Anastatica Hierochuntica etanool- ja vesiekstraktide antioksüdantne aktiivsus, fenoolprofiil ja nefroprotektiivne potentsiaal CCl{0}}indutseeritud nefrotoksilisuse vastu rottidel

Palun võtke ühendustoscar.xiao@wecistanche.comrohkemate jaoks

Abstraktne:Kaff-e-Maryam (Anastatica hierochuntica L.) kasutatakse laialdaselt mitmesuguste terviseprobleemide raviks, eelkõige sünnituse hõlbustamiseks ja reproduktiivsüsteemiga seotud häirete leevendamiseks. Selle uuringu eesmärk oli hinnata A. hierofantilise etanooli (KEE) ja vesilahuse (KAE) ekstraheerimise mõju CCl4-indutseeritud oksüdatiivsele stressile ja nefrotoksilisusele rottidel, kasutades neerufunktsiooni ja biokeemilisi markereid.antioksüdantseisundi kui ka neerukoe histopatoloogilised uuringud.A. hierofhantic sisaldas kokku 67,49 mg GAE g-1fenoolsed ühendid(TPC), 3,51 µg g-1 kogu karotenoide (TC) ja 49,78 ja 17,45 mg QE g-1 kogu flavonoide (TF) ja kogu flflavonoole (TFL). Tulemuseks oli DPPH-RSA TE g-1 128,71 µmol ja ABTS-RSA TE g-1 141,92 µmol. A. hierophantikul oli suurepärane antioksüdantne toime, inhibeerides linoolhappe radikaale ja kelaatides oksüdatsioonimetalle. HPLC analüüs andis tulemuseks 9 ja 21fenoolhappedja 6 ja 2flavonoididKEE-s ja KAE-s, kus ülekaalus on vastavalt sinapiinhape ja süringiinhape. Intramuskulaarne süstimine vit. E plus Se ja KEE, KAE ja KEE plus KAE suukaudne manustamine 250 mg kg-1 kehakaaluga taastas märkimisväärselt seerumi kreatiniini, uurea, K, üldvalgu ja albumiini taseme. Lisaks vähendasid nad malondialdehüüdi (MOD), taastasid redutseeritud glutatiooni (GSH) ja suurendasid superoksiidi dismutaasi (SOD) taset. KEE, KAE ja KEE pluss KAE kaitsesid neere CCl4-nefrotoksilisuse eest, kuna need nõrgendasid peamiselt indutseeritud oksüdatiivset stressi. Kogu nefroprotektsioon oli KEE, KAE ja KEE pluss KAE puhul vastavalt umbes 83,27 protsenti, 97,62 protsenti ja 78,85 protsenti. Nii vit.E pluss Se kui ka A. hierofantsed ekstraktid nõrgendasid histopatoloogilisi muutusi CCl{10}}ravitud rottidel. Kokkuvõtteks võib öelda, et A. hierophantikul, eriti KAE-l, on potentsiaalne võime taastada oksüdatiivne stabiilsus ja parandada neerufunktsiooni pärast CCl4 ägedat neerukahjustust paremini kui KEE. Seetõttu võib A. hierophantic olla kasulik raviaine ravimist põhjustatud nefrotoksilisuse ravis.

Märksõnad:Kaff-e-Maryam; polüfenoolid; bioaktiivsus; sekundaarsed metaboliidid; neerumarkerid;antioksüdantsed ensüümid; neerufunktsiooni häire

