Tarimi kõrbest pärit kultiveeritud tsistanide Herba seitsmeteistkümne komponendi iseloomustus HPLC-MS abil

［Abstraktne］Eesmärk: tuvastada 60% metanooliekstrakti kromatograafilised komponendidTistanches deserticola Herbakasvatatud Tarimi kõrbes HPLC-MS abil.

meetod: HPLC-MS analüüs viidi läbi kolonniga Agilent ZOＲBAX Eclipse Plus C18 (6 mm × 250 mm, 5 μm). Liikuvaks faasiks oli atsetonitriili-0. 1% sipelghappe vesilahus gradientelueerimise teel voolukiirusel 1 ml·min-1 ja tuvastamise lainepikkus oli 254 nm. Kolonni temperatuur määrati 25 kraadile ja süstimismaht oli 10 µl. Tulemus: Kuusteist kromatograafilist piiki / seitseteist komponenti tuvastati täpselt, võrreldes eraldatud ja tuvastatud ühendite retentsiooniaega, molekulmassi ja fragmentide ioone. Need kromatograafilised komponendid määrati: koniferiin, demetüülsüringiin, syringiin, ehhinakosiid, tsistanosiid A, verbaskosiid (tubulosiid A), tsistanosiid B, isoverbaskosiid, 2'-atsetüültsistanosiid A, tsistanosiid C, isotsistanosiid K, 2'-atsetüülverbaskosiid, tsistanosiid B, tsistanosiid B, tubulosiid J.

Järeldus: HPLC-MS meetod sobib 60% metanooliekstrakti kromatograafiliste komponentide tuvastamiseks Cistanches Herbas. See uuring annab teaduslikke tõendeid selle ravimtaime keemiliste koostisosade põhjalikuks analüüsimiseks.

［Märksõnad］ Cistanches deserticolaHerba; Cistanche; HPLC-MS; metanooli ekstrakt

Cistanche deserticola YCMa

Cistanche deserticola, tuntud ka kui "kõrbe ženšenn",on kuulus toonik Hiina meditsiin, mida levitatakse Hiinas Sise-Mongoolias, Ningxias, Gansus ja Xinjiangis [1].Sellel on neeru-yangi toniseeriv toime, soodustab vere olemust, niisutab soolestikku ja roojamist. Seda kasutatakse tavaliselt kliinikutes meeste impotentsuse, naiste viljatuse, vöö- ja põlvevalu, vere staasi kõhukinnisuse raviks.jne [2-3].Cistanche deserticola, mis onHiina farmakopöa (2015. aasta väljaanne) esimesse ossa lisatud on Cistanche deserticola ja Cistanche tubulosa kuivatatud lihakas vars (4). Meie uurimisrühm on Cistanche'i taimede kohta aastaid süstemaatilisi ja põhjalikke uuringuid läbi viinud.Cistanche taimede keemilisteks komponentideks on peamiselt fenüületanoidglükosiidid, lisaks iridoidid ja nende glükosiidid, lignaanid ja nende glükosiidid, bensüülalkoholi glükosiidid jne.[5]. Kaasaegsed farmakoloogilised uuringud näitavad, et fenüületanoolglükosiididel, mis on selle perekonna põhikomponendid, on neuroprotektiivne, antioksüdant, maksa kaitsev, antibakteriaalne, viirusevastane, kasvajavastane, põletikuvastane ja muu toime [6-11].

