Fenüületanoidglükosiidide taseme, antioksüdantide aktiivsuse ja muude kvaliteediomaduste muutused Cistanche Deserticola viiludes auruga töötlemisel

Cistanche deserticola Y. C. MA(Orobanchaceae), üldtuntud kui "kõrbe ženšen", on Hiinas ja Jaapanis pikka aega kasutatud toonikuna. Lihakad varred lõigatakse viiludeks, et ravida mitmesuguseid haigusi, sealhulgas impotentsust, naiste viljatust, külmatunnet nimmes ja põlvedes ning geriaatrilist kõhukinnisust. Viimastel aastatel on mitmed uuringud näidanud selle efektiivsust eksperimentaalsetes mudelites, mis on seotud neuroloogiliste häiretega, eriti Alzheimeri tõve ja Parkinsoni tõvega.Tervisliku toidu turg tunneb selle kasuliku loodusliku toidulisandi vastu üha enam huvi. Mahlakatest vartest valmistatud vein ja tee on populaarsed tervisetoidud, mis leevendavad väsimust ning parandavad õppimisvõimet ja mälu.C. deserticolaon rikkalik fenüületanoidglükosiidide, polüsahhariidide ja lahustuvate suhkrute allikas, millel on peamiselt antioksüdatiivne toime,neuroprotektiivne,hepatoprotektiivne,immuunsüsteemi tugevdav,lahtistav,ja vananemisvastane toimeid, mille hulgas antioksüdatiivset toimet peetakse muude farmakoloogiliste toimete aluseks. Ehhinakosiid ja akteosiid on Hiina farmakopöas (2015. aasta väljaanne) Cistanches Herba kvaliteedikontrolli tüüpilised markerid, kuna need on valdava arvukuse, perekonna spetsiifilisuse ja märkimisväärse bioaktiivsuse tõttu. Lahjendatud etanoolis lahustuvate ekstraktide määramine sisaldub ka Cistanches Herba kvaliteedikontrollis. Samuti on teatatud, et tsistanosiidi A, isoakteosiidi ja 2'-atsetüüllakteosiidi leidub rohkestiC. deserticola. 

LOODUSLIK TASTANŠEKSTRAKT VÄSIMUSVASTANE TOIDULISAND PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Kasvavnõudlus C. deserticola järele on selle kasvatamist oluliselt stimuleerinud. C. deserticola kuulub mitmeaastaste parasiittaimede hulka, mis kasvab peamiselt Loode-Hiina kuivades või poolkuivades piirkondades. Kohe pärast koristamist tuleb need väga suhkrurikkad rasked toored varred kuivatada, et vältida toitainete sisalduse vähenemist ja riknemist. Värsked varred sisaldavad tavaliselt 75–85% vett ja nende säilimiseks tuleks veetase langetada alla 10%. Enamikus Cistanche'i tootmispiirkondades asetatakse terved värsked varred esialgseks kuivatamiseks umbes kaheks kuuks avamaale. Seejärel transporditakse kuivatatud materjal tehastesse, leotatakse vees, lõigatakse viiludeks ja kuivatatakse uuesti. Viilude töötlemise viivitus võib olla halva haridusega või halvasti varustatud põllumeeste tagajärg. Peamiseks probleemiks on aga teadmiste ja tehnoloogia puudumine tõhusa tootmisprotsessi võimaldamiseks.