Lisateabe saamiseks klõpsake siin

Sissejuhatus

Neeruhaigus on 9. peamine surmapõhjus – hinnanguliselt põeb krooniline neeruhaigus (CKD) rohkem kui 1-l seitsmest, st 15 protsendil USA täiskasvanutest ehk 37 miljonil inimesel [1]. Märkimisväärselt on 2015. aastal registreeritud kroonilise neeruhaiguse kõige levinum põhjus suhkurtõbi, millele järgneb kõrge vererõhk ja glomerulonefriit [2]. Muud kroonilise neeruhaiguse põhjused on idiopaatilised (neeru ultraheliuuringul sageli seotud väikeste neerudega) [3]. Varem kasutati CCl4 metallide rasvaärastuse, keemilise puhastuse, kanga määrimise, tulekustutivedelike ja terade fumigatsiooni jaoks [4]. See põhjustab aktiivseid vabu radikaale tekitades tõsiseid häireid maksas, kopsudes ja munandites ning veres [5]. Vastavalt Ogeturki et al. [6], kokkupuude selle lahustiga põhjustab ägedat ja kroonilist neerukahjustust. Arvatakse, et vabade radikaalide poolt indutseeritud lipiidide peroksüdatsioon on rakumembraani kahjustuste üks peamisi põhjuseid, mis põhjustab mitmesuguseid patoloogilisi seisundeid [7]. Reaktiivsete radikaalide teket on seostatud CCl4-indutseeritud nefrotoksilisusega, mis on seotud lipiidide peroksüdatsiooni ja düsfunktsionaalsete valkude akumuleerumisega, mis põhjustab neerude vigastusi [8]. Viimastel aastatel on kasvanud hämmastavad traditsioonilised ravimtaimede kasutusviisid ning arvukad uuringud on kinnitanud nende terapeutilist rolli mitmete haiguste vastu [9–12]. Kaff-e-Maryam (Anastatica hierochuntica) on kõrbe ravimtaim, mis kuulub Brassicaceae perekonda. Ta kasvab erinevates piirkondades üle maailma, eriti araabia maades (nt Saudi Araabia, Egiptus, Omaan, Liibüa, Iraak, Araabia Ühendemiraadid, Kuveit), aga ka mõnedes Aasia, Euroopa ja Aafrika riikides. Arvatakse, et A. hierophantikul on parem meditsiiniline potentsiaal ja seda kasutatakse eelistatavalt erinevate haigusseisundite korral [13]. Seda kasutatakse peamiselt sünnitusprotsessi hõlbustamiseks ning reproduktiivsüsteemiga seotud häirete ja ainevahetushäirete, peamiselt suhkurtõve raviks [14]. Seda kasutatakse valuvaigistina ja epilepsia, seedetrakti häirete, artriidi, bronhiaalastma, suuhaavandite, malaaria ja vaimse depressiooni raviks [15–17]. A. hierophantic sisaldab märkimisväärses koguses mineraale, nagu Mg, Ca, Mn, Fe, Cu ja Zn, mis on võrreldavad või suuremad kui paljude ürtide omad, mis võivad anda metallidele kelaativaid omadusi [18]. Yoshikawa jt. [19] järeldasid, et flavanoonide, nagu Anastasia A ja B, olemasolu korreleerub tugeva hepatoprotektiivse toimega, inhibeerides D-galaktosamiini poolt indutseeritud tsütotoksilisust esmaselt kultiveeritud hiire hepatotsüütides. Reaktiivsete hapnikuliikide (ROS) ja tsütokiinide, nagu kasvajanekroosifaktori ja interleukiini-1 tootmine maksas Kupfferi rakkude poolt aitab kaasa hepatotsüütide hävitamisele D-galaktosamiini hepatotoksilisuse korral [20]. A. hierofantiliste komponentide antioksüdantsed ja põletikuvastased omadused võivad aidata vähendada D-galaktosamiini poolt põhjustatud hepatotoksilisust [21]. A. hierofhantic võib endale lubada ekstrakti sõltuvalt kaitsest CCl4-hepatotoksilisuse eest [22]. Siiski, vaatamata kirjandusele, mis näitab paljulubavaid potentsiaale seoses A. hierophanticu kasutamisega, tuleb A. hierophantic etanool- (KEE) ja vesiekstraktide (KAE) nefroprotektiivset potentsiaali hoolikalt uurida. Veelgi enam, kirjanduse ülevaates tõsteti peamiselt esile A. hierophanticu hepatoprotektiivset efektiivsust, kuid nefroprotektiivset potentsiaali ei ole seni uuritud, mis motiveerib seda tööd. Seetõttu on käesoleva uuringu eesmärk jälgida muutusi antioksüdatiivsetes kaitseensüümides, tuvastada muutusi neerude mikroskoopias pärast CCl4 manustamist rottidele ja uurida A. hierofantiliste ekstraktide võimalikku kaitsvat toimet CCl4-indutseeritud neerukahjustuse vastu.