Kõrbe ženšenn

Hiinas on Cistanche deserticola levinud Sise-Mongoolia lääneosas, Xinjiangi põhjaosas ja Qinghais Qaidami basseinis, kuid mitte Lõuna-Xinjiangis Tarimi jõgikonnas.. 1990. aastate lõpus tõi Tazhongi naftavälja kaitsmiseks ja kõrbe kontrollimiseks naftaväljade peakorter Tazhongi naftavälja ümber ja mõlemale poole kõrbe maanteed suure hulga Haloxyloni ammodendroneid ning nakatas Haloxyloni ammodendronit tsitanchega, mis on olnud juba üle 10 aasta. Lõuna-Xinjiangi sooja kliima ja heade tilguti niisutamise tingimuste tõttu õlibaasis on cistanche deserticola saagikus väga kõrge ja värske cistanche deserticola saagikus ühe mu kohta ulatub üle 500 kg [8]. Paljud Cistanche deserticola keemilised komponendid on asendajate erinevate ühenduspositsioonide tõttu tekitanud suure hulga isomeere. See tekitab suuri raskusi selle ravimmaterjali kromatograafilise piigi tuvastamisel. Kromatograafilise piigi komponente on raske täpselt identifitseerida, kui tugineda ainult LC-MS-le ilma monomeersete ühenditeta kontrollina. Seetõttu on selle töö algfaasis vähe kirjanduslikke aruandeid. Autor eraldas Tazhongi kõrbes varajases staadiumis kasvatatud Cistanche deserticolast palju monomeerühendeid [9-11]. Nende varajases staadiumis saadud monomeerühendite kaudu tuvastati täpselt Cistanche deserticola 60% metanooliekstrakti HPLC osalised kromatograafilised piigid. See mitte ainult ei hoia ära mõnede teadaolevate ühendite korduvat tuvastamist Cistanche deserticola keemilistes koostisosades, vaid annab ka viiteid edasistele uuringutele ravimmaterjali kvaliteedikontrolli kohta. Selles artiklis tuvastati HPLC-MS abil 17 komponenti Cistanche deserticola 0% metanooliekstraktist.

Cistanche deserticola viil

Cistanche toodete vaatamiseks klõpsake siin

【Küsi lisa】 E-post: xue122522@foxmail.com / WhatsApp: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1.Materjal

Inova-500 tuumamagnetresonantsinstrument (Varian, USA); 6320IonTrap LC-MS massispektromeeter, EclipseXDB-C18 kolonn (4,6 mm × 250 mm, 5 μm) (Agilent, USA); QUINTIX313-1CN tüüpi 1/10000 elektrooniline tasakaal (Sedarise osakond); KQ-500DV ultrahelipuhasti (Jiangsu Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); KMUP – Ⅰ Trace Analytical Ultra Pure Water Generation System (Chengdu Haochun Instrument Equipment Co., Ltd.).

Selles katses kasutatud 39 kontrollainet eraldas autor varajases staadiumis Tazhongis kõrbes kultiveeritud Cistanche deserticolast ning nende struktuurid määrati NMR-i ja muude spektroskoopiameetoditega. 39 kontrollproovi struktuurid tuvastati kui Cistanche deserticoside J, Cistanche deserticoside K, Cistanche deserticoside L, Cistanche deserticoside M, Cistanche deserticoside N, epimeridinosideA, Isocistancheside C, angiocyanin B, Cistanche deserticoside, Cistanche deserticoside, Cistanche deserticoside, Cistanche deserticoside, Cistanche deserticoside, Cistanche deserticoside Cistanche tsümosiin, 2 '- atsetüül Cistanche deserticoside A, 2' - atsetüül Cistanche deserticoside A, Cistanche deserticola B, Cistanche deserticola A, Echinoside A, Cistanche deserticola glükosiid E, salidrosiid, 6 '- atsetüül-juperiini rõngas, saliin, salidrosiid (2E, 6E) - 3, 7-dimetüül-8-hüdroksüktadieen-1-O- - D-glükosiid, (+) - syringiin, (+) - syringiin-4 '- O- - D-glükopüranosiid, (+) - isoeucomminA, (+ eucomminA, methyl}} rosinA, (+ eucommin) D-glükosiid, larvitsiidi hävitav-4 '- O- - D-glükosiid, larvitsiidi hävitav-4-O- - D-glükosiid- - D-glükopüranosiid, hesperidiin A, ala kõrval A, 6-desoksükatapool. Kõigi ülaltoodud võrdlusainete puhtus on üle 98,0%. Atsetonitriil on kromatograafiliselt puhas (DikmaPure, USA), vesi on ülipuhas vesi ja teised katseprotsessis kasutatavad reaktiivid on analüütiliselt puhtad reaktiivid, mida toodab Pekingi keemiatehas.

