Ööpäevaste variatsioonide ja sooerinevuste uurimine hipokampuse neurofüsioloogias ja ruumilises mälus, 2. osa

Terve raku patch-clamp salvestused

Kõik andmed koguti koronaalsete hipokampuse viiludelt ZT 2–6 (päev) või ZT 13–17 (öö) 32 kraadi juures standardses ACSF-is, mis sisaldas järgmist (mM): 125 NaCl, 2,5 KCl, 1,25 Na2PO4, 2 CaCl2, 1 MgCl2, 25 NaHC03 ja 25 glükoosi, mullitati 95% O2/5% CO2-ga.

Koronaalne hipokampus on oluline ajupiirkond, mis mängib võtmerolli inimese mäluprotsessis.

Uuringud näitavad, et koronaalne hipokampus on pikaajaliste mälestuste salvestamiseks ja leidmiseks kriitilise tähtsusega. See, mida inimesed nimetavad "ajaränduriks", võib viia inimesed tagasi mineviku kogemuste ja kogemuste juurde. Koronaalne hipokampus mängib olulist rolli meie identiteedis, emotsionaalses kontrollis, enesemõistmises ja inimestevahelistes suhetes.

Meie mälu halveneb aja jooksul, kuid on mõned asjad, mida saame oma mälu parandamiseks teha. Esiteks on oluline säilitada positiivne suhtumine, kuna see võib vähendada stressi ja parandada mälu. Teiseks võib suurem treening ja toitumine aidata kaasa koronaarhipokampuse talitlusele ja olla kasulikud füüsilisele tervisele. Lõpuks võib mälu parandada ka mälutreening ja selliste tööriistade kasutamine nagu märkmikud.

Kokkuvõttes mängib koronaalne hipokampus inimese mälus ja kognitiivses jõudluses asendamatut rolli. Seetõttu peaksime pöörama tähelepanu selle rollile ja hoidma seda võimalikult tervena. Ennetavate sammude abil saame parandada oma mälu ja aeglustada selle halvenemist, et saaksime jätkuvalt selgelt mõelda ja elada tähendusrikast elu. On näha, et peame parandama mälu ja Cistanche deserticola võib oluliselt parandada mälu, sest Cistanche deserticola suudab reguleerida ka neurotransmitterite tasakaalu, näiteks tõsta atsetüülkoliini ja kasvufaktorite taset. Need ained on mälu ja õppimise jaoks väga olulised. Lisaks võib liha parandada ka verevoolu ja soodustada hapniku kohaletoimetamist, mis tagab aju piisava toitainete ja energia kättesaamise, parandades seeläbi aju elujõudu ja vastupidavust.

Klõpsake teada, kuidas ajufunktsiooni parandada

CA1 püramiidsete neuronite terve raku-klambri salvestused saadi pimeda plaastri tehnikaga. Lühidalt, plaastripipetid asetati piirkonna CA1 mediaalsesse või lateraalsesse otsa (sõltuvalt sellest, kas viil pärines vasakust või paremast poolkerast) sügavusele; 50–150 mM, rakendati positiivset rõhku, kui pipett liiguti aeglaselt kas mediaalselt või lateraalselt läbi. püramiidrakkude kiht kuni pipeti resistentsuse kiire suurenemiseni viitas kontaktile neuroniga, misjärel positiivne rõhk vabastati, saadi tihe tihend (0,1 GX) ja rakendati kerget negatiivset survet, et saavutada terve raku plaastri konfiguratsioon.

Andmed koguti Multiclamp700B võimendi, Axon Digidata 1440A ja 1550B digitaatori ning pClamp10/11 tarkvara (Molecular Devices) abil. Patch pipetid (BF150–086; Sutter Instruments) tõmmati Sutter P-97 horisontaalse tõmbeseadmega. ) takistusele vahemikus 2,5–5 MV. Rakke dialüüsiti 5 minutit enne eksperimentaalset salvestamist. Analüüsiks kasutatud rakkude juurdepääsutakistus oli 30 MV, mis ei suurenenud 0,20% iga 5-minuti katse kestuse jooksul.