Cistanche seksuaalsuse parandamiseks

2. Materjalid ja meetodid

2.1. Proovi ettevalmistamine Kaff-e-Maryami (A. hierophantic L.) taime proov osteti Saudi Araabia Qassimi piirkonna Buraydah linna kohalikult turult. Taimse materjali autentsust kinnitas Saudi Araabia Qassimi ülikooli põllumajandus- ja veterinaarmeditsiini kolledži taimekasvatuse ja -kaitse osakond. Proove pesti puhta kraaniveega, et eemaldada lehtedelt liiv ja mustus, seejärel õhu käes kuivatatud taimne materjal (28 ± 1 ◦C juures 48 tundi) pulbristati mehaaniliselt ja hoiti läbipaistmatutes polüetüleenkottides temperatuuril 4 ± 1 ◦C. kuni kasutamiseni. 2.2. Etanooli- ja vesiekstraktide valmistamine Ligikaudu 200 g kuivatatud A. hierophaticut ekstraheeriti 3{{1{{106}}4}}0 ml 7{{150}} protsenti etanooli Soxhleti ekstraktoris etanoolekstraktsiooni (KEE) valmistamiseks. Ekstrakt kontsentreeriti rootoraurustis temperatuuril 40 °C, et aurustada järelejäänud lahusti, seejärel kuivatati N2 voolu all. Vesiekstraktsioon (KAE) viidi läbi nii, nagu on kirjeldanud Asuzu [23], väikeste muudatustega. Kakssada grammi kuivatatud taimset materjali lisati 500 ml kuumale steriilsele destilleeritud veele. Seejärel loksutati segu korralikult ja lasti seista 1 tund. Seejärel kinnitati kolvi külge püstjahuti ja kuumutati seejärel õrnalt keemiseni 10 minutit, jahutati, loksutati korralikult ja filtriti läbi Whatmani nr 1 filterpaberi. Filtraat aurustati rootoraurustiga, seejärel kuivatati N2 voolu all. Alkoholi- ja vesiekstraktid (250 mg ml-1) valmistati värskelt destilleeritud vees, et kasutada neid suukaudseks manustamiseks. 2.3. Fenooli üldsisaldus (TPC) A. hierophhanticu TPC sisaldus määrati vastavalt kohandatud meetodile, mille on koostanud Bettaieb et al. [24]. Tulemusi võrreldi joonistatud gallushappe (GA) standardkõveraga, mis tehti vahemikus 50–500 mg ml-1 (R2=0.99) ja TPC arvutati gallushappe ekvivalendi (GAE) mg-des. ) ühe grammi A. hierophaticu kohta (mg GAE g−1 ). 2.4. Kokku karotenoidid (TC), kogu flavonoidid (TF) ja kogu flavonoolid (TFL) Nagu on teatanud Al-Qabba et al. [10], 5 g A. hierophanticut ekstraheeriti korduvalt atsetooni ja petrooleetri seguga (1:1, maht/maht). Karotenoidide (TC) üldsisaldus määrati spektrofotomeetriliselt 451 nm juures. TC väljendati mg g-1 DW. A. hierophanticu TF sisaldust analüüsiti vastavalt Mohdaly et al. kirjeldatud protokollile. [25]. TF-i sisaldus arvutati mg kvertsetiini ekvivalendina (QE) 100 g-1 dw kohta. Samas kontekstis viidi läbi TFL-i sisu [26]. Neelduvus 440 nm juures registreeriti ja TFL arvutati mg kvertsetiini ekvivalendina (QE) 100 g-1 DW kohta. 2.5. Antioksüdandi võimsuse määramine DPPH radikaali püüdmise test: RSA-d testiti spektrofotomeetriliselt sõltuvalt DPPH lillavärvilise lahuse pleegitamisest vastavalt Lu et al. muudetud tehnikale. [27]. Antiradikaalne võime esitati kui µmol Troloxi ekvivalente (TE) ühe grammi A. hierophantic (µmoL TE g-1) kohta. ABTS-i radikaale püüdev aktiivsus: A. hierophanticu RSA-d ABTS-i radikaalide vastu testiti Lu et al. kohandatud meetodiga. [27]. Tulemused väljendati kui µmoL TE g-1. -karoteen-linoolhappe pleegitamise test: A. hierophanticu antioksüdantide protsenti hinnati karoteeni pleegitamise järgi võrreldes butüülitud hüdroksüanisooliga (BHA), kasutades kohandatud spektrofotomeetrilist protokolli, mille on määranud Koleva jt. [28]; tulemused esitati BHA-ga seotud protsendina. A. hierophanticu kelaativ toime raua ioonidele: A. hierophanticu kelaatimise aktiivsust mõõdeti Zhao et al. [29]. Kui positiivse kontrollina kasutati etüleendiamiintetraäädikhapet (EDTA), mõõdeti metalli kelaativa toimena ferrosiin-Fe2 pluss kompleksi moodustumise inhibeerimise protsent ja esitati mg ml-1-na. 2.6. A. hierofantsete vesi- ja etanooliekstraktide polüfenoolsete ühendite fraktsioneerimine Polüfenoolide määramine etanool- ja vesiekstraktidest viidi läbi HP1100 (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, USA) HPLC süsteemiga, mis oli varustatud automaatse proovivõtturi, kvaternaarse pumba ja dioodide massiiviga. detektor (Hewlett Packard 1050), kasutades kolonni (Altima C18 150 × 4,6 mm, 5 µm) koos 5 mm Altima C18 kaitsekolonniga (Alltech, Nettetal, Saksamaa) vastavalt Goupy et al. [30]. Kasutatud lahustisüsteem oli A (äädikhape 2,5 protsenti), B (äädikhape 8 protsenti) ja C (atsetonitriil) gradient. Lahusti kaaskiirus oli 1 ml min-1 ja eraldamine viidi läbi temperatuuril 35 °C. Süstitud maht oli 10 µL. Fenoolseid ühendeid analüüsiti välise standardse kalibreerimisega ja väljendati mg g-1 DW ekvivalentidena (pluss)-katehiinina flavan{85}}oolide ja ekvivalentse kumariinina polaarsete aromaatsete ühendite jaoks. Samast proovist viiel fenoolide ekstraktsioonil määrati varieeruvus 8 protsenti. Kõik väärtused olid kahekordsete süstide keskmised. Polüfenoolid ja nende derivaadid identifitseeriti ja kvantifitseeriti lainepikkustel 280 ja 320 nm, flavonoidid aga 360 nm juures. 2.7. Katse ülesehitus Kõik katsed kiitis heaks KSA QU (nr 15-4-2017) institutsionaalne loomaeetika komitee (IAEC), mida reguleerib loomkatsete kontrolli ja järelevalve (CPCSEA) eesmärk. riikliku bioeetika komitee (NCBE), elusolendite uurimise eetika seaduse rakendusmäärused. Käesolevas uuringus kasutati kokku 36 isast albiinorotti, kes jaotati kuueks rühmaks, millest igaühes oli 6 looma, ning raviti järgmiselt: I rühma (kontroll) süstiti intraperitoneaalselt (ip) oliiviõli (1,0 ml kg-1 kaks korda päevas). nädal) ja 0,5 ml destilleeritud vett suu kaudu/päevas 21 järjestikuse päeva jooksul. II rühmale süstiti intraperitoneaalselt värske segu, mis sisaldas võrdsetes kogustes CCl4 ja oliiviõli (annuses 1,0 ml kg-1 kaks korda nädalas) ja 0,5 ml destilleeritud vett suu kaudu/päevas vastavalt Al-Qabba et al. [10] väikeste muudatustega. III rühm (referentsrühm) sai intramuskulaarse süsti (im) 50 mg kg-1 vit. Asuka jt andmetel on E plus Se (Selepherol, Vetoquinol Co., Magny-Vernois, Prantsusmaa) kaks korda nädalas. [31] ja El-Desoky et al. [32] ja 0,5 ml destilleeritud vett suu kaudu/päevas. IV rühm toimis testina ja sai 250 mg kg-1 KEE-d suu kaudu / päevas koos CCl4 ip kaks korda nädalas. V rühm sai 250 mg kg-1 KAE suukaudselt / päevas koos CCl4 ip kaks korda nädalas. VI rühm sai 250 mg kg-1 KEE pluss KAE (1:1) suu kaudu/päevas koos CCl4-ga ip kaks korda nädalas. 24 tundi pärast viimast ravi (päev 21) tuimastati rotid seguga (alkohol:kloroform:eeter, 1:2:3). Kõigilt loomadelt koguti südame punktsioonist võetud vereproovid ja seerum eraldati tsentrifuugimisega kiirusel 4000 p/min 10 minutit ja hoiti biokeemiliseks uurimiseks temperatuuril –20 ◦C. 2.7.1. Neeru biokeemiline analüüs Seerumi kreatiniini, uurea, üldvalgu ja albumiini kontsentratsioonid määrati automaatsete spektrofotomeetriliste meetoditega (BM/Hitachi autoanalyzer-911; Boehringer Mannheim, Saksamaa) vastavalt tootja juhistele. Kaaliumisisaldus määrati leekfotomeetria abil 766 nm juures. 2.7.2. Neerude antioksüdantse aktiivsuse hindamine Pärast vereproovide võtmist surmati kõigi rühmade loomad; paremad neerud eraldati kiiresti ja loputati jääkülma soolalahusega. Seejärel kude lõigati, loputati külmas soolalahuses, kuivatati ja asetati kohe jääle. Elektrilist koehomogenisaatorit kasutades kaaluti osa koest (1,0 g) ja homogeniseeriti 9 mahuosa jääkülma 0,05 M fosfaatpuhvriga pH väärtusel 7,4. Rakujäänused eemaldati tsentrifuugimisega kiirusel 12 000 p/min (4 °C) 20 minutit, et koguda supernatandid malondialdehüüdi (MDA) kontsentratsiooni [33], superoksiiddismutaasi (SOD) aktiivsuse [34] ja vähendatud glutatiooni (GSH) sisalduse määramiseks. 35]. Valgu kontsentratsioon neeruhomogenaadis määrati Bradfordi meetodil [36]. 2.7.3. Nefroprotektsiooni protsent Nefroprotektsiooni (F) protsendid vit. E pluss Se, KEE, KAE ja KEE pluss KAE arvutati iga biokeemilise parameetri jaoks eraldi vastavalt Wakchaure et al. [37] kasutades järgmist võrrandit: F protsent=[1 − (T − N) (C − N)] × 100 (1) kus T=ravirühma keskmine väärtus, C {{ 171}} positiivse kontrollrühma keskmine väärtus ja N= negatiivse kontrollrühma keskmine väärtus. Lisaks võrreldi sellega kogu nefroprotektsiooni protsenti (TFP protsenti). E pluss Seas järgib TFP protsenti=Iga ekstrakti biokeemiliste parameetrite F protsendi summa selle biokeemiliste parameetrite F protsendi summa. E pluss Se × 100 (2) 2.7.4. Histopatoloogilised uuringud Lahkamise proovid koguti eraldi rottide rühmade vasakust neerust ja fikseeriti 10% formaliini soolalahuses 24 tundi. Kraaniveega pesemisele järgnes dehüdratsioon alkoholi (metüül-, etüül- ja absoluutne etüül) seerialahjendustega. Proovid puhastati ksüleenis ja sisestati parafiini 24 tunniks temperatuuril 56 ◦C kuumaõhuahjus. Mesilaste parafiinvahast koeplokid valmistati kelgu mikrotoomi abil 4-mikroni paksusega lõikamiseks. Koelõigud koguti alusklaasidele, deparafineeriti ja värviti hematoksüliini ja eosiiniga korrapäraseks kontrollimiseks valguse elektrimikroskoobi all [38]. 2.8. Statistiline analüüs Tulemused on näidatud kui keskmine ± standardviga (SE). Keskmiste erinevuste olulisust erinevates rühmades uuriti ühesuunalise dispersioonanalüüsi (ANOVA) abil, millele järgnes Duncani test ja keskmiste p-väärtus anti tasemel p < 0,05="" [39].="" 3.="" tulemused="" 3.1.="" a.="" hierophanticu="" fütokemikaalid="" ja="" antioksüdantide="" võime="" viidi="" läbi="" a.="" hierophantic="" fütokemikaalide="" ja="" nendega="" seotud="" antioksüdantsete="" aktiivsuste="" kvantitatiivne="" analüüs,="" kasutades="" dpph="" ja="" abts="" radikaalide="" eemaldamist,="" -karoteen-linoolhappe="" pleegitustegevust="" ja="" kelaatimise="" võimet="" (ca).="" nagu="" on="" selgelt="" näha="" tabelist="" 1,="" oli="" tpc="" sisaldus="" 67,49="" mg="" gae="" g-1.="" tc="" sisaldus="" oli="" 3,51="" µg="" g-1.="" tf="" ja="" tl="" sisaldus="" olid="" vastavalt="" 49,78="" ja="" 17,45="" mg="" qe="" g-1.="" lisaks="" kasutati="" antioksüdantide="" aktiivsuse="" progresseerumise="" mõõtmiseks="" dpph-rsa="" ja="" abts-rsa.="" tulemused="" näitasid="" dpph-rsa="" ja="" abts-rsa="" puhul="" vastavalt="" 128,71="" µmol="" te="" g-1="" ja="" 141,92="" µmol="" te="" g-1.="" lisaks="" on="" a.="" hierophanticu="" antioksüdantne="" aktiivsus="" (aoa)="" esitatud="" tabelis="" 1.="" linoolhappe="" radikaalide="" inhibeerimise="" protsent="" arvutati="" bha-ga="" võrreldes="" 45,74="" protsenti,="" kasutades="" -carotene="" bleaching="" (-cb)="" testi.="" lisaks="" näitas="" metalli="" kelaatimise="" aktiivsuse="" hindamine="" 42,="" 89="" mg="" g-1,="" mis="" näib="" olevat="" võimeline="" segama="" fe2="" pluss-ferrosiini="" kompleksi="" moodustumist,="" mis="" näitab="" selle="" võimet="" kelaatida="" oksüdatsioonimetalle.="" tabel="" 1.="" üldfenoolisisaldus,="" karotenoidide="" üldsisaldus,="" flavonoidide="" üldsisaldus,="" flflavonoolide="" üldsisaldus="" ja="" suhteline="" potentsiaalne="" antioksüdantne="" aktiivsus="" a.="" hierofhanticu="" (keskmine="" ±="" se),="" n="">