Kõrgkuumtöötlust on laialdaselt kasutatud köögiviljade ja puuviljade puhul ning see võib pärssida mikroobide kasvu ja pikendada säilivusaega. Kuid see võib põhjustada ka muutusi välimuses ja toitainete koostises. On näidatud, et teatud bioaktiivsed komponendid ja farmakoloogiline toime, nagu antioksüdantne toime, suurenevad ravimtaimedes pärast aurutamist. Seega võib C. deserticola aurutamine parandada mitmeid tervisega seotud eeliseid. Samuti on teatatud, et aurutamine või blanšeerimine värskelt lõigatud C. deserticola puhul suurendab selle kogust.ehhinakosiid ja akteosiid.19,20) Värskelt lõigatud C. deserticola bioaktiivsete ühendite ja antioksüdantse aktiivsuse muutuste võrdlemiseks aurutamisprotsessi ajal ei ole aga üksikasjalikke uuringuid läbi viidud. Selle uuringu eesmärk oli seega uurida aurutamisaja (1, 3, 5, 7 min) mõju fenüületanoidglükosiidide, polüsahhariidide, lahustuvate suhkrute, lahjendatud etanoolis lahustuvate ekstraktide kogusele, kehakaalu langusele ja antioksüdantsetele omadustele. C. deserticola viiludel võrreldes kolme teise rühmaga (värsked, otse ahjus kuivatatud, blanšeeritud).

Eksperimentaalne

Kemikaalid

Analüütilise puhtusega kemikaalid: metanool, etanool, D-glükoos, väävelhape, kaaliumvesinikfosfaat ja kaaliumdivesinikfosfaatmonohüdraat hangiti ettevõttest Beijing Chemical Works (Peking, Hiina). Sipelghape ja fenool osteti ettevõttest Sinopharm Chemical Reagent Co. (Shanghai, Hiina). HPLC-kvaliteediga metanool osteti ettevõttest Fisher Scientific (Toronto, Kanada). Deioniseeritud vesi saadi Milli-Q süsteemiga (Millipore Corp., Bedford, MA, USA). 2,2-difenüül-1-pikrüülhüdrasüüli (DPPH) valmistas Alfa Aesar (Ward Hill, MA, USA) ja 2,2'-asobis(2-aminopropaan)divesinikkloriidi (AAPH) ) autor Adamas-beta (Shanghai, Hiina). 6-Metoksü-2,5,7,8- tetrametüülkromaan-2-karboksüülhape (Trolox), 2,6-di-tert-butüül-p-kresool (BHT) ja fluorestseiin (naatriumisool) (FL) saadi TCI-st (Tokyo, Jaapan) ja kogu antioksüdantide mahu (T-AOC) testikomplekt Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute'ist (Nanjing, Hiina). Akteosiidi (111530-200706) ja ehhinakosiidi (111670-200503) standardid osteti riiklikust toidu- ja ravimikontrolli instituudist (Peking, Hiina). Standardid jaoks2'-atsetüüllakteosiid, tsistanosiidi A ja isoakteosiidi esitas kingitusena dr Zhiguo Ma. Iga võrdlusühendi puhtus määrati üle 98%, normaliseerides HPLC-diode array detektoriga (DAD) tuvastatud piigi pindala.

Materjali töötlemine ja kaalulanguse määramine

Proovid koguti 2{{10}}14. aasta kevadel Ningxia Cistanches Herba istanduses (106.08 kraadi N, 38,24 kraadi E, 1124,2 m ) Hiinas ja selle tuvastas üks meist (prof. Jun Chen). Vautšeri näidis anti hoiule Hiina meditsiiniteaduste akadeemia Peking Unioni meditsiinikolledži ravimtaimede arendamise instituuti. Juhuslikult koguti umbes 3 kg C. deserticola tüvesid ja loputati puhta veega. Õisikuosad eemaldati keraamilise noaga, seejärel lõigati varred 3 mm viiludeks. Iga 100 g viilu mõõdeti massina (W0) kordusena. Hinnati seitset eksperimentaalset ravi kolme kordusega ravi kohta. Aurutamiseks pandi neli portsjonit viilu 93-kraadisesse veeauru 1, 3, 5 või 7 minutiks. Blanšeerimiseks pandi üks töötlus 5 minutiks 96 kraadisesse vette. Värsked ja otse ahjus kuivatatud viilud olid teised kaks selles katses kirjeldatud ravi. Töödeldud viilud kaaluti (W1) ja kuivatati ahjus 60 kraadi juures. Seejärel kaaluti kuivatatud viilud uuesti (W2), jahvatati ja pulbristati (65 silma). Proovipulbreid hoiti kuni analüüsipäevani vaakumkottides temperatuuril -20 kraadi. Kaalulangus arvutati järgmiselt: kaalulangus pärast kõrget kuumtöötlust (%)=[(W0−W1)/W0] × 100, kaalulangus pärast ahjus kuivatamist (%)=[(W0) −W2)/W0]× 100, kus W0 on algkaal ning W1 ja W2 on kaalud, mis on mõõdetud vastavalt kõrge kuumtöötluse ja ahjus kuivatamise järel.

