Tistanche glükosiidide kaitsev toime ajuisheemia-reperfusioonikahjustusele

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

Zhang Yanhui1, Ren Xiaoli1, Pei Feixiang2

Abstraktne

Eesmärk: jälgida mõjucistanche glükosiidid(GC) ergastavate aminohapete (EAA) ning NF-KB ja valgu ekspressiooni kohta rottide hipokampusesajuisheemia-reperfusioonning uurida ennetus- ja ravimõjusidcistanche glükosiididpealajuisheemia-reperfusioonvigastus. Meetodid: 60 SD rotti jagati juhuslikult võltsrühma, mudelrühma ja väikese annusega rotticistanche glükosiididrühm, suur annuscistanche glükosiididrühm ja kontrollrühm, kus igas rühmas oli 12 rotti. Roti mudelajuisheemia-reperfusioonvalmistati traatpoldi meetodil. Pärast edukat modelleerimist manustati iga rühma rottidele ravimit sondiga. Mälestused veelabürindi navigatsioonitest rottide ruumilise õppimise ja mäluvõime hindamine kõrgjõudlusega vedelikkromatograafia (HPLC) katserühmaga, rottide asparagiinhape (Glu), glutamiinhape (Asp), -aminovõihape (GABA), glütsiin (Gly) ) sisaldus, kasutades immunohistokeemilist meetodit roti hipokampuse ajupiirkondade NF - KB, tau, P - tau, A amüloidvalgu ekspressioonitaseme tuvastamiseks. Tulemused: 5-päevase veelabürindi positsioneerimise merekatse ajal lühenes iga rühma rottide keskmine põgenemise latentsusaeg erineval määral. Rottide põgenemislatentsus suurtes annustescistanche glükosiididrühmas ja kontrollrühmas 4. ja 5. päeval olid oluliselt madalamad kui mudelrühmas (P < 0,05).="" pärast="">ajuisheemia-reperfusioonvigastused, organisatsiooni EAA sisaldus ja rottide hipokampuse ajupiirkonnad NF - KB, valgu ekspressioonitasemed olid oluliselt kõrgemad (P < 0,05), EAA sisalduse kasutamine ja ravimite sekkumine pärast seda, kui rottidel oli aju hipokampus NF - KB , valgu ekspressioonitase erineva languse astmega, suur annuscistanche glükosiididrühma, EAA sisalduse ja ravimi kontrollrühma rottidel oli aju hipokampus NF - KB, valgu ekspressioonitasemed olid oluliselt madalamad kui mudelrühmal (P < 0,05).="" järeldus:="">ajuisheemia-reperfusioon, ergutavate aminohapete (EAA) sisaldus on ülesreguleeritud ja seotud valkude aktiveerimine mõjutab rottide kognitiivset funktsiooni.Cistanche glükosiididvõib vähendada EAA, NF-KB ja valgu ekspressiooni taset rottide hipokampuse ajus ja seeläbi parandada rottide kognitiivset funktsiooni.

Märksõnad: Tsistanche glükosiid; Ajuisheemia-reperfusioon; Ergutavad aminohapped (EAA); NF - KB; Valgu ekspressiooni tase

cistanche glükosiidid

1. Materjalid ja meetodid

1.1 Katseloomad

60 8-nädalased SPF-klassi terved isased SD-rotid, kaaluga (200±20) g, ostetud Anhui Meditsiiniülikooli Katseloomade Keskusest, sertifikaadi number: 0001507. Sobib aretamiseks 1 nädalaks keskkond toatemperatuuril 22-24 kraadi ja suhtelist õhuniiskust 45–55 protsenti. Sel perioodil võite vabalt süüa ja juua ning 12 tundi vahelduvat valgustust. Katseprotsess järgib rangelt "Juhivad arvamusi katseloomade ravimise kohta".

1.2 Peamised instrumendid ja reaktiivid

Tsistanche glükosiididon pärit Shanxi Yuning Biotechnology Co., Ltd.-st, spetsifikatsioon: 80 protsenti; Oksiratsetaami ostetakse ettevõttelt CSPC Ouyi Pharmaceutical Co., Ltd.; EAA standardtoode pärineb Ameerika Sigmalt, puhtusaste 99,9 protsenti; Kõrgfektiivset vedelikkromatograafiat pakub Shimadzu, Jaapan, LC-6A type; NF-KB komplekt, tau valgu komplekt, P-tau valgu komplekt, amüloidvalgu komplekt osteti ettevõttelt Shanghai Jingkang Biological Engineering Co., Ltd.

