Perimenopausaalse sündroomi loommudeli sekkumisuuringud fenüületüülalkoholi glükosiidide kohta Cistanche'is Ⅱ

Katse 1 Cistanche fenüületanoidglükosiidi valmistamine 1 Ravimaterjalide allikas

Cistanche tubulosa, Chengdu Wecistanche biotech Ltd.d, partii number: 20130501.

2 reaktiivi

95% etanool (meditsiiniline); AB-8 makropoorne adsorptsioonivaik, Tianjin Guangfu Fine Chemical Research Institute, partii number: 20130618.

Ehhinakosiidi võrdlusaine, mille pakub Hiina Farmaatsia- ja Bioloogiatoodete Kontrolli Instituut, partii number: 111670-200503.3

KUI KAUA LÄBIB, ET CISTANCHE TÖÖTAB?

Valmistamismeetod

Viidati kirjanduse meetodile [19] ja see viidi läbi Henani traditsioonilise hiina meditsiini kolledži ravimianalüüsi osakonna professor Feng Suxiangi juhendamisel.Jahvatage Cistanchejämedaks pulbriks, lisage püstjahutisse 10-kordne kogus 70% etanooli ja ekstraheerige kaks korda, iga kord 1,5 tundi, ühendage kaks alkoholiekstrakti, kontsentreerige alandatud rõhul kuni alkoholilõhna kadumiseni ja hajutage proovilahusena destilleeritud vett (kontsentratsioon 0,5g ravimainet/ml). Laske läbi AB-8 vaigu (kolonni ravim: vaik on 1:10), laadige proov voolu ja laske sellel seista 5 tundi, kuni see täielikult adsorbeerub. Esmalt peske kolonni 10-kordse mahuga destilleeritud veega, visake vesi ära ja seejärel kasutage 10-kordset kolonni mahtu. Lisandite eemaldamiseks kasutage 10% etanooli ja lõpuks elueerige 7-kordse kolonni mahuga 60% etanooliga. Koguge eluaat ja aurustage pulbri saamiseks kuivaks. 4 Mõõtmise lainepikkuse valik

Mõõtke täpselt {{0}},5 ml võrdluslahust, lisage 1 ml 5% naatriumnitriti lahust, loksutage korralikult ja laske 6 minutit seista; lisage 1 ml 10% alumiiniumnitraadi lahust, loksutage korralikult ja laske 6 minutit seista; lisage 10 ml 10% naatriumhüdroksiidi lahust, lahjendage veega 25 ml-ni, loksutage korralikult ja laske võrdluslahusena 18 minutit seista. 0,5 mlCistanche fenüületanoolglükosiidlahus valmistati samal viisil kui testlahus. Kasutatakse paralleelproovi ilma võrdlusainet lisamata ja analüüsitakse lahust pimekatsena ning valmistatakse pimelahus samal viisil. UV-spektrofotomeetril tehke ülaltoodud kolme lahusega täielik lainepikkuse skaneerimine lainepikkuste vahemikus 200-800nm. Nii etalonainel kui ka uuritaval lahusel on maksimaalne neeldumispiik 507 nm juures, seega määratakse neeldumise lainepikkuseks 507 nm.

Pärast Cistanche fenüületanoolglükosiidi proovi + Echinacea mandariini etalonaine värvuse esilekutsumist (pealne võrdlus), vt joonis 1.

Joonis 1 Pärast värvi kujunemist Cistanche fenüületanoidglükosiidi proovis + pärast Echinacea mandariini oranži etalonaine värvuse kujunemist Joonis 5 Sisu tuvastamise meetod

Mõõtke täpselt 1 ml testitavat lahust, lisage 1 ml 5% naatriumnitriti lahust, loksutage korralikult ja laske 6 minutit seista; lisage 1 ml 10% alumiiniumnitraadi lahust, loksutage korralikult ja laske 6 minutit seista; lisage 10% naatriumhüdroksiidi Lahus on 10 ml, lahjendage veega 25 ml-ni, loksutage korralikult ja laske 18 minutit seista. Kasutage paralleelproovi ilma proovilahust lisamata pimekatsena ja valmistage pimelahus samal viisil. Mõõdetud UV-spektrofotomeetriga lainepikkusel 507 nm. 6 Metoodiline ülevaade

6.1 Võrdluslahuse ja proovilahuse valmistamine

Võrdluslahuse valmistamine: kaaluge täpselt 3.06 mg ehhinakosiidi võrdlusstandardit, mis on kuivatatud konstantse massini, asetage see 25 ml mõõtekolbi, lisage lahustamiseks 70% lahus ja lahjendage märgini. loksutage hästi ja pange kõrvale. Standardkontsentratsioon on 0,1224 mg/ml.

Proovilahuse valmistamine: kaaluge täpselt 5 mgCistanche fenüületanoidglükosiid väljavõte10 ml mõõtekolbi, lahustada see 70% etanooliga ja lahjendada mahuni.

6.2 Standardkõvera koostamine

Joonista täpselt {{0}}, 1.0, 2.0, 3.0, 4.{{10}}, 5.0 , 6,0 ml võrdluslahust, anda värvus ja lahjendada mahuni vastavalt punktis 4.2 kirjeldatud meetodile ning mõõta neeldumise väärtus 507 nm juures. Kasutades regressioonikõvera koostamiseks kontsentratsiooni ja neeldumist, on regressioonivõrrandiks järgmine: Y=20.296X-0.0015 (r=0.9994) ja lineaarne vahemik on 4.{{ 23}},4 ug/ml.

6.3 Täpsuskatse

Võtke proovilahus ja mõõtke seda kuus korda paralleelselt vastavalt punktile "Sisu määramise meetod". Arvutage neeldumise suhteline standardhälve. Neeldumised on vastavalt {{0}},299, 0,299, 0,298, 0,297, 0,297, 0,297. Keskmine neelduvus=0,298, RSD=0,330% (n =6).

6.4 Stabiilsuse test

Võtke sobiv kogus proovilahust ja mõõtke vastavalt jaotisele "Sisu määramise meetod" neeldumisväärtused {{0}}, 15, 30, 50 ja 60 minutit pärast lahuse täielikku värvimist ning arvutage suhteline standardhälve. Neeldumised on vastavalt 0,304, 0,303, 0,300 ja 0,296. , 0,295, 0,295, keskmine neelduvus=0,299, RSD=1,362% (n=5).

6.5 Korratavuse test

Võtke proov, valmistage 6 proovilahust vastavalt punktile "Proovilahuse valmistamine" ja mõõtke neeldumisväärtus vastavalt punktile "Sisu määramise meetod" ja arvutage sisaldus. Sisu on vastavalt 65,2%, 65,6%, 66,7%, 67,2% ja 66,5%. , 65,8%, keskmine sisaldus 66,2%, RSD=1,142% (n=6).

6.6 Proovi taastamise test

Tõmmake täpselt 0,5 ml teadaoleva sisaldusega proovilahust, kokku 9 osa, ja lisage vastavalt 200, 250 ja 300 ul standardlahust. Mõõtke ja arvutage Cistanche fenüületanoolglükosiidi saagismäär ja suhteline standardhälve. Taaskasutamise määrad on vastavalt 101,45% ja 99,26%. , 98,94%, 101,83%, 99,05%, 99,47%, 98,72%, 99,17%, 100,64%, keskmine taastamismäär on 99,84%, RSD=1,164% (n=9).

7 Proovi sisu määramine

Tabel 1 Fenüületanoidglükosiidide sisalduse määramise tulemused Cistanche'is