Cistanche Tubulosa vesiekstrakt soolestiku häiretega hiirte soolestiku mikrobiootas

1. Sissejuhatus

Soolestiku mikroorganismid koloniseerivad peamiselt soole luumenist ja limaskestakihti ning ühinevad peremeesorganismiga materjali- ja energiavahetuse, transformatsiooni ja muude protsesside kaudu [1]. Need on signaalimiskeskused, mis integreerivad keskkonnateateid, nagu toitumine, geneetiliste ja immuunsignaalidega, mõjutades järelikult peremeesorganismi ainevahetust, immuunsust, närvisüsteemi ja vastust infektsioonidele [2]. Tavaliselt on soolefloora ja peremeesorganismide vahel dünaamiline tasakaal; soolestiku düsbioos võib aga põhjustada muutusi tervise/haiguste tasakaalus, immuunhäireid ja paljusid haigusi [3]. Mõõdukad muutused soolestiku mikrobiotas on peremeesorganismile vastuvõetavad; see võib siiski anda võimaluse võimendada muutusi muudes raskendavates tegurites, nagu bakteriofaagid, bakteriotsiinid ja oksüdatiivne stress [4].

CISTANCHE TUBULOSA soolestiku mikroobide parandamiseks PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Varasemad uuringud on seda näidanudCistanche tubulosa etanooliekstrakt(CT), traditsiooniline Hiina taimne valem, võib reguleerida rottide soolestiku mikroobide koostist [5] ja CT glükosiidide koguhulk reguleerib soolestiku korrastamata mikrobiootat [6]. Cistanche liike, mis parasiteerivad peamiselt Tamarixi liikide juurtel, nimetatakse ka "kõrbe ženšenniks" ning taimse ravimina kasutatakse Cistanche deserticola (CD) ja Cistanche tubulosa (CT) vartest koosnevat toonikut [7] ]. Leiti, et CT fenüületanoolglükosiidide (PHG) peamised keemilised komponendid, mis on antioksüdandid [8, 9], parandavad reproduktiivfunktsiooni häireid [10], pärsivad maksa tähtrakkude aktivatsiooni, blokeerivad TGF-i signaaliradade juhtivust{{6} }/SMAD [11] ja ennetada veiste seerumi albumiinist põhjustatud maksafibroosi rottidel [12]. CT enam kui 100 komponendi hulgas on polüsahhariid ka üks olulisemaid aineid, mille sisaldus on suur [13, 14]. Varasemad uuringud on näidanud, et C. deserticola polüsahhariidid kutsuvad esile melanogeneesi melanotsüütides, vähendavad oksüdatiivset stressi [15], leevendavad kognitiivset düsfunktsiooni, reguleerides antioksüdantseid ja põletikuvastaseid protsesse rottidel [16], kaitsevad PC12 rakke OGD/RP-indutseeritud vigastuste eest [17]. ],suurendada ehhinakosiidi imendumist in vivoja mõjutada soolestiku mikrobiotat [18].

Probiootikumid on elusad mittepatogeensed mikroorganismid, millel on piisavas koguses manustamisel kasu tervisele ja mis tagavad seedetraktis mikroobide tasakaalu [19]. Need võivad tugevdada mittespetsiifilisi rakulisi immuunvastuseid, mida iseloomustab makrofaagide, looduslike tapjarakkude (NK) ja antigeenispetsiifiliste tsütotoksiliste T-lümfotsüütide aktiveerimine ning mitmesuguste tsütokiinide vabanemine tüvespetsiifilisel ja annusest sõltuval viisil [20]. Probiootilised tüved parandavad sooleepiteeli omadusi TJ modulatsiooni kaudu ja on näidatud, et spetsiifilised probiootilised tüved reguleerivad mutsiini ekspressiooni, mõjutades seeläbi limakihi omadusi ja reguleerides kaudselt soolestiku immuunsüsteemi [21]. Piimhappebakterite (LAB) ja Bifidobacterium tüved on peamised probiootikumid, mida on kasutatud paljudes valdkondades [22–26]. Nende tervisega seotud eelised on arvukad, kuna nende antioksüdantne võime on nende tervisega seotud funktsioonide oluline tegur [27]. Probiootikumid võivad kelaatida metalliioone, et vältida nende oksüdatsiooni katalüüsimist [28, 29]; nad võivad samuti suurendada antioksüdantsete ensüümide ekspressiooni [30, 31], toota erinevaid antioksüdantse toimega metaboliite [32, 33], vahendada antioksüdantide signaaliülekandeteid [34–36] ning reguleerida ensüüme, mis toodavad reaktiivseid hapniku liike (ROS) ja soolestiku mikroorganismide reaktsioon oksüdatiivsele stressile [37].

