Jabuticaba (Myrciaria Jaboticaba) koor kui fosfolipiidvesiikulite kaudu toodetud antotsüaniinide ja ellagitaniinide jätkusuutlik allikas inimese keratinotsüütide oksüdatiivse stressi leevendamiseks 2. osa

Palun võtke ühendustoscar.xiao@wecistanche.comrohkem informatsiooni

2.3. In vitro uuringud keratinotsüütidega

2.3.1.Vesiikulite biosobivus

Transfersoomide, eriti polümeeridega rikastatud, füüsikalis-keemiliste omaduste hindamiseks tehtud uuring kinnitas nende suuremat stabiilsust ja ideaalset suurust nahale kandmiseks. Kõik olulised erinevused tuvastati polümeeri kontsentratsioonide funktsioonina (1 või 2 mg/ml). Selle hindamiseks kasutati järgmiste uuringute läbiviimiseks kõrgeima polümeerikontsentratsiooniga (2 mg/ml) modifitseeritud vesiikuleid. Nende biosobivust hinnati keratinotsüütide abil ning vesidispersioonis sisalduva ekstrakti väärtust hinnati ja kasutati võrdlusena. Keratinotsüüdid on valitud, kuna need on epidermise kõige esinduslikumad rakud ning kasutatud on kihtide kaupa seadistust, kuna oma erilisel eristumisel moodustavad nad naha peamise barjääri, mis reguleerib naha hüdratatsiooni ning takistab väliste ainete tungimist naha sisse ja läbi selle. Keratinotsüüte töödeldi 48 tundi dispergeeritud ekstraktiga või vesiikulite sisse lülitamisega neljas erinevas lahjenduses, mille järel mõõdeti rakkude elujõulisust (joonis 3). Dispersioonis oleva ekstraktiga inkubeeritud rakkude elujõulisus oli ~ 88 protsenti (lk<0.05 versus="" the="" viability="" measured="" using="" extract="" loaded="" vesicles),="" indicating="" that="" the="" extract="" is="" not="" toxic.="" the="" viability="" of="" cells="" treated="" with="" extract-loaded="" transfersomes="" and="" hyaluronan-transfersomes="" at="" higher="" dilutions="" was~100%="" (p="">0.05 selle rühma hulgas). Ravi HE-tselluloosi-transfersoomide ja hüaluronaani-transfersoomidega parandas veelgi rakkude elujõulisust. Kõik koostised olid väga bioloogiliselt ühilduvad, sõltumata kasutatud polümeerist ja lahjendusest. Tõepoolest, rakkude elujõulisus oli 100 protsenti või kõrgem, näidates isegi vesiikulite laadimisega seotud proliferatiivset toimet.

Lisateabe saamiseks klõpsake siin

2.3.2. Dispergeeritud või vesiikulites sisalduva ekstrakti kaitsev toime keratinotsüütides vesinikperoksiidi poolt põhjustatud kahjustuste vastu

Keratinotsüüte rõhutati vesinikperoksiidiga ja seejärel töödeldi ekstraktiga kas dispersioonina või laaditi transfersoomidesse. Rakkude elujõulisust mõõdeti 4 tunni pärast ja seda kasutati preparaatide kaitsva toime hindamiseks oksüdatiivse stressi vastu (joonis 4). Proovid lahjendati rakusöötmega kahe erineva kontsentratsiooni saavutamiseks (4 ja 0,4 ug/mL). Vesinikperoksiidi stress põhjustas kõrge rakkude suremuse ja vähendas elujõulisust kuni ~ 50 protsenti (lk<0.05 versus="" the="" viability="" of="" cells="" treated="" with="" the="" extract="" in="" dispersion="" or="" loaded="" in="" vesicles)[35].="" hydrogen="" peroxide="" is="" considered="" one="" of="" the="" most="" dangerous="" oxidative="" molecules="" among="" the="" different="" reactive="" oxygen="" species,="" capable="" of="" promoting="" apoptosis="" and="" cell="" death.="" the="" treatment="" of="" stressed="" cells="" with="" the="" aqueous="" dispersion="" of="" the="" extract="" was="" capable="" of="" reducing="" the="" damaging="" effect="" of="" hydrogen="" peroxide="" as="" the="" viability="" increased="" up=""><0.05 versus="" the="" viability="" of="" cells="" treated="" with="" the="" extract="" loaded="" in="" hecelluose-transfersomes="" at="" a="" higher="" dilution="" and="" hyaluronan-transfersomes),="" although="" the="" complete="" restoration="" of="" normal="" conditions="" was="" not="" achieved="" (figure="" 4).="" treatment="" with="" the="" extract-loaded="" transfersomes="" protected="" the="" cell="" to="" the="" same="" extent="" as="" the="" extract="" in="" dispersion="" (~82%,p="">0.05 versus dispersiooniga töödeldud rakkude elujõulisus). Parima tulemusega ravi oli HE-tselluloosi-transfersoomidega (kõrgema lahjendusega) ja hüaluronaani-transfersoomidega laetud ekstrakt, mille elujõulisus oli ~104 protsenti (p<0.05 versus="" the="" values="" of="" other="" treatments).="" the="" restored="" normal="" conditions="" and="" even="" slightly="" promoted="" cell="" proliferation,="" probably="" due="" to="" the="" synergic="" effect="" of="" the="" extract="" and="" the="" polymer-immobilized="" vesicles.="" the="" vesicle="" behavior="" was="" not="" affected="" by="" the="" dilution="" levels="" of="" the="">

