Eesmised talamuse tuumad: oluline substraat rottide mitteruumilise paarismälu jaoks, 2. osa

2|MATERJALID JA MEETODID

2.1|Loomad ja pidamistingimused

Isased Long-Evansi rotid (12 kuu vanused; keskmine kaal 630 g) peeti kolme- või neljaliikmelistes rühmades Makroloni puurides (48 28 22 cm) ümberpööratud 12-h valguse-pimeduse tsüklis (tuled süttivad kell 20.00 ).

Käitumistestid viidi läbi valgustsükli pimedas faasis, viis seanssi nädalas; vaatlused kinnitasid, et rotid olid pimedas faasis suhteliselt aktiivsemad. Rottidel hoiti 85% vabalt toitunud kehakaalust veega ad libitum; toitu anti ad libitum enne ja pärast operatsiooni, et taastuda pärast operatsiooni.

Kirurgia on haiguste ravimise ja füüsilise tervise parandamise protsess. Taastumisprotsess pärast operatsiooni nõuab erilist tähelepanu. Hea enesetunne nõuab lisaks füüsilisele taastumisele keskendumist ka mälu taastumisele. Operatsioonijärgse taastumise ja mälu vahel on tugev seos.

Operatsiooni ajal mõjutavad sageli aju mälufunktsiooni sellised tegurid nagu keha reaktsioon ebaõnnele ja anesteetikumide toime. Pärast keha taastumist pöörake tähelepanu õigele toitumisele, mõõdukale treeningule ja piisavale unele. Taastumisperioodil väljaspool haiglat tuleb jätkuvalt vältida liigset tegevust ja säilitada mugav keha seisund.

Tervise ja mälu taastamisel on lisaks elamisharjumustele abi ka mõistlikud psühholoogilised kohanemised. Lõdvestuge, säilitage rahulik meel ja aidake end mälu taastumisega kohaneda. Samal ajal tuleks aktiivselt osaleda vaba aja tegevustes ning suhelda sugulaste ja sõpradega, et hoida aju töös ning parandada kognitiivseid ja mäluvõimeid. Seda tegevust saab järk-järgult suurendada ja seda saab teha põhimõtteliselt kord nädalas.

Lühidalt öeldes nõuab taastumisprotsess pärast operatsiooni igakülgset tähelepanu. Heade eluharjumuste säilitamine ja psühholoogiline kohanemine mängib füüsilise taastumise ja mälu taastumise edendamisel väga olulist rolli. Vaadakem seda positiivselt, täie enesekindluse ja lootusega. Peame parandama mälu ja Cistanche deserticola võib oluliselt parandada mälu, sest Cistanche deserticola suudab reguleerida ka neurotransmitterite tasakaalu, näiteks tõsta atsetüülkoliini ja kasvufaktorite taset. Need ained on mälu ja õppimise jaoks väga olulised. Lisaks võib liha parandada ka verevoolu ja soodustada hapniku kohaletoimetamist, mis tagab aju piisava toitainete ja energia kättesaamise, parandades seeläbi aju elujõudu ja vastupidavust.

Klõpsake teada, kuidas ajufunktsiooni parandada

Kõik protseduurid vastasid Canterbury ülikooli loomade eetikakomitee heakskiidetud juhistele. Neli rottide rühma moodustati juhusliku määramise teel pärast operatsioonieelset tutvumist radiaalse käe labürindis (RAM) ja rajal. Need neli rühma olid kahepoolsed ATN-i kahjustused, millel ei olnud jälgi lõhna ja objekti stiimulite vahel, kui nad olid koolitatud paaris-seotud ülesande ja vastava kahe Sham-kahjustuse rühmaga.

Lõplikud valimi suurused olid (1) võlts-jälgedeta=7 (st võltsitud kahjustuste rühm, kus ei olnud paaris-seotud ülesandes kasutatud lõhna ja objekti stiimulite vahelist intervalli); (2) Sham-Trace=7 (Shamlesioni rühmale on antud 10- s jälg lõhna ja objekti stiimulite vahel); (3) ATN-No Trace=8;ja (4) ATN-Trace=9. Täiendav ATN-kahjustuse rott jäeti välja, kuna see ei vastanud kahjustuse kriteeriumidele (vt allpool).

