Melanogeneesi inhibeerimine naatrium2-merkaptoetaansulfonaadi poolt

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

Jeong-Hwan Kim1,2,3,#, Chang-Taek Oh2,#, Tae-Rin Kwon2, Jong Hwan Kim2,3, Dong-Ho Bak2,3, Hyuk Kim1, Won-Seok Park1 ja Beom Joon Kim2,3 ,*

ABSTRAKTNENaatrium 2-merkaptoetanoolsulfonaat (mesna) on kaitsev aine, mida oma antioksüdantse toime tõttu kasutatakse laialdaselt meditsiinis. Hiljuti näidati, et reaktiivsed hapniku liigid (ROS) suurendavad pigmentatsiooni. Seega võivad ROS-i püüdurid ja ROS-i tootmise inhibiitorid melanogeneesi pärssida. Forkhead box-O3a (FoxO3a) on loomade angiogeenne tegur, mis vahendab ROS-i põhjustatud naha pigmentatsiooni. Selles uuringus püüdsime uurida mesna valgendavat toimet ja seda mõju vahendavat signaalimehhanismi. Selles uuringus kasutati inimese melanoomi (MNT-1) rakke. mRNA ja valgu ekspressiooni mõõdeti reaalajas kvantitatiivse PCR ja Western blot analüüsiga, et jälgida mesna poolt indutseeritud FoxO3a-ga seotud signaalide muutusi. FoxO3a tuuma translokatsiooni määramiseks viidi läbi immunofluorestsentsanalüüs. Kui MNT-1 melanoomirakke raviti mesnaga, vähenes melaniini tootmine ja sekretsioon. Nende mõjudega kaasnes FoxO3a aktiveerimise ja tuuma translokatsiooni suurenemine, mille tulemuseks oli nelja melanogeneesi peamise geeni: MITF, TYR, TRP1 ja TRP2 alareguleerimine. Leidsime, et mesna, antioksüdant ja radikaalide püüdja, pärsib melaniini tootmist ja võib seetõttu olla kasulik vahend hüperpigmentatsioonihäirete kliiniliseks raviks.

MärksõnadAntioksüdandid Hüperpigmentatsioon MesnaNahka helendavad preparaadid

Cistanche: antioksüdant ja kasulik nahka valgendav aine

SISSEJUHATUS

Kosmeetikatööstus on huvitatud nahka valgendavate omadustega materjalide avastamisest. Hiljuti näidati, et reaktiivsetel hapnikuliikidel (ROS) on melanotsüütidele paradoksaalne mõju [1]. Täpsemalt, need suurendavad pigmentatsiooni ja põhjustavad oksüdatiivse stressi põhjustatud kahjustusi melanotsüütidele. Seega võivad ROS-i püüdurid ja ROS-i tootmise inhibiitorid pärssida melanogeneesi [2,3].

Naatrium 2-merkaptoetanoolsulfonaat (mesna) on kaitseaine, mida kasutatakse keemilise antidoodi ja adjuvandina erinevates ravivaldkondades. Mesnat kasutatakse meditsiinis laialdaselt selle kaitsva ja antioksüdantse toime tõttu [4,5]. Antioksüdandina toimib mesna, säilitades tõhusalt rakusisese tiooli seisundi. Kuigi mesna esineb nii redutseeritud kui ka oksüdeeritud kujul, eksisteerib see peamiselt redutseeritud kujul. Mesna toimib antioksüdandina, püüdes kinni vabadest radikaalidest, mis pärsivad melanogeneesi, pärssides türosinaasi aktiivsust [6]. Seetõttu ennustatakse, et mesna vähendab de novo melanogeneesi.

Melaniini sünteesi reguleerivad mitmed signaaliülekanderajad, millel on melanogeneesis olulised funktsioonid. Hiljuti näidati, et kahvlipea kast O3a (FoxO3a) on loomade angiogeenne tegur, mis vahendab ROS-indutseeritud naha pigmentatsiooni, mis viitab tihedale seosele melanogeneesi ja antioksüdantide, eriti askorbiinhappe (AA) ja N-atsetüültsüsteiini (NAC) vahel [7]. Kuigi mesna on võimas radikaalide püüdja, ei ole selle valgendavat toimet ja signaalimehhanismi veel uuritud.