Pingeklambriga katsete jaoks hoiti kõiki rakke 70 mV juures ja signaale filtreeriti sagedusel 5 kHz ja digiteeriti 10 kHz juures. IPSC katsetes kasutati plaastri pipeti lahust, mis sisaldas (mM): 140 CsCl, 10 EGTA, 5 MgCl2, 2 NaATP, 0,3 Na-GTP, 10 HEPES, 0,2% biotsütiini (pH 7,3, 290 mm) ja 5 QX-314} (naatriumikanali antagonist) lisatud kasutusajal. IPSC-d eraldati farmakoloogiliselt 10 mM NBQX (AMPAR antagonist, HelloBio) ja 5 mM CPP (NDMAR antagonist, Hello Bio) perfusiooniga.

EPSC katsetes kasutati plaastri pipeti lahust, mis sisaldas (inmM): 100 CsOH, 100 glükoonhapet (50%), 0,6 EGTA, 5MgCl2, 2 Na- Kasutamise ajal lisati ATP*3H2O, 0,3 Na-GTP, 40 HEPES, 7 fosfokreatiini, biotsütiin (0,2%) ja 5 QX{19}}. EPSC-d eraldati farmakoloogiliselt 10 mM gabasiini (GABAAR-i antagonist, Hello Bio) vanniperfusiooniga. Miniatuursete IPSC-de ja miniatuursete EPSC-de (mIPSC-d/mEPSC-d) mõõtmiseks registreeriti eraldi katsed, lisades 0,5 mM tetrodotoksiini (TTX; pingega naatriumikanal). inhibiitor, Tocris).

Vooluklambri katsete jaoks filtreeriti signaalid sagedusel 10 kHz ja digiteeriti sagedusel 20 kHz. Plaastri pipeti lahus, mis sisaldas (mM): 135 K-glükonaati, 2 MgCl2, 0,1 EGTA, 10 HEPES, 4 KCl, 2 Mg-ATP, 0,5 Na-GTP, 10 ui fosfokreatiini ja biotsütiin (0,2%; pH 7,3, 310 mOsm ja 2–4 ​​MV). Neuronaalset erutuvust hinnati, süstides järk-järgult puhkeasendis depolariseerivat voolu (0–500 pA, D 20 pA) ja loendades iga 1000 jooksul vallandatud aktsioonipotentsiaalide arvu. ms praegune samm.

Reageerimiskalle saadi, arvutades lineaarse seose põlemissageduse ja sisestatud voolu vahel vahemikus {{0}} kuni 400-pAsteps. Mõõdeti ka maksimaalset aktsioonipotentsiaali (AP) süütesagedust (max) ja voolu, mille juures max esines (Imax). Langust mõõdeti hüperpolariseeriva voolu sissepritse tipppinge amplituudina (mV), mis saavutas membraani püsipotentsiaali 90–93 mV. Sisendtakistust (MX) mõõdeti kui voolu reaktsiooni kalle hüperpolariseeriva voolu seeriale. süstid (150 kuni 0 pA, D 50 pA).

Reobaas määratleti kui minimaalne vool, mis on vajalik ühe AP esilekutsumiseks. Aktsioonipotentsiaaliomaduste analüüsimiseks kasutati reobaasi poolt valitud üksikut AP-d (tabelid 1, 2). AP amplituud määratleti kui pinge erinevus AP läve ja selle tipu vahel. Lävi määrati pingena (mV), mille juures AP esimene tuletis (dV/dt) ületas 20 mV/s. AP tõusuaeg oli aeg (ms), mille jooksul AP saavutab 90% oma tipu amplituudist 10% tipust. Vaibumisaeg oli aeg 90% ja 10% vahel AP piigi amplituudist. Poollaius oli aeg (ms) AP lainekuju tõusu ja languse poolamplituudide vahel. Järelhüperpolarisatsioon (AHP) oli erinevus algtaseme ja kõige hüperpolariseeritud punkti vahel, mis ilmnes 3 ms jooksul pärast AP läve kiire AHP (fAHP) ja 10–50 ms pärast AP läve keskmise AHP (mAHP) puhul.