2.2|Kirurgia

Rotid anesteseeriti isofluraaniga (induktsioon 4%; hooldus 2,5%) ja paigutati stereotaksilisse aparaati koos atraumaatiliste kõrvapulgadega (Kopf, Tujunga, CA). Lõikehammas seati 7,5 mm allapoole interauraalset joont, et minimeerida fornixi kahjustusi.

Mõlemas poolkeras suunati kaks infusiooni anteroventraalsesse tuuma (AV; ülemine ja alumine) ning üks infusioon oli suunatud anteromeediaalsesse tuumasse (AM). Igas operatsioonis kasutati üht ametlikku anterior-posterior (AP) koordinaati iga roti Bregma-Lambda kauguse suhtes (kõik väärtused mm). AV kahjustuste korral olid AP koordinaadid: 2,20 B–L 6,9–7,2; 2,25 B–L jaoks 7,3–7,6; 2,30 B–L puhul suurem kui 7,7 või sellega võrdne. AV-infusioonid tehti kõvakesta all 5,68 ja 5,73 ning keskjoonest 1,52 külgmiselt.

AM-i infusioon tehti AV-koordinaadist {{0}},1 mm eesmises suunas, 5,76 allpool kõvakestat ja 1,16 lateraalset; esimene AM-lesioon tehti pärast kõigi AV-infusioonide lõpetamist ja see algas viimase AV-kahjustuse kohaga kontralateraalselt. 0,15 M N-metüül-d-aspartaati (NMDA; Sigma, CastleHill, NSW) 0,1 M fosfaatpuhvris (pH 7,20) infundeeriti igasse kohta kiirusega 0,04 ul minutis 2.{18}}ulHamiltoni süstal (Reno, NV, USA), kasutades mikroinfusioonipumpa (Stoelting, Wood Dale, IL).

AV sitesper poolkera sai vastavalt {{0}},12 ja 0,10 ul dorsalandi ventraalsete saitide jaoks; Iga AM saidi jaoks kasutati 0,06 ul. Süstlanõel jäi pärast infusiooni 3 minutiks paigale.
Näidiskahjustuse operatsioonides kasutati sama protseduuri, kuid nõel langetati 1 mm kõrgemale ülemisest AV-st ja AM-i kahjustuskohtadest ning tehti noinfusioon.

2,3|Käitumisülesanded

Kaheksa käega RAM kinnitas pärast operatsiooni ATN-kahjustusega rottidel ruumimälu kahjustust. Raja aparaati kasutati rottide koolitamiseks kõigis mitteruumilistes ülesannetes, st lihtsa lõhna ja lihtsa objekti eristamise ning lõhna-objekti ja lõhna-jälje-objekti paaris-seotud ülesannetega.

Enne operatsiooni harjutati toidupiiranguga rotte kaheksaharulise RAM-iga, mida on kirjeldatud allpool, et saada 0,1 g šokolaaditükke (Foodfirst LTD Auckland, NZ) ja kohaneda käeluukide avamise ja sulgemisega. Punasel Perspexi rajal (joonis 1) kujundati rotid ka nii, et nad torkaksid nina 2-cm ringikujulise valge plastkorgi, mis asus 10 cm kõrgusel põrandapinnast ja peenikese käsna keskel, mis oli kinnitatud läbipaistvale Perspexi vahetükile. otsasein.

Neid kujundati ka nii, et need suruksid (nina või käpa abil) selle aluse tagaosas hingedega kinnitatud eseme toidukaevu ülaossa, mis oli süvistatud 5 x 8,5 3 cm puitklotsi keskele. Toit sisaldas šokolaaditükke (ja hoidis süvendi all ligipääsmatut toitu). Eeltreeninguks kasutatud eset enam ei kasutatud. Pärast operatsiooni viidi taastuvad rotid uuesti tuttavaks nii RAM-i kui ka rajaga.

