Bakteri Symbiont Virgibacillus Salariuse tüve karotenoidiekstraktist pärit vananemisvastase kreemi erinevate koostiste iseloomulik hinnang

Märksõnad:koor;cistanche;antioksüdandid; päikesekaitsekreem; bakteriaalne sümbiont

Cistanche'i vananemisvastase kohta lisateabe saamiseks klõpsake siin

1. Sissejuhatus

Enneaegne vananemineon degeneratiivne haigus, mida iseloomustab kuiv, kortsuline ja kare nahkja mustad täpid [1]. Enneaegset vananemist põhjustavad kaks tegurit, nimelt sisemised tegurid, näiteksnagu stress, vastupidavus, hormonaalsed muutused ja tervis, aga ka välised tegurid, sealhulgasultraviolettkiired ja vabad radikaalid. Vabad radikaalid on hapnikku sisaldavad molekulid, milleaatomite paigutus on ebastabiilne ja läbib seetõttu ahelreaktsioone, mis võivad tekkidakeha ja põhjustada pidevaid kahjustusi [2]. 

Vabad radikaalid on väga reaktiivsed ja ohtlikud ained, mis kahjustavadkehakuded, mis võivad vanemas eas põhjustada mitmesuguste haiguste teket [3]. Vabadest radikaalidest on aga võimalik üle saada, kasutades antioksüdante [4] mis peatusahelreaktsioonid, mille käivitavad vabad radikaalid, loovutades elektrone ebastabiilsetele molekulidele.Antioksüdantsete ühendite näidete hulka kuuluvad tsistanche, C-vitamiin ja E-vitamiin.5].

cistanche on ühendid, mis on tõestatult potentsiaalsed antioksüdandid [6–10] nagu need sisaldavadpika ahelaga isopreeni ühend konjugeeritud kaksiksidemega [5,7,11]. Konjugeeritudkaksikside eemaldab üksiku hapniku ja desaktiveerib teised selle kaudu esinevad vabad radikaalidelektronide ülekande protsess [12,13]. Seejärel konjugeerunud ühendid kahekordistuvadsidemeid võib leida maismaa- ja mereorganismidest. Merest pärit ühendidorganismidel on ainulaadsed omadused ja mitmeid avastusi uute bioaktiivsete ühendite kohtaantibiootikumide, vähivastaste ravimite, ravimite, kosmeetika, ensüümide ja pigmentide jaokson saadud paljudest korallide ökosüsteemidest, eriti pehmetest korallidest.

Pehmete korallide massilist kasutamist ei tohiks kasutada, kuna see kahjustab neidökosüsteem. Pehme koralliga seotud bakterisümbiont võib muutuda tugevaksalternatiiv, mis toodab tsitanche'i antioksüdantide allikana [14,15]. KosmeetikaKasutamisel on vaja preparaate, mida saab vaevata ja mugavalt peale kandakarotenoidühendid. Seetõttu on eelistatud kosmeetiline preparaat vormiskoorest. Kreem on valitud pooltahke preparaat, mis jaotub kergesti ühtlaselt nahale,ei kleepu ja seda on lihtne puhastada, et tarbijatel oleks seda mugav kasutada. Kasutaminesümbiontbakterid kosmeetika tooraine allikana on uusim läbimurre, mistuleb arendada.

2.1. Materjalid ja tööriistad

Bakterite sümbiontV. palgadtüvi 19.PP.Sc1.6, mis on eraldatudSinulaariasp. päritolupärit Panjangi saarelt Jeparast Kesk-Jaava osariigist Indoneesiast; konkreetne punkt asub koordinaatidel"6◦340 37.3500 S", "110◦370 52.0100 E". Vajalikud materjalid hõlmavad metanooli (analüütilineklass) ostetud Merckist (Darmstadt, Saksamaa);

2,2-difenüül-1-pikrüülhüdrasüül

(DPPH) firmalt Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, USA). Muud kreemi koostises kasutatud koostisosadnagu steariinhape, glütseriin, Na-tetraboraat, trietanoolamiin (TEA), lanoliin,päevalilleõli, mesilasvaha, tsetüülalkohol, span 80, glütseroolmonostearaat ja Tween 80 olidostetud Merckist (Darmstadt, Saksamaa). Instrumendid olid UV-viskajadShimadzu 1240 spektrofotomeeter (Kyoto, Jaapan), Brookfield LVDV-I Prime Viscometer(Toronto, ON, Kanada), pH-meeter digitaalne USB Phs 3c 3d Rohs, tsentrifuug IEC Centra MP4R(Thermo Electron, Waltham, MA, USA) ja orbitaalloksuti Daihan SHO 2D ​​(Wonju, Korea).

