Bushen Huoxue Xiezhuo keetmise mõju neerukoe apoptoosile ja fibroosile rottidel, kellel on 5/6 nefrektoomia HIF-1 / PKM2 põhjal
Jan 27, 2026
3.4 Bushen Huoxue Xiezhuo keetmise mõju -SMA, TGF-, FN ja kollageen-1 valgu ekspressioonile CRF-rottide neerukoes
Nagu on näidatud joonistel 3-6, suurenes näidisrühma neerukoes SMA, TGF-, FN ja kollageen-1 valgu ekspressioon märkimisväärselt (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of α-SMA, TGF-β, FN, and collagen-1 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.
Tabel 2 Bushen Huoxue Xiezhuo keetmise mõju uurea, Scr ja ₂-MG seerumi tasemele CRF-rottidel (x̄±s, n=10)
| Grupp | Uurea/(mmol/l) | Scr/(μmol/L) | ₂-MG/(mg/l) |
|---|---|---|---|
| Näidisopereeritud rühm | 6.23±0.63 | 37.35±0.83 | 0.98±0.13 |
| Mudelirühm | 23.02±0.73* | 118.57±1.03* | 3.95±1.07* |
| Madala annuse rühm | 21.23±0.69# | 112.45±0.87# | 2.57±0.35# |
| Keskmise annusega rühm | 18.02±0.54# | 93.18±1.17# | 1.98±0.09# |
| Suurte annustega rühm | 15.23±0.33# | 87.24±1.08# | 1.13±0.17# |
| Benasepriili rühm | 19.09±0.59# | 105.77±0.67# | 2.48±0.15# |
Märkus: *P<0.05 vs. sham-operated group; #P<0.05 vs. model group
3.5 Bushen Huoxue Xiezhuo keetmise mõju HIF-1, PKM2 ja HK2 mRNA ekspressioonile CRF-rottide neerukoes
Nagu on näidatud joonisel 7, oli näidisoperatsiooni saanud rühmaga võrreldes HIF-1, PKM2 ja HK2 mRNA ekspressioon mudelrühma neerukoes märkimisväärselt suurenenud (P<0.05). Compared with the model group, the mRNA expressions of HIF-1α, PKM2, and HK2 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.
Joonis 3. Neere toniseeriva, verd aktiveeriva ja hägusust kõrvaldava valemi mõju -SMA valgu ekspressioonile CRF-rottide neerukoes (ICH, ×400)
A. võltsitud rühm
B. Mudelirühm
C. Väikestes annustes neere toniseeriv, verd aktiveeriv ja hägusust kõrvaldav valemirühm
D. Keskmise annusega neere toniseeriv, verd aktiveeriv ja hägusust kõrvaldav valemirühm
E. Suurte annustega neerude toniseeriv, verd aktiveeriv ja hägusust kõrvaldav valemirühm
F. Benasepriili rühm
Joonis 4. Neere toniseeriva, verd aktiveeriva ja hägusust kõrvaldava valemi mõju TGF-valgu ekspressioonile CRF-rottide neerukoes (ICH, × 400)
A. võltsitud rühm
B. Mudelirühm
C. Väikestes annustes neere toniseeriv, verd aktiveeriv ja hägusust kõrvaldav valemirühm
D. Keskmise annusega neere toniseeriv, verd aktiveeriv ja hägusust kõrvaldav valemirühm
E. Suurte annustega neerude toniseeriv, verd aktiveeriv ja hägusust kõrvaldav valemirühm
F. Benasepriili rühm
Wecistanche'i tugiteenus – koostöö kohta lisateabe saamiseks
E-post:wallence.suen@wecistanche.com
3.6 Bushen Huoxue Xiezhuo keetmise mõju HIF-1, PKM2 ja HK2 valgu ekspressioonile CRF-rottide neerukoes
Nagu on näidatud joonisel 8, oli näidisoperatsiooni saanud rühmaga võrreldes HIF-1, PKM2 ja HK2 valgu ekspressioon mudelrühma neerukoes märkimisväärselt suurenenud (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of HIF-1α, PKM2, and HK2 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.
3.7 Bushen Huoxue Xiezhuo keetmise mõju Baxi, Bcl-2 ja kaspaas-3 valgu ekspressioonile CRF-rottide neerukoes
Nagu on näidatud joonisel 9, suurenes näidisoperatsiooniga rühmaga võrreldes märkimisväärselt Baxi ja Kaspaas-3 valgu ekspressioon mudelrühma neerukoes, samas kui Bcl-2 valgu ekspressioon oli oluliselt vähenenud (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of Bax and Caspase-3 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased, and the protein expression of Bcl-2 was significantly increased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.