Selles uuringus püüdsime uurida mesna pärssivat toimet melaniini sünteesile ja melanogeneesifaktorite ekspressioonile, et selgitada välja selle tõhusa depigmentatsiooni toime aluseks olev mehhanism.

cistanche tubolosa

MEETODID

Rakukultuur ja rakkude elujõulisuse analüüs

Selles uuringus kasutatud inimese melanoomi (MNT-1) rakke hoiti minimaalses olulises söötmes (MEM; Gibco, Grand Island, NY, USA), mis sisaldas 10 protsenti Dulbecco MEM-i, 20 mM HEPES-i (Sigma-Aldrich Co. , St. Louis, MO, USA), 20% FBS, 100 U/ml penitsilliini G ja 100 mg/ml streptomütsiinsulfaati. Rakke paljundati 37 kraadi juures 5% CO2-ga. Rakkude elujõulisust mõõdeti 3-(4,5-dimetüültiasool-2-üül)2,5-difenüültetrasooliumbromiidi (MTT) testiga. Lühidalt, pärast inkubeerimist uuritavate ainetega, sööde eemaldati ja lisati MTT lahus (5 mg/ml). Seejärel hoiti rakke 1 tund 37 kraadi ja ekstraheeriti DMSO-ga. Neelduvus määrati 590 nm juures, kasutades mikroplaadilugejat.

2,2-difenüül-1-pikrüülhüdrasüüli (DPPH) radikaali püüdmise aktiivsuse test

DPPH radikaali püüdmise aktiivsuse test viidi läbi nagu eelnevalt kirjeldatud [8], mõne muudatusega. Lühidalt, 10 ul mesnat (3–400 ug/ml, lahustatud etanoolis) lisati 190 ul etanoolilahusele, mis sisaldas DPPH radikaale (100 μM) igas { süvendis. {6}}kaevuplaat. Segu loksutati ja inkubeeriti 30 minutit 37 kraadi juures pimedas, misjärel mõõdeti neeldumist lainepikkusel 517 nm, kasutades positiivseks kontrolliks AA-d. Madalam neeldumine tähendab suuremat DPPH eemaldamisaktiivsust. Puhastusefekti protsent arvutati järgmiselt: puhastuskiirus ( protsenti )=[1 – (A1 – A2)/A0] × 100 protsenti, kus A0, A1 ja A2 on kontrolli neelduvus (ilma proovita). ), vastavalt uuritav proov ja proov ilma DPPHta. Katseid korrati kolm korda sõltumatult.

Cistancheekstrakti eelised: selged vabad radikaalid.

Seene türosinaasi analüüs

In vitro seente türosinaasi test viidi läbi, kasutades türosinaasi substraadina L-türosiini ja L-3,4-dihüdroksüfenüülalaniini (L-DOPA). Iga proovi (mesna ja AA) inhibeeriv toime türosinaasi poolt katalüüsitud L-türosiini oksüdatsiooni vastu määrati Chang et al. meetoditega. [9]. Lühidalt, 40 ul 1,5 mM L-türosiini (substraati), mis oli lahustatud 0,1 M fosfaatpuhvris (pH 6,8) ja 120 ul sama puhvrit, segati 20 ul iga erineva kontsentratsiooniga prooviga. Seejärel lisati reaktsiooni käivitamiseks 20 ul seene türosinaasi (2,000 U/ml fosfaatpuhvris) ja analüüsisegu inkubeeriti 37 kraadi juures 15 minutit. Lõpuks jälgiti dopakroomi moodustumisest põhjustatud neeldumise suurenemist lainepikkusel 475 nm, kasutades mikroplaadilugejat (Opsys MR; Dynex Technologies, Ltd., Frankfurt, Saksamaa).

Iga ekstrakti inhibeeriv toime L-DOPA oksüdatsioonile seente türosinaasi poolt määrati Masamoto et al. meetodil. [10], väikeste muudatustega. Lühidalt, 100 ul 0,1 M fosfaatpuhvrit segati iga proovi 20 ul erineva kontsentratsiooniga. Reaktsioonid käivitati 20 ul seene türosinaasi lisamisega (2,000 U/ml fosfaatpuhvris). Seejärel inkubeeriti segu 37 kraadi juures 5 minutit ja lisati seejärel 40 ui L-DOPA-le (4 mM 0,1 M fosfaatpuhvris). Seda reaktsioonisegu inkubeeriti 10 minutit temperatuuril 37 °C, misjärel mõõdeti selle neeldumine 475 nm juures. Türosiini või L-DOPA oksüdatsiooni inhibeerimise protsent arvutati järgmiselt: inhibeerimine ( protsent )=100 – (B/A × 100), kus A ja B olid ΔOD475 väärtused, mis registreeriti 10 minuti jooksul ilma testita ja koos testiga. vastavalt näidis. Katseid korrati kolm korda sõltumatult.

