Looduse sõrmejäljed – kõrvenõgese taimekristallide koostise naha läbitungimise analüüs

Abstraktne:

Taust: Taimsed kristallid on uus kontseptsioon taimsete preparaatide valmistamiseks. Nende põhimõte põhineb taimede osade või tervete taimede vähendamisel. Selles uuringus uuriti pindaktiivse aine mõju kõrvenõgese lehtedele PlantCrystals. Teiseks võrreldi puistematerjali ja PlantCrystalsi koostist. Lisaks uuriti esimest korda PlantCrystalsi läbitungimist läbi naha.

Meetodid: kõrvenõgese lehed jahvatati kõrgsurvehomogeniseerimisega. Suurusi analüüsiti valgusmikroskoopia ja staatilise valguse hajumise abil. Jahvatamise mõju uurimiseks määrati flavonoidide ja karotenoidide üldsisaldus ning preparaadi antioksüdantide võime mõõdeti polüfenoolide üldsisalduse ja DPPH (1,1-difenüül-2-pikrüülhüdrasüül) testiga. .

Lõpuks uuriti mõju naha tungimisele. Tulemused: Suuruse analüüs näitas pindaktiivse aine stabiliseerivat toimet ja keemiline analüüs näitas PlantCrystalsi suuremat flavonoidide ja polüfenoolide sisaldust. Preparaadi tungimine sarvkihti osutus paljulubavaks; PlantCrystalsil oli puistematerjaliga võrreldes visuaalselt suurem fluorestsents ja homogeensus. Järeldus: PlantCrystalsi kontseptsioon parandas väärtuslike koostisosade kättesaadavust ja läbitungimisvõimet. Loodusliku klorofülli fluorestsentsi kasutamine taimsete preparaatide naha läbitungimise analüüsiks osutus väga tõhusaks.

Nahk on inimkeha üks suuremaid organeid ja selle vananemismärgid ilmnevad järk-järgult koos vanusega. Naha vananemist iseloomustab naha kuivus, kortsude suurenemine ja elastsuse vähenemine. Cistanche sisaldab suurel hulgal flavonoide ja polüsahhariide, neil on oksüdatsiooni-, põletiku-, antioksüdatiivse stressi- ja muud toimed ning need võivad ennetada ja tagasi pöörata naha vananemist.

Cistanche koostises olevad flavonoidid võivad pärssida vabade radikaalide teket ja eemaldamist, vähendada oksüdatiivse stressi kahjustusi naharakkudele, kaitsta naharakke ja aeglustada naha vananemisprotsessi. Uuringud on näidanud, et Cistanche koostises olevad polüsahhariidid võivad stimuleerida naharakkude kasvu ja jagunemist ning suurendada naha elastsust ja läiget.

Click cistanche deserticola toidulisand

Märksõnad:

antioksüdandid; Vananemisvastane; Taimekristallid; urtica dioica; naha tungimine.

1. Sissejuhatus

Igavene noorus ja ilu on inimkonnale alati olnud ihaldusväärsed ning katsed neid saavutada on toimunud iidsetest aegadest peale. Tänaseks on see idee tõlgitud vananemisvastasteks strateegiateks. Eesmärk ei ole enam üldise tervise säilitamine kogu aeg, vaid pigem terve keha igakülgne toetamine ja vanusega seotud metaboolsete mehhanismide edasilükkamine [1,2]. Kosmeetilisest vaatenurgast on vananemisvastane toime valdavalt seotud inimese naha visuaalse tajumisega, sest vananemist on lihtne ära tunda, nt kortsud või naha lõtvumine [1,3].
Sellegipoolest ei tohiks nahka vaadelda ainult kosmeetilisest vaatepunktist; see on suurim organ ja barjäär keha ja välismaailma vahel [4]. Terve ja terve nahk on seetõttu oluline ka meditsiinilisest vaatenurgast. Fotovananemine (UV-valgusega kokkupuude) on kõige sagedamini tuntud kui eksogeenne tegur, mis vastutab naha vananemise eest koos muude teguritega, nt suitsetamine või õhusaaste [5]. Need tegurid on sageli ise oksüdeerijad või kutsuvad esile protsesse, mis on sageli seotud reaktiivsete hapnikuliikide (ROS) tootmisega [1,6].

Veelgi enam, kahjustatud sarvkiht (SC), mille barjäärifunktsioon on kadunud, võib põhjustada ROS-i teket, kahjustades seega rakualuseid kihte, mille tulemuseks on näiteks ulatuslik vananemine, põletik või nahavähk. Seetõttu võib antioksüdantide viimine nahka edasi lükata või ära hoida ROS-i kahjustavat toimet, tugevdada SC-d ja suurendada selle kaitsefunktsiooni [7,8]. Tänapäeval on oma populaarsust tõstnud antioksüdantide vananemisvastane toime ning tarbijate nõudmised ei ole keskendunud ainult toote efektiivsusele ja hinnale, vaid ka jätkusuutlikkusele [9]. Hiljutised uuringud on näidanud, et taimseid materjale saab jätkusuutlikult rafineerida anodeerimisega, mis võib stimuleerida avastamata potentsiaali [10–12].

Nende tulemuste põhjal on PlantCrystals uus kontseptsioon taimede töötlemiseks, vähendades kogu materjali madalamasse mikro- või isegi nanosuuruste vahemikku, ilma et oleks vaja orgaanilisi lahusteid või orgaanilisi jäätmeid. Teine PlantCrystalsi eelis võrreldes tavaliste ekstraktidega on orgaanilise materjali rakkude lagunemine. See viib kasutatud materjalist kõigi toimeainete vabanemiseni ja nende säilimiseni preparaadi sees. Vastupidi, ekstrakt on piiratud ühe või osaga sarnaste keemiliste omadustega koostisosadest (nt vees või etanoolis lahustuv). Sellest lähtuvalt kasutati selles uuringus kõrvenõgese (SN) lehti (Urtica dioica), mida nimetatakse ka "ürtide kuningannaks", taimekristallide tootmiseks ja kanti nahale [13].

Tavaliselt tuntakse SN-i diureetikumina, kuid farmatseutiline toime ei piirdu sellega. SN-ile võib omistada palju kasu tervisele ja seda uuritakse endiselt paljude farmakoloogiliste mõjude osas, nt antioksüdantne, antimikroobne, antimitootiline, valuvaigisti, põletikuvastane ja vähivastane [14,15]. Võttes arvesse nahka kui sihtmärki, on SN-l suur hulk kasulikke toimeid omavaid koostisosi, nt klorofüll, karotenoidid ja polüfenoolid [15,16]. Kirjanduses on kirjeldatud mitmeid soodsaid farmakoloogilisi omadusi pärast SN-ekstraktide nahale manustamist, nt põletikuvastane ja antioksüdatiivne [17].

Siiani pole PlantCrystalsi kunagi nahale kantud ega analüüsitud. Kuna PlantCrystalle saab toota lugematu arvu taimedega, oleks kasulik analüüsida, ilma et oleks vaja iga proovi jaoks individuaalset meetodit. Selle probleemi lahendamiseks kasutati ühte, mis on enamikul taimedel ühine: klorofüll (a ja b) (joonis 1). Klorofülli fluorestsents on hästi tuntud ja seda on uuritud [18]. Kui histoloogilistes lõikudes on piisavas koguses tunginud klorofülli, mida saab ära tunda fluorestsentsmikroskoopia abil, saab taimsete preparaatide läbitungimist nahale hõlpsasti analüüsida.