Joonis 7. Neere toniseeriva, verd aktiveeriva ja hägusust kõrvaldava valemi mõju HIF-1, PKM2 ja HK2 mRNA ekspressioonile CRF-rottide neerukoes
A. võltsitud rühm
B. Mudelirühm
C. Väikestes annustes neere toniseeriv, verd aktiveeriv ja hägusust kõrvaldav valemirühm
D. Keskmise annusega neere toniseeriv, verd aktiveeriv ja hägusust kõrvaldav valemirühm
E. Suurte annustega neerude toniseeriv, verd aktiveeriv ja hägusust kõrvaldav valemirühm
F. Benasepriili rühm
Märkus. Võrreldes võltsoperatsiooniga rühmaga,
∗ P<0.05; Compared with the model group,
#P<0.05
Joonis 8. Neere toniseeriva, verd aktiveeriva ja hägusust kõrvaldava valemi mõju HIF-1, PKM2 ja HK2 valkudele CRF-rottide neerukoes
A. võltsitud rühm
B. Mudelirühm
C. Väikestes annustes neere toniseeriv, verd aktiveeriv ja hägusust kõrvaldav valemirühm
D. Keskmise annusega neere toniseeriv, verd aktiveeriv ja hägusust kõrvaldav valemirühm
E. Suurte annustega neerude toniseeriv, verd aktiveeriv ja hägusust kõrvaldav valemirühm
F. Benasepriili rühm
Joonis 9. Neere toniseeriva, verd aktiveeriva ja hägusust kõrvaldava valemi mõju Bax-, Bcl-2- ja kaspaas-3-valkude ekspressioonile CRF-rottide neerukoes
A. võltsitud rühm
B. Mudelirühm
C. Väikestes annustes neere toniseeriv, verd aktiveeriv ja hägusust kõrvaldav valemirühm
D. Keskmise annusega neere toniseeriv, verd aktiveeriv ja hägusust kõrvaldav valemirühm
E. Suurte annustega neerude toniseeriv, verd aktiveeriv ja hägusust kõrvaldav valemirühm
F. Benasepriili rühm
Märkus. Võrreldes võltsoperatsiooniga rühmaga,
∗ P<0.05; Compared with the model group,
#P<0.05
4 Arutelu
Viimastel aastatel on kroonilise neeruhaigusega patsientide arv kasvanud ning ka selle levimus on oluliselt tõusnud. Tuginedes kroonilise neeruhaiguse kui "liigsusega komplitseeritud puudulikkuse" patogeneesile, pakkus professor Tan Jinchuan välja ravipõhimõtte, milleks on neerude ja põrna toniseerimine, vereringe aktiveerimine ja hägususe eemaldamine. Varasemad uuringud on näidanud, et Bushen Huoxue Xiezhuo Keetmine võib neerufunktsiooni kaitsmiseks reguleerida selliseid teid nagu autofagia, apoptoos ja fibroos. Asjakohased uuringud on näidanud, et rabarber, astragalus, angelica, salvia miltiorrhiza ja nende toimeained võivad kõik pärssida neerufibroosi ja kaitsta neerufunktsiooni [7]. Selle uuringu tulemused näitasid, et võrreldes mudelrühmaga parandasid kõik Bushen Huoxue Xiezhuo Decoctioni annustamisrühmad uurea, Scr ja ₂-MG taset seerumis, samuti kollageenikiudude ladestumist neerukoes erineval määral, mis viitab sellele, et Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction mängib olulist rolli taaste fibronaalses funktsioonis ja kaitses.
Eelkõige on sarnaseid neerude kaitsvaid toimeid täheldatud Cistanche tubulosa puhul, mis on klassikaline TCM-i ürt, mida tuntakse "kõrbe ženšennina" ja mida peetakse kõrgeima kvaliteediga neerude toitmiseks ravimmaterjaliks [15]. TCM-teoorias hinnatakse Cistanche tubulosa kõrgelt selle võime tõttu "ergutada neeru yangi ja täiendada essentsi" ning kaasaegsed uuringud on kinnitanud, et see on rikas selliste toimeainete nagu ehhinakosiid, verbaskosiid ja flavonoidid [15] poolest. Need komponendid võivad pärssida neerurakkude apoptoosi, soodustada neerurakkude proliferatsiooni, parandada kahjustatud neerukude ja laiendada neerude veresooni – mõju, mis on kooskõlas neerukaitsemehhanismidega, mida on täheldatud Bushen Huoxue Xiezhuo decoctionis [15]. Sellised leiud rõhutavad neerude toitvate omadustega TCM-i ürtide potentsiaali kroonilise neeruhaiguse ravis.