Melaniini sisalduse mõõtmine

Raku melaniini sisaldus määrati meetodi modifitseeritud versiooniga, mille on kirjeldanud Hosoi et al. [11]. Lühidalt, MNT 1 rakud külvati 24-süvendiga plaadile tihedusega 1 × 10 5 rakku süvendi kohta ja inkubeeriti üleöö. Sööde asendati söötmega, mis sisaldas erinevas kontsentratsioonis mesnat, NAC-d ja AA-d, seejärel inkubeeriti segusid veel 72 tundi ja sööde eemaldati. Seejärel pesti rakke kaks korda PBS-ga, koguti trüpsiiniga, kasutades 0,25% trüpsiini/0,02% EDTA-d PBS-is, sadestati ja solubiliseeriti 1 N NaOH-s 1 tund temperatuuril 80 °C. Pärast tsentrifuugimist kiirusel 3,000 × g 10 minutit, mõõdeti saadud supernatandi OD mikroplaadilugejaga 490 nm juures. Katsed viidi läbi kolmes eksemplaris.

Kvantitatiivne reaalajas RT-PCR (qRT-PCR)

Kogu raku RNA ekstraheeriti MNT{0}} rakkudest, kasutades RNeasy Mini komplekti (Qiagen, Valencia, CA, USA). cDNA sünteesiks pöördtranskribeeriti 1 ug RNA-d, kasutades Primerscripti esimese ahela cDNA sünteesikomplekti (Takara Bio Inc., Shiga, Jaapan). Kvantitatiivne reaalajas PCR (qPCR) viidi läbi, kasutades IQ SYBR Green Supermixi (Bio-Rad, Hercules, CA, USA). qRT-PCR termotsükli parameetrid hõlmasid inkubeerimist 95 kraadi juures 10 minutit, millele järgnes 45 tsüklit 95 kraadi juures 10 sekundit, 72 kraadi juures 1 sekundit ja 40 kraadi juures 30 sekundit. Reaktsioonid viidi läbi BioRad CFX96 reaalajas PCR-tuvastussüsteemis. Iga qRT-PCR jooksu lõpus analüüsiti tulemusi automaatselt ja iga cDNA jaoks koostati amplifikatsioonigraafik. Kõik katsed viidi läbi kolmes eksemplaris. mRNA ekspressioonitasemed kvantifitseeriti suhtelise CT-meetodi abil ja normaliseeriti majapidamisgeeni transkripti GAPDH omaga.

Joonis 1. 2-merkaptoetanoolsulfonaadi (mesna) mõju 2,2-difenüül-1-pikrüülhüdrasüüli (DPPH) eemaldamisaktiivsusele ja seente türosinaasi aktiivsusele

Western blot analüüs

MNT{{0}} rakkude valguekstraktid valmistati külma radioimmunosadestamise testi (RIPA) puhvriga (50 mM Tris HCl, pH 7,2, 150 mM NaCl, 1% NP40 , 0,1 protsenti SDS, 0,5 protsenti DOC, 1 mM PMSF, 25 mM MgCl2 ja fosfataasi inhibiitori kokteil). Saadud rakulüsaatide valgusisaldus kvantifitseeriti, kasutades Pierce'i bitsinhoniinhappe (BCA) valguanalüüsi komplekti (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA). Võrdsed kogused valku lahutati SDS-PAGE abil (8–12 protsenti geelid) ja kanti PVDF membraanidele (Millipore, Billerica, MA, USA). Pärast 2-tunnist blokeerimist 5% kooritud piimaga Tris-puhverdatud soolalahuses, mis sisaldas 0,5% Tween 20 (Sigma-Aldrich Co.), sondeeriti membraane primaarsete antikehadega ja inkubeeriti mädarõika peroksidaasiga konjugeeritud sekundaarsete antikehadega. Hübridiseeritud antikehad tuvastati täiustatud kemoluminestsentslahusega (ATTO Co., Tokyo, Jaapan) ja kujutised saadi LAS-1000 LuminoImage Analyzer'iga (Fujifilm, Tokyo, Jaapan). Kõik katsed viidi läbi kolmes eksemplaris.

