TLC-NITS-i kombineeritud tehnoloogia poolt tervishoiutoodetes ebaseaduslikult lisatud soo suurendavate ravimite määramine

Kokkuvõte:Kehtestada avastamismudelsugu parandavad ravimidebaseaduslikult lisatud õhukese kihi kromatograafia (TLC) ja lähedase infrapunaspektroskoopia (NIA) kombineeritud tehnoloogia abil, et saada ebaseaduslikult lisatud ravimite kiireks kvalitatiivseks ja kvantitatiivseks analüüsikstervishoiutooted． Koos The keemiliste ravimite sisaldusTervishoiusooted määratakse HPLC meetodil võrdlusväärtusena． Uuringus kasutati TLC -d． Trihlorometaan-metüülalkohol-ammooniumhüdroksiid (1 0 ∶ 1 ∶ 0． 1) kasutati areneva lahustina ja plaat tuvastati ultraviolettlamp． all． TLC keemiliste komponentide laikude spekter kogus NI ONS． Keemiliste ravimite kiire kvalitatiivne ja kvantitatiivne mudel loodi, kasutades osalise vähimruutude regressioonanalüüsi (PLS) koos ristvalideerimise meetodiga． Ja valideeritud mudeli． jaoks Koostas HPLC analüüsi meetod parema eraldusastme ja laia lineaarse vahemikuga． Asutas laia lineaarse vahemikuga sildenafiili ja noratsetildenafiili TLC-NITS-i analüüsimudelid ning paremad stabiilsed ja ennustatud tulemused． Korrelatsioonikoefitsient (y2), kalibreerimise valideerimise ruutkeskmine viga (ymmSecv) ja prognoosimise keskmine ruutviga ({{1 {1 {0}}}． olid {{1 {0}}． 984, 0． 0 85 ja 0． 081; 0． 982,0． 098 ja 0． 087, vastavalt． Kasutades TLC-NITS-mudelit, tuvastati 9 partii 10 partii seksuaalelu suurendavatest toodetest, mis lisati sildenafiil ja kvalifitseerimata 90%, oli sildenafiili ja noratsetildenafi keskmine suhteline suhteline kõrvalekalle 1． 1．. 86%, 1． 96%, vastavalt． Tulemused näitasid, et TLC-NIMS-i analüüsimudeleid saab kasutada ülaltoodud keemiliste komponentide jaoks kiiret määramist soo parandavates toodetes． Meetod konkreetse ja lihtsa． -ga Mis pakkus ideid lisatud ebaseaduslike ravimite kiireks määramiseks tervishoiutoodetes．．

 

Looduslikud tsistanche taimsed toidulisandid seksuaalse jõudluse jaoks

 

Märksõnad: tervishoiutooted;; lisatud ebaseaduslikult; Tlc-niDS; HPLC; soo parandav toode

 

Kuna avalikkuse teadlikkus tervishoiust suureneb, kasvab nõudlus tervisetoodete järele, eriti tervisetooted, mida nimetatakse traditsiooniliseks Hiina meditsiiniks. Tervistitooted on populaarne termin tervislik toiduainete jaoks, mida nimetatakse välismaal toidulisanditeks. Need ei ole ravimid ja neil on funktsioon inimese funktsioonide reguleerimisel. Neid kasutavad konkreetsed inimrühmad, kuid need ei ole mõeldud haiguste raviks [1]. Seistes silmitsi suure kasumi kiusatusega, lisavad illegaalsed müüjad tervisetoodetele liigseid odavaid keemilisi tooraineid, millel on ilmselge kõrvaltoimed, et parandada toodete tõhusust. See on minu riigi tervisetoodete turgu märkimisväärselt häirinud ja kujutanud tõsist ohtu inimeste tervisele. Näiteks 2009. aastal lisas Xinjiangi piirkonna hüpoglükeemilise terviseprodukt "Tangzhining Capsel" keelatud keemilise ravimi glibenclamiidi liigseid annuseid, põhjustades palju surma. 2014. aastal lisas Shanxi provintsis asuv "Xianxian kaalulanguse kapsel" keemilised ravimid Sibutramiini ja sildenafiili, põhjustades paljudel inimestel kahjulikke reaktsioone või isegi surema. Viimastel aastatel leiti tervisetoodete juhuslikul kontrollimisel ja hindamisel, et ebaseaduslikud tootjad lisasid seksuaaltervise toodetele liigseid annuseid ja traditsioonilisi Hiina meditsiini tervisepreparaate tarbijate petmiseks, ohustades tõsiselt tarbijate tervist [2,3]; Sarnased nähtused, näiteks keelatud keemiliste ravimite liigsed annused, nagu fenafil, biguaniidid, furosemiid ja fenolftaleiin seksuaaltervise, hüpoglükeemilise ja kaalukaotuse korral, on tekkinud lõputu oja ning lisamise varjamine on muutumas üha kõrgemaks [4,5]; Sellised nähtused esinevad sageli ka välismaal [6]. Need ebaseaduslikud teod, millel on laiaulatuslik mõju ja suur kahju, väärivad uimastite reguleerivate asutuste sügavat kaalumist ning eriti oluline on välja töötada kiire turuvalimi ja avastamismeetodid.

