Herba Cistanche ekstrakt parandab mitokondriaalse glutatiooni staatust ja hingamist roti südametes koos võimaliku valkude lahtiühendamise esilekutsumisega

Ada Hoi-Ling Siu & Kam Ming Ko

Selle artikli tsiteerimiseks: Ada Hoi-Ling Siu & Kam Ming Ko (2010) Herba Cistanche ekstrakt suurendab mitokondriaalset glutatiooni seisundit ja hingamist roti südametes, mis võib põhjustada valkude lahtiühendamise, Pharmaceutical Biology, 48:5, 512-517, DOI: 10.3109/13880200903190985

Selle artikli linkimiseks: https://doi.org/10.3109/13880200903190985

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com

Abstraktne

HerbaCistanche, Hiina ravimtaim, mis on saadud kogu taimestCistanchedeserticolaOn näidatud, et YC Ma (Orobanchaceae) suurendab mitokondriaalset ATP teket ja kaitseb müokardi isheemia/reperfusiooni (I/R) vigastuste eest ex vivo rottidel. Mitokondrite rolli määratlemiseks Herba Cistanche kardioprotektiivses toimes uurisime Herba toimetCistanchemitokondriaalse glutatiooni staatuse ja funktsionaalsete parameetrite ravi roti südametes. Ravi Herba metanooliekstraktigaCistancheparanenud mitokondriaalse glutatiooni staatus, vähenenud mitokondriaalse Ca2 pluss sisaldus ja suurenenud mitokondriaalse membraani potentsiaal. Lisaks täheldati Herbast eraldatud mitokondrites seisundi 4 hingamise suurenemist, mis viitab lahtihingamisele.Cistanche-töödeldud rotisüdameid. Mitokondriaalse glutatiooni staatuse ja funktsionaalse võime paranemine, samuti lahtiühendavate valkude oletatav esilekutsumine võib olla seotud Herba pakutava kardioprotektsioonigaCistancheravi, mis kaitseb I/R vigastuste eest.

Cistanchesellel on palju kasu tervisele

Märksõnad:HerbaCistanche; mitokondrid; glutatioon; kaltsium; membraanipotentsiaal; mitokondriaalne hingamine; lahtihaakimine

Sissejuhatus

Varem isheemilise müokardi reperfusioon põhjustab mitmeid mitokondriaalseid muutusi, sealhulgas suurenenud reaktiivsete hapnikuliikide (ROS) tootmine, Ca2 pluss ülekoormus ja adenosiintrifosfaadi (ATP) tootmise vähenemine, mis kõik võivad põhjustada nekroosi ja/või apoptoosi. vahendatud rakusurm (Redegeld et al., 1992; Lemasters et al., 1998). Kuna mitokondrid mängivad otsustavat rolli kardiomüotsüütide saatuse määramisel pärast isheemia/reperfusiooni (I/R) väljakutset, peaks kaitse müokardi I/R vigastuse eest olema suunatud mitokondriaalse struktuurse ja funktsionaalse terviklikkuse säilitamisele. Mitokondriaalse energia metabolismi säilitamine pärast I / R väljakutset on eriti oluline, kuna südame kontraktiilne funktsioon sõltub peaaegu täielikult mitokondrite tekitatud ATP-st. Kardiomüotsüüdid, mis on elus, kuid ei tõmbu kokku, on väga vähe kasulikud.

Herba Cistanche, terve Cistanche deserticola YC Ma (Orobanchaceae) kuivatatud taim, on parasiitaim, mis kasvab peamiselt Põhja- ja Kirde-Hiina kõrbealadel. Herba Cistanche, mis on hiina meditsiinis klassifitseeritud "Yangi ergutavaks" ürdiks, on ette nähtud neerupuudulikkuse, naiste steriilsuse ja soolestiku kuivusest tingitud kõhukinnisuse korral seniilsetel patsientidel (Chen, 1998). Varasemad meie laboris tehtud uuringud on näidanud, et Herba Cistanche metanooliekstrakt suurendab müokardi ATP tekkevõimet (Leung & Ko, 2008) ja kaitseb müokardi I/R vigastuste eest rottidel (Leung, 2006). Kui ATP genereerimisvõime stimuleerimine kõrvutati mitokondriaalse elektronide transpordi suurendamisega (Leung & Ko, 2008), siis Herba Cistanche raviga saadud südamekaitse I/R vigastuste vastu seostati müokardi ATP ammendumise vähenemisega (Leung, 2006). Käesolevas uuringus, et määratleda mitokondrite rolli Herba Cistanche kardioprotektiivses toimes, uurisime Herba Cistanche ravi mõju mitokondriaalse glutatiooni seisundile, Ca2 pluss sisaldusele, membraanipotentsiaalile ja hingamissagedusele roti südametes.

