Cistanche-põhise preparaadi terapeutilise mõju uurimine kroonilisele mittebakteriaalsele prostatiidile (CNP) ja selle mehhanismile soolestiku mikrobiota ja metaboloomia kaudu rotimudelis
Jul 04, 2025
Abstraktne
Põhineb aneksperimentaalne autoimmuunse prostatiidi (EAP) roti mudel, see uuring uuribCistanche-põhise kapsli (CBC) terapeutiline toime ja selle aluseks olevad mehhanismidleevendamiselkrooniline mittebakteriaalne prostatiit (CNP). Eesmärk on luua prekliiniline alus selle arengukstäiustatud botaanilised ravimidlaiendatud näidustustega juhtimisekskrooniline prostatiit ja vaagnavalu sündroomid.
Metoodika:
Histopatoloogilised muutusedroti eesnäärmekoes hinnati läbihematoksüliin-eosiini (HE) värvimine.
Valgevereliblede infiltratsioonjaletsitiini keha tiheduseesnäärme homogenaate hinnati mikroskoopiliselt.
Seerumi tasemedsuperoksiiddismutaas (SOD)jamalondialdehüüd (MDA)mõõdeti biokeemilise analüüsi abil.
Põletikulised tsütokiinid(TNF-, iNOS, IL-1, IL-2, IL-6, IL-8 ja IL-10) kvantifitseeriti, kasutadesensüümiga seotud immunosorbentanalüüs (ELISA).
16S rDNA sekveneeriminekasutati muudatuste hindamisekssoolestiku mikrobiota.
Sihitu metaboolikaselgitamiseks tehti analüüsmetaboolsed rajad, mida mõjutab CBC.
Western blot (WB)kasutati modulatsiooni kontrollimiseksSPHK1/S1P1/PI3K/Akt signaalirada.
Tulemused:
CBC manustamine märkimisväärselt:
Vähendatud histoloogiline kahjustuseesnäärme kudedesse;
Suurenenud letsitiini keha tihedusjaleukotsüütide infiltratsiooni vähenemine;
Vähendatud põletikueelsed tsütokiinid(TNF-, iNOS, IL-1, IL-2, IL-6, IL-8);
Suurendas põletikuvastast tsütokiini IL-10;
Parem soolestiku mikrobiota koostis, eriti suurenebLactobacillusjaBifidobacterium animalis, vähendades samal ajalklassifitseerimata_f_PrevotellaceaejaVeillonella;
Muutunud 10 peamist metaboliiti, sealhulgassfingosiinjaretinoüül-glükuroniid, mõjutadessfingolipiidide metabolismjaretinooli metabolism;
Allareguleeritud SPHK1 ja S1P1 ekspressioon, ja inhibeeritudPI3K ja Akt fosforüülimineeesnäärme kudedes.
Järeldus:
Tistanche-põhised kapslid (CBC) tõhusaltleevendada põletikulisi vigastusiEAP rottide eesnäärmekoes. Mehhanismid võivad hõlmata:
Soole mikrobiota düsbioosi moduleerimine;
Ainevahetushäirete korrigeerimine;
SPHK1/S1P1/PI3K/Akt signaaliraja mahasurumine.
Need leiud toetavad potentsiaaliTsistanchist saadud taimsed preparaadidkui alooduslik, mitme eesmärgiga ravijaokskrooniline mittebakteriaalne prostatiitja pakkuda paljulubavat suunda tulevikuks.
Märksõnad:
Cistanche-põhised kapslid; krooniline mittebakteriaalne prostatiit; soolestiku mikrobiota; metaboloomika; SPHK1/S1P1/PI3K/Akt rada; taimne prostatiidi ravi; looduslik põletikuvastane ravi; EAP roti mudel
Cistanche-põhine teevalem
Abstraktne:
Krooniline mittebakteriaalne prostatiit/krooniline vaagnavalu sündroom (CNP/CPPS), tuntud ka kui III kategooria prostatiit, põhjustab ligikaudu90% kõigist prostatiidi juhtudest. Seda iseloomustavad ebamugavustunne alumistes kuseteedes, vaagna- ja perineaalvalu, seksuaalfunktsiooni häired ning sageli psühholoogilised või neuroloogilised sümptomid. Traditsioonilises hiina meditsiinis (TCM) liigitatakse CNP kategooriasse "Jing Zhuo" (seemneline hägusus), mida sageli seostatakse sisemise niiskuse, põrnapuuduse või põrna funktsiooni kahjustavate külmade või kibedate ravimite pikaajalise kasutamisega, mis viib niiskuse ja kuumuse kuhjumiseni eesnäärmes.
Praegused läänepoolsed CNP farmakoloogilised ravimeetodid, sealhulgas antibiootikumid, blokaatorid ja mittesteroidsed põletikuvastased ravimid, keskenduvad peamiselt sümptomite juhtimisele ja neil puudub sageli pikaajaline tõhusus. Üha enam pöörduvad teadlasedtaimne ravim kui ohutum ja terviklikum alternatiiv.
Cistanche: paljutõotav taimne kandidaat
Cistanche, traditsiooniline Hiina ravimtaim, mis on tuntud selle poolestneere toniseeriv, põletikuvastane, immuunmoduleeriv ja antioksüdantomadused, on näidanud potentsiaali erinevate urogenitaalhaiguste ravis. Kaasaegsed farmakoloogilised uuringud näitavad sedaCistanche deserticolavõib reguleerida põletikulisi tsütokiine, tugevdada immuunvastust ja parandada mikrotsirkulatsiooni, muutes selle apaljutõotav kandidaat CNP-raviks.
