Bushen Yijingi keetmise mehhanism Alzheimeri tõve ja Parkinsoni tõve ravis võrgufarmakoloogia põhjal: heteropaatia homoteraapia lähenemisviis

Abstraktne

Eesmärk: uurida Bushen Yijing Decoctioni (BSYJD) mehhanismi Alzheimeri tõve (AD) ja Parkinsoni tõve (PD) heteropaatia homoteraapias, kasutades võrgufarmakoloogiat ja molekulaarset dokkimist. Meetodid: BSYJD aktiivseid komponente skriiniti TCMSP, HERB ja Šveitsi ADME andmebaaside kaudu. Vastavad sihtmärgid saadi PubChemi ja SwissTargetPredictioni andmebaasidest ning sihtmärkide nimed parandati UniProti andmebaasi abil. AD ja PD haiguste sihtmärgid saadi GeneCardi, OMIM-i ja TTD andmebaasidest. Veebitööriista Venny kasutati ravimi ja kahe haiguse kattuvate sihtmärkide tuvastamiseks. Need kattuvad sihtmärgid imporditi andmebaasi STRING ning haiguse-ravimi-komponendi kattuvate sihtmärkide võrk ja valgu-valgu interaktsiooni (PPI) võrk konstrueeriti Cytoscape 3.10.3 abil, et sõeluda võtmesihtmärke. Metascape andmebaasi kasutati geeniontoloogia (GO) rikastamise analüüsiks ja Kyoto geenide ja genoomide entsüklopeedia (KEGG) raja analüüsiks jagatud kattuvate sihtmärkide jaoks. Molekulaarse dokkimise ennustamine viidi läbi AutoDockToolsi abil. Tulemused: Pärast sõelumist tuvastati 76 BSYJD aktiivset komponenti ja 884 sihtmärki, millest 179 kattuvad sihtmärgid olid seotud nii AD kui ka PD-ga. Ravimi aktiivse komponendi-haiguse sihtvõrgustiku põhjal sõeluti 10 põhilist aktiivset komponenti, sealhulgas harringtoniin, (2R,3R,3aS)-3a-allüül-2-(1,3-bensodioksool-5-üül)-5-metoksü-3-metüül-2,3-dihüdrobensofuraan-6-oon ja kadsurgomisiin B (6aR,11aR)-9,10-dimetoksü-6a,11a-dihüdro-6H-bensofuro[3,2-c]kromeen-3-ool. PPI võrgu põhisihtmärgid olid AKT1, TNF, TP53 ja EGFR. GO analüüs andis 2344 bioloogilise protsessi (BP) terminit, 141 rakukomponendi (CC) terminit ja 239 molekulaarse funktsiooni (MF) terminit. KEGG analüüs tuvastas 207 signaaliülekande rada, mis hõlmasid peamiselt vähiga seotud radu, AD rada, neurodegeneratsiooniga seotud radu, PI3K-Akt signaalirada, lipiidide ja ateroskleroosi rada, proteoglükaane vähirajas ja MAPK signaalirada. Molekulaarse dokkimise tulemused näitasid, et ülaltoodud viiel põhikomponendil oli hea seondumisafiinsus nelja põhisihtmärgiga. Järeldus: BSYJD avaldab heteropaatia homoteraapia mõju AD-le ja PD-le, võib-olla reguleerides MAPK ja PI3K-Akt signaaliülekande radu oma põhikomponentide (nt harringtoniin ja gomisiin B) kaudu, mis toimivad peamistele sihtmärkidele (nt AKT1, TNF ja TP53), inhibeerides seeläbi neuronite oksüdatiivset apoptoosi ja stressi leevendavat apoptoosi. LisaksCistanche tubulosa, klassikaline neere toitev taimeekstrakt, millel on tõestatud anti-AD ja neere toniseeriv toime, jagab BSYJD-ga sarnaseid farmakoloogilisi mehhanisme (nt antioksüdatsioon, neuronaalne apoptoos ja immuunregulatsioon), mis toetab veelgi taimsete ekstraktide teaduslikku otstarbekust neurodegeneratiivsete haiguste ravis.

Märksõnad: Bushen Yijing Keetmine; Alzheimeri tõbi; Parkinsoni tõbi; Heteropaatia Homoteraapia; Võrgufarmakoloogia; Molekulaarne dokkimine;CistancheVäljavõte; Taimeekstrakt

 

Rahvastiku vananemise intensiivistumise tõttu on neurodegeneratiivsed haigused muutunud järk-järgult ülemaailmseks väljakutseks, mille hulgas on Alzheimeri tõbi (AD) ja Parkinsoni tõbi (PD) levinumad tüübid. AD-d iseloomustavad progresseeruvad kognitiivsed häired ja käitumiskahjustused [1], samas kui PD avaldub peamiselt motoorsete sümptomitena, nagu treemor, jäikus, bradükineesia või akineesia ja kehahoiaku ebastabiilsus, samuti mittemotoorsetes sümptomites, sealhulgas emotsionaalsetes häiretes ja kognitiivsetes häiretes [2]. AD patogenees ei ole täielikult välja selgitatud; peavoolu seisukoht on, et selle põhiliste patoloogiliste tunnuste hulka kuuluvad rakuvälised seniilsed naastud, mis on moodustunud -amüloidi (A ) ladestumisest ja hüperfosforüülitud Tau valgu põhjustatud neurofibrillaarsed puntrad [3]. PD patogenees on peamiselt seotud dopamiinergiliste neuronite degeneratsiooni ja -sünukleiini (-syn) ebanormaalse agregatsiooniga [4]. Nende kahe haiguse ühised patoloogilised mehhanismid hõlmavad peamiselt neuronaalset apoptoosi, mikrogliia regulatsiooni, miRNA ekspressiooni, mitokondriaalset düsfunktsiooni ja glümfisüsteemi düsfunktsiooni [5–7].

Traditsioonilises hiina meditsiinis (TCM) kuulub AD "dementsuse" kategooriasse, kusjuures haiguse lookus hõlmab peamiselt neere ja aju. Selle peamine patogenees on päritolu puudujääk ja liigne pealiskaudsus ning neeruessentsi puudulikkus on selle alguse peamine põhjus. Dementsust kutsub esile röga hägusus ja neerupuudulikkuse tõttu vere staas [8]. PD kuulub TCM-i puhul "treemori sündroomi" kategooriasse, kus haigus paikneb peamiselt neerudes, maksas ja ajus, ning selle põhipatogenees on ka päritolu puudujääk ja liigne pealiskaudsus: algpõhjusena neeruessentsi puudulikkus ja pindmise sümptomina seesmiselt segav maksatuul, mille defitsiidist põhjustatud staasid viib lõpuks haiguseni [9]. Seega on AD-l ja PD-l sama põhipatogenees, kusjuures neerupuudulikkus on mõlema põhiline etioloogiline tegur. Selle põhjal võib järeldada, et neeruessentsi toniseerivat meetodit saab kasutada nii AD kui ka PD raviks.