Hiljutine uuring näitas, et CD polüsahhariidid võivadstimuleerivad mõnede piimhappebakterite kasvu, mis võiks olla kasulik inimeste tervisele [38]. Siiski on CD polüsahhariidide sisaldus erinev CT omast [7, 39] ja see erinevus võib põhjustada soolestiku mikroorganismidele erinevat mõju. Veelgi enam, kuigi CD polüsahhariidid võivad NRF2/HO-1 raja aktiveerimise kaudu vähendada oksüdatiivset stressi [15], võib ühe polüsahhariidi toime erineda mitme kompositsiooni üldisest mõjust CT-s. Seega on vaja täpselt määratleda CT vesiekstraktide mõju soolestiku mikroorganismidele. Lisaks võivad PHG-d vastu seista ka oksüdatiivsele stressile [40] ja pärssida lipopolüsahhariidide poolt vahendatud põletikulisi reaktsioone, aktiveerides Keap1/Nrf2/HO-1 raja [41]. Seetõttu on CT vesiekstrakti mõju määramine väga väärtuslik. Lisaks viitavad CD vesiekstrakti teatud koostisosade mõju oksüdatiivsele stressile ja soolefloorale sellele, et resistentsus oksüdatiivse stressi suhtes võib olla korrelatsioonis soolefloora muutustega.

Eespool nimetatud teemade teadmistes lünkade täitmiseks uurisime CT vesiekstrakti mõju soolestiku mikrofloora häiretega hiirte soolestiku mikrobiootale.ThNeed tulemused annavad väärtuslikku teavet võimalike mehhanismide kohta, mille kaudu CT muudab soolefloorat ja annab soolestiku resistentsuse oksüdatiivse stressi suhtes.

2. Materjalid ja meetodid

2.1. Katseloomad.

Kokku osteti Xinjiangi meditsiiniülikooli katseloomade keskusest 18 SPF-klassi isast C57BL/6J hiirt, kaaluga 18–22 g, litsentsinumbriga SCXK (uus) 2018-0003. Neid hoiti puurides standardsetes tingimustes: 12-tunnine valguse/pimeduse fotoperiood, temperatuur 23 ± 2 kraadi ja niiskus 55 ± 5%. Loomi toideti kaubandusliku toiduga (51% lämmastikuvaba ekstrakti, 25% toorvalku, 4,6% toorrasva, 6,5% toortuhka, 4{20}}% toorkiudu ja 8,9% niiskust) ja kraaniveega. Loomi raviti vastavalt riiklike tervishoiuinstituutide laboriloomade hooldamise ja kasutamise juhendis kirjeldatud soovitustele.

