B- ja T-rakkude kõrvalekalded selektiivse IgA puudulikkusega patsientidel

Abstraktne

Taust

Selektiivne IgA puudulikkus (SIgAD) on peaaegu tundmatu etioloogiaga kõige levinum immuunsuse kaasasündinud viga. Selle uuringu eesmärk oli uurida lümfotsüütide alamrühmade kliinilisi diagnostilisi ja prognostilisi väärtusi ning funktsiooni sümptomaatilistel SIgAD patsientidel.

meetodid

Käesolevasse uuringusse kaasati kokku 30 saadaolevat SIgAD-ga patsienti Iraani registrist ja 30 vanuse-soolist tervet kontrolli. Analüüsisime B- ja T-rakkude perifeerseid alamhulka ja T-rakkude proliferatsiooni testi voolutsütomeetria abil kerge ja raske kliinilise fenotüübiga SIgAD patsientidel.

Tulemused

Meie tulemused näitasid naiivsete ja üleminekuperioodide B-rakkude arvu olulist suurenemist ning marginaalsete tsoonitaoliste ja ümberlülitatud mälu B-rakkude tugevat vähenemist SIgAD-ga patsientidel. Leidsime, et naiivsed ja keskmälu CD4+ T-rakkude alamhulgad, samuti Th1, Th2 ja regulatoorsed T-rakud on oluliselt vähenenud. Teisest küljest vähenes oluliselt kesk- ja efektormälu CD8+ T-rakkude alamhulk, samas kui mõlema (CD4+ ja CD8+) osakaal diferentseerus lõplikult efektormälu T-rakkudes. (TEMRA) olid meie patsientidel märkimisväärselt tõusnud. Kuigi mõned raske SIgAD-i T-rakkude alamrühmad olid sarnased, oli marginaalse tsooni ja ümberlülitatud mälu B-rakkude arvu vähenemine ja raskete SIgAD-patsientide CD21madala B-rakkude arvu suurenemine veidi silmatorkav. Veelgi enam, raske fenotüübiga SIgAD-ga patsientidel oli CD4+ T-rakkude proliferatsiooniaktiivsus tugevalt häiritud.

Järeldus

SIgAD patsientidel on erinevad rakulised ja humoraalsed puudused. Seetõttu võib T-rakkude ja B-rakkude hindamine aidata paremini mõista haiguse heterogeenset patogeneesi ja prognoosi.

Märksõnad

Immuunsuse kaasasündinud vead, primaarne immuunpuudulikkus, selektiivne IgA puudulikkus, B-rakkude alamrühmad, T-rakkude alamrühmad, voolutsütomeetria, proliferatsioonanalüüs

cistanche tubulosa - parandab immuunsüsteemi

cistanche ekstrakt

Sissejuhatus

Selektiivne IgA puudulikkus (SIgAD) on kõige levinum primaarne immuunpuudulikkuse häire (PID) või kaasasündinud immuunsuse tõrge (IEI), mis tuvastatakse IgA kontsentratsiooni järgi seerumis alla 7 mg/dl ning IgG ja IgM normaalsete kontsentratsioonide järgi üle nelja-aastastel patsientidel. . Enamik SIgAD-ga patsiente on asümptomaatilised, kuigi mõnel neist on erinevad kliinilised ilmingud, sealhulgas seedetrakti ja hingamisteede infektsioonid, allergilised haigused ja autoimmuunhaigused. Teatatud on haiguse progresseerumisest tavaliseks muutuvaks immuunpuudulikkuseks (CVID) valitud SIgAD-patsientide rühmas, kellel on IgG alaklasside puudulikkus või autoimmuunsed häired [1]. SIgAD patogeneesi spetsiifilisi põhjuseid ei ole veel teatatud. Siiski on lahendamata juhtudel tuvastatud defekte IgA klassi vahetamise rekombinatsiooni (CSR), IgA tootmise ja sekretsiooni protsessis, samuti SIgAD-ga patsientide IgA, ümberlülitatud mälu B-rakkude ja plasmarakkude pikaajalises ellujäämises [2]. ]. Nende immunoloogiliste protsesside defektid on seotud SIgAD patsientide lümfotsüütide kõrvalekalletega. Seega võib lümfotsüütide, eriti B-rakkude ja T-rakkude alamhulkade hindamine olla väärtuslik ja kasulik. Mitmed uuringud on näidanud B- ja T-rakkude kõrvalekaldeid mõnes SIgAD-ga patsientide rühmas [3, 4]. Seoses B-rakkude alamhulkadega on teatatud SIgAD-ga patsientide ümberlülitatud mälu B-rakkude, IgA plasmarakkude ja üleminekuperioodi IL-10+ regulatoorsete B-rakkude arvu vähenemisest [5–8]. Teisest küljest on teatatud defektidest SIgAD juhtude mõnedes T-rakkude alamhulkades, mis on seotud ebapiisava IgA-d tootvate B-rakkudega [5, 8, 9]. Voolutsütomeetriline immunofenotüüpimine võib mängida olulist rolli SIgAD-ga patsientide diagnoosimisel, prognoosimisel, klassifitseerimisel ja ravil. Seetõttu püüdsime esimest korda uurida B- ja T-lümfotsüütide peamisi alampopulatsioone koos T-rakkude funktsiooni hindamisega, et selgitada immunoloogiliste omaduste ja kliiniliste ilmingute vahelist seost SIgAD-ga sümptomaatilistel patsientidel.

materjalid ja meetodid

Patsiendid

Käesolevasse uuringusse kaasati kokku 30 saadaolevat sümptomaatilist SIgAD-ga patsienti (Iraani IEI registrist [10, 11]) ja 30 vanuse-sooga sobivat tervet kontrolli (HC). Pärast kliinilisi ja laboratoorseid hinnanguid kinnitati, et HC-del ei olnud immuunpuudulikkust ega ühtegi põhihaigust. Patsiendid suunati lastemeditsiini keskusesse (Pediatrics Excellence Center, mis on seotud Teherani meditsiiniteaduste ülikooliga, Teheran, Iraan). Euroopa immuunpuudulikkuse ühingu andmetel diagnoositi kõigil patsientidel SIgAD [12]. Uuringu kiitis heaks Teherani meditsiiniülikooli eetikakomitee ja kõigilt isikutelt saadi kirjalik teadlik nõusolek (IR.TUMS.VCR.REC.1396.2018). Patsientide demograafilised, kliinilised ilmingud ja immunoloogilised andmed dokumenteeriti küsimustiku vormis.