Praegu hõlmavad traditsioonilistes Hiina ravimites ja tervisetoodetes keemiliste ravimite ebaseaduslikuks lisamiseks avastamismeetodeid peamiselt õhukese kihi kromatograafia (TLC) [7], suure jõudlusega vedelikkromatograafia (HPLC) [8], vedelikkromatograafia-massi spektromeetria (LC-MS) [9], IMS-metroom (IMS-i spektromeetria (Gaasikromatograafia spektromeetria) [10] [10] [10]) [10], [10]) [10], iM-i spektromeetria (IMS-MS) [10], MS) [10]. Spektromeetria (RS) [11].
Erinevate avastamismeetodite hulgas on LC-MS-i, GC-MS-i ja IMS-i uuritud rohkem, kuid instrumentide kõrge hinna ja keeruka operatsiooni tõttu pole neid lihtne reklaamida ning neid on raske populariseerida linna- ja mägipiirkondades, millel on suhteliselt mahajäänud majandusareng. TLC on üks neljast traditsioonilisest ravimite tuvastamise meetoditest. See on kiire, lihtne ja sellel on head eraldamisefektid. Seda kasutatakse laialdaselt ravimite kvalitatiivses ja kvantitatiivses tuvastamisel. Selle puuduseks on aga see, et sellel peavad olema vastavad võrdlusveded või võrdlusmaterjalid [12, 13]. Infrapunaspektroskoopia (NIRS) lähedal on viimastel aastatel välja töötatud. See kogub CH, OH, SH, NH, C=C ja C {9}} o Rühmad tuvastatud aine rühmade CH, OH, SH, SH, NH, C, C, NH, C=vibratsiooni- ja pöördeteave, et ainete kvalitatiivseks ja kvantitatiivseks analüüsiks lähedases infrapunaspektris. Seda kasutatakse laialdaselt põllumajanduses, nafta, keemiatööstuses, tubakas ja toidus. Praegu on seda järk -järgult rakendatud farmaatsia- ja ravimijärelevalve tööstuses. Sellel on suur arengupotentsiaal ravimite kiire kvalitatiivse ja kvantitatiivse tuvastamise ja analüüsimisel [14, 15].

Seetõttu kasutab see artikkel TLC-NIRS kombineeritud tehnoloogia loomiseks olemasolevaid populaarseid instrumente ja testimismeetodeid. Seksuaaltervise toodete näitena on kehtestatud keelatud seksuaaltervise keemiliste ravimite ebaseadusliku lisamise universaalne kvalitatiivne ja kvantitatiivne tuvastusmudel. Seda saab kasutada tõhusalt, kiiresti ja lihtsalt sõeluuringuks ja tuvastamiseks keelatud keemiliste ravimite lisamiseks turutervise toodetes, vähendades seeläbi avastamiskulusid.

1 instrumenti ja testi ravimeid

1.1 instrumendid

Fourier Transform Tensor 37 NI -spektromeeter (Bruker, Saksamaa), Opus 5. 0 analüüsitarkvara; LC -20 suure jõudlusega vedelikkromatograafil (Shimadzu, Jaapan), LC -lahenduse kromatograafia tööjaam; BS224S elektrooniline analüütiline tasakaal (Sartorius, Saksamaa); Ränidioksiid GF254 õhuke kihi plaat (Qingdao Ocean Biochemical Co., Ltd.).

 

1.2 Testi ravimid

Sildenafil ({0}}, 99,9%) ja Narodenafiil (520039-201902, 96,5%) osteti Hiina toidu- ja ravimite uurimise instituudist ning struktuurid on näidatud joonisel 1. Metanool oli kromatograafiliselt puhas, vesi oli ultrapuuritud ja kloroforit ja klooroforit, ja phofrici, kõik analüüs. Terviseproovid olid turuproovid.