3.2. A. hierofantsete fenoolsete ühendite kvantitatiivne määramine KEE ja KAE fenoolsete ühendite kvantitatiivne analüüs HPLC analüüsiga viidi läbi ja andmed on esitatud tabelis 2. A KEE-st tuvastati üheksa eraldatud fenoolhapet ja kuus flavonoidi tuvastatavas koguses. hierofantiline. Kõige enam esines fenoolhappeid hüdroksükaneelhappeid, nagu sinapiinhape (28,704 mg 1{{50}}0 g−1), millele järgnes kohvhape (6,621 mg 1{). {63}}0 g-1 ), rosmariinhape (2,884 mg 100 g-1 ), feruulhape (1,854 mg 10{{85} } g−1 ) ja kaneelhapet (0.094 mg 100 g−1 ); ja hüdroksübensoehapped, nagu p-hüdroksübensoehape (3,440 mg 100 g-1), protokatehhhape (1,811 mg 100 g-1), vanillhape (3,326 mg 100 g-1) ja süstoolhape (1,083 mg 100 g-1) −1). Flavonoidid nagu müritsetiin (16,269 mg 100 g-1), D-katehiin (2,410 mg 100 g-1), kaempferool (0,434 mg 100 g-1), rutiin (0,539 mg 100 g-1), apigeniin{{58} }glükosiidi (0,192 mg 100 g-1) ja kvertsetiini (0,184 mg 100 g-1) tuvastati hindamatutes kogustes. Samuti määrati A. hierophanticu KAE fenoolsed ühendid ja andmed on esitatud tabelis 2. Süringiinhape registreeriti kõrgeima fenoolhappena 21 tuvastatud fenooli hulgas. Katehhool ja pürogallool olid vastavalt 2,526 ja 1,589 mg 100 g-1. Andmed näitasid, et mõningaid fenoolhappeid, nagu kohv-, katehhiin-, klorogeen-, epikatehiin-, e-vanilliin-, p-hüdroksübensoe- ja protokatehhihape, tuvastati mõõdukates kogustes 0,725, 0,256, 0,136, 0,193, 0,42404,5 ja 40 mg. vastavalt g−1. Samas kontekstis on väikestes kogustes 3,4,5-trimetoksükaneeli, 4-aminobensoehapet, bensoehapet, kaneeli, kumariini, ellag-, feruuli-, galli-, isoferuli-, -kumaar-, p-kumaar- ja salitsüülhapped kvantifitseeriti pärast nende tuvastamist. Epikatehhiin ja D-katehhiin flavonoididena kvantifitseeriti ka A. hierophanticu KAE-s.