Selles katses kasutatud ravimmaterjal Cistanche deserticola koguti 2010. aasta novembris Xinjiangi osariigis Tazhongi kõrbepiirkonnast. Pekingi ülikooli farmaatsiakooli professor Tu Pengfei tuvastas selle kui Leobaceae taime Cistanche deserticola kuivatatud lihakat vart. Proovi säilitati Pekingi ülikooli traditsioonilise hiina meditsiini kaasaegses uurimiskeskuses (proovi number: CD201011).

Cistanche deserticola viil

2.Meetodid ja tulemused

2.1 Võrdluslahuse valmistamine

Võtke umbes 1 mg igast 39-st Cistanche deserticolast varajases staadiumis saadud kontrollproovist, kaaluge need täpselt, pange need vastavalt 5 ml mõõtekolbi, lahustage metanoolis ja mahutage skaalale ning seejärel võtke üks kontrolllahus.

2.2 Uuritava lahuse valmistamine

Hiina farmakopöa 2015. aasta väljaandele viidates võtke umbes 1g tootepulbrit (läbi neljanda sõela), kaaluge täpselt, pange 100mL pruuni pudelisse, lisage täpselt 50mL 60% metanooli, tampige, loksutage korralikult, kaaluge mass, leotage töötluseks 30 min, kaaluge uuesti ,40 min. 50% metanooli, et täiendada vähendatud massi, loksutada korralikult, seista, võtta supernatant ja kasutada 0,45 µM mikropoorset membraanfiltratsiooni, võtta katselahuse saamiseks pidev filtraat.

2.3 Kromatograafilised tingimused

AgilentEclipse XDB-C18 kromatograafiline kolonn (4,6 mm × 250 mm, 5 μm), tuvastamise lainepikkus 254 nm, kolonni temperatuur 25 kraadi; Kasutades atsetonitriili (A) - 0.1% sipelghappe vesilahust (B) liikuva faasina, gradientelueerimine (0 - 20min, 5% - 15% A; 20 - 50min, 15% - 30% A; 50 - 60min, 30% - 50% A}, - 50% A}; Voolukiirus: 1,0 ml · min-1, süstimismaht: 10 μL.

2.4 Massispektri tingimused

Kapillaaride temperatuur 350 kraadi ; Kapillaaride pinge 3500V; Mantelgaasi (lämmastiku) voolukiirus 12,0L · min-1; Abigaasi (lämmastiku) rõhk 206,8kPa; Massispektromeetria täielik skaneerimisvahemik on m/z 50-1000; Kokkupõrkegaas heelium, kokkupõrkeenergia valitakse katse ajal automaatselt; Koguge iga positiivse ja negatiivse ioonirežiimi jaoks 1 nõel.

2.5 Võrdlusaine katse

Vastavalt punktile 2.1 valmistatud 39 võrdluslahust testiti 2,3 kromatograafiliste ja 2,4 massispektromeetriliste tingimustes ning registreeriti nende retentsiooniaeg ja suhteline molekulmass (tabel 1).

2.6 Uuritava lahuse määramine

Võtke Xinjiangi Tazhongi kõrbepiirkonnast kogutud ravimmaterjal Cistanche deserticola ja valmistage katselahus vastavalt punktis 2.2 kirjeldatud meetodile. Seejärel teostage määramine vastavalt punktis 2.3 kirjeldatud kromatograafilistele tingimustele ja punktis 2.4 kirjeldatud massispektromeetria tingimustele ning määrake selle HPLC kromatogramm ja massispektromeetria positiivsete ja negatiivsete ioonide režiimis (joonised 1–3).

joon. 1 Cistanches Herba 60% metanooliekstrakti HPLC kromatogramm

joon. 2 Cistanches Herba 60% metanooliekstrakti positiivne TIC MS kromatogramm

joon. 3 Cistanches Herba 60% metanooliekstrakti negatiivne TIC MS kromatogramm

2.7 Ravimaterjalide HPLC kromatogrammi identifitseerimine

Samadel tingimustel (2,3 kromatograafilist tingimused ja 2,4 massispektromeetria tingimused) identifitseeriti komponendid, võrreldes uuritava proovi ja kontrollproovi retentsiooniaega ja suhtelist molekulmassi. Uuritava proovi kromatogrammi piigi spetsiifiline identifitseerimisprotsess (joonis 1) on järgmine.