Selle uuringu põhieesmärk oli SN PlantCrystalsi koostise väljatöötamine nahakaudseks manustamiseks ja SC läbitungivuse hindamine. SN-i ei olnud varem Taimekristallideks töödeldud; järelikult oli esimene eesmärk luua protsess, mis suudab jämedat materjali vähendada alumisse mikromeetrisse või isegi väiksemasse suurusvahemikku. Lisaks hinnati täiendava pindaktiivse aine mõju saadud suurustele ja preparaadi aglomeratsioonile. Teiseks uuriti lahtist suspensiooni ja SN PlantCrystalle erinevate testidega, et võrrelda polüfenoolide, flavonoidide ja karotenoidide sisaldust ning antioksüdantide võimet. Abraham et al. näitas juba, et vähenemise mõju tegevusele sõltub valitud tehasest ja tootmisprotsessist [11]. Seetõttu on töödeldud materjali ja puistematerjalide võrdlemine vältimatu, et tõestada, et rakendatud protsess on valmistatud tehasele kasulik. Pärast nende eeltingimuste saavutamist kontrolliti nahale manustamist uue "looduse sõrmejälje" kontseptsiooniga, tuvastades SC läbitungimise hindamiseks loodusliku klorofülli fluorestsentsi. See tooks kaasa meetodi, mis võimaldab kiiret, lihtsat ja kulutõhusat võimalust hinnata taimsete preparaatide nahka tungimist.

2. Materjalid ja meetodid

2.1. PlantCrystali tootmine

Mahepõllumajandusliku kvaliteediga kuivatatud SN-lehti pakkus lahkelt Blank's GmbH and Co. KG (Uplengen, Saksamaa) (joonis 2A). Jäme materjal vähendati kohviveski (CM) (CG9100, AICOK, Guangdong, Hiina) abil, et saada pulbriline proov edasiseks töötlemiseks. Seejärel dispergeeriti pulbriline proov (joonis 2B) vees kontsentratsiooniga 3 massiprotsenti. Lisaks valmistati proov, mis sisaldas 3% (w/w) FDA poolt heaks kiidetud pindaktiivset ainet TPGS (-tocopherol Polyethylene Glycol Succinate, Gustav Parmentier GmbH, Frankfurt a. M., Saksamaa). Mõlemat proovi segati üleöö toatemperatuuril, et lasta osakestel paisuda paremaks töödeldavuseks ja tagada, et hiljem suurus ei muutu (CM pluss S).

Järgmises etapis deaglomereeriti proovid Ultra-Turraxiga (T 25 digital, IKA-Werke GmbH & Co. KG, Staufen, Saksamaa) ühe minuti jooksul, suurendades pöörlemiskiirust 3000-lt 25-le,{ {11}}. Järgmine eeljahvatamise etapp viidi läbi Miccra D27-ga (MICCRA GmbH, Heitersheim, Saksamaa), et veelgi vähendada suuremate osakeste suurust. Proove töödeldi neli korda kasvava pöörlemiskiirusega 5 minuti jooksul pööretega 7000, 12, 000, 18 000 ja 24 000 pööret minutis.

Osakeste lõplik vähendamine viidi läbi kõrgsurvehomogeniseerimise (HPH) abil LAB 40-ga (APV Gaulin, Lübeck, Saksamaa) 500, 750, 1000 ja 1500 baari juures, igaüks viis korda (joonis 2C). Sisuanalüüsi jaoks analüüsiti ilma TPGS-ita proove, et välistada TPGS-i mõju mõõtmiste ajal või toimeainete võimalik täiendav ekstraheerimine või kaitse TPGS-i mitselli koostisest [19]. Naha läbitungimise uuringutes kasutati TPGS-i sisaldavaid proove, et tagada PlantCrystalsi koostise hea märguvus ja levitavus. Kontrollina, et näidata vähenemise mõju, kasutati sama kontsentratsiooniga üleöö paisunud SN-lehtede lahtist suspensiooni (joonis 2A).

2.2. Osakeste suuruse analüüs

Proovide visuaalseks uurimiseks kasutati valgusmikroskoopiat (Olympus BX53, Olympus Cooperation, Tokyo, Jaapan). Täiendav osakeste suuruse analüüs viidi läbi staatilise valguse hajumise abil (SLS, Mastersizer 3000, Malvern Instruments, Kassel, Saksamaa), mille murdumisnäitaja oli 1,47 ja neeldumisnäitaja 0,01. Tulemused arvutati mahulise (D(v)) ja numbrilise (D(n)) jaotusena. Mahupõhine suurusjaotus on D(v)0.x tähendab, et x protsenti kogumahust (kõikide osakeste summeeritud maht) on esindatud osakestega, mille suurus on võrdne antud arvuga või sellest väiksem.

Seetõttu rõhutab D (v) väärtus suuremaid osakesi astmega kolm ja on oluline suurte aglomeraatide ja osakeste kontrollimiseks. Numbripõhine suurusjaotus D(n)0,x tähendab, et x protsenti osakestest on võrdne antud väärtusega või sellest väiksem. D(n)-väärtus on nahauuringu seisukohalt väga oluline, kuna see rõhutab proovis olevate osakeste suuruse põhiosa, mis on peamiselt seotud läbitungimisprotsessiga. Mahuliste ja numbriliste tulemuste kombinatsioon peaks andma täiendava ülevaate proovi töötlemisest ja pindaktiivse aine mõjust suurte osakeste fraktsioonidele (D (v)) ja põhiosakeste fraktsioonile (D (n)).

2.3. Polüfenooli kogusisaldus

Proovide polüfenoolide üldsisalduse ja seejärel antioksüdantse võime hindamiseks kasutati Folin-Ciocalteu kolorimeetrilist analüüsi [20]. Esiteks segati 100 µL SN suspensiooni 200 µL Folin-Ciocalteu reagendiga (Merck KGaA, Darmstadt, Saksamaa) ja 2 ml puhastatud veega ning seejärel inkubeeriti toatemperatuuril 5 minutit. Pärast seda lisati 1 ml 20% (mass/maht) Na2CO3 ja inkubeeriti pimedas 1 tund. Lõpuks mõõdeti saadud reaktsioonisegu spektroskoopiliselt 765 nm juures (Multiskan GO, Thermo Scientific, Dreieich, Saksamaa). Sisaldus arvutati standardina gallushappe kohta ja tulemused on väljendatud gallushappe ekvivalendina (mg GAE).

2.4. Flavonoidide sisaldus

Flavonoidide sisalduse määramiseks kasutati alumiiniumkompleksi moodustumise reaktsiooni, mis on laialt kasutatav spektrofotomeetriline meetod erinevate flavonoidühendite määramiseks toidu- ja taimeproovides [21]. Lisaks lisati 100 µL igat lahjendatud suspensiooni 100 µL 2-protsendilisele (mass/maht) AlCl3 etanooli lahusele 96-süvendiga plaadil ja inkubeeriti pimedas 1 tund. Seejärel mõõdeti proovide neeldumist lainepikkusel 420 nm. Sisalduse arvutamisel kasutati standardset kvertsetiini (Biomol GmbH, Hamburg, Saksamaa) ja tulemused on väljendatud kvertsetiini ekvivalendina (µg QE).