Fenüületanoidglükosiidid ja antioksüdantsed omadused

Proovide ekstraheerimine

{{0}}.5-g pulbrilist proovi ekstraheeriti 25 ml 60% metanooli vesilahusega KQ-250DE ultraheli abil (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Jiangsu, Hiina) 40 kHz, 200 W ja 40 kraadi juures 30 minutit. Pärast ekstraheerimist tsentrifuugiti töödeldud proove 10 minutit kiirusel 4600 x g (TD5; Hunan Herexi Instrument & Equipment Co., Hunan, Hiina). Supernatant filtriti läbi 045-µm poorisuurusega filtri järgnevate analüüside jaoks.

Fenüületanoidglükosiidide määramine

ehhinakosiidi, tsistanosiidi A määramine,akteosiid, isoakteosiid ja 2'-atsetüüllakteosiidC. deserticola proovidest viidi läbi nii, nagu on kirjeldanud Ma et al.21) mõningate muudatustega. Analüüs viidi läbi 2695–2996 HPLC seadmega (Waters Corp., Milford, MA, USA), ultraviolettkiirguse neeldumist jälgiti lainepikkusel 330 nm. Eraldamine viidi läbi Merck Purospher® Star RP-C18 kolonnis (250 mm × 4,6 mm, 5 µm), mis töötati 30 kraadi juures. Liikuv faas voolukiirusel 1 ml/min koosnes lahustist A (metanool) ja lahustist B (0,1% sipelghappe vesilahus, v/v). Gradientelueerimine viidi läbi järgmiselt: 28% A ({{30}}–10 min), 28–38% A (10–30 min), 38% A (30– 45 min) ja süstimismaht oli 10 µL. Viit võrdlusstandardit sisaldav segalahus valmistati, lahustades võrdlusstandardid 60% metanoolis lõppkontsentratsioonini 0,20 mg/ml ehhinakosiidi puhul, 0,21 mg/ml akteosiidi puhul, 0,20 mg/ml 2'-atsetüüllakteosiidi puhul, 0,05 mg/ml. ml tsistanosiidi A puhul ja 0,05 mg/ml isoakteosiidi puhul. Seejärel lahjendati lahust seitsme erineva kontsentratsioonini, et luua kalibreerimiskõverad. Proovide fenüületanoidglükosiidide kontsentratsiooni väljendati grammides värske massi kilogrammi kohta (FW).

LOODUSLIK CISTANŠEKSTRAKT PARANDAB MÄLU TOIDULISAND PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Hapnikuradikaali neeldumisvõime (ORAC) määramine

ORAC-analüüs viidi läbi nii, nagu on kirjeldanud Huang et al.22) mõningate muudatustega. Positiivse kontrollina kasutati sünteetilist antioksüdanti BHT. Lühidalt, 25 µL lahjendatud prooviekstrakte ja 160 µL FL segati 96-süvendiga mikroplaadil. Segu inkubeeriti 37 kraadi juures 15 minutit enne 20 µL AAPH lisamist. Fluorestsentsi jälgimiseks kasutati 485 nm (ergastus) ja 520 nm (emissioon) 3- min intervalliga 72 minuti jooksul, kasutades Fluoroskan Ascent FL (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA). Võrdlusstandardina kasutati Troloxi (2,5–50,0 µmol/L) ja tulemused väljendati Troloxi mikromoolides värske viilu massi kohta, µmol TE/g FW.