2.4|Ruumiline töömälu RAM-is

Operatsioonijärgset ruumilist töömälu testiti akendeta ruumi (3 3 m) keskel asuva RAM-i abil. Labürindis oli halliks värvitud puidust 35 cm laiune keskne rummu kaheksa alumiiniumvarrega (65 cm pikk, 8,6 cm lai, 4,5 cm kõrguste ääristega), mis tõsteti ruumi põrandast 67,5 cm kõrgemale. Läbipaistvad Perspex seinad (19 cm pikkused ja 25 cm kõrgused) ulatusid piki mõlema käe ühte külge rummust, et vältida rottide käte vahele hüppamist.

Iga käe otsa asetati must puidust toidukaev (5 x 8,5 x 3 cm), mille all oli kättesaamatu toit. Katsetamise ajal oli iga toidukannu alguses 2 0,1 g šokolaaditükki. kohtuprotsess. Läbipaistvad Perspexguillotine uksed, mida sai rummu alt rihmarattasüsteemi abil üles tõsta, kontrollisid juurdepääsu rummu õlgadele.

Ruumilise töömälu testimiseks kasutati kümmet järjestikust päeva ametlikku koolitust RAM-is. Rott paigutati keskmisse rummu ja 10 sekundit hiljem avati kõik kaheksa kätt ning rotil lasti teha valik, mis määratleti mõlema tagajala üle käeläve. Kui rott oli käsivarresse sisenenud, suleti kõik uksed ja see jäi 15 sekundiks käe külge, olenemata sellest, kas ta tegi õige valiku.

Seejärel lasti rott tagasi kesksesse jaoturisse ja hoiti seal 10 sekundit, enne kui kõik uksed uuesti avati, et võimaldada teistsugust käe valikut. Katse lõppes, kui rathad külastas kõiki kaheksat kätt, oli tehtud 20 käe valikut või 10 minutit oli möödunud.

2,5|Mitteruumilised ülesanded: lihtdiskrimineerimine ja paarisõpe

Nii lihtsad diskrimineerimise kui ka paaris-seotud ülesanded kasutasid sama punast Perspexi lennurada (93 26 26 cm), mis asetati 75- cm kõrgusele lauale (joonis 1). Lennurada saab jagada kolme vertikaalselt eemaldatava uksega (redPerspex, 26 26 cm), mis valiti konkreetse käitumisülesande alusel. Mis puutub tutvumiseks, siis 6,5 6 8 mm õhuke käsn, mille keskel oli kork, sisaldas šokolaaditoidu preemiat (joonis 1).

Käsn kinnitati rajal oleva eemaldatava ukse külge (paaris-seotud ülesannete jaoks) või raja otsaseina külge (lihtsa eristamise ülesande jaoks). Iga lõhna jaoks kasutati erinevat uksepluss käsna, mis infundeeriti anuma kõrvale 5 ml päevalilleõliga, mis oli segatud 20 ul Uus-Meremaa eeterlike õlidega.

Lõhnad olid sidruni ja nelgi lõhnad paaris-assotsieerunud ülesannete puhul ning kaneeli ja laimi lõhnad lihtsate diskrimineerimisülesannete puhul või vastupidiselt tasakaalustatud rühmades. Kerged ja visuaalselt eristatavad esemed (joonis 1) kinnitati selle põhja tagaosas oleva hingega toidukaevu ülaosa külge, et rott saaks objekti kergesti tagasi lükata (ninna või käpaga), et kaevust toidutasu otsida.

Puitraam (1,8 m kõrge põrandast ja 1,3 m lai), mis on kaetud mustade kardinatega, ümbritses katseala kõik küljed, et vähendada ruumilisi vihjeid testimise ajal.

Lihtsad diskrimineerimised (ainult lõhn; ainult objekt) ja paaris-seotud ülesanded kasutasid protseduuri „go/no-go”.

Iga seansi esimene katse algas roti kinnihoidmisega stardialas 120 sekundiks, et temaga uuesti kohaneda; järgnevatel katsetel kasutati sellel stardialal 20 s. Allrats läbis 12 massilist uuringut päevase seansi kohta, kuue go (tasustatud) ja kuus no-gos (tasutamata) katset apseudorandomiseeritud järjekorras. Seansi jooksul ei viidi järjest läbi rohkem kui kolm käia või kolm no-go katset.

Ühtegi neljast erinevast lõhna-objekti stiimuli paarist ei korratud järjestikustel katsetel. Õiged elemendid lihtsates diskrimineerimisülesannetes ja õiged stiimulipaarid paaris-seotud ülesannetes olid tasakaalustatud.