 

Joonis 1 sooga soodustavate keemiliste ravimite struktuurid

 

2 meetodit ja tulemusi

2.. 1 Võrdluslahuse ettevalmistamine ja proovilahendus

Võrdluslahenduse ettevalmistamine: võtke vastavalt umbes 25 mg sildenafiili ja narendenafiili, kaaluge neid täpselt, asetage need 5 ml mahulisse kolbi ja lahustage need metanoolis, et valmistada segatud referentslahus umbes 5 mg/ml; Seejärel võtke vastavalt umbes 5 mg sildenafiili ja narendenafiili, kaaluge neid täpselt, asetage need 5 ml mahulisse kolbi ja lahustage need metanoolis, et valmistada ette ühe identifitseerimislahuse, milles on umbes 1 mg/ml.

Proovilahenduse ettevalmistamine: võtke selle toote annus üks kord, asetage see 5 ml mahulisse kolbi, lisage metanool ja lisage ultraheli 3 0 min (100 W, 56 kHz), jahutage see, lisage märgile metanool ja filtreerige filtri saamiseks. Sisu määramisel mõõtke täpselt 1 ml iga proovilahust, lahustage see liikuvas faasis 25 ml ja filtreerige see 0,45 μm filtrimembraaniga. Kuna positiivsetes proovides tuvastatud komponentide massikontsentratsioonid (keelatud keemiliste ravimitega tervisetooted) on väga erinevad, saab proovivõtumahtu piisavalt suurendada või proovilahust sobivalt lahjendada, et muuta selle lõplik massi kontsentratsioon lineaarses vahemikus.
Positiivse proovilahenduse ettevalmistamine: Kuna Naringenfili jaoks ei tõmmatud positiivset proovi, võeti üks kord tühja proovi (Huangjingbajitian kapsel, Luoyang Kangti bioloogia, testi tulemus oli negatiivne) ja lisati sobivat lahjendatud nakanenfiili referentlahendust. Positiivne proovilahus valmistati vastavalt proovilahuses ettevalmistusmeetodile, nii et naissoost proovide massi kontsentratsioonid positiivses proovilahuses olid vastavalt umbes 5, 7,5 ja 10 mg/ml ning iga massi kontsentratsiooni 4, 3 ja 3 koopiat valmistati paralleelselt.

2. 2 kromatograafilised ja spektraalsed tingimused

2. 2. 1 HPLC kromatograafilised tingimused

Fenomenex ODS C18 (25 0 mm × 4. 6 mm, 5 μm) kromatograafilist kolonni; 45% metanool (a) -55% 0. 3% fosforhappe vesilahust (B) kasutati elueerimise liikuva faasina 30 minutit; Voolukiirus oli 1 ml/min, tuvastuslainepikkus oli 290 nm; Kolonni temperatuur oli 40 kraadi; Süstimise maht oli 10 μl.

 

2. 2. 2 TLC kromatograafilised tingimused

Kasutati ränidioksiidi GF254 õhukese kihi kromatograafiaplaadi ja kloroformi-metanooliammoniaaki (1 0: 1: 0. 1) kasutati areneva lahusti arendamiseks ja aurustumiseks. Pärast kuivati ​​kuivatamist 1 tund kontrolliti märki 254 nm ultraviolettlambi all (vt joonis 2).

 

2. 2. 3 NIRS omandamistingimused

Mõõtmiseks kasutati Bruker NIRS tahket kiudondit, lainearvu vahemik 12, 000 kuni 4, 000 cm -1, 64 skaneerimist, eraldusvõime 16 cm {7}}, temperatuur 10 kuni 30 kraadi ja 5%. Viidena kasutati tühja ränidioksiidi GF254 õhukese kihi plaati ja spekter koguti pärast tausta lahutamist. Iga keemilise komponendi laiku mõõdeti paralleelselt 5 korda ja NIRS -i teave salvestati.

 

2.3 HPLC sisu määramise meetodi loomine

2.3.1 Lineaarse suhte uurimine

2.0 mL of the mixed reference stock solution (sildenafil 5.25 mg/mL; narcolepsy 5.15 mg/mL) was accurately aspirated and diluted to 10 mL with methanol, and then 0.25, 0.1, 0.5, 1. {0, 1,5, 2.. {{2 {0}}}, 2. 0, 2,5, 3. {{3 0}}, 3,5, 4. {{34}, 5. {38}, 6 7. 13. 0, 14. {{6 {6 {62}}}}, 15. 0, 16. 2 0. 26. 0, 27. 0, 28. 0, 29.. 36,0, 37,0, 38,0, 39,0, 40,0, 41,0, 42,0, 43,0, 44,0, 5 ml, lahustuge vastavalt liikuvas faasis ja moodustavad vastavalt kuni 5 ml, raputage hästi.
Vastavalt kromatograafiliste tingimuste kohaselt "2.2.1" viidi läbi proovide analüüs, määrati piigipindala ja regressioonijoone võrrand arvutati iga komponendi piigipindalaga ordinaat (y) ja võrdlusaine massi kontsentratsioonina Abscissa (x): sidenafiil on=3 {8} {8} {8} {8} {8} {8} {8}=0. 9989, lineaarne vahemik 0. 0525 ~ 1,05 ug; Nafthool on y y=1 × 106x -3 184. 4, r=0. 9999, lineaarne vahemik 0,0515 ~ 1,03 ug. Tulemused näitasid, et ülaltoodud referentiainetel oli nende vastavatel lineaarsetes vahemikes hea lineaarsus.