2.2. Sinularia sp. bakteriaalse sümbionti isoleerimine.

TheSilunariasp. koed asetati steriilsetesse Petri tassidesse, mis olid osaliselt täidetudsteriliseeritud merevesi. Pehmete korallide kudede pinnad lõigati ära ja ainult sisemusproovist kasutati mikroobide isoleerimiseks. Bakterite isoleerimiseks rida lahjendusiviidi läbi kõigi proovide jaoks. Igast Petri tassist koguti 10 ml proovisteriilse pipetiga ja asetatakse kolbi, mis sisaldab 90 ml steriliseeritud merevett, et saada a10−1 lahjendamine. Alates 10−1 Lahjendusega viidi 1 ml tuubi, mis sisaldas 9 ml steriilset ainetmerevesi, et saada 10−2 lahjendamine. Seda lahjendusprotsessi korrati kuni 10−5 lahjendaminesaadi. Igast lahjendusseeriast koguti proov (1 ml) ja asetati steriilsesse anumassePetri tass, mis sisaldab Zobell 2216E agarisöödet (Himedia, Mumbai, India) bakterite jaoksisolatsioon. Seejärel inkubeeriti Petri tassid 30 °C juures◦C 2 päeva. Kollase värvusega bakteragarisöötme pinnal kasvavad kolooniad eraldati triibu meetodilsaada puhtaid bakteritüvesid.

2.3. Bakterite sümbiontide kultuur

BakteridV. salariustüvi 19.PP.Sc1.6 [16] inokuleeriti, viies üle 1 mlisolaat 2 liitrisse steriilsesse Zobell Marine Broth 2216-sse (Himedia, Mumbai, India). See oliseejärel asetati loksutile kiirusel 100 p/min temperatuuril 27◦C kuni kandja värv muutus kollaseks (±7 päeva).Seejärel isoleeriti sümbiootilised bakterid, mis olid tootnud tsistanši jatsentrifuugiti 15 minutit kiirusel 6000 p/min, misjärel graanulid eraldusid ja seejärel filtritikasutades Whatmani filterpaberit nr 1 (Maidstone, UK).

2.4. Karotenoidide ekstraheerimine

Tistanši ekstraheerimine kiirleotamise meetodil, mis viiakse läbi pimedastuba. Merckist (Darmstadt, Saksamaa) ostetud metanool (analüütiline puhastus) olilisati pelletikultuurile ja seejärel tsentrifuugiti 10 minutit kiirusel 6000 p/min. Seejärel asaadi filtraat, mis sisaldas tsistanche'i ja pelleteid bakterimassi kujul,filtreeriti Wahtman No 1 filterpaberiga, aurustati ja kuivatati N-gaasiga [14,15].

2.5. Kreemi koostised

Valem kasutas kolme erinevat tüüpi kreemiga koostist, nimelt vs.oh ja oh [16–18]. Kasutatud valem on näidatud tabelis1.

Tabel 1.Karotenoidekstrakti kreemivalemidV. palgadtüvi 19.PP.Sc1.6.

2.5.1. Vormel 1: koor vs

Sulatasime kausis steariinhappe ja glütseriini. Natetraboraat ja TEA olidlahustatakse väheses vees, seejärel pannakse steariinhappe ja glütseriini lahusesse. Seejärel segasimeja homogeniseeriti ning lisati veidi vett, et tulemused oleksid head. Viimane samm olikarotenoidi ekstrakti lisamiseks ja segage, kuni see on ühtlaselt jaotunud.2.5.2. Vormel 2: Cream owEsiteks sulatati tassis 1 glütseroolmonostearaat ja tsetüülalkohol. Päevalill jaTween 80 segati tassis 2. Pärast seda asetasime 2. tassis oleva segu tassi 1.segati vähese kuuma veega kuni homogeensuseni. Lõpuks lisasime karotenoidiekstrakti ja segage kuni homogeensuseni.