AP tipptaseme tõus ja langus määrati vastavalt AP tõusu ja languse maksimaalseks kaldeks (DmV/Dms). Membraani algpotentsiaal arvutati keskmise pingena 1400- ms pA etapi ajal 0- pA. Esialgsed katsed viidi läbi sünaptiliste blokaatorite puudumisel, et teha kindlaks, kuidas sugu ja kellaaeg aitavad kaasa CA1 püramiidi neuronite erutuvusele terves ahelas. Et hinnata sünaptilise ülekande mõju öise erutuvuse paranemisele, viidi läbi eraldi järelkatse GABAA antagonisti gabasiini (10 mM) ja glutamatergiliste antagonistide NBQX (10 mM) ja CPP (5 mM) juuresolekul. .

Immunohistokeemia

Kinnitamaks, et postsünaptiliste voolude mõõtmiseks registreeritud rakud olid CA1 püramiidrakud, täideti kõik rakud biotsütiiniga vähemalt 20 minutit. Täidetud rakke sisaldavad viilud fikseeriti 4% paraformaldehüüdis vähemalt 24 tundi, seejärel pesti 310 minutit PBS-is ja inkubeeriti 2–3 tundi toatemperatuuril TBS lahuses, mis sisaldas 10% NDS, 3% BSA, 1% glütsiini, 0,4 % Triton X-100 ja streptavidiin-488(1:1000).

Seejärel pesti viile 3–10 minutit PBS-s ja paigaldati slaididele ja katteklaasidele DAPI-d sisaldava ProLongGold Antifade paigalduskandjaga. Slaidid visualiseeriti BZ-X700 fluorestsentsmikroskoobiga (Keyence). Kõik rakud, mida ei saanud asukoha ja morfoloogia alusel liigitada CA1 püramiidrakkudeks, jäeti analüüsist välja.

Analüüs ja statistika
Andmeid analüüsiti ja visualiseeriti SPSS-i (versioon 27/28) ja tarkvara Prism-GraphPad abil. Hinnati parameetriliste testide eeldusi, sealhulgas dispersiooni normaalsust ja homogeensust, ning nende rikkumise korral andmeid teisendati või kasutati mitteparameetrilisi teste. Kui pole teisiti märgitud, omistati olulisus p, 0.05. Kõikide statistiliste testide kokkuvõte on esitatud ExtendedData tabelis 1-1.

Objekti asukoha mälu

OLM-i andmeid analüüsiti, kasutades sõltumatut kahesuunalist ANOVA-d, kus sõltumatud muutujad olid kellaaeg ja sugu ning sõltuvaks muutujaks oli diskrimineerimisindeks (joonis 1D). Uurimisaja koguaja ja diskrimineerimisindeksi skooride vahelise seose hindamiseks kasutati Pearsoni korrelatsiooni ning kõrgete ja madalate uurimisaegade jaotuse määramiseks soo ja kellaaja lõikes kontingentsianalüüsi (ExtendedData joonis 1-1B). .

Välisalvestised

Sisend-väljundandmeid analüüsiti lineaarse segamudeli abil, mille fEPSP kalle olenenud kellaajast, soost ja stimulatsiooni intensiivsusest. LTP-katsete jaoks normaliseeriti fEPSP nõlvad algtaseme vastustele ja 40-minutijärgse HFS-i salvestusperioodi viimase 10 minuti jooksul saadud vastuseid analüüsiti korduvate mõõtmistega kolmesuunalise ANOVA abil (RM-ANOVA).