Rakkude fraktsioneerimise test

Tsütoplasmaatilised ja tuumavalgu fraktsioonid genereeriti NE-PER tuuma- ja tsütoplasmaatilise ekstraheerimisreaktiivi komplekti abil, järgides tootja protokolli (Pierce Biotechnology, Rockford, IL, USA). Ekstraheerimisreaktiive täiendati fosfataasi inhibiitorite, 10 mM naatriumpürofosfaadi, proteaasi inhibiitori tablettidega (Roche Diagnostics, Basel, Šveits) ja 100 mM naatriumortovanadaadiga. Katsed viidi läbi kolmes eksemplaris.

FoxO3a immunofluorestsentsanalüüs

MNT{{0}} rakud külvati neljakambrilistele rakukultuuri objektiklaasidele (SPL Life Sciences Co., Ltd., Pocheon, Korea) ja töödeldi iga uuritava ainega (mesna, NAC või AA) 1 päeval. Järgmisena pesti slaide 1 × PBS-ga ja fikseeriti 4% paraformaldehüüdiga 20 minutit. Pärast uuesti pesemist 1 × PBS-ga inkubeeriti slaide 0,01% Triton X-100-ga (Sigma-Aldrich Co.) 1 × PBS-is 20 minutit, blokeeriti 2% BSA-ga 1 × PBS-is 2 tundi. ja seejärel inkubeeriti FoxO3a-vastaste antikehadega üleöö 4 kraadi juures. Pärast 1 × PBS-ga pesemist inkubeeriti slaidid FITC-konjugeeritud kitse küülikuvastase IgG-ga (1:1, 000, NB730-F; Novus Biologicals, Littleton, CO, USA) ja paigaldati kasutades 4',6-diamidino-2-fenüülindooli (DAPI; Golden Bridge International, Inc., Mukilteo, WA, USA). Rakkude morfoloogiat uuriti DP70 fluorestsentsmikroskoobiga, kasutades DP kontrolleri tarkvara (Olympus Optical Co., Ltd., Tokyo, Jaapan). Katsed viidi läbi kolmes eksemplaris.

cistanche phelypaes

TULEMUSED

Mesna mõju DPPH eemaldamisaktiivsuselesuse

DPPH-d kasutatakse laialdaselt komplekssete segude ja üksikute ühendite antioksüdantse efektiivsuse hindamiseks. Mesna in vitro antioksüdantset aktiivsust hinnati DPPH radikaali eemaldamise aktiivsuse testidega ja võrreldi AA omaga. IC50 väärtused olid mesna ja AA puhul vastavalt 23,49 ja 21,89 ug/ml, mis näitab, et mõlemad ühendid olid tugevad radikaalide püüdjad ja et nende radikaalide püüdjad olid võrreldavad (joonis 1A ja tabel 1).

Mesna pärsib seente türosinaasi aktiivsust

Et uurida, kas mesna pärsib otseselt melanogeneesi võtmeensüümi, viidi läbi in vitro seente türosinaasi test. Nii mesna kui ka AA inhibeerisid L-DOPA ja türosiini seene türosinaasi poolt vahendatud oksüdatsiooni annusest sõltuval viisil (joonis 1B, C). Nagu oodatud, inhibeeris positiivne kontroll (AA) tugevalt seene türosinaasi, samas kui mesna näitas sama tugevat inhibeerivat aktiivsust (tabel 1). Mesna IC50 väärtused L-DOPA ja L-türosiini suhtes olid vastavalt 22,5 ja 16,3 ug/ml, samas kui AA väärtused olid vastavalt 120,8 ja 166,9 ug/ml. Kokkuvõttes näitavad meie tulemused, et mesna pärsib tugevamini seene türosinaasi aktiivsust kui AA.