2.5. Karotenoidide kogusisaldus

Proovide karotenoidisisaldus määrati karotenoidi spektraalse neeldumise mõõtmisega kindlal lainepikkusel, kasutades Rodriguez-Amaya järgset meetodit [22]. Iga proovi neeldumist mõõdeti 450 nm juures. Arvutamisel kasutati karoteeni standardkõverat (TCI Deutschland GmbH, Eschborn, Saksamaa) ja tulemused on väljendatud µg-karoteeni ekvivalendina (µg CE).

2.6. Antioksüdantne toime

Antioksüdantide võimet hinnati DPPH testiga, mis kasutab indikaatorina 1,1-difenüül2-pikrüülhüdrasüüli (DPPH) vabu radikaale [23]. Lühidalt, valmistati 0,2 mM DPPH metanoolilahus (Sigma-Aldrich Corporation, St. Louis, MO, USA) ja 100 µL lahjendatud proove lisati 96-süvendiga plaadile ja segati 100 µL DPPH lahusega. Plaati inkubeeriti pimedas 30 minutit ja neeldumist mõõdeti lainepikkusel 517 nm [23]. Vabade radikaalide eemaldamise aktiivsus arvutati järgmise võrrandi järgi:

kus protsent RSA on radikaali eemaldamise aktiivsus protsentides, ADPPH on DPPH neeldumine ja proov on proovi neeldumine. Proovi kontsentratsioonid ja neile vastav RSA protsent kanti graafikule, et arvutada IC50 väärtus.

2.7. Statistiline analüüs

Andmete statistiline analüüs tehti GraphPad Prism® tarkvaraga (v. 8.3, GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA, USA) ja võrdluseks kasutati paaris-t-testi, kus p-väärtused < {{4 }}.05 loeti statistiliselt oluliseks.

2.8. Naha läbitungimise määramine

Naha läbitungimise uuring viidi läbi värskete seakõrvadega, mis saadi kohalikust tapamajast lihatootmise kõrvalsaadusena. Seakõrvu kasutatakse ex vivo nahamudelina sea- ja inimesenaha sarnasuse tõttu [24–26]. Pärast puhastatud veega puhastamist ja hoolikat kuivatamist paberrätikutega kanti 50 mg igast proovist 2 × 2 cm uurimisalale. Seejärel masseeriti preparaate nahka 1 minuti jooksul, kasutades küllastunud kinnast [27]. Kõiki proove inkubeeriti 32 °C juures 6 tundi ja nahapinda pühiti ettevaatlikult märgade paberrätikutega, et eemaldada proovijäägid.

Seejärel võeti 15 mm läbimõõduga punch-biopsiad, sisestati Tissue-Tek®-i (Sakura Finetek Europe BV, Alphen aan den Rijn, Holland) ja külmutati kohe temperatuuril –80 ◦C. Krüolõikamine 20 µm paksustes vertikaalsetes lõigetes viidi läbi krüo-mikrotoomiga (Mod. 2700, Reichert-Jung, Nußloch, Saksamaa). Kõikide lõigete fluorestsentskujutised viidi läbi kaameraga Olympus CKX53 (Olympus, Jaapan), mis oli varustatud Olympus U-HGLGPS valgusallika ja 200-kordse suurendusega. Fluorestsentsvalgusallika intensiivsus määrati 50 protsendile. Säriaeg hoiti kõigi piltide puhul konstantsena 50 ms. Analüüsiks valiti DAPI HC filtriplokisüsteem (ergastusfilter: 540–560 nm, dikroonne peegel: 570 nm, emissioonifilter: alates 580 nm (LP)).

3. Tulemused ja arutelu

3.1. Taimsete kristallide tootmine ja osakeste suuruse analüüs

Taimekristallide valmistamine jämedast SN-lehest puistematerjalist oli edukas. HPH tulemuseks olid väga väikesed osakesed ja valgusmikroskoopia abil ei täheldatud ühtegi tervet rakku. Ilma täiendava stabiliseerimiseta töödeldud proovide (joonis 3A) ja TPGS-i (joonis 3B) kui pindaktiivse ainena ei olnud pärast valgusmikroskoopilist uurimist võimalik visuaalselt täheldada. TPGS-i kui pindaktiivse ainena kasutava proovi puhul võis tajuda ainult veidi madalamat aglomeratsiooni tendentsi.

Mahupõhine osakeste suuruse analüüs SLS-i abil näitas, et jahvatusprotsess suutis vähendada suurusi mitmelt 100 µm-lt madalamale kahekohalisele µm suurusevahemikule (D(v){{8 }}.50). Proovide võrdlus näitas, et pindaktiivsel ainel oli äratuntav mõju jahvatatud ja paisunud proovile (CM pluss S). Võib tuvastada, et ilma pindaktiivse aineta proovil oli sama D(v)0.{5}}väärtus kui TPGS-iga stabiliseeritud proovil (joonis 4), kuid suuremate D(v) väärtuste korral olid suurused ligikaudu kahekordsed. . Kuna mõlemad proovid koosnesid ja neid töödeldi identselt, välja arvatud pindaktiivse aine lisamine, näitab see, et TPGS suutis paisumise ajal vältida suuremaid proovide aglomeratsioone. Töödeldud proovid näitasid sarnaseid tulemusi kõigi D(v)-väärtuste puhul, välja arvatud D(v)0,99, mida võib tõlgendada TPGS-ga stabiliseeritud proovi tugeva aglomeratsiooni märgina (joonis 4). Sellegipoolest tuleb arvestada, et D(v)0,99 on märkimisväärselt muutuv ja mitte alati kõige usaldusväärsem parameeter, kuna üks või väga vähesed suuremad osakesed võivad nt proovi ettevalmistamise tõttu oluliselt mõjutada [28].

Saadud suurused on väga paljulubavad võrreldes Abrahami jt lehepõhise materjaliga saavutatud tulemustega. [11]. SLS-i mõõtmised andsid PlantCrystalsi lõpliku koostise jaoks peaaegu samad suurused ja suurusjaotused. Selle uuringu võimalik puudus võrreldes Abraham et al. seisneb selles, et eeljahvatamine ei olnud käesolevas uuringus nii tõhus ja kasutati Miccra D27, mis tõi proovi palju soojust ja õhku. Teisest küljest oli osakeste lõplik vähenemine HPH poolt selles uuringus leebem, kuna HPH tsüklite arv vähenes 18 tsüklilt 15 tsüklilt rõhuga alla 1000 baari ja 10 tsüklilt 5 tsüklile rõhuga. 1500 baari [11]. Mõlemas uuringus PlantCrystalsi jaoks saadud sarnased suurused viivad seega huvitava teooriani: rakendati kahte tohutult erinevat protsessi ja peale selle kasutati kahte erinevat pindaktiivset ainet (või mitte ühtegi), kuid lõpuks saadi sarnased suurused. See toob kaasa eelduse, et taimse materjali vähenemine HPH kaudu on teatud määral piiratud. Vähemalt SN-lehtede (käesolev uuring) ja salvei/lauralehtede (Abraham et al.) puhul näivad näidustused olevat väga tugevad ja neid tuleks tulevastes uuringutes uurida [11].