Vaatamata kasvavale huvile, täpnemehhanismid, mille abil Cistanche CNP-d leevendab, on halvasti mõistetavad. Hiljutised uuringud viitavad sellelesoolestiku mikrobiota düsbioosmängib olulist rolli CNP patogeneesis. Seetõttu uurib see uuring aCistanche-põhine taimne kapsel (CBC)CNP-le, kasutades eksperimentaalse autoimmuunse prostatiidi (EAP) rotimudelit, pöörates erilist tähelepanusoolestiku mikrobiota koostis ja metaboolsed muutused.
1. Materjalid ja meetodid
1.1 Loomad
30 SPF-klassi isast Sprague-Dawley (SD) rotti(300–320g) ja45 SPF-klassi isast SD rotti(180–200 g) saadi ettevõttelt Hubei Beiante Biological Technology Co., Ltd.
Majutatud standardsetes SPF-tingimustes: temperatuur 25±1 kraadi, niiskus 55±5%, 12-tunnine valguse/pimeduse tsükkel.
Loomaeetika heakskiit:HUCMS00302159, mille on andnud Hubei Hiina meditsiini ülikooli eetikakomitee.
1.2 Ravimid ja reaktiivid
Cistanche-põhised kapslid (CBC)(Partii: 20221226) GMP-sertifikaadiga taimsete ravimite ettevõttelt.
Tamsulosiinvesinikkloriidi kapslid(positiivne kontroll) ostetud ettevõttelt Hangzhou Conba Pharmaceutical Co., Ltd.
Freundi täielik adjuvant (CFA)Sigmast (Saksamaa).
ELISA komplektidIL-1 , IL-6, IL-8, IL-10, TNF- ja iNOS jaoks ettevõttelt Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.
Oksüdatiivse stressi komplektid(MDA, T-SOD) ettevõttelt Wuhan Elabscience Biotechnology Co., Ltd.
Soolestiku mikrobiota DNA ekstraheerimise komplektidjametaboolsed reaktiividfirmalt Meiji Biotechnology (Shanghai).
1.3 Varustus
Kiire tsentrifuug (Eppendorf, Saksamaa), UHPLC ja Q-Exactive HF-X massispektromeeter (Thermo Fisher Scientific) ja muud molekulaarbioloogia instrumendid ELISA, PCR, sekveneerimise ja metaboloomika analüüsi jaoks.
2. Katseprotokoll
2.1 Eksperimentaalse autoimmuunse prostatiidi (EAP) mudeli esilekutsumine
2.1.1 Prostata Protein-CFA emulsiooni valmistamine
Doonorrottidelt ekstraheeriti eesnäärme kude, homogeniseeriti steriilses soolalahuses 0,5% TritonX-100-ga ja tsentrifuugiti kiirusel 20 000 p/min 30 minutit 4 kraadi juures.
Valgu kontsentratsioon reguleeriti 20 mg/ml, kasutades BCA analüüsi.
Valguekstrakt emulgeeriti CFA-ga vahekorras 1:1, et moodustadaCNP antigeeni emulsioon.
2.1.2 Immuniseerimise protseduur
45 SD rotti (180 ± 20 g) jagati juhuslikult, 10 määrati normaalsesse rühma.
Ülejäänud rotid said kättesubkutaansed mitmepunktilised süstidCNP antigeeni emulsioonist kubemes, reie siseküljel ja seljas.
Revaktsineerimine viidi läbi15. päev following the same protocol.
Tavalised kontrollid said soolalahuse süsti.
2.2 Rühmitamine ja käsitlemine
On Day 28 post-immunization, successful modeling was confirmed via histology (HE staining).
Rotid määrati juhuslikult:
Tavaline kontrollrühm
Mudelirühm
Positiivne narkorühm: tamsulosiin (0,021 mg/kg)
CBC madala annuse rühm: 0,63 g/kg (kliiniline ekvivalentdoos)
CBC suure annuse rühm: 1,26 g/kg
Ravi manustati suu kaudu üks kord päevas 30 päeva jooksul. Kontroll- ja mudelrühmad said soolalahust.
2.3 Proovide kogumine ja analüüs
24 tundi pärast viimast annust rotid surmati.
Veri koguti kõhuaordi kaudu; seerum eraldati ja säilitati -80 kraadi juures.
Eesnäärme kuded koguti, kaaluti ja uuriti makroskoopiliselt.
TheEesnäärme indeks (PI)arvutati:
PI=Eesnäärme märgkaal / kehakaal
Kuded fikseeriti formaliinis histoloogia jaoks või külmutati tsütokiinide analüüsiks, Western blot analüüsiks, mikrobiota DNA ekstraheerimiseks ja metaboloomikaks.
Järeldus ja tähendus
Selle uuringu eesmärk on pakkudaprekliinilised tõendidkasutamise eestCistanche-põhine taimne raviravimiselkrooniline mittebakteriaalne prostatiit. Integreeridessoolestiku mikrobiota analüüsjametaboolne profiilide koostamine, püüame paljastadamitme sihtmärgiga mehhanismidmille kaudu Cistanche avaldab oma põletikuvastast ja immunomoduleerivat toimet.
Need leiud toetavadCistanche kui uudse taimse ravimi väljatöötamineCNP jaoks ja võib põhjustadauued näidustusedselle kliiniliseks kasutamiseks.