LOODUSLIK TUBULOOS IMmuunsuse PARANDAMISEKS PHGS75% ECH 30% ACT 12%

2.2. Vesiekstrakti ekstraheerimine.

Kuivatatud C. tubulosa viilud, mille hankis Hotan Dichen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd., jahvatati pulbriks ja graanulid osakeste suurusega vahemikus 2{{10}} kuni 40 silma. valitud. Ekstraheerimise tingimused olid järgmised: tahke vedeliku suhe 1:19, temperatuur 80 kraadi, mikrolaineaeg 6 minutit, ultraheliaeg 16 minutit, mikrolainevõimsus 400 W ja ultraheli võimsus 400 W. vesiekstrakti põhikomponentide sisaldus mõõdeti HPLC-ga (Agilent 1260 Infinity II, California, USA). Lühidalt, ehhinakosiidi (0,2 mg/ml) ja akteosiidi (0,2 mg/ml) standardained lahustati 50% metanoolis, et kasutada võrdlusaine lahusena. Seejärel lahustati 1 g CT vesiekstrakti 100 ml 50% metanoolis ja jäeti 30 minutiks tarduma. Ekstrakti lahust töödeldi ultraheliga 250 W ja 35 kHz juures 10 minutit ning seejärel tsentrifuugiti kiirusel 12, 000 p/min. Supernatant filtriti 0,45 μm mikropoorse filtrimembraaniga. Seejärel tuvastati võrdlusaine lahus ja filtraat HPLC abil järgmistes tingimustes: oktadetsüülsilaaniga seotud silikageel täiteainena, metanool liikuva faasina A ja 0,1% sipelghape liikuva faasina B. Kolonni temperatuuriks määrati 30 °C. kraadi, määrati tuvastamise lainepikkuseks 330 nm ja süstimismaht oli 10 μL.

2.3. Eksperimendid.

Pärast ühenädalast kohanemist jagati 18 hiirt juhuslikult kuue rühma: A (normaalne, millele on lisatud keskmise annusega CT vesiekstrakt), B (normaalne ilma CT vesiekstraktita), C (mudel ilma vesiekstraktita), D ( mudel, millele on lisatud suures annuses CT vesiekstrakt), E (mudel, millele on lisatud keskmise annuse CT vesiekstrakt) ja F (mudel, millele on lisatud väikese annuse CT vesiekstrakt). Rühmi töödeldi järgmiselt: normaalset rühma leotati tavalise soolalahusega, mudelrühma leotati tsefiksiimiga (30 mg/kg, Shiyao Group Ouyi Pharmaceutical Co., Ltd., Shijiazhuang, Hiina) ja tavalise soolalahusega, kõrge -annuse gruppi leotati tsefiksiimi ja 221,14 mg/kg CT vesiekstraktiga, keskmise annuse gruppi leotati tsefiksiimi ja 165,54 mg/kg vesiekstraktiga ning väikese annusega gruppi leotati tsefiksiimi ja 110,57 mg/kg vesiekstraktist. A-rühma leotati 165,54 mg/kg vesiekstraktiga ja tsefiksiimi ei lisatud. Tsefiksiimi manustati iga päev keskpäeval h ja teisi aineid iga päev kell 15:00 h. Katsete ajal hoiti C-, D-, E- ja F-rühmi soolehäirete mudelseisundis. Väljaheited koguti iga seitsme päeva järel steriilsele opereeritavale lauale ja säilitati -20 kraadi juures.

2.4. Hiirte käärsoole histopatoloogiline vaatlus.

Katse lõpus tapeti hiired emakakaela dislokatsiooniga ja nende käärsoole sisu koguti steriilsele opereeritavale lauale ja säilitati temperatuuril –80 °C; samal ajal fikseeriti käärsoole koeproovid 10% neutraalses formaliinis. Seejärel dehüdreeriti proovid etanooli gradiendikontsentratsiooniga, hüaliniseeriti ksüleeniga, sisestati parafiini, lõigati osadeks ja värviti hematoksüliin-eosiiniga. Käärsoole limaskesta morfoloogilisi muutusi vaadeldi ja võrreldi optilise mikroskoobi abil. Mõõdeti villuse pikkus ja krüpti sügavus käärsooles ning arvutati villuse pikkuse ja krüpti sügavuse suhe (V/C väärtus) (51).

2.5. DNA ekstraheerimine ja raamatukogu ehitamine.

DNA ekstraheeriti väljaheitest, kasutades EZNA ®Soil DNA komplekti (Omega Bio-Tek, Norcross, GA, USA) vastavalt tootja protokollile. DNA kvaliteet määrati fluoromeetriga (QuantiFluor™-ST, Promega Corporation, USA). 16s rDNA V3-V4 piirkonna paarispraimerid kavandati piirkonna võimendamiseks ja 466 bp DNA fragmentide tootmiseks. Edasine praimer oli 341F (-5- CCTACGGGNGGCWGCAG-3-) ja vastupidine praimer oli 806R (-5-GGACTACHVGGGTATCTAAT-3-). Iga PCR maht oli 25 μL, mis sisaldas 2, 5 μL 10 × PCR puhvrit, 2 μL dNTP-sid, 1 μL iga praimerit ja 20–30 ng matriitsi DNA. Seejärel kinnitati indekseeritud adapterid amplikonide otsa, et luua järjestusraamatukogud. Raamatukogud valideeriti QuantiFluor™ fluoromeetriga ja kvantifitseeriti 10 nmol-ni.