2.7.1 Kromatograafilise piigi tuvastamine 1

Kromatograafilise piigi 1 retentsiooniaeg on 16,67 minutit. Positiivse iooni režiimis on eksimeeri iooni piik m/z365 antud kujul [M+Na]+, negatiivse iooni režiimis aga eksimeeri iooni piik m/z387 [M+COOH] -. Piigi 1 suhteliseks molekulmassiks määratakse 342. Samuti on antud fragmendi ioon m/z179, mis pärineb 1 glükoosi molekuli 163 D kadumisest glükosiidsideme lõhustumise tõttu. Võrdlusaine retentsiooniaja ja suhtelise molekulmassi järgi tuvastati kromatograafiline piik 1 okaspuuna.

2.7.2 Kromatograafilise piigi 2 identifitseerimine

Kromatograafilise piigi 2 retentsiooniaeg on 17,36 minutit. Negatiivse iooni režiimi korral antakse eksimeeri ioonide piigid m/z357 [M – H] -, 393 [M+Cl] - ja piigi 2 suhteliseks molekulmassiks määratakse 358. Samal ajal tuletatakse fragmendi ioon m/z195 16 glükoosi molekuli kadumisest, mis on tingitud 16 glükoosi lagunemisest. Kromatograafiline piik 2 identifitseeriti retentsiooniaja ja võrdlusaine suhtelise molekulmassi järgi demetüülsüringiiniks.

2.7.3 Kromatograafilise piigi tuvastamine 3

Kromatograafilise piigi 3 retentsiooniaeg on 19,04 min, eksimeer-iooni piik m/z395 [M+Na] on antud positiivse iooni režiimis ja eksimeer-iooni piik m/z417 [M+HCOO] - on antud negatiivse iooni režiimis ning fragmendi suhteline molekulmass on 3. piigi ajal 2, määratakse iooni 3 ajal 2 väärtuseks. m/z209 tuleneb 1 glükoosi molekuli, 163 Da, kadumisest glükosiidsideme katkemise tõttu. Kromatograafiline piik 3 identifitseeriti retentsiooniaja ja võrdlusaine suhtelise molekulmassi järgi syringiinina.

2.7.4 Kromatograafilise piigi tuvastamine 4

Kromatograafilise piigi 4 retentsiooniaeg on 27,66 min. Eksimeeri iooni piik m/z804 [M+NH4] on antud positiivse iooni režiimis ja eksimeer-iooni piik m/z785 [M–H] - negatiivse iooni režiimis. Piigi 4 suhteliseks molekulmassiks määratakse 786. Samal ajal on fragmendi ioon m/z623 tuletatud 1 kofeiini molekuli, 163 Da, estersideme katkemisest. Koos võrdlusaine retentsiooniaja ja suhtelise molekulmassiga tuvastati kromatograafiline piik 4 kui ehhiaatsia.

2.7.5 Kromatograafilise piigi tuvastamine 5

Kromatograafilise piigi 5 retentsiooniaeg on 31,48 min, eksimeer-iooni piik m/z818 [M+NH4 on antud positiivse iooni režiimis ja eksimeer-iooni piik m/z799 [M–H] - on antud negatiivse iooni režiimis ning fragmendi 5 suhteline molekulmass on samal ajal 6, ioon 7, m3, 8/z. tuleneb 1 kofeiini molekuli, 163Da, estrisideme katkestamisest. Võrdlusaine retentsiooniaja ja suhtelise molekulmassi kombineerimisel kinnitati, et kromatograafiline piik 5 oli tsistanche glükosiid A.