3.3. Seerumi kreatiniini, uurea, K, üldvalgu ja albumiini tase CCl4 süstimine tõstis oluliselt seerumi kreatiniini, uurea ja k taset GII rottidel võrreldes kontrollrottidega (GI). Vastupidiselt vähenes CCl4--ravi saanud rottidel üldvalgu ja albumiini tase oluliselt (tabel 3). Vit. E pluss Se ja A. hierofantilised ekstraktid (G III, IV, V ja VI) vähendasid oluliselt kreatiniini ja uurea sisalduse muutusi, mis olid põhjustatud CCl4 süstimisest, samas kui need suurendasid albumiini ja üldvalkude sisaldust GI-s normaalsete väärtuste lähedale (tabel 3 ). Seerumi k tase tõusis märkimisväärselt CCl4--ravi saanud rottidel (GII) võrreldes GI-ga (tabel 3). Süstimine vit. E pluss ja A. hierofhantic alkohoolsete ja vesiekstraktide (G IV, V ja VI) manustamine parandasid samuti positiivselt k taset võrreldes GI-ga (tabel 3).

3.4. Neerude antioksüdantide biomarkerid Nagu on näidatud tabelis 4, vähendas CCl4 manustamine oluliselt SOD ja GSH taset ning suurendas MDA taset GII neeru homogenaadi koes. Kui aga võrrelda GI-ga, said rotid nii vit. E pluss Se ja A. hierofantsete ekstraktide (GIII, VI, V ja VI) puhul ilmnes antioksüdantsete ensüümide SOD ja GSH aktiivsuse oluline paranemine, samuti MDA taseme langus (tabel 4). A. hierofhantic alkohoolne ekstrakt (GIV) ületas A. hierofhantic vesiekstrakti (GV) ja kombineeris A. hierofhantic alkohoolseid ja vesiseid ekstrakte antioksüdantide taseme nõrgendamisel ning autooksüdatsiooniprotsessiga võitlemine andis tulemuseks madala MDA taseme võrreldes GI-ga.

3.5. Nefroprotektsiooni protsent neerufunktsioonide, nagu kreatiniin, uurea, k, TP ja albumiin, ning antioksüdantide aktiivsus neeruhomogenaadis (MDA, SOD, GSH) nefrokaitse protsent (võrreldes negatiivse kontrolli (GI) ja positiivse (GII) rühmaga) ) on illustreeritud tabelis 5. Nefroprotektsiooni protsent registreeris kõrgeima väärtuse kreatiniini, uurea, k GIII-s, TP-s ja albumiinina GV-s, MDA-s ja GSH-s GIII-s ja SOD-na GV-s (tabel 5). Nefroprotektsiooni koguprotsent võrreldes vit. E plus Se ravis registreeriti maksimaalsed tasemed KAE-ga ravitud rühmas (GV, 97,62 protsenti), seejärel KEE (GIV, 83,27 protsenti) ja seejärel KEE pluss KAE (GVI, 78,85 protsenti), nagu on näidatud tabelis 5.