2.3.3. In vitro haavade paranemise mõju

In vitro kriimustustest viidi läbi keratinotsüütide monokihiga, et kontrollida vesidispersioonina või vesiikulitesse lülitatud ekstrakti võimet stimuleerida rakkude proliferatsiooni ja migratsiooni. Tühje vesiikuleid ei testitud, kuna eelmises uuringus ei tuvastatud tühjade hüalurosoomide kasutamisel haavade paranemise paranemist [37]. Tehtud haava sulgumist jälgiti 48 tundi (joonis 5) ja sulgumise protsent arvutati kahjustusalade mõõtmise teel (joonis 6). Töötlemata rakkude haava sulgumine toimus väga aeglaselt – 13 protsenti 24 tunni pärast, 28 protsenti 36 tunni pärast ja ainult 40 protsenti 48 tunni pärast. Ekstraktiga töötlemine vesidispersioonis parandas protsessi veidi ja viis sulgemise 48 tunni pärast 50 protsendini. Töötlemine ekstraktiga laetud vesiikulitega 48 tunni pärast saavutas transfersoomide ja HE-tselluloosi-transfersoomide kasutamisel 90-protsendilise sulgemise ja hüaluronaani-transfersoomide kasutamisel ligikaudu 100-protsendilise sulgemise. Nagu näeme, oli haava sulgemine peaaegu täielik, kinnitades ekstraktiga laetud hüaluronaani-transfersoomide taastavaid omadusi.

Meie üldised tulemused kinnitasid hüaluronaani-transfersoomide suurt biosobivust, mis olid ka kõige tõhusamad naharakkude proliferatsiooni ja migratsiooni stimuleerimisel ning oksüdatiivse stressi põhjustatud nahakahjustuste vastu võitlemisel.

3. Materjalid ja meetodid 3.1. Materjalid

Lipoid S75 (koosneb ~70 protsendist sojafosfatidüülkoliinist, 9 protsendist fosfatidüületanoolamiinist ja 3 protsendist lüsofosfatidüülkoliinist) osteti ettevõttelt Lipoid GmbH (Ludwigshafen, Saksamaa). Madala molekulmassiga (200-400) naatriumhüaluronaat ja polüdisperssus 1,4 Mw/Mn, osteti firmalt DSM Nutritional Products AG Branch Pentapharm (Šveits). Tween 80, glütserool, DPPH-radikaal (2,2-difenüül-1-pikrüülhüdrasüül), raud(III)kloriidheksahüdraat, gallus-, klorogeen- ja askorbiinhape, katehhiin, tetrasooliumisool, 3-(4,{ {15}}dimetüültiasool-2-vl)-2,5-difenüültetrasooliumbromiid (MTT), kvertsetiin, neosporiin, Folin-Ciocalteu fenoolreaktiiv, 2,4,6-tris( 2-püridüül)-S-triasiin (TPTZ) ja pvrokatehoolviolett osteti ettevõttelt Sigma-Aldrich (Milano, Itaalia). Kaaliumheksatsüanoferraat (ⅢI) saadi firmast Merck (Darmstadt, Saksamaa). Veevaba naatriumatsetaat, vasksulfaatpentahüdraat ja vaskkloriiddihüdraat saadi ettevõttest VWR Chemi-cals BDH⑧ (Frankfurt, Saksamaa). Tsüanidiin 3-O-glükosiid (95 protsenti või rohkem) ja delfinidiin 3-O-glükosiid (95 protsenti või suurem) osteti ettevõttelt Extrasynthese (Lyon, Prantsusmaa). Jää-äädikhape ja fosforhape (85 protsenti) hangiti firmalt JTBaker (Mallinckrodt Baker Inc., Utrecht, Holland). Kõik rakukultuuri reaktiivid ja plastid osteti ettevõttest Life Technologies Europe (Monza, Itaalia).