Lihtsa lõhna eristamiseks defineeriti reaktsioonina nina torkamine lõhnastatud käsna keskel asuvasse korki; ainuüksi käsna nuusutamist peeti keelava vastusena. Toit oli alati käsna keskel asuvas korgis, et täita lõhna-objekti paaris-seotud ülesandeid; go/no-go aspekt viitab siin sellele, kas objekti lükati, et paljastada, kas selle all on lennuraja lõpus toidutasu.

Objektide puhul määratleti vastuseks igasugune tõuge nina-käpaga, mis kallutas objekti tahapoole. Latents alates ajast, mil viimane uks tõsteti üles ja kui rott suhtles lõhnaga (nina torkamine korgi sisse; lihtsa lõhna eristamiseks) või objektiga (lihtsate objektide eristamiseks ja paaris-seotud ülesannete jaoks lükati hingele tagasi) mõõdetuna vaikse stopperiga (Dick Smith, Uus-Meremaa).

Vaatleja istus kardinate sees ja raja kõrval, et juhtida uksi ja registreerida käitumist. Katse määrati "õigeks", kui rott reageeris vähem kui 8 sekundiga liikvel olles või ei reageerinud enne 8 sekundit no-go katsetel.

2,6|Lihtsad diskrimineerimised

Pooled rottidest said koolituse lihtsa lõhna eristamise ülesandeks, millele järgnes lihtne objektide diskrimineerimine ja teisel poolel vastupidi. Registreeriti ukse X (joonis 1a) vaheline latentsus ja koostoime lõhna-oroobjektiga raja lõpus. Rottidele õpetati lihtsat lõhna ja objektide eristamise ülesannet, kuni nad saavutasid kriteeriumi (80% õige kahe järjestikuse päeva jooksul).

Lihtsa lõhnade eristamise ülesande jaoks esitati igas katses üks lõhn. Rathad eristada, milline kahest lõhnast oli seotud toidutasuga, mis esitati sektsiooni B lõpus olevas käsnas (joonis 1a).

Lihtsa objektide diskrimineerimise ülesande puhul esitati iga katse puhul üks objekt sektsiooni B lõpus (pole näidatud joonisel 1). Therat pidi õppima, milline kahest objektist on seotud objekti all pakutava toidupreemiaga.

2,7|Paaris-seotud ülesanded (jälgimine ja jälgimata jätmine) Need ülesanded kasutasid vertikaalselt eemaldatavate uste uut paigutust (joonis 1). Rotid said teada, milline kahest lõhna-objekti paarist premeeritakse (nt lõhn 1 + objektA ja lõhn 2 + objekt B) ja milliste paaride eest ei premeeritud (st lõhn 1 + objekt B ja lõhn 2 + Objekt A).

Sõltumata paarist said rotid alati tasu lõhna avaldamise eest, kui nad lubati raja teise sektsiooni. See oli sektsioon C „jälgedeta” seisundi eest, mille puhul kambrit A ei kasutatud ja kamber B oli stardiruum. Lõhn oli "jälje" seisundi jaoks sektsiooni B lõpus, mille jaoks sektsiooni A kasutati stardikastina.

Jäljeseisundis rottidele viidi lõhna ja objekti stiimulite vahel 10--sekundiline viivitus, kui neid hoiti sektsioonis C, samas kui jälgimata olekuga rotid puutusid objektiga kokku vahetult pärast nende koostoimet lõhnaga (pärast tasu söömine). Nii jälgimis- kui ka mittejälgede tingimustes registreerisime sektsiooni D läbimise latentsusaja alates DoorZ tõstmisest kuni roti suhtlemiseni objektiga või hoidus sellega 8 sekundi jooksul suhtlemisest.

Kahte rottide rühma (võlts-kahjustus ja ATN-kahjustus) koolitati lõhna-objekti paaris-seotud ülesannete täitmiseks (jälgedeta rühmad) ja kahte vastavat rühma koolitati lõhna-jälje-objekti paaris-seotud ülesandeid (jäljerühmad). saavutas kriteeriumi (80% õigeid katseid 3 päeva jooksul) või maksimaalselt 50 päeva.