2.6. 16s rRNA geenide järjestamine ja mikroobide kogukonna analüüs.

2 × 250 bp paarisotsa andmete saamiseks kasutati Illumina platvormi (Illumina MiSeq). Operatiivsed taksonoomilised üksused (OTU-d) saadi Uparse tarkvara abil standardse klastrite abil 97% sarnasusega. RDP klassifikaatori naiivset Bayesi määramisalgoritmi kasutati OTU-de joondamiseks Greengene'i andmebaasi versiooniga 13.5 ja liikide annotatsiooni tegemiseks. Soolestiku mikrobiota alfa mitmekesisus arvutati Shannoni ja Simpsoni indeksite abil ning rühmadevahelisi erinevusi analüüsiti lineaarse diskriminantanalüüsi efekti suuruse (LEfSe) abil. Beeta mitmekesisust analüüsiti Bray-Curtise erinevuste põhikoordinaatide analüüsi (PCoA) abil. PICRUSt2 kasutati soolestiku mikrobioomi mikroobse metaboolse võimekuse hindamiseks [42].

2.7. Statistiliste andmete analüüs.

Ühesuunalise ANOVA jaoks kasutati SPSS 20 ja katseandmed väljendati kui X ± S; X näitab keskmist väärtust ja S tähistab standardhälvet.

LOODUSLIK CISTANCHE TUBULOSA METABOOLSTE MUUTUSTE MODEERIMISEKS PHGS75% ECH 30% ACT 12%

3. Tulemused

3.1. 8e CT vesiekstrakti mõju käärsoole morfoloogiale.

Tüüpilised ühendid (ehhinakosiid ja akteosiid) ja nende CT ekstrakti kontsentratsioonid kinnitati HPLC abil (joonis S1). Vesiekstrakti soolele mõju määramiseks uurisime pärast CT vesiekstraktiga töötlemist käärsoole villi pikkust ja süvendite sügavust. Käärsoole villid normaalsetes ja suure annusega rühmades (A, B ja D) olid pikemad ja sõrmetaolised, samas kui mudel- ja väikese annuse rühmade (C ja F) käärsoole villid olid lühikesed ning käärsoole tipud villid olid katki (joonis 1). Sellest tulenevalt suurendas suurtes annustes CT vesiekstrakt soolehäiretega hiirtel märkimisväärselt käärsoole villi pikkust ja vähendas süvendite sügavust võrreldes mudelrühma hiirtega (P < 0.01). Seevastu ei erinenud süvendamise sügavus suure annusega rühmas ja normaalses rühmas oluliselt (P> 0, 05) (tabel S1). Need tulemused näitasid, et CT vesiekstrakti suur annus võib parandada soolehäiretega hiirte käärsoole morfoloogiat.

3.2. 8e CT vesiekstrakti mõju soolestiku mikrobiota mitmekesisusele.

