Tsistache kasu uuring eksperimentide ja laborite kohta
May 09, 2022
Võtkejimmy.wu@wecistanche.comRohkem infot
tsistachetarbimine Käitumuslik vastus
cistanche ekstrakt, nagu eespool kirjeldatud, kasutage sensoorseid vihjeid, et liikuda keskkondadesse, kus nad tõenäolisemalt väldivadtsistanche erektsioonihäired. hankige toitu või leidke kaaslasi. Sarnaselt OMR-iga nõuab tõhus eesmärgile suunatud liikumine motoorse toime ja sensoorse taju koordineerimist. Vastsete ja täiskasvanud seebikala visuaalses süsteemis saavutatakse see fototaksise või fotoaktiivse käitumusliku vastuse kaudu. Selline käitumine juhib sebrafikala valgustatud piirkondade suunas ja on sebrakala visuaalses süsteemis kõva juhtmega 5 pdf juures . Fototaktiline käitumuslik vastus test kasutab sebrakala kalduvust liikuda valgustatud kambri suunas .
Selles analüüsis paigutatakse vastsed või täiskasvanud sebrafikala pöörlevasse valgesse trumlisse, millel on üks must triip, mis simuleerib ähvardavat kiskjat. Visuaalse puudujäägiga kalad ujuvad juhuslikes mustrites ja ei näita kiskjate vältimise vastust . Rakud 2021, 10, 633 11 kohta 33 4.2. Võrkkesta pildistamine Tehnoloogia, mis oli algselt mõeldud patsiendi võrkkesta pildistamiseks kliinilises keskkonnas diagnostilistel ja teaduslikel eesmärkidel, on nüüd kohandatud kasutamiseks laborikeskkonnas. Kõige sagedamini kasutatav tehnoloogia on spektraaldomeeni optiline koherentsustomograafia (SD-OCT), mis võib pakkuda näriliste ja kalade silmade ristlõike- ja näokujutisi, tavaliselt isegi suurema eraldusvõimega kui kliinilises keskkonnas genereeritud. Optiline koherentsus Tomograafia Spektraaldomeeni optiline koherentsustomograafia (SD-OCT) võrkkesta pildistamine on muutunud kliinikus oluliseks diagnostiliseks lähenemiseks. see test näitabcistanche pulbri tervisele kasulikLoomade ja inimeste jaoks.
Samuti on see väärtuslik mitteinvasiivne pilditöötlusvahend alusuuringute jaoks.fütokeemilinenäriliste võrkkesta pildistamiseks kasutatud on veelgi kohandatud, et uurida sebrakala võrkkesta kõrge eraldusvõimega. Zebrafishi silma väikese suuruse ja optiliste omaduste tõttu saab fotoretseptori maatriksi näopilte toota ühe raku eraldusvõimega, mis ei ole näriliste ja inimese silmadega võimalik . Üksikute koonuste kvantifitseerimine ja jälgimine on seda lähenemisviisi kasutades väga reprodutseeritav. Voronoi domeenianalüüsi on kasutatud ka koonuse domeeni pakkimise korrektsuse määramiseks ja selle järkjärguliseks vähendamiseks, kuna sebrakala vanuses 3 kuni 12 kuud vana . Hiljutised uuringud on kasutanud SD-OCT-i degeneratiivsete haiguste sebrakala mudelites.
cistanche'i eelised
Laseriga indutseeritud võrkkesta neovaskulariseerumises, mida kasutatakse vanusega seotud makulaarse degeneratsiooni modelleerimiseks,tsistachekasutati koos histoloogilise ja immunohistoloogilise analüüsiga Mülleri rakkude aktiveerimise hindamiseks . Välimine võrkkesta hüperreflektiivsus, mis tulenebtsistacheSD-OCT tuvastas selle ja oli sarnane näriliste mudelitega. In vivo pildistamise lähenemisviis näitas, et regeneratiivne reaktsioon vigastustele toimus 14-päevase perioodi jooksul ja vastas Mülleri rakkude ekspressioonile GFAP-is, mille avastas immunohistokeemia, mis viitab sellele, et makrogliia põletikuline reaktsioon mängib rolli haavade taastumisel ja taastumisel sebrakala võrkkestas, võttestsistache.