 

2.3. 2 Täpsus, stabiilsus, korratavus ja taastumistesti

Võtke segatud võrdluslahendus jaotises "2.3.1" ja tühja proovi (Huangjingbajitian kapsel, Luoyang Kangti bioloogiline, testi tulemus on negatiivne) ja valmistage ette 6 proovilahust, mis sisaldavad Sildenafiili ja Nardenafiili paralleelselt vastavalt meetodile "2.1". Kromatograafiliste tingimuste kohaselt süstiti segatud võrdluslahust pidevalt täpsuseks; Üks proovilahendustest süstiti stabiilsuse tagamiseks 0, 3, 6, 9, 12 ja 24 tundi; 6 proovilahust valmistati korratavuse ja taastamiseks paralleelselt ning iga proovi süstiti üks kord. Määrati sildenafiili ja Nardenafiili tipppiirkonnad ning arvutati taastumine ja selle RSD väärtus. Tulemused Sildenafiili ja Nardenafiili keskmised taastumismäärad olid 100. 16%, 100. 49%; RSD väärtused olid kõik alla 3% (n=6), mis näitab, et instrumendil oli hea täpsus, proovilahendus oli stabiilne 24 tunni jooksul ning meetodil oli hea taastumine ja korratavus.

 

2.3.3 Sisu määramine

Täpselt aspiraatige iga proovilahendus, süstige ja analüüsige vastavalt kromatograafilistele tingimustele "2.2.1", mõõta iga partii jaoks 3 korda, registreerige tipppindala ja arvutage sisu. Tulemused näitavad, et 10 partii seksuaaltervise proovide hulgas leiti, et 9 partii sisaldasid keelustatud keemilise ravimi sildenafiili ja lisatud annus varieerus suuresti. Avastamise määr oli 90%. Tulemused on toodud tabelis 1 ja joonis 3.

 

Tabel 1 10 soo suurendavasse tootesse ebaseaduslikult lisatud ainete määramise tulemused (n=3)

 

Proov	Tootja	Proovikaal	Sisu (mg/aeg)
Kuldlillede ekstrakt	Lääne -Hiina põllumajandusülikool	1 × 0.88 g	58.79 ± 1.03
Putukate tõrjuv	Hongkongi teaduse ja tehnoloogia ülikool	2 × 0.50 g	73.62 ± 0.21
Saksa kummel	Haiyuni bioloogiline	2 × 0.50 g	22.47 ± 0.23
Varahommik kaste	Hongkongi teaduse ja tehnoloogia ülikool	2 × 0.50 g	8.90 ± 0.03
Ussipuu	USA elupaik	2 × 0.50 g	61.83 ± 0.48
A. Niger	Lääne -Hiina põllumajandusülikool	2 × 0.50 g	45.20 ± 0.04
Kuldniit	Hongkongi teaduse ja tehnoloogia ülikool	2 × 0.50 g	Ei tuvastatud

 

Joonis 3 HPLC 10 soo parandava toote kohta

 

2.4 TLC-NIRSi koostamine kvalitatiivne mudel seksuaaltervise keemiliste ravimite jaoks

2.4.1 Spektriinfo kogumine

Vastavalt "2.2.3" tingimustele koguti vastavalt TLC õhukese kihi plaadil tuvastatud võrdlussikohtade NIR -id vastavalt. Segatud võrdluslahuse kohapealsed mahud olid 1, 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 ja 50 μl ning proovilahuse puhkemaht oli vastavalt 2, 5 ja 10 μl. Iga erinevate kohamahtudega segatud võrdlus- ja proovi võrdluspunkt koguti 5 korda ja NIRS -i ülekatteskeem on näidatud joonisel 4. Katses valiti kalibreerimiskomplektiks segatud viidete spektrid erinevate täppmahtudega ning erinevate kohapealsete kohapealsete teabekomplektide jaoks valitud proovide komplektis olevate proovide komplektiga proovid valiti proovide spektrite spektrid.

Joonis 4 Keemiliste ravimite originaalspektrid