Teostasime 16s rRNA geenide sekveneerimise, et uurida käärsoolesisese morfoloogiliste muutuste võimalikku põhjust ja uurida soolestiku mikrobiota muutusi pärast töötlemist CT vesiekstraktiga. Toorandmetest saadi keskmiselt 100 553 efektiivset märgist vahemikus 77 734 kuni 125 144 (tabel S2). Need sildid koondati 4932 OTU-sse (tabel S3). Seejärel analüüsisime nende OTUde põhjal soolestiku mikrobiota mitmekesisust. Shannoni ja Simpsoni indeksid ei näidanud erinevust A-rühma (normaalne CT vesiekstraktiga) ja B-rühma (normaalne ilma CT vesiekstraktita) vahel (joonis 2(a)). See näitas, et tsefiksiimravita hiirtel ei pruukinud CT vesiekstraktil olla täiendavat kasulikku ega kahjulikku mõju soolestiku mikrobiota mitmekesisusele. Mudelrühma (C) mitmekesisus näitas aga tavarühmadega võrreldes vähenevat trendi. Suure ja keskmise annusega CT vesiekstraktidega töödeldud hiirtel ilmnesid mitmekesisuse taastumise tunnused, samas kui sellist nähtust ei täheldatud hiirtel, keda raviti väikese annusega CT vesiekstraktiga (joonis 2 (a)). Samal ajal näitas PCoA, et normaalsetel rühmadel (A ja B) ja soolehäirete rühmadel, kellele manustati suures annuses (D) ja keskmise annusega (E) CT vesiekstrakte, oli proovidevaheline kaugus lühem kui mudelrühmas ja väikese annusega CT vesiekstrakti toidulisandi rühm (F) (joonis 2(b)). Need tulemused näitasid, et CT vesiekstrakt võib aidataparandada soolestiku mikrobiota mitmekesisustsoolehäiretega hiirtel.

3.3. Muutused CT vesiekstraktiga töödeldud soolestiku mikrobiota koostises.

Mikrobioota koostise profiile võrreldi erinevate rühmade vahel. Varjupaiga tasandil oli proteobakterite suhteline arvukus mudelrühmas kõrgem kui teistes rühmades (joonis 3 (a)). Proteobakterite arvu suurenemine viitas sellele, et tsefiksiim muutis mudelhiirte mikrobioomi ja et CT vesiekstrakt võib soolestiku mikrobiootale kasu tuua, kuna proteobakterite suurenenud levimus on korrastamata soolefloora sõlmmarker [43–45]. Lisaks vähenes perekonna tasandil Lactobacillus'e suhteline arvukus mudelrühmas võrreldes normaalsete ja suurte annustega rühmadega; see aga suurenes võrreldes keskmise ja väikese annuse rühmaga (joonis 3 (b)). Need tulemused näitasid, et suure annusega CT vesiekstrakt võib soodustada mõne perekonna Lactobacillus bakterite kasvu.

Uuritud rühmade vaheline mikrobioot määrati vastavalt LEfSe analüüsile. See analüüs näitas, et pärast ravi tsefiksiimiga suurenes Turicibacter, Alphaproteobacteria, Acidobacteria, Betaproteobacteriales ja Chloroflexi suhteline arvukus märkimisväärselt, samas kui Lactobacillus'e, Eubacterium{0}}nodatum{1}}rühma Pseudonocardiales suhteline arvukus, , ja Christensenellaceae _R-7_ rühm vähenes oluliselt võrreldes normaalse rühmaga (joonis 4(a)). Hämmastav on see, et kui mudelrühma täiendati suure annusega CT vesiekstraktiga, suurenes Muribaculaceae, Lactobacilluse, Kineosporiaceae, Eubacterium nodatum'i rühma ja Pedobacter'i suhteline arvukus võrreldes mudelrühma omadega märkimisväärselt. Samal ajal vähenes Rhodobacter'i, Ruminococcaceae UCG_013, Roseburia, Ruminiclostridium_9 ja Candidatus Stoquefichuse suhteline arvukus märkimisväärselt võrreldes mudelrühma omadega (joonis 4(b)).

3.4. Soolestiku mikrobiota funktsioonid seoses CT vesiekstraktiga töötlemisega.

Soolestiku mikrobiota metaboolsete radade ennustamiseks kasutasime tarkvara PICRUSt2 ja teistes rühmades toimunud muutuste analüüsimisel kasutati tavarühma. Tsefiksiimravi korral suurenes etüülbenseeni lagunemise suhteline arvukus, siderofoorrühma mitteribosomaalsete peptiidide biosüntees ja ksenobiootikumide metabolism tsütokroom P450 radade kaudu; pärast töötlemist suure ja keskmise annusega CT vesiekstraktidega taastus nende suhteline arvukus normaalsele tasemele. Samal ajal vähenes tsefiksiimravi ajal tsüanoaminohapete metabolismi raja suhteline arvukus; see aga suurenes pärast töötlemist suure annusega CT vesiekstraktiga. Lisaks olid üldiselt muutused erinevates metaboliitide radades pärast ravi tsefiksiimiga olulised võrreldes tavarühma muutustega; CT vesiekstrakti lisamine suutis aga vältida liigseid muutusi (joonis 5).