Terve raku patch-clamp elektrofüsioloogia

Postsünaptilised voolud (inhibeerivad ja ergutavad) tuvastati automaatselt 5-minutisest salvestusest, kasutades pClampi sündmusemalli otsingut, ja seejärel kontrolliti käsitsi valesündmuse tuvastamiseks. Amplituude ja intereventintervalli (IEI) analüüsiti üldistatud hinnanguvõrrandi (GEE) abil, mis võimaldas parameetrite hinnanguid populatsiooni keskmistatud mudelitega, võttes samal ajal arvesse korrelatsioone katseisikute sees korduvate mõõtmiste vahel (Reed ja Kaas, 2010; Cook et al., 2016).

GEE mudel määratles struktureerimata töötava korrelatsioonimaatriksstruktuuri, raku subjektiefekti ja postsünaptiliste sündmuste subjektisisese efekti. Toorandmetel oli äärmuslike väärtustega märkimisväärne positiivne kallutatus ja seega kärbiti need ülemistest ja alumistest kõrvalekalletest (10%), millele järgnes amplituudiandmete puhul logaritmine või IEI andmete puhul log 1 1 teisendus. , vastake enne analüüsi normaaljaotuste eeldustele.

Kõiki vooluklambri andmeid analüüsiti tarkvarapaketiga EasyElectrophysiology (Easy Electrophysiology, RRID: SCR_021190), mis kasutab Neot (Garcia etal., 2014). Tegevuspotentsiaalid loendati, kasutades Action Potential Counting moodulit vaikimisi AutoThreshold Spike algoritmiga. RM-ANOVA-d kasutati aktsioonipotentsiaalide analüüsimiseks praegustes etappides, mille andmed ei rikkunud lineaarsuse ja normaalsuse eeldusi: 160–400 pA. Kõiki teisi membraani omadusi (tabelid 1, 2) analüüsiti kahesuunalise ANOVA abil koos sõltumatute kellaaja ja soo muutujatega. Kõik vooluklambri andmed kihistati enne lõplikku statistilist analüüsi positsiooni järgi piki eesmist-tagumist telge.

Tulemused

Päeva ja öö erinevused OLM-i jõudluses sõltuvad soost

Et uurida seksi mõju õppimise ja mälu ööpäevasetele rütmidele, kasutasime hipokampuse ruumimälu hindamiseks objekti asukohamälu (OLM) testi, mis põhineb hiire kalduvusel uurida objekte uudsetes kohtades (Barker ja Warburton, 2011; Takahashiet al. ., 2013; Chao et al., 2016). Kuigi on teatatud ööpäevalistest ja ööpäevasetest erinevustest OLM-i jõudluses (Takahashi et al., 2013; Snider et al., 2016), on soo mõju OLM-i jõudluse ööpäevasele varieerumisele endiselt halvasti mõistetav.

Leidsime, et OLM-i jõudlus on kellaajal erinev; päevase jõudluse erinevuse muster erines aga sugude lõikes (p=0.023, kahesuunaline ANOVA interaktsioon).

Kui isastel hiirtel oli oodatult parem öösel võrreldes päevaga (p {0},028, lihtsad peamised efektid, mis võrdlevad päeva ja öö tulemusi isastel; joonis 1D), siis emased hiired toimisid päeval paremini kui hiirtel. öö (p=0.004, lihtsad peamised efektid, võrreldes päeva ja ööga naistel; joonis 1D). Kellaaeg ega sugu ei mõjutanud kogu uurimisaega (p=0,926 ja 0,936, kahesuunaline ANOVA põhiefektid; laiendatud andmed, joonis 1-1A). Kogu uurimise ja DISskooride vahel puudus seos (r(52)=0.053, ns p=0.704, Pearsoni korrelatsioon; laiendatud andmed, joonis 1-1B).

LTP suurusjärk öösel on suurem kui päeval, olenemata soost
Pikaajalist potentseerimist (LTP) peetakse õppimise ja mälu rakuliseks korrelatsiooniks. CA3-CA1 sünapsides on LTP öösel suurem kui päeval (Chaudhury et al., 2005; Besing et al., 2017; Davis et al., 2020), kuid meile teadaolevalt ei ole avaldatud aruanded kellaaja mõju kohta LTP suurusjärgus täiskasvanud emastele hiirtele. Arvestades meie järeldust, et ööpäevased erinevused hipokampusest sõltuva mäluanalüüsi jõudluses sõltuvad soost, püüdsime järgmisena kindlaks teha, kas sugu mõjutab LTP ööpäevaseid erinevusi.