2,2-difenüül-1-pikrüülhüdrasüüli vabade radikaalide eemaldamise aktiivsuse (DPPH) määramine

DPPH test viidi läbi nii, nagu on kirjeldanud Goupy et al.23) mõningate muudatustega. Positiivse kontrollina kasutati sünteetilist antioksüdanti BHT. Lühidalt, 1 ml lahjendatud prooviekstrakti segati 1 ml 0,2 mmol/L DPPH metanoolilahusega. Lahusi hoiti pimedas 25 kraadi juures 90 min, seejärel mõõdeti neeldumine lainepikkusel 517 nm. Võrdlusstandardina kasutati Troloxi (4,0–119,5 µmol/L) ja tulemused väljendati Troloxi mikromoolides värske viilu massi kohta, µmol TE/g FW.

Raudhapet redutseeriva antioksüdandi omaduse (FRAP) määramine

FRAP test viidi läbi, kasutades T-AOC testikomplekti vastavalt tootja juhistele.

Lahustuvad suhkrud ja polüsahhariidid

Lahustuvate suhkrute proovide valmistamine

0.5-g pulbrilist proovi ekstraheeriti 25 ml 80% etanooli vesilahusega KQ-250DE ultraheliga 40 kHz, 150 W ja 80 kraadi juures 30 minutit. Esimene ekstraktiivne lahus filtriti ja viidi 50-mL mõõtekolbi. Setted ekstraheeriti uuesti ja filtraat ühendati esimese ekstraktsioonilahusega 50-mL mõõtekolvis ja täideti märgini 80% etanooli vesilahusega.

Seejärel pipeteeriti 1 ml seda lahust 10- ml klaastorusse, et aurustada etanool keevas veevannis. Jäägi lahustamiseks lisati destilleeritud vett (5 ml), seejärel viidi see 100- ml mõõtekolbi ja täideti märgini destilleeritud veega. Lõpuks kasutati 2 ml seda lahjendatud lahust lahustuvate suhkrute määramiseks.

Polüsahhariidide proovide valmistamine

Lahustuvate suhkrute ekstraheerimisel tekkinud setted kuivatati õhu käes ja ekstraheeriti 25 ml destilleeritud veega KQ- 250DE ultraheliga 40 kHz, 150 W ja 80 kraadi juures 30 minutit. Esimene ekstraktiivne lahus filtriti ja viidi 50-mL mõõtekolbi. Setted ekstraheeriti uuesti ja filtraat ühendati esimese ekstraktsioonilahusega 50- ml mõõtekolvis ja täideti märgini destilleeritud veega. Seejärel pipeteeriti 5-mL selle lahust 50-mL mõõtekolbi ja täideti märgini destilleeritud veega. Lõpuks kasutati 2 ml seda lahjendatud lahust polüsahhariidide määramiseks.

Lahustuvate suhkrute ja polüsahhariidide määramine

Lahustuvate suhkrute ja polüsahhariidide määramine viidi läbi fenool-väävelhappe meetodil, nagu on kirjeldanud Wang et al.24) Üks milliliiter 6% fenooli lahust lisati 2 ml proovilahusele ja segati hästi. Seejärel lisati kiiresti 5 ml kontsentreeritud väävelhapet ja loksutati 5 minutit. Segu viidi 15 minutiks keeva veevanni ja jahutati ultraviolettkiirguse tuvastamiseks kiiresti toatemperatuurini. Ultraviolettkiirguse neeldumist jälgiti lainepikkusel 49{10}} nm UV2550 spektrofotomeetriga (Shimadzu Co., Kyoto, Jaapan). Destilleeritud vett kasutati toorikuna. Võrdlusstandard veevaba D-glükoos kaaluti täpselt ja lahustati destilleeritud vees lõppkontsentratsioonini 0,10 mg/ml. Seejärel pipeteeriti 1, 2, 3, 4, 5, 6 ja 7 ml põhilahust seitsmesse 10-mL mõõtekolbi ja täideti märgini destilleeritud veega. Seejärel kasutati kalibreerimiskõverate loomiseks standardlahuste seitset erinevat kontsentratsiooni.