1.3 Rühmitamine ja modelleerimine

Juhuslike arvude tabeli meetodi kohaselt jaotati 60 SD isasrotti juhuslikult võltsrühma, mudelrühma ja väikese annusega rotti.Tsistanche glükosiidrühm, suur annusTsistanche glükosiidrühmas ja ravimi kontrollrühmas, igas rühmas 12 rotti. Roti mudelajuisheemia ja reperfusioonreplitseeriti õmblusmeetodil [6].

1.4 Manustamisravi

Vastavalt "Inimese ja looma kehapinna konversiooni ekvivalentannuse suhte tabelile" arvutati roti sondidoos. Madal ja kõrge annuscistanche glükosiididrühmadele manustati sondiga vastavalt 2,5 mg/kg ja 10 mg/kg ning ravimi kontrollrühmale. Vastavalt oksiratsetaami annusele 450 mg/kg anti võltsoperatsiooni rühmale ja mudelrühmale maosiseselt sama kogus tavalist soolalahust üks kord päevas, 2 nädalat pidevat ravi.

1.5 Vaatlusnäitajad

Kognitiivse funktsiooni hindamine Morrise veelabürindi testi kasutati kognitiivse funktsiooni hindamiseksajuisheemia-reperfusioonrotid: ümmargune Morrise veelabürindi bassein, mille siseläbimõõt on 30 cm ja siseläbimõõt 160 cm. Basseini sisesein on värvitud mustaks ja jagatud 4 sama alaga kvadrandiks. Kvadrant valitakse juhuslikult, et ehitada peidetud platvorm 1 cm veepinnast allapoole. Üks päev pärast manustamist alustati veelabürindi positsioneerimise navigatsioonikatset. Asetage rott juhusliku kvadrandi sisenemispunktist basseini näoga basseini seina poole ja registreerige roti põgenemislatentsus (aeg, mis kulub rotil peidetud platvormi leidmiseks ja sellel seismiseks vähemalt 3 sekundit). Kui rott ei leia peidetud platvormi 2 minuti jooksul, võtke puupulk, et liigutada roti tupp platvormile ja panna see 30ndateks platvormile seisma. Roti põgenemise latentsusajaks registreeritakse 120 sekundit ja katset jätkatakse 5 päeva.

1.6 Statistilised meetodid SPSS22.0 analüüsimiseks kasutati statistikatarkvara.

Mõõtmisandmed on tähistatud (x ± s ), mis on normaalselt jaotunud ja ühtlase dispersiooniga. Rühmadevaheliseks võrdlemiseks kasutatakse sõltumatu valimi t-testi ja rühmadevaheliseks võrdlemiseks paaris-t-testi. P<0.05 is="" considered="" as="" the="" difference="" is="" statistically="">

2. Tulemused

2.1 Tistanche glükosiidide mõju ajuisheemia-reperfusioonikahjustusega rottide positsioneerimise navigatsioonikatse põgenemislatentsusele

Iga rühma rottide keskmine põgenemise latentsus muutus 5d veelabürindi navigatsioonikatses oluliselt. Katse jätkudes näitas iga rühma rottide põgenemislatentsus erineval määral lühenemist. Võrreldes mudelirühmaga, on rottide põgenemislatentsus madala ja suure annuse korralcistanche glükosiididrühmas ja ravimi kontrollrühmas lühenesid oluliselt ning rottide põgenemislatentsus suurtes annustes GC-de rühmas ja ravimi kontrollrühmas oli märkimisväärne 4. ja 5. päeval.

Oluliselt madalam kui mudelirühmal (P<>

Tabel 1 Mõjucistanche glükosiididajuisheemia-reperfusioonikahjustusega rottide positsioneerimise navigatsioonikatse põgenemislatentsuse kohta (x ± s, s)

Märkus. Võrreldes võltsoperatsioonide rühmaga, △P＜{{0}}.05; võrreldes mudelirühmaga ▲P＜0,05.