cistanchedeserticola eelised

materjalid ja meetodid

Taimne materjal

Herba Cistanche osteti kohalikult (Hongkongis asuv) ravimtaimede edasimüüjalt (Lee Hoong Kee). Tarnija kinnitas ürdi autentsuse ja kviitungi näidis (HKUST00301) deponeeriti Hongkongi teadus- ja tehnoloogiaülikooli (HKUST) biokeemia osakonda. Varasemate uuringute põhjal viidi läbi ürdi ekstraheerimine metanooliga, mis näitasid, et selline ekstrakt suurendas mitokondriaalset ATP teket ja kaitses roti südametes I/R vigastuste eest (Leung, 2006; Leung & Ko, 2008). Lühidalt, Herba Cistanche (400 g) lõigati väikesteks tükkideks ja ekstraheeriti, kuumutades püstjahuti all 300 ml metanoolis 60 kraadi juures 2 tundi, nagu eelnevalt kirjeldatud (Leung & Ko, 2008). Protseduuri korrati kaks korda. Ühendatud ekstrakt kuivatati, aurustades lahusti alandatud rõhul; saagis oli 42% (w/w) toorürdi kogusest. Ekstrakti hoiti kuni kasutamiseni 4 kraadi juures. Kuigi Hiina ürte ekstraheeritakse traditsiooniliselt suukaudseks tarbimiseks veega, kasutati meie varasemas uuringus proovide töötlemise ja säilitamise mugavuse huvides metanooli (Yim & Ko, 2002) ning leidsime, et metanooli ekstraheerimine on igas mõttes rahuldav.

Loomade hooldus ja uimastiravi

Täiskasvanud emased Sprague-Dawley rotid (8–10 nädala vanused; 2{{10}}0–230 g) peeti kontrollitud niiskusega ruumis, kus oli 12 tundi pimedas/valguses. tsükkel umbes 22 kraadi juures ning lubatud toit ja vesi ad libitum. Loomad jaotati juhuslikult erinevatesse rühmadesse, igas rühmas oli viis looma. Rotid said Herba Cistanche ekstrakti intragastraalselt (0,2 g/ml vees) 0,5 g/kg või 1,0 g/kg 3 päeva järjest. Kontrollloomad (ravimata) said ainult vett. Kakskümmend neli tundi pärast viimast annustamist saadi anesteseeritud loomadelt biokeemiliseks analüüsiks südamevatsakeste kude. Kõik katseprotokollid kiitis heaks uurimispraktika komitee HKUST.

Mitokondriaalsete fraktsioonide valmistamine

Südamevatsakeste peenestatud koed (~{0}},6 g) homogeniseeriti 10--kordses (w/v) liias jääkülmas sahharoosipuhvris [0,32 M sahharoosi, 1 mM etüleendiamiintetraäädikhapet (EDTA), 50 mM Tris/HCl; pH 7,4], kasutades teflon-klaasist homogenisaatorit, kiirusel 4000 p/min, 25–30 tõmbega. Mitokondriaalsed pelletid valmistati koehomogenaatidest tsentrifuugimisega 800 × g juures 4 kraadi juures 30 minutit ja puhtus määrati suktsinaatdehüdrogenaasi ja laktaatdehüdrogenaasi suhtelise spetsiifilise aktiivsuse mõõtmisega vastavalt supernatandis ja pelletis, nagu eelnevalt kirjeldatud (Evans, 1992). Mitokondriaalsed pelletid suspendeeriti 1 ml homogeniseerivas puhvris.