3.2. Jabuticaba pissid: ekstraheerimine, keemiline iseloomustus ja antioksüdantne aktiivsus

Jabuticaba viljad (Myrciaria jabuticaba (Vell.)O.Berg)cv. Sabara koristati küpses küpsemisetapis Brasiilias Paranås Araucaria linnas (geograafilised koordinaadid∶25 kraadi 2924,7" S49 kraad 2637,8" W) 2018. aasta detsembris. Puuviljad pesti ja desinfitseeriti (NaOCl 100 mg/l/15 min), loputada ja käsitsi tselluloosiks. Koorisid kuivatati 35 kraadi juures 50 tundi, jahvatati, et saavutada 42 Tyleri võrgusilma, ja ekstraheeriti kiirendatud lahustiekstraktoris (ASE-350, Dionex, Sunnyvale, CA, USA), kasutades rõhku 100 baari (98,7). atm) kahe ekstraheerimistsükliga 50 kraadi juures. Lahustina kasutati sidrunhappega hapestatud vett (pH 2,10) ja ekstraheerimist korrati neli korda. Seejärel ekstraktid filtriti kvalitatiivse paberiga ja külmkuivatati vaakumis 120 tundi. Seejärel arvutati protseduuris kasutatud tooraine kohta ekstraheerimissaagis, väljendatuna protsentides.

Cistanche võib parandada immuunsust

Fenooli üldsisaldus (TPC, mg gallushappe ekvivalenti 100 g kohta, mg GAE/100 g) kondenseeritud tanniini kogusisaldus (TCT, mg katehhiini ekvivalenti 100 g kohta, mg CE / 100 g), flavonoidide üldsisaldus (TF, mg CE /100 g) ja orto-difenoolide üldsisaldust (TOD, mg klorogeenhappe ekvivalenti 100 g kohta, mg CAE/100 g) mõõdeti kolmes korduses UV-Vis spektrofotomeetria abil vastavalt protseduuridele, mida on täielikult kirjeldanud do Carmo et al. [20].

Antotsüaniinid (tsüanidiin {0}}O-glükosiid ja delfinidiin 3-O-glükosiid) kvantifitseeriti kõrgsurvevedelikkromatograafia (HPLC) abil, kasutades Agilent 110{{37} }(Agilent Technologies Inc., Espoo, Soome) seade, mis on varustatud diode massiivituvastusega (DAD). Eraldamiseks kasutati Gemini C18 kolonni (15{41}} mm × 4,6 mm, 5 μm) gradientelueerimisega atsetonitriiliga, mis oli hapestatud 5% sipelghappega. Ellagitanniini üldsisaldus määrati pärast happelist hüdrolüüsi Mattila ja Kumpulaineni [38] järgi ning gallushape määrati Inertsil ODS-3 kolonniga （150 mm × 4.0 mm , 3 μm) atsetonitriili gradientelueerimisega 50 mmol/L H3PO4-ks (pH 2,5). Analüüsid viidi läbi kolmes korduses ja tulemused väljendati mg/100 g kohta. Peamiste ellagitaniinide ja antotsüaniinide iseloomustamiseks kasutati ülikõrge jõudlusega vedelikkromatograafiat (UHPLC) kombineerituna kõrglahutusega massispektromeetriaga (MS). Acquity UPLC-Xevo G2 QTOF massispektromeeter (Waters, Milford, MA, USA) oli varustatud Waters Acquity BEH C18 (1,7 μm, 2,1 mm × 150 mm) kolonniga ja eraldamine viidi läbi vees hapestatud atsetonitriili gradiendiga. 0,1% sipelghappega, vastavalt Santos jt [39]. Voolukiirus oli 0,55 ml/min, kolonni ahju temperatuur oli 45 kraadi ja süstimismaht 1,0 μL. Elektropihustusliides (ESI) on negatiivne ja positiivset režiimi kasutati kapillaarpingetega vastavalt -1 kV ja pluss 0,5 kV. Kokkupõrkegaasina kasutati argooni. MS analüüsid viidi läbi andmetest sõltumatu hankimise (MSE) tsentroidi andmemudeli abil täisskaneerimisel m /z 50-1500 skaneerimisajaga 0,2 s. MSE-funktsioonis killustati MS-i lähteioonid, kasutades suurt kokkupõrkeenergiat, mida tõsteti 25-lt 45 V-le.