2,8|Omandamisjärgne säilitamise test

Paaris-seotud ülesande säilitamine mis tahes roti puhul viidi läbi 5 päeva pärast kriteeriumi saavutamist või pärast 50-päevast koolitust. Sellel seansil kasutati ühel päeval 12 massilist tasulist/tasutamata katset identsel viisil, mida kasutati selle roti puhul.

2,9|Histoloogia

2.9.1|Perfusioon ja kudede kogumine

Kolm päeva enne peetuskatset viidi üksikud rotid 90 minutiks pimedas vaikses ruumis tühja puhta puuriga. Vahetult pärast viimast kinnipidamiskatset paigutati rott 90 minutit enne perfusiooni oma puuri tuttavasse pimedasse vaikse ruumi.

Rotid anesteseeriti sügavalt naatriumpentobarbitaaliga (125 mg/kg) ja perfuseeriti transkardiaalselt soolalahusega, seejärel paraformaldehüüdiga [4% PFA-d 0,1 M fosfaatpuhvris (PB)], et fikseerida aju. Ajud järelfikseeriti 4% PFA-s, millele järgnes vähemalt 48 tundi pikaajalises lahuses (20% glütserool 0,1 M PB-s). Koronaalsed 40-μm lõigud koguti külmutusmikrotoomiga (Thermo Fisher, UK) ja säilitati krüoprotektiivses lahuses (30% glütserool, 30% etüleenglükool 0,1 M PB-s) temperatuuril 20 C kuni immunohistokeemia jaoks töötlemiseni.

Koronaalsed lõigud koguti kahte eraldi seeriasse. Esimeses seerias jäädvustati immunohistokeemia jaoks järjestikused lõigud viies krüoviaalis (st üks viiest). See seeria hõlmas eesmise plokki lõikudest prefrontaalsest ajukoorest vaheseina piirkonda (umbes {{0}},7–0,6 mm kaugusel Bregmast) ja tagumist blokki mediodorsaalsest talamusest (umbes 3,5 mm Bregmast) kuni kaudaalini. retrospleniaalne ajukoor.

Teine seeria jäädvustas kahjustuste kontrollimiseks järjestikused lõigud. Need lõigud koguti nelja krüoviaali ATN-i eesmisest kuni tagumise mediodorsaalse taalamuseni (umbes 0,6–3,5 mm kaugusel Bregmast).

2.9.2|Neu-N värvimine ja ATN-kahjustuse kontrollimine

Vabalt ujuvad sektsioonid kogu ATN piirkonnas pesti (3 10 min) 0,1 M fosfaatpuhverdatud soolalahuses Triton-X-ga (0,2%; PBSTx) enne inkubeerimist endogeenses peroksidaasi blokeerivas puhvris 30 min [1% vesinikperoksiidi (H2O2), 50% metanooli (CH3OH) 2% PBSTx-s].

Sektsioone inkubeeriti üleöö 4 C inanti-NeuN primaarses antikehas (1:5000; monoklonaalne-MouseCat# MAB377; Millipore, California USA) PBSTx-s koos 1% normaalse kitse seerumiga (NGS; Life Technologies, NZ).

Liigne antikehapuhver eemaldati PBSTx-ga ja sellele järgnes inkubeerimine biotinüülitud kitse hiirevastases sekundaarses antikehas (1:1000 Cat# BP-9200-50: VectorLaboratories, California USA) üleöö temperatuuril 4 °C PBSTx-s ja 1% NGS-is. Sektsioonid asetati ExtrAvidin'i (konjugeeritud peroksidaas; 1:1000; Sigma, NSW Australia), PBSTx ja 1% NGS 2 tunniks toatemperatuuril.

Liigne ExtrAvidin ja Triton X{{0}} eemaldamiseks pesti sektsioone PBS-i, PB-ga ja seejärel Tris-puhvriga (pH 7,4 destilleeritud H2-s0), et valmistada lõigud ette visualiseerimiseks värskelt valmistatud diaminobensidiiniga ( DAB 0,05%; Sigma, 0,01% H2O2-s Tris puhvris).