Esiteks, et hinnata basaalsünaptilise ülekande tugevust CA{{0}}CA1 sünapsides, koostasime I/O kõverad, mõõtes fEPSP kalle CA1 kihi radiatumi reaktsioonist Schafferi kollateraalsele stimulatsioonile järjest suureneva stimulatsiooni intensiivsusega ( 0.2–200 mA, D 10 mA) päeval ja öösel isastel ja emastel hiirtel (joonis 2A, B). Kuigi ei sugu ega kellaaeg ei avaldanud olulist mõju basaalsünaptilisele ülekandele testitud stiimulivahemikus (p=0.552 ja 0,981, vastavalt LMM-peaefekt), esines märkimisväärne soopõhise stimulatsiooni intensiivsusega interaktsioon ( p, 0,001, LMM; joonis 2A, B).

Meestel olid emasloomadega võrreldes suuremad fEPSP tõusud ainult 180, 190 ja 200 mA juures, olenemata kellaajast (vastavalt p =0,041, 0,043 ja 0,035; lihtsad peamised efektid, mis võrdlevad mehi ja naisi kõigi stimuleerimise intensiivsuste lõikes; joonis 2A). Üldiselt näitavad need tulemused, et kellaaeg ei mõjuta basaalsünaptilist ülekannet ja seks mõjutab reaktsioone ainult kõrgeima stimulatsiooni intensiivsuse korral.

Järgmisena hindasime CA{0}}CA1 sünapsi sünaptilist plastilisust, mõõtes LTP-d vastuseks lühikesele kõrgsageduslikule stimulatsioonile (HFS; joonis 2C, D). Nagu varem teatatud, oli LTP suurus öösel suurem kui päeval nii isastel kui emastel hiirtel (p =0,003, kolmesuunaline RM-ANOVA; joonis 2C, D); aga seksil ei olnud märkimisväärset mõju ega koostoimet sellega. Need leiud näitavad koos, et kellaaeg mõjutab isaste ja emaste hiirte sünaptilist plastilisust, ilma et see mõjutaks basaalset sünaptilist tugevust.

CA1 püramiidrakkude sünaptiline inhibeerimine on päeval suurem kui öösel, sõltumata soost

LTP muutusi võib seostada sünaptiliste mehhanismidega ja/või erutuvuse olemuslike muutustega. Seetõttu püüdsime kõigepealt kindlaks teha, kas kellaaeg ja sugu mõjutavad inhibeerivat ja ergastavat sünaptilist ülekannet CA1 püramiidsetele neuronitele. CA1 püramiidrakkude sünaptilise inhibeerimise uurimiseks mõõdeti isastel ja emastel hiirtel päeval ja öösel spontaansete IPSC-de (sIPSC) amplituudi ja sagedust (joonis 3A). Leidsime, et sIPSC sekkumisintervall (IEI) päeval oli lühem kui öösel, olenemata soost (kellaaeg: p=0,033, GEE; joonised 3A, C), mis näitab suuremat sagedust inhibeerivatest sündmustest päeva jooksul.

SIPSC-de amplituud päeval oli nii meestel kui naistel suurem kui öösel (kellaaeg: p=0,008, GEE; joonis 3A, E). See sIPSC-de suurenenud päevane sagedus ja amplituud viitavad CA1 püramiidsete neuronite tugevamale pärssimisele päevasel ajal võrreldes ööga.