Ekstrakti antioksüdantset aktiivsust analüüsiti kolmes eksemplaris, kasutades erinevaid analüüse: vabade radikaalide püüdmise aktiivsus seoses DPPH radikaaliga, raud(III) redutseeriv antioksüdantne toime (FRAP), vaskiooni vähendav antioksüdantne võime (CUPRAC), redutseerimisvõime ja Cu2. pluss kelaatimise võime. Tulemused väljendati vastavalt mg GAE / 100 g (redutseeriv võimsus), mg askorbiinhappe ekvivalenti 100 g kohta, mg AAE / 100 g (DPPH, FRAP ja CUPRAC) ja mg EDTA ekvivalenti 100 g kohta (metallikelaat). . Kõiki kasutatud meetodeid on varem põhjalikult kirjeldanud Carmo et al. ja Fidelis et al. [9,20].

3.3. Vesiikulite ettevalmistamine

Transfersoomid, hüdroksüetüültselluloosiga rikastatud transfersoomid (HE-tselluloos-thansferoomid) ja naatriumhüaluronaadiga rikastatud transfersoomid (hüaluronaan-transfersoomid) valmistati fosfolipiidi (S75, 180 mg/mL), Tweeni ekstrakti (20 mg/mL) dispergeerimisega. (40 mg/mL) ja polümeer (hüdroksüetüültselluloos või naatriumhüaluronaat 1 ja 2 mg/mL) vajaduse korral vees ja jättes segud mõneks tunniks hüdraatuma. Pärast seda töödeldi dispersioone ultraheliga (4 tsüklit 2 peale 5 amplituudiga 15,0 μ), oodates iga tsükli vahel 5 minutit, et soodustada jahtumist ja vältida proovi ülekuumenemist. Kõigi dispersioonide ultraheliga töötlemiseks kasutati suure jõudlusega sonikaatorit Soniprep 150 (MSE Crowley, London, UK), et saada väikese suurusega homogeenne süsteem [15]. See protseduur väldib valmistamisel kasutatud komponentide kadu, mille tulemusel moodustuvad toimivad vesiikulid, mis on võimelised sisaldama suures koguses ekstrakti.

3.4. Vesiikulite iseloomustus

Vesiikulite keskmist läbimõõtu ja polüdisperssuse indeksit (mõõtmeteta suurusjaotuse laiuse mõõt) mõõdeti footonkorrelatsioonispektroskoopia abil, kasutades seadet Zetasizer Ultra (Malvern Instrument, UK). Sama aparatuuri kasutati vesiikulite zeta potentsiaali mõõtmiseks, mõõtes osakeste elektroforeetilist liikuvust [40]. Proove lahjendati enne mõõtmist sobivalt, et need oleksid optiliselt selged ja väldiksid tuvastatava hajutatud valguse vähenemist. Vesiikulitesse tegelikult lisatud ekstrakti koguse hindamiseks puhastati dispersioonid inkorporeerimata ekstraktist dialüüsi teel. Vesiikulite dispersioonid (1 ml) sisestati polükarbonaadist dialüüsi katsutitesse (Spectra/Pormembranes: 12-14 kDa MW piirväärtus, pooridega 3 nm; Spectrum Laboratories Inc., Rancho Dominguez, CA, USA) ja sukeldati destilleeritud vette. (2 L) 25 kraadi juures 2 tundi segades. Vett värskendati ühe tunni pärast, kasutades seega 4 liitrit vett, et lahustada 1 ml vesiikulite dispersiooni (40 mg) mittesisalduvaid bioaktiivseid molekule. Ekstrakti kogus vesiikulite suspensioonides enne ja pärast dialüüsi kvantifitseeriti, mõõtes nende antioksüdantset aktiivsust DPPH testi abil. Ekstrakti vesiikulite sees kinnijäämise efektiivsus arvutati proovide antioksüdantse aktiivsuse protsentuaalse suhtena enne ja pärast puhastusprotsessi [41-43].