2.2 Tsistanche glükosiidide mõju EAA sisaldusele ajuisheemia perfusioonikahjustusega rottide ajukoes.

Pärastajuisheemia-reperfusioonvigastuse korral suurenes EAA sisaldus rottide ajukoes märkimisväärselt (P<0.05). after="" drug="" intervention,="" the="" eaa="" content="" in="" the="" brain="" tissue="" of="" the="" rats="" decreased="" to="" varying="" degrees.="" compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" contents="" of="" eaa="" in="" the="" high-dose="">cistanche glükosiididrühma ja ravimi kontrollrühma arv vähenes oluliselt (P<>

Tabel 2 Mõjucistanche glükosiididajuisheemia perfusioonikahjustusega rottide EAA sisalduse kohta ajukoes (x ± s, μmol/g)

Märkus. Võrreldes võltsoperatsioonide rühmaga, △P＜{{0}}.05; võrreldes mudelirühmaga ▲P＜0,05.

2.3 Tsistanche glükosiidide mõju NF-KB ja valgu ekspressioonile ajuisheemia perfusioonikahjustusega rottide hipokampuses

Immunohistokeemia näitas, et mudelrühma hipokampuse 4 proteiini ekspressioon oli kõrge, mis erines oluliselt võltsoperatsiooni rühma omast (P＜{1}}.05). Pärast ravimite sekkumist langes 4 valgu ekspressioonitase rottide hobuste ajus, suurte annuste vahel esines olulisi erinevusi.cistanche glükosiididrühm, ravimi kontrollrühm ja mudelrühm (P<>

3 Arutelu

Ajuisheemia-reperfusioonvõib põhjustada immuunpõletikulist reaktsiooni, NO massilist vabanemist, hapniku vabade radikaalide teket, rakusisest kaltsiumi ülekoormust, suurenenud EAA vabanemist ja muid reaktsioone ning indutseerida neuronite degeneratsiooni ja nekroosi, mis mõjutab tõsiselt ajukoe normaalset talitlust [8]. NF-KB on regulatiivne tegur, mis reguleerib immuun- ja põletikulisi reaktsioone. Uuringud on näidanud, et NF-KB aktivatsiooni pärssimine tuumas ja tsütoplasmas võib tõhusalt vähendada närvirakkude aju apoptoosi infarkti fookuspiirkonnas [9]. EAA on kesknärvisüsteemis jaotunud oluline neurotransmitter. Pärastajuisheemia ja reperfusioon, neuronid läbivad depolarisatsiooni ja nende võime võtta EAA-d on oluliselt vähenenud, mille tulemusena suureneb ajukoes EAA sisaldus ebanormaalselt. Kui EAA sisaldus on liiga kõrge, põhjustab selle neurotoksilisus ajukoe pidevat kahjustust, põhjustab veelgi neuronaalset apoptoosi ja kahjustab ajukoe normaalset funktsiooni [10].

Wang Lu et al. [15] näitas, et:Tsistanche glükosiidvõib suurendada selgroolülirakkude elulemust hipokampuse CA1 piirkonnas ja vähendada MDA-d, et suurendada GSH-Px ja SOD aktiivsust, kinnitades, etTsistanche glükosiidsuudab tõhusalt eemaldada hapnikuvabu radikaale ja parandada Alzheimeri tõvega rotte. Õppige kognitiivseid funktsioone. Huang Huilian et al. [16] jälgisid vaskulaarse dementsusega patsientide kognitiivset funktsiooni ja leidsid, etTsistanche glükosiidvõib vähendada seerumi P-tau valgu ekspressioonitaset patsientidel ja parandada patsientide igapäevaelu. Nad tegid selle ettepanekuTsistanche glükosiidvõib reguleerida valkude ekspressioonitaset kehas, vähendades seeläbi vaskulaarse dementsusega patsientide ajukahjustuse taset. Qi Yue et al. [17] täheldasCistanche glükosiidi mõjupeamise ravimina mudelhiirte käitumist ja tau valgu ekspressiooni mõjutades, replitseerides Alzheimeri tõve hiiremudelit, ning leidis, et hiirte põgenemislatentsus lühenes ja tau valkude fosforüülimise ekspressioon oli pärsitud ning hiirte õppimis- ja mäluhäired vähenesid. tõhusalt täiustatud. Seda on nähaTsistanche glükosiidvõib vähendada ajukoe kahjustusi ja parandada närvifunktsiooni selliste mehhanismide kaudu nagu valgu ekspressioonitaseme reguleerimine ja oksüdatiivse stressi pärssimine. Vere reperfusioonikahjustuse võimalik mehhanism.