Patsientide klassifikatsioon

Demograafiliste, kliiniliste ja immunoloogiliste andmete võrdlemiseks jaotati patsiendid kahte rühma: rasked ja kerged (kliiniliste ilmingute alusel) ning sugulas- ja mittesugulusrühmad (vanemliku suguluse alusel). Sümptomaatiliseks peetava patsiendi minimaalsed kaasamise kriteeriumid olid Jeffrey Modell Foundationi kümme hoiatusmärki. Patsiendid jagati kahte rühma: kerged ja rasked, kuna raskete infektsioonide (nt vereringe, kesknärvisüsteemi ja sügavalt juurdunud infektsioonidega nagu osteomüeliit ja artriit), autoimmuunsuse või pahaloomuliste kasvajatega patsiendid liigitati rasketesse rühmadesse ja muud tüsistused. peeti kergeks rühmaks. Kuna kopsupõletik ja muud hingamisteede infektsioonid on SIgAD-ga patsientidel tavalised ja tahtsime seda kontrollida raskete ja kergete rühmade vahelise parameetrina, ei liigitanud me seda raskesse rühma.

Tistanche toidulisandi eelised - kuidas tugevdada immuunsüsteemi

Cistanche Enhance Immunity toodete vaatamiseks klõpsake siin

【Küsi lisa】 E-post:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Lümfotsüütide alamhulkade analüüs

Perifeerse vere mononukleaarsed rakud (PBMC-d) eraldati 8 ml vereproovidest, mis koguti naatriumhepariini tuubidesse, kasutades Ficoll-Hypaque tihedusgradienttsentrifuugimist 600 g juures 25 minutit 22 kraadi juures. Ekstratsellulaarseks värvimiseks jagati PBMC-d 5-paneelifraktsioonideks ja värviti 20 minutit 2–8 kraadi juures pimedas kohas, kusjuures iga kokteil sisaldas optimaalses kontsentratsioonis monoklonaalseid antikehi. B1 paneeli kasutati naiivse (CD19+CD27−IgM+IgD+), ainult IgM-mälu (CD19+CD27+ IgM++IgD−), lülitatud mälu määramiseks. mälu (CD19+CD27+IgM−IgD−) ja marginaalsed tsoonitaolised B-rakud (CD19+CD27+IgM++IgD+). B2 paneeli kasutati CD21 madalate B-rakkude (CD19+CD21−/low CD38−/lowIgM+++), plasmablastide (CD19+CD21−/lowCD38++/{ {34}}IgM−) ja üleminekuperioodi B-rakud (CD19+CD21+CD38++IgM+). T1 paneeli kasutati naiivsete (CD4+ või CD8+ ja CD45RA+CCR7+), efektormälude (CD4+ või CD8+ ja CD45RA−CCR7−), keskmälu (CD4+ või CD8+ja CD45RA−CCR7+) ja TEMRA (terminaalselt diferentseeritud efektormälu) T-rakud (CD4+ või CD8+ ja CD45RA+CCR7−). T2 paneeli kasutati regulatiivsete T-rakkude (TregsCD4+CD25+FOXP3+CD127−/low) klassifitseerimiseks. Intratsellulaarseks värvimiseks, pärast pinnamolekulide värvimist, fikseeriti ja permeabiliseeriti need kogu FOXP3/permeabiliseerimispuhvris (eBioscience, USA) vastavalt tootja juhistele järgmiste kohta: Anti-Human FOXP3 (PE), Anti-Human IL{67} } (PE), Anti-Human IL-4 (APC) ja Anti-Human IFN- (FITC). Kõik antikehad ja isotüübikontrollid osteti USA ettevõttelt eBioscience. T-abistajarakkude (sealhulgas T1, T2 ja T17) hindamiseks kultiveeriti Roswell Park Memorial Institute (RPMI 1640) rakukultuurisöötmes 1 × 106 (rakk/ml) PBMC-sid, millele järgnes stimuleerimine forboolmüristaatatsetaadiga (PMA). , 50 ng/mL, Sigma-Aldrich, USA) / ionomütsiini (1 ug/ml, Sigma-Aldrich) ja brefeldiini (5 ug/ml, eBioscience) juuresolekul. Seejärel inkubeeriti rakke 37 kraadi juures 5% CO2 ja 95% niiskusega inkubaatoris 5 tundi. Stimuleeritud rakke pesti fosfaatpuhverdatud soolalahusega (PBS) ja pind värviti inimese vastase CD4 (PerCp)-Cy5.5-ga. Lisati rakusisesed tsütokiini värvivad antikehad (anti-IFN-FITC, anti-IL-17 PE ja anti-IL-4 APC T-alarühmade hindamiseks ja anti-FoxP3 PE Treg-i hindamiseks) ja inkubeeriti. toatemperatuuril 30 min. Rakud pesti permeabiliseerimispuhvriga ja resuspendeeriti külmas värvimispuhvris ning loendused määrati BD FACSCalibur Flow Cytometer (BD Biosciences) abil (lisafail 1: tabel S1). Väramisstrateegia on sarnane meie eelmise uuringuga [13, 14].

T-rakkude proliferatsiooni test

T-rakkude proliferatsiooni hindamiseks kultiveeriti PBMC-sid fluorestseeruva 5,6-karboksüfluorestseiini suktsiinimidüülestriga (CFSE, Biolegend, USA). CFSE põhilahus valmistati, lahustades CFSE dimetüülsulfoksiidis (DMSO) kontsentratsioonis 5 mM/L, lähtudes tootja juhistest. See varu külmutati väikeste alikvootidena, et vältida liigseid külmumis- ja sulatamistsükliid. CFSE lisati põiktorusse, mis sisaldas 500 µl PBMC suspensiooni (5 × 106 rakku/ml) RPMI 1640 rakukultuurisöötmes, mis sisaldas 10% FBS-i (veise loote seerum, Biosera, Prantsusmaa) lõppkontsentratsiooniga 5 µM ja 2 mM. L-glutamiin, 100 U/mL penitsilliini ja 100 ug/ml streptomütsiini (Lymphosep; Biosera, Prantsusmaa). Toru pöördus kiiresti ja segati, et tagada homogeenne hajumine. Pärast märgistamist inkubeeriti rakususpensiooni 5 minutit 37 kraadi juures. Seejärel lisati rakususpensioonile 9 ml RPMI1640, mis sisaldas 10% FBS-i, ja seda tsentrifuugiti 500 g juures 5 minutit. Rakke pesti kolm korda ja lisati 1 ml RPMI1640 10% FBS-iga. Seoses spetsiifilise T-rakkude stimuleerimise ja proliferatsiooniga lisati 500 µl steriilsele PBS-ile anti-CD3 antikeha (1 µg/ml) ja plaati inkubeeriti 37 ˚C juures 2 tundi. Kaetud plaati pesti kaks korda steriilse PBS-ga ja märgistatud rakud lisati otse ning lõpuks lisati T-rakkude stimulaatorina anti-CD28 antikeha (2 ug/ml). Plaati inkubeeriti temperatuuril 37 ºC 5% CO2 ja 95% niiskusesisaldusega inkubaatoris 96 tundi [15–17]. Stimuleerimata süvendit peeti mitteproliferatiivsete rakkude kontrolliks. 96 tunni pärast rakud koguti ja pesti. Pärast värvimist Anti Human CD4-ga (PerCPCy5.5) analüüsiti rakke lõpuks BD FACSCalibur™ Flow tsütomeetri ja CellQuest Pro tarkvaraga (BD, Biosciences, San Jose, CA, USA). Proliferatsioonianalüüs viidi läbi kolme kriteeriumi võrdlemisel, sealhulgas jagatud rakkude protsent (jagunenud %), keskmine raku jagunemiste arv (jagunemisindeks) ja keskmine rakkude jagunemiste arv kogu primaarses rakupopulatsioonis. (Proliferation Index) tarkvara FlowJo 7.6 poolt.