Mesna vähendab melaniini sünteesi MNT{0}} rakkudes

Mesna, NAC ja AA inhibeeriva toime võrdlemiseks melaniinisisaldusele töödeldi MNT{0}} rakke nende antioksüdantide erineva kontsentratsiooniga. Kõik kolm ainet vähendasid oluliselt melaniini tootmist annusest sõltuval viisil võrreldes melaniini tootmisega töötlemata rakkudes (joonis 2A, B). Melaniini sünteesi IC50 väärtused olid mesna, NAC ja AA puhul vastavalt 230 nM, 173 nM ja 812 nM. Mesna efektiivne kontsentratsioon ei olnud MNT-1 rakkudele tsütotoksiline (joonis 2C). Need tulemused viitavad sellele, et mesna inhibeeriv toime melaniini sünteesile korreleerub hästi mesna mõjuga seente türosinaasi aktiivsusele. Lisaks hindasime muutusi MITF, TYR, TRP-1 ja TRP-2 ekspressioonis MNT-1 rakkudes (joonis 2D). Mesna ja NAC vähendasid oluliselt MITF-i, TYR-i ja TRP-2 ekspressiooni 12–24 tunni pärast, kuid tasemed taastusid 48 tunni pärast. Lisaks vähendas AA MITF-i, TYR-i, TRP-1 ja TRP-2 ekspressioonitasemeid, kuid nende tase tõusis 48 tunni pärast. Analüüsisime ka MITF-i, TYR-i, TRP-1 ja TRP-2 valgutasemeid 24–48 tunni jooksul ning leidsime, et pärast iga ainega 24–48-tunnist töötlemist vähenesid need tasemed märkimisväärselt (joonis 1). 2E). Need andmed näitavad, et mesna, NAC ja AA vähendavad melaniini sünteesi, tõenäoliselt MITF-i, TYR-i ja TRP-i allareguleerimise kaudu-2.

Joonis 2. 2-merkaptoetanoolsulfonaadi (mesna) mõju melanogeneesile MNT-1 rakkudes.

Mesna kutsub esile FoxO3a tuuma translokatsiooni

On teatatud, et NAC ja AA kutsuvad esile FoxO3a tuuma translokatsiooni, mis reguleerib melanogeneesi ja vähendab melaniini sünteesi. Samuti on teatatud, et nad indutseerivad MNT 1 rakkudes MITF, TYR, TRP-1 ja TRP-2 ekspressiooni [7]. Me oletasime, et FoxO3a fosforüülimine tuuma translokatsioonis on seotud mesna poolt indutseeritud melanogeneesi protsessidega. Oma hüpoteesi testimiseks viisime läbi immunofluorestsentsanalüüsi. Tulemused näitasid, et mesna, NAC ja AA kutsusid kõik esile FoxO3a tuuma translokatsiooni (joonis 3A, B). Lisaks tõusis endogeense FoxO3a tase antioksüdantidega töödeldud rakkude tuumafraktsioonis (joonis 3C). Need tulemused viitavad sellele, et mesna reguleerib FoxO3a tuuma translokatsiooni, eriti tugevdades FoxO3a tuuma translokatsiooni, vähendades seeläbi melaniini sünteesi.

Mesna indutseerib MST1 ja JNK fosforüülimist

Kuna FoxO3a interakteerub erinevate valkudega, võib see seostuda melanogeneesiga seotud teguritega tuumas, moodustades suure molekulmassiga komplekse, mis täidavad sellega seotud funktsioone. On teatatud, et FoxO3a tuuma akumuleerumine aktiveerib MST1, millele järgneb JNK aktiveerimine [12, 13]. FoxO3a tuuma translokatsiooni aluseks olevate mehhanismide uurimiseks kasutati mesna poolt indutseeritud FoxO3a-ga seotud signaalide muutuste jälgimiseks ajakulu eksperimendi Western blot analüüsi. Kinnitasime, et ravi mesna, NAC ja AA-ga suurendas oluliselt MST1 ja JNK fosforüülimist (joonis 4). Need tulemused viitavad sellele, et mesna, NAC ja AA reguleerivad FoxO3a tuuma translokatsiooni MST1 ja JNK fosforüülimise kaudu.

cistanche ürt

ARUTELU

Melanogenees, diferentseerunud melanotsüütide peamine funktsioon, mängib olulist rolli naha kaitsmisel UV-B-kiirguse kahjustuste eest ja vastutab peamiselt nahavärvi eest. Melaniini pigmendi ebanormaalne kogunemine põhjustab pigmentatsioonihäireid, nagu melasma ja seniilne lentiigo. Melanogenees hõlmab rida rangelt reguleeritud ensümaatilisi oksüdatsiooniprotsesse, mis kulmineeruvad melaniini polümeeride sünteesi ja kokkupanemisega. Seetõttu on naha hüperpigmentatsiooni raviks kasutatud palju antioksüdante. Hiljuti teatati, et FoxO3a osaleb melanogeneesi reguleerimises ja avaldab loomadele angiogeenset toimet. Täpsemalt, antioksüdantide loomset angiogeenset aktiivsust vahendab FoxO3a aktiveerimine selle tuuma translokatsiooni kaudu [7].