Lahjendage etanoolis lahustuvad ekstraktid

Proove (4.0 g) kaaluti täpselt, et määrata nende lahjendatud etanoolis lahustuvad ekstraktid vastavalt Hiina farmakopöas (2015. aasta väljaanne) kirjeldatud meetodile.25) Pulberproov kaaluti (W3) ja ekstraheeriti 100 ml 50% etanooli vesilahust 250- ml koonilisse kolbi, aeg-ajalt loksutades 6 tundi ja lasti seista 18 tundi. Ekstraheeriv lahus filtriti ja 20 ml filtraati aurustati kuivaks, kuivatati 105 kraadi juures 3 tundi ja jahutati eksikaatoris (silikageel) 30 minutit. Lõpuks sai kogus täpselt kaalutud (W4). Lahjendatud etanoolis lahustuva ekstrakti sisaldus väljendati g/kg proovi FW kohta. Lahjendatud etanoolis lahustuvad ekstraktid arvutati järgmiselt: lahjendatud etanoolis lahustuvad ekstraktid (g/kg FW)=[(W4×5)/W3]×(100−W5)×10, kus W3 on algkaal , W4 on pärast ekstraheerimist mõõdetud kaal ja W5 on kaalukaotus pärast ahjus kuivatamist (%).

Statistiline analüüs

Ravirühmade vaheliste erinevuste selgitamiseks rakendati ühesuunalist ANOVA-d, kasutades SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Erinevusi hinnati Duncani testi abil olulisuse piiriga 0,05. Andmed väljendati standardhälbena (SD) (n=3).

Tulemused ja arutlus

Kaalukaotus

C. deserticola viilude kaal määrab otseselt selle kaubandusliku väärtuse ravimtaimede turul. Nagu on näidatud tabelis 1, analüüsiti C. deserticola kaalukaotust pärast kõrget kuumtöötlust ja ahjus kuivatamist. Madalam kaalukaotus leiti, kui viilud kuivatati ahjus, mitte aurutati või blanšeeriti. Blanšeeritud proovide kaalulangus oli kõige suurem. Aurutatud proovide kaalukaotus oli suurem pikema aurutamisajaga. Seitse minutit aurutamist, mis on pikim aeg värskelt lõigatud viilude kuju säilitamiseks, näitas märgatavalt (p<0.05) higher levels of weight loss after oven-drying than 5 min of steaming. Since phenylethanoid glycosides had been detected in the hot water (data not shown), it suggested that blanching/steaming promoted more water-soluble compounds to be dissolved in the hot water. Concerning weight loss after high-heat exposure, samples steamed for 1 minute exhibited extremely low weight loss. Therefore, 1 min of steaming was too short to make the Cistanche tissue brittle, so it was less able to release bioactive compounds (such as phenylethanoid glycosides) during the subsequent extraction procedure, compared with samples that had been steamed longer.

Fenüületanoidglükosiidid

Ehhinakosiidi, tsistanosiidi A, akteosiidi, isoakteosiidi ja 2'-atsetüüllakteosiidi tasemed erinevatel meetoditel töödeldud C. deserticola viiludes on näidatud joonisel 1. 7 minutit aurutatud proovid sisaldasid 2,16 g/kg FW ehhinakosiidi ja {{6} },29 g/kg FW tsistanosiidi A, mis on vastavalt –140 ja –6 korda suurem kui värskete viiludega. Fenüületanoidglükosiidide sisaldus tõusis järsult, kui värskeid proove töödeldi kõrge kuumusega ja kuivatati, eritiakteosiid, isoakteosiid ja 2'-atsetüüllakteosiid,samas kui neid värsketes proovides ei tuvastatud. Selle üheks võimalikuks põhjuseks võib olla fenüületanoidglükosiidide lagunemine peroksidaasi ja -glükosidaasi toimel. Kõrge temperatuuri ja veesisalduse vähenemise tõttu kuivatatud proovides inaktiveeritakse need ensüümid, mille tulemuseks on fenüületanoidglükosiidide kõrge sisaldus ekstraktides. Veelgi enam, fenüületanoidglükosiidid on fenoolsed ühendid, mis sünteesitakse värsketes taimedes vastusena kõrge temperatuuri ja niiskuse kadumise stressile.