Mitokondriaalse redutseeritud glutatiooni ja oksüdeeritud glutatiooni taseme mõõtmine

Mitokondriaalne redutseeritud glutatiooni (GSH) tase määrati ensümaatiliselt, kasutades 5,59-ditiobis(2- nitrobensoehapet) (DTNB) ja glutatioonreduktaasi (GR), järgides Griffithi (198{{17}) modifitseeritud protokolli. }). Alikvoot (210 µL) mitokondriaalsest fraktsioonist segati 90 µL 10 (maht/maht) 5-sulfosalitsüülhappega (SSA) ja segu tsentrifuugiti 600 x g juures 10 minutit. Oksüdeeritud glutatiooni (GSSG) taseme mõõtmiseks segati mikrofuugitorudes 100 µl SSA supernatante 10 µL 20-protsendilise (mass/maht) 2-vinüülpüridiini ja 10 µL 60-protsendilise (maht/maht) trietanoolamiiniga. Igal katseklaasil lasti seista toatemperatuuril vähemalt 1 tund. Reaktsioonisegu, mis sisaldas 0,63 mM DTNB-d ja 0,053 mM NADPH-d (redutseeritud nikotiinamiidadeniindinukleotiid fosfaat) fosfaatpuhvris (0,1 M, 5 mM Na2EDTA-ga; pH 7,5), eelinkubeeriti 30 kraadi juures 2 minutit. Alikvoot (30 µL) kas SSA proovi supernatanti (kogu glutatioon) või GSSG proovi lisati 96-süvendiga mikrotiiterplaadi süvendisse ja 180 µL eelsoojendatud reaktsioonisegu, mis sisaldas 0,525 U. Järgmisena lisati /mL GR. Neeldumise muutusi 412 nm juures jälgiti spektrofotomeetriliselt 5 minutit. GSH ja GSSG kontsentratsioonid hinnati kalibreerimiskõverate põhjal, kasutades standarditena GSH-d ja GSSG-d [lahustatud 3% (mass/maht) SSA-s] ja väljendatud ühikuna nmol/mg valku. GSH taseme hindamiseks lahutati kogu GSH-st kaks korda suurem GSSG kogus.

Mitokondriaalse Ca2 pluss sisalduse mõõtmine

Mitokondriaalse Ca2 plussi sisaldust mõõdeti Ca2 pluss-tundliku fluorestsentssondi, Fluo-5N AM estriga (Molecular Probes, Eugene, OR), kasutades Victor2 Multi-Label Counter (mudel 1420; PerkinElmer, Turu, Soome), nagu on kirjeldanud Menze et al. (2005). Ca2 pluss dissotsiatsioonikonstandid (Kd väärtused) määrati Ca2 pluss kalibreerimiskomplektiga, mis kehtis kontsentratsioonivahemikus 1–1000 µM; hinnangulised Kd väärtused olid 90–100 µM ja vastavalt komplekti tootja andmetele olid need väga usaldusväärsed. Mitokondriaalse fraktsiooni alikvoot (25 µL) (lõppkontsentratsioon 0,5 mg valku/ml) segati 25 µL inkubatsioonipuhvriga {100 mM KCl ja 30 mM MOPS [3-(N-morfolino)propaansulfoonhape]; pH 7,2} 96-süvendiga mustas mikrotiiterplaadis. Segu inkubeeriti 25 kraadi juures 15 minutit; Seejärel lisati 25 µL digitoniini (50 µg/mL) ja 25 µL Fluo-5N AM estrit (1 µM 0,005 protsendilises (mass/maht) Pluronic F-127-s). Membraani läbitungimist hõlbustades vahendas digitoniin fluorestsentsvärvi mitokondriaalset sisenemist. Leidsime, et Fluo-5N tase roti südame mitokondriaalsetes preparaatides tõusis digitoniini juuresolekul 20-korda. Reaktsioonisegusid inkubeeriti 25 kraadi juures 30 minutit ja fluorestsentsnäidud mõõdeti ergastuslainepikkusel 488nm ja emissioonilainepikkusel 532nm. Mitokondriaalse Ca2 pluss sisaldust hinnati kalibreerimiskõvera abil ja väljendati kui µmol/mg valku.