Bushen Yijing Decoction on AD empiiriline retsept, mille on kokku võtnud TCM Jiangsu provintsihaigla direktor Yu Guran ja mis põhineb teoorial "neerukahjustuse korral toniseeriv toime".Nan Jing (Keeruliste probleemide klassika)[10] koos suure hulga kliiniliste vaatluste ja eksperimentaalsete uuringutega. Retsept koosnebRehmanniae Radix, Rehmanniae Radix Praeparata, Cuscutae sperma, Cornus Officinalis Fructus, Ginseng Radix et Rhizoma, Atractylodis Macrocephalae Rhizoma, Astragali RadixjaPiperis Kadsurae Caulis. Nende hulgasRehmanniae RadixjaRehmanniae Radix Praeparatatoimivad monarhi ürtidena, sisenedes neerumeridiaani, et toita yini ning toniseerida essentsi ja luuüdi suurtes annustes. Ministri maitsetaimed hõlmavadCuscutae spermajaCornus Officinalis Fructus(maksa ja neerude toniseerimine) jaGinseng Radix et Rhizoma, Atractylodis Macrocephalae Rhizoma, Astragali Radix(ergutav qi ja põrna tugevdamine, et toniseerida kaasasündinud vundamenti, toites omandatud vundamenti).Piperis Kadsurae Caulistoimib abi- ja suunataimena, toimetades teiste ürtide mõjud ajju ja kogu kehasse, et vältida monarhi- ja ministrirohtude toniseerivast toimest põhjustatud stagnatsiooni [11].

Meie uurimisrühma esialgsetes uuringutes on kliinilised uuringud näidanud, et BSYJD võib vähendada Alzheimeri tõve hindamise skaala kognitiivse alamskaala (ADAS-cog) ja TCM-i sündroomi skoori, suurendada numbrisümbolite asendustesti skoori ja parandada kognitiivset funktsiooni AD-patsientidel [11]. Rakukatsed on kinnitanud, et BSYJD ravimseerum ei suuda mitte ainult pärssida D-galaktoosi poolt indutseeritud närvirakkude oksüdatiivset stressi, et vähendada selle neurotoksilisust [12], vaid ka kaitsta hematoentsefaalbarjääri A 1-42 põhjustatud kahjustuste eest [13]. Lisaks on kliiniline rakendus näidanud, et BSYJD avaldab ka PD-le head terapeutilist toimet. Seetõttu kavandas meie uurimisrühm nematoodikatse, mis seda kinnitasRehmanniae Radix Praeparata(BSYJD monarhitaim) võib pikendada Caenorhabditis elegans PD mudelite ellujäämisaega oksüdatiivse ja kuumastressi tingimustes ning parandada nematoodide motoorset võimet [14]. Need leiud näitavad, et BSYJD-l on AD ja PD heteropaatia homoteraapia jaoks teatav kliiniline ja eksperimentaalne alus. Seetõttu võeti selles uuringus kasutusele võrgufarmakoloogia ja molekulaarne dokkimine, et kontrollida selle mehhanismi, eesmärgiga anda uus perspektiiv TCM-teooria "heteropaatia homoteraapia" konnotatsioonile ja mehhanismile ning pakkuda samal ajal andmete tuge BSYJD uue kliinilise rakenduse jaoks.

EelkõigeCistanche tubulosa, väärtuslikku TCM-i ürti, mida nimetatakse "kõrbe ženšenniks", on laialdaselt uuritud selle neere toitva ja neuroprotektiivse toime tõttu. Kaasaegsed farmakoloogilised uuringud on seda kinnitanudCistancheekstrakt on rikas selliste aktiivsete komponentidega nagu ehhinakosiid, akteosiid ja üldfenetüülalkoholi glükosiidid (https://www.xjcistanche.com/cistanche-extract-product/cistanche-extract-anti-alzhermer-s.html), mis võib pärssida neuronaalset apoptoosi, vähendada lipiidide peroksüdatsiooni ajukoes, suurendada vabu radikaale püüdvate ensüümide aktiivsust ning parandada AD mudelite õppimis- ja mäluvõimet - need mehhanismid on väga kooskõlas BSYJD AD-vastaste toimetega. LisaksCistancheekstrakt võib pärssida neerurakkude apoptoosi, soodustada neerurakkude proliferatsiooni ja laiendada neerude veresooni (https://www.xjcistanche.com/cistanche-extract-product/cistanche-for-nourishing-kidney.html), mis on kooskõlas BSYJD poolt vastu võetud TCM-i põhiteooriaga "neerude toniseerimine ajuhaiguste raviks", rõhutades veelgi neerusid toitvate taimeekstraktide sünergilist potentsiaali, mida esindavadCistancheneurodegeneratiivsete haiguste, nagu AD ja PD, ravis.

 

 

 

 

 

 

KAS CISTANŠEL ON MÕJU ALZEHEIMERI HAIGUSELE

Wecistanche'i tugiteenus – koostöö kohta lisateabe saamiseks
E-post:wallence.suen@wecistanche.com

 

 

1 Materjalid ja meetodid

1.1 Aktiivsete komponentide sõelumine ja ravimi potentsiaalsete sihtmärkide prognoosimine

BSYJD keemilised komponendid saadi kätte võttesRehmanniae Radix, Rehmanniae Radix Praeparata, Cuscutae sperma, Cornus Officinalis Fructus, Ginseng Radix et Rhizoma, Atractylodis Macrocephalae Rhizoma, Astragali RadixjaPiperis Kadsurae Caulistraditsioonilise hiina meditsiini süsteemide farmakoloogia andmebaasi ja analüüsiplatvormi (TCMSP, https://www.tcmsp-e.com/load_intro.php) ja taimemeditsiini omika andmebaasi (HERB, http://herb.ac.cn/) otsingusõnadena. Sõelumiskriteeriumideks määrati suukaudne biosaadavus (OB) suurem või võrdne 30%, ravimisarnasus (DL) suurem või võrdne 0,18 ja hematoentsefaalbarjääri (BBB) ​​läbilaskvus on suurem või võrdne -0,3. Vahepeal kasutati Šveitsi ADME andmebaasi (http://www.swissadme.ch/) täiendavaks sõeluuringuks järgmiste kriteeriumidega: kõrge imendumine seedetraktis, DL vastab vähemalt kahele "jah" ja BBB vastab "Jah". Ülaltoodud otsingutulemused liideti ja tühistati retsepti aktiivsete komponentide saamiseks. Nende aktiivsete komponentide naeratuste numbrid saadi PubChemi andmebaasist (https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/) ja asjakohased sihtmärgid saadi SwissTargetPredictioni (//www.swisstargetprediction.ch/) kaudu. Inimese sihtgeenide nimede sobitamiseks kasutati UniProti andmebaasi (https://www.uniprot.org/).