DAB-reaktsioon (umbes 5 minutit) peatati Tris puhvriga (1 x 10 min pesu) ja lõigud pandi ööseks PB-sse temperatuuril 4 C, enne kui paigaldati želatiniseeritud objektiklaasidele ja lasti kuivada. Slaidid dehüdreeriti läbi gradeeritud alkoholi (70%–100%), enne kui need puhastati inksüleenist ja paigaldati DPX-i (06522; Sigma-Aldrich) ja katteklaasiga.

Kahjustuse ulatuse määramiseks kasutati Neu-N-positiivsete rakkude arvu ATN-is. See kasutas nii vasakust kui ka paremast poolkerast iga nelja 40-μm lõigu kohta kogu ATN-is ja ala kvantifitseeriti ImageJ abil (NIH, USA). NeuN-positiivset rakkude värvimist pildistati 5 objektiiviga LeicaDM6 B püstise mikroskoobi ja DFC7000T kaameraga (Leica Microsystems, Saksamaa).

Rakkude automatiseeritud loendused saadi ImageJ abil (pildianalüüsi tarkvara, National Institute of Health, NIH, USA). ATN-piirkonna neuroneid ümbritsev ala valiti käsitsi ja kujutised teisendati {{0}}bithalliks, taust lahutati (veeremine=40), teisendati maskiks ja rakendati veelahkme funktsiooni, ja kõik neuronaalsed rakud, mis ületavad läve ('MaxEntropy' lävi, tsirkulaarsus 0,5–1,0).

Tuvastamislävi oli kõigi sektsioonide jaoks sama. Rakkude arvu ekspresseerimiseks ATN-is loendati üheksal võltsrotil (viiel Sham-Trace'i rühmas ja neljal Sham-No Trace'i rühmas) automatiseeritud NeuN-värvitud rakutuumad.

Kõigi ATN-kahjustusega rottide säästetud rakkude NeuN-värvitud tuumade automatiseeritud loendusi võrreldi võltsitud rottidel täheldatud NeuN-rakkude keskmise arvuga. Vastuvõetavad kahjustused määrati 50% rakkude kadumise kriteeriumiks ATN-is, minimaalselt 25% poolkera kohta. See on kooskõlas varasemate uuringute ATN-kahjustuse kriteeriumidega (Mitchell & Dalrymple-Alford, 2005, 2006; Perryet al., 2018).

2.9.3|Zif268 immunohistokeemia

Vabalt ujuvaid sektsioone töödeldi sarnaselt NeuN-iga, kuid inkubeeriti küüliku polüklonaalses Zif268 primaarses antikehas (Egr-1; 1:1000 Cat# sc-110; Santa CruzBiotechnology, USA) 72 tundi kl. 4 C PBSTx-s 1% NGS-iga, millele järgneb inkubeerimine biotinüülitud kitse küülikuvastases sekundaarses antikehas (1:1000: Vector LaboratoriesBA-1000) üleöö PBSTx-s ja 1% NGS-s.

Pärast DAB-i visualiseerimist (18 min) pildistati igas huvipakkuvas piirkonnas Zif268-positiivne rakuvärvimine 10 objektiiviga valgusmikroskoobiga (Leica, Saksamaa). Rakkude automatiseeritud loendus saadi rakendusega ImageJ ( NIH, USA) samamoodi nagu NeuNpositive rakud, välja arvatud see, et tsirkulaarsus määrati väärtusele 0,65–1,0.

Zif{0}}positiivsete rakkude arv kõigis piirkondades kasutas sama lävealgoritmi, kusjuures iga roti huvipakkuva piirkonna kohta hinnati kaks kuni kuus sektsiooni. Kasutati keskmist Zif{1}}positiivsete rakkude arvu mm2 kohta huvipakkuva piirkonna lõikude lõikes (mõlemalt poolkeralt).

2.10|Andmete analüüs

ANOVA, kasutades Statisticat (v13; Dell Inc.), viidi läbi keskmiste erinevuste testimiseks neljas rotirühmas (Sham-No Trace, Sham-Trace, ATN-No Trace ja ATNTrace). Lisati korduvate mõõtmiste tegurid päevade (RAM ja lihtne diskrimineerimine), katsete plokkide (paaris-seotud ülesanded) ja Zif268 loenduste kohta huvipakkuvates seotud piirkondades või alampiirkondades.

