiti kurkumiiniga ravitud hiirel adenosiini A2AR geeni ekspressioonitaseme märkimisväärne langus võrreldes rotenoonirühmaga. Kurkumiiniga töödeldud PD hiiremudelites täheldati veel üht paljutõotavat dopamiini ja serotoniini taseme paranemist.

Lisaks põhjustab ravi kurkumiiniga oksüdatiivse stressi vähenemist PD hiiremudelites [79]. Muud toetavad tõendid näitavad sarnaseid tulemusi rottide PD mudelites, kus rotid reageerisid kurkumiinravile oksüdatiivse stressi ja energeetiliste indeksite osas. Seetõttu nõrgendas kurkumiin PD tõsist mõju rotimudelis ja seda võib vaadelda kui potentsiaalset toidulisandit [81]. Kirjandusest saadud tõendid on näidanud, et autofagia-lüsosoomi raja (ALP) kahjustus mängib PD patogeneesis otsustavat rolli. Hiljutine uuring, mis keskendus kurkumiini mõjule alfa-sünukleiini (S) oligomeerile molekulaarse dünaamika simulatsioonimeetodi abil, näitas, et kurkumiin vähendas S-oligomeeri struktuurset stabiilsust, häirides selle üldisi omadusi.

Lisaks takistas kurkumiin sünukleiini oligomeeride agregatsiooni ja fibrillide moodustumist [82]. Kuna kurkumiin suudab autofaagiat soodustades vähendada valesti volditud sünukleiini, on hiljutised uuringud uurinud selle mõju autofagia regulatsioonile. Seega on PD rakumudeli ravi näidanud mikrotuubulitega seotud valgu 1 kerge ahela 3 (LC3-II) suurenenud ekspressiooni, tuuma transkriptsioonifaktori EB (TFEB) tuumaplasmavalgu määramist ja autofagia- seotud valgu lüsosoomi membraani valk 2 (ALAMP2A).

Selle tulemuseks on autofagia-lüsosoomi sünteesi ja -sünukleiini autofaagilise kliirensi soodustamine [83,84]. TFEB on tuvastatud kui autofagia ja lüsosoomi biogeneesi üks kriitilisi võtmeregulaatoreid [85, 86]. See on tugevdanud hüpoteesi, et TFEB-d võib pidada PD uueks terapeutiliseks sihtmärgiks. Kurkumiini derivaat, nimega E4 (kurkumiini analoog), suutis aktiveerida ja soodustada TFEB translokatsiooni tsütoplasmast tuuma.

Selle translokatsiooniga kaasneb autofagia ja lüsosomaalse biogeneesi stimuleerimine. Mehhaaniliselt aktiveeris ühend E4 TFEB-i AKT-MTORC1 raja inhibeerimise kaudu. Lisaks on PD-rakkude mudelites näidatud, et E4 vähendab sünukleiini taset ja kaitseb MPP pluss (1-metüül-4-fenüülpüridiiniumioon) tsütotoksilisuse eest närvirakkudes. Need paljulubavad andmed, mis näitavad E4 in vitro kaitsvat toimet, nõuavad siiski täiendavaid in vivo eksperimentaalseid katseid, kuna E4 biosaadavus ajus ei ole ikka veel teada. E4 neuroprotektiivset efektiivsust tuleb PD loommudelites täiendavalt uurida [87].

Lisaks soodustas kurkumiini intraperitoneaalne süstimine in vivo LC3-II valgu ekspressiooni ja pärssis P62 ekspressiooni autofagia kasuks. Kurkumiin pärssis sünukleiini ekspressiooni ja dopamiini neuronite apoptoosi MPTP-indutseeritud PD hiiremudelis (kurkumiin 80 mg / kg 14 päeva jooksul) ja parandas hiire liikumishäireid [33]. On näidatud, et sevofluraananesteesia kutsub esile kognitiivse kahjustuse, aktiveerides noorte hiirte hipokampuses autofagia [88]. Huvitaval kombel suutis kurkumiin moduleerida autofagiat annuses 300 mg/kg kuue päeva jooksul ja pärssida sevofluraani poolt indutseeritud hiirte mäluhäireid [89].