Mitokondriaalse membraani potentsiaali mõõtmine

Membraani potentsiaali (ΔΨm) hinnati Bonavita et al. (2003), kasutades fluorestsentsvärvi, lipofiilset katioonset sondi 5596,69- tetrakloro-1,193,39-tetraetüülbensimidasolüülkarbotsüaniinjodiid, mida tavaliselt nimetatakse JC-1. Mitokondriaalsete fraktsioonide alikvoote (50 µL) (reguleeritud 1 mg valku/ml) inkubeeriti 37 kraadi juures 50 µL substraadilahusega (sisaldab 6 mM püruvaati ja 6 mM malaati), 25 µl eeltöödeldud adenosiindifosfaadi lahusega (30 (ADP) ja 25 µL 3 µM JC-1, pimedas. ΔΨm väärtused saadi fluorestsentsi mõõtmisel lainepikkusel 535 nm (FL1) versus 580 nm (FL2), kasutades Victor2 Multi-Label Counter. JC-1 moodustab mitokondrites agregaadi, mille tulemuseks on kõrged FL2 fluorestsentsi väärtused ja mis näitab normaalset mitokondriaalset potentsiaali. ΔΨm kadumine viib FL2 fluorestsentsi vähenemiseni (JC-1 agregeerub vähemal määral) ja samaaegselt FL1 fluorestsentsi suurenemiseni (JC-1 monomeeridest). Andmed väljendati FL1/FL2 fluorestsentsi väärtuste suhetena. Katse kinnitamiseks kasutati karbonüültsüaniid-m-klorofenüülhüdrasooni (CCCP), ΔΨm-kollapseerivat ainet.

Mitokondriaalse hingamise mõõtmine

Mitokondriaalse hingamise kiirust mõõdeti 37 kraadi juures, kasutades Hansatech Oxygraph-Plus instrumenti, mis oli varustatud Clarki tüüpi hapnikuelektroodiga (Sarasota, FL, USA). Mitokondriaalsed fraktsioonid (0,6 mg valku/ml) suspendeeriti hingamispuhvris, mis sisaldas 125 mM KCl, 20 mM MOPS, 10 mM Tris, 0,5 mM etüleenglükooltetraäädikhapet (EGTA) ja 2 mM KH2PO4; pH 7,2. Pärast 2-minutilist inkubeerimist 37 kraadi juures sai iga proovi 50 µL substraadilahust (5 mM püruvaati ja 5 mM malaati). Hingamissagedust mõõdeti 1 mM ADP juuresolekul (olek 3) ja pärast kogu ADP fosforüülimist ATP-ks (olek 4). Seisundi 3:oleku 4 hingamissageduste suhe on hingamiskontrolli indeks, mis näitab hingamise ja fosforüülimise vahelise seose tihedust (Javadov et al., 2005; Kuwabara et al., 1997). Enne substraadilahuse lisamist mõõdeti oleku 1 hingamissagedust kuni oleku 2 hingamise alguseni ja oleku 2 hingamissagedust hinnati enne ADP lisamist.

Statistiline analüüs

Andmeid analüüsiti ühesuunalise dispersioonanalüüsi (ANOVA) abil mitme rühma võrdlemiseks. Väikseima olulise erinevuse (LSD) väärtusi kasutati oluliste erinevuste tuvastamiseks kahe rühma vahel, kui p väärtused olid <>

Cistancheonmeditsiinilineväärtus

Tulemused

Nagu on näidatud joonistel 1 ja 2, parandas töötlemine Herba Cistanche metanooliekstraktiga (0,5 või 10g/kg/päevas × 3) oluliselt mitokondriaalset glutatiooni seisundit roti südametes, kuna mida tõendab annusest sõltuv GSH taseme tõus (11–30 protsenti) ja GSSG taseme langus (31 protsenti).

Herba Cistanche ravi vähendas annusest sõltuvalt mitokondriaalset Ca2 pluss taset roti südametes võrreldes kontrollidega; supressioon oli 41 protsenti annuses 1.0 g/kg (joonis 3).

Herba Cistanche ravi suurendas mitokondriaalset ΔΨm, mida tõendab FL1/FL2 suhte vähenemine (14–16 protsenti). CCCP (100 µM) põhjustas ΔΨm kollapsi, mida näitab FL1/FL2 suhte suurenemine (joonis 4).