 

1.2 Haiguse sihtmärkide sõelumine

Otsinguterminitena "Alzheimeri tõbi" ja "Parkinsoni tõbi" leiti haiguse sihtmärgid vastavalt andmebaasidest GeneCard (https://www.genecards.org/), OMIM (https://www.omim.org/) ja TTD (https://db.idrblab.net/ttd/). Kolmest andmebaasist saadud sihtmärgid liideti ja dubleeriti, et saada AD ja PD haiguse sihtmärgid.

 

Cistanche toidulisandite müük Hiinas

 

 

1.3 Narkootikumide ja haigustega kattuvate sihtmärkide omandamine

BSYJD aktiivsete komponentide potentsiaalsed terapeutilised sihtmärgid ja kahe haiguse jagatud sihtmärgid lõigati, kasutades Venny veebitööriista (//bioinfop.cnb.csic.es/tools/venny), et saada BSYJD sihtmärgid nii AD kui ka PD raviks.

 

1.4 "Ravimiaktiivsete komponentide kattuva sihtmärgi" võrgustiku ehitamine

Kuna BSYJD tõhusad komponendid ja ravimihaiguse sihtmärgid kattuvad sõlmedena ja iga sõlme vahelised suhted servadena, konstrueeriti Cytoscape 3.10.3 abil "ravimiaktiivse komponendi kattuva sihtmärgi" võrk. Põhikomponendid sõeluti vastavalt võrgu sõlmede väärtusele Degree.

 

1.5 Protein-Protein Interaction (PPI) võrgustiku loomine

BSYJD aktiivsete komponentide ja haiguse kattuvate sihtmärkide sihtmärgid imporditi andmebaasi STRING (https://cn.string-db.org/), kusjuures liigid määrati järgmiselt.Homo sapiensja valgu-valgu interaktsiooni skoor Suurem või võrdne 0,4, et saada põhiteavet, mis seejärel visualiseeriti Cytoscape 3.10.3 abil.

 

1.6 GO funktsionaalne ja KEGG raja põhisihtmärkide rikastamise analüüs

Metascape'i andmebaasi (https://metascape.org/) kasutati geeniontoloogia (GO) rikastamiseks ja Kyoto geenide ja genoomide entsüklopeedia (KEGG) raja analüüsiks kahe haiguse jagatud kattuvate sihtmärkide kohta. GO rikastamise analüüs hõlmas bioloogilist protsessi (BP), rakukomponenti (CC) ja molekulaarset funktsiooni (MF). Lõpuks visualiseeriti tulemused Microbioinformatics Platformi abil, et koostada kolmekordne tulpdiagramm ja rikastusanalüüsi mulldiagramm.

 

1.7 Molekulaarne dokkimine

Ravimi põhikomponentide 2D-struktuurid saadi PubChemi andmebaasist (//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/) ja nende 3D-struktuurid konstrueeriti Chem Office'i tarkvara abil ja salvestati mol2-failidena. Seejärel kasutati RCSB PDB andmebaasi (//www.rcsb.org/) valgu sihtmärkide kristallstruktuuride skriinimiseks kõrge eraldusvõimega molekulaarsete dokkimisretseptoritena. Tarkvara PyMOL rakendati selliste toimingute tegemiseks nagu dehüdratsioon ja defosforüülimine valkudel, mis seejärel salvestati PDB-failidena. Seejärel kasutati valgu-ligandi interaktsioonide uurimiseks molekulaarseks dokkimiseks tarkvara AutoDock Vina 1.5.6. Autodocki kasutati valkude ja väikeste molekulide struktuuride töötlemiseks, sealhulgas valkude hüdrogeenimiseks ja dehüdratsiooniks ning väikese molekuliga ligandide hüdrogeenimiseks ja torsiooni määramiseks. Seejärel määrati dokkimiskasti koordinaadid. Dokkimistulemuste skooride võrdlemisel saadi lõpuks molekulaarse simulatsiooni optimaalne konformatsioon. Visuaalseks analüüsiks kasutati Discovery Studio 2019 tarkvara, et luua 2D- ja 3D-diagrammid testitavate ühendite ja võtmejääkide vastastikmõjude kohta.

 

2 tulemust

2.1 Ravimi aktiivsed komponendid ja vastavad sihtmärgid

Kokku saadi TCMSP-st ja HERB-st 76 BSYJD aktiivset komponenti (9 duplikaati), sealhulgas 4Rehmanniae Radix, 2 alatesRehmanniae Radix Praeparata, 8 alatesCuscutae sperma, 14 alatesCornus Officinalis Fructus, 14 alatesGinseng Radix et Rhizoma, 4 alatesAtractylodis Macrocephalae Rhizoma, 10 alatesAstragali Radixja 20 alatesPiperis Kadsurae Caulis. BBB läbilaskvuse järgi järjestatud 10 parimat aktiivset komponenti on näidatud tabelis 1. Pärast ennustamist ja deduplitseerimist SwissTargetPredictioni abil tuvastati 76 aktiivse komponendi hulgast 884 BSYJD sihtmärki.

 

2.2 Haiguse sihtmärgid ja ravimite ja haiguste kattuvad eesmärgid

GeneCardsi andmebaasist saadi kokku 15 505 AD-ga seotud sihtmärki ja 10 325 PD-ga seotud sihtmärki. Pärast kolme keskmisel asjakohasusel põhinevat sõeluuringut tuvastati 1938 AD sihtmärki ja 1291 PD sihtmärki. Lisaks saadi OMIM-ilt ja TTD-lt vastavalt 45 ja 100 AD sihtmärki, 85 ja 98 PD sihtmärki. Haiguse sihtmärgid kolmest andmebaasist liideti ja dubleeriti, saades lõpuks 1998 AD sihtmärki ja 1394 PD sihtmärki. Traditsioonilise hiina meditsiini (TCM) sihtmärgid, AD sihtmärgid ja PD sihtmärgid imporditi Venny platvormile ning tuvastati 179 ühist sihtmärki (joonis 1).