Ravitud rottide põgenemislatentsusTsistanche glükosiidlühendati erineval määral. EAA sisaldus ajukoes ning NF-KB ja valgu ekspressioon hipokampuses olid alla reguleeritud, mis viitab sellele, et rottide kognitiivne funktsioon on tõhusalt paranenud. EAA sisaldus ajukoes vähendab selle neurotoksilisust ja kaitseb teatud määral neuroneid. Lisaks,Tsistanche glükosiidvõib pärssida NF-KB valgu ekspressiooni ja takistada selle aktiveerimisprotsessi, blokeerides seeläbi signaaliraja ülekandeprotsessi ja vähendades neuronaalsete rakkude apoptoosi.Tsistanche glükosiidvõib alareguleerida tau valgu, P-tau valgu ja A amüloidi ekspressioonitasemeid hipokampuses ning takistada nende liigset kogunemist rakkudesse, mis omakorda võib kahjustada neuroneid. Seda on nähaTsistanche glükosiidsaab vähendadaajuisheemia-reperfusioonvigastused EAA ja valguregulatsiooni kaudu, parandades seeläbi keha ajukoe funktsiooni. Võrreldes väikeste ja suurte annustega GC-de rühmade toimet rottidel, on näha, et suurtes annustes GC-de paranemine on paremmõju ajuisheemia-reperfusioonilevigastused rottidel. Spekuleeritakse, etTsistanche glükosiidon teatud kontsentratsioonist sõltuv raviajuisheemia-reperfusioonvigastusja suurtes annustescistanche glükosiididneil ei ole vähem kui oksiratsetaami terapeutiline toime. Seda on nähaCistancheon Hiina taimne ravim, millel on kõrge kliiniline rakendusmehhanism. Selle toimemehhanism on suhteliselt keeruline ja toimemehhanism väga ulatuslik. See hõlmab konkreetselt valke, rakke ja muid välju. Seda võib kasutada uute ravimite, nagu Parkinsoni tõbi ja Alzheimeri tõbi, väljatöötamiseks. Peamine materjal. Kuid praegused uuringud selle kohtaCistancheon suhteliselt nõrk ning selle mitmesugune tundmatu ja piisav farmakoloogia ja toimemehhanism vajavad täiendavat selgitamist. Oleme alustanud mitmetasandilisi valkude, geenide, rakkude, molekulide jne uuringuid, et selgitada erinevate tõhusate koostisosade sihtmärke. Neuropsühhiaatriliste haiguste tulevasel ravil on laialdased rakendusväljavaated.

Kokkuvõttes,ajuisheemia ja reperfusioonvõib põhjustada EAA, NF-KB ja valgu ebanormaalset ekspressiooni rottide hipokampuses ning süvendada ajukahjustust ja kognitiivset düsfunktsiooni.Tsistanche glükosiidvõib tõhusalt inhibeerida NF-KB ekspressiooni ja reguleerida tau valgu, P-tau valgu ja A amüloidi ekspressioonitasemeid roti ajukudede EAA-s ja hipokampuses, mida saab kasutada uue raviviisina.isheemilinetserebrovaskulaarne haigus.

Tistanche glükosiid ravib ajuisheemiat-reperfusiooni

Viited

[1] Yuan Lingyue, Zhai Dongyu. Ketamiin vähendab põletikulist reaktsiooniajuisheemia-reperfusioonvigastused hiirtel ja NF-κB signaaliraja korrelatsiooniuuring [J]. Hiina apteeker, 2020, 23(4): 614-619.

[2] Li Ping, Yu Jingping, Chen Yixuan jt. Mõjudajuisheemia-reperfusioonkahjustus neuronaalsete vigastuste patoloogilise morfoloogia kohta ajukoore EPL piirkonnas ja hipokampuse CA1 piirkonnas [J]. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020, 35 (3):1488-1492.