LOODUSLIK TUBULOOS PARANDAB NEERUTUNGI PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Värskelt lõigatud C. deserticola nii aurutamine kui ka blanšeerimine suurendas ehhinakosiidi ja akteosiidi sisaldust.19,20) Kuid käesolevas uuringus andis blanšeerimine oluliselt (p.<0.05) lower concentration of acteoside and cistanoside A than drying directly. Regarding the total concentration of the five phenylethanoid glycosides, the blanched samples were still lower than the directly oven-dried ones (1.73, 2.35 g/kg FW, respectively). Slices steamed for 5 and 7 min contained significantly (p<0.05) higher amounts of acteoside, isoacteoside, and 2′-acetylacteoside than directly oven-dried samples. In general, the highest levels of phenylethanoid glycosides were found in the steamed samples, suggesting that the above-mentioned pharmacological activities produced by fenüületanoidglükosiididC. deserticola puhul võib viilude aurutamist parandada.

Lisaks leidsime, et aurutamisaeg oli fenüületanoidglükosiidide sisalduse määramisel ülioluline. Ehhinakosiid, tsistanosiid A, akteosiid ja isoakteosiid näitasid aurutamisprotsessi ajal sarnast kasvutendentsi, mis suurenesid järsult (1, 3 minuti pärast) ja saavutasid maksimaalse taseme 7 minuti pärast. Nelja ülalmainitud fenüületanoidglükosiidi puhul ei täheldatud aurutamisprotsessi ajal 3 kuni 7 minuti jooksul olulisi muutusi. Vastupidi, 2'-atsetüüllakteosiid suurenes oluliselt (lk<0.05) with processing time. Notably, the levels of phenylethanoid glycosides in slices steamed for 1 min were significantly (p<0.05) lower than in directly oven-dried slices, except isoacteoside. Therefore, 1 min steaming of 3-mm fresh-cut C. deserticola was not long enough to inactivate the above-mentioned enzymes. Higher total levels of the five phenylethanoid glycosides were observed when the slices were steamed for 5 and 7 min (3.20, 3.52 g/kg FW, respectively) rather than directly oven drying. Steaming from 5 to 7 min more effectively promoted the extraction of phenylethanoid glycosides from C. deserticola, leading to a higher level of phenylethanoid glycosides in the extracts.

Joonis 1. Ehhinakosiidi (A), tsistanosiidi A (B), akteosiidi (C), isoakteosiidi (D) ja 2'-atsetüüllakteosiidi (E) kontsentratsioon (g/kg FW) Cistanche deserticola viiludes vastavalt erinevatele töötlemismeetoditele Erinevad tähed (a–e) tähistavad statistiliselt olulisi erinevusi raviviiside vahel (Duncani test, lk<0.05, n=3).

Antioksüdantne aktiivsus

Viilude antioksüdantsed omadused, mida analüüsiti ORAC, DPPH ja FRAP abil, on esitatud joonisel 2. Ootuspäraselt näitasid ORAC väärtused proovide vahel suurt erinevust, ulatudes 13,34 µmol TE/g FW värsketes proovides kuni 108,62 µmol TE/g FW 7-minutise aurutamise juures. Aurutamisprotsessi ajal suurenes ORAC väärtus 4-korda 1–7 minuti jooksul aurutamise ajal. Sarnaseid suundumusi täheldati nii DPPH kui ka FRAP testides, mis näitasid kiiret tõusu aurutamise ajal. Kuigi auruga töödeldud proovidel olid algselt madalamad antioksüdantide väärtused (1 minuti pärast), näitasid nad protsessi ajal palju paremat antioksüdandivõime säilimist. Blanšeerimisel ei täheldatud olulisi erinevusi antioksüdantsetes omadustes võrreldes otsese ahjukuivatusega.