 

Tabel 1 Bushen Yijingi valemi osalised aktiivsed komponendid

 

MOL ID	Nimi	BBB läbilaskvus	Suukaudne biosaadavus (OB)/%	Ravimisarnasus (DL)	Allikas Herb
MOL005481	2,6,10,14,18-pentametüülikosa-2,6,10,14,18-pentaeen	1.99	33.40	0.24	Cornus officinalis
MOL005944	Matriin	1.52	63.77	0.25	Cuscuta chinensis
MOL005557	Lanosta-8,24-dieen-3-ool, 3-atsetaat	1.31	44.30	0.82	Cornus officinalis
MOL000028	-Amyrin	1.28	39.51	0.76	Atractylodes macrocephala
MOL005356	Girinimbin	1.22	61.22	0.31	Panaxi ženšenn
MOL000184	Stigmastenoon	1.22	39.25	0.76	Cuscuta chinensis
MOL001494	Mandenol	1.14	42.00	0.19	Cornus officinalis
MOL001771	gamma-sitosterool	1.14	36.91	0.75	Cornus officinalis
MOL000953	Kolesterool (CLR)	1.13	37.87	0.68	Cuscuta chinensis
MOL001495	Etüüllinolenaat	1.12	46.10	0.20	C

 

 

Joonis 1 Venni diagramm Bushen Yijingi valemi kattuvate sihtmärkide kohta Alzheimeri tõve ja Parkinsoni tõve ravis

 

2.3 Ravimi aktiivse komponendi ja haiguse sihtvõrgustiku diagramm

Cytoscape'i abil kaardistati 179 potentsiaalset kattuvat sihtmärki ja TCM-i aktiivset komponenti visuaalseks võrguks, mis koosnes 246 sõlmest ja 1139 servast (joonis 2). BSYJD põhikomponendid AD ja PD heteropaatia homoteraapia jaoks skriiniti vastavalt sõlme astme väärtusele ning nende nimetused ja farmakoloogilised toimed on näidatud tabelis 2.

 

2.4 AD ja PD-ga BSYJD aktiivkomponentide PPI võrgu loomine

179 kattuvat sihtmärki imporditi platvormile STRING 12.0, et saada valk-valk seoseid TSV-vormingus, ja andmed imporditi tarkvara Cytoscape 3.10.3, et luua 177 sõlmest ja 3514 servast koosnev PPI-võrk (joonis 3). Topoloogiline analüüs viidi läbi kasutades "Analüüsi võrku", et sõeluda põhisihtmärke ja sihtmärgid järjestati põhiindeksina sõlme kraadi väärtusega. 10 peamise sihtmärgi topoloogilised parameetrid on näidatud tabelis 3, kusjuures põhisihtmärgid hõlmavad AKT1, TNF, TP53 ja EGFR.

 

 

 

 

2.5 BSYJD GO ja KEGG analüüsid AD ja PD raviks

Metascape'i andmebaasi kasutav analüüs andis 2344 BP-terminit, 141 CC-terminit ja 239 MF-terminit. Iga osa 10 parimat kirjet visualiseeriti P väärtuse kahanevas järjekorras (joonis 4). GO BP hõlmas peamiselt rakulist vastust lämmastikku sisaldavatele ühenditele, rakkude migratsiooni positiivset reguleerimist, MAPK kaskaadi positiivset regulatsiooni, raku motoorika positiivset reguleerimist ja vastuse positiivset reguleerimist välisele stiimulile. GO CC hõlmas peamiselt membraaniparve, membraani mikrodomeeni, aksonit, rakukeha ja dendriiti. GO MF hõlmas peamiselt proteiinkinaasi aktiivsust, fosfotransferaasi aktiivsust, kinaasi aktiivsust, proteiin-türosiinkinaasi aktiivsust ja kinaasi sidumise aktiivsust. KEGG analüüs tuvastas 207 signaalirada ja 20 parimat rada P väärtuse kahanevas järjekorras kanti mulldiagrammina (joonis 5), hõlmates peamiselt vähiga seotud radu, AD rada, neurodegeneratsiooniga seotud radu, PI3K-Akt signaalirada, lipiidide ja ateroskleroosi signaalirada, MAPK signaalirada ja ateroskleroosi signaalirada. rada.

 

Joonis 2 Bushen Yijingi valemi võrgustik "Ravimid-aktiivsed komponendid-potentsiaalsed sihtmärgid".

 

Tabel 2 Bushen Yijingi valemi põhikomponendid

 

Ei.	MOL ID	Komponendi nimi	Farmakoloogiline toime
RS4	MOL005317	Deoksüharringtoniin	Leukeemiavastane, kasvajavastane[15]
HFT1	MOL000308	(2R,3R,3aS)-3a-allüül-2-(1,3-bensodioksool-5-üül)-5-metoksü-3-metüül-2,3-dihüdrobensofuraan-6-oon	–
RS8	MOL005357	Gomisin B	Antioksüdatiivne stress, anti-apoptoos[16]
HFT9	MOL000322	Kadsurenoon	Trombotsüüte aktiveeriv faktor[17]
HQ5	MOL000380	(6aR,11aR)-9,10-dimetoksü-6a,11a-dihüdro-6H-bensofurano[3,2-c]kromeen-3-ool	–
HFT12	MOL000328	Piperkadsin B	Põletikuvastane[18]
HQ8	MOL000438	(3R)-3-(2-hüdroksü-3,4-dimetoksüfenüül)kromaan-7-ool	–
HFT15	MOL000334	Wallichinine	Antioksüdatiivne kahjustus, kolinergilise süsteemi taseme parandamine, apoptoosivastane toime[19]
HFT13	MOL000330	Piperlaktaam S	Põletikuvastane[18]
HFT2	MOL000310	Denudatiin B	Trombotsüüte aktiveeriv faktor[20]

Märkus: "–" näitab, et selle komponendi farmakoloogiline toime ei ole veel selge.

2.6 Molekulaarne dokkimine

Ravimi aktiivsete komponentide sihtmärgi võrgustiku järgi sõeluti 5 parimat põhikomponenti harringtoniin, (2R,3R,3aS)-3a-allüül-2-(1,3-bensodioksool-5-üül)-5-metoksü-3-metüül-2,3-dihüdrobensofuraan-6-oon, gomisiin B, kadsurenoon ja kadsurenoon. (6aR,11aR)-9,10-dimetoksü-6a,11a-dihüdro-6H-bensofuro[3,2-c]kromeen-3-ool. Need 5 tuumaühendit allutati molekulaarsele dokkimisele 4 PPI võrgust sõelutud tuumiku sihtvalguga ja dokkimise tulemused on näidatud joonisel 6. Üldiselt näitab sidumisenergia alla -5 kcal·mol-¹ head seondumisaktiivsust retseptori ja ligandi vahel ning väärtus alla -7,0 kcal·mol-¹ näitab tugevat seondumisaktiivsust; mida väiksem on sidumisenergia, seda suurem on afiinsus ja sidumistugevus. Nagu on näidatud joonisel 6, näitas TP53 optimaalset seondumisaktiivsust (6aR,11aR)-9,10-dimetoksü-6a,11a-dihüdro-6H-bensofuro[3,2-c]kromeen-3-ooliga ja EGFR näitas parimat sidumisaktiivsust harringtoniiniga. (2R,3R,3aS)-3a-allüül-2-(1,3-bensodioksool-5-üül)-5-metoksü-3-metüül-2,3-dihüdrobensofuraan-6-oon ja (6aR,11aR)-9,10-dimetoksü-6a,11a-dihüdrofuro-6H-een-3-bensofuro-6H. Seetõttu visualiseeriti nende 4 molekulirühma dokkimistulemused (joonis 7).