Statistiline analüüs

Statistilise analüüsi jaoks kasutati SPSS-tarkvara (Windowsi versioon 16.0; SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Andmete normaalse jaotuse hindamiseks kasutasime Kolmogorovi – Smirnovi testi. Tulemused esitati mediaanväärtustena (kvartiilidevaheline vahemik [IQR], vahemikuna 25.–75. protsentiiliga). Võrdlusteks kasutati hii-ruudu testi või Fisheri täpset testi. Rohkem kui kahe rühma võrdlemiseks, kui andmete jaotus oli normaalne, kasutati ANOVA-d ja kui andmete jaotus oli ebanormaalne, kasutati Kruskal Wallise testi. Te erinevusi peeti statistiliselt olulisteks P-väärtuste puhul, mis olid<0.05.

Tistanche kasulikud omadused meestele - tugevdavad immuunsüsteemi

Tulemused

Demograafilised, immunoloogilised ja kliinilised leiud

Kõigist registreeritud Iraani SIgAD patsientidest võeti käesolevasse uuringusse 30 olemasolevat patsienti (23 meest ja seitse naist). Patsientide keskmine vanus (IQR) oli uuringu ajal 11 (7,3–16) aastat. Vanemlik sugulus esines 16 (53,3%) patsiendil. Pneumoonia (42,3%) oli uuritud patsientidel kõige sagedasem kliiniline ilming ja pahaloomulisi kasvajaid selles kohordis ei diagnoositud. Patsientide demograafilised, kliinilised ja immunoloogilised omadused on kokku võetud tabelis 1. Pärast patsientide kategoriseerimist raskete ja kergete fenotüüpide alusel võrreldi demograafilisi, kliinilisi ja immunoloogilisi andmeid (tabel 1, joonis 1). Raskete fenotüüpidega patsientidel ilmnes rohkem hingamisteede tüsistusi kui kergel rühmal. Muud parameetrid ei ole näidanud olulist erinevust. Samad võrdlused viidi läbi suguluses ja ilma suguluseta patsientidega ning ühelgi neist ei olnud olulist erinevust. Seevastu kerge fenotüübiga patsientidel esines veidi suurem allergia ja seedetrakti ilmingute määr koos suurenenud seerumi IgE tasemega, mis viitab suurenenud üleminekule IgE tootmisele.

Tabel 1 Raske ja kerge fenotüübiga SIgAD patsientide demograafiliste, kliiniliste ja immunoloogiliste andmete võrdlus

Joonis 1 Raske ja kerge SIgAD kliiniliste ilmingute võrdlus

B-rakkude alamhulgad

SIgAD-ga patsientidel esines oluliselt suurenenud CD{{0}} B-rakkude esinemissagedus [11,2% (9,4–13.07%) vs. 7,2% (6–8,6%), p < 0,001], naiivsete B-rakkude arvu suurenemisega [71% (63,7–80%) vs. 66,5% (56,2–71,1%), p=0.036] ja üleminekuperioodi B-rakkudega [ 8% (3,6–13,5%) vs 4,8% (2,6–9,5%), p=0,032] võrreldes HC-dega. Seevastu marginaalse tsoonitaoliste [2,3% (2–3,5%) vs. 3,4% (2,3–4,8%), p=0,022) ja vahetatud mälu B-rakkude protsent [3,5% (1,9) –5,5%) vs 6% (3,5–8,4%), p=0,006] olid oluliselt madalamad kui HC-d. Kuid ainult IgM-i sisaldava mälu ja plasmablastide vähenemine ning CD21 madalate B-rakkude arvu suurenemine patsientidel kui HC-de puhul ei olnud olulised (joonis 2). Huvitaval kombel olid mõned võrdlused patsientide kliiniliste rühmade vahel olulised. CD19+ B-rakkude protsent nii kerge kui ka raske fenotüübi korral oli oluliselt kõrgem kui HC-de puhul [11,6% (8,7–13) vs. 7,2% (6–8,6), p < 0,0001, 10,8% (9,6–13,2). ) vs vastavalt 7,2% (6–8,6), p < 0,0001]. Raske SIgAD-ga patsientidel suurenes CD21 madalate B-rakkude protsent oluliselt [1,5% (1–2,2) vs. 2,7% (1,6–5,6), p=0,025] ja protsent vähenes oluliselt nii marginaalse tsooni kui ka kommuteeritud mälu B-rakkude alamhulkadest [3,4% (2,3–4,8) vs. 2,2% [2, 3], p=0,040, 6% (3,5–8,4) vs. 2,7% ( 1,7–4,7), p=0,003]. Kerge SIgAD-ga patsientidel oli üleminekuperioodi B-rakkude protsent kõrgem kui HC-del [10,7% (3,9–13,8) vs. 4,8% (2,6–9,5), p=0,047] (joonis 3). Ainult IgM-i sisaldava mälu protsent oli sugulassugulusega patsientidel oluliselt kõrgem kui nendel, kellel polnud sugulust. Samuti liigitasime SIgAD-i patsientide B-rakkude alamhulkade sageduse kolme kategooriasse: normaalne, vähenenud ja suurenenud HC-de normaalse vahemiku alusel (tabel 2). Selle analüüsi põhjal on B-rakkude alamhulkade arv kõige enam seotud ümberlülitatud mälu B-rakkudega (23%), samas kui SIgAD-ga patsientidel on kõige suurem suurenemine seotud naiivsete B-rakkudega (27%). Välja arvatud suurenenud CD21 madalate B-rakkude arv rasketel SIgAD patsientidel võrreldes kerge SIgAD patsientidega.

Joonis 2 B-rakkude ja T-rakkude alamhulga protsentide kvantitatiivne analüüs SIgAD-ga patsientidel ja tervetel kontrollidel. Mediaan on kujutatud horisontaalse joonega. Andmeid analüüsiti Mann-Whitney U testi abil. *lk<0.05, statistical significance between patients and HCs. HC Healthy control