Joonis 2. Hapnikuradikaalide neeldumisvõime (ORAC) (A), 2,2-difenüül-1-pikrüülhüdrasüüli vabade radikaalide eemaldamise aktiivsuse (DPPH) (B) tasemed (µmol TE/g FW) ja Cistanche deserticola viilude raudhapet redutseeriv antioksüdant (FRAP) (C) vastavalt erinevatele töötlemismeetoditele Erinevad tähed (a–f) tähistavad statistiliselt olulisi erinevusi raviviiside vahel (Duncani test, p<0.05, n=3).

ORAC antioksüdantset aktiivsust C. deserticola toores vartes või viiludes ei ole varem teatatud. Siiski on C. deserticola toorvarte etanooliekstrakte mõõdetud DPPH ja FRAP testides,28) millel on kõrge antioksüdantne aktiivsus, veidi madalam kui 2(3)-t-butüül-4-hüdroksüanisool (BHA) ja kõrgem kui BHT. Veelgi enam, C. deserticolast eraldatud fenüületanoidglükosiididel oli tugev DPPH-d siduv toime, mis on veidi madalam kui askorbiinhappel29) ja kõrgem kui -tokoferoolil.2) C. deserticola võib olla looduslike antioksüdantide potentsiaalne allikas, kuna eraldatud puhastel ühenditel on antioksüdantsed omadused. C. deserticola omad olid kõrgemad kui mõnede sünteetiliste antioksüdantide omad. Nagu on näidatud tabelis 2, ilmnes BHT märkimisväärselt (lk<0.05) higher antioxidant properties than C. deserticola slices steamed for 7 min. Therefore, there is still a big gap between C. deserticola slices and synthetic antioxidants of equal quality.

DPPH testis kasutatakse nii vesinikuaatomi ülekande (HAT) kui ka üksiku elektroni ülekande (SET) mehhanisme, samas kui ORAC ja FRAP analüüsid järgivad vastavalt HAT ja SET reaktsioonide põhimõtteid.30) Käesolevas uuringus antioksüdandi võimekuse üldised suundumused. kolme testiga hinnatud olid väga sarnased. Seega kinnitasime, et kuivatatud C. deserticola viiludel (aurutatud, otse ahjus kuivatatud ja blanšeeritud) oli oluliselt (p<0.05) higher levels of antioxidant activity than fresh ones. Furthermore, steaming for 5 and 7 min significantly (p<0.05) enhanced levels of antioxidant activity compared with direct oven drying and blanching. Overall, our results showed that steaming fresh-cut C. deserticola slices was effective in preserving phenylethanoid glycoside levels and antioxidant activity.

Lahustuvad suhkrud, polüsahhariidid ja lahjendatud etanoolis lahustuvad ekstraktid

As shown in Fig. 3, levels of soluble sugars and polysaccharides exhibited the following descending order: fresh>directly oven-dried>steamed>blanšeeritud. Blanšeeritud viiludel oli väga madal lahustuvate suhkrute, polüsahhariidide ja lahjendatud etanoolis lahustuva ekstrakti sisaldus, correspooma suure kaalukaotusega hästi. Värsketel proovidel oli märkimisväärne (lk<0.05) higher content of soluble sugars (62.89 g/kg FW) and polysaccharides (17.36 g/kg FW) than the other samples, suggesting that heat treatment (oven drying, steaming, blanching) on fresh-cut samples would reduce the extraction of soluble sugars and polysaccharides. Heat treatment inhibited the hydrolysis of phenylethanoid glycosides to release the glucose, rhamnose, and so on. Moreover, heat treatment, used as an abiotic stress factors on fresh slices, gave rise to the synthesis of several phenylpropanoid compounds including phenylethanoid glycosides.27) Particularly, sugars contained in the slices were dissolved in the hot water to different extents by steaming or blanching. Thus, it is not surprising to see that the content of soluble sugars decreased by 23.88% in steaming and by 60.82% in blanching, while the content of polysaccharides decreased by 41.33% in steaming and by 53.83% in blanching, compared with fresh slices. It has been reported that the steaming process can increase reducing sugars and acidic polysaccharides in Ginseng Radix et Rhizoma,18) and mono sugars, including galactose and glucose, in Rehmanniae Radix.17) However, the whole dried crude drugs studied in the above-mentioned literature were quite different from the fresh-cut slices used in the present study.