Üldiselt näitavad mõlemad uuringud, et HPH on taimekristallide tootmisel väga tõhus, kuid eeljahvatamine on vältimatu, et vältida kolvivahe ummistumist. Tootmisprotsessi optimeerimiseks on veel potentsiaali, mis ühest küljest peaks olema kõige tõhusam, kuid teisest küljest tooma proovi võimalikult vähem soojust ja õhku, et säilitada võimalikult palju koostisosi. .

Numbriline suurusjaotuse analüüs näitas taas, et paisunud proov sisaldas veidi suuremaid pindaktiivse aineta proovide suurusi võrreldes TPGS-i sisaldavate proovidega (joonis 5). Töödeldud valimi suurused olid väiksemate Dväärtuste (D(n)0.10 ja D(n)0.50 puhul sarnased ning suuremate Dväärtuste puhul võis tuvastada suuri erinevusi ( D(n)0,99.

Protsessist, pindaktiivse aine toimest ja saadud töödeldud proovidest parema ülevaate saamiseks tuleb läbi mõelda ja kombineerida kõik suurusanalüüsid (D(v), D(n), valgusmikroskoopia). Üldiselt ei saa SLS-i mõõtmise seadistus teha vahet ühel suurel osakesel ja osakeste aglomeratsioonil. Võimalik on teha täiendav Joonis 5. Töötlemata ja töödeldud SN-proovide arvuline suurusjaotus. Üleval vasakul: ilma pindaktiivse aineta. All, vasakul: pindaktiivse ainega. Paremal: vastavate PlantCrystalsi proovide tulemused on parema visualiseerimise ja võrdlemise jaoks muudetud. Protsessist, pindaktiivse aine toimest ja saadud töödeldud proovidest parema ülevaate saamiseks tuleb läbi mõelda ja kombineerida kõik suurusanalüüsid (D(v), D(n), valgusmikroskoopia). Üldiselt ei saa SLS-i mõõtmise seadistus teha vahet ühel suurel osakesel ja osakeste aglomeratsioonil. Aglomeratsioonide kontrollimiseks on võimalik teha täiendavaid mõõtmisi, kui aglomeratsioon ei ole liiga tugev ja seda saab lagundada, nt segamiskiirust muutes või ultraheliga [29,30].

Sellegipoolest ei kasutata neid protseduure sageli ja on võimalik, et need ei anna soovitud mõju. Kiire ja lihtne lahendus on valgusmikroskoopia kasutamine, mis võimaldab kiiret oletust ka kitsaste linnastute puhul. Mikroskoopilise analüüsi osas võis tõdeda, et ilma TPGS-ita proovi puhul olid aglomeratsioonid tumedamad ja üldiselt tundus proov hägune. Teisest küljest tundusid mõlema proovi üksikud osakesed olevat samas suurusjärgus (joonis 3). See tähendab, et erinevused SLS-i mõõtmiste suuruses on kõige tõenäolisemalt seotud aglomeratsiooniga, mitte osakeste "tegeliku" suurusega.

SLS-i andmete tõlgendamiseks on oluline teada, et D(v)-väärtused esindavad ja rõhutavad suuremaid osakesi eksponentsiaalselt kolme astmega, samas kui D(n)-väärtus esindab osakeste kogust. 28]. Tulemuste võrdlemiseks määrati D-väärtuste suhe, jagades ilma pindaktiivse aineta proovi D(v)- või D(n)-väärtuse vastava D-väärtusega koos täiendava pindaktiivse ainega (tabel 1). Suhe, mis on suurem kui 1.{{10}} tähendab, et pindaktiivsel ainel oli stabiliseeriv toime, samas kui suhe alla 1.0 viitab destabiliseerivale toimele ja suhe 1,0 täpselt näitab mõju puudumist.

Kuivjahvatatud ja paisunud proovi (CM pluss S) puhul näitab D(v)- väärtuse suhte tugev tõus, et TPGS-iga saab ära hoida eelistatult suuri aglomeraate, samas kui D(n)- väärtuse konstantne suhe. väärtus näitab, et TPGS-iga stabiliseerimisel oli väiksematele aglomeraatidele või üksikutele osakestele vaid väike mõju. Töödeldud proovide puhul võib täheldada vastupidist; D(v)-väärtuse suhe on peaaegu konstantne, kuid D(n)-väärtuse suhe suureneb kõrgemate D(n)-väärtuste korral. See tähendab, et töödeldud proovide puhul tekivad suuremad aglomeraadid TPGS-ga ja ilma (D(v)). Teisest küljest pärssis pindaktiivne aine üksikute osakeste aglomeratsiooni ja ka suuri agregatsioone sai vähemalt teatud määral vähendada (D(n)).

Kokkuvõttes võib kokku võtta, et TPGS-il kui pindaktiivsel ainenal ei olnud suurt mõju suurusele ega suurusjaotusele, kuid mõju võib ära tunda. PlantCrystalsi preparaadi isestabiliseerivat toimet ei täheldatud. Vastupidi, PlantCrystalsi koostisele tuli kasuks pindaktiivse aine lisamine. HPH tõestas end taas väga tõhusa tehnikana PlantCrystalsi preparaatide tootmisel ja suutis vähendada põhiosakeste suurust soovitud vahemikku 1 µm ümber või alla selle. See nõuab aga ulatuslikke eelfreesimisetappe, et vältida masina ummistumist ja seda ei saa kasutada eraldiseisva tehnikana [11].

3.2. Sisuanalüüsi ja antioksüdantide võimekuse (AOC) uuringud

Selles jaotises analüüsiti esialgset töötlemata proovi (lahtise suspensiooni) ja PlantCrystalsi, et uurida jahvatamise mõju SN-i bioaktiivsetele ainetele, eriti antioksüdantidele. SN on hästi tuntud oma polüfenoolide, flavonoidide ja karotenoidide sisalduse poolest, millel on suur kasu tervisele. Neil on antioksüdantne, põletikuvastane ja kasvajavastane toime, aga ka palju muid toimeid [23,31,32].

Lisaks sisaldab see suures koguses klorofülli, millel on märkimisväärne antioksüdantne ja antimutageenne toime; lisaks saab seda kasutada aknevastase ja kudesid stimuleeriva ainena [33,34]. Kõik need bioaktiivsed ained võivad olla suurepäraseks looduslikuks toeks SC barjäärifunktsiooni tugevdamiseks. Viidi läbi mitmeid spektrofotomeetrilisi uuringuid, et uurida jahvatamistehnikate mõju SN-i sisaldusele ja antioksüdantidele. Flavonoidide ja karotenoidide sisaldust mõõdeti enne ja pärast jahvatamist. Lisaks kasutati antioksüdandi võime hindamiseks polüfenoolide kogusisaldust ja DPPH testi. Kõik sisuanalüüsi ja analüüside tulemused on kuvatud tabelis 2.

Eeldati, et vähendamine parandab taimsete koostisosade kättesaadavust taimerakkude hävitamise kaudu, mille tulemuseks peaks olema toimeainete edasine vabanemine, parandades seega preparaadi farmakoloogilist potentsiaali. Sellega kooskõlas täheldati flavonoidide sisalduse olulist paranemist (p-väärtus=0,0165). Puistematerjali puhul oli väärtus 107 ± 2 µg QE ja PlantCrystalsi suspensiooni puhul sai seda parandada 288 ± 38 µg QE-ni.