Kurkumiini kaitsvat toimet suukaudsel manustamisel uuriti 6-hüdroksüülamiini (6-OHDA) – indutseeritud PD loommudelis. Kurkumiini neuroprotektiivset toimet (200 mg/kg) 2 nädalat enne ja pärast operatsiooni hinnati morfoloogiliste ja käitumuslike analüüsidega. Motoorset funktsiooni hinnati kolm nädalat pärast operatsiooni. Kurkumiin on oluliselt parandanud ebanormaalset motoorset käitumist ja on näidanud, et see kaitseb substantia nigra ja caudate-putamen tuumas vähenenud dopamiinergiliste neuronite eest, nagu näitas türosiinhüdroksülaasi (TH) immunoreaktiivsus.

7-nAChR-selektiivse antagonisti metüüllükakonitiini intraperitoneaalne manustamine muutis need neuroprotektiivsed toimed. See kinnitas 7-nAChR-ide mõju kurkumiini vahendatud mõjudele. Selles uuringus näidati, et kurkumiinil on neuroprotektiivne toime 6-hüdroksüülamiini (6-OHDA) roti PD mudelis 7- nAChR-vahendatud mehhanismi kaudu [90]. Zhang et al. on näidanud, et G2385R-LRRK2 ekspressioon indutseeris inimese neuroblastoomi SH-SY5Y ja hiire primaarsete neuronite neurodegeneratsiooni. See oksüdatiivse stressi poolt vahendatud neurotoksilisus põhjustab apoptootilise raja aktiveerimist.

Kurkumiin, millel on antioksüdantne toime, on märkimisväärselt kaitsnud kombineeritud G2385R-LRRK2-indutseeritud neurodegeneratsiooni eest, nõrgendades mitokondriaalset ROS-i taset, kaspaasi-3/7 aktivatsiooni ja PARP lõhustumist ning vähendades rakulise keskkonnastressori H2O2. (Joonis 2). Need tulemused annavad uue ülevaate G2385R-LRRK{10}}seotud neurodegeneratsiooni mehhanismidest ja kurkumiini potentsiaalsest ravitoimest G2385R-i kandvatel PD patsientidel [91].

Lisaks ülalkirjeldatud kurkumiini-neuroprotektiivsetele mehhanismidele PD vastu võib uus kasvav huvi soolestiku-aju telje vastu PD vastu selgitada kurkumiini neuroprotektiivseid omadusi vaatamata selle piiratud biosaadavusele. Kurkumiin võib mikrobiota-soolestiku telje kaudu toimida kaudselt kesknärvisüsteemile. Keerulist kahesuunalist süsteemi, mis mängib aju tervises olulist rolli, ei mõisteta täielikult. Hiljutised uuringud on näidanud, et kurkumiin taastab soolestiku mikrobioomi düsbioosi. Düsbioosi määratletakse kui stabiilset mikroobikoosluse seisundit, mis funktsionaalselt aitab kaasa haiguse etioloogiale, diagnoosimisele või ravile [92].

Kuid kurkumiini modifikatsioonid bakterite poolt ei moodusta kurkumiini aktiivsemat metaboliiti [93]. See vastastikune koostoime võib säilitada tasakaalustatud füsioloogilisi funktsioone ja mängida võtmerolli neuroprotektsioonis ja PD arengu ja progresseerumise ennetamises. Vaatamata suurenenud uurimishuvile PD-ga seotud mittemotoorsete sümptomite vastu, nagu depressioon, haistmispuudulikkus, kõhukinnisus, uni ja käitumishäired, vajab kurkumiini mõju PD-le täiendavat uurimist.

Kokkuvõttes näitas kurkumiin paljutõotavaid toimeid PD ravis (tabel S1) (vt joonis 1). Rohkemate kurkumiinipreparaatide uurimine in vivo mudelite ja kliiniliste uuringute abil aitaks aga edasi arendada kurkumiini kasutamist ennetava ravina, et blokeerida või aeglustada PD tekkimist.

4. Kurkumiin kui MS-i ravikandidaat

MS on krooniline neuropõletikuline autoimmuunne kesknärvisüsteemi demüeliniseeriv haigus noortel täiskasvanutel, mis mõjutab miljoneid inimesi [94]. MS-i seostatakse mitmete patofüsioloogiliste protsessidega, sealhulgas krooniline põletik, muutunud immuunsüsteem, BBB katkemine kui retsidiveeruvad-remiteerivad (RR) episoodid, suure hulga leukotsüütide infiltratsioon, oksüdatiivne stress, demüelinisatsioon, mis viib aksonite ja neuronite kahjustusteni, remüelinisatsioon. ja remondisüsteemide aktiveerimine [95–98].