Tugevam sünaptiline pärssimine päeva jooksul võib tuleneda presünaptilise GABA vabanemise suurenemisest või suurenenud postsünaptilisest GABAAR funktsioonist. Nende võimaluste eristamiseks mõõdeti nii isas- kui ka emastel hiirtel päeval ja öösel miniatuursed IPSCS-id (mIPSC-d) pingepõhise naatriumikanali blokaatori tetrodotoksiini (TTX) juuresolekul (joonis 4A). Kuigi leidsime, et ei sugu (p=0.392,GEE) ega kellaaeg (p=0.760, GEE) ei avaldanud mIPSC IEI-le statistiliselt olulist mõju, on meeste sündmustel kalduvus ilmneda päeva ja öö vahe (p= 0,068, soo ja kellaaja interaktsioon, GEE; joonis 3C).

Päeva ja öö erinevuste puudumine naistel näitab, et kellaaja mõju sIPSC-dele on tõenäoliselt tingitud kohaliku interneuroni aktsioonipotentsiaali vallandamisest. Meestel erinesid päeva ja öö keskmised väärtused 12 ms võrra (keskmine ja SEM: meeste päev, 98.24 61.05 ms; meeste öö, 85.78 6 1.04 ms), mis viitab sellele tegevusele potentsiaalist sõltumatu inhibeeriv vesiikulite vabanemine võib olla sagedasem öösel (joonis 3C). Uurides mIPSC amplituudi, avastasime ootamatult olulise koostoime kellaaja ja soo vahel (p=0.038,GEE), kusjuures naiste amplituudid olid päeva jooksul suuremad kui meestel (p {{16} }.006, Wald x2 paaride võrdlust; joonis 4E); aga see;2-pA erinevus ei ole tõenäoliselt bioloogiliselt oluline (naiste päev: 34.68 6 1.01 pA;meeste päev: 32.67 6 1.02 pA, keskmine 6 SEM) .

Kokkuvõttes viitavad need spontaansed ja miniatuursed IPSC-andmed sellele, et aktsioonipotentsiaalist sõltuv inhibeerimine, kuid mitte spontaanne vesiikulite sulandumine CA1 püramiidrakkudele, on päeval nii meestel kui naistel suurem kui öösel.

Sünaptiline erutus CA1 püramiidrakkudele sõltub soost

Järgmisena tahtsime kindlaks teha, kas sugu ja kellaaeg mõjutasid spontaanset ergastavat sünaptilist sisendit CA1 püramiidsetesse neuronitesse. Esiteks mõõdeti spontaanseid EPSC-sid (sEPSC-sid), kasutades kogu elemendi pinge-klambri salvestusi (joonis 5A). Kuigi kellaajal ei olnud olulist peamist mõju sEPSC amplituudile (joonis 5E), sõltumata soost (p=0.371, GEE), oli kellaaja olulise peamise mõju statistiline suundumus. päev näitas, et päeval registreeritud sEPSC IEI võib olla suurem kui öösel registreeritud (p=0.052,GEE), mis viitab ergastavate sündmuste suuremale esinemissagedusele öösel (joonis 5C). Üldiselt leidsime, et naistel oli rohkem ergastavat sünaptilist sisendit, suuremate sEPSCamplituudide ja lühemate IEI-dega võrreldes meestega (p=0,022 ja 0,020 vastavalt, soo peamine mõju, GEE; joonis 5C, E).

Järgmisena kordasime neid katseid pingepõhise naatriumikanali blokaatori tetrodotoksiini (TTX) juuresolekul ja mõõtsime miniatuurseid spontaanseid ergastavaid sünaptilisi voolusid (mEPSC-sid) CA1 püramiidsetele neuronitele (joonis 6A). MEPSC-de amplituud ei erinenud soo või aja lõikes. of-day(p= 0.227 ja p= 0.150, soo ja kellaaja põhimõju, vastavalt GEE; joonis 6E); siiski sõltus mEPSC IEI-de päevane ja öö varieeruvus soost (p= 0.021, kellaaeg ja seksuaalne interaktsioon, GEE; joonis 6C). Isastel olid mEPSC IEI-d öösel lühemad kui päeval (p= 0.002, Wald x2-paaris võrdlused), mis näitab isastel hiirtel erutusjuhtumite suuremat sagedust öösel ja seetõttu presünaptilise vabanemise tõenäosuse tõenäolist suurenemist; naistel ei ilmnenud aga olulist päeva ja öö erinevust (p= 0,765, Wald x2 paaridevahelised võrdlused; joonis 6C).