Seetõttu võib väita, et HPH põhjustab SN PlantCrystalsi flavonoidide saadavuse kahekordistumist võrreldes hulgimüügiga. See täiustus on eriti oluline PlantCrystalsi tehnika tõhususe rõhutamiseks, kuna SN-i flavonoide nagu ursoolhapet ja kvertsetiini peetakse kõige olulisemateks toimeaineteks, mis vastutavad SN-i vananemisvastase toime eest nahal. See toime põhineb koostisosade võimel inhibeerida elastaasi ja kollagenaasi [17]. Lisaks toetas flavonoidide sisalduse paranemist hüdrofiilse keskkonna kasutamine PlantCrystalsi preparaadis nagu Bourgeois et al. näitas hüdrofiilse ekstrakti paremust antioksüdantide ja vananemisvastaste toimete osas [17].

Saadud tulemused karotenoidide üldsisalduse kohta ei näidanud pärast homogeniseerimisprotsessi olulist paranemist. Selle võimalikuks põhjuseks on kokkupuude kuumuse, õhu ja valgusega tootmise ajal, lisaks preparaadi hüdrofiilsusele, mis ei pruugi toetada lipofiilsete toimeainete, näiteks karotenoidide, vaba kättesaadavust [22].

Polüfenoolid on hästi tuntud oma laiendatud tervisega seotud eeliste poolest antioksüdantide, antimikroobsete, põletikuvastaste, haavandivastaste, kasvajavastaste ainete ja paljude muude mõjudena [35–37]. SN-i peetakse erinevat tüüpi polüfenoolide, nagu gallushape, kohvhape, feruulhape, kvertsetiin ja rutiin, rikkalikuks allikaks [36,38]. Polüfenoolisisalduse analüüs tehti koostise paremaks mõistmiseks. Seda analüüsi peetakse ka antioksüdantide võimekuse testiks ja sellega saab mõõta samaaegselt hüdrofiilseid ja lipofiilseid polüfenoole [39]. Võrreldes flavonoidide sisalduse tulemustega, võib polüfenoolide üldsisaldust oluliselt parandada (p-väärtus=0,0013). PlantCrystalsi proov näitas puistematerjaliga võrreldes 65 protsenti kõrgemat sisaldust. Seda tugevat kasvu ei osatud oodata, sest varasemad Abrahami jt uuringud. näitas ainult argaaniaseemnete homogeniseerimist 1,1 protsenti [11]. Selle põhjuseks võivad olla taimede erinevad antioksüdandid: st SN on rikas hüdrofiilsete antioksüdantide ja klorofülli poolest, argaaniaseemned aga sisaldavad peamiselt lipofiilseid antioksüdante.

DPPH testi tulemused näitasid, et preparaadi IC50 väärtust ei saa PlantCrystalsi tehnoloogia abil parandada. DPPH test on tõhus antioksüdantide analüüs, mida tavaliselt kasutatakse kirjanduses, kuid sellel on peamine puudus seoses karotenoidi- ja klorofüllirikaste preparaatidega. Nende koostisosade olemasolu kattub fotomeetriliselt DPPH mõõtmisega, mis toob kaasa valepositiivse näidu. See kattumine võib seletada PlantCrystalsi preparaadi ootamatult kõrget IC50 väärtust. Seda ei osatud oodata, kuna varasemad PlantCrystalsi koostised saavutasid alati DPPH testiga analüüsitud AOC paranemise [10, 11, 40].

Kokkuvõtteks võib öelda, et HPH suutis polüfenoolide mõõtmise abil suurendada flavonoidide sisaldust ja AOC-d, kuid mitte karotenoidisisaldust ja AOC-i mõõtmist DPPH-testi abil. Ühest küljest võib osakeste suuruse vähendamisele omistada võimalikke parandusi, mis tooks kaasa suurema pinna ja järelikult aktiivsete ainete parema difusiooni ja kättesaadavuse. Taimerakkude hävitamine HPH-ga toob kaasa ka aktiivsete koostisosade parema vabanemise.

Teisest küljest mõjutab kahandamistehnika koostisainete füüsikalis-keemilist stabiilsust. Selles uuringus kasutatud protsessid tõid preparaati teatud määral soojust ja õhku, mis võib viia tundlike koostisosade kadumiseni, nt oksüdatsiooni tõttu. Valguse eest kaitsmine, sobiv jahutamine ja proovi steriliseerimine võiksid olla edasised täiustused PlantCrystals'ide tootmiseks tulevastes uuringutes ja väärtuslike koostisosade parema kaitse tagamiseks.

3.3. Naha läbitungimise määramine

Selle uuringu viimases osas uuriti SN puiste- ja PlantCrystalsi suspensioonide läbitungimiskäitumise võrdlust. Fluorestsentsmikroskoopia võimaldas SN-i lehtede proovi visualiseerimist nahal, jälgides klorofülli tüüpide a ja b tungimist. SN on tuntud nende looduslike värvainete suurte koguste poolest, mis vastutavad taime rohelise värvuse eest. Mõlemad ained võivad neelata sinist (400–420 nm) ja punast valgust (640–680 nm), mille tulemuseks on klorofülli fluorestsents umbes 690 ja 740 nm juures [41]. Seda klorofülliga fluorestseeritud punast valgust saab jälgida fluorestsentsmikroskoopia abil.

SN-i lehtede proovide naha läbitungimise uuringu tulemused on näidatud joonisel 6. Algselt viidi naha autofluorestsents miinimumini (joonis 6A). Tuleb mainida, et isegi töötlemata puistematerjalist saadud klorofüll näitas SC-s visuaalselt tuvastatavat fluorestsentsi. Siiski on naha tungimine ebaühtlane ja ebaühtlane (joonis 6B). PlantCrystalsi koostis näitas SC-s ühtlasemat ja visuaalselt tajutavat kõrgemat fluorestsentsi (joonis 6C).

Tuleb rõhutada, et taimse materjali kontsentratsioon on sama ning peamine erinevus on osakeste suurus ja hävinud taimerakkude arv. See tähendab, et penetratsiooni erinevusi saab seletada kahe efektiga. Esiteks toob rakkude lagunemine kaasa suurema vabade kloroplastide sisalduse, mille tulemuseks on suurem kontsentratsioon ja sellest tulenevalt suurem kontsentratsioonigradient ning parem läbitungimine [42,43]. Teiseks on PlantCrystalsi preparaadi lahustumatu materjal ja koostisosad palju väiksemad ja see oleks võrreldav nanokristallidelt teadaolevate mõjudega, nt parem adhesioon ja läbitungimisvõime. Lisaks paraneks homogeensus tänu väiksematele osakeste suurusele ja osakeste suuremale kokkupuutepinnale.

Sellegipoolest oli selle uuringu eesmärk SC-sse tungimine ja võib tunnistada, et Taimekristallides ei olnud puistematerjaliga võrreldes visuaalselt täheldatav selget mõju läbitungimissügavusele. Asjaolu, et klorofüll näitas transdermaalset tungimist elavatesse nahapesuritesse isegi pärast HPH-d, on seletatav Lipinski viie reegli rakendamisega molekulile. Seda reeglit kasutatakse algselt ravimite imendumise või läbilaskvuse ennustamiseks pärast suukaudset manustamist. Praegu arutatakse selle reegli kohaldamist seoses ravimi läbitungimise ennustamisega (46).