Tabel 1 39 standardühendi molekulmass ja retentsiooniaeg (tＲ)

2.7.6 Kromatograafilise piigi tuvastamine 6

Kromatograafilise piigi 6 retentsiooniaeg on 34,17 minutit. Kaks eksimeeri iooni piiki m/z846642 [M+NH4] + on antud positiivse iooni režiimis ja kaks eksimeeri iooni piiki m/z827623 [M–H] - samuti negatiivse iooni režiimis. Spekuleeritakse, et piik 6 võib sisaldada kahte ühendit suhtelise molekulmassiga 828624. Samal ajal on fragmendi ioon m/z665461 tuletatud 1 kofeiinimolekuli estersideme katkemise kadumisest, 163 Da, ja fragmendi ioon m/z622 on tuletatud bond lõhuvast atsetüülestrist. Need kaks ühendit eraldati ja kombineeriti võrdlusaine retentsiooniaja ja suhtelise molekulmassiga; kromatograafiline piik 6 oli tsimicifugariini ja antotsüaniini A segu.

2.7.7 Kromatograafilise piigi tuvastamine 7

Kromatograafilise piigi 7 retentsiooniaeg on 35,34 min. Eksimeeri iooni piik m/z832 [M+NH4]+, 837 [M+Na]+ on antud positiivse iooni režiimis ja eksimeeri iooni piik m/z813 [M–H] - on antud negatiivse iooni režiimis ning piigi 7 suhteline molekulmass on 814. Samal ajal on m/z6 tuletatud fragmendist3-7. 1 feruulhappe molekuli kadu, 177Da. Koos võrdlusaine retentsiooniaja ja suhtelise molekulmassiga tuvastati kromatograafiline piik 7 kui tsistanche glükosiid B.

2.7.8 Kromatograafilise piigi identifitseerimine 8

Kromatograafilise piigi 8 retentsiooniaeg on 36,17 min, eksimeer-iooni piik m/z647 [M+Na] on antud positiivse iooni režiimis ja eksimeer-iooni piik m/z623 [M–H] - negatiivse iooni režiimis ning fragmendi 8 suhteliseks molekulmassiks määratakse ioonajal 6/2 samal ajal 6, 6/2. on antud, mis pärineb estersideme katkemisest ja 1 kofeiinirühma molekuli kadumisest, 163 Da. Koos võrdlusaine retentsiooniaja ja suhtelise molekulmassiga tuvastati kromatograafiline piik 8 heterotsönosiidina.

2.7.9 Kromatograafilise piigi identifitseerimine 9

Kromatograafilise piigi 9 retentsiooniaeg on 38,20 minutit. Eksimeeri ioonide piigid m/z860 [M+NH4]+, 865 [M+Na] on antud positiivse iooni režiimis ja eksimeer-iooni piigid m/z841 [M–H] -, 877 [M+Cl] - negatiivse iooni režiimis. Piigi 9 suhteliseks molekulmassiks määratakse 842. Samal ajal on fragmendi ioon m/z679636 tuletatud 1 kofeiini molekuli (163 Da ja 1 molekuli atsetüüli (43 Da) estersideme katkemise kaotusest). Võrdlusaine retentsiooniaeg ja suhteline molekulmass on ühtsed ning identifitseerimispiik 9 on 2- 2'-atsetüültsitanšglükosiid A.

2.7.10 Kroomi tuvastaminetograafiline lkeak 10

Kromatograafilise piigi 10 retentsiooniaeg on 39,04 minutit. Positiivse iooni režiimis on antud eksimeeri iooni piik m/z656 [M+NH4]+, 661 [M+Na] ja negatiivse iooni režiimis eksimeer-iooni piik m/z637 [M–H] -, 673 [M+Cl] -. Piigi 10 suhteliseks molekulmassiks määratakse 638. Samal ajal on fragmendi ioon m/z475 tuletatud 1 kofeiini molekuli, 163 Da, estersideme katkemise kaotusest. Võrdlusaine retentsiooniaeg ja suhteline molekulmass on ühtsed ning identifitseerimispiik 10 on Cistanche C.