In vivo pildistamise uuringute mitteterminalilist olemust saab tõhusalt kombineerida visuaalse funktsiooni käitumusliku hindamisega. Hiljutine uuring selle kohta, kuidasfütokeemiline kasutas SD-OCT-i võrkkesta verejooksu jälgimiseks ja parandamiseks pärast nõela põhjustatud võrkkesta kahjustust ning mõõdeti ka funktsionaalset muutust samas viimistluses, kasutades T-labürindi valiku kambri paradigmat . Uuring näitas väga tihedat seost võrkkesta verejooksu ulatuse ja T-labürindi jõudluse vahel, mis viitab sellele, et mehaanilised kahjustused mõjutavad visuaalset funktsiooni ja et nii võrkkesta struktuur kui ka funktsioon on taastatavad 14–15-päevase perioodi jooksul pärast seda tüüpi vigastusi. Kuigi praegu on ainult väike arv uurijaid, kes kasutavad SD-OCT-i seebikala võrkkesta uurimiseks, tundub, et sebrakala silm pakub võimalust kõrge eraldusvõimega in vivo pildistamiseks, mis võimaldab koonuse retseptorite üksikasjalikku kaardistamist ning närvikahjustuste ja taastumise mugavat mõõtmist viisil, mis ei ole näriliste mudelites saadaval.
meie uuring cistanche kohta
Funktsionaalsed lõpp-punktid . Elektroretinograafia Lisaks käitumuslike analüüside kasutamisele sebrakala visuaalse süsteemi uurimiseks saab võrkkesta funktsiooni ja neurotransmissiooni uurida elektroretinogrammi (ERG) abil. ERG on Fifieldi salvestamise elektrofüsioloogiline meetod, mida saab kasutada võrkkesta rakkude elektrilise aktiivsuse mõõtmiseks vastuseks lühikesele valgussähvatusele võrreldes nendega, kes tarbivad tsistacheNeile, kes seda ei tee. Kui võrkkestas tuvastatakse ja töödeldakse visuaalset sisendit, tekib elektrivälja potentsiaal ja kantakse sarvkesta pinnale, kus seda saab tuvastada. Erinevalt OMR-ist, mis haarab visuaalse funktsiooni kogu KESKNÄRvisüsteemis tervikuna, hindab ERG närvifunktsiooni just võrkkestas.
ERG-d on aastaid peetud võrkkesta funktsiooni testiks nii kliiniliselt kui ka eksperimentaalselt. ERG suureks eeliseks on see, kuidas see tõlgib erinevate liikide vahel, kuna klassikaline ERG lainekuju on inimestel põhimõtteliselt sama,fütokeemiline elu Ja kala. Kuigi sebrakala silma väike suurus muudab ERG mõõtmised tehniliselt keeruliseks, on kaasaegsed elektroodid ja võimendid võimaldanud rakkudel koguda ERG-salvestusi, mis on võrreldavad suuremate loomaliikidega . Zebrafishis kasutatakse visuaalsete puudujääkide analüüsimiseks üldiselt kolme peamist komponenti: a-laine, mis on fotoreskeptikute fotovastuse või aktiivsuse mõõt. b-laine või ON vastus, mis mõõdabfütokeemiline ON-bipolaarse raku neurotransmissioonini
d-laine või OFF-reaktsioon, mida mõõdetakse valguse nihkes pikemate valgusstiimulite perioodidega (≥0,5 msec) [133]. Kõiki kolme lainekuju on võimalik salvestada õhukese klaasist pipetiga, mis kannab kloriidi/hõbetraadi elektroodi ja Ringersi lahust, mis on sisestatud tuimastatud kala sarvkesta lähedusse nii fotograafilistes kui ka scotoopilistes tingimustes. Isoleeritud sebrafishi silmadest on isegi võimalik salvestada ERG b-laineid ja seda tehnikat on kasutatud atsetüülkoliini panuse uurimiseks ERG lainekujul, supledes entire eye nikotiinilahuses. Uuemad tehnoloogilised uuendused hõlmavad LED-stimulaatorite kasutamist ja käsnaotsaga elektroodi kasutamist standardse klaaspundeti asemel . ERG ilmub esmakordselt juba 4 pdf-is sebrakalas, kusjuures a-laine, b-laine ja d-laine mõõtmised aitavad kaasa ainult koonuste varajasele vastse ERG mõõtmisele, mille varraste funktsioon ilmub hilisemates arenguetappides täiskasvanueas lähemale .