Selles öeldakse, et ravimi halba läbilaskvust saab ennustada, kui molekuli kohta kehtib rohkem kui üks kriteerium: rohkem kui viis vesiniksideme doonorrühma, vesiniksideme aktseptorrühma, molekulmass üle 500 Da või oktanool-vesi. jaotuskoefitsient (log P väärtus) on suurem kui 5 (47. Klorofüll a ja b vastavad lisaks vesiniksideme doonorrühmadele (joonis 1) kõigile nimetatud kriteeriumidele (joonis 1). See viitab molekulide halbadele läbitungimisomadustele per se. Seega võivad PlantCrystals ainult teatud piiril parandavad klorofülli konsistentsi ja naha läbitungimissügavust.Siiski suurendas PlantCrystals tootmine HPH kaudu klorofülli a ja b hulka SC-s.Võib eeldada, et kui klorofüll tungib homogeensemalt ja väljendub SC, satuvad teised suurema läbilaskvusega taimsed toimeained suurel määral nahka.

Arvestades, et SC oli selle uuringu sihtmärk, on PlantCrystalsi tehnoloogia väga paljutõotav ja mitmekülgne koostis, et kasutada ära paljude looduslike ürtide eeliseid naha omadustele. Näiteks on paljudel taimedel niisutav toime, mis on kooskõlas korneoteraapia põhimõtetega, et luua tervem nahk [48, 49]. Lisaks on sellistel komponentidel nagu asendamatud rasvhapped ka positiivsed mõjud, nt tugevdavad ja parandavad nahabarjääri, ning neid saab kasutada isegi läbitungimise parandajatena [50,51]. Kõik need taimse päritoluga toimeainete ja abiainete positiivsed mõjud sisalduvad PlantCrystalsi koostises loomulikult ilma jäätmeid tekitamata.

Üldiselt võib näidata, et fluorestsentsmikroskoopia suudab tuvastada taimsete preparaatide tungimist läbi naha. See pole huvitav mitte ainult teaduslikust vaatenurgast, vaid ka turunduse ja klientide rahulolu jaoks, kuna taimse koostise (nt majapidamises kasutatavad vahendid või nahamaskid) mõju saab lihtsalt tõestada, nt spetsiaalse UV-lambiga. pärast ravi kosmeetikastuudiotes. Teaduslikust vaatenurgast on see meetod väga kiire ja kulutõhus meetod preparaadi efektiivsuse hindamiseks ilma fluorestsentsmarkereid lisamata. Peale selle, et analüüsida saab ainult aktiivseid fluorestsentskomponente (enamasti klorofülli, kuid ka teisi ei saa välistada), saab teha üldise oletuse homogeensuse ja koguse kohta. Veelgi enam, PlantCrystals või taimsete materjalidega nahauuringute puhul võimaldab "looduse sõrmejälje" kontseptsioon analüüsida koostise (nt kasutatud alus (geelid, kreemid jne) või läbitungimist parandavad ained) mõju ilma seda muutmata. algse koostise või kemikaali(de) lisamine.

4. Järeldused

Mõiste "looduse sõrmejälg" tõestas oma väärtust selles uuringus. Looduslikult esineva fluorestseeruva klorofülli tuvastamine sarvkihis saavutati nii PlantCrystalsi kui ka puistematerjalide puhul. SN PlantCrystalsi täiustatud SC läbitungiga preparaadi väljatöötamise põhieesmärk saavutati ja PlantCrystalsi preparaadi SC penetratsioon oli homogeenne võrreldes puistematerjali ebahomogeense tungimisega. Mõiste "looduse sõrmejälg" peaks olema kasulik teistele klorofüllirikastele taimepreparaatidele, kuna see on lihtne ja kiire meetod nende läbitungimise hindamiseks.

Siin esimest korda kirjeldatud SN PlantCrystalsi valmistamise käigus sai jämeda materjali põhiosakeste suurust vähendada alumisse mikrosuuruse vahemikku. TPGS täiendava pindaktiivse ainena takistas teatud määral aglomeratsiooni. PlantCrystalsi täieliku potentsiaali aktiveerimise võti on taimerakkude häirimine, mis saavutati suurusanalüüsi järgi. Seda teooriat rõhutas aktiivsete ainete parem vabanemine ja väljendunud antioksüdantne aktiivsus. Suuremad flavonoidide sisalduse väärtused ja parem AOC, mida mõõdetakse kogu fenoolisisaldust kasutades, teevad SN PlantCrystalsist paljulubava koostise antioksüdatiivseks nahateraapiaks.

Tulevased uuringud peavad tõestama, et need tulemused pole saavutatavad ainult "ürtide kuningannaga". Katsetada tuleks ka täiendavaid AOC mõõtmise meetodeid, et kontrollida nende rakendatavust klorofüllirikaste taimekristallide puhul. Tavaliselt kasutatud DDPH testi, mida ka selles uuringus kasutati, ei saanud kahjuks selles uuringus kasutada kasutatud reaktiivide ning proovi karotenoidi ja klorofülli spektrofotomeetrilise kattumise tõttu.

Autori kaastööd:

kontseptualiseerimine, DK ja CMK; metoodika, DK, RMA ja SW; formaalne analüüs, DK, RMA ja SW; uurimine, DK, RMA ja SW; ressursid, CMK; andmete kureerimine, DK, RMA ja SW; kirjutamine – algse mustandi ettevalmistamine, DK, RMA ja SW; kirjutamine – läbivaatamine ja toimetamine, DK, RMA ja JB; visualiseerimine, DK, RMA ja SW; järelevalve, JB; projektihaldus, CMK; rahastamise omandamine, CMK Kõik autorid on käsikirja avaldatud versiooniga tutvunud ja sellega nõustunud.

Rahastamine:

Tööd rahastati osaliselt ZIM projektist: KF ZF4114903AJ8.

Institutsioonilise ülevaatenõukogu avaldus:

Ei kohaldata.

Teadliku nõusoleku avaldus:

Ei kohaldata.

Andmete kättesaadavuse avaldus:

Kõik käsikirjas sisalduvad andmed.

Tänuavaldused:

Autorid soovivad lahkelt tänada Blank's GmbH & Co.KG-d selles uuringus kasutatud kõrvenõgese proovide annetamise eest. Samuti soovime tänada Udo Bakowskyt, kes andis fluorestsentsmikroskoobi tasuta kasutamise. Autorid tänavad ka Soma Senguptat abi eest mustandite läbivaatamisel. Reem M. Alnemari tänab Saudi Araabia Taifi ülikooli rahalise toetuse eest.

Huvide konfliktid:

Autorid ei kinnita huvide konflikti.