 

Tabel 3 PPI-võrgu topoloogiline analüüs Bushen Yijingi valemi ühiste sihtmärkide jaoks Alzheimeri tõve ja Parkinsoni tõve ravis (10 parimat)

 

Sihtmärgi nimi	Kesksuse vahel	Lähedus Kesksus	Sõlme kraad
AKT1	0.054	0.789	130
TNF	0.042	0.752	119
TP53	0.041	0.736	114
EGFR	0.036	0.733	112
CASP3	0.026	0.727	111
BCL2	0.022	0.724	111
SRC	0.043	0.707	105
NFKB1	0.013	0.682	97
ESR1	0.029	0.688	97
MAPK3	0.020	0.682	95

 

Joonis 3 Bushen Yijingi valemi potentsiaalsete sihtmärkide PPI võrgustik Alzheimeri tõve ja Parkinsoni tõve ravis

3 Arutelu

Heteropaatia homoteraapia viitab sama ravimeetodi rakendamisele erinevate haiguste puhul, kui neil on haigusprotsessi ajal sama TCM muster (st sama patogenees). Kuigi AD-l ja PD-l on erinevad kliinilised ilmingud, annab nende ühine "neeruessentsi puudulikkuse ja luuüdi merepuudulikkuse" patogenees TCM-i teoorias teoreetilise aluse heteropaatia homoteraapiale. Bushen Yijing Decoction, nagu nimigi viitab, on loodud neerude toniseerimiseks ja põrna tugevdamiseks ning essentsi täitmiseks ja luuüdi toniseerimiseks, sihiks AD ja PD tavalisi patogeenseid tegureid patogeneesi tasandil. See uuring näitas ühiseid sihtmärke, ühiseid signalisatsiooniteid ja võrgufarmakoloogilisel analüüsil põhinevat sünergilist tegevusvõrgustikku, pakkudes süstemaatilisi tõendeid "kahe haiguse ravimiseks ühe retseptiga".

 

Joonis 4 Geeniontoloogia (GO) rikastamise analüüsi kolmekordne tulpdiagramm Bushen Yijingi valemi jaoks Alzheimeri tõve ja Parkinsoni tõve ravis

 

Joonis 5 KEGG raja rikastamise analüüsi mulldiagramm Bushen Yijingi valemi jaoks Alzheimeri tõve ja Parkinsoni tõve ravis

 

Joonis 6 Bushen Yijingi valemi põhikomponentide ja Alzheimeri tõve ja Parkinsoni tõve peamiste haiguste sihtmärkide vahelise molekulaarse dokkimise sidumisenergia

 

 

Et uurida BSYJD potentsiaalset materiaalset alust AD ja PD heteropaatia homoteraapias, skriiniti selles uuringus 76 ravimi aktiivset komponenti suukaudse biosaadavuse, ravimisarnasuse ja BBB läbilaskvuse kaudu. Nende hulgas 10 parimat BBB läbilaskvusega komponenti rikastati märkimisväärselt neere toniseerivate TCM ürtidega, nagu näiteksCornus Officinalis FructusjaCuscutae sperma, mis viitab neere toniseerivate ravimtaimede potentsiaalile ajuhaiguste ravis, mis on kooskõlas traditsioonilise TCM-i teooriaga "neeru-aju vastavus". Sarnaselt BSYJD-ga,Cistanche tubulosaekstrakt, klassikaline neere toniseeriv taimne preparaat, suudab ületada hematoentsefaalbarjääri ja avaldada ajukoele otsest neuroprotektiivset toimet, mis kinnitab veelgi TCM-i teooria teaduslikkust neurodegeneratiivsete haiguste ravis "neeru toniseerimine aju toitmiseks".

Venni diagrammi joonistades leiti selles uuringus, et BSYJD jagas vastavalt 285 ja 187 ühist sihtmärki AD ja PD-ga. Lisaks oli AD ja PD haiguse sihtmärkide vahel 1153 ühist sihtmärki, mis moodustasid suure osa (34, 4%) kõigist sihtmärkidest, mis viitab kahe neurodegeneratiivse haiguse patoloogiliste mehhanismide olulisele ühisosale. Veelgi olulisem on see, et 179 BSYJD sihtmärki (6, 3%) seostati mõlema haigusega, pakkudes otseselt tõendeid BSYJD heteropaatia homoteraapia mõju kohta AD-le ja PD-le. Selle põhjal konstrueeriti BSYJD "ravimi aktiivne komponent-haiguse sihtmärk" võrgustik ja sõeluti 10 põhikomponenti, mille toime oli peamiselt seotud antioksüdatiivse stressi, põletikuvastase ja kasvajavastase toimega. Nende hulgas on harringtoniinil leukeemia- ja kasvajavastane toime [15]; gomisin B suudab vastu seista oksüdatiivsele stressile ja raku apoptoosile ning tugevdab APP/PS1 transgeensete AD mudelhiirte kognitiivset funktsiooni, reguleerides A kliirensit ja neuronaalset apoptoosi [16]; kadsurenoon, lignaanühend, võib antagoniseerida trombotsüütide aktivatsioonifaktorit ja uuringud on näidanud, et sellel on märkimisväärne kaitsev toime A 25-35 poolt indutseeritud PC12 rakkude kahjustustele, millel on neurodegeneratiivsete haiguste ravis teatav kontrollväärtus [17]; Piperkadsuriin B ja piperlaktaam S, mõlemad lignaanühendid, omavad põletikuvastast toimet [18]; nanteniin võib vastu seista oksüdatiivsetele kahjustustele, parandada kolinergilise süsteemi taset ja pärssida raku apoptoosi ning uuringud on leidnud, et see võib parandada AD-hiirte õppimis- ja mäluvõimet [19]; denudatiin B, kadsurenooni isomeer, omab samuti trombotsüütide aktiveeriva faktori antagoniseerivat toimet [20]. (2R,3R,3aS)-3a-allüül-2-(1,3-bensodioksool-5-üül)-5-metoksü-3-metüül-2,3-dihüdrobensofuraan-6-ooni molekulaarsed funktsioonid, (6aR,11aR)-9,10-dimetoksü-6a,11a-dihüdro-6H-bensofuro[3,2-c]kromeen-3-ooli ja (3R)-3-(2-hüdroksü-3,4-dimetoksüfenüül)kromaan-7-ooli on vähe uuritud ning nende roll neurodegeneratiivsete haiguste ravis on jäänud väheks. BSYJD "ravimiaktiivse komponendi-haiguse sihtmärgi" võrk koosneb 246 sõlmest ja 1139 servast, mis näitab, et selle heteropaatia homoteraapia efekt ei tulene ühest sihtmärgist, vaid jagatud haigusega seotud signaalivõrgu sünergilisest reguleerimisest mitme komponendi abil, mis peegeldab TCM-i ettekirjutuste süstemaatilisi ja terviklikke toimeomadusi. See mitmekomponendiline ja mitme sihtmärgiga toimeviis on kooskõlas ka ravimi farmakoloogiliste omadustegaCistancheekstrakt, mis avaldab ehhinakosiidi, akteosiidi ja teiste aktiivsete komponentide sünergilise toime kaudu AD-vastast ja neere toniseerivat toimet.