Kuigi SM-i algpõhjus on endiselt teadmata, usuvad teadlased, et SM on multifaktoriaalne haigus, mis hõlmab geneetiliste, keskkonna- ja autoimmunoloogiliste tegurite kombinatsiooni, mis soodustavad SM-i väljakujunemise riski [99]. Põletiku algfaasi iseloomustab IL-22, IL-17 ja T-rakkude panus, mis põhjustab põletikulise kaskaadi aktiveerumist ja muid patofüsioloogilisi MS tunnuseid, mis põhjustavad demüelinisatsiooni ja aksonite kahjustus [100].

Praeguseks on SM-i jaoks saadaval ainult sümptomaatiline ravi, mis keskendub ägenemiste ja haigusepisoodide taandumisele. Praegust MS-ravi tuntakse haigust modifitseeriva ravina (DMT), mille käigus on välja töötatud erinevaid ühendeid. Enamik neist ravimeetoditest on immunomoduleerivad ühendid, mis on heaks kiidetud erinevat tüüpi MS-i raviks ja on suunatud erinevatele patofüsioloogilistele radadele [101, 102]. Kasutatakse ka teisi ravistrateegiaid, mis hõlmavad tüvirakuteraapia kasutamist autoloogse vereloome tüvirakkude siirdamise (aHSCT) ja B-rakke kahandava monoklonaalse ravina [102].

Relapsid on RRMS-i domineeriv kliiniline tunnus, kuid neid esineb ka sekundaarselt progresseeruva MS algfaasis [103]. 85–90 protsendil SM-ga patsientidest esineva retsidiveeruva ja taanduva MS-i (RRMS) ravistrateegia valik on endiselt vastuoluline [104]. See on tingitud MS-ga seotud sümptomite varieeruvusest iga inimese puhul. Vaatamata paljudele saadaolevatele ravimeetoditele on iga juhtumi jaoks sobiva ravistrateegia kindlaksmääramisel tekkinud uued väljakutsed. Lisaks on nende ühendite ohutus- ja efektiivsusprofiil ning võimalike kõrvaltoimete mõistmine endiselt keeruline.

Kõrvaltoimed, ravi ebaõnnestumised, toksilisuse aruanded ja praeguste keemiliste ravimite kõrge hind on tegurid, mis soodustavad ravimtaimede, sealhulgas kurkumiini kasutamist ravieesmärkidel. Hiljuti on tuvastatud mitmeid kurkumiini omadusi, millest mõned võivad olla tõhusad SM ravis, eriti selle põletikuvastased omadused, inhibeerides põletikueelsete tsütokiinide sekretsiooni (joonis 1) [103].

Siin käsitleme kurkumiini erinevaid omadusi ja peamisi mõjusid MS-i raviks (tabel S1). Arvestades astrotsüütide asendamatut rolli SM-st paranemisel ja taastumisel, kasutati varasemas uuringus MS-i rakumudelina inimese astrotsüütide rakuliini (U373-MG) [105]. LPS-iga eeltöödeldud rakkudes vähendas kurkumiin nii IL6 kui ka MMP9 aktiivsuse vabanemist, kuigi see ei mõjutanud ei insuliinitaolise kasvufaktori (IGF)-1 ega neurotropiini-3 mRNA taset. See toetab kurkumiini põletikuvastast toimet kesknärvisüsteemi astrotsüütidele [106]. Müeliini süstimisel hiirtele tekitatud eksperimentaalset autoimmuunset entsefalomüeliiti (EAE) kasutati eksperimentaalse mudelina MS uurimiseks.

Kasvab ka huvi kurkumiini kui potentsiaalse MS-i ravikandidaadi vastu. Huvitaval kombel on hiljutised leiud kurkumiini mõju kohta EAE Lewise rotimudelitele näidanud, et polümeriseeritud nanoCUR-il (PNC), mida manustati annuses 12,5 mg/kg, oli tõhus terapeutiline toime, millel oli märkimisväärne mõju EAE skooridele ja müeliini parandamise mehhanismid.