2.5.3. Vormel 3: kreem wo

2.6. Kreemi hindamine

Hinnati kolme kreemi koostise omadusi; esialgne hindamineviidi läbi organoleptiline test. Organoleptilistes testides hõlmavad vaatlused muutusivärvus, lõhn (rääsumine) ja tunne. Organoleptilises testis kasutati vastajatena 25 inimest,mis koosneb 15 koolitatud ja 10 treenimata inimesest. Järgmine test oli homogeensus,mis saavutatakse kreemi kandmisega klaasplaatidele ja jälgides kreemi ühtlustvärv, olgu see ühtlane või mitte. Seejärel pH-testis kreem ladestusklaasist keeduklaasi ja seejärel tehti pH mõõtmine pH-meetriga, millel olieelnevalt kalibreeritud Dappari standardiga (pH 4 ja pH 7). Hajutusjõudtest viidi läbi läbipaistval klaasil, mis asetati millimeetripaberile ja 0,5 g kreemi

asetatakse klaasile ja kaetakse seejärel teise läbipaistva klaasiga ja jäetakse seisma±5 s kunisaada moodustatud ala läbimõõt. Seejärel erinevad kaalud 50, 100, 150, 200, 250, 300,Läbipaistvale klaasile asetati 350, 400 ja 450 g ning moodustati ala läbimõõttäheldati. Spetsifikatsioonides on kirjas, et kreem peaks levima kergesti ja ühtlaselt.

Vahepeal määrati kreemi viskoossuse test Brookfield LVDV-I Prime'igaViskosimeeter Adhesioonikatse viidi läbi klaasesemega, mis on märgistatud kui4 × 2,5 cm, seejärel asetati piirkonna keskpunkti koguni 0,25 g kreemi ja kaetimuud klaasist esemed. Seetõttu pandi 5 minutiks koorem 1 kg, seejärel kaks klaasist esetmis olid kinnitatud, paigaldati katseseadmele, millele anti koormus 80g. Pärast seda märgiti kahe klaaseseme eraldamiseks vajalik aeg. Tähelepanekud jaokskõik testid viidi läbi kord nädalas 5 nädala jooksul.

2.7. Antioksüdandi aktiivsuse mõõtmine

Metanoolis lahustatud kreemid valmistati kontsentratsioonide seeriasse. Seega, akokku 3 ml proovi lahjendati 1 ml 0,1 mM DPPH lahusega ja lasti30 min seista. Setimisel lahus homogeniseeriti ja selle imendumine olimõõdeti spektrofotomeetriga lainepikkusel 517 nm. Neelduvusloeti ka kontrolllahust, st DPPH ilma testlahuseta. Lisaks onantioksüdandi aktiivsust mõõdeti järgmise võrrandi abil [19]: 

2.8. Päikesekaitsefaktori (SPF) mõõtmine

Mõõdeti päikesekaitsefaktori (SPF) väärtusin vitro. SPFkreemi päikesekaitse aktiivsuse määramiseks tehti test UV-Vis abilspektrofotomeeter. Iga kreem, mis kaalus 0,1 g, lahustati 100 ml metanoolisMõõtekolbi ja filtriti kasutades Whatmani nr 1. Kokku pandi 3 ml lahustküvetti, et mõõta selle neeldumist UV-Vis spektrofotomeetriga. Järgnevalt,SPF väärtuse määramine UV-Vis spektrofotomeetriga oli teadakreemi omastamise omadused lainepikkustel 290–320 nm intervalliga 5 nm.SPF väärtuse arvutamisel kasutatakse järgmist võrrandit [20,21]: 

abs=Proovi neeldumine.

Küsi lisa:

E-post:wallence.suen@wecistanche.com Whatsapp pluss 86 15292862950