4. Arutelu

Käärsoole morfoloogiat saab muuta kasv, seedimine ja imendumine, immuunregulatsioon ja soolekahjustuse parandamine [46–50]. V/C suhe võib igakülgselt kajastada sooletrakti seedeseisundit ja on otseselt võrdeline sooletrakti seede- ja neeldumisvõimega [51, 52]. Käesolevas uuringus näitasid villi ja süvendite biopsia ja statistilised andmed, et suure annusega vesiekstrakt võib osaliselt parandada käärsoole defektset morfoloogiat.

Et uurida, kuidas vesiekstrakt muudab soolestiku morfoloogiat ja mõjutab soolestiku mikrobiotat, töötasime soolestiku mikrofloora muutustest tagasi. Leidsime, et tsefiksiimravi ajal suurenes proteobakterite, mis on korrastamata soolefloora sõlmmarker, suhteline arvukus võrreldes ilma tsefiksiimravita. Teiste sõlmpunkti markerite, Bacteroidetes ja Firmicutes, suhtelises arvukuses ei olnud olulisi muutusi, kuigi need

rühmad on inimese soolestikus ülekaalus; leiti, et Bacteroidetes/Firmicutes'i suhe on rasvunud inimestel võrreldes kõhnade inimeste omaga vähenenud ja see suhe suureneb koos kaalulangusega inimestel, kes järgivad kahte tüüpi madala kalorsusega dieeti [38, 41, 43–45, 48, 53, 54]. Samal ajal oli Turicibacter, mida seostatakse rasvumisega [55], märkimisväärselt kõrgem mudelrühmas võrreldes teiste rühmade omaga. Nimelt paranes soolestiku mikrobiota mitmekesisus mudelhiirtel CT vesiekstrakti lisamisega. Märkasime erinevatel ravimeetoditel hiirtel teatud spetsiifilisi soolebakteriid; Näiteks Lactobacillus ja Muribaculaceae olid kaks peamist bakteriperekonda, mis suurenesid suures annuses CT vesiekstraktiga ravitud rühmas võrreldes mudelrühma omadega (joonis 4). Hiljutised uuringud on näidanud, et CT vesiekstraktide polüsahhariididel on märkimisväärne hulk

mõnede piimhappebakterite kasvu, mis võib olla kasulik peremeesorganismi tervisele [43]. Paralleelselt on Muribaculaceae probiootilised organismid, mis on seotud pikaealisusega [57].These soovitas, et mehhanism, mille abil CT vesiekstrakt parandab soolestiku mikrobiotat, võib olla probiootiliste organismide kasvu soodustamine või kaitse. Veel üks tähelepanu vääriv bakter oli bakter YE57. Kuigi suures annuses CT vesiekstrakt soodustas käesolevas uuringus bakteri YE57 suhtelist arvukust (joonis 4), on varasemad uuringud leidnud, et selle arvukus oli normaalses soolestikus suurem kui kõrge kontsentratsiooniga taimetee jääkidega töödeldud soolestikus. [58] ja et selle arvukus vähenes pärast Bacillus licheniformis'e ja XOS-iga (ksülooligosahhariidid) kombineeritud sekkumist [59].ThMeie arvates väärib selle bakteri roll soolestiku mikrobiotas edasist uurimist. Peale selle võib selle uuringu suhteliselt väike proovide arv põhjustada valepositiivseid ja valenegatiivseid tulemusi ning tuvastatud bakterimarkerite kinnitamiseks soovitatakse tulevasi uuringuid suuremate proovide kohta.