3.5. Vesiikulite stabiilsus ladustamisel

Vesiikulite stabiilsust dispersioonis hinnati, jälgides nende keskmist suurust, polüdisperssuse indeksit ja pinna laengut 90 päeva jooksul, hoides dispersioone toatemperatuuril (25 ± 1 kraadi).

3.6. Proovide antioksüdantse aktiivsuse mõõtmine DPPH kolorimeetrilise testi abil Vesiikulitesse laaditud jabuticaba koore ekstrakti antioksüdantset aktiivsust mõõdeti funktsioonina selle võimest eemaldada DPPH. Dispersioone (10 μL) lahjendati (1–100) DPPH metanoolilahusega (0,4 ug/mL). Lahjendatud proove hoiti toatemperatuuril ja pimedas 30 minutit, seejärel mõõdeti lahuste neeldumine 517 nm juures UV-spektrofotomeetriga. Preparaatide antioksüdantne aktiivsus arvutati valemi (1) kohaselt: (1) Antioksüdandi aktiivsuse protsent =[(ABSDPPH-ABSample)/ABSpPPH] × 100

3.7. Proovide biosobivus ja kaitsev toime keratinotsüütide oksüdatiivse stressi vastu

Immortaliseeritud inimese keratinotsüüte (HaCaT) kasvatati ühekihiliste kihtidena 37 kraadi juures 100% niiskuse ja 5% CO2-ga, kasutades Dulbecco modifitseeritud Eagle Medium (DMEM) kõrge glükoosisisaldust, millele oli lisatud veise loote seerumit, penitsilliini ja kasvukeskkonnana streptomütsiin. Preparaatide biosobivuse hindamiseks külvati rakud 96-süvendiga plaatidele tihedusega 7,5 × 10 rakku süvendi kohta. 24 tunni pärast töödeldi rakke 48 tundi jabutikaba ekstraktiga vesidispersioonis või laaditi vesiikulitesse, mis olid korralikult lahjendatud DMEM-ga, et saavutada ekstrakti erinevad kontsentratsioonid (40, 4, 0,4 ja 0,04 ug/ml). Inkubeerimise lõpus MTT [3(4,5-dimetüültiasolüül-2)-2, 5-difenüültetrasooliumbromiid] (100 μL, lõppkontsentratsioon 0,5 mg/mL ) lisati igasse süvendisse ja kolme tunni pärast lahustati moodustunud formatsaani kristallid dimetüülsulfoksiidiga. Iga süvendi neeldumist mõõdeti 570 nm juures, kasutades mikroplaadilugejat (Synergy 4 Reader, BioTek Instruments, AHSI SpA, Bernareggio, Itaalia). Kõiki katseid korrati vähemalt kolm korda, iga kord kolmes eksemplaris. Tulemused on näidatud rakkude elujõulisuse protsentides võrreldes töötlemata kontrollrakkudega (100 protsenti elujõulisust).

Samuti hinnati preparaatide in vitro kaitsvat toimet oksüdatiivse stressi põhjustatud kahjustuste vastu. Rakud külvati {{0}}süvendiga plaatidele tihedusega 7,5 × 10 rakku süvendi kohta. Pärast 24-tunnist inkubeerimist rõhuti rakke vesinikperoksiidiga (30 protsenti lahjendati 1:40, 000 mahus PBS-iga) ja töödeldi ekstraktiga vesidispersioonis või laaditi vesiikulitesse ja lahjendati kahe erineva kontsentratsiooni saavutamiseks. (4 ja 0,4 ug/ml). Negatiivse kontrollina kasutati ainult vesinikperoksiidiga stressi all olevaid rakke, positiivse kontrollina aga töötlemata rakke. Pärast 4-tunnist inkubeerimist pesti rakke värske söötmega ja nende elujõulisus määrati MTT testiga. Tulemused on esitatud töötlemata rakkude protsendina (100-protsendiline elujõulisus).