T-rakkude alamhulgad

CD4+ T-rakkude alamhulga eraldamine näitas olulist CD4+ T-rakkude koguarvu vähenemist [36,5% (30,8–41,2%) vs. 40,1% (37,3–47,2%), p{{14 }}.038)], keskmälurakud [11% (7,3–13,1%) vs. 24,5% (16–29%), p<0.0001), T1 [7.7% (5.2–9.9%) vs. 12% (7.8–16%), p=0.002], T2 [0.3% (0.2–0.4%) vs. 0.6% (0.4–1.3%), p<0.0001] and Tregs [0.3% (0.03–0.7%) vs. 1.4% (1.1– 1.6%), p<0.0001] in patients compared with HCs. Oppositely, the percentage of TEMRA [9.5% (5.7–16.4%) vs. 2% (1.3–6.2%), p<0.0001] was meaningfully higher than HCs. Moreover, decreased effector memory and T17, and increased naïve helper T cells in patients in comparison with HCs were not significant (Fig.  2). Regarding the percentage of CD8+ T cell subsets, central memory [0.6% (0.3–0.8%) vs. 3% (2–6%), p<0.0001] and effector memory [12.3% (7.6–22.1%) vs. 23.9% (19.5– 27.2%), p<0.0001] were markedly diminished in patients compared with HCs. On the other hand, the percentage of cytotoxic TEMRA [44.1% (28.4–55.7%) vs. 24.4% (20– 31%), p<0.0001] was significantly higher than HCs. However, increased total CD8+ T cells and decreased naïve CD8+ T cells were not significant in patients compared to those in HCs (Fig. 2). Regarding the comparison of the percentage of CD8+ T cells subsets between severe SIgAD patients with HCs, naïve T cells, effector, and central memory cells demonstrated a significant reduction. Also, there was a significant decrease in the percentage of total CD4+ T-cells, central memory, T1, T2, and regulatory T cells, whereas TEMRA in both CD4+ and CD8+ T cells demonstrated an increase. On the other hand, the percentage of effector and central memory cells within CD8+ T cells, as well as central memory, TEMRA, T1, and regulatory T cells within CD4+ T cell subsets demonstrated a significant decrease in mild forms of SIgAD compared to HCs. In contrast, we found an increase in TEMRA CD8+ T cells and T2 CD4+ T cells in mild patients compared to controls (Fig.  3). Comparisons of the percentages of all T cell subsets between SIgAD patients with and without consanguinity have not indicated any significant difference. We also categorized the frequency of T cell subsets of SIgAD patients into three categories: normal, decreased, and increased based on a normal range of HCs (Table  2). Based on this analysis, the most decrease in T cell subsets is related to Tregs (67%), while the most increase is related to CD8+ TEMRA (37%) in SIgAD patients. Flow cytometry results of B cell and T cell subsets in 30 SIgAD patients have shown separately in Additional file 1: Tables S2 and S3. To evaluate the impact of the T cell subset on the switching process of B cells and the production of different Ig subtypes we performed a correlation analysis. Surprisingly only IgG but not IgM and IgE were significantly associated with specific T cell subsets (negative association with naïve CD4 and naïve CD8 T cells and positive association with CD4+ TEM and T17 cells, Additional file 1: Table S4) indicating the independent association of IgM to IgE from co-stimulation of T cell subsets in our patient cohorts. Moreover, correlation analysis of absolute counts and percentage of subsets should significant direct correlation in all measured parameters (Additional file 1: Table S5).

Joonis fig 3 B-rakkude ja T-rakkude alamhulga protsentide kvantitatiivne analüüs raske ja kerge SIgAD-ga patsientidel. Mediaan on kujutatud horisontaalse joonega. Andmeid analüüsiti Mann-Whitney U testi abil. *lk<0.05, statistical signifcance between severe and mild patien

Tabel 2 T-rakkude ja B-rakkude alamrühmade normaalsete, suurenenud ja vähenenud proportsioonide jaotus kõigil SIgAD-ga patsientidel. N=30

T-rakkude proliferatsioon

CD4+ T-rakkude proliferatsiooni kvantifitseerimiseks analüüsiti CFSE-märgistatud kultuuride poolt genereeritud andmeid. Jaotusindeksis (DI), proliferatsiooniindeksis (PI) ja jagunemisprotsendis (PD) SIgAD-ga patsientide ja HC-de vahel olulist erinevust ei esinenud (joonis 4). Huvitav on see, et kui me võrdlesime neid indekseid raske ja kerge fenotüübiga SIgAD-ga patsientide vahel, siis leidsime, et raskete SIgAD-patsientide keskmine DI ja PD võrreldes kergete juhtudega olid oluliselt tühistatud [0.1 (0). .08–0,4) vs. 0,5 (0,3–0,8), p=0,019 ja 12,2 (8,4–) 26,4) vs. 42,5 (26,8–52,6), vastavalt p=0,009]. Siiski ei olnud tõsiste ja kergete rühmade vahel PI-s olulist erinevust (joonis 4). Teisest küljest ei olnud DI, PI ja PD võrdlus SIgAD-ga patsientide vahel, kellel oli ja ilma suguluseta, oluline.

Joonis fig 4 T-lümfotsüütide proliferatsiooniindeksite võrdlus raske ja kerge SIgAD-ga patsientidel. Mediaan on kujutatud horisontaalse joonega. *lk<0.05, statistical significance between severe and mild patients

Arutelu

SIgAD on kõige levinum erinevate kliiniliste ilmingutega IEI. Nendel patsientidel on erinev kliiniliste ilmingute spekter. Seetõttu on kasulikud immunoloogilised uuringud erinevate kliiniliste ilmingute spektriga patsientidel. IEI-de, eriti SIgAD-i kõige levinum kliiniline ilming on korduvad hingamisteede infektsioonid [18–20]. Leidsime, et meie registreeritud sümptomaatiliste patsientide seas on kõige sagedasem tüsistus kopsupõletik. Korduvad hingamisteede infektsioonid avalduvad tavaliselt ülemiste hingamisteede infektsioonidena ja võivad jääda diagnoosimata mitu aastat; mõnedel SIgAD-ga patsientidel ilmnevad siiski raskemad fenotüübid, nagu bronhektaasia või oblitereeriv bronhioliit, mis sunnib nendel patsientidel immunoloogilist uurimist [21]. Arvestades, et korduvad hingamisteede infektsioonid on teatatud IEI-dega laste haigestumuse ja surma kõige olulisema põhjusena, eriti primaarsete antikehade puudulikkusega [22, 23], on SIgAD-ga seotud hingamisteede häirete varajane diagnoosimine ja ravi väga oluline [24, 25]. . On näidatud, et mõnedel SIgAD-ga patsientidel täheldatakse kõrvalekaldeid B-rakkude alamrühmades [3, 4]. Meie tulemused näitasid naiivsete ja üleminekuperioodide B-rakkude arvu olulist suurenemist ning marginaalsete tsoonitaoliste ja lülitatud mälu B-rakkude tugevat vähenemist. See ebanormaalne B-rakkude muster viitab defektidele B-rakkude diferentseerumise lõppfaasis, sarnaselt CVID-i patsientidele [26]. Arvestades, et CVID-il ja SIgAD-il on peaaegu sarnane geneetiline taust ja need võivad perekonnas akumuleeruda mitme juhtumina, on see sarnasus etteaimatav. Üldiselt on enam kui pooltel Iraani registris registreeritud IEI patsientidest vanemlik sugulus, kuid see määr on SIgAD-ga patsientidel siiski vähem levinud. Iraani SIgAD-i patsientidel on lääne patsientidega võrreldes levinum sugulus. Kuigi monogeneetilised põhjused võivad esineda, ei ole seda veel tuvastatud, hoolimata järgmise põlvkonna järjestamisest mitmel patsiendil [27]. Nagu varem teatatud, tuvastasime marginaalsete tsoonitaoliste ja ümberlülitatud mälu B-rakkude vähenemise, eriti rasketel SIgAD-ga patsientidel [28]. Hiljuti teatasime CVID-i patsientidel marginaalsete tsoonitaoliste ja ümberlülitatud mälu B-rakkude sarnasest vähenemisest [14].