PNC suurendas müeliniseerumist täiustatud parandusmehhanismi kaudu, mis indutseerib tugevdatud neurotroofseid tegureid. Lisaks muutis see ümber EAE-indutseeritud neuropõletiku, inhibeerides põletikueelset geeniekspressiooni NF-kB, IL-1, IL-17, TNF- ja MCP-1 ning suurendades anti-inflammatoorset toimet. põletikulise geeni ekspressioon IL-4, IL-10, FOXP3 ja TGF-. Lisaks moduleeris PNC oksüdatiivse stressi markerite ekspressiooni.

Veelgi huvitavam on see, et eeltöötlus PNC-ga on suurendanud eellasrakkude markereid ja viivitanud EAE arengut [27, 107, 108]. Arvestades oligodendrotsüütide ja nende ebaküpsete eellaste tähtsust, mis on demüeliniseerivate haiguste ravi terapeutiliste strateegiate olulised sihtmärgid, uuriti kurkumiini mõju oligodendrotsüütidele. Kurkumiini mõju uurimine oligodendrotsüütide eellasrakkude (OP) diferentseerumisele, eriti põletikuliste haiguste korral, on näidanud, et kurkumiin parandab OP-de diferentseerumist erinevate arenguetappidega seotud markerite suurenenud ekspressiooni kaudu.

Kurkumiin suutis aktiveerida PPAR- OP-des, näidates kurkumiinist sõltuvat PPAR- tuuma translokatsiooni [109]. Kurkumiini võime soodustada OP-de diferentseerumist (ebaküpseteks oligodendrotsüütideks) OL-deks hõlmas mitmeid mehhanisme, sealhulgas PPAR- ja ERK1/2 aktiveerimist ning TNF- --indutseeritud kahjulike mõjude vältimist. Hiljutine uuring kinnitas kurkumiini nanoformulatsiooni efektiivsust MS-ga patsientide põletikuliste omaduste suhtes. Tõepoolest, kurkumiin vähendas oluliselt miRNA-de, sealhulgas miR-145, miR-132, miR-16, aga ka põletikuliste vahendajate, nagu STAT-1, NF-kB, AP, ekspressiooni. -1, IL-1, IL-6, IFN-, CCL2, CCL5, TNF-.

Teisest küljest on nanoCUR esile kutsunud Sox2, Sirtuin-1, Foxp3 ja PDCD1 ekspressioonitasemete märkimisväärse tõusu. Lisaks vähenesid kurkumiiniga ravitud patsientide rühmas IFN-, CCL2 ja CCL5 sekretsioonitasemed platseeborühmaga võrreldes drastiliselt [110]. T-abistaja 1 (Th1) ja T-abistaja 17 (Th17) rakud osalevad MS patogeneesis ja arvatakse olevat terapeutilised sihtmärgid [111] (vt joonis 2). Hiljutised uuringud EAE mudelite ja MS patsientide kohta tõid esile Th17 rakkude kriitilise rolli autoimmuunse neuroinflammatsiooni vahendamisel. Th17, põletikku soodustav efektor-T-rakkude liin, arvatakse olevat kõige olulisem IL17 tsütokiinide tootja [112].

Seega on need rakud seotud demüelinisatsiooni ja aksonite / neuronite degeneratsiooniga. Huvitav on see, et võrreldes platseeborühmaga oli Th17 rakkude osakaal ning ROR t ja IL-17 ekspressioonitase oluliselt vähenenud SM patsientidel, kes said iganädalaselt interferooni -1a (Actovex) süste ja lisasid täiendavaid ravimeid. NanoCUR-iga 6 kuud [113]. Peamiselt näitas EDSS-i skoor MS-i patsientide rühmas, kellele lisati nanoCUR, paremat kvaliteeti võrreldes platseeborühmaga. Üldiselt võib nanoCUR pärssida haiguse progresseerumist MS patsientidel. Kokkuvõtteks võib nanoCUR-i vaadelda kui neuroprotektiivset ainet MS-i progresseerumise vastu, mis on peamiselt suunatud MS-i põletikulistele omadustele.

Teised uuringud, milles kasutati EAE mudeleid, on näidanud CD4 pluss regulatiivsete T (Treg) rakkude keskset rolli MS patogeneesis ja ägenemises [114–117]. Oluline on rõhutada, et MS-ga patsientidel on Treg-rakkude sagedus ja supressiivne funktsioon häiritud [118, 119]. Veel üks hiljutine Dolati jt uuring. kirjeldas nanoCUR-i mõju Tregi funktsioonile ja sagedusele MS-ga patsientidel. Rühm neist sai nanoCUR kapslite efekte vähemalt kuus kuud, teine ​​rühm sai kontrollrühmana platseebot. MS patsientidel on täheldatud tsirkuleeriva Tregi sageduse suurenemist koos FoxP3 kõrgema ekspressiooniga.