Viited

1. Kohl, E.; Steinbauer, J.; Landthaler, M.; Szeimies, R.-M. Naha vananemine. J. Eur. Acad. Dermatol. Venereol. 2011, 25, 873–884. [CrossRef]

2. Mohiuddin, AK Skin Aging & Modern Edge Anti-Aging Strategies. Int. J. Dermatol. Nahahooldus 2019, 1, 8–62. [CrossRef]

3. Trojahn, C.; Dobos, G.; Lichterfeld, A.; Blume-Peytavi, U.; Kottner, J. Inimeste näonaha vananemise iseloomustamine: välise lahutamine sisemistest bioloogilistest nähtustest. BioMed Res. Int. 2015, 2015, 318586. [CrossRef]

4. Grice, EA; Segre, JA Naha mikrobioom. Nat. Rev. Microbiol. 2011, 9, 244–253. [CrossRef]

5. Cannarozzo, G.; Fazia, G.; Bennardo, L.; Tamburi, F.; Amoruso, GF; Del Duca, E.; Nisticò, SP Uus 675 nm laserseade näo vananemise raviks: perspektiivne vaatlusuuring. Fotobiomoodul. Pildistatud. Laser Surg. 2021, 39, 118–122. [CrossRef] [PubMed]

6. Farage, MA; Miller, KW; Elsner, P.; Maibach, HI Naha vananemise sisemised ja välised tegurid: ülevaade. Int. J. Cosmet. Sci. 2008, 30, 87–95. [CrossRef] [PubMed]

7. Trouba, KJ; Hamadeh, HK; Amin, RP; Germolec, DR Oksüdatiivne stress ja selle roll nahahaigustes. Antioksüd. Redokssignaal. 2002, 4, 665–673. [CrossRef] [PubMed]

8. Lademann, J.; Vergou, T.; Darvin, MINA; Patzelt, A.; Meinke, MC; Voit, C.; Papakostas, D.; Zastrow, L.; Sterry, W.; Doucet, O. Antioksüdantide paikse, süsteemse ja kombineeritud kasutamise mõju inimese naha barjääriomadustele. Skin Pharmacol. Physiol. 2016, 29, 41–46. [CrossRef]

9. Amberg, N.; Fogarassy, ​​C. Roheline tarbijakäitumine kosmeetikaturul. Vahendid 2019, 8, 137. [CrossRef]

10. Griffin, S.; Sarfraz, M.; Farida, V.; Nasim, MJ; Ebokaiwe, AP; Keck, CM; Jacob, C. Pole aega raisata orgaanilisi jäätmeid: nanoseerimine muudab toiduainete töötlemise jäänused rafineeritud materjalideks. J. Environ. Manag. 2018, 210, 114–121. [CrossRef]

11. Aabraham, AM; Alnemari, RM; Jacob, C.; Keck, CM PlantCrystals – nanoseeritud taimne materjal ravitaimede biotõhususe parandamiseks. Materjalid 2020, 13, 4368. [CrossRef]

12. Aabraham, AM; Alnemari, RM; Brüßler, J.; Keck, CM Musta tee jäätmete parem antioksüdantne võimsus, kasutades taimekristalle. Molecules 2021, 26, 592. [CrossRef] 13. Mehegan, MA kõrvenõges – ürtide kuninganna. Alchemical Herbal Healing, 1. väljaanne; Bookbaby: Pennsauken Township, NJ, USA, 2011.

14. Upton, R. Nõgese leht (Urtica dioica L.): erakordne taimne ravim. J. Herb. Med. 2013, 3, 9–38. [CrossRef]

15. Semalty, M.; Adhikari, L.; Semwal, D.; Chauhan, A.; Mishra, A.; Kotiyal, R.; Semalty, A. Põhjalik ülevaade kõrvenõgese (Urtica dioica) fütokeemia ja farmakoloogiliste mõjude kohta. Curr. Tradit. Med. 2017, 3, 156–167. [CrossRef]

16. Kregiel, D.; Pawlikowska, E.; Antolak, H. Urtica spp.: Erakordsete omadustega tavalised taimed. Molecules 2018, 23, 1664. [CrossRef] [PubMed]

17. Bourgeois, C.; Leclerc, É. A.; Corbin, C.; Doussot, J.; Serrano, V.; Vanier, J.-R.; Seigneuret, J.-M.; Auguin, D.; Pichon, C.; Lainé, É.; et al. Nõges (Urtica dioica L.) on antioksüdantide ja vananemisvastaste fütokemikaalide allikas kosmeetikas kasutamiseks. Comptes Rendus Chim. 2016, 19, 1090–1100. [CrossRef]

18. Maxwell, K.; Johnson, GN Klorofülli fluorestsents – praktiline juhend. J. Exp. Bot. 2000, 51, 659–668. [CrossRef] [PubMed]

19. Hosseinzadeh, R.; Khorsandi, K.; Hemmaty, S. Uuring pindaktiivsete ainete mõjust polüfenoolsete ühendite ekstraheerimisele ja määramisele ning puuviljaekstraktide antioksüdandivõimele. PLoS ONE 2013, 8, e57353. [CrossRef]

20. Gao, X.; Ohlander, M.; Jeppsson, N.; Björk, L.; Trajkovski, V. Astelpaju (Hippophae rhamnoides L.) viljade antioksüdantsete mõjude muutused ja nende seos fütotoitainetega küpsemise ajal. J. Agric. Food Chem. 2000, 48, 1485–1490. [CrossRef]

21. Ordonez, A.; Gomez, J.; Vattuone, M.; Isla, MI Sechium edule (Jacq.) Swartz ekstraktide antioksüdantne toime. Food Chem. 2006, 97, 452–458. [CrossRef]

22. Rodriguez-Amaya, DB Toidu karotenoidianalüüsi juhend; ILSI Press: Washington, DC, USA, 2001.

23. Katsube, T.; Tabata, H.; Ohta, Y.; Yamasaki, Y.; Anuurad, E.; Shiwaku, K.; Yamane, Y. Antioksüdantse aktiivsuse sõelumine söödavates taimsetes toodetes: madala tihedusega lipoproteiinide oksüdatsioonianalüüsi, DPPH radikaali eemaldamise testi ja Folin-Ciocalteu analüüsi võrdlus. J. Agric. Food Chem. 2004, 52, 2391–2396. [CrossRef]

24. Summerfield, A.; Meurens, F.; Ricklin, ME Seanaha immunoloogia ja selle väärtus inimese naha mudelina. Mol. Immunol. 2015, 66, 14–21. [CrossRef] [PubMed]

25. Ranamukhaarachchi, SA; Lehnert, S.; Ranamukhaarachchi, SL; Sprenger, L.; Schneider, T.; Mansoor, I.; Rai, K.; Häfeli, UO; Stoeber, B. Inimese ja sea naha mikromehaaniline võrdlus enne ja pärast säilitamist külmutamise teel meditsiiniseadmete arendamiseks. Sci. Vabariik 2016, 6, 32074. [CrossRef]

26. Jacobi, U.; Kaiser, M.; Toll, R.; Mangelsdorf, S.; Audring, H.; Otberg, N.; Sterry, W.; Lademann, J. Sigade kõrva nahk: inimese naha in vitro mudel. Skin Res. Technol. 2007, 13, 19–24. [CrossRef] [PubMed]

27. Nagelreiter, C.; Mahrhauser, D.; Wiatschka, K.; Skipiol, S.; Valenta, C. Sobiva tööprotokolli tähtsus lindi eemaldamise katseteks seakõrva nahal: lipofiilsete preparaatide mõju ja ribade kleepumise kahjustus. Int. J. Pharm. 2015, 491, 162–169. [CrossRef] [PubMed]