2.7.11 Kromatograafilise piigi 11 tuvastamine

Kromatograafilise piigi 11 retentsiooniaeg on 40,82 min. Positiivse iooni režiimis on antud eksimeeri iooni piik m/z661 [M+Na]+, 677 [M+K +, negatiivse iooni režiimis aga eksimeer-iooni piik m/z637 [M–H] -, 673 [M+Cl] -. Võib määrata, et piigi 11 suhteline molekulmass on 638. Samal ajal on fragmendi ioon m/z475 tuletatud 1 kofeiini molekuli, 163 Da, estersideme katkemisest. Võrdlusaine retentsiooniaja ja suhtelise molekulmassi kombineerimisel identifitseeriti kromatograafiline piik 11 kui isotsitanche glükosiid C.

2.7.12 Kromatograafilise piigi 12 tuvastamine

Kromatograafilise piigi 12 retentsiooniaeg on 41,48 min. Positiivse iooni režiimis on antud eksimeeri iooni piik m/z684 [M+NH4]+, 689 [M+Na +, negatiivse iooni režiimis on antud eksimeer-iooni piik m/z665 [M–H] -. Võib määrata, et piigi 12 suhteline molekulmass on 666. Samal ajal on näidatud, et fragmendi ioon m/z503460 pärineb 1 kofeiini molekuli (163 Da) ja 1 molekuli atsetüüli (43 Da) estersideme katkemisest. Vastavalt retentsiooniajale ja võrdlusaine suhtelisele molekulmassile identifitseeriti kromatograafiline piik 12 kui a2'-atsetüülüültseliaosiid.

Cistanche deserticola eksperiment

2.7.13 Kromatograafilise piigi 13 tuvastamine

Kromatograafilise piigi 13 retentsiooniaeg on 44,29 min, eksimeer-iooni piik m/z689 [M+Na] on antud positiivse iooni režiimis ja eksimeer-iooni piik m/z665 [M–H] - on antud negatiivse iooni režiimis ning piigi 13 suhteline molekulmass on samal ajal 66 ioon. m/z503460 tuleneb 1 molekuli kofeiini (163 Da) ja 1 molekuli atsetüüli (43 Da) estersideme katkemisest. Koos võrdlusaine retentsiooniaja ja suhtelise molekulmassiga tuvastati kromatograafiline piik 13 kui antotsüaniin B.

2.7.14 Kromatograafilise piigi 14 tuvastamine

Kromatograafilise piigi 14 retentsiooniaeg on 46,67 min. Eksimeeri iooni piik m/z675 [M+Na] on antud positiivse iooni režiimis ja eksimeer-iooni piik m/z651 [M–H] - negatiivse iooni režiimis. Piigi 14 suhteline molekulmass on 652. Samal ajal on fragmendi ioon m/z475 tuletatud feruulhappe rühma 177Da molekuli estersideme katkemisest. Koos võrdlusaine retentsiooniaja ja suhtelise molekulmassiga tuvastati kromatograafiline piik 14 kui epimeridinosiid A.

2.7.15 Kromatograafilise piigi 15 tuvastamine

Kromatograafilise piigi 15 retentsiooniaeg on 49,90 min. Positiivse iooni režiimis on antud eksimeeri iooni piik m/z698 [M+NH4]+, 703 [M+Na +, negatiivse iooni režiimis aga eksimeer-iooni piik m/z679 [M–H] -, 715 [M+Cl] -. Piigi 15 suhteline molekulmass on 680. Samal ajal tuleneb fragmendi ioon m/z517474 1 kofeiini molekuli (163 Da) ja 1 molekuli atsetüüli (43 Da) estersideme katkemisest. Kromatograafiline piik 15 identifitseeriti võrdlusaine retentsiooniaja ja suhtelise molekulmassi põhjal kui tsistanšglükosiid K.