Kokkuvõttes näitavad need tulemused, et öise sEPSC sageduse suurenemise trend (eriti naistel) sõltub tegevuspotentsiaalist. Meestel näitab aktsioonipotentsiaalide blokeerimine aga öist sageduse suurenemist, mida nendes EPSC-des ei täheldatud.

CA1 püramiidsed neuronid on öösel erutavamad

Üldiselt näitavad meie tähelepanekud, et sünaptiline inhibeerimine on suurem öösel ja sünaptiline erutus suurem päeval; seega tahtsime järgmisena kindlaks teha, kas see vastandlik ööpäevane varieeruvus sünaptilises ergastavas ja inhibeerivas sisendis põhjustab CA1 püramidaalneuroni erutuvuse ööpäevaseid variatsioone. Selleks paikasime CA1 püramiidrakud praeguses klambrirežiimis terve vooluringiga (st sünaptiliste antagonistide puudumisel) ja ilma raku membraani potentsiaalita. Süstisime püramiidsetesse neuronitesse üha suuremas koguses depolariseerivat voolu (0–500 pA, D 20 pA, kestus 1000- ms) ja mõõtsime esile kutsutud toimepotentsiaalide arvu.

Andmed koguti neuronitelt kogu hipokampuse eesmise-tagumise telje ulatuses. Varem avaldatud uuringutes leiti CA1 püramiidsete neuronite elektrofüsioloogilist mitmekesisust, mis sõltuvad telgedevahelisest asukohast (Spruston, 2008; Marcelin et al., 2012; Dougherty jt, 2012, 2013; Hönigsperger jt, 2015; Kim ja Johnston 201). Malik jt, 2016; Milior jt, 2016); seega otsustasime seda tegurit arvesse võtta, klassifitseerides koronaalsektsiooni anatoomia alusel kõik neuronid kas "eesmiseks" või "tagumiseks" (Alleni viiteatlas saidilt https://atlas.brain-map.org/; joonis 7A).

Kui lisasime oma esialgsesse ANOVA mudelisse tegurina eesmise-tagumise telje, mis hindas mitut toimepotentsiaali jooksva etapi kohta, leidsime, et kõige suurem mõjutegur oli piirkond (p= 0.005, põhiefekt, neljasuunaline RM-ANOVA). Lisaks leiti olulisi piirkondlikke erinevusi sisendtakistuse (A: 64.27 6 1.95 MX, P:75.90 6 2.47 MX, p, 0.001, kolmesuunaline ANOVA), reobaasi (A) osas : 146.69 6 7.50 pA, P: 112.32 6 6.10 pA, p, 0,001, kolmekordne ANOVA) ja Imax ehk vool, mille juures neuronid vallanduvad maksimaalsel sagedusel (A: 417.{101} {23}}.29 pA. P: 386.90 610.82 pA, p= 0.047, kolmesuunaline ANOVA).

Need erinevused eesmiste ja tagumiste neuronite vahel on kooskõlas varem avaldatud uuringutega, milles leiti mitmekesisust dorsaalsete ja ventraalsete CA1 püramiidneuronite vahel. Kuigi meie koronaallõike ettevalmistamine ei võimaldanud meil ventraalset CA1 tõeliselt isoleerida, sisaldavad tagumised sektsioonid suurema tõenäosusega mõnda ventraalset CA1 püramiidneuronit. leidis, et tagumiste neuronite omadused olid kooskõlas varem avaldatud andmetega venralCA1 püramiidsete neuronite kohta, samas kui eesmised neuronid olid sarnased dorsaalsete püramiidneuronitega (Dougherty et al., 2012; Malik et al., 2016).

For more information:1950477648nn@gmail.com