cistanche toidulisandi eelised - suurendavad immuunsust

Teisest küljest, kuigi täheldasime ataksia telangiektaasia (AT) patsientidel mälu olulist vähenemist, täheldati marginaalsete tsoonitaoliste B-rakkude järsku suurenemist [29]. SIgAD-ga patsientidel, eriti raskete kliiniliste ilmingutega (korduv ja intensiivne infektsioon ja autoimmuunsus) patsientide rühmal, on madalam mälu B-rakud [28, 30, 31]. On oletatud, et ümberlülitatud mälu B-rakkude alampopulatsiooni vähenemine on tingitud ensümaatilisest puudulikkusest põhjustatud defektidest antikehade klassivahetuse rekombinatsiooni (CSR) tasemes või tsütokiinivõrkude ja nende retseptorite kõrvalekalletest [28]. Mõned raske fenotüübiga SIgAD-ga patsiendid arenevad CVID-iks, mis peegeldab seda SIgAD-i alarühma, võib jagada CVID-iga ühist immuunpatogeneesi, eriti CSR-i etapi väljatöötamisel. Seetõttu peetakse ümberlülitatud mälu B-rakke patsientide diagnostiliseks biomarkeriks [28]. Siiski on ümberlülitatud mälu B-rakkude sagedus meie uuringupopulatsiooni laste seas normaalne ja vähenemist täheldati rohkem täiskasvanud patsientidel; mis viitab sellele, et vananemine põhjustab tõenäoliselt SIgAD-i progresseerumist CVID-iks, eriti raskete kliiniliste ilmingutega patsientidel (andmeid pole näidatud). Teisest küljest on marginaalse tsooni B-rakud spetsialiseerunud B-rakkude populatsioon, mis toodavad IgM-i, et kaitsta infektsioonide, eriti kapseldatud bakterite eest [32]. Kuigi varasemad uuringud on näidanud, et marginaalsete tsoonitaoliste B-rakkude arv SIgAD-ga patsientidel ei erinenud võrreldes tavaliste kontrollidega [33], saavutasime sellegipoolest meie juhtudel marginaalsete tsoonitaoliste B-rakkude arvu olulise vähenemise, sarnaselt eelmine aruanne CVID-i patsientide kohta [34]. Marginaalsete B-rakkude alamhulkade vähendamine teistel antikehade tootmise defektidega patsientidel võib sarnaselt CVID-patsientidega olla seotud suurenenud infektsiooniriskiga, nagu kopsupõletik ja seerumi IgM taseme langus [35]. Leidsime, et CD21low B-rakud on suurenenud võrreldes kontrolliga, peamiselt rasketel SIgAD patsientidel. Varasemad uuringud on teatanud CD21madala B-rakkude arvu suurenemisest nii SIgAD-ga [3] kui ka CVID-ga patsientidel [36] ja muudel autoimmuunhaigustel [37]. Hiljuti on teatatud ka madala CD21 taseme tõusust AT patsientidel [29]. CD21 madalate rakkude arvu suurenemine on otseselt seotud mitte ainult autoimmuunsuse, vaid ka infektsiooniga [36]. Teisest küljest võib krooniline kokkupuude viirusinfektsiooniga viia antigeeniga reaktiivsete B-rakkude muutumiseni mittereageerivateks CD21low B-rakkudeks [38]. Paisutatud CD21madala B-rakkude põhjuse selgitamiseks; selle B-rakkude alampopulatsiooni kohta on vaja teha täiendavaid uuringuid. Arvestades CD21low B-rakkude suurt alampopulatsiooni CVID-i patsientidel ja mõnede SIgAD-ga patsientide progresseerumist CVID-iks, areneb CVID-i tõenäolisemalt rasketel SIgAD-patsientide rühmal, kellel on suurenenud CD21low B-rakud. Seetõttu vajavad nad haiguse kulgu hindamiseks regulaarsemat jälgimist. Üleminekulised B-rakud on luuüdi ebaküpsete rakkude ja põrna küpsete B-rakkude vahel arengu vahepealses staadiumis [39]. Käesolevas uuringus täheldasime oma SIgAD-ga patsientidel märkimisväärselt suurenenud üleminekuperioodi B-rakke, eriti rasketel SIgAD-ga patsientidel, kuigi SIgAD-ga lastel oli üleminekuperioodi B-rakkude arv normaalne (andmeid pole näidatud). Hiljuti täheldasime üleminekuperioodi B-rakkude AT olulist vähenemist [29]. Erinevalt varasematest uuringutest, mis näitasid üleminekuperioodi B-rakkude vähenemist [8, 28, 40], näitasid täiskasvanud patsiendid üleminekuperioodi B-rakkude veidi suurenemist. Veelgi enam, Lemarquis et al. näitas üleminekuperioodi B-rakkude funktsionaalse aktiivsuse vähenemist IL-10 tootmise ja CpG stimulatsiooni põhjal [40]. Arvestades SIgAD-i B-rakkude terminaalsete etappide defekti, näib, et meie patsientide üleminekuperioodi B-rakkude ja naiivsete B-rakkude arvu suurenemine on tingitud kompensatsioonimehhanismist, mis suurendab B-rakkude varajast arengut. Mis puudutab meie ja teiste uuringu erinevaid tulemusi, siis näib, et see erinevus tuleneb erinevatest valikuprotsessidest, kuna kõik meie patsiendid olid sümptomaatilised, samas kui teised uurisid heterogeenselt asümptomaatilisi ja sümptomaatilisi SIgAD patsiente. Seoses T-rakkude alamhulkadega täheldasime CD4+ T-rakkude, T1-, T2- ja Treg-rakkude koguarvu vähenemist ning TEMRA suurenemist nii CD4+ kui ka CD8+ rakkudes. Kooskõlas meie tulemustega on varasemad uuringud näidanud CD8+ ja CD4+ T-lümfotsüütide populatsiooni suurenemist ja vähenemist [4]. Samuti leidsime, et nii CD4+ kui ka CD8+ T-rakkude keskmälu ja CD8+ T-lümfotsüütide efektormälu vähenesid SIgAD-ga patsientidel võrreldes HC-dega. Me täheldasime TEMRA rakkude alamhulga olulist suurenemist nii CD4+ kui ka CD8+ lümfotsüütide populatsioonis, eriti rasketel SIgAD patsientidel. TEMRA on kolmas T-rakkude mälu alamhulk perifeersetes põletikulistes kudedes, mis ekspresseerivad CD45RA-d, kuid millel puudub CCR7 või CD27 ekspressioon. Inimestel mõjutavad TEMRA rakkude akumulatsiooni kroonilised infektsioonid, nagu CMV [41, 42]. Nende lõpetatud T-rakkude alamhulkade arvu suurenemine võib olla tingitud kroonilisest rakulisest vastusest infektsioonidele nendel patsientidel; selle nähtuse kohta tuleb siiski teha täiendavaid uuringuid. Kooskõlas meie tulemustega, Nechvatalova et al. näitas SIgAD-ga patsientidel CD{60}} ja CD8+ TEMRA rakkude laienemist, mis olid seotud CMV infektsiooniga [43]. Me ei uurinud CMV-nakkust SIgAD-ga patsientidel, kuid TEMRA rakkude alamhulga arvu suurenemine meie patsientidel võib olla seotud krooniliste infektsioonidega. Hiljuti hindasime spetsiifilisi antikehavastuseid PPSV-23 suhtes SIgAD ja AT-ga patsientidel ning näitasime, et 18,6% SIgAD-ga patsientidest ja 81,3% AT-ga patsientidest oli ebapiisav vastus. Plasmablastide, marginaalse tsooni B-rakkude, üleminekuperioodi B-rakkude, naiivsete CD8+ T-rakkude ja CD8+ T-rakkude, IgM-mälu-B-rakkude ja ümberlülitatud mälu-B-rakkude protsent SIgAD-ga patsientidel oli oluliselt madalam mittereageerijate rühmas kui reageerijate rühmas. Kuigi spetsiifiliste antikehade defitsiit esineb AT-patsientidel sagedamini kui SIgAD-ga patsientidel [44]. Reguleerivad T-rakud mängivad olulist rolli IgA antikehade tootmisel, muutes kasvufaktor-beeta (TGF-) sekretsiooni [45–47]. Leidsime, et meie patsientidel vähenes oluliselt Treg, mis on kooskõlas varasemate avaldatud uuringutega [48], kuigi ühes uuringus teatati Tregide suurenemisest SIgAD patsientidel [43]. Samuti on teatatud korrelatsioonist vähenenud Treg-rakkude ja SIgAD-haiguse raskusastme vahel, eriti autoimmuunsusega inimestel, ja IgA CSR-i puudulikkuse vahel raskete kliiniliste ilmingutega patsientidel [30, 48]. Treg-rakkude ja teiste T-rakkude alamhulkade, sealhulgas T1 ja T2, madal sagedus meie patsientidel võib olla tingitud vähesest tüümuse emigrantidest, mis on põhjustatud defektsest tümopoeesist ja/või nende rakkude suurenenud apoptoosist [49]. T-rakkude funktsionaalne test mitogeense või antigeense stimulatsiooni abil on oluline tunnus erinevate immuunhäirete ja immuunpuudulikkuse diagnoosimisel [50]. Traditsiooniliselt on T-rakkude funktsiooni hindamiseks üks protokoll, mis põhineb [3H]-tümidiini omastamisel pärast PHA-stimulatsiooni radioaktiivsete komponentidega, mis vajab spetsiifilisi laboratoorseid tingimusi ning samuti ei ole see T-raku-spetsiifiline, kuna võib stimuleerida mitmeid teisi immuunrakke. hästi. Teisest küljest on kõige olulisem nõrkus see, et konkreetsete raku alamhulkade kohta teavet ei saadud. CFSE proliferatsioonitest on praktiline valik T-rakkude reaktsioonide hindamiseks antigeenile või mitogeenile IEI patsientidel, eriti SIgAD, et suunata nende patsientide edasisi võimalikke T-rakkude defektide analüüse [51]. Siiani on SIgAD-ga patsientidel vähe teateid T-raku vastuse defektidest. Nagu oodatud, ei näidanud meie uuring olulist erinevust T-raku vastuses patsientide ja kontrollide vahel. Kui aga liigitasime patsiendid kahte rühma raskete ja kergete fenotüüpide alusel, näitasid rasked patsiendid T-rakkude proliferatsiooni vähenemist võrreldes kergete patsientidega. See tulemus võib olla oluline leid SIgAD-ga patsientide kategoriseerimiseks, et teada saada patsiendi prognoosi. Hiljuti teatasime, et T-rakkude proliferatsioon oli CVID-i ja AT-patsientide tervete kontrollidega võrreldes märkimisväärselt halvenenud [29, 52]. Veelgi enam, see näitab, et defektse T-rakkude proliferatsiooniga SIgAD-ga patsiente tuleks täpse meditsiinilise juhtimise jaoks täiendavalt jälgida. Soovitame teha täiendavaid uuringuid, et hinnata T-rakkude funktsiooni toimet SIgAD-ga patsientidel teiste uuringute raskete ja kergete fenotüüpide põhjal. Katse piirangud hõlmasid sümptomaatiliste patsientide väikest arvu, paljude nende ja e kättesaamatust ning isegi mõne patsiendi seisundi paranemist.