Nii RAM-i kui ka lihtsate diskrimineerimisülesannete ANOVA võrdles nelja rühma, et kinnitada, et kaks Sham-kahjustuse ja kaks ATN-kahjustuse rühma olid üksteisega kooskõlas, kuid pange tähele, et RAM-is või lihtsates diskrimineerimisülesannetes ei olnud jälgi. Nii lihtsa diskrimineerimise kui ka paaris-seotud ülesannete puhul rajal kasutati variatsiooni homogeensuse tagamiseks individuaalsete katsete latentsusandmete vastastikust teisendamist.

Igal testipäeval genereerisid teisendatud latentsusajad keskmise latentsusaja iga kuue tasumata katse ja kuue tasulise katse jaoks. Lihtsate diskrimineerimisülesannete jaoks analüüsisime keskmist latentsuse erinevuse skoori (tasustatud katsete keskmine miinus seejärel tasumata katsete keskmine), kuid mitte tasutud ja tasumata katseid eraldi andmete salvestamise tõrke tõttu.

Kõik kolm latentsusmõõtjat olid saadaval paaris-seotud mäluülesannete jaoks (tasuta katsed, tasulised katsed ja latentsusaja erinevus). Mitmekordsete võrdluste arvessevõtmiseks ning I ja II tüüpi vigade tasakaalustamiseks kasutasime käitumisanalüüside jaoks olulisuse taset p < 0,02, kuna paaris-seotud ülesandes oli kolm seotud mõõdikut (tasuta katsed, tasulised katsed). ja keskmine latentsusaeg).

Zif268 ekspressiooni huvipakkuvate piirkondade jaoks viidi läbi kuus esmast analüüsi, nende analüüside olulisus määrati väärtusele p < 0.01. Posthoc Newman-Keulsi (NK) testid hindasid paaride kaupa rühmade erinevusi. Lihtsat peamiste mõjude analüüsi kasutati siis, kui esines olulisi koostoimeid, mis hõlmasid korduvate meetmete tegureid.

3|TULEMUSED

3.1|Kahjustuse kontrollimine

Kõik peale ühe 18 ATN-i kahjustusega rotist vastasid apriori kriteeriumile, mille kohaselt ATN-i kahepoolne kahjustus on 50% ja vähemalt 25% poolkera kohta. Keskmine kahepoolne kahjustus oli mõlemas ATN-kahjustuse rühmas 76% (vahemik: ATN-jälje puudumine, 61%–93%; ATN-jälg, 63%–93%; joonis 2). Välistatud rotil oli rahuldav kahjustus ainult ühes poolkeras (48% kokku, 75% vasakul ja 20% paremal).

Joonisel fig 2d on näidatud, et ATN-i neuronite NeuN-i arv ATN-kahjustusega rottidel (M=3388, SD=2024) oli tunduvalt madalam kui võltskahjustusega rottidel leitud väärtustest (M=15, 339, SD=1065; see arv oli sarnane Frosti et al., 2020 esitatud andmetega). 17 kahjustusega rotist kaheksal (neljal Trace'i rühmas ja neljal No-Trace'i rühmas) ei olnud kahjustusi ei mediodorsaalses talamuses (MD) ega taasühinemises/romboidses (Re/Rh) tuumas ja suhteliselt vähe oli kahjustusi. neid struktuure ülejäänud üheksal kahjustustega rotil.

Kui MD kahjustus tekkis, paiknesid eesmised aspektid ATN-i kõrval. Seega hinnati MD kahjustust vahemikus {{0}},72 kuni +2,10 mm Bregmast, kus see oli vahemikus 0% kuni 41% rakkude kadu kogu ulatuses. rühm (mediaan=21%). Kui Re/Rh kahjustus tekkis, oli see ka ATN piirkonna kõrval, seega hinnati seda umbes 1,08–2,04 mm kaugusel Bregmast, kus see oli vahemikus 0% kuni 33% (mediaan=6%). Pange tähele, et need vigastuse protsendi väärtused ei esinda kogu MD ja Re / Rh piirkonda, kuna mõlema tuuma tagumised piirkonnad olid kõigil ATN-kahjustusega rottidel puutumata.

For more information:1950477648nn@gmail.com