2.7.16 Kromatograafilise piigi 16 tuvastamine

Kromatograafilise piigi 16 retentsiooniaeg on 55,36 minutit. Positiivse iooni režiimis on antud eksimeeri iooni piik m/z717 [M+N, negatiivse iooni režiimis aga eksimeer-iooni piigid m/z693 [M–H] -, 729 [M+Cl] -, mille tulemuseks on piigi 16 suhteline molekulmass 694. Samal ajal on näidatud fragment m/z 17, ioonist47. estersideme katkemise kadu 1 feruulhappe rühma molekulil, 177 Da, ja 1 molekulil atsetüülrühmal, 43 Da. Koos võrdlusaine retentsiooniaja ja suhtelise molekulmassiga identifitseeriti kromatograafiline piik 16 kui cistanche glükosiid J. Cistanche deserticola 60% metanooliekstrakti kromatograafilised piigid tuvastati HPLC-MS abil, mis kombineeriti eraldatud võrdlusaine suhtelise molekulmassi, retentsiooniaja ja fragmendi iooniga. Tulemused näitasid, et 16 kromatograafilise piigi 17 komponenti olid täpselt identifitseeritud (tabel 2).

Tabel 2: Cistanches Herba ja võrdlusstandardühendite identifitseeritud kromatograafilised piigid

3  . Arutelu

3.1 Katseartikli valmistamise meetodi valik

Selle uuringu peamine eesmärk on tuvastada Cistanche deserticola HPLC piigid. Seetõttu põhineb ekstraheerimislahusti ja ekstraheerimismeetodi valik võimel saada rohkem HPLC piike. Uurimisrühm on viinud läbi pikaajalisi Cistanche deserticola uuringuid ja teinud palju tööd kvaliteedianalüüsi alal. Käesolevas töös valiti ka Cistanche deserticola ekstraheerimislahusti ja ekstraheerimismeetod, tuginedes uurimisrühma varasemale analüüsitööle ja Hiina farmakopöale (2015. aasta väljaanne). Lõpuks valiti ekstraheerimismeetodiks 60% metanooli lahustiga ultraheli ekstraheerimine 40 minutiks.

3.2 HPLC-MS tingimuste valik

Käesolevas artiklis tehtud kromatograafilise kolonni valik põhineb Cistanche deserticola kvaliteedianalüüsil uurimisrühma varases staadiumis ning AgilentZORBAXEclipsePlusC18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μm), DionexC18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μmm × 5 μmm, 4,5 μ6 × 5 μ6 m). μ m) kromatograafiline kolonn, lõpuks valige AgilentZORBAXEclipsePlusC18 kromatograafiline kolonn (4,6 mm × 250 mm, 5 μm) Sellel on hea eraldusefekt Cistanche deserticolale; 39 võrdlusaine hulka kuuluvad fenüületanoid, lignaanid ja fenüülpropanoid, seega on tuvastamise lainepikkus 254 nm; Samal ajal uuriti liikuva faasi, nagu metanool-vesi, atsetonitriil-vesi, metanool-0,1% fosforhappevesi, atsetonitriil-0,1% sipelghapevesi, mõju kromatograafilisele eraldamisele ja massispektromeetriale ning lõpuks valiti liikuvaks faasiks atsetonitriil-0,1% sipelghappevesi.

3.3 Kokkuvõte

Selles uuringus loodud meetod tuvastas täpselt 17 komponenti 60% metanooli 16 kromatograafilisest piigist.väljavõtekohtaCistanche deserticola.