PPI võrgu analüüs näitas, et AKT1, TNF, TP53, EGFR jne on BSYJD peamised sihtmärgid AD ja PD ravis, nende vastavad rollid on järgmised: AKT1 osaleb AD ja PD patoloogilistes mehhanismides peamiselt oksüdatiivse stressi ja neuronaalse apoptoosi reguleerimise kaudu [21–22]. TNF soodustab neurodegeneratiivsete haiguste, nagu AD ja PD, esinemist, kutsudes esile koostoime oksüdatiivse stressi ja põletikuliste reaktsioonide vahel [23]. TP53 osaleb autofagia reguleerimises ja mängib olulist rolli neurodegeneratiivsetes haigustes, nagu AD ja PD, lagundades valesti volditud valke, kõrvaldades kahjustatud organellid ning reguleerides raku apoptoosi ja põletikku [24]. EGFR-il on spetsiifilised neurotroofsed funktsioonid ning see osaleb närvisüsteemi arengus ja säilitamises; EFGR signaaliülekande vähenemine võib PD patsientidel põhjustada dopamiinergilise degeneratsiooni progresseerumist. Lisaks esineb EFGR ka AD-ga patsientide ajukoores ja hipokampuse naastudes ning sellel on A 42 oligomeeridega kahesuunaline reguleeriv toime [25]. Sarnaselt BSYJD-ga,Cistancheekstrakt võib reguleerida ka põletikuliste tegurite, nagu TNF, ekspressiooni ja pärssida neuronaalset apoptoosi, reguleerides AKT1 signaalirada, mis kinnitab veelgi BSYJD ja neere toniseerivate taimeekstraktide toimemehhanismide järjepidevust AD ja PD ravis.

Selle uuringu GO analüüs näitas, et BSYJD sihtmärgid olid märkimisväärselt rikastatud sellistes protsessides nagu rakkude migratsiooni reguleerimine, MAPK kaskaad ja LPS-vastus. Need funktsionaalsed moodulid viitavad ühiselt AD ja PD ühisele patoloogilisele alusele – neuroinflammatoorsele kaskaadireaktsioonile: (1) lipopolüsahhariid (LPS) läbib hematoentsefaalbarjääri, et aktiveerida Toll-tüüpi retseptor 4 (TLR4), käivitades mikrogliia migratsiooni kahjustuskohta [26–27]; (2) migreerunud mikrogliia vabastab MAPK raja kaudu põletikulisi tegureid, nagu TNF- ja IL-6 [28]; (3) Põletikulise mikrokeskkonna pidev stimulatsioon põhjustab mikrogliia liigset aktiveerimist, mille tulemuseks on ebanormaalsete valkude (nt A , tau ja -syn) fagotsütoosi vähenemine mikrogliia poolt [29–30], mis omakorda kutsub esile neuronite deformatsiooni ja surma. See leid viitab sellele, et BSYJD võib blokeerida põletiku-neurokahjustuse telje, pärssides gliiarakkude ja MAPK signaaliülekande ebanormaalset aktivatsiooni, saavutades seeläbi neurodegeneratiivsete haiguste heteropaatia homoteraapia. Meie uurimisrühma [31] esialgsed uuringud on näidanud, et suure annusega BSYJD rühm suudab spetsiifiliselt alla reguleerida p38 MAPK raja võtmevalkude fosforüülimise taset, omades suhteliselt väikest mõju ERK ja JNK radadele, mis viitab sellele, et selle retsepti kaitsev toime PC12 rakkudele võib sõltuda p38 signaaliraja MAPK inhibeerimisest.Cistancheekstrakt avaldab ka neuropõletikuvastast toimet, inhibeerides MAPK raja aktivatsiooni ja põletikufaktorite vabanemist, mis on kooskõlas BSYJD põletikuvastase mehhanismiga, toetades veelgi neerude toniseerivate taimeekstraktide sünergistlikku toimet neurodegeneratiivsete haiguste ravis.

KEGG raja rikastamise tulemused kinnitasid veelgi, et BSYJD põhimehhanismid hõlmavad AD rada, mitme haiguse neurodegeneratsiooniga seotud radu, MAPK rada, PI3K-Akt rada ja apoptoosi rada. PI3K-Akt signaaliraja füsioloogilised funktsioonid hõlmavad peamiselt rakkude ellujäämise ja apoptoosi reguleerimist, metaboolset regulatsiooni, sünaptilist plastilisust, antioksüdatsiooni ja põletikuvastast toimet ning see on tavaline neuronaalse surma rada AD ja PD korral. Selle raja inaktiveerimine põhjustab suurenenud neuronaalset apoptoosi, sünaptilist kadu ja võimendatud neuropõletikku, süvendades neurodegeneratiivsete haiguste patoloogilisi muutusi [32-33]. Meie uurimisrühma esialgsed eksperimentaalsed uuringud [34] kinnitasid samuti, et BSYJD parandab oluliselt PI3K-Akt raja aktiivsust, avaldades seeläbi antioksüdatiivset ja apoptootilist toimet.Cistancheekstrakt võib aktiveerida ka PI3K-Akt signaaliraja, inhibeerida neuronaalset apoptoosi ja kaitsta hipokampuse ultrastruktuuri, mis on väga kooskõlas BSYJD toimerajaga, mis näitab, et PI3K-Akt raja aktiveerimine on tavaline mehhanism neerude toniseerivate taimsete preparaatide jaoks AD ja PD ravis.