Joonis 3. Cistanche deserticola viilude lahustuvate suhkrute (A), polüsahhariidide (B) ja etanoolis lahustuvate ekstraktide (C) kontsentratsioon (g/kg FW) vastavalt erinevatele töötlemismeetoditele Erinevad tähed (a–e) tähistavad statistiliselt olulised erinevused raviviiside vahel (Duncani test, lk<0.05, n=3).

Otse ahjus kuivatatud viilud sisaldasid kõige rohkem lahjendatud etanoolis lahustuvaid ekstrakte (89,26 g/kg FW), samas kui blanšeeritud viilud olid kõige madalamad (47,60 g/kg FW). Kuigi kõik töödeldud C. deserticola viilud vastasid Hiina farmakopöa (2015. aasta väljaanne) standardile, mille kohaselt tuleb neid nimetada Cistanches Herbaks, tooksid blanšeeritud viilud vähem kasu tervisele kui otse ahjus kuivatatud proovid lahjendatud etanoolis lahustuva aine olulise kadumise tõttu. väljavõtted. Seoses aurutamisprotsessiga oli lahustuvate suhkrute suundumus väga sarnane lahjendatud etanoolis lahustuvate ekstraktide puhul täheldatud suundumusega, vähenedes järk-järgult ilma olulisi muutusi 3–7 minuti jooksul. Polüsahhariidide kontsentratsioon kõikus kogu aurutamisperioodi jooksul kerge tõusuga. Nimelt näitas 7-minutiline aurutamine polüsahhariidide head säilivust, kuid lahustuvate suhkrute suurt kadu, samas kui 5-minutiline aurutamine näitas vastupidist, võrreldes otsese ahjukuivatusega.

Järeldus

Oleme esimest korda teatanud aurutamise mõjust bioaktiivsetele ühenditele ja antioksüdantsele aktiivsusele värskelt lõigatud C. deserticola puhul ning andnud olulist teavet tõhusate protsesside väljatöötamiseks C. deserticola varte koristusjärgseks töötlemiseks. Värsked viilud näitasid fenüületanoidglükosiidide ja antioksüdantsete ühendite ekstraheerimisel kõige halvemat efektiivsust, mis näitas, et need ained olid altid ensümaatilisele lagunemisele. Seevastu aurutatud proovides oli kõrgeim fenüületanoidglükosiidide ja antioksüdantide aktiivsus. Kuigi blanšeerimine suurendas veidi akteosiidi, isoakteosiidi ja 2'-atsetüüllakteosiidi sisaldust võrreldes otsese kuivatuskapis kuivatamisega, vähenesid massi, lahustuvate suhkrute, polüsahhariidide ja lahjendatud etanoolis lahustuvate ekstraktide väärtused dramaatiliselt. Aurutamisprotsessis tõusis fenüületanoidglükosiidide ja polüsahhariidide tase aja jooksul veidi. Aurutamine 5 ja 7 minutit märgatavalt (lk<0.05) enhanced total levels of the five phenylethanoid glycosides than directly oven drying. However, the longer the steaming process, the greater the decrease in weight, soluble sugars, and dilute ethanol-soluble extracts. No significant decrease in soluble sugars was observed when slices were steamed from 1 to 5 min compared with directly oven-dried samples. The steaming time had a consistent effect on the antioxidant properties, with a significant increase evaluated by the DPPH, ORAC, and FRAP assays. It was concluded that C. deserticola slices can be successfully treated with 5 to 7 min of steaming to improve the phenylethanoid glycoside levels and antioxidant activity while preserving the amounts of soluble sugarid, polüsahhariidid ja lahjendatud etanoolis lahustuvad ekstraktid.

Cistanche TUBULOSA VÄSIMUSVASTANE ANTIOKSIDANT PHGS75% ECH 30% ACT 12%