CT vesiekstrakti koostis võib olla oluline selle mõju tõttu soolehäiretega hiirte koostisele ja funktsionaalsetele muutustele soolestiku mikrobiota. PHG-d on levinud CD-s ja CT-s leiduvad aktiivsed komponendid ning ehhinakosiid tuvastati CT-s peamise PHG-na [60]. Viimastel aastakümnetel on ehhinakosiidil mitmeid farmakoloogilisi toimeid, nagu vananemisvastane ja neuroprotektiivne toime, südamefunktsiooni parandamine, hüperlipideemia ja hüperglükeemia vähendamine ning rasvumisest põhjustatud diabeedi ja metaboolse sündroomi ennetamine [53, 61–65]. . Avastasime muutused soolestiku mikrobiota metaboolsetes radades.ThTsefiksiimi töötlemine viis bakterite rikastamiseni, mis on seotud etüülbenseeni lagunemise ja siderofoorrühma mitteribosomaalsete peptiidide biosünteesiga, samas kui töötlemine suure ja keskmise annusega CT vesiekstraktiga võib neid muutusi leevendada, mis näitab, et see ekstrakt leevendas bakterikooslust. nendele funktsioonidele. Lisaks näitas tsüanoaminohapete metabolismi rajaga seotud suurenenud bakterite rikastamine suure annuse vesiekstraktiga töötlemisel ja selle vähenenud rikastumine mudelhiirtel, et CT vesiekstrakt võib soodustada tsüanoaminohappe metabolismi.ThAsjakohaste metaboliitide muutused võivad anda sellele vesiekstraktile farmakoloogilise toime.

Kuigi mehhanism, mille abil CT vesiekstrakt muudab soolestiku mikrobiota koostist ja funktsiooni, on keeruline, on võimaliku mehhanismi kohta spekuleerida mõningaid vihjeid. On teatatud, et nii piimhappebakterid kui ka CT vesiekstraktid võivad antagoniseerida oksüdatiivset stressi. Põletiku ajal tekkiv oksüdatiivne stress on tavaline tegur, mis süvendab soolehäireid, vähendades tugevalt soolestiku mikroobide mitmekesisust ja soodustades spetsiifiliste bakterite levikut (4). Vastupidi, reaktiivsed hapnikuliigid soodustavad ka bakterirühmade selektiivset kasvu nitraadi ja tetrationaadi hingamise kaudu [66–68]; näiteks bakterid perekonnast Enterobacteriaceae võivad kiiresti kasvada soolefloora koostise muutuste tagajärjel põletiku ajal oksüdatiivsetes tingimustes [69, 70]. Enamik elusorganisme arendab hapnikuradikaalide eemaldamiseks ensümaatilisi kaitsemehhanisme, mitteensümaatilisi antioksüdantseid kaitsemehhanisme ja parandusmehhanisme [71]. Kuid need looduslikud antioksüdandid ei ole üldiselt piisavad elusorganismide oksüdatiivsete kahjustuste vältimiseks. Oksüdatsiooni vähendamiseks on laialdaselt kasutatud mitmeid täiendavaid sünteetilisi antioksüdante, sealhulgas butüülhüdroksüanisooli ja butüülitud hüdroksütolueeni, kuid nende ohutus on seatud kahtluse alla [72, 73]. Seetõttu on teadlased pöördunud looduslikult esinevatest ainetest saadud ohutumate ja looduslikumate antioksüdantide leidmise poole. Kuna nii polüsahhariidid kui ka piimhappebakterid suudavad kõrvaldada oksüdatiivset stressi, nõuab CT vesiekstraktide täpse antioksüdatiivse mehhanismi määramine soolestiku mikrobiootas tulevikus täiendavat uurimist.

Kokkuvõtteks leidsime, et CT vesiekstrakt oli võimelineparandada soolestiku mikrobiootatsoolehäiretega hiirtel, edendades mitmekesisust,aeglustada metaboolseid muutusija soolestiku mikrobiota struktuuri ümberkujundamine ning need tulemused võivad olla viiteallikaks seotud ravimite väljatöötamiseks tulevikus.

LOODUSLIK TUBULOOS SOELE MIKROBIOTIDE STRUKTUURI Ümberkujundamiseks PHGS75% ECH 30% ACT 12%