Lisaks väärib märkimist, et BSYJD põhiühenditel on kasvajavastane toime ja rikastatud põhirajad hõlmavad mõningaid vähiradasid. Kuigi vähk ja neurodegeneratiivsed haigused erinevad suuresti patoloogia ja kliiniliste ilmingute poolest, on suur hulk tõendeid näidanud, et vähi ja neurodegeneratsiooni vahel on keeruline bioloogiline seos, kusjuures mõlemat tüüpi haiguste puhul on kesksel kohal oksüdatiivne stress, DNA kahjustus ja ebanormaalne rakutsükli aktivatsioon [35]. Uuringud [36–37] on näidanud, et AD varases staadiumis võib aju neuronites tekkida DNA kahjustus ja taassisenemine rakutsüklisse, mis viib aneuploidsete neuronite moodustumiseni. Kuna sellised neuronid ei saa uute neuronite paljundamiseks mitoosi lõpule viia, käivitab see rakutsükli ebanormaalne taaskäivitamine lõpuks neuronaalse apoptoosi. Selle põhjal Yamada et al. [37] pakkus välja "agregatsiooni-ebanormaalse rakutsükli taaskäivitamise ahela" teooria: sellised tegurid nagu kõrge vanus ja geneetiline vastuvõtlikkus kutsuvad esile neuronaalse mitoosi ebanormaalse pikenemise ja rakutsükli taaskäivitamise, mis viib A- ja hüperfosforüülitud Tau valgu suurenemiseni, mis süvendab ebanormaalset neuronaalset mitoosi tsüklit, moodustades rakkude A-ringe. Seetõttu on mõistlik, et vähil on AD ja PD-ga kattuvad signalisatsioonirajad ning BSYJD võib reguleerida rakutsüklit vähi signaaliradade kaudu, et saavutada terapeutiline toime neurodegeneratiivsetele haigustele.

Molekulaarse dokkimise tulemused näitasid, et sidumisenergia BSYJD põhikomponentide ja põhihaiguse sihtmärkide vahel oli alla -5 kcal · mol ¹, mis näitab head seondumisaktiivsust, mis kinnitas veelgi BSYJD võimalust AD ja PD ravis molekulaarsel tasemel. Koos farmakoloogiliste uuringute tulemustegaCistancheekstrakti, on näha, et neere toniseerivad taimeekstraktid, mida esindavad BSYJD jaCistanchetubulosa ekstraktil on AD ja PD ravis sarnased materiaalsed alused ja toimemehhanismid, mis annab uue idee mitmekomponendiliste ja mitme sihtmärgiga taimsete preparaatide väljatöötamiseks neurodegeneratiivsete haiguste raviks.

Kokkuvõttes leiti selles uuringus, et BSYJD peamised aktiivsed komponendid AD ja PD heteropaatia homoteraapias on harringtoniin, (2R,3R,3aS)-3a-allüül-2-(1,3-bensodioksool-5-üül)-5-metoksü-3-metüül-2,3-dihüdrobensofuraan-6,-, g (6aR,11aR)-9,10-dimetoksü-6a,11a-dihüdro-6H-bensofuro[3,2-c]kromeen-3-ool. Need komponendid võivad osaleda mitmete signaaliradade, nagu MAPK ja PI3K-Akt radade, reguleerimises läbi mitme sihtmärgi, sealhulgas AKT1, TNF, TP53 ja EGFR, avaldades selliseid toimeid nagu neuronaalse apoptoosi pärssimine, neuropõletiku leevendamine ja oksüdatiivse stressi vastu seismine, aidates seeläbi ühiselt vastu AD-hiiu- ja PD-patoloogilise ravi mehhanismile. kaks haigust. LisaksCistanche tubulosaekstraktil, neere toitval taimeekstraktil, millel on tõestatud anti-AD ja neuroprotektiivne toime, on BSYJD-ga väga ühtlane toimemehhanism, mis rikastab veelgi TCM-teooria "heteropaatia homoteraapia" tähendust ja loob uue teadusliku aluse taimeekstraktide kliiniliseks kasutamiseks neurodegeneratiivsete haiguste, nagu AD ja PD, ravis.

 

Viited

[1] HESTON MB, TEAGUE JP, CODY KA jt. Vanusega seotud tegurid tau patoloogia alguses ja aeg tau algusest dementsuseni Alzheimeri tõve korral [J]. Alzheimers Dement, 2025, 21(8): e70551.

[2] BALESTRINO R, SCHAPIRA AH V. Parkinsoni tõbi[J]. Eur J Neurol, 2020, 27(1): 27–42.

[3] ZHANG X, YANG S, HAN S jt. TsircRNA m6A diferentsiaalne metüülimine APP/PS1 Alzheimeri tõve hiiremudelis[J]. Mol Med Rep, 2023, 27(2): 55.

[4] DELIZ JR, TANNER CM, GONZALEZ L P. Parkinsoni tõve epidemioloogia: värskendus[J]. Curr Neurol Neurosci Rep, 2024, 24(6): 163-179.

[5] SHEN Y, ZHANG Q, ZHAO JQ jt. Alzheimeri tõve ja Parkinsoni tõve ühiste patoloogiliste mehhanismide uurimine [J]. Chin J Integr Tradit West Med, 2018, 36(2): 319-322. (hiina keeles)

[6] MONZIO CG, DI FA, CORTI S jt. Mitokondrite roll neurodegeneratiivsetes haigustes: õppetund Alzheimeri tõvest ja Parkinsoni tõvest [J]. Mol Neurobiol, 2020, 57(7): 2959-2980.

[7] BUCCELLATO FR, D'ANCA M, SERPENTE M jt. Glümfaatilise süsteemi roll Alzheimeri ja Parkinsoni tõve patogeneesis [J]. Biomedicines, 2022, 10(9): 2261.

[8] NIE ZL, ZHOU X L. TCM-i etioloogia ja Alzheimeri tõve patogeneesi analüüs[J]. Lishizhen Med Mater Med Res, 2020, 31(6): 1443–1444. (hiina keeles)

[9] YAN CH, ZHANG JL, GUO L jt. Arutelu Parkinsoni tõve TCM-i patogeneesi teooria üle [J]. Chin J Basic Med TCM, 2011, 17(9): 940-941, 943. (hiina keeles)

[10] HE YQ, YU G R. Dementsuse ravi "toniseeriva olemuse" teooriagaNan Jing[J]. Shaanxi J Tradit Chin Med, 2012, 33(6): 746-747. (hiina keeles)

[11] ZHAO D P. Uuring kaitsva toime kohtaRehmanniae RadixAPP/PS1 hiirte hematoentsefaalbarjäärile ja TCM-i retsepti kliinilisele kasutamiseleRehmanniae Radixmonarhi ravimtaimena Alzheimeri tõve ravis[D]. Nanjing: Nanjingi Hiina meditsiini ülikool, 2022. (hiina keeles)