3.8. In vitro haavade paranemise omadused

Vesiikulitesse laaditud jabuticaba kooreekstrakti võimet nahakahjustusi ümber kujundada ja nende paranemist soodustada hinnati rakkude laienemise mõõtmisega kahjustusel raku monokihis. Rakke kultiveeriti 6 süvendiga plaatidel kuni täieliku ja homogeense monokihi saavutamiseni. Lineaarne haav tekitati steriilse plastpipeti otsaga. Rakkude hajutatud fragmendid eemaldati õrna pesemisega värske söötmega. Ekstrakti vesidispersioon või ekstraktiga laetud vesiikulid lahjendati rakusöötmega kuni 4 ug/ml ekstrakti ja kasutati kahjustatud raku monokihtide töötlemiseks. Täheldati rakukahjustusi ja pildid jäädvustati 24-, 36- ja 48-tunnise inkubeerimise järel, kasutades 10-kordse objektiiviga optilist mikroskoopi. Negatiivse kontrollina kasutati töötlemata rakke. Jäädvustatud piltide piirkonna kahjustusi mõõdeti Java image J tarkvaraga (http://rsb.info.nih.gov, juurdepääs aprillist juunini 2021). Haavade sulgumine arvutati võrrandi (2) abil:

kus ao on haavatud piirkond vahetult pärast kriimustamist ja a on haavatud piirkond mõõdetuna 24, 36 ja 48 tunni pärast [44].

3.9. Statistiline analüüs

Tulemused on väljendatud keskmise ± standardhälbena ja olulisust testiti tõenäosuse tasemel 0,05 (p). Suuruse, zeta potentsiaali, viskoossuse, ravimite akumulatsiooni ja tsütotoksilisuse jaoks kasutati rühmadevaheliste statistiliste erinevuste põhjendamiseks ühesuunalist dispersioonanalüüsi (ANOVA), millele järgnes Tukey test, samas kui Studenti t-testi kasutati kahe proovi võrdlemiseks, kasutades XLStatistic. Exceli jaoks.

4. Järeldused

Lüofiliseeritud jabutikaba koore ekstrakt lisati transfersoomidesse ja polümeeriga (hüdroksüetüültselluloos ja naatriumhüaluronaat) rikastatud transfersoomidesse eesmärgiga stabiliseerida ekstrakti ja parandada selle terapeutilist efektiivsust. Saadud vesiikulid olid väikese suurusega ja homogeenselt hajutatud. Mõlema polümeeri lisamine viis ainult veidi suuremate vesiikulite moodustumiseni, ilma erinevusteta kasutatud polümeerikontsentratsioonide vahel. Polümeeriga rikastatud vesiikulid tundusid olevat ideaalsed paikseks manustamiseks ja suutsid lisada suures koguses bioaktiivset rikast ekstrakti. Eelkõige on fosfolipiidi Tween 80 ja naatriumhüaluronaadi kombinatsioon hüaluronaani-transfersoomide saamiseks valitud parimaks koostiseks stabiilsuse ja keratinotsüütidega interaktsioonivõime osas, kuna ainult need vesiikulid suutsid kahjustusi tõhusalt neutraliseerida. indutseerida rakkudes vesinikperoksiidi kasutamisel ja soodustada haavade paranemist inimese keratinotsüütides. Üldiselt näitasid meie tulemused, et hüaluronaan-transfersoomid võivad olla paljulubav süsteem oksüdatiivse stressiga seotud nahahaiguste või nahahaavade raviks. Lisaks näitame esimest korda jabuticaba koore ekstrakti kasutamist dermatoloogilises manustamissüsteemis.

Autori kaastööd:DG, MLM, MM: kontseptualiseerimine, formaalne analüüs, andmete kureerimine, kirjutamine ja ülevaade; IC, MA, JH: formaalne analüüs ja kirjutamine. Kõik autorid on käsikirja avaldatud versiooni läbi lugenud ja sellega nõustunud.

Rahastamine:See uuring ei saanud välist rahastamist. Institutsioonilise läbivaatamise nõukogu avaldus: Ei kohaldata. Teavitatud nõusoleku avaldus: Ei kohaldata.

Andmete kättesaadavuse avaldus:Toorandmed on saadaval ja neid saab otse autoritelt küsida.

Huvide konfliktid:Autorid ei kinnita huvide konflikti.

Näidiste saadavus:Jaboticaba kooreekstrakti näidised on saadaval autoritelt.

See artikkel on välja võetud ajakirjast Molecules 2021, 26, 6697. https://doi.org/10.3390/molecules26216697 https://www.mdpi.com/journal/molecules