Mesnat kasutatakse terapeutiliselt tsüklofosfaatide (nt ifosfamiidi) põhjustatud hemorraagilise tsüstiidi ja hematuuria ennetamiseks. Mesna on väike molekul, mis suudab oma sulfhüdrüülrühma tõttu eemaldada ROS-i [14]. Selles uuringus näitasime, et mesnal on tugev radikaalide eemaldamise võime, mis on sarnane AA-ga (joonis 1A). Käesoleva töö eesmärk oli uurida mesna pärssivat toimet melaniini moodustumisele, mis on tihedalt seotud naha pigmentatsiooniga. Leidsime, et mesna vähendas melaniini tootmist ja sekretsiooni MNT-1 melanoomirakkudes. See mõju oli tingitud FoxO3a aktivatsiooni ja tuuma translokatsiooni järsust suurenemisest, mille tulemuseks oli melanogeneesi põhigeenide (nt MITF, türosinaas, TRP1 ja TRP2 [DCT]) allareguleerimine pärast 12-tunnist ravi.

MST1 aktiveerimine soodustab FoxO3a tuuma akumulatsiooni, millega kaasneb JNK aktivatsioon. Eelmine melanoomirakkude uuring näitas, et MST1 soodustab rakusurma vastusena oksüdatiivsele stressile, aktiveerides otseselt FoxO3a [12]. Vahepeal teatati teisest uuringust, et MST1 on naiivsete T-rakkude ellujäämise jaoks ülioluline vastuseks rakusisesele ROS-ile, reguleerides FoxO valgu taset [15]. Meie uuringus indutseeris mesna FoxO3a tuuma translokatsiooni, aktiveerides vastavalt MST1 ja JNK. Kuid mesna ei muutnud MNT-1 rakkude arvu (joonis 2D), mis viitab sellele, et mesna ei kutsu esile raku apoptoosi. Seega näib, et MST1 toimib vastavalt raku tingimustele, et moduleerida FoxO funktsiooni, et reguleerida rakusurma ja ellujäämist erinevalt.

Melasma on omandatud pigmendihäire, mis esineb peamiselt näol ja mõjutab peamiselt fertiilses eas naisi. Sõltuvalt melaniini ladestumise astmest nahas klassifitseeritakse see epidermiks, nahaks ja segatud melaniiniks. Epidermaalne melanoom on haiguse kõige levinum vorm, mida iseloomustab melaniini suurenemine epidermises. Naha melasmat iseloomustab melaniini suurenemine pärisnahas, samas kui segatud melaniin viitab epidermise ja dermaalse melasma kombinatsioonile [16]. Praegu saadaval olevad melasma ravivõimalused hõlmavad paikseid aineid, keemilisi koorimisi, lasereid ja valgusteraapiat [17]. Nendest ravimeetoditest on osutunud kõige tõhusamaks paikne kombineeritud ravi, mis koosneb hüdrokinoonist, tretinoiinist ja fluotsinoloonatsetoniidist, kuid ligikaudu 40 protsendil patsientidest ilmnes erüteem ja koorumine. Veelgi enam, keemilised koorimised, laserteraapia ja valgusteraapia andsid erinevaid ravitulemusi, suurendades ärrituse ja sellele järgneva hüperpigmentatsiooni riski. Seetõttu on melasma praegused ravimeetodid ebarahuldavad. AA, teisiti tuntud kui C-vitamiin, on võimas antioksüdant ja radikaalide püüdja, mis häirib melanogeneesi, pärssides oksüdatiivseid reaktsioone melaniini tootmisprotsessis [18]. 12-nädalases randomiseeritud topeltpimedas kahepoolses uuringus teatasid melasmi all kannatavad korea naised C-vitamiiniga iontoforeesi kasutamisega ravitava poole märgatavast paranemisest [19]. Seega oletame, et mesna, antioksüdant ja radikaalide püüdja, pärsib ka melaniini tootmist ja võib seega olla kasulik vahend hüperpigmentatsioonihäirete kliiniliseks raviks.

Cistanche tubulosa ekstrakt