Arutelu

suurepärased antioksüdandid. Arvatakse, et polüfenoolsetel ainetel on inimestel kantserogeensed ja mutageensed omadused [40]. Väärtuslik TPC sisaldus A. hierophanticus oli veidi kõrgem kui Mohamedi jt. [21] 51,97 mg GAE g-1 A. hierochuntica ürtis ja AlGamdi et al. [41], kes leidis A. hierofantilistes seemnetes 4 mmol L-1 GAE. Hiljuti avaldasid Zin et al. [42] osutasid tanniinide olemasolule A. hierophanticus kui bioaktiivses ühendis ja soovitasid selle bioaktiivsust, mis vajas põhjalikku uurimist. Karoteeni sisaldus karotenoidide koguarvus oli 2,27 µg g-1, nagu mainisid Mohamed et al. [21] ja isegi praegused tulemused näitasid karotenoidide üldsisaldusena 3,51 µg g-1. Sarnaseid leide flavonoidide ja flavonoolide sisalduse kohta on näidanud Mohamed et al. [21]. Bioloogiliselt aktiivsed komponendid, nagu fenoolsed ühendid, avaldavad antioksüdantset toimet lipiidide oksüdatsiooni ahelreaktsioonide lagunemisena, andes vesinikku aktiivsetele vabadele radikaalidele. Seda fenoolide eemaldamispotentsiaali radikaalide inhibeerimiseks selgitati nende fenoolsete hüdroksüülrühmadega [8, 10, 22]. Seda fenoolhapet on kirjeldatud kui tõhusat antioksüdantset komponenti, sealhulgas vesinikperoksiidi, hüdroksüülradikaali ja superoksiidi aniooni [43]. A. hierofantne metalli kelaatimise aktiivsus näib olevat võimeline segama "Fe2 pluss-ferrosiini" kompleksi ehitust, mis viitab selle võimele püüda kinni "raudioonid" enne "ferrosiini". Positiivset seost nende fenoolsete ühendite sisalduse suurenemise vahel näitab otseselt nende antioksüdantne võime [42]. Andjelković jt. [44] tegi kindlaks paljude fenoolhapete aktiivsuse metallidega komplekside moodustamisel. Väärtuslik TPC ja asjakohane antioksüdantne aktiivsus, kasutades erinevaid mõõtmismeetodeid, annavad selge plaadi ja kinnitavad A. hierochuntica bioaktiivsust ravimtaimena toidus või joogis. Bioloogiliselt aktiivsed komponendid, nagu fenoolsed ühendid, avaldavad antioksüdantset toimet lipiidide oksüdatsiooni ahelreaktsioonide lagunemisena, annetades vesinikku aktiivsetele vabadele radikaalidele [45]. Selgitati välja see fenoolide eemaldamispotentsiaal radikaalide inhibeerimiseks