Ravi Herba Cistanche'iga suurendas mitokondriaalset hingamist, mida tõendab oluliselt kõrgem oleku 3 hingamissagedus (84 protsenti) katseloomadel võrreldes kontrollidega (tabel 1). Seisundi 2 ja oleku 4 hingamistasemed tõusid vastavalt 47 ja 80 protsenti, kuid oleku 4 hingamise stimulatsiooni pärssis täielikult 1 mM guanosiin-5'-difosfaat, valgu 2/3 inhibiitor. Ravi Herba Cistanche'iga ei mõjutanud hingamiskontrolli indeksit, mis on hinnatud oleku 3/seisundi 4 hingamissageduste suhte järgi.

Cistancheonneuroprotektiivneomadused

Arutelu

Herba Cistanchega töödeldud roti südametest eraldatud mitokondrid näitasid glutatiooni seisundi paranemist, mida näitasid suurenenud GSH tasemed ja vähenenud GSSG tasemed. Mitokondriaalse glutatiooni redoksstaatuse säilitamine on südame-veresoonkonna kaitse jaoks ülioluline I/R vigastuste vastu (Chiu & Ko, 2003). Tsütosoolse Ca2 pluss sisaldus suureneb müokardi isheemia ajal sisemembraani Ca2 pluss uniporteri omastamise kaudu (Ataka et al., 1992; Grover et al., 1990), mis viib mitokondriaalse Ca2 pluss akumulatsioonini. Meie tulemused näitavad, et ravi Herba Cistanche ekstraktidega suurendas mitokondriaalset glutatiooni redoksseisundit ja vähendas mitokondriaalset Ca2 plussi taset, mis võib pakkuda kaitset müokardi I/R vigastuse eest (Leung, 2006). Herba Cistanche-ravi suutmatus suurema annusega 1,0 g/kg GSSG ja Ca2 plussi taset veelgi vähendada võib olla seotud isemajanduva regulatsioonimehhanismiga, mis mõjutab glutatiooni redokspotentsiaali ja kaltsiumi seisundit mitokondrites.

Mitokondrid tekitavad elektronide transpordi teel elektrokeemilise prootoni gradiendi läbi sisemembraani. Seda gradienti kasutab ATP süntaas ADP fosforüülimiseks ATP-ks. Mitokondriaalse membraani potentsiaali vähenemine, nagu hüpoksia / reoksüdatsiooni korral pärast kultiveeritud kardiomüotsüütide vigastust (Chiu et al., 2008), vähendab ATP teket. Herba Cistanche ravi, mis võib suurendada müokardi mitokondriaalse membraani potentsiaali, võib suurendada ATP teket, eriti post-isheemilise reperfusiooni ajal. Jällegi võib isemajanduva regulatiivse mehhanismi olemasolu selgitada, miks Herba Cistanche ravi mõju mitokondriaalse membraani potentsiaalile ei sõltu annusest.