Apoptoos on üks olulisi CRF-i patogeneesi aluseks olevaid mehhanisme. Füsioloogilistes tingimustes säilib õrn dünaamiline tasakaal pro-apoptootiliste ja anti-apoptootiliste pereliikmete vahel. Kui apoptoos on ülemääraselt aktiveeritud, põhjustab see patoloogilisi muutusi glomerulites ja neerutuubulites, kahjustades seeläbi neerufunktsiooni. Kui pro-apoptootiline valk Bax on aktiveeritud, indutseerib see mitokondriaalse välismembraani läbilaskvuse suurenemist, mille tulemuseks on mitokondriaalse sisemembraani potentsiaali kokkuvarisemine ja tsütokroom C (CytC) vabanemine tsütoplasmasse, mis aktiveerib kaspaas-9 ja vallandab veelgi kaspaas-3-sõltuva apoptoosi. Asjakohased uuringud on näidanud, et proksimaalsetes tubulaarsetes epiteelirakkudes võib Baxi geeni väljalöömine või Bcl-2 ekspressiooni ülesreguleerimine tõhusalt pärssida apoptootilist protsessi [9]. Selles uuringus leiti, et kõik Bushen Huoxue Xiezhuo Decoctioni annused vähendasid oluliselt pro-apoptootiliste tegurite Bax ja Caspase-3 ekspressioone ning suurendasid apoptootilise faktori Bcl-2 ekspressiooni, mis viitab sellele, et Bushen Huoxue Xiezhuo Keetmine võib parandada neerufunktsiooni, blokeerides apoptootilise raja.
Neerufibroos on krooniline neeruhaigus, mida vahendavad mitmed tsütokiinid, mida reguleerivad mitmed signaalirajad ja mida juhivad mitmed tegurid. See on levinud tee, mis viib lõppstaadiumis neeruhaiguseni, mida iseloomustavad neerukoe kahjustused, põletik, ECM-i ladestumine ja tubulaarne epiteeli-mesenhümaalne üleminek. Neerufibroos hõlmab glomerulaarfibroosi ja tubulointerstitsiaalset fibroosi [8]. Uuringud on kinnitanud, et varase CRF-i peamine patoloogiline ilming on neerufibroos ning neerufibroosi progresseerumise edasilükkamine on neerukahjustuse vähendamisel ja neerupuudulikkuse progresseerumise leevendamisel väga oluline [10]. TGF- on fibroosi juhtiv alatüüp, mis reguleerib ECM-i sünteesi Smadi signaaliraja kaudu. FN osaleb rakkude adhesioonis, migratsioonis ja ECM-i koostamises. ECM-i ülemäärase ladestumise peamine rakuline allikas on müofibroblastid ja nende struktuurne transdiferentseerumine on neerufibroosi esinemise ja arengu võtmetegur. Kollageen-1 pärineb peamiselt müofibroblastidest ja -SMA-st, mis on müofibroblastide üks peamisi morfoloogilisi omadusi ja aktivatsioonimarkereid, mõlema ekspressioonitasemed on positiivses korrelatsioonis neerufibroosi astmega [11]. Asjakohased uuringud on näidanud, et mitmesuguste krooniliste neeruhaiguste korral on -SMA ja kollageen-1 mRNA ja valgu ekspressioon oluliselt suurenenud, millega kaasneb raske neerufibroos [12]. Selles uuringus vähendas Bushen Huoxue Xiezhuo Keetmine märkimisväärselt fibroosimarkerite, nagu -SMA, TGF-, FN ja kollageen-1, ekspressiooni, mis näitab, et Bushen Huoxue Xiezhuo keetmisel on oluline mõju neerufunktsiooni parandamisele ja neerufibroosi progresseerumise aeglustamisele.
HIF-1 /PKM2 signaalirada on tihedalt seotud apoptoosiga. HIF-1 võib soodustada apoptoosi, aktiveerides transkriptsiooniliselt Baxi ja inhibeerides Bcl-2, ning PKM2 võib avaldada mõju, reguleerides apoptoosiga seotud valke, nagu p53 pärast tuuma translokatsiooni [13]. Imetajate hüpoksilise vastuse ühe peamise regulaatorina võib HIF-1 ülesreguleerida TGF-i ekspressiooni läbi HIF-1 hüpoksilistes neerutuubulite epiteelirakkudes neerude interstitsiaalse fibroosi mudelis, aktiveerides seeläbi Smadiga seotud radu ja indutseerides fibroosimarkerite, nagu -SMA ja Collagen-1, ekspressiooni. Lisaks apoptoosi regulatsioonis osalemisele toetab PKM2 ka fibrootiliste rakkude energiavajadust, reguleerides glükolüütilist metabolismi [14]. Selle uuringu tulemused näitasid, et HIF-1 , PKM2 ja HK2 tasemed CRF-i mudelirühma neerukoes suurenesid märkimisväärselt, samas kui TCM-i rühmas vähenesid oluliselt, mis viitab sellele, et Bushen Huoxue Xiezhuo Keetmine võib pärssida apoptoosi ja aeglustada neerufibroosi, pärssides renaalse koe {{M2}tee} /PKM2} aktivatsiooni.