tõhus antioksüdantne komponent, sealhulgas vesinikperoksiid, hüdroksüülradikaal ja superoksiidi anioon [43,45,47]. HPLC abil tuvastatud ja kvantifitseeritud ühendid A. hierophanticu KAE-s olid suuremad kui KEE-s tuvastatud ühendid, kuid A. hierophanticu KEE-s tuvastatud ühendeid esitati suuremates kogustes [22]. Tulemused näitavad, et tarbiv A. hierophantic võib esitada palju komponente nii polaarses kui ka mittepolaarses vormis. Neid tulemusi esitavad sarnaselt AlGamdi jt. [41] kuna nad tuvastasid ja kvantifitseerisid A. hirerochuntica seemnetes 20 polüfenoolühendit. Ekstrakt sisaldas klorogeenhappeid ja hüdroksübensoehappeid, kuid põhikomponendid olid flavoon-C-glükosiidid, C-glükosiidid, O-glükosiidid ja O-glükosiid-C-glükosiidid, mis esinesid valdavalt luteoliini konjugaatidena. Lisaks näitas 14 A. hierophatic ekstraktis sisalduvast 20 ühendist antioksüdantset toimet, kasutades HPLC-on-line antioksüdantide tuvastamise süsteemi [41]. Huvitaval kombel kinnitasid praegused andmed, et A. hierophantic on rikas fütokemikaalide ühendite poolest ja on hea looduslike antioksüdantide allikas, millel on võimalik tervisele kasu, nagu on seemnete puhul varem vähe esile tõstetud [41]. Seetõttu on terve taime pulbrist valmistatud tee traditsiooniline tarbimisviis; andmed illustreerisid uusi tuvastatud bioaktiivseid ühendeid A. hirerochuntica KEE-s ja KAE-s, mis erinesid AlGamdi et al. [41] Paljudes uuringutes on CCl4-indutseeritud nefrotoksilisust kasutatud mudelsüsteemina taimeekstraktide/ravimite nefroprotektiivse toime testimiseks [48,49]. Käesolevas uuringus vaadeldi A. hierofantiliste ekstraktide mõju CCl4-indutseeritud neerukahjustusele, samuti selle nefrokaitset ja antioksüdantide potentsiaali rottidel. Käesolevas uuringus suurendas CCl4-ravi (GII) rühm oluliselt kreatiniini, uurea ja k taset ning vähendas valgu ja albumiini üldkontsentratsiooni võrreldes GI-ga. Selle põhjuseks võib olla asjaolu, et CCl4 mürgistus on vabade radikaalide tootmise peamine allikas paljudes elundites, sealhulgas maksas, neerudes, kopsudes, ajus ja veres [50]. Samuti on täheldatud, et pärast CCl4 süstimist rottidele jaotub CCl4 kontsentratsioon neerudes ühtlasemalt kui maksas [51], kuna neerul on kõrge afiinsus CCl4 suhtes ja see sisaldab tsütokroom P450, peamiselt ajukoores. Kõige tavalisemad CCl4 vabad radikaalid on triklorometüülradikaal (CCl3• ) ja triklorometüülperoksüülradikaal (CCl3O2• ) [52]. Need radikaalid kinnituvad intratsellulaarse valgu, rakumembraani lipiidide ja DNA külge, põhjustades valkude denaturatsiooni, lipiidide peroksüdatsiooni ja oksüdatiivset DNA kahjustust, mis põhjustab rakusurma [53]. Seevastu ravides sellega CCl{38}rotte. E plus Se (GIII) ja A. hierofantilised ekstraktid (GVI: VI) vähendasid tõhusalt kreatiniini ja uurea taseme tõusu, samuti suurendasid seerumi albumiini ja üldvalkude taset, et olla väga lähedal nende tasemele GI-s. See võib olla tingitud A. hierofantiliste ekstraktide antioksüdantsetest omadustest ja rikkalikust fenoolisisaldusest ning selle antioksüdantsest võimest ja kelaativast aktiivsusest. E pluss Se, mis eemaldab vabad radikaalid, pärssides seeläbi neerukahjustusi. Fütokemikaalid on kõige tõhusamad vabade radikaalide püüdjad ja neid peetakse parimateks taimede antioksüdantideks [54]. Kõige levinumad fenoolsed ühendid olid KEE-s üheksa tuvastatud fenoolühendi hulgas hüdroksükaneelhapped, näiteks sinaphape, samas kui süringiinhape oli KAE 21 tuvastatud fenoolhappe hulgas kõrgeim fenoolhape. HPLC analüüsi abil tuvastati kuus flflavonoidi KEE-s ja kaks KAE-s [55]. Lisaks on see antioksüdandina. Arvatakse, et E kaitseb kudesid reaktiivsete hapniku metaboliitide põhjustatud kahjustuste eest. Seleeni peetakse ka inimeste tervise jaoks oluliseks mineraalaineks, mis kaitseb rakke vabade radikaalide kahjuliku mõju eest [22]. Käesolevas uuringus vähendas CCl4 manustamine märkimisväärselt GSH-d ja SOD-d ning suurendas MDA taset neeruhomogenaatides võrreldes GI-ga. Vit. E plus Se ja A. hierofhantic ekstraktid leevendasid CCl4 erinevaid toimeid, taastades antioksüdantide, nagu SOD ja GSH, muutunud aktiivsuse ning võivad deaktiveerida MDA tootmisprotsessi, nagu hiljuti teatati [15,21,40,41]. . GSH on mitteensümaatiline antioksüdant, mida leidub kõigis imetajarakkudes. Oma oksüdeeritud vormiga GSSG toimib GSH paljude detoksifitseerivate ensüümide (GPx, GST jt) kofaktorina oksüdatiivse stressi vastu ja säilitab rakkude redoks-tasakaalu [47]. See leid on kooskõlas Khani ja Siddique'i [56] ning Makni et al. [57], kes teatasid, et CCl4 vähendas GSH taset roti neerudes. Ravi sellega. E plus Se ja A. hierofhantic ekstraktid näitasid kaitset GSH taseme languse eest, mille käivitas CCl4. Samas kontekstis katalüüsib SOD kahe superoksiidi aniooni (*O2) molekuli dismutatsiooni vesinikperoksiidiks (H2O2) ja molekulaarseks hapnikuks (O2), muutes potentsiaalselt kahjuliku superoksiidi aniooni vähem ohtlikuks [58, 59]. CCl4 mürgistus muudab geeniekspressiooni taset, vähendades neerude SOD-d [60]. SOD aktiivsuse vähenemine on rakukahjustuse tundlik indeks. Meie testitud A. hierophatic ekstraktid leevendasid neerutoksilisust, vähendades SOD taset. See osaleb erinevates ensümaatilistes protsessides, et vähendada hapestamisreaktsioonide kontsentratsiooni [61]. MDA on lipiidide peroksüdatsiooni esimene produkt ja üks olulisi oksüdatiivse stressi markereid. A. hierofantilised ekstraktid vähendasid MDA taseme tõusu ja taastasid CCl{65}}töödeldud roti neerudes antioksüdantide koguvõimsuse. Need kaitsvad toimed võivad olla tingitud A. hierophatic ekstraktide tugevast antioksüdatiivsest toimest [15,21,40,41]. Need tulemused viitavad ka sellele, et A. hierofantilised ekstraktid võivad nõrgendada oksüdatiivset stressi, vähendades lipiidperoksiidi taset CCl{70}}eksponeeritud roti neerudes ja vältida neerukahjustusi. Need tulemused langesid kokku Zn-i antioksüdatiivse toimega CCl{71}}indutseeritud ägeda nefrotoksilisuse suhtes [62,63]. A. hirerochuntica ekstraktid näitasid väärtuslikku nefrokaitsevõimet seoses neerufunktsiooni testidega (kreatiniin, uurea, K, TP ja albumiin) ja neeru homogenaadi antioksüdantsete aktiivsustega (GSH, SOD, MDA) vastavalt GIV-s, V-s ja IV-s. Nefroprotektsiooni koguprotsent võrreldes vit. E plus Se ravis registreeriti maksimaalsed tasemed KAE-ga ravitud rühmas (GV, 97,62 protsenti), seejärel KEE (GIV, 83,27 protsenti) ja seejärel KEE pluss KAE (GVI, 78,85 protsenti) kahanevas järjekorras. Selle põhjuseks võivad olla erinevused A. hirerochuntica ekstraktide fenooli- ja antioksüdantide sisalduse kvantiteedis ja kvaliteedis, mis on seotud antioksüdantse võimega [15,19,22,40,42]. Neerude histopatoloogilised leiud on kooskõlas uuritud katserühmade biokeemiliste hinnangutega. CCl4 manustamine (GII) põhjustas glomerulaarse ja tubulaarse kahjustuse koos vasokongesiooniga neerudes. Dogukan et al. [64] avastasid vastusena pikaajalisele CCl4-ravile roti neerukoes sarnase histoloogilise mustri. Samuti leitakse, et histoloogilised muutused on põhjustatud nefronite funktsionaalsest ülekoormusest, mis põhjustab neerufunktsiooni häireid [65] ja/või on tingitud koe hävimisest, mis on põhjustatud vabade radikaalide tekkest CCl4 metabolismi kaudu [56, 66]. . Selle mõju. Märkimisväärsed olid E plus Se ja A. hierofantilised ekstraktid, mis parandasid ja taastasid CCl4 neerude hävitavat toimet. See võib olla tingitud sellest. E pluss Se (tugeva antioksüdandina) toimib CCl4 poolt indutseeritud ROS-ile [67]. A. hierofantilised ekstraktid pärsivad CCl4-indutseeritud ägedat nefrotoksilisust tänu A. hirerochuntica ekstraktides sisalduvate fenoolsete ühendite antioksüdatiivsele rollile ja vabu radikaale püüdvatele omadustele [22]. Meie tulemused on kooskõlas teiste teadlaste tulemustega, kes on näidanud, et erinevatel taimsetel derivaatidel on farmakoloogiline toime, kõrvaldades CCl4 kuritarvitamise ja normaliseerides [6].