[3] Wen Yan, Yu Guan. Hematoentsefaalbarjääri roll Alzheimeri tõve patogeneesis [J]. Chongqing Medical Journal, 2016, 45(8): 1116-1118. [4] Li Chuanwen, Zhang Rong, Hou Liang jt. SIRT1/NF-kB rada osaleb resveratroolis, et parandada põletikulist reaktsiooniajuisheemia-reperfusioonvigastus rottidel[J].Journal of Anhui Medical University, 2018, 53(1):6-9.

[5] Yin Shuiling, Wang Haibo, Yang Shuo. NeuroprotektiivCistanche'i mõjupolüsahhariide, aktiveerides Wnt/-kateniini signaaliülekanderaja 6-HODA-indutseeritud Parkinsoni tõvega rottidel[J]. Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine in Cardio-Cerebrovascular Disease, 2020, 18(8):1227-1230.

[6] Li Zhenzong, Zhao Yumei, Yuan Hui. Roti fookuskauguse mudeli modifitseerimineajuisheemiaõmblusmeetodiga[J]. Chinese Journal of Minimally Invassive Neurosurgery, 2018, 23(9): 419-422.

[7] Longa EZ, Weinstein PR, Carlson S jt. Pöörduv keskmise ajuarteri oklusioon ilma kraniektoomiata rottidel.[J]. Insult; ajuvereringe ajakiri, 1989, 20(1):84.

[8] Xie Lihua, Liao Jun. Uurimused Hiina meditsiini kombineerimise seaduse kohta haiguste ravis.Tserebraalne isheemia-reperfuuspealVigastus Ühingu reeglite alusel[J]. Hunan Traditional Chinese Medicine Journal of Pharmaceutical University, 2020, 40(1): 65-69.

[9] Li fänn. Kurkumiin vähendab Alzheimeri tõve põikisuunaliste hiirte aju neuronite kahjustusi, inhibeerides TLR4/NF-kB signaalirada [J]. Anatoomilised uuringud, 2017, 39(2): 102-105.

[10]Wang Weiyao, Chen Ling, Yue Xueling jt. Kroonilise ohjeldusstressi mõju ruumilisele õppimisele ja mälule ning ergastavate aminohapete tasemele eakate rottide hipokampuse dentate gyrus [J]. Jilini ülikooli ajakiri (Medical Edition), 2018, 44 (1):8-12.

[11] Yang Jianhua, Mai Wu Judan Alifu, Ju Bowie jt. Uuring lahtistavate tõhusate osade ekstraheerimisprotsessi ja farmakodünaamika kohtaCistanche[J]. Journal of Food Safety and Quality Inspection, 2019, 10(15) ): 5069-5075.

[12]Ailadan·Maimaiti Aili, Yang Ting, Yuan Jie jt. Polüsahhariidide ekstraheerimistehnoloogia ja in vitro antioksüdantne aktiivsusCistanchetuhk[J]. Chemistry and Bioengineering, 2020, 37(2) ): 36-41.

[13] Ma Xiaoqing, Wang Jie, Hu Junping jt. FarmakodünaamikaCistanche fenüületanoidglükosiididgentamütsiinist põhjustatud ägeda neerukahjustuse kohta rottidel [J]. Xinjiangi meditsiiniülikooli ajakiri, 2020, 43(7): 942 -946, 950.

[14] Deng Nan, Shen Yajuan, Ding Hui jt. Edusammud ravimi farmakoloogiliste mõjude kohtaCistanchedeserticola polüsahhariidi komponendid[J]. Liaoningi traditsioonilise hiina meditsiini ülikooli ajakiri, 2020, 22(6): 67-71.

[15] Wang Lu, Bai Yumeng, Li Xiaoyu jt. MõjudCistanche glükosiididKognitiivse funktsiooni ja oksüdatiivse stressi õppimisest Alzheimeri tõve mudelrottidel[J]. Journal of Anatomy, 2020, 43(3): 194-199, tagakaas 3.

[16]Huang Huilian, Chen Li. MõjudCistanche glükosiididKognitiivse funktsiooni ja seerumi p-tau valgu ekspressiooni kohta vaskulaarse dementsusega patsientidel [J]. Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine Cardio-Cerebrovascular Disease, 2019, 17(8):1248- 1250.