Üldiselt suutis kurkumiini nanopreparaat SM-i patsientide EDSS-i skoori algtasemega võrreldes alandada, mis viitab pigem taastumisele retsidiivi sündmustest kui tõelisest paranemisest. Ülaltoodud tulemuste põhjal leiti, et nanoCUR-i peetakse immunomoduleerivaks aineks, kuna see reguleerib immuunsüsteemi funktsiooni ja hoiab ära autoreaktiivsuse, moduleerides Treg-rakkude osakaalu ja funktsiooni SM-patsientidel [120].

Need tähelepanekud näitavad, et nanoCUR võib taastada MS-ga patsientidel Treg-rakkude sagedust ja funktsiooni, tuues esile kurkumiini tekkivad terapeutilised mehhanismid MS-ravis kui remüelinisatsiooni soodustamise strateegia.

Cisanche anti-Alzheimeri tõve ja Parkinsoni tõve mehhanism

Cistanche on traditsiooniline Hiina taimne ravim, mida on sajandeid kasutatud mitmesuguste haiguste, sealhulgas Alzheimeri tõve ja Parkinsoni tõve raviks. Cistanche toimemehhanism nende haiguste puhul ei ole täielikult teada, kuid on mitmeid võimalusi, kuidas see võib olla kasulik.

Üks peamisi viise, kuidas Cistanche võib Alzheimeri tõve korral aidata, on beeta-amüloidnaastude tootmise vähendamine ajus. Arvatakse, et need naastud on Alzheimeri tõve arengu peamiseks teguriks ja nende tootmise vähendamine võib aidata haiguse progresseerumist aeglustada või ära hoida.

Cistanche'il võib olla ka neuroprotektiivne toime, aidates kaitsta ajurakke kahjustuste ja degeneratsiooni eest. See võib olla eriti kasulik Parkinsoni tõve korral, mida iseloomustab ajus dopamiini tootvate neuronite degeneratsioon. Lisaks võib Cistanche'il olla põletikuvastane toime, mis võib aidata vähendada põletikku ajus ja parandada kognitiivset funktsiooni. Arvatakse, et põletik mängib rolli Alzheimeri tõve ja Parkinsoni tõve tekkes.

Jätkub...

Tarek Benameur 1,†, Giulia Giacomucci 2,† , Maria Antonietta Panaro 3,† , Melania Ruggiero 3, Teresa Trotta 4, Vincenzo Monda 4,5, Ilaria Pizzolorusso 6, Dario Domenico Lofrumento 4, Chiara Lofrumento ja Givanro 4 4

1 Biomeditsiiniteaduste osakond, meditsiinikolledž, King Faisali ülikool, Al-Ahsa 31982, Saudi Araabia; tbenameur@kfu.edu.sa

2 Firenze ülikooli neuroteaduse, psühholoogia, ravimiuuringute ja laste tervise osakond, 50134 Firenze, Itaalia; giuliagiacomucci.md@gmail.com

3 Biotehnoloogia ja biofarmaatsia, Bioteaduste osakond, Bari Ülikool, 70125 Bari, Itaalia; mariaantonietta.panaro@uniba.it (KAART); melania.ruggiero@uniba.it (MR)

4 Foggia ülikooli kliinilise ja eksperimentaalse meditsiini osakond, 71121 Foggia, Itaalia; teresa.trotta@unifg.it (TT); vincenzo.monda@unicampania.it (VM); Giovanni.messina@unifg.it (GM)

5 Dieet- ja spordimeditsiini üksus, inimfüsioloogia osakond, eksperimentaalmeditsiini osakond, Luigi Vanvitelli University of Campania, 81100 Napoli, Itaalia

6 Laste ja noorukite neuropsühhiaatria osakond, vaimse tervise osakond, ASL Foggia, 71121 Foggia, Itaalia; ilaria.pizzolorusso@virgilio.it

7 Bioloogia- ja keskkonnateaduste ja -tehnoloogiate osakond, inimanatoomia osakond, Salento ülikool, 73100 Lecce, Itaalia; dario.lofrumento@unisalento.it