Ravi Herba Cistanche'iga suurendas oluliselt hapnikutarbimise põhjal hinnatuna seisundi 3 hingamissagedust roti südame mitokondrites. See leid on kooskõlas tulemustega, mis on saadud mitokondriaalse ATP tekkevõime in vitro ja situ mõõtmistel (Leung & Ko, 2008). Huvitaval kombel vähendas ravi Herba Cistanche'iga müokardi ATP püsiseisundi taset (andmeid pole näidatud), suurendas ravi mitokondriaalset ATP teket. Lahtise hingamise kaasamine võib neid vastuolulisi tähelepanekuid selgitada. Lahtiühendatud oksüdatiivne fosforüülimine toimub siis, kui prootonid liiguvad läbi mitokondriaalse sisemembraani tagasi mitokondriaalsesse maatriksisse, hajutades seega elektronide transpordiahelast moodustunud membraanipotentsiaali. Selle tulemuseks on ATP moodustumist juhtiva prootoni liikumapaneva jõu vähenemine (Garvey, 2003). Selle tulemusena väheneb Ca2 pluss kontsentratsioon ja ROS tootmine mitokondrites dramaatiliselt (Teshima et al., 2003). See soovitus on kooskõlas käesoleva uuringu tulemustega, mis näitasid mitokondriaalse Ca2 plussi taseme langust Herba Cistanchega töödeldud südametes. Mis puutub lahtihingamisse, võib Herba Cistanche töötlemine indutseerida lahtiühendavate valkude (UCP) sünteesi. On teada, et UCP-d lahutavad oksüdatiivse fosforüülimise ja UCP1 ekspressioon transgeensete hiirte südametes on kaitstud I / R-indutseeritud müokardi kahjustuse eest (Hoerter et al., 2004). UCP-de lahtisidumist inhibeerisid puriinnukleotiiddifosfaadid ja trifosfaadid (nagu ADP, ATP, guanosiindifosfaat (GDP) ja GTP) (Echtay et al., 2002). Käesolevas uuringus mõõdeti ADP (substraadina) juuresolekul mitokondriaalseid parameetreid, nagu membraanipotentsiaal ja hingamissagedus; UCP-de lahtisidumise efekt oli seetõttu pärsitud. Kui aga mõõdeti mitokondriaalse seisundi 4 hingamissagedust ADP puudumisel, oli see määr kõrgem Herba Cistanchega töödeldud südametest valmistatud mitokondrites kui töötlemata kontrollide südametes. State 4 hingamissagedus peegeldab mitokondrite hapnikutarbimist, kui prootonid lekivad tagasi mitokondriaalsesse maatriksisse mehhanismi kaudu, mis ei hõlma F1F0 -ATPaasi (Garvey, 2003). UCP-de võimalikku osalust Herba Cistanche põhjustatud seisundi 4 hingamise suurenemises toetab järeldus, et SKT pärsib seda võimendust (Bento et al., 2007).

Kokkuvõtteks võib öelda, et ravi Herba Cistanche'ga võib parandada mitokondriaalset glutatiooni seisundit, vähendada mitokondriaalset Ca2 pluss taset ja suurendada mitokondriaalse membraani potentsiaali ja hingamissagedust roti südametes. Mitokondriaalse glutatiooni staatuse ja funktsionaalse võime paranemine ning UCP-de oletatav esilekutsumine võib olla seotud Herba Cistanche'i raviga pärast I / R vigastust pakutava kardioprotektsiooniga.

Cistanchevõib suurenedamitokondriaalnehingamine määra

Huvi deklaratsioon

Autorid teatavad, et huvide konflikti ei esine. Töö sisu ja kirjutamise eest vastutavad autorid.

Viited

Ataka K, Chen D, Levitsky S, Jimenez E, Feinberg H (1992): Vananemise mõju intratsellulaarsele Ca2 plusile, pHi ja kontraktiilsusele isheemia ja reperfusiooni ajal. Tiraaž 86 II371–II376.

Bento LM, Fagian MM, Vercesi AE, Gontijo JA (2007): NH4 Cl-indutseeritud süsteemse metaboolse atsidoosi mõju neerude mitokondriaalsele sidumisele ja kaltsiumi transpordile rottidel.

Nephrol Dial Transplant 22: 2817–2823. Bonavita F, Stefanelli C, Giordano E, Columbaro M, Facchini A, Bonafe F, Caldarera CM, Guarnieri C (2003): H9c2 südame müoblastid läbivad apoptoosi isheemia mudelis, mis koosneb seerumi puudusest ja hüpoksiast: PMA inhibeerimine. FEBS Lett 536: 85–91.

Chen P (1998): Toniseerivad ürdid. Täiustatud TCM-seeria. Peking, Science Press, lk 233–320.

Chiu PY, Ko KM (2003): Ajast sõltuv mitokondriaalse glutatiooni staatuse ja ATP tekkevõime paranemine skismdriin B-ravi abil vähendab roti südamete vastuvõtlikkust isheemia-reperfusioonikahjustusele.

Biofaktorid, 19: 43–51. Chiu PY, Luk KF, Leung HY, Ng KM, Ko KM (2008): Schisandrin B stereoisomeerid kaitsevad hüpoksia/reoksügeenimise põhjustatud apoptoosi eest ja pärsivad sellega seotud muutusi Ca2 pluss-indutseeritud mitokondriaalse läbilaskvuse üleminekus ja mitokondriaalse membraani potentsiaalis H9c2 kardiomüotsüütides. Life Sci 82: 1092–1101.