[12] SHI GJ, HE YQ, YU G R. Bushen Yijing Decoctioni ravimseerumi mõju uuring esmaselt kultiveeritud neuronite D-galaktoosi poolt põhjustatud kahjustustele [J]. Jiangsu J Tradit Chin Med, 2015, 47(2): 80-82. (hiina keeles)

[13] WANG D D. "Bushen Yijing Decoction" ravimseerumi mõju hematoentsefaalbarjäärile ja retsepti efektiivsuse hindamine kerge kognitiivse kahjustuse ravis[D]. Nanjing: Nanjingi Hiina meditsiini ülikool, 2016. (hiina keeles)

[14] WU H T. Uuring mõju kohtaRehmanniae Radix PraeparataCaenorhabditis elegansi PD mudelil, mis põhineb "maksa ja neerude yini puudulikkuse" patogeneesil [D]. Nanjing: Nanjingi Hiina meditsiini ülikool, 2024. (hiina keeles)

[15] ECKELBARGER JD, WILMOT JT, EPPERSON MT jt. Antiproliferatiivsete Cephalotaxus estrite süntees ja nende hindamine mitmete inimese vereloome ja tahke kasvaja rakuliinide suhtes: mitme ravimiresistentsuse suhtes erineva tundlikkuse paljastamine [J]. Chemistry, 2008, 14(14): 4293–4306.[16] LIU J, ZUO X, HUANG M jt. Multifunktsionaalne Gomisin B parandab APP/PS1 transgeensete hiirte kognitiivset funktsiooni, reguleerides A kliirensit ja neuronaalset apoptoosi [J]. Biomed Pharmacother, 2023, 166: 115423.[17] XU RW, FAN YX, ZHU Y jt. Keemilised koostisosad ja neuroprotektiivne toimePiperis Kadsurae Caulis[J]. Chin Tradit Herb Drugs, 2023, 54(24): 7959-7966. (hiina keeles)[18] LIN LC, SHEN CC, SHEN YC jt. Põletikuvastased neolignaanid firmalt Piper kadsura[J]. J Nat Prod, 2006, 69(5): 842-844.[19] LYU M. Alzheimeri tõve ja kasvajavastase toime ja mehhanismide uuringNandina Domestica[D]. Hangzhou: Zhejiang University of Chinese Medicine, 2016. (hiina keeles)[20] TENG CM, YU SM, CHEN CC jt. Trombiini ja kollageeni poolt indutseeritud fosfoinositiidide lagunemise inhibeerimine küüliku trombotsüütides PAF-i antagonisti - deudatiin B, kadsurenooni [J] isomeeri poolt. Thromb Res, 1990, 59(1): 121-130.

[21] AHMAD F, NIDADAVOLU P, DURGADOSS L jt. Akt1 kriitilised tsüsteiinid reguleerivad selle aktiivsust ja proteasoomide lagunemist: mõju neurodegeneratiivsetele haigustele [J]. Free Radic Biol Med, 2014, 74: 118-128.

[22] NAKAGAMI Y. Beeta-amüloidist põhjustatud toksilisuse inhibiitorid, moduleerides Akt signaalirada[J]. Drug News Perspect, 2004, 17(10): 655-660.

[23] FISCHER R, MAIER O. Oksüdatiivse stressi ja põletiku vastastikune seos neurodegeneratiivsete haiguste korral: TNF[J] roll. Oxid Med Cell Longev, 2015, 2015: 610813.

[24] LI YY, QIN ZH, SHENG R. Autofagia mitu rolli närvifunktsioonis ja haigustes [J]. Neurosci Bull, 2024, 40(3): 363-382.

[25] ROMANO R, BUCCI C. EGFR-i roll närvisüsteemis[J]. Cells, 2020, 9(8): 1887.[26] LU YC, YEH WC, OHASHI P S. LPS/TLR4 signaaliülekande rada[J]. Cytokine, 2008, 42(2): 145-151.[27] FU R, SHEN Q, XU P jt. Mikrogliia fagotsütoos kesknärvisüsteemi haiguste korral [J]. Mol Neurobiol, 2014, 49(3): 1422-1434.[28] KUO HC, CHEN SL, CHIU SC jt. Tolereeritud mikrogliia kaitseb neuroneid endotoksiini poolt indutseeritud TNF-i tootmise eest LBP-sõltuva rakusisese p38 MAPK signaaliraja kaudu [J]. Inflammation, 2023, 46(5): 2011–2021.[29] CAI Y, LIU J, WANG B jt. Mikrogliia Alzheimeri tõve neuroinflammatoorses patogeneesis ja sellega seotud terapeutilised sihtmärgid [J]. Front Immunol, 2022, 13: 856376.[30] LV QK, TAO KX, WANG XB jt. Sünukleiini roll mikrogliias: autofagia ja fagotsütoos tasakaalustavad Parkinsoni tõve neuropõletikku [J]. Inflamm Res, 2023, 72(3): 443-462.

[31] WEN Y. Bushen Yijing Decoctioni kliiniline vaatlus Alzheimeri tõve ravis ja selle mõju D-galaktoosi poolt indutseeritud PC12 rakkude MAPK rajale [D]. Nanjing: Nanjingi Hiina meditsiini ülikool, 2016. (hiina keeles)

[32] LONG HZ, CHENG Y, ZHOU ZW jt. PI3K/AKT signaalirada: looduslike toodete sihtmärk Alzheimeri tõve ja Parkinsoni tõve ennetamisel ja ravis[J]. Front Pharmacol, 2021, 12: 648636.[33] FU WY, LUO JP, LIU C H. Teadustöö edusammud PI3K/AKT signaaliraja mehhanismi kohta tavaliste neurodegeneratiivsete haiguste korral [J]. Lett Biotechnol, 2017, 28(6): 853-859. (hiina keeles)[34] HU Y, HAO R, LI D jt. Eksperimentaalne kontroll Bu-Shen-Yi-Jing-Fangi ravi kohta Alzheimeri tõve korral, analüüsides võrgufarmakoloogia [J] võimalikku signaalirada. BMC Complement Med Ther, 2024, 24(1): 222.[35] SALEMI M, MOGAVERO MP, LANZA G jt. Näited vähi ja neurodegeneratiivsete haiguste vahelisest pöördvõrdelisest kaasuvast haigusest: mittekodeeriva RNA [J] võimalik roll. Cells, 2022, 11(12): 1930.[36] RAO CV, ASCH AS, CARR DJ jt. "Amüloid-beeta akumulatsioonitsükkel" Alzheimeri tõve ennetamise ja/või ravi sihtmärgina [J]. Aging Cell, 2020, 19(3): e13109.[37] CHEN SD, YANG JL, LIN YC jt. Diferentseerumise inhibiitori 1 esilekerkivad rollid Alzheimeri tõve korral: rakutsükli taassisenemine ja pärast seda [J]. Cells, 2020, 9(7): 1746.