Järeldused

Meie tulemused näitasid olulisi kõrvalekaldeid B-rakkude mustrites, mis sarnanesid CVID-i patsientidele. Arvestades, et CVID-il ja SIgAD rasketel vormidel on peaaegu sarnased kliinilised ja immunoloogilised fenotüübid ning tõenäoliselt geneetiline taust, on see arusaam etteaimatav. Fenotüübi analüüside põhjal täheldasime veel mõningaid kõrvalekaldeid raskete fenotüüpidega SIgAD patsientidel, nagu CD21low B-rakkude suur alampopulatsioon ja T-rakkude proliferatsioonidefekt. Sellest tulenevalt ilmneb rasketel patsientidel suurem arv hingamisteede infektsioone võrreldes kerge SIgAD-ga, kusjuures paljudel patsientidel on sinusiit, kõrvapõletik, kopsupõletik ja b-bronhoektaasia, mis viitab nende patsientide edasisele jälgimisele ja täpsemale ravile. Käesoleva uuringu isad viitavad sellele, et B- ja T-rakkude alamhulkade uurimine võib olla abiks haiguse patogeneesi ja prognoosi paremaks mõistmiseks.

Viited

1. Aghamohammadi A, Mohammadi J, Parvaneh N, Rezaei N, Moin M, Espanol T jt. Selektiivse IgA puudulikkuse progresseerumine tavaliseks muutuvaks immuunpuudulikkuseks. Int Arch Allergy Immunol. 2008;147(2):87–92.

2. Bagheri Y, Sanaei R, Yazdani R, Shekarabi M, Falak R, Mohammadi J jt. Selektiivse immunoglobuliini puudulikkuse heterogeenne patogenees. Int Arch Allergy Immunol. 2019;179(3):232–46.

3. Nechvatalova J, Pikulova Z, Stikarovska D, Pesak S, Vlkova M, Litzman J. B-lümfotsüütide subpopulatsioonid selektiivse IgA puudulikkusega patsientidel. J Clin Immunol. 2012;32(3):441–8.

4. Litzman J, Vlková M, Pikulová Z, Štikarovská D, Lokaj J. T- ja B-lümfotsüütide alampopulatsioonid ja aktivatsiooni/diferentseerumise markerid selektiivse IgA puudulikkusega patsientidel. Clin Exp Immunol. 2007;147(2):249–54.