Echtay KS, Roussel D, St Pierre J, Jekabsons MB, Cadenas S, Stuart JA, Harper JA, Roebuck SJ, Morrison A, Pickering S, Clapham JC, Brand MD (2002): Superoksiid aktiveerib mitokondriaalseid lahtisiduvaid valke. Loodus 415: 96–99.

Evans WH (1992): Membraanide ja rakuorganellide isoleerimine ja iseloomustamine. In: Rickwood D, toim., Preparative Centrifugation. Praktiline lähenemine. New York, Oxford University Press, lk 233–270.

Garvey WT (2003): Valgu 3 lahtiühendamise roll inimese füsioloogias. J Clin Invest 111: 438–441. Griffith OW (1980): glutatiooni ja glutatiooni disulfiidi määramine glutatioonreduktaasi ja 2-vinüülpüridiini abil.

Anal Biochem. 106: 207-212. Grover GJ, Dzwonczyk S, Sleph PG (1990): Ruteenipunane parandab postheemilist kontraktiilset funktsiooni isoleeritud roti südametes. J Cardiovasc Pharmacol. 16: 783–789.

Hoerter J, Gonzalez-Barroso MD, Couplan E, Mateo P, Gelly C, Cassard-Doulcier AM, Diolez P, Bouillaud F (2004): transgeensete hiirte südames ekspresseeritud mitokondriaalne lahtiühendamisvalk 1 kaitseb isheemilise-reperfusioonikahjustuse eest. Tiraaž 110: 528–533.

Javadov S, Huang C, Kirshenbaum L, Karmazyn M (2005): NHE-1 inhibeerimine parandab mitokondriaalse läbilaskvuse üleminekut ja hingamisfunktsiooni infarktijärgse ümberkujundamise ajal rottidel. J Mol Cell Cardiol 38: 135-143.

Kuwabara M, Takenaka H, ​​Maruyama H, Onitsuka T, Hamada M (1997): Pikaajalise hüpotermilise isheemia ja reperfusiooni mõju hapnikutarbimisele ja kogu mehaanilisele energiale roti müokardis: mitokondriaalse oksüdatiivse fosforüülimise osalemine. Transplantation 64: 577–583.

Lemasters JJ, Nieminen AL, Qian T, Trost LC, Elmore SP, Nishimura Y, Crowe RA, Cascio WE, Bradham CA, Brenner DA, Herman B (1998): Mitokondriaalse läbilaskvuse üleminek rakusurmas: tavaline nekroosi mehhanism, apoptoos ja autofagia. Biochim Biophys Acta 1366: 177–196.

Leung HY (2006): Herba Cistanche mõju mitokondriaalsele ATP tekkele: "Yang-invigoration" farmakoloogiline alus. MPhil Thesis, Hongkongi teadus- ja tehnoloogiaülikool, lk 67–69.

Leung HY, Ko KM (2008): Herba Cistanche ekstrakt suurendab mitokondriaalset ATP teket roti südametes ja H9C2 rakkudes. Pharma Biol. 46: 418-424.

Menze MA, Hutchinson K, Laborde SM, Hand SC (2005): Mitokondriaalse läbilaskvuse üleminek koorikloomades Artemia franciscana: kaltsiumiga reguleeritud pooride puudumine kaltsiumi põhjaliku ladustamise taustal. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 289: R68–R76.

Redegeld FA, Moison RM, Koster AS, Noordhoek J (1992): ATP, kuid mitte GSH vähenemine mõjutab roti hepatotsüütide elujõulisust. Eur J Pharmacol. 228: 229–236.

Teshima Y, Akao M, Jones SP, Marban E (2003): Valgu lahtiühendamine{1}} üleekspressioon pärsib mitokondriaalset surma rada kardiomüotsüütides. Circ Res 93: 192–200.

Yim TK, Ko KM (2002): Hiina toniseerivate ürtide antioksüdant ja immunomoduleeriv toime. Pharm Biol. 40: 329-335.