ERG-d on kasutatud sebrakalade mudelites võrkkesta neurodegeneratsiooni astme kvantifitseerimiseks pärilike võrkkesta haiguste mitmesugustes mudelites. Öise pimeduse mudelis, kus on erinev varraste välimise segmendi degeneratsioon, korreleerub ERG b-laine amplituud nii visuaalse funktsiooni kadumise kui ka histoloogiliste parameetritega, mis viitab sellele, et ERG on zebrafishi neurodegeneratsiooni kehtiv näitaja [138]. Arvatakse, et müosiin 7aa悆 / mutatsioon sebrakalas modelleerib Usheri sündroomi inimestel ja põhjustab võrkkesta välimises tuumakihis rakusurma suurenemist, millega kaasneb ERG a- ja b-lainete amplituudide amplituudide märkimisväärne vähenemine. Usheri mutatsioon häirib ka varda ja siniste koonuse opsiinide lokaliseerimist, kinnitades veelgi, et see on Usheri sündroomi hea mudel [139]. Samamoodi suurendab USH2a CRISPR mutatsioon välises tuumakihis apoptoosi ja erinevalt näriliste nokautidest väheneb oluliselt a- ja b-laine amplituudid, mis illustreerivad sebrakala koonuse domineeritud võrkkesta kasulikkust teatud inimeste haiguste modelleerimiseks.
ERG amplituud väheneb ka CLCC1 kloriidikanali knock-out mudelis, mida täheldatakse mõnedes pärilikes pigmentosa retiniidi vormides . Samamoodi on vähenenudcistanche beneficiossilmade suletud mutantide amplituudiga, teise pigmentosa retiniidi mudeliga, kaasneb liikumisreaktsiooni kadumine valgusele ja nii rodopsiini kui ka koonuse transdutsiini valesti lokaliseerimine fotoretseptori silias . ERG-d saab kasutada ka funktsionaalse taastumise kinnitamiseks pärast ägedaid neurodegeneratiivseid muutusi. Näiteks normaliseerus ERG umbes 50 päeva pärast ouabaiini süstimist, mis algselt põhjustas bipolaarsetele rakkudele ulatuslikke struktuurseid kahjustusi. Funktsionaalse taastumisega kaasnes bipolaarsete rakkude dendriitliku keerukuse suurenemine ja nende seosed fotoretseptoritega, mis viitab sellele, et võrkkesta taastumine hõlmab tähendusliku neuronaalse ühenduvuse taastamist sebrakalas .
Üks oluline uurimisvaldkond on diabeedi mõju nägemisele ja võrkkesta degeneratsioonile. Erinevate ERG parameetrite, sealhulgas b-laine amplituudi märkimisväärne vähenemine on hästi tõestatud kliinilistes uuringutes ning näriliste ja teiste imetajate liikidega seotud põhiuuringutes. Looduslikus tüüpi zebrafifishis saab diabeeti modelleerida korduva kokkupuutega 2% kõrgenenud glükoosiga akvaariumi vees ja see võib põhjustada võrkkesta funktsiooni muutumist umbes 1 kuu jooksul. Selle lähenemisviisi abil tehti kindlaks, et hüperglükeemiline ravi vähendas visuaalselt esilekutsutud käitumist ja mõjutas peamiselt siniseid koonuseid, ilmselt selektiivse degeneratsiooniga võrreldes varda fotoretseptoritega, mis määrati histoloogilise analüüsiga. Degeneratsiooniga kaasnes b-laine amplituudi märkimisväärne vähenemine, mis viitab sellele, et koonuse degeneratsioon sebrakalades on diabeedi varajane tagajärg ja et koonused vastutavad suures osas b-laine eest fotograafilistes tingimustes .
Selle lähenemisviisi abil registreeriti ulatuslikum uuring isoleeritud silmade tekitatud ERG. Leiti, et kohaliku fotopic ERG amplituud on hüperglükeemilistel kaladel oluliselt madalam kui mannitooliga töödeldud kala, mis toimib osmootiliste muutuste kontrollina. B-laine parameetreid vähendati ka vastuseks spektraalsetelecellidele 2021, 10, 633 13-le 33-st ERG stiimulist, mis näitab koonuse-raja puudujääki .cistanche beneficiosvähendas oluliselt ka d-laine amplituudi, mis arvatakse olevat saadud OFF-bipolaarsetest rakkudest. Hiljuti näidati, et kõhunäärme transkriptsioonifaktori mutantil on diabeetiline fenotüüp , millel on funktsionaalsed puudujäägid, sealhulgas b-laine amplituudi märkimisväärne vähenemine, millega kaasneb võrkkesta veresoonte kõrvalekalded ning varraste ja RGB koonuste degeneratsioon. Hiljutised andmed näitavad, et sebrakala võib olla kasulik uus diabeedist tingitud võrkkesta tüsistuste mudel, mis sisaldab mõningaid neurodegeneratiivseid funktsioone, mis põhjustavad visuaalse funktsiooni kadu. Arvestades koonuse vahendatud nägemise domineerimist sebrakalades, on tõenäoline, et see mudel aitab kaasa diabeetilise retinopaatia uuringutele viisil, mis ei ole olnud võimalik laialdasemalt kasutatavate näriliste mudelitega.
See artikkel on võetudhttps://doi.org/10.3390/cells10030633