5. Lemarquis AL, Einarsdottir HK, Kristjansdottir RN, Jonsdottir I, Ludviksson BR. Üleminekulised B-rakud ja TLR9 vastused on selektiivse IgA puudulikkuse korral puudulikud. Front Immunol. 2018; 9:909.

6. Celiksoy M, Yildiran A. B-rakkude alamrühmade võrdlus primaarsete immuunpuudulikkuste korral edeneb antikehade puudulikkusega sobitatud tervete lastega. Allergool Immunopatool. 2016;44(4):331–40.

7. Marasco E, Farroni C, Cascioli S, Marcellini V, Scarsella M, Giorda E jt. B-rakkude aktiveerimine CD40L või CpG abil mõõdab B-rakkude alamrühmade funktsiooni ja tuvastab immuunpuudulikkusega patsientide spetsiifilised defektid. Eur J Immunol. 2017;47(1):131–43.

8. Lemarquis AL, Theodors F, Einarsdottir HK, Ludviksson BR. SIgAD-ga seotud signaaliradade kaardistamine paljastab IL-21- juhitud STAT3 B-rakkude aktiveerimise halvenemise. Front Immunol. 2019;10:403.

9. Borte S, Pan-Hammarstrom Q, Liu C, Sack U, Borte M, Wagner U jt. Interleukiin-21 taastab immunoglobuliinide tootmise ex vivo patsientidel, kellel on tavaline muutuv immuunpuudulikkus ja selektiivne IgA puudulikkus. Veri. 2009;114(19):4089–98.

10. Abolhassani H, Kiaee F, Tavakol M, Chavoshzadeh Z, Mahdaviani SA, Momen T jt. Neljas värskendus Iraani riikliku esmaste immuunpuudulikkuste registri kohta: molekulaardiagnostika integreerimine. J Clin Immunol. 2018;38(7):816–32.

11. Aghamohammadi A, Rezaei N, Yazdani R, Delavari S, Kutukculer N, Topyildiz E jt. Lähis-Ida ja Põhja-Aafrika konsensuse register immuunsuse kaasasündinud vigade kohta. J Clin Immunol. 2021;41(6):1339–51.

12. Seidel MG, Kindle G, Gathmann B, Quinti I, Buckland M, van Montfrans J jt. Euroopa immuunpuudulikkuse ühingu (ESID) registri töödefinitsioonid kaasasündinud immuunsusvigade kliiniliseks diagnoosimiseks. J Allergy Clin Immunol Pract. 2019;7(6):1763–70.

13. Shad TM, Yousef B, Amirifar P, Delavari S, Rae W, Kokhaei P jt. Muutuvad kõrvalekalded T- ja B-rakkude alamhulkades ataksia telangiektaasia korral. J Clin Immunol. 2020: 1–13.

14. TofghiZavareh F, Mirshafey A, Yazdani R, Keshtkar AA, Abolhassani H, Bagheri Y jt. Lümfotsüütide alamhulgad korrelatsioonis kliinilise profiiliga CVID-i patsientidel, kellel puuduvad monogeensed defektid. Ekspert Rev Clin Immunol. 2021;17(9):1041–51.

15. Moeini Shad T, Yousef B, Amirifar P, Delavari S, Rae W, Kokhaei P jt. Muutuvad kõrvalekalded T- ja B-rakkude alamhulkades ataksia telangiektaasia korral. J Clin Immunol. 2021;41(1):76–88.

16. Azizi G, Mirshafey A, Abolhassani H, Yazdani R, Ghanavatinejad A, Noorbakhsh F jt. Tsirkuleerivate T-abistaja alamhulkade ja regulatiivsete T-rakkude tasakaalustamatus LRBA puudulikkusega patsientidel: korrelatsioon haiguse tõsidusega. J Cell Physiol. 2018; 233 (11): 8767–77.

17. Azizi G, Mirshafey A, Abolhassani H, Yazdani R, Jafarnezhad-Ansariha F, Shaghaghi M jt. Tsirkuleerivad abistaja T-rakkude alamrühmad ja regulatoorsed T-rakud tavalise muutuva immuunpuudulikkusega patsientidel, kellel puudub teadaolev monogeenne haigus. J Investig Allergol Clin Immunol. 2018;28(3):172–81.

18. Reisi M, Azizi G, Kiaee F, Masiha F, Shirzadi R, Momen T jt. Primaarse immuunpuudulikkuse häiretega patsientide kopsutüsistuste hindamine. Eur Ann Allergy Clin Immunol. 2017;49(3):122.

19. Cerutti A, Chen K, Chorny A. Immunoglobuliini vastused limaskesta liidesel. Annu Rev Immunol. 2011;29:273–93.

20. Bagheri Y, Babaha F, Falak R, Yazdani R, Azizi G, Sadri M jt. IL-10 indutseerib B-rakkudes TGF- sekretsiooni, TGF-retseptori II ülesreguleerimist ja IgA sekretsiooni. Eur Cytokine Netw. 2019;30(3):107–13.

21. Ozkan H, Atlihan F, Genel F, Targan S, Gunvar T. IgA ja/või IgG alaklassi puudulikkus korduvate hingamisteede infektsioonidega lastel ja selle seos kroonilise kopsukahjustusega. J Investig Allergol Clin Immunol. 2005;15(1):69–74.

22. Tavakol M, Jamee M, Azizi G, Sadri H, Bagheri Y, Zaki-Dizaji M jt. Diagnostiline lähenemine primaarse immuunpuudulikkuse kahtlusega patsientidele. Endocr Metab immuunhäirete ravimi sihtmärgid. 2020;20(2):157–71.

23. Resnick ES, Moshier EL, Godbold JH, Cunningham-Rundles C. Haigestumine ja suremus tavalise muutuva immuunpuudulikkuse korral 4 aastakümne jooksul. Veri. 2012;119(7):1650–7.

24. Yazdani R, Abolhassani H, Asgardoon M, Shaghaghi M, Modaresi M, Azizi G jt. Nakkuslikud ja mitteinfektsioossed kopsutüsistused primaarse immuunpuudulikkuse häiretega patsientidel. J Investig Allergol Clin Immunol. 2017;27(4):213–24.

25. Ahmadi M, Nouri M, Babaloo Z, Farzadi L, Ghasemzadeh A, Hamdi K jt. Intravenoosne immunoglobuliini (IVIG) ravi moduleerib perifeerse vere Th17 ja regulatoorseid T-rakke korduva raseduse katkemise korral: mitte-randomiseeritud avatud kliiniline uuring. Immunol Lett. 2017;192:12–9.

26. Yazdani R, Seify R, Ganjalikhani-Hakemi M, Abolhassani H, Eskandari N, Golsaz-Shirazi F jt. Erinevate klassifikatsioonide võrdlus tavalise muutuva immuunpuudulikkusega (CVID) patsientide jaoks, kasutades B-rakkude alamhulkade mõõtmist. Allergol Immunopatool (Madr). 2017;45(2):183–92.