28. Stetefeld, J.; McKenna, SA; Patel, TR Dünaamiline valguse hajumine: praktiline juhend ja rakendused biomeditsiiniteadustes. Biophys. Rev. 2016, 8, 409–427. [CrossRef] [PubMed]

29. Brar, SK; Verma, M. Nanoosakeste mõõtmine valguse hajumise tehnikatega. Trends Anal. Chem. 2011, 30, 4–17. [CrossRef]

30. Kübart, SA; Keck, CM Nanoosakeste laserdifraktomeetria: sagedased lõksud ja tähelepanuta jäetud võimalused. J. Pharm. Technol. Drug Res. 2013, 2, 17. [CrossRef]

31. Kukric, Z.; Topalic-Trivunovic, L.; Kukavica, B.; Matos, S.; Pavicic, S.; Boroja, M.; Savic, A. Nõgese lehtede (Urtica dioica L.) antioksüdantse ja antimikroobse toime iseloomustus. Acta periood. Technol. 2012, 2012, 257–272. [CrossRef]

32. Pereira, L. Merevetikad kui bioaktiivsete ainete allikas ja nahahooldusravi – kosmeetika, algoteraapia ja talassoteraapia. Kosmeetika 2018, 5, 68. [CrossRef]

33. Hayes, M.; Ferruzzi, MG Toidu klorofülli derivaatide biosaadavuse ja kemopreventatiivsete mehhanismide värskendus. Nutr. Res. 2020, 81, 19–37. [CrossRef] [PubMed]

34. Song, BH; Lee, DH; Kim, eKr; Ku, SH; Park, EJ; Kwon, IH; Kim, KH; Kim, KJ Fotodünaamiline ravi klorofüll-a-ga akne vulgarise ravis: Randomiseeritud, ühepime, jagatud näo uuring. J. Am. Acad. Dermatol. 2014, 71, 764–771. [CrossRef] [PubMed]

35. Gülçin, I.; Küfrevioglu, OI; Okei, M.; Büyükokuroglu, ME Nõgese (Urtica dioica L.) antioksüdantne, antimikroobne, haavandivastane ja valuvaigistav toime. J. Ethnopharmacol. 2004, 90, 205–215. [CrossRef] [PubMed]

36. Ðurovi´c, S.; Pavli'c, B.; Šorgic, S.; Popov, S.; Savi´c, S.; Petronijevi´c, M.; Radojkovi´c, M.; Cvetanovic, A.; Zekovi´c, Z. Erinevate analüütiliste lähenemisviiside abil saadud kõrvenõgese lehtede keemiline koostis. J. Funktsioon. Toidud 2017, 32, 18–26. [CrossRef]

37. Ghaima, K.; Hashim, NM; Ali, SA Nõgese (Urtica dioica) ja võilille (Taraxacum officinale) etüülatsetaadi ekstrakti antibakteriaalne ja antioksüdantne toime. J. Appl. Pharm. Sci. 2013, 3, 96–99. [CrossRef]

38. Orˇci´c, D.; Franciškovi´c, M.; Bekvalac, K.; Svirˇcev, E.; Beara, I.; Lesjak, M.; Mimica-Duki´c, N. Taimsete fenoolide kvantitatiivne määramine Urtica dioica ekstraktides kõrgsurvevedelikkromatograafia abil koos tandem-massispektromeetrilise tuvastamisega. Food Chem. 2014, 143, 48–53. [CrossRef]

39. Everette, JD; Bryant, QM; roheline, AM; Abbey, YA; Wangila, GW; Walker, RB. Põhjalik uuring erinevate ühendiklasside reaktsioonivõimest Folin-Ciocalteu reaktiivi suhtes. J. Agric. Food Chem. 2010, 58, 8139–8144. [CrossRef]

40. Griffin, S.; Tittikpina, NK; Al-Marby, A.; Alkhayer, R.; Denežkin, P.; Witek, K.; Gbogbo, KA; Batawila, K.; Duval, RE; Nasim, MJ; et al. Jäätmete muutmine väärtuseks: Solanum incanum L. ja Pterocarpus erinaceus Poiri nanoseeritud looduslikud taimsed materjalid, millel on paljulubav antimikroobne toime. Pharmaceutics 2016, 8, 11. [CrossRef]

41. Guidi, L.; Tattini, M.; Landi, M. Kuidas kloroplast kaitseb klorofülli liigse valguse eest? Klorofüllis; Jacob-Lopes, E., Zepka, LQ, Queiroz, MI, toim.; InTech: London, Ühendkuningriik, 2017.

42. Scheuplein, RJ; Tühi, IH Naha läbilaskvus. Physiol. Rev. 1971, 51, 702–747. [CrossRef] [PubMed]

43. Godin, B.; Touitou, E. Transdermaalne nahale manustamine: ennustused inimestele in vivo, ex vivo ja loommudelite põhjal. Adv. Narkootikumide Deliv. Rev. 2007, 59, 1152–1161. [CrossRef] 44. Pyo, S.; Meinke, MC; Keck, CM; Müller, RH Rutin – nanokristalltehnoloogia (smartCrystals) suurenenud antioksüdantide aktiivsus ja naha läbilaskvus. Kosmeetika 2016, 3, 9. [CrossRef]

45. Vidláˇrová, L.; Romero, Suurbritannia; Hanuš, J.; Štˇepánek, F.; Müller, RH Nanokristallid naha läbitungimise suurendamiseks – kontsentratsiooni mõju ja selle aluseks olevad mehhanismid, kasutades kurkumiini mudelina. Eur. J. Pharm. Biopharm. 2016, 104, 216–225. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​Chaulagain, B.; Jain, A.; Tiwari, A.; Verma, A.; Jain, SK Valguravimite passiivne kohaletoimetamine transdermaalsel teel. Artif. Nanomed rakud. Biotehnoloogia. 2018, 46, 472–487. [CrossRef] [PubMed]

47. Lipinski, CA; Lombardo, F.; Dominy, BW; Feeney, PJ eksperimentaalsed ja arvutuslikud lähenemisviisid lahustuvuse ja läbilaskvuse hindamiseks ravimite avastamise ja arendamise seadetes. Adv. Narkootikumide Deliv. Rev. 1997, 23, 3–25. [CrossRef]

48. Gediya, S.; Mistry, R.; Patel, U.; Blessy, M.; Jain, H. Taimed: kasutatakse kosmeetikatoodetena. J. Nat. Prod. Taimeressurss. 2011, 1, 24–32.

49. Kapoor, S.; Saraf, S. Taimeekstrakte sisaldava niisutaja koostamine ja hindamine kuiva naha raviks. Pharmacogn. J. 2010, 2, 409–417. [CrossRef]

50. Dorni, AC; Amalraj, A.; Gopi, S.; Varma, K.; Anjana, S. Taimedest pärit uudsed kosmeetikatooted – tööstusharu juhitud ülevaade. J. Appl. Res. Med. Aroom. Taimed 2017, 7, 1–26. [CrossRef]

51. Herman, A.; Herman, AP Eeterlikud õlid ja nende koostisosad naha läbitungimise parandajana ravimite transdermaalseks manustamiseks: ülevaade. J. Pharm. Pharmacol. 2014, 67, 473–485. [CrossRef]

For more information:1950477648nn@gmail.com