Uurimistulemused ei oma mitte ainult kindlat referentsväärtust ravimmaterjali edasiseks kvaliteedianalüüsiks, vaid võimaldavad vältida ka korduvat tööd ravimmaterjali teadaolevate ühendite struktuuri tuvastamisel. Kuid üldiselt on tuvastatud kromatograafilisi piike suhteliselt vähe ja paljusid kromatograafilisi piike ei ole tuvastatud, kuna neid ei ole võrdlusainele määratud. Enamik tuvastatud komponente on fenüületanoidglükosiidid, samas kui lignaanid on haruldased. Põhjuseks võib olla see, et Hiina farmakopöa 2015. aasta väljaandes viidatud ekstraheerimismeetod on peamiselt suunatud fenüületanoidglükosiididele või ehhinakosiidide ja kolibakterilaadsete ühendite sisaldus selle ravimmaterjali ekstraktis on liiga kõrge, mistõttu on raske tuvastada teisi väikese sisaldusega ühendeid. Konkreetsed põhjused vajavad täiendavat selgitamist.

[Viiteallikad]

[1] Hiina Flora toimetuskomitee. Hiina taimestik [M]. Peking: Science Press, 1990: 86

[2] Yang Junshan. Kõrbe ženšenn – Cistanche deserticola [J]. Chinese Journal of Pharmacy, 2011, 46 (12): 881.

[3] Tu Pengfei, Jiang Yong, Guo Yuhai jt. Cistanche deserticola ja selle tööstusliku arengu uurimine[J]. Chinese Journal of Pharmacy, 2011, 46 (12): 882-887

[4]Riiklik farmakopöa komisjon. Hiina Rahvavabariigi farmakopöa. I osa [M]Peking: China Pharmaceutical Science and Technology Press, 2015: 135

[5] JIANG Y, TU PF. Cistanche liikide keemiliste koostisosade analüüs ［J］． J Chromatogr A, 2009, 1216 (11): 1970-1979.

[6] PAN J, YUAN CS, LIN CJ jt. Looduslike fenüülpropanoidglükosiidide farmakoloogiline toime ja mehhanismid［J］． Pharmazie, 2003, 58( 11): 767-775.

[7] FU GM, PANG HH, Wong Y. Looduslikult esinevad fenüületanoidglükosiidid: potentsiaalsed juhid uute ravimite loomiseks［J］． Curr Med Chem, 2008, 15 (25): 2592-2613.

[8] Rhode Mei, Long Mei, Du Wenjing jt. Cistanche deserticola ekstrakti osteoporoosivastase toime mehhanism M KOOPG hiirtel ［ J ］. Hiina eksperiment Journal of Prescriptions, 2016, 22 (10): 138–142

[9] Ma Hui, Yin Ruoxi, Guo Min jt. Cistanche deserticola polüsahhariidi mõju D-galaktoosist põhjustatud vananemisele. CREB ekspressiooni mõju vana mudeli hiirtele ［ J ］. Chinese Experimental Prescriptions Journal, 2014, 20 (20): 137–141

[10] Tao Yicun, Li Jianying, Xu Yonghua jt. Cistanche deserticola fenüületanosiidi mõju rottidele: kõrgmäestiku kopsuturse ennetamine ja ravi ［ J ］. Chinese Journal of Experimental Prescriptions, 2014, 20( 15): 134-138.

[11] Zhou Haitao, Cao Jianmin, Lin Qiang. Cistanche deserticola rottide ammendatud ujumisvõime ja müokardi mitokondriaalse antioksüdandi võime kohta ［ J ］. Hiina eksperimentaalne valem Journal of Science, 2012, 18 (6): 229–233

[12] NAN ZD, ZHAO MB, ZENG KW jt. Põletikuvastased iridoidid Tarimi kõrbes kasvatatud Cistanche deserticola vartest ［J］． Chin J Nat Med, 2016, 14(1): 61-65.

[13] NAN ZD,ZENG KW,SHI SP,et al． Põletikuvastase toimega fenüületanoidglükosiidid Tarimi kõrbes kasvatatud Cistanche deserticola vartest ［J］． Fitoterapia,2013,89: 167-174．

[14] Nan Zedong, Zhao Mingbo, Jiang Yong jt. Tazhongis kasvatatava kõrbetsitantsi keemia: koostise uuring ［ J ］. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2013, 38 (16): 2665-2670.

[15] Nan Zedong, Zhao Mingbo, Jiang Yong jtLignans [J]. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2015, 40 (3): 463-468.