Kokkuvõttes võib Bushen Huoxue Xiezhuo Keetmine pärssida CRF-rottide raku apoptoosi ja fibroosi, parandada CRF-mudeli rottide neerukahjustusi ja selle mehhanism võib olla seotud HIF-1 /PKM2 signaaliraja reguleerimisega.
Viited
[1] American Journal of Health-System Pharmacy. Kdigo 2024 kliinilise praktika juhis kroonilise neeruhaiguse hindamiseks ja raviks[J]. Kidney International, 2024, 105(4S): 117–314.[2] Zhang L, Liu L, Bai M jt. Hüpoksiast põhjustatud HE4 tubulaarsetes epiteelirakkudes soodustab rakuvälise maatriksi akumuleerumist ja neerufibroosi NF-κB[J] kaudu. FASEB Journal, 2020, 34(2): 2554–2567.[3] Hu D, Wang L, Zhang Y jt. Sanqi suukaudne lahus leevendab neerufibroosi, pärssides fibroblastide aktivatsiooni HIF-1 /PKM2/glükolüüsiraja kaudu kroonilise neeruhaiguse korral[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2024, 335: 118679.[4] Palsson-Mcdermott EM, Curtis AM, Goel G jt. Püruvaatkinaas M2 reguleerib Hif-1 aktiivsust ja IL-1 induktsiooni ning on Warburgi efekti kriitiline määraja LPS-ga aktiveeritud makrofaagides [J]. Cell Metabolism, 2015, 21 (1): 65–80.[5] Vt EJ, Cullen V. Kommentaar KDIGO kliinilise praktika juhendi 2021. aasta värskenduse kohta kroonilise neeruhaiguse korral vererõhu juhtimiseks[J]. Nephrology (Carlton, Vic), 2025, 30(1): e14414.[6] Wu ZH, Cao WX, Tan M jt. Rabarberi Xiezhuo keetmise mõju uurimine autofagiale ja apoptoosile kroonilise neerupuudulikkusega rottidel mTORC1 / p70S6K raja põhjal [J]. Lishizhen Medicine and Materia Medica Research, 2023, 34(2): 321–324.[7] Wang J, Li YT, Liu DW jt. Teadustöö edusammud rabarberi antrakinoonide peamiste aktiivsete komponentide mehhanismi kohta neerufibroosi vastu[J]. Traditsiooniline hiina meditsiini uurimus, 2023, 36(10): 92–96.[8] Askari H, Seifi B, Kadkhodaee M jt. Vesiniksulfiidi kaitsev toime kroonilisele neeruhaigusele, vähendades oksüdatiivset stressi, põletikku ja apoptoosi [J]. EXCLI Journal, 2018, 17: 14–23.[9] Solà-Riera C, García M, Ljunggren HG jt. Hantaviirus pärsib apoptoosi, hoides ära mitokondriaalse membraani potentsiaali kadumise elulemust soodustava faktori BCL-2[J] ülesreguleerimise kaudu. PLoS Pathogens, 2020, 16(2): e1008297.[10] Yuan L, Wang L, Wang H jt. Ikariin inhibeerib Epo promootori hüpermetüleerimist, reguleerib peritsüüt-müofibroblastide üleminekut ja parandab neeruaneemiat 5/6 nefrektoomiaga rottidel [J/OL]. Hiina Materia Medica farmakoloogia ja kliinikud: 1-17 [2025-12-17]. https://doi.org/10.13412/j.cnki.zyyl.20250408.004.[11] Sravani S, Saifi MA, Godugu C. Riociguat parandab neerukahjustusi ja fibroosi loommudelil [J]. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2020, 530(4): 706–712.[12] Li L, Zhou G, Fu R jt. Balanophora polyandra Griffist (BPP) ekstraheeritud polüsahhariidid leevendavad neerufibroosi ja EMT-d, pärssides Hedgehog rada [J]. Journal of Cellular and Molecular Medicine, 2021, 25(6): 2828–2840.[13] Rana NK, Singh P, Koch B. CoCl2-simuleeritud hüpoksia kutsub esile rakkude proliferatsiooni ja muudab angiogeneesis ja apoptoosis osalevate hüpoksiaga seotud geenide ekspressioonimustrit [J]. Biological Research, 2019, 52(1): 12.[14] Wang Z, Yu J, Hao D jt. PKM2 aktivaatorile TEPP-46 reageerivad transkriptoomilised signatuurid hüperglükeemilistes inimese neerude proksimaalsetes epiteelitorukestes [J]. Frontiers in Endocrinology, 2022, 13: 965379.[15] Chengdu WeCistanche Bio-Tech., Co Ltd. Cistanche neerude toitmiseks[EB/OL]. https://www.xjcistanche.com/cistanche-extract-product/cistanche-for-nourishing-kidney.html, 2022-08-01.