27. Aghamohammadi A, Abolhassani H, Rezaei N. Primaarsed immuunpuudulikkuse haigused Iraanis: minevik, olevik ja tulevik. Arch Iran Med. 2021. https://doi. org/10.34172/aim.2021.18.

28. Aghamohammadi A, Abolhassani H, Biglari M, Abolmaali S, Moazzami K, Tabatabaeiyan M jt. Ümberlülitatud mälu B-rakkude analüüs IgA puudulikkusega patsientidel. Int Arch Allergy Immunol. 2011;156(4):462–8.

29. Yousef B, Amirifar P, Delavari S, Rae W, Kokhaei P, Abolhassani H jt. Muutuvad kõrvalekalded T- ja B-rakkude alamhulkades ataksia telangiektaasia korral. J Clin Immunol. 2020. https://doi.org/10.1007/s10875-020-00881-9.

30. Abolhassani H, Gharib B, Shahinpour S, Masoom SN, Havaei A, Mirminachi B jt. Autoimmuunsus selektiivse IgA puudulikkusega patsientidel. J Investig Allergol Clin Immunol. 2015;25(2):112–9.

31. Arkwright PD, Abinun M, Cant AJ. Autoimmuunsus inimese primaarsete immuunpuudulikkuse haiguste korral. Veri. 2002;99(8):2694–702.

32. Cerutti A, Cols M, Puga I. Marginaalse tsooni B rakud: kaasasündinud antikehi tootvate lümfotsüütide voorused. Nat Rev Immunol. 2013;13(2):118–32.

33. Bukowska-Straková K, Kowalczyk D, Baran J, Siedlar M, Kobylarz K, Zembala M. B-rakkude sektsioon erinevat tüüpi primaarse humoraalse immuunpuudulikkusega laste perifeerses veres. Pediatr Res. 2009;66(1):28–34.

34. Karaman SBES, Gülez N, Genel F. B-rakkude alamrühmade tähtsus klassifitseerimata hüpogammaglobulineemiaga patsientidel ja seos intravenoosse immunoglobuliini asendamise vajadusega. Iraan J Immunol. 2018;15(1):1–13.

35. Patuzzo G, Mazzi F, Vella A, Ortolani R, Barbieri A, Tinazzi E jt. B-lümfotsüütide immunofenotüübiline analüüs tavalise muutuva immuunpuudulikkusega patsientidel: CD23 tuvastamine kasuliku markerina haiguse määratluses. ISRN Immunol. 2013. https://doi.org/10. 1155/2013/512527.

36. Patuzzo G, Barbieri A, Tinazzi E, Veneri D, Argentino G, Moretta F jt. Autoimmuunsus ja infektsioon tavalise muutuva immuunpuudulikkuse (CVID) korral. Autoimmun Rev. 2016;15(9):877–82.

37. Rakhmanov M, Keller B, Gutenberger S, Foerster C, Hoenig M, Driessen G jt. Tsirkuleerivad CD21madalad B-rakud tavalise muutuva immuunpuudulikkuse korral meenutavad koe-kodusid, kaasasündinud B-rakke. Proc Natl Acad Sci. 2009;106(32):13451–6.

38. Isnardi I, Ng YS, Menard L, Meyers G, Saadoun D, ​​Srdanovic I jt. Komplemendi retseptor 2/CD21 – inimese naiivsed B-rakud sisaldavad enamasti autoreaktiivseid mittereageerivaid kloone. Veri. 2010;115(24):5026–36.

39. Sims GP, Ettinger R, Shirota Y, Yarboro CH, Illei GG, Lipsky PE. Tsirkuleerivate inimese B-rakkude identifitseerimine ja iseloomustamine. Veri. 2005;105(11):4390–8.

40. Lemarquis AL, Einarsdottir HK, Kristjansdottir RN, Jonsdottir I, Ludviksson BR. Üleminekulised B-rakud ja TLR9 vastused on selektiivse IgA puudulikkuse korral puudulikud. Front Immunol. 2018. https://doi.org/10.3389/fmmu.2018. 00909.

41. Willinger T, Freeman T, Hasegawa H, McMichael AJ, Callan MF. Molekulaarsed signatuurid eristavad inimese keskmälu efektormälu CD8 T-rakkude alamhulkadest. J Immunol. 2005;175(9):5895–903.

42. Martin MD, Badovinaci asepresident. Mälu CD8 T-raku määratlemine. Front Immunol. 2018; 9:2692.

43. Nechvatalova J, Pavlik T, Litzman J, Vlkova M. Terminally diferentseeritud mälu T-rakud on suurenenud tavalise muutuva immuunpuudulikkusega ja selektiivse IgA puudulikkusega patsientidel. Cent Eur J Immunol. 2017;42(3):244–51.

44. Khanmohammadi S, Shad TM, Delavari S, Shirmast P, Bagheri Y, Azizi G jt. Spetsiifiliste antikehade vastuste hindamine selektiivse IgA puudulikkuse ja ataksia telangiektaasiaga patsientidel. Endocr Metab immuunhäirete ravimi sihtmärgid. 2022;22(6):640–9.

45. Cazac BB, Roes J. TGF-retseptor kontrollib B-rakkude reageerimisvõimet ja IgA indutseerimist in vivo. Immuunsus. 2000;13(4):443–51.

46. ​​Van Vlasselaer P, Punnonen J, De Vries J. Transforming growth factor-beta directs IgA switching in human B cells. J Immunol. 1992;148(7):2062–7.

47. Cerutti A, Rescigno M. Intestinaalse immunoglobuliini A vastuste bioloogia. Immuunsus. 2008;28(6):740–50.

48. Soheili H, Abolhassani H, Arandi N, Khazaei HA, Shahinpour S, Hirbod Mobarakeh A jt. Looduslike regulatiivsete T-rakkude hindamine selektiivse IgA puudulikkusega isikutel: vanematest ideedest kuni uute võimalusteni. Int Arch Allergy Immunol. 2013;160(2):208–14.

49. Yazdani R, Fatholahi M, Ganjalikhani-Hakemi M, Abolhassani H, Azizi G, Hamid KM jt. Apoptoosi roll tavalises muutuvas immuunpuudulikkuses ja selektiivses immunoglobuliini A puudulikkuses. Mol Immunol. 2016;71:1–9.

50. McCusker C, Warrington R. Primaarne immuunpuudulikkus. Kõik Asth Clin Immun. 2011;7 (lisa 1):S11.

51. Marits P, Wikström AC, Popadic D, Winqvist O, Thunberg S. T- ja B-lümfotsüütide funktsiooni hindamine kliinilises praktikas, kasutades voolutsütomeetrial põhinevat proliferatsioonianalüüsi. Clin Immunol. 2014;153(2):332–42.

52. TofghiZavareh F, Mirshafey A, Yazdani R, Keshtkar AA, Abolhassani H, Mahdaviani SA jt. Lümfotsüütide alamrühmade immunofenotüübiline ja funktsionaalne analüüs tavalistel muutuva immuunpuudulikkusega patsientidel, kellel puuduvad monogeensed defektid. Scand J Immunol. 2022;96(1):e13164.