Järeldused

Selle uuringu tulemused näitasid selgelt, et A. hierofhantic taim on rikas polaarsete ja mittepolaarsete fenoolsete ühendite poolest, millel on suurepärane antioksüdantne võime, mis on otseselt seotud fütokeemilise sisaldusega. A. hierofantne (eriti vesiekstrakt) kaitseb rotte CCl{0}}indutseeritud oksüdatiivse stressi ja ägeda neerukahjustuse eest, mida tõendab MDA taseme oluline langus ning GSH ja SOD aktiivsuse suurenemine, samuti biokeemilise ja histoloogilise aktiivsuse peatumine muutused neerudes. Kaitsetõhusus võib tuleneda A. hierofantilistes ekstraktides sisalduvate fenoolsete ühendite antioksüdantsetest ja vabu radikaale püüdvatest omadustest. Need omadused aitavad selgitada taime meditsiinilist efektiivsust taimse ravimina. A. hierophanticu aktiivsete põhimõtete täielikuks kirjeldamiseks on vaja rohkem uuringuid ja selle uuringu eesmärk on stimuleerida põhjalikumaid seotud uuringuid, et pakkuda piisavalt andmeid ja soovitusi selle mehhanismide ja ohutute annuste määratlemiseks.

Viited

1. Statistika, KD krooniline neeruhaigus Ameerika Ühendriikides. 2021. Veebis saadaval: https://www.cdc.gov/kidneydisease/pdf/ Chronic-Kidney-Disease-in-the-US-2021-h.pdf (kasutatud 20. juulil 2021).
2. Ku, E.; Glidden, DV; Johansen, KL; Sarnak, M.; Tighiouart, H.; Grimes, B.; Hsu, CY Seos range vererõhu kontrolli vahel kroonilise neeruhaiguse ajal ja madalama suremuse vahel pärast lõppstaadiumis neeruhaiguse algust. Kidney Int. 2015, 87, 1055–1060. [CrossRef] [PubMed]
3. Tumlin, JA; Madaio, parlamendiliige; Hennigar, R. Idiopaatiline IgA nefropaatia: patogenees, histopatoloogia ja ravivõimalused. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 2007, 2, 1054–1061. [CrossRef] [PubMed]
4. Olah, G.; Reddy, asepresident; Prakash, GS; Reaktsioonid, FC Kirk-Othmeri keemiatehnoloogia entsüklopeedia. Kontaktläätsed 1978, 720–742.
5. Ozturk, F.; Ucar, M.; Ozturk, IC; Vardi, N.; Batcioglu, K. Süsiniktetrakloriidist põhjustatud nefrotoksilisus ja betaiini kaitsev toime Sprague-Dawley rottidel. Urology 2003, 62, 353–356. [CrossRef]
6. Ogeturk, M.; Kus, I.; Colakoglu, N.; Zararsiz, I.; Ilhan, N.; Sarsilmaz, M. Kofeiinhappe fenetüülester kaitseb neere süsiniktetrakloriidi toksilisuse eest rottidel. J. Ethnopharmacol. 2005, 97, 273–280. [CrossRef]
7. Slater, TF Vabade radikaalide mehhanismid koekahjustuses. Rakkude funktsioonide ja haiguste korral; Cañedo, LE, Todd, LE, Packer, L., Jaz, J., toim.; Springer: Boston, MA, USA, 1988; lk 209–218. [CrossRef]
8. Khan, MR; Rizvi, W.; Khan, GN; Khan, RA; Shaheen, S. Süsiniktetrakloriidist põhjustatud nefrotoksilisus rottidel: Digera muricata kaitsev roll. J. Ethnopharmacol. 2009, 122, 91–99. [CrossRef]
9. Afsar, T.; Khan, MR; Razak, S.; Ullah, S.; Mirza, B. Acacia hydaspica R. Parkeri palavikuvastane, põletikuvastane ja analgeetiline toime ja selle fütokeemiline analüüs. BMC täiendus. Altern. Med. 2015, 15, 1–12. [CrossRef]
10. Al-Qabba, MM; El-Mowafy, MA; Althwab, SA; Alfheeaid, HA; Aljutaily, T.; Barakat, H. Chenopodium quinoa võrsete fenoolprofiil, antioksüdantne aktiivsus ja parandav efektiivsus CCl4 -indutseeritud oksüdatiivse stressi vastu rottidel. Toitained 2020